JPH04500823A - ポリペプチド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ポリペプチド誘導体 本発明は、ポリペプチド、その製造方法、例えば腫瘍の処置のための医薬として の、まｔ；はインビボの診断薬としてのその用途、およびそのための新規中間体 に関するものである。

幾年にもわたり種々の腫瘍において様々なレセプターの存在が立証されてきた。

そのための診断薬はしばしば構造が明確に定義されていない。すなわち、キレー ト試薬と反応させた放射性ヨウ素化蛋白またはモノクローナル抗体が無作為に置 き換えられている。故に、診断薬としての使用のため、または腫瘍に放射性核種 を運びこむための確定した構造体を提供する新しい化学的アプローチの必要性が 存在する。

本発明は、治療およびインビボ診断への適用に有用な新規標識ペプチドを提供す る。

本発明によれば、成長因子、例えば後に記載するようなペプチドホルモン、例え ばＩＬ−１，ＩＬ−４またはＩＬ−６およびその類似体まＩ；は誘導体のような インターフェロンおよびサイトカインからなる群より選ばれる生物学的に活性な ペプチドであって、当該ペプチドのアミノ基に結合した少なくとも一個のキレー ト形成基を有し、このキレート形成基が検出可能な元素と錯体を作ることができ 、かつ、かかるアミノ基が標的レセプターに対する有意な結合親和性を有しない ようなペプチドが提供される。

これらの化合物を以後本発明のリガンドと称する。これらは、例えば放射性核種 、放射線不透過性元素または常磁性イオンのような検出可能な元素と反応して錯 体を形成することができ、さらに腫瘍まｔ；は転移によって発現または過剰に発 現されるレセプターと結合することができる、少なくとも一個のキレート形成基 を有する。このキレート形成基は、レセプターとの結合に関与しないペプチドの アミノ基に結合している。キレート形成基の結合したこのようなアミノ基は、ペ プチドのレセプター結合を有意に妨害または防止することはない。好ましくは、 かかるアミノ基は芳香族残基に直接結合していない。

レセプターという語は本明細書中、例えば乳房まＩ：は卵巣の癌腫において過剰 に発現されるＨＥＲ−２／ｎｅｕ＊ｌｌｉ瘍遺伝子（ｃ　−ｅｒｂ　Ｂ２として も知られる）またはＥＧＦＲ（ｃ−ｅ　ｒ　ｂ　Ｂｌとしても知られる）のよう な原腫瘍遺伝子をも包含して使用する。

本発明によれば、キレート形成基は二価の架橋基によってペプチドのアミノ基に 直接または間接的に結合することができる。

生物学的に活性なペプチドという語は本明細書中、自然から、または例えば遺伝 子工学による生産といったような細胞の発酵がら単離される天然のペプチド、ま たは合成ペプチド、およびそれらの誘導体または類似体を包含して使用する。

誘導体および類似体は、ｌまＩ；はそれ以上のアミノ酸単位が脱落し、かつ／ま たは１またはそれ以上の他のアミノ酸基で置換されており、モして／または１ま たはそれ以上の官能基が１またはそれ以上の他の官能基で置換されており、モし て／または１またはそれ以上の基が１または数個の他の等配電子基で置換されて いる、特定の天然ペプチドに関するものと理解される。一般にこの語は、非修飾 ペプチドと定性的に類似の効果を表わす生物学的に活性なペプチドのすべての誘 導体を包含する。これらは例えば天然に存在するペプチドより有効であり得る。

この語はさらに天然に存在するペプチドの拮抗物質をも包含する。

好ましくは生物学的に活性なペプチドは３または３個以上のアミノ酸を有し、ｌ または数個の連鎖の形をとる。生物学的に活性なペプチドという語は抗体まｊ； は免疫グロブリン分子を包含しないということが理解される。

成長因子ペプチドの好適な例は、上皮成長因子（ＥＧＦ）　、インシュリン様成 長因子（ＩＧＦ−１およびＩＣＦ−１１）、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、腫 瘍壊死因子（ＴＮＦ）、腫瘍化増殖因子（ＴＧＦ−ａおよびＴＧＦ−βｎ）、血 小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、神経成長因子、ボンベシンおよびこれらの類似 体または誘導体を包含する。

ホルモンペプチドの好適な例は、インシュリン、ＬＨＲＨ，ガストリン、ガスト リン放出ペプチド、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）、甲状腺刺激ホ ルモン（Ｔ　Ｓ　Ｈ）、プロラクチン、血管作用性腸管ポリペプチド（Ｖ　Ｉ　 Ｐ）　、アンギオテンシンおよびこれらの類似体または誘導体を包含する。サイ トカインの例はＩｔ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４およびＩＬ−６である。

この他のまたはこれに代わる態様において本発明は、＆、上皮成長因子（ＥＧＦ は種々の起源、例えばマウスＥＧＦ、ラットＥＧＦ、ヒトＥＧＦであってよい） ：ｂ、インシュリン様成長因子（ＩＧＦ）、特にＩＧＦ−１（ソマトメジンＣ） ； ｃ、ＬＨＲＨ，ＬＨＲＨ作動物質またはＬＨＲＨ拮抗物質：ｄ、ガストリン； ｅ、ガストリン放出ペプチド： ｆ、ボンベシンまたはポンベンン拮抗物質；ｇ、腫瘍化増殖因子、特にＴＧＦ− σ；ｈ、血小板由来成長因子； 冒アンギオテンシン： ｊ、甲状腺刺激ホルモン； に、血管作用性腸管ポリペプチド； １、繊維芽細胞成長因子； ｍ、プロラクチン： ｎ、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン；０、インシュリン； ｐ、ｌ！ｌ瘍壊死因子： ｑ、神経成長因子： ｒ、ＩＬ−１，ＩＬ−２、Ｔ　Ｌ−４またはＩＬ−６、好ましくはＩＬ−１、Ｉ Ｌ−４またはＴＬ−６； Ｓ、インターフェロン およびこれらの誘導体および類似体を提供し、（ａ）から（ｓ）の各々は、その アミノ基に結合する少なくとも一個のキレート形成基を有し、該アミノ基はレセ プター結合に実質的には関与せず、該キレート形成基は検出可能な元素と錯体を 作ることができる。

一連の特定のまたはこれに代わる態様において、本発明は、Ａ、（ａ）から（ｑ ）の各々が該ペプチドのアミン基に結合する少なくとも一個のキレート形成基を 有し、該アミノ基はレセプター結合に実質的には参加せず、かつ該キレート形成 基は検出可能な元素と錯体を作ることができる、上記に定義されるペプチド（ａ ）から（ｑ）の群のいずれかより選ばれるペプチドならびにその誘導体および類 似体； Ｂ、（ａ）から（１）の各々が該ペプチドのアミン基に結合する少なくとも一個 のキレート形成基を有し、該アミン基はレセプター結合に実質的には参加せず、 かつ該キレート形成基は検出可能な元素と錯体を作ることができる、上記に定義 されるペプチド（ａ）から（１）の群のいずれかより選ばれるペプチドならびに その誘導体および類似体： Ｃ，（ａ）から（ｋ）の各々が該ペプチドのアミン基に結合する少なくとも一個 のキレート形成基を有し、該アミノ基はレセプター結合に実質的には参加せず、 かつ該キレート形成基は検出可能な元素と錯体を作ることができる、上記に定義 されるペプチド（ａ）から（ｋ）の群のいずれかより選ばれるペプチドならびに その誘導体および類似体； Ｄ、（ａ）から（ｇ）の各々が該ペプチドのアミノ基に結合する少なくとも一個 のキレート形成基を有し、該アミノ基はレセプター結合に実質的には参加せず、 かつ該キレート形成基は検出可能な元素と錯体を作ることができる、上記に定義 されるペプチド（ａ）から（ｇ）の群のいずれかより選ばれるペプチドならびに その誘導体および類似体； を提供する。

さらにとりわけ好ましいペプチドはＥＧＦ、ＬＨＲＨＳＬＨＲＨ作動物質、ＬＨ ＲＨ拮抗物質およびボンベシン拮抗物質である。

本発明のリガンドに存在するキレート形成基は、ペプチドのアミノ基に共存結合 で結合している。好ましくは本発明のリガンドに存在するキレート形成基は直接 的または間接的であるとに関わらずペプチドのアミノ基にアミド結合によってつ ながっている。

好ましくは本発明のりガントは１個のキレート形成基を有する。

本発明によれば、キレート形成基はたとえばリジンのＮ゛−アミノ基のようなペ プチドの側鎖アミノ基、および／またはペプチドの末端Ｎ−アミノ基（本明細書 中Ｎ°−アミノ基と称する）に結合することができ、ただしこのような側鎖また はＮ”−結合アミノ基は、標的レセプターに対するペプチドの結合親和性を有意 に妨害または損なうことはない。

上に列挙したペプチドの中で、以下の物質は専らＮ・−アミノ基上にキレート形 成基を有する：ＥＧＦ、ｒＧＦ−１，ガストリン、ガストリン放出ペプチド、イ ンシュリン、ＴＧＦ−σ、ＬＨＲＨ。

ボンベシン、ＶＩＰ、およびこれらの類似体または誘導体。専ら側鎖アミン基に 少なくとも１個のキレート形成基を有するペプチドは、少なくとも１個のリジン をそのアミノ酸配列中に含むＥＧＦ、たとえばｈＥＧＦ、ＬＨＲＨ，ＬＨＲＨ作 動物質、ＬＨＲＨ拮抗物質、ＩＧＦ−１、ガストリン、ガストリン放出ペプチド 、ボンベシン拮抗物質、ＶＩＰ、およびこれらの類似体まＩ；は誘導体である。

あるペプチド群は１個のリジンが存在するペプチドからなる。別のペプチド群は １個以上のリジン基が存在するペプチドからなる。

さらに別のペプチド群はリジンを含まないペプチドからなる。

認められるように、ペプチドが例えばアシルによって置換まｔ；は保護されてい る末端アミノ基を有する場合、この置換基または保護基は、キレート形成基また は架橋基との結合前に簡便に除去することができる。

好適なキレート形成基は、検出可能な元素と錯体を作ることのできる生理学的に 許容し得るキレート形成基である。好ましくは、キレート形成基は実質的に親水 性を有する。キレート形成基の例には、例えばイミノジカルボキシル基、ポリア ミノポリカルボキシル基、例えば非環状リガンドから誘導されるもの、例えばエ チレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）　、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ ）、Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−エチレンジアミン三酢酸（ＨＥＤ ＴＡ）、エチレングリコール−ｏ、ｏ’−ビス（２−アミノエチル）−Ｎ、Ｎ、 Ｎ’、Ｎ″−四節酸（ＥＧＴＡ）　、Ｎ、Ｎ’−ビス（ヒドロキシベンジル）エ チレンジアミン−Ｎ、Ｎ’　−二酢酸（ＨＢＥＤ）およびトリエチレンテトラア ミン六酢！　（ＴＴＨＡ）から構成される装置換ＥＤＴＡまｔ；は置換ＤＴＰＡ から誘導される基、大環状リガンドから誘導されるもの、例えば１，４．７．１ ０−テトラアザンタロドデヵンーＮ、Ｎ’、Ｎ”、Ｎ”’−四酢酸（ＤＯＴＡ） 、］、］４，８．ＩＩ−テトラアザシクロテトラデカンＮ、Ｎ’。

Ｎ”、Ｎ”’−四四節　（ＴＥＴＡ）　、Ｃ−機能化テトラアザ７りロドデカン 四酢酸、テトラアザシクロテトラデカン四酢酸、トリアザシクロドデカン三酢酸 およびトリアザシクロノナン三酢酸、例えば式１ａ、Ｉｂまｆ二は■ｃ： ［式中、Ｒ１６は−ＣＨ，Ｃ０ＯＨまたはその官能性誘導体、例えばエステルで あり、 （式中ｎおよびｍは各々独立して０、Ｃ２または３であり、ＡｌｋはＣｌ−１１ アルキレンであり、Ｘｌは所望により保護基によって置換されていてもよい−Ｎ Ｃ３またはＮＨ，であり、環へは置換または非置換である）である］ で示される化合物から誘導されるキレート形成基、例えば欧州特許第３０４７８ ０Ａ１号およびＷＯ８９１０ｌ　４７６−Ａ号に開示されるようなシフラムをも 含むＮ−置換まｌ；はＣ−置換大環状アミンから誘導されるもの、例えば欧州特 許第２４７８６６Ａ１号に開示されるような式１１ａまたはＩｌｂ：ｕ、−ｃ− ｓ−（ｃＨ２）。、−ｃ−（ｒｒ）ｉ−ｃ−（エエａ）Ｏ ［式中、Ｒ１、Ｒ１およびＲ１は各々独立して、各々所望により０Ｈ１Ｃ８−１ アルコキン、Ｃ０ＯＨまたはＳ○、Ｈにより置換されていてもよいＣ１−６アル キノ呟Ｃ，−、アリールまたはＣ７−、アリールアルキルであり、Ｒ１は　☆　 ☆　まｔ；は　ヵＩ （式中、＊を付した炭素原子はイミノ基に結合している）であり、ｎ′は１また は２であり、 １は２から６の整数であり、 ＴＴは独立して互いにアミド結合により結合したσまたはβアミノ酸である〕 で示される基、 ビス−アミノチオール誘導体、例えば式ＩＩＩ：［式中、Ｒ２゜、Ｒ２゜ワ、Ｒ ２１、Ｒ２□およびＲ２３は各々独立して水素またはＣ３−４アルキルであり、 Ｘ、は、ペプチドのＮ−アミノ基と反応可能な基、または二価の架橋基と結合可 能な基のいずれかであり、ｍ′は２または３である〕 で示される化合物から誘導される基、 ジチアセミカルバゾン誘導体、例えば式ＩＶ：［式中、Ｘ、は前記と同意義］ で示される化合物から誘導される基、 プロピレンアミンオキシム誘導体、例えば式Ｖ。

［式中、Ｒ３いＲ３３、Ｒｏ、Ｒ２７、Ｒ２，およびＲ３，は各々独立して水素 またはＣ３□アルキルであり、 Ｘ、およびｍ′は前記と同意義である］で示される化合物から誘導される基、 ジアミドジノルカプチド類、例えば式■Ｉ：［式中、Ｘ、は前記と同意義であり 、 Ｘ、は、Ｃ１−４アルキレン、１または２個のＣｏ、Ｒ，。、またはＣＨ。

ＣＯＲｓ　ａ、Ｃ０ＮＨ，またはＣ０ＮＨＣＨ２Ｃ０，Ｒ３６により置換されて いルｃ　、−、アルキレン、フェニレン、まにはＣ０ｆｆ１Ｒ３゜により置換さ れているフェニレン（式中Ｒ３゜はＣ３−、アルキルである）であり、 Ｙ、は水素またはＣｏ、Ｒ，。である］で示される化合物から誘導される基、 ポルフィリン類、例えばＮ−ベンジル−５，１０，１５，２０−テトラ−キス− （４−カルボキンフェニル）ポルフィリンまたは前記に定義の基Ｘ２を有するＴ ＰＰ、から誘導される、またはデスフェラール（デフェロキサミン）から誘導さ れる基が包含される。

特定の化合物を含む上記すべての刊行物の内容は、個別に引用してこれを本明細 書の一部とする。

アリールは好ましくはフェニルである。アリールアルキルは好ましくはベンジル である。

アルキレンは直鎖または分校であってよく、好ましくは直鎖である。

ｘ、の例は式−（Ｘｔ）　、”　Ｘ！で示される基［式中、Ｘ４はＣ，−。

アルキレン；所望により酸素原子または−ＮＨ−によって炭素原子に結合したＣ ３−、アルキレンまたはフェニル−ＣＩ−３アルキルであり；ｎ゛は０まには１ であり、ｘ５は−ＮＣ５，−ＮＧＯ，まｆ−はカルボキシ基である］、またはそ の官能性誘導体、例えば酸ハライド、無水物またはヒドラジドを含む。Ｘ４がフ ェニルー０１−．アルキルであるとき、Ｘ、は好ましくはバラ位にある。たとえ ば、Ｘ、は−０−（ＣＨ２）ｚ−ａ−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体、または ｐ−インチオシアナート−ベンジルまたは一７エネチルであり得る。

式１ａＳ　１１）またはＩｃの化合物において、Ｒ１１は好ましくはＡｌｋ好ま しくはＡｌｋはｃ＋−ｉアルキレン、より好ましくは０１−４アルキレンであり 、ｎは好ましくは１または２である。環へは好ましくは非置換である。

式ＩＩＩの化合物において、Ｒ２゜、は好ましくは水素である。

式Ｖの化合物において、Ｒ２４および／またはＲ２１は好ましくは水素である。

Ｒ２ｍからＲ２Ｂの各々は独立して好ましくはメチルである。

より好ましくはＲ２！からＲ２１は各々メチルである。ｍ′は好ましくは３であ る。ｍ′が３である時、ｘ２は好ましくは２位に位置する。

Ｘ、は好ましくはｐ−インチオンアナートーベンジルまたはｐ−イソチオ／アナ ートーフェ不チルである。

特に好ましいキレート形成基は、 ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、または、置換ＥＤＴＡまたはＤＴＰＡ、例えば Ｎ’−ｐ−インチオシアナートベンジル−ジエチレントリアミン−Ｎ、Ｎ、Ｎ” 、Ｎ”−四節酸、Ｎ’−ｐ−インチオシアナート７エ不チルージエチレントリア ミンーＮ、Ｎ、Ｎ”、Ｎ″′−四節酸、Ｎ−（２−［ビス（カルボキシメチル） アミベニチルｌ　−Ｎ’−（２−［ビス（カルボキシメチル）アミン］　−２− （ｐ−インチオシアナートベンジル）−エチル）−置換ＤＯＴＡ、例えば式１ａ の化合物、まｊ；は弐１ｂもしくはＩｃの化合物、特にＲｏｌが−（ＣＨ２）＋ −１−ＮＣ５，ｐ−インチオシアナートベンジルまｔ；はｐ−インチオシアナー トベンジルである化合物；または、 式Ｖａ： で示される化合物、 から誘導される基である。

認められるように、本発明のりガント中！＝存在するキレート形成基がビシナル なカルボン酸基を含む場合、これらは無水物官能基としても存在し得る。

本発明によれば、キレート形成基が二価の架橋基またはスペーサー基によってペ プチドのアミン基と間接的に結合している場合、これは例えば式（σ、）ニ ーＺ−Ｒ−ＣＯ−（σＩ） ［式中、Ｒは、Ｃ、、、アルキレン、ヒドロキシ置換Ｃ，−，，アルキレＲ。

ロヘキンレン、マたハ式（σ、）。

［式中、ｎおよびｍは前記と同意義であり、環へは置換または非置換であり、 Ｒ２は天然まｊ；は合成σ−アミノ酸のＣσに結合した基である］で示される基 であり、 ２は、共有結合によりキレート形成基と度応することができる、官能基から誘導 される二価の基である］ で示される基を介して結合することができる。

好ましくはＲはＣ１□アルキレン、−ＣＨ（Ｒｓ）−または式（Ｃ２）（式中、 環Ａは非置換である）で示される基である。

式（σ、）の基において、置換基−（ＣＨり、、−は好ましくはメタまたはバラ 、さらに好ましくはバラ位に位置する。

Ｚは例えばキレート形成基とエーテノ呟エステルまたはアミド結合を作ることの できる基であり得る。２は好ましくは一〇〇−または−ＮＨ−５より好ましくは −ＮＨ−である。

２が一〇〇−である時、式（σｌ）の二価架橋基はジカルボン酸から誘導される 二価の基であり得る。

Ｒ１の意義の例には、例えば水素、Ｃ＋−Ｉ＋アルキル、ベンジル、置換ベンジ ル、例えばフェニル環上でヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ，−、アルキルまたはＣ２ −、アルコキシにより置換されているベンジノ呟および一〇Ｈ２−ナフチルが含 まれる。

好ましい本発明のりガントの一群は、式Ｘ：Ａ−Ｚ、−Ｂ　（Ｘ） ［式中、Ａはキレート形成基、例えば反応性カルボキシまｔ；はアミノ基を含む キレート試薬またはその官能性誘導体から誘導されるキレート形成基であり、 Ｚ、は直接結合または二価架橋基であり、Ｂは生物学的に活性なペプチド、好ま しくは前記定義によるペプチド（ａ）から（Ｓ）またはその類似体もしくは誘導 体であり、アミノ基Ｂに結合している基Ａ−Ｚ、−は標的レセプターに対し有意 な結合親和性を持たない］ で示される化合物である。

式Ｘの好ましい化合物は、 ＡがＮ″−ｐ−インチオシアナートベンジル−ジエチレントリアミン−Ｎ、Ｎ、 Ｎ”、Ｎ”−四酢酸、Ｎ’−ｐ−インチオシアナートフェネチル−ジエチレント リアミン−Ｎ、Ｎ、Ｎ″’、Ｎ”−四酢酸、Ｎ−＋２−、［ビス（カルボキシメ チル）アミノ］エチル）　−Ｎ’−（２−［ビス（カルボキンメチル）アミノ］ −２−（ｐ−インチオ’ｉ７＋−）ベンジル）−エチル）−グリシン、ＤＯＴＡ 、Ｃ−ｉ［化テトラアザシクロドデカン四酢酸、Ｃ−官能化テトラアザシクロテ トラデカン四酢酸、Ｃ−官能化トリアザシクロドデカン三酢酸、Ｃ−官能化トリ アザシクロノナン三酢酸、好ましくは式１ａ、ＩｂまたはＩｃの化合物、特に、 Ｒ１，が−（ＣＨ２）＋−ｓ　ＮＣ３，ｐ−インチオシアナートベンジルまたは ｐ−インチオシアナートフェネチルである式１ａ、ＩｂまたはＩｃの化合物、ま たは式Ｖ：［式中、Ｒ２４からＲ２，およびｍ′は前記と同意義であり、Ｘ、は ｐ−インチオシアナート−ベンジルまたは一フェネチルである］ で示される化合物から誘導されるキレート形成基であり、または、Ｚｌが直接結 合または式ａ１の基（式中、−ＣＯ−基はペプチドのアミノ基に結合しており、 Ｚは−ＮＨ−である）であり、または、ＢがＥＧＦ、ＬＨＲＨ，ＬＨＲＨ作動物 質、ＬＨＲＨ拮抗物質、ボンベシンまたはボンベシン拮抗物質である化合物であ る。

ＬＨＲＨ拮抗物質の例は、遊離型または塩の形の式Ｖｌｌ：Ｒｓｓ　Ａ＋−Ｂ＋ 　Ｃｒ−Ｄ＋　Ｅ＋　Ｆ＋　Ｇ＋　Ｈ＋−１＋　Ｋ＋　ＮＨｚ　（Ｖｌｌ）［式 中、Ｒ３３は水素、Ｃ２−、アシルまたはカルバモイルであり、Ａ１は、所望に よりフェニル環においてハロゲン、ＣＦ、、Ｃ，、フルキルおよび／またはＣ１ −、アルコキシによって置換されているＤ−Ｐｈｅ、σ−またはβ−す７チルー 〇−アラニン、所望により５または６位でハロゲンまたはＣ１−、アルコキシに より、モして／または１位でホルミルまｌ；はアセチルによって置換されている Ｄ−Ｔｒｐ、Ｄ−まｔ二はＬ−Ｐｒｏ、Ｄ−まＩ；はＬ−３，４−デヒドロプロ リン、Ｄ−まｊこはＬ−３ｅｒ、Ｄ−まｆ−はＬ−Ｔｈｒ、Ｄ−まｌ二はＬ−Ａ ｌａＳＤ−ピログルタミン、３−（９−アントリル）−り。

Ｌ−アラニル、３−（２−フルオレニル）　−Ｄ、Ｌ−アラニルまたは３−　（ Ｈｅ　ｔ）−Ｄ、Ｌ−アラニル［式中、Ｈｅｔは、［式中、Ａ２およびＡ、は、 水素、Ｃ，−４アルキル、塩素および臭素よりなる群から独立して選ばれ、 Ａ１は○、ＳまたはＮである］ から選ばれる複素環アリール基である〕であり、Ｂ１は、所望によりフェニル環 においてハロゲン、ＮＯｘ、Ｃｒ−５アルキルまＩ；はＣ＋−Ｓアルコキシによ って置換されていてもよいＤ−Ｐｈｅ、所望により４位において塩素により置換 されていてもよいＤ−σ−メチルＰｈｅ、２．２−ジフェニルグリシンまｌ二は ３−（２−ナフチル）−Ｄ−アラニンであり、 Ｃ１は、所望により５または６位においてハロゲン、ＮｏよまたはＣ３−３アル コキシにより、モして／または１位においてホルミルまたはアセチルにより置換 されていてもよいＤ−Ｔｒｐｓ　３−　（２−まｔ二はｌ−（ナフチル）−Ｄ− アラニン、３−Ｄ−ヒ°リジルアラニン、Ｄ−Ｔｙｒ、所望によりハロゲン、Ｃ ，、アルキルおよび／またはＣ１，アルコキシにより置換されていてもよいＤ− Ｐｈｅ、Ｄ−３−Ｐｚ−ＡｌａＳＤ−Ｔｉｎ−ＧｌｕまたはＤ−Ｎｉｃ−Ｌｙｓ であり、 Ｄ、はＬ−５ｅｒであり、 Ｅｌは、Ｔｙｒ、所望によりフェニル環においてハロゲン、Ｃ１−３アルキルお よび／またはＣ１−、アルコキシによって置換されていてもよいＰｈｅ、○ｒｎ 、Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−Ｎｉｃ、ＭＰｉｃ−Ｌｙｓ。

Ｐｉｃ−Ｌｙｓ、ＤＰｉｃ−Ｌｙｓ、ＭＰｉｃ−１−ｙｓ、ＤＭＧ−Ｌｙｓ、Ｐ ｍｃ−ＬＩＳ％　Ｐｚｃ−Ｌｙｓ、ＰｍＡＣＡｌａ、ＰｚＡＣＡＩａ％Ｈｉｓ、 ＤｐＯｓ　Ａｒｇ％　３−　（３−ピリジル）−ＡＩ　ａ％Ｔｒ　ｐ、Ｎ−（３ −ピリジル）アセチル＝Ｌｙｓまｔ二はＧｌｕ（ｐＭｅｏ−フェニル）、Ｃｉｔ 、ＨＯＢＬｙｓまたはＰｚＡＣＡｌａであり、 Ｆｌは、所望によりフェニル環においてハロゲン、Ｎｏ、、ＮＨ，、Ｃ１−、ア ルキルまたはＣ１−３アルコキシによって置換されていてもよいＤ−Ｐｈｅ、所 望により５または６位においてハロゲン、Ｎｏ、、および／まｔ二はＣ１−、ア ルレフキシにより、モして／まｔ二は１位においてホルミルまたはアセチルによ って置換されていてもよいＤ−Ｔｒｐ、３−（２−す７チル）−Ｌ−アラニル、 Ｄ−Ｔｙｒ、Ｄ−○ｒｎ、Ｄ−Ｌｙｓ、Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎｉｃ、Ｄ−ＭＮｉｃ−Ｌ ｙｓ。

Ｄ−ＭＰｉｃ−Ｌｙｓ、Ｐｉｃ−Ｌｙｓ、ＤＰｉｃ−Ｌｙｓ％Ｄ−Ｐｍｃ−Ｌｙ 　ｓ、Ｄ−Ｐｚｃ−Ｌｙ　ｓ、Ｄ−Ｂｚ−Ｌｙ　ｓ、Ｄ−ＩＬｙｓ、ＡｎＧ］ｕ Ｘ　Ｄ−ＮＡＣＡＩａ、Ｄ−ＰｚＡＣＡｌａ、Ｄ−ＰｍＡＣＡ　Ｉ　ａ、Ｄ−３ −（３−ピリジル）−Ａｌａ、Ｄ−Ｈｉｓ　（Ｈまたはベンジル置換）、Ｄ−Ａ ｒｇ、Ｄ−ホモ−Ａｒｇ（Ｅｔ２）、Ｄ−Ｃｉ　ｔＳＤ−ＨＣｉ、Ｄ−ＬＶｓ− Ｐｉｅ、Ｄ−Ｃｉｔ　（Ｃ＋−ｓ−アルキル）　、Ｄ−ＨＣ＋　（ＣＩ−ｓアル キル）、Ｄ−Ｇｌｕ　（ＡＡ）まにはσ−アミノーω−ウレイドー〇、−４アル カン酸であり、 Ｇ１は、Ｌｅｕｓ　Ｎｌｅ、Ｎｖａ　ｌ、Ｎ−ａ−メチルＬｅｕ１Ｔｒ１）％　 Ｐｈ　ｅ、Ｍｅ　ｔ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ＋　ｌｉｅ、アロＩ　Ｉｅ、ＡｂＵまたは Ａｌａであり、 Ｈｌは、Ａｒｇｓ　ｌ０ｒｎ、Ｌｙｓ、ＩＬｙｓまたはｃｙｐ−４ｙＳであり、 １１は、Ｐｒｏ、ヒドロキシプロリン、３．４−デヒドロプロリン、Ｐｉｐであ り、 Ｋ１は、Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、ｃｙｌｙ、Ｄ−３ｅｒまにはＳａｒである］ で示される化合物である。

キレート形成基は、Ｒ３３が水素であるとき１位の末端Ｎ“−アミノ基に、モし て／または式ＶｌｌのＥ、および／またはＦ、および／またはＨｌに存在する遊 離アミン基に結合することができる。好ましくは、ＬＨＲＨ拮抗物質群の本発明 のリガンドは、ｌまたは６または８位、特に６または８位のアミノ基に結合した キレート形成基を含む式Ｖ■ｒの化合物である。

ＬＨＲＨ作動物質の例は、遊離型または塩の形の弐ＶＩＩＩ：ｐＧｌｕ−Ｈ４ｓ −Ａ、−５ｅｒ−Ｂ２−Ｃ２Ｄｚ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｅ、（Ｖｌｌｌ）［式中、 Ａ、はＴｒｐ、Ｐｈｅまたは３−（１−ナフチル）Ａｌａであり、 Ｂ２はＴｙｒ、Ｐｈｅ　Ｄ−Ｔｒｐ、または３−（ペンタフルオロフェニル）Ａ ｌａであり、 Ｃ６は式： ％式％ ［式中、Ｒ３１は、−（ＣＨ２）　、’−１−（ＣＨ，）、’−ＣＯ−１（ＣＨ ２）−°’　Ｒ３に−まｔ二は−（ＣＨｚ）−°”−Ｙ＊　（ＣＨ２）−”’− （式中、ｐ′はＪないし５であり、ｐ″はＯまたは１ないし３であり、ｐ゛″′ は各々独立して１ないし３であり、Ｒ３５はフェニルまたはシクロヘキシルであ り、Ｙ、はｏ、ｓ、−５ｏ−またはＳＯ３である）である］ で示されるアミノ酸単位であり、 Ｄ、はＬｅｕ、Ｉ　１ｅ１Ｎｌｅ、ＭｅＬｅｕであり、Ｅ、はＧａｙ　ＮＨ２、 −ＮＨＲｓ＋または−ＮＨ−ＮＨ−Ｃｏ−ＮＨＲ２ＨＣ式中、Ｒｓ＋は水素、低 級アルキル、シクロアルキルまたはフルオロ低級アルキルであり、Ｒ３２は水素 または低級アルキルである）である］ で示される化合物である。

基Ｃ１は、好ましくはＤ配置を有する。

キレート形成基は好ましくはＣ２に存在する遊離アミノ基に結合している。

ボンベシン拮抗物質の例は、例えばその内容を引用して本明細書の一部としてい る欧州特許第３３９１９３Ａ号および欧州特許第３１５３６７Ａ号に開示される 化合物、特に式ＩＸａ　：Ｒｓａ　Ａｓ　Ｂｓ　Ｃｓ　Ｄｓ−Ｅｓ　Ｆｓ　Ｇ５ −Ｈ５ｌ５−Ｑ　（ＩＸａ）［式中、Ｒ＄、は、水素、Ｃ８−、アルキル、Ｃ２ −、アルカノイル、ｃ、−６シクロアルコキシカルボニルまたはＣＩ□アルコキ シカルボニルであり、 Ａ、は、直接結合またはＧｌｙ、Ａｒｇ％Ｌｙｓ、Ｐｈｅｓ　ＡｓｐｓＮａｌ、 Ｐｒｏｓ　β−ＡｌａまたはＧｌｐであり、Ｒ３は、直接結合またはＧｌｙ％Ｐ ｒｏまたはＡｓｎであり、ＣＳは、直接結合またはＬｙｓまたはＤ−Ｎａｌであ り、Ｄ、は、直接結合まＩ；はＨ４ｓ％ＭｅＨｉｓ％ＥｔＨｉｓ、ＰｒＨｉｓＳ Ｇｉｎ％ＧＩｕｓ　（ＯＭｅ）−Ｇｌ＋）％　Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ。

ＬｙｓＳＰａｌ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、ＡｒｇｓＴｒｐまたはＴｈｒであり、 Ｅ、は、Ｔｒｐ％Ｖａ　１％　Ｎａ　１％　ＬｅｕｌＬｙｓ、Ｐａ　Ｉであり、 Ｒ３は、Ａｌａｓ　ＭｅＡＩａ、　Ａｉｂ、Ｇｌｙ％Ｐｒｏ、Ｌｅｕ。

Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｖａｌｘ　Ｎａｌ、Ｔｈｒ％ＡｒｇまたはＧｌｕであり、 Ｇ、は、Ｖａ　１％Ａｉｂ、Ｌｅｕ、Ｉ　ｌｅ、Ｔｈｒ％ＰｈｅまたはＳｅｒで あり、 Ｈ３は、Ｇｌｙ、５ａｒＳＡｌａ、Ｓｅｒ％Ａｉｂｓ　Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ 、Ａｒｇ、Ｖａ　Ｌ　Ａｃ”ｃｓ　Ａｃ’ｃまたはＡｃ’ｃであり、 ！、は、Ｈ４５ｘ　ＭｅＨｉｓ％Ａｉ　ｂ％Ｖａ　ｌ、Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ａ ｌａ％　Ｉｃｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅｌ　Ｇｉｎ、Ｌｙｓ。

Ｐａｌ、Ｓｅｒ％Ｔｈｒ％Ｇｌｕ％Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＮａｌであり、 Ｑは、Ｋｓ−Ｒｓｒ　［式中、Ｋ、はＬｅｕ、ＭｅＬｅｕＳ　Ｉ　ｌｅ、ＭｅＴ ｌｅ、Ａｉｂｚ　Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＭｅＶａｌ、Ｐｈｅｓ　Ａｐｅ。

ＭｅＡｐｅｓ　Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｇｌｎ、ＧｌｕまたはＴｒｐであり、Ｒ１７は Ｃｔ−ｓアルキルアミノ、Ｃｔ−ａ（ジアルキル）アミノまたはＣ８−３アルフ キシである１か、またはＱはＣ３−、アルコキシ、Ｃ＋−＋。アルキルアミノま Ｉ；はＣ１−１゜（ジアルキル）アミンである１で示される化合物および式ＩＸ ｂ　： Ａ７−Ｂ、−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｗ−Ｘ＠−Ｙ、−丁、　（ＩＸ ｂ）［式中、Ａ７は、水素、ＢＯＣ％　Ｌｙｓ、Ａｒｇであり、Ｂ、は、直接結 合またはＡｓｎ、Ｔｈｒ、Ｇｌｐであり、Ｗは、Ｇａｙまｔ：はＡｈａであり、 Ｘ、は、直接結合、Ｈｉ　ｓ　（Ｒｓａ）　、Ｐｈｅ％Ｓｅ　ｒまたはＡｌａで あり、 Ｙ６は、直接結合、ＬｅｕまたはＰｈｅであり、Ｔ１は、アミノ、ＮＨ（ＣＨｚ ）４ＣＨ３、ベンジルアミノ、Ｍｅｔ−Ｒ１１、Ｌｅｕ　Ｒｓａ、ｌｉｅ　Ｒｓ ａ、ｌｉｅ　ＲｓａまたはＮ１ｅ−Ｒ３ｔであり、 Ｒ１，は水素まｔ；はベンジルであり、Ｒ３１はアミノ、ヒドロキシ、メトキシ または−ＮＨＮＨ，である］で示される化合物の遊離型または塩の形である。

好ましくは、ボンベシン拮抗物質群の本発明のリガンドは、１位および／または ２位および／または４位および／または５位および／または６位および／または ７位および／まｌ；は８位に存在する遊離アミン基に結合したキレート形成基、 さらに好ましくは上記のごとく結合したただ１個のキレート形成基を含む式ＩＸ ａまたはＩＸｂの化合物である。

本発明のりガントは例えば遊離まｔ；は塩の形で存在することができる。塩には 、例えば有機酸、重合酸または無機酸との酸付加塩、例えば塩酸塩および酢酸塩 、ならびにキレート形成基内に存在するカルボン酸またはスルホン酸基をもって 得られる塩の形、例えばナトリウムまたはカリウムのようなアルカリ金属塩、ま たは置換もしくは非置換アンモニウム塩が包含さＪする。

さらに本発明は、 ａ）キレート形成基を有するペプチド内に存在する少なくとも１個の保護基を除 去し、または、 ｂ）各ペプチドが少なくとも１個のアミノ酸を保護または非保護型で含み、かつ その一方がキレート・形成基を含む（ここでアミド結合は所望のアミノ酸配列が 得られるような状態で存在する）２個のペプチドフラグメントをアミド結合によ って結合し、次いで所望により工程ａ）を実施し、または、 Ｃ）キレート形成基がペプチドの所望のアミノ基Ｉこ固定されるよう、キレート 試薬および保護まｌ；は非保護型の所望ペプチドを結合し、次いで所望により工 程ａ）を実施し、または、ｄ）キレート形成基を有する非保護まｊ；は保護ペプ チドの官能基を除去し、またはこれを他の官能基に変換して、キレート形成基を 有する別の非保護または保護ペプチドを得、そして後者の場合は工程ａ）を実施 し、 そして、このようにして得られたりガントを遊離型または塩の形で回収すること からなる、本発明のりガントの製造方法をも包含する。

上記の反応は既知の方法と同様にして、例えば特に工程ａ）においては、以下の 実施例に記載するように実施することができる。キレート形成基がエーテル、エ ステルまｌ；はアミド結合によって結合している場合、これは各々エーテル、エ ステルまたはアミド形成に使用する方法と同様にして行うことができる。所望な らばこれらの反応において、ペプチド内での使用または所望のキレート形成基に 好適な保護基を、反応に関与しない官能基に対して使用することができる。保護 基という語は、官能基を有するポリマー樹脂をも包含し得る。

上記工程ｂ）およびＣ）において、キレート形成基が二価の架橋基またはスペー サー基によってペプチドのアミノ基に結合してし）るペプチドを製造したい場合 は、該架橋基は、出発物質として用いられる対応アミノ酸、ペプチドフラグメン トまたはペプチド上に存在、またはキレート形成基に結合１．ていることができ る。

該アミノ酸、ペプチドフラグメントまたはペプチドは、既知の方法と同様にして 、架橋基まｊ二はスベ・−サー基を持ｔ：ない対応アミノ酸またはペプチドを、 対応する架橋またはスペーサー生成化合物、例えば式ＨＯ−ＣＯ−Ｒ−ＣＯＯＨ ，Ｈ，Ｎ、Ｒ−ＣＯＯＨで示される酸または活性エステルのようなその反応性酸 誘導体と反応させることにより製造できる。活性エステル基またはカルホキ／活 性化基の例は、例えば４−ニトロフェニル、ペンタクロロツユニル、ペンタフル オロフェニル、スクシンイミジルまたはｌ−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾリルで ある。

別法として、架橋基まＩ；はスペーサー基を持たせるｊ；めに、まずキレート試 薬を架橋基またはスペーサー基生成化合物と反応させ、次いで既知の方法と同様 にしてペプチド、ペプチドフラグメントまたはアミノ酸と反応させることができ る。

本発明の好ましい態様によれば、キレート形成基がポリアミノポリカルボキシル 化合物から導かれる場合、キレート試薬、例えばＥＤＴＡ−またはＤＴＰＡ−二 無水物を架橋基またはスペーサー基生成化合物、例えばＨ２Ｎ−Ｒ−ＣＯＯＨま たはその反応性酸誘導体、例えばそのアルキルエステルと反応させて、架橋基に より修飾されたキレート試薬を得る。次いでこの化合物を活性化、例えば修飾さ れたキレート試薬を例えばヒドラジン水利物と反応させることにより、対応する ヒドラジドへと変換できる。次にこのヒドラジドキレート試薬は既知の方法と同 様にして、例えば対応するアジドへの変換後アジドカップリングを経てアミノ酸 、ペプチドフラグメントまｔ；はペプチドと反応させることができる。

本発明のさらに別の好ましい態様によれば、カルボキシ官能基、例えば−〇〇〇 Ｈまたはその無水物を有するキレート試薬をペプチドのアミノ基に直接結合（二 価の架橋基またはスペーサー基の不在下において）させｔ；い場合、このキレー ト試薬は例えばヒドラジン水和物との反応によって活性化、例えば対応するヒド ラジドに変換できる。次いでこのヒドラジドキレート試薬を既知の方法と同様に して、例えば対応するアジドへの変換後アジドカップリングを経て、アミノ酸、 ペプチド７ラグメントまたはペプチドと反応させることができる。

キレート形成基を、１またはそれ以上の側鎖アミノ基を含む出発物質としてのペ プチドまたはペプチド７ラグメントの末端Ｎ−アミノ基に結合させたい場合には 、例えばこれら側鎖アミノ基をペプチド化学で用いられるような保護基で筒便に 保護する。

キレート形成基を、出発物質として用いられるペプチドまたはペプチドフラグメ ントの側鎖アミノ基上に結合させたく、かつそのペプチドが遊離の末端アミノ基 を含む場合には、後者を保護基で保護することができる。

出発物質として用いられるペプチドまたはペプチドフラグメントの末端アミノ基 上にキレート形成基を結合させたく、かつ該末端アミノ基が置換され、または保 護型である、例えばアシルにより置換されている場合、置換基または保護基は、 キレート形成基との結合前に簡便に除去することができる。

式１１ａまたはＩｌｂのキレート形成基は、式１１’ａまたはＲ，−Ｃ−Ｓ−（ （Ｊ）、、−Ｃ−（ＴＴ）１−Ｃ−Ｘ　（Ｉ工’ａ）［式中、Ｘは、アミド結合 を形成することのできる活性化基である］で示されるキレート試薬を反応させる ことにより、ペプチドと結合できる。この反応は、例えば欧州特許第２４７８６ ６Ａ１号に記載されるように実施することができる。

工程ｂ）またはＣ）で使用するキレート試薬は既知であるか、または既知の方法 と同様にして製造できる。

本発明のりガントは、常法、例えばクロマトグラフィーによって精製できる。好 ましくは本発明のリガンドは、キレート形成基を含まないペプチドを５％（重量 ）より少なく含有する。

さらに別の態様において本発明は、遊離型または塩の形の、検出可能元素と錯体 を形成しｔ；上記定義による本発明のリガンド（以後、本発明のキレートと称す る）、それらの製造ならびにそれらのインビボにおける診断用および治療用処置 における用途をも提供する。

本発明のキレートは、検出可能元素と錯体を形成した、特に前記（ａ）ないしく Ｓ）に述べたような本発明のりガントの各々を含む。

一連の、特定のまｔ；はこれに代わる態様において、本発明は、検出可能元素と 錯体を作った前記（Ａ）ないしくＤ）に記載のりガント群をも提供する。

検出可能元素とは、治療用のまたはインビボ診断用の技術に有用な性質、例えば 検出可能な放射物の放出またはＮＭＲ緩和特性への影響を示す、任意の元素、好 ましくは金属イオンを意味する。

好適な検出可能金属イオンは例えば重元素または粘土イオン、例えばＣＡＴ走査 （コンピューター軸方向断層撮影）に使用されるようなイオン、常磁性イオン、 例えばＧｄ”、Ｆｅ”、Ｍｎ”＋およびＣｒ”、蛍光性イオン、例えばＥｕ”、 および放射性核種、例えばγ放出放射性核種、β放出放射性核種、σ放出放射性 核種、陽電子放出放射性核種、例えば”Ｇａ、”Ｃｕ、”Ｆｅおよび＠２ｚｎお よびオージェ電子放出放射性核種を含む。

好適なγ放出放射性核種は、診断技術において有用なものを含む。

有利なγ放出放射性核種は、半減期が１時間ないし４０日間、好ましくは５時間 ないし４日間、さらに好ましくは１２時間ないし３日間である。例としては、ガ リウム、インジウム、テクネチウム、イッテルビウム、レニウムおよびタリウム から導かれる放射性核種、例えば’Ｇａ１”’Ｉｎ、”ｍＴｃ５　”’Ｙｂおよ びｌ１Ｒｅがある。

好ましくはγ放射性核種は選ばれた本発明のリガンドまたは使用されるペプチド の代謝によって選択する。より好ましくは、本発明のリガンドは腫瘍上のペプチ ドの半減期に相当またはこれより長い半減期を有するγ放射性核種とキレート形 成させる。

画像化に好適なさらに別の放射性核種は、例えば前記のような陽電子放出放射性 核種である。

好適なβ放出放射性核種は、治療への適用に有用なもの、例えばｔｏｙ、１７ｃ ｕ、”’Ｒｅ　、”’Ｒｅ　％　１６’Ｅ　ｒ　％　”’Ｓ　ｎ　％　”’Ｔ　 ｅ、””　Ｐ　ｒ　％　””Ａ　ｕ　、”’Ｐ　ｄ　％　”’Ｄ　ｙ　−＝　Ｓ ２Ｐ、１１２ｐ　ｒまｊ二はＡｇから誘導されるものを含む。このβ放射性核種 は１時間ないし１４゜３日間、好ましくは２．３ないし１００時間の半減期を有 するのが有利である。好ましくはこのβ放出放射性核種は、腫瘍上のペプチドの 半減期に相当またはこれより長い半減期を有するよう選択する。

好適なα放出放射性核種は治療用の処置に使用されるもの、例えば”’ＡｔＸ” ’Ｂ　ｌである。

治療用の処置に適当なさらに別の放射性核種はオージェ電子放出放射性核種、例 えば１２６１．１″３■、＋７Ｂｒである。

本発明のキレートは、リガンドを、化合物を作る対応する検出可能元素、例えば 金属塩、好ましくは水溶性塩と反応させることにより製造できる。この反応は、 既知の方法、例えばベリン、オーガニック・リガンド、ケミカル・データ・シリ ーズ２２、ＮＹパーガモン・プレス（１９８２）；クレジュカリットおよびタッ カ−、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｒｅｓ、Ｃｏｍ、第７７巻５８１頁（ １９７７）およびワグナ−およびウェルシュ、ジャーナル・オブ・ヌクレアー・ メディスン第２０巻４２８頁（１９７９）に開示される方法と同様にして実施で きる。

該キレートは、化合物を作る検出可能な元素とりガントを、本発明のりガントが 化学的に安定なｐＨで反応させることにより筒便に生成できる。

さらにこの検出可能な金属イオンは、中間体キレート試薬、例えばその金属イオ ンを可溶性にするが、そのキレートより熱力学的な安定性の低いキレートを形成 するキレート試薬との錯体として溶液に供給され得る。このような中間体キレー ト試薬の例は、４．５−ジヒドロキシ−１，３−ベンゼンジスルホン酸（タイロ ン）である。

このような工程において、検出可能な金属イオンはりガントを交換する。

本発明のキレートは、検出可能元素と錯体を形成したキレート試薬および保護ま たは非保護型のペプチドを共有結合で結合し、所望ならば存在する保護基の少な くとも１個を除去することによっても製造することができる。この反応は、金属 イオンと錯体を作ったキレート試薬を使用して実施し、次いで得られた錯体化し たペプチドにおいて金属イオンを所望の検出可能元素で置換することができる。

本発明のキレートは、検出可能元素と錯体を形成したキレート試薬および少なく とも１個の保護まＩ；は非保護型のアミノ酸を含むペプチドフラグメントを結合 し、次いで最終的ペプチド配列が得られるまで順次ペプチド合成を続け、所望な らば存在する少なくとも１個の保護基を除去することによっても製造することが できる。検出可能元素の代わりにキレート試薬を検出不可能な金属と錯体形成さ せ、次いでこの金属を、得られた錯体化ペプチドにおいて検出可能元素ｌこ置換 することもできる。

本発明によれば、キレート形成基は架橋基またはスペーサー基、例えば前記定義 の式（σｌ）の基を介して結合することができ、この場合、前記の本発明のキレ ートを製造する工程において、ペプチドもしくはペプチドフラグメントまたはキ レート試薬のいずれかが該架橋基またはスペーサー基を有しているということに なる。

上記の反応は既知の方法と同様にして実施できる。存在するキレート形成基によ っては標識効率が１００％に近づき精製が不必要となり得る。例えばテクネチウ ム９９ｍのような放射性核種は酸化型、例えばＴｃ　９９ｍ過テク不タートの形 で使用でき、これは還元条件下で錯体を形成し得る。

上記の反応は微量金属の混入を防ぐ条件の下で簡便に実施できる。

好ましくは蒸留脱イオン水、超高純度試薬、キレート形成グレードの放射活性な どを、微量金属の影響を小さくするために使用する。

本発明のキレートは例えば遊離または塩の形で存在し得る。塩は例えば有機酸、 重合酸まｔ；は無機酸との酸付加塩、例えば塩酸塩および酢酸塩、ならびに分子 内に存在してキレート形成に参加しないカルボン酸によって得られる塩の形、例 えばナトリウムもしくはカリウムのごときアルカリ金属塩または置換もしくは非 置換アンモニウム塩を包含する。

特に好ましい本発明のキレートは、 放射活性Ｔｃ、例えば″”Ｔ　ｃと錯体を作っている式Ｘ［式中、Ａは式Ｖａの 化合物から誘導されるキレート形成基である］で示される化合物； 放射活性イツトリウム、例えば”Ｙと錯体を作っている式Ｘ［式中、Ａは式１ａ 、ＩｂまたはＩｃ［式中、Ｒ１１は−（ＣＨｚ）＋−＊−ＮＣ３，ｐ−インチオ シアナートベンジルまＩ；はｐ−インチオシアナート７エネチルである］の化合 物から誘導されるキレート形成基である１で示される化合物； ユーロピウムと錯体を作っている式Ｘ［式中、ＡはＮ’−ｐ−インチオシアナー トベンジル−ジエチレントリアミン−Ｎ、Ｎ、Ｎ”。

Ｎ”−四酢酸またはＮ’−ｐ−インチオシアナート７エネチルージエチレントリ アミンーＮ、Ｎ、Ｎ”、Ｎ”−四酢酸から誘導されるキレート形成基である］で 示される化合物；放射活性インジウムまたはイツトリウム、例えば”Ｙまたはｌ １ｌＩｎと錯体を作っている式Ｘ［式中、ＡはＮ−（２−ビス（カルボキシメチ ル）アミノ］エチル）　−Ｎ’−（２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］− ２−（ｐ−インチオシアナートベンジル）−エチル）−グリシンから誘導される キレート形成基である］で示される化合物である。

本発明のキレートおよびそれらの薬学的に許容し得る塩は薬学活性を示し、そし てそれ故に、例えば実施例１２に示されるような０゜５ないし２ｍＣｉのＩｌｌ 　Ｉｎで標識したリガンド約１ないし５μｇ／ｋｇの静脈内投与時の生体内分布 を示す標準試験によって示されるように、常磁性イオン、γ放出金属イオンまた は陽電子放出放射性核種と錯体を作る場合には、例えばレセプター陽性腫瘍およ び転移の視覚化といったような画像化試薬として、または、σもしくはβ放射性 核種もしくはオージェ電子放出放射性核種と錯体を作る場合には、レセプター陽 性腫瘍および転移のインビボ治療用放射性薬物として、検出可能金属イオンの種 類により有用である。さらに本発明のキレートは、例えば実施例１１に示される ような標準インビトロ結合検定で示されるように、腫瘍および転移により発現ま たは過剰に発現されるレセプターに対する親和性を有し、この場合キレートは好 ましくは約１０−”ないしｔｏ−”Ｍの濃度で加える。

一連の特定のまたはこれに代わる態様において、さらに本発明は以下のものを提 供する： １、ａ）本発明のキレートを患者、に投与し、そしてｂ）該キレートの標的とす る組織、例えば腫瘍または転移の位置を記録する、ことからなる、インビボの画 像化、例えば患者内の腫瘍または転移のインビボの検出のｔ；めの方法。

この本発明方法は、レセプターを発現または過剰に発現する腫瘍のインビボでの 検出に特に有用であり、とりわけ腫瘍形成性細胞において高い確率で有用である 。本発明に係るインビボ検出方法における使用のだめの本発明のキレートは、例 えば前記のようなγ放出放射性核種、陽電子放出放射性核種または常磁性金属イ オンと錯体を作るキレートである。

方法（１）における画像化試薬としての使用のための本発明に係るキレートは、 非経口的に、好ましくは静脈内に、例えば注射用溶液または懸濁液の形で、好ま しくは１回の注射で投与することができる。熱論適切な用量は、例えば使用する リガンドおよび検出可能元素、例えば放射性核種の型によって変わる。注射され る適当な用量は、当分針で知られるフォ、トスキャニング法により画像化が可能 となる範囲にある。放射標識した本発明のキレートを使用する場合、０，１ない し５０ｍＣ１、好ましくはＯ，ｌないし３０ｍＣ１，より好ましくはＯ，Ｉない し２０ｍＣ１の放射活性を有する用量で投与するのが有利である。

動物においては、指示される用量範囲は０．１ないし２ｍＣ１のγ放出放射性核 種、例えばＩｌｌ　Ｉ　ｎで標識したリガンド０．１ないしｌＯｐｇ／ｋｇとす ることができる。大型の哺乳類、例えば人間においては、指示される用量範囲は 、使用するγ放出放射性核種によるが、０．１ないし１５ｍＣ１，好ましくは０ ．１ないし３０ｍＣ１、例えば３ないしＩ　５ｍＣｉのγ放出放射性核種で標識 されたりガントｌないし２００μｇとすることができる。例えばＩｎの場合低い 範囲の放射活性を使用するのが好ましいが、Ｔｃの場合は高い範囲の放射活性を 使用するのが好ましい。

キレートで腫瘍生成部位を強化した後、対応する画像化技術、例えば核医学画像 化機器、例えば好ましくはコンピューターで補助されたスキャナー、γカメラ、 回転式γカメラ、ＰＥＴ−スキャナー（ポジトロン・エミッション断層撮影）、 ＭＲ１装置またはＣＡＴ走査装置を用いることができる。

２、患者に本発明のキレートの治療的有効量を投与することからなる、腫瘍およ び転移の処置を必要とする患者におけるインビボの腫瘍および転移の処置方法。

本発明に係るインビボの処置方法における使用のための本発明のキレートは、前 記定義によるσ−１β−１またはオージェ電子放出放射性核種と錯体を形成した キレートである。

本発明方法は、特にレセプターを発現ま！；は過剰に発現する腫瘍のインビボで の処置に、とりわけ腫瘍形成性細胞において高い確率で有用である。

本発明に係る治療法を実行するにあたり使用する用量は、熱論例えば処置される 個々の状態、例えば腫瘍の量、使用する個々のキレート、例えば腫瘍中のキレー トの半減期、および所望の治療法によって変わる。一般に、用量は各器官に対す る放射活性の分布および観察される標的の取り込みを基準にして算出する。例え ば、本キレートは０．１ないし３ｍＣ１／ｋｇ（体重）、例えばｌないし３ｍＣ 】、好ましくは１ないし１．５ｍＣｉ／ｋｇ　（体重）の放射活性を有する日用 量範囲で投与できる。

動物においては、指示される用量範囲は０．１ないし３ｍＣ１のσまたはβ放出 放射性核種、例えばｔｏｙで標識したリガンド０．　１ないし５μｇ／ｋｇとす ることができる。大型哺乳類、例えば人間においては、指示される用量範囲は、 簡便には１日４回までの分割投与の形で投与される０、１ないし３ｍＣ１／ｋｇ （体重）、例えば０．１ないし］−５ｍＣｉ／ｋｇ　（体重）のσまたはβ放出 放射性核種で標識したりガント１ないし２００μｇである。

本発明のσ−またはβ−放出キレートは任意の常套的経路、とりわけ非経口的に 、例えば注射用溶液または懸濁液の形で投与でさる。

さらにこれらは注入、例えば３０ないし６０分間の注入によっても有利に投与で きる。腫瘍の部位により、これらはその腫瘍部位のできる限り近傍法こ、例えば カテーテルを用いて投与することができる。

選択される投与方法は、使用するキレートの解離速度および排出速度に依存し得 る。

本発明のキレートは遊離の形または薬学上許容し得る形で投与できる。このよう な塩は常法により製造でき、かつ遊離化合物と同等の活性を表わすことができる 。

本発明方法に使用するための本発明のキレートは、好ましくは患者に投与する直 前に製造、すなわち所望の検出可能金属イオン、特に所望のσ−１β−またはγ −放射性核種による標識は投与の直前に行なうことができる。

本発明のキレートは、様々な型の固体または非固体腫瘍およびその転移、例えば 脳下垂体、胃腸膵、中枢神経系、脳、胸部、卵巣、大腸、前立腺、腎臓または肺 の癌、傍神経節腫、神経芽腫、膠腫、髄様甲状腺癌、骨髄腫、骨腫瘍、カルシノ イド等およびこれらの転移を処置または画像化するのに好適である。

これらの使用のためには、ポリペプチド部分として、診断上のまたは治療上の標 的となる特定の器官または組織に特異的に蓄積するような化合物を選択するのが 有利である。本発明によれば、限定された細胞集団を標的とするレセプター特異 性のリガンドおよびキレートを得ることができる。

本発明のざらにＥＩＪの態様によれば、ｉ、遊離または薬学上許容し得る塩の形 の本発明のリガンドを、このための１またはそれ以上の薬学上許容し得る担体ま たは希釈剤と共に含む薬学的組成物； ｉｉ、遊離または薬学上許容し得る塩の形の本発明に係るキレートを、このｔ； めの１またはそれ以上の薬学上許容し得る担体または希釈剤と共に含む薬学的組 成物： ｉｉｉ、標的組織の画像化のための診断剤を製造する際の、遊離または薬学上許 容し得る塩の形の本発明のりガントの用途；が提供される。

このような組成物は常法により製造できる。好ましくはこれらは液体の形である 。

本発明による組成物は、リガンドと金属イオンの混合のための、および得られた キレートの投与のための指示を付した別々の包装ででも提供できる。当組成物は さらに対の包装形態、すなわちリガンドおよび検出可能金属イオンの別々の単位 用量が入っており、これらの混合およびキレートの投与のための指示を付した単 一の包装としても提供できる。希釈剤または単体は単位投薬形態で提供される。

本発明のさらに別の態様によれば、式ｘＩ：Ａ−Ｚ　ＲＺｘ　（ＸＩ） ［式中、ＡｌＺおよびＲは前記と同意義であり、Ｚ、はＣ０ＯＨまたはカルボキ シ基の官能基、例えば（Ｃｒ−＋ｘアルコキシ）カルボニルである］ で示される化合物は新規であり、かつ本発明の一部を形成する。

弐ＸＩ（７）好ましい化合物は、ＡがＥＤＴＡ、ＤＴＰＡまたはＤＯＴＡ、特に ＤＴＰＡから導かれる化合物である。Ｚは好ましくは−ＮＨ−である。Ｒは好ま しくはＣ＋−ａアルキレン、特にエチレン、前記定義による一ＣＨ（Ｒｓ）−ま たは環Ａが非置換である式（Ｃ２）で示される基である。

弐ＸＩの化合物は既知の方法に従って製造できる。例えばポリアミノポリカルボ キシキレート試薬を好ましくは二無水物の形で水性溶媒中、架橋化合物またはス ペーサー生成化合物と反応させる。ｐＨはわずかに酸性に調節するのが好都合で ある。

弐Ｘｌｌ： Ａ−Ｚ’＋−Ｃｏ　Ｘｔ　（ＸＩ　Ｉ）［式中、Ａは前記と同意義であり、 Ｚ′、は直接結合または−Ｚ−Ｒ−［式中２およびＲは前記と同意義である］の いずれかであり、 ｘ７は保護または非保護型の−ＮＨＮＨ３または−Ｎ、である］で示される化合 物もまた新規でありかつ本発明の一部を形成する。

好ましくはＡ、ＺおよびＲの各々は独立してそれぞれ前記のような好ましい意義 の１つを有する。

式ＸＩＩの化合物は既知の方法に従って製造できる。これらは弐ＸＩの化合物ま たは反応性−ＣＯＯＨを有するキレート試薬またはそれらの機能的誘導体のいず れかを、ヒドラジンまたはその誘導体と反応させ、次いで例えば後に開示するよ うに対応するアジドに変換することにより製造できる。ヒドラジンは好ましくは 保護型の１個のアミノ基と共に使用する。反応は、水中または水およびアルコー ルの混合物、例えばメタノール中、冷却およびわずかな加熱の間といったような 中等度の温度、例えば室温で、例えば１時間ないし３０時間、簡便に実施するこ とができる。必要ならば式Ｘｌｌの化合物を単離し、クロマトグラフィーのよう な任意の既知の精製法を用いて精製することができる。

以下の実施例において、温度はすべて℃であり、　［σ］！’値は未補正である 。以下の略語を使用する：ＢＯＣ−ｔ−ブトキシカルボニル ＴＦＡ−トリフルオロ酢酸 ＤＴＰＡ−ジエチレントリアミン五酢酸ＤＭＦ−ジメチルホルムアミド 因子「Ｆ」は、得られた生成物におけるペプチド含量を示す（Ｆ−１はペプチド 含量１００％にあＩ：る）。１００％に至る差異［（１−ｌ／Ｆ）　ｘ　１００ ］は酢酸および水からなる。

実施例Ｉ　Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ　Ｎ　Ｈ−ＣＨ！　ＣＨｘ　−ＣＯＯＣＨｓ重炭酸ナ トリウム５ｇおよび２．１ｇのＨ，Ｎ−ＣＨ，−ＣＨ２−Ｃ０−〇ＣＨ３、ＨＣ Ｉを水３０１に溶解する。ＤＴＰＡ二無水物５．３ｇの添加後、そして１分間の 反応時間の後、混合物のｐＨをＭＣＩで３に、次いでＩ　ＮＮ　ａ　ＯＨで５． ５に調節する。得られた混合物を凍結乾燥し、次いで最初に７／４／２、次に７ １５／４のクロロホルム／メタノール１５０％酢酸の混合物で溶出するクロマト グラフィーにより精製して標記化合物を得る。

ＭＨ”＋　４７９　（ＦＡＢ−ＭＳ） 実施例２　ＤＴＰＡ−ＮＨ−ＣＨ，−ＣＨ，−Ｃ○−ＮＨＮＨ！ヒドラジン水和 物２００ｍｇをＤ　Ｔ　Ｐ　Ａ　Ｎ　ＨＣＨ２−ＣＨｚ−Ｃ○−ＯＣＨ５３３０ ｍｇのメタノール溶液に加える。室温で２４時間後、メタノールを蒸発させ、残 留物を５／８／３のクロロホルム／氷酢酸／水の混合物を溶離液として用いるシ リカゲル上のクロマトグラフィーに付す。得られた生成物をイオン交換樹脂（Ａ Ｃ３−Ｘ４、ＯＨ型、ビオラド）上でさらに精製する。標記化合物を白色凍結乾 燥物として得る。

ＭＨ’″：　４７９　（ＦＡＢ−ＭＳ）実施例３　ＤＴＰＡ−β−Ａ　ｌ　ａ− ｍＥＧＦａ）アジドの製造 ＤＴＰＡ−β−Ａｈａ−ヒドラジド１４．３ｍｇをＤＭＦｌｍｌに溶解し、−１ ５°Ｃに冷却する。次にジエチルエーテル中の３ＮＨＣＩ０．０２ｍ１および亜 硝酸ｔ−ブチル５．４μｍをこの溶液に加える。３０分後、得られる溶液は次工 程に使用できる（母液はアジド０゜０３ｍＭ／ｍ！（溶液）を含有する）ｂ）カ ップリング ｍＥＧＦ３ｍｇ　（１５３）をＤＭＦｌｍｌに溶解し、０℃に冷却する。この溶 液にＮ−エチルジイソプロピルアミン０．８８μｍ、次いでａ）で得られた溶液 ２５μｍを加える。得られた混合物を冷蔵庫に１６時間放置する。反応の進行を 薄層クロマトグラフィー（溶１１液ニア１５／４のクロロホルム／メタノール１ ５０％酢酸）により試験し、ざらにＮ−エチルジイソプロピルアミン０．８８μ ｌおよびａ）で得られｌ；アジド溶液２５μｍを混合物に加える。冷蔵庫内でさ らに１２時間放置した後、この混合物を減圧下に蒸発させ、残留物を逆相ＨＰＬ Ｃ（カラム：ＥＴ　２５０／８／４　ヌクレオンル　３００−７　Ｃ１８；マチ エリ−および不一ジェル）により精製する。

Ｆ−０，９１゜ アミノ酸分析　理論値　実測値 ＳＥＲ６５，３ Ｈ１ｓ　ｌ　０．９ ＴＨＲ２１，６ β−ＡＬＡ　ｌ　１．１ ＡＲＧ　４　４．０（標準） ＴＹＲ５５，Ｉ ＣＹＳ−ＣＹＳ　６　３．２ ＶＡＬ　２　１．８ ＭＥＴ　］、　１．３ ＩＬＥ　２　２．２ ＬＥＵ　４　４．４ ＰＲ０２１，９ 実施例４　１１１ｉｎ標識ＤＴＰＡ−β−Ａｈａ−ｍＥＧＦＤＴＰＡ−β−ＡＩ 　ａ−ｍＥＧＦｌｍｇを０．０１Ｍ酢酸に溶解する。得られた溶液を０．２２μ のミレックスーＧＶフィルターを通過させる。”’ＩｎＣｌ３　アマ−ジャム、 ３７０ＭＢｑ／ｍｌ）を等用量の０．５Ｍ酢酸ナトリウム中に前希釈する。ＤＴ ＰＡ−β−Ａｌ　ａ−ｍＥＧＦをＩ　ｎＣ１３溶液と混合し、室温で穏やかに混 合することにより、標識を行なう。

実施例５　ｓｏｙ標識ＤＴＰＡ−β−Ａｌａ−ｍＥＧＦ”Ｓ　ｒ−′。Ｙ放射性 核種発生機から”Ｙを得る。発生機の構造、その溶出および［”ＹＩ　ＥＤＴＡ のアセタート錯体への変換は、Ｍ。

チノールおよびり、Ｊ、７ナトウイツチによりジャーナル・オブ・ヌクレアー・ メディスン第２８巻１４６５−１４７０頁（１９８７）に開示される方法に従っ て実施する。０．ＯＩＭ酢酸５ｍｌに溶解したＤＴＰＡ−β−Ａｌ　ａ−ｍＥＧ Ｆ　１ｍｇを室温まで温め、滅菌０．５Ｍアセタート５０μｍ中のｌ−ＯｍＣ＋ の”Ｙを加える。次いでこの混合物を３０分ないし１時間かき乱さずに放置して 最大限のキレートを生成させる。

実施例６　［ＤＴＰＡ−β−Ａｌａ−Ｔｒｐ”］−テトラガストリン ｍＥＧＦの代わりにＨ−Ｔｒｐ−Ｍｅ　ｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ８を使用する 外は実施例３（アジどの製造およびカップリング）の手順に従って標記化合物を 得る。

ｒｅ］　Ａ’−−６，７°　（９５％ＡｃＯＨ中ｃ−０，５）、Ｆ−０，７７゜ 次いでこの標記化合物を各々実施例４まｊ；は５の手順に従って＋１１１ｎまた は一０Ｙで標識する。

実施例７　［ＤＴＰＡ−β−Ａｌ　ａ−Ｐｈｅ”］　−ｂインシュリｍＥＧＦの 代わりにＡＩ、Ｂ！Ｉ−ジーＢｏｃ−インシュリンを使用し、既知の方法によっ て保護基を１００％ＣＦ、Ｃ０ＯＨで除去する外は実施例３の手順に従って、標 記化合物を得る。

Ｆ−０，８３゜ 次いでこの標記化合物を各々実施例４まｔ：は５の手順に従って”’Ｉｎ！？： は９°Ｙで標識する。

実施例８　アセチル−ＤＰｈｅ　（ｐｃｔ）−ＤＰｈｅ　（ｐｃｔ）−ＤＴｒｐ −５ｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ　（Ｒ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＤＡｌａ−Ｎ Ｈ２ ＤＭＦ２５ｍｌ中のＤＴＰＡ−ヒドラジド１５０ｍｇを−２０６に冷却する。こ の混合物にエーテル中の３ＮＨＣＩ０．３７ｍ１゜次いで亜硝酸ｔ−ブチル７２ μｍを加え、得られた混合物を−１５゜ないし−２０’の温度を維持しながら約 ３０分間撹拌する。この後−２０’に冷却したＤＭＦ１００ｍｌ中のアセチル− ＤＰｈｅ　（ｐＣｌ）−ＤＰｈｅ　（ｐＣｌ）−ＤＴｒｐ−Ｓｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ −ＤＬｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＤＡｌａ−ＮＨｚ２００ｍｇの溶液を加 え、次いでｐＨ９が得られるまでＮ−エチルジイソプロピルアミンを加える。得 られた混合物をｐＨ９を維持しなからＯ＠で約７０時間撹拌する。

次に最終容量５ｍｌが残るまでＤＭＦを減圧で除去し、エーテルの添加により標 記化合物を沈澱させる。こめ沈澱を濾過し、洗浄し、乾燥する。

精製のために、標記化合物を水１５０ｍ１に溶解し、この溶液にＮ）（４０Ｈを 加えることによりｐＨ７に調節し、デュオライトＥＳ８８１カラムに吸着させ、 Ｈ，Ｏ−ジオキサン−ＡｃＯＨの勾配を用いて溶出する。標記化合物を含む分画 を集め、次いで凍結乾燥する。

［ａｌ　ｏｏ−１４−５°　（９５％ＡｃＯＨ中Ｃ−０，２）出発化合物は以下 のように製造することができる。

ａ、ＤＴＰＡ−ヒドラジド 重炭酸ナトリウム２ｇを水７１に溶解する。この溶液にＢｏｃＨＮ−ＮＨ，０， ７４ｇ、次いでＤＴＰＡ二無水物２ｇを加える。数秒後、透明な溶液が得られる 。次にこの混合物を４０°で容量０゜５１まで蒸発させ、これをＩＮＨｃＩでｐ Ｈ５（最大）に調節する。

１５分間撹拌後、混合物をｌＮＮａＯＨでｐＨ７に調節し、次いで凍結乾燥する 。この後生成物を、クロロホルム、メタノール、水およびＡｃＯＨの混合物を溶 離液に用いたシリカゲル上のクロマトグラフィーに付す。−置換生成物を集め、 イオン交換樹脂（ＡＣ３−ｘ４、ＯＨ型、ビオラド）上でさらに精製する。得ら れた生成物をＴＦＡＩＯｍ＋に溶解し、この混合物を３０分間撹拌する。ジイソ プロピルエーテルの添加によりＤＴＰＡ−ヒドラジドを沈澱させ、濾過し、高度 真空下で乾燥する１゜ ｂ、アセチル−ＤＰｈｅ　（ｐｃｉ）−ＤＰｈｅ　（ｐｃｌ）−ＤＴｒｐ−５ｅ 　ｒ−Ｔｙ　ｒ−ＤＬｙ　ｓ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ　−ＤＡＩａ−ＮＨ２ このペプチドは、以下の順序で添加されるＮ−σ−Ｆ　ｍ　ｏ　ｃ保護アミノ酸 を使用して、緩和な酸開裂樹脂［例えば４−（２°、４′−ジメトキシフェニル −アミノメチル）−フェノキシメチルポリスチレン、１％架橋、例えばノポビオ ケムより入手可能］上で合成するＦｍｏｃ−ＤＡＩａ−ＯＨ−”　Ｆｍｏｃ−Ｐ ｒｏ−ＯＨ−＊Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ　（Ｐｍｃ）−ＯＨ→　Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−Ｏ Ｈ→　Ｆｍｏｃ−ＤＬｙｓ　（Ｂｏｃ）−ＯＨ−＊　Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ　（ｔＢ ｕ）−ＯＨ−４Ｆｍｏｃ−５ｅｒ　（ｔＢｕ）−ＯＨ−＊Ｆｍｏｃ−ＤＴｒｐ− ＯＨ−＊　Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ　（ｐｃｌ）−ＯＨ−”　Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ　 （ｐｃｔ）−ＯＨ各サイクルにおいてアミノ酸はＤＭＦ中のジイソプロピルカル ボジイミド／ＨＯＢｔで活性化し、完全な結合の後Ｆｍｏｃ基をＤＭＦ中の２０ ％ピペリジンで開裂させる。最終工程のＮ−アセチル化は無水酢酸で行なう。

側鎖保護基を除去し同時にペプチドを遊離させるために、保護ペプチド−樹脂を ＴＦＡ／Ｈ２０（９５：　５）？処理する。ＲＰ−ＨＰＬＣ，引紐きＡＧ−４Ｘ ４、アセタート上のイオン交換により精製を行なう。このようにして標記化合物 を得る。

次いでこの標記化合物を各々実施例４または５の手順に従って１１１ｉｎまたは ”Ｙで標識する。

実施例９ ＤＴＰＡ−ＤＮａｌ−（２）”−ＤＰｈｅ（ｐ−ＣＩ）−ＤＴｒｐ−５ｅｒ−出 発物質としてＨ−ＤＮａ　ｌ　（２）’−ＤＰｈｅ　（ｐＣ１）−ＤＴｒｐ−５ ｅ　ｒ−Ｔｙ　ｒ−ＤＬｙ　ｓ　（ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨｚＯＨ）−Ｌｅｕ− Ｌｙｓ　（ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨ，ＣＨ）−Ｐｒｏ−ＤＡｌａＮＨ２を使用す る外は実施例８（アジドの製造およびカップリング）の手順に従って、標記化合 物を得る。

Ｆ−０，８３゜ 出発物質のペプチドは、反応サイクル３および５でＦｍｏｃ−ＤＬ　ｙ　ｓ　（ ＣＨ！　−ＣＨＯＨ−ＣＨ２０Ｈ）を使用し、最終工程でＦｍｏｃ−ＤＮａｌ− ＯＨを使用する外は実施例８ｂに記載されるように、固相合成法により製造でき る。完全な結合の後、側鎖保護基を除去し同時にペプチドを遊離させるために、 保護ペプチド−樹脂をＴＦＡ／Ｈ２０（９５：　５）で処理する。このペプチド をＲＰ−ＨＰＬＣ１引続きＡＧ−４Ｘ４、アセタート上のイオン交換により精製 する。

［σ］６°−−１６°　（９５％ＡｃＯＨ中ｃ−０，５）。

次いでこの標記化合物を各々実施例４まＩ；は５０手順に従ってＩＩＩ　Ｉ　ｎ または”Ｙで標識する。

実施例１Ｏアセチル−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　Ｉ　−ＤＡｌａ−Ｌｙ ｓ（β−Ａ　Ｉ　ａ−ＤＴＰＡ）　−Ｌ　ｅ　ｕ−ＯＥ　を出発物質としてアセ チル−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　ｌ　−ＤＡＩａ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｏ Ｅｔを使用する外は実施例３（アジドの製造およびカップリング）の手順に従っ て標記化合物を得る。

出発物質のペプチドは欧州特許第３１５３６７−Ａ号に開示されるように製造で きる。

次いでこの標記化合物を各々実施例４または５の手順に従って１１＋１ｎまｊ； はｓａｙで標識する。

腫瘍中に存在するレセプターに対する本発明のキレートの親和性は以下のように 検定できる。

実施例１１　結合特性 ＥＧＦレセプター陽性のヒト腫瘍を取り出し直ちに一７０℃で保存する。これに 統く単離の操作の間、この材料は０ないし４°Ｃに保持する。緩衝液Ａ（２０ｍ ＭのＨＥＰＥＳ、Ｏ，１ｍＭのＥＤＴＡおよび２５０ｍＭのシュクロース、ｐＨ ７，４）５部中でホモジナイズする前に、この膿瘍組織を小立方体に切り刻む。

膜は分画遠心により分離する。次いでこの材料をＨＥＰＥ５３０ｍＭ、ｐＨ７゜ ４、ＢＳＡ１ｍｇ／ｍｌおよびベンズアミジン１ｍＭを含有するインキュベーシ ａン緩衝液中に希釈する。被験混合物（最終容量２００μｍ）はｌｏｏｏｏｏｃ ｐｍの［”’ＩＦ−ＥＧＦ、組織（５ないし２５μｇの蛋白／検定）および濃度 １０−’Ｍの実施例３の化合物を含む。水冷被験溶液をポルテックス上で撹拌し た後、この管（ポリプロピレン）を水浴に移し３７℃で３０分間インキュベート する。

氷冷したバンクまＩ：はトリス緩衝液（４ｍｌ）を添加することにより反応を停 止させる。このトリス緩衝液は０．９％塩化ナトリウム溶液中トリス１０ｍＭを 含有し、ｐＨ７，４に調節しである。通常、濾過緩衝液は、使用の数分前に濾過 緩衝液に浸漬したグラスファイバーフィルター（Ａ／Ｅ型）への非特異結合を抑 制するために１％ＢＳＡ　（分画Ｖ）を含む。管を濾過緩衝液４ｍｌですすぎ、 洗液を各フィルター上に注ぐ。フィルターを３度目に洗浄した後乾燥し、フィル ターに結合した放射活性をγ−計数器で測定する。フィルターの洗浄にはおよそ １０秒かかる。実施例３の化合物が、特異的に結合した［”’＋３−ＥＧＦを阻 害することが観察される（ＩＣｓ。

＝１．３ｎＭ）。

被験物質として０．２ｍＣ１”’ＩｎＣ１，で標識した実施例３の化合物１．ｕ ｇを使用する外は同様の結合検定操作を繰り返す。この試験はシリコン処理しｔ ；ホウ珪酸塩のガラス管中で実施し、非特異的結合を測定するためのＥＧＦＩＯ −’Ｍをさらに含有する対照を使用する。これらの検定において、実施例４の化 合物が高い親和性でＥＧＦレセプターと結合することが観察される（ＩＣ，。− ３ｎＭ）。

雄のスプラーグ・ドーレイ・ラット由来のＬＨＲＨレセプター陽性前脳下垂体膜 、０．４ｍＣ１の”’ＩｎＣｌ、で標識した（標識は室温で１５分間行なう）実 施例８の化合物ｌμｇおよび非特異結合の測定のための（ＤＡｌａつＬＨＲＨＩ Ｏ−’Ｍを使用する外は同様の結合検定手順に従うことにより、Ｉｌｌ　１０で 標識した実施例８の化合物が高い親和性でＬＨＲＨレセプターと結合することが 観察される（　Ｉ　Ｃｈｏ−１，１ｎＭ）。

実施例１２　生体内分布 放射活性の生体内分布は、ＥＧＦレセプター陽性腫瘍（ＭＤＡ２３１％ＭＤＡ　 ４６８またはＡ４３１腫瘍）を有する体重２０＋５ｇのヌードマウスにおける標 準画像化技術を用いて、またはこのような多数の動物を順次殺し、器官の放射活 性を測定することにより、決定できる。実施例４の化合物を９０−１００μＣ４ に相当する用量で動物に静脈内投与し、５分、１０分、１５分、３０分、６０分 、２０時間および４８時間における放射活性を評価する。注射の５分後に、肝臓 、腎臓、膀胱および腫瘍部位における放射活性を検出する。注射の６０分後にお いて、放射活性は増加しつつあり、かつ腫瘍部位に存在する。

実施例１３　ＤＴＰＡ−ｍＥＧＦ 出発物質としてｍＥＧＦを使用する外は実施例８の手順に従って標記化合物を得 る。

次いで各々実施例４または５の手順に従ってこの標記化合物をＩｌｌ　１　ｎま たは１Ｙで標識する。

実施例１４１−（ｐ−インチオシアナートベンジル）−ＤＴＰＡ−ｍＥＧＦ Ｎａ、ＣＯ３でｐＨ９，８に調節しｔ；、アセトニトリル／水（１／ｌｖ／ｖ） ５ｍｌ中のｍ　Ｅ　Ｇ　Ｆ　３　ｍ　ｇの溶液に、Ｎ−（２−［ビス（カルボキ シメチル）アミノ］エチルｌ　−Ｎ’　−（２−ビス−［ビス（カルボキシメチ ル）アミノ］　−２−（ｐ−インチオシアナートベンジル）−エチル）−グリシ ン［または１−（ｐ−イソチオシアナートベンジル）−ＤＴＰＡ］を加える。室 温で９時間の反応の後、この溶液を水で２０ｍ１に希釈し、ＲＰ−ＨＰＬＣカラ ムにロードする。

標記化合物を勾配溶離（緩衝液Ａ：Ｏ，１％トリフルオロ酢酸、緩衝液Ｂニアセ トニトリル中０．１％トリフルオロ酢酸）によって単離し、凍結乾燥後に白色の 凍結乾燥物として得る。

次いで各々実施例４または５の手順に従ってこの標記化合物を１１＋１ｎまたは ”Ｙで標識する。

実施例１５　ｐ−イソチオ・シアナートベンジル−ＤＯＴＡ−ｍＥＧＦ １−（ｐ−インチオシアナートベンジル）−ＤＴＰＡの代わりにｐ−イソチオノ アナートベンジル−ＤＯＴＡを用い、実施例１４０手順に従って標記化合物を得 る。

次いで各々実施例４または５の手順に従ってこの標記化合物を１１１１０または ”Ｙで標識する。

国際調査報告 ｍ−ｗｍ−＋＾＊ｓｉ−＋−−）ｌ−ＰＣＴ／ＥＰ　９０１０１１６９国際調査 報告 ＥＰ　９００１１６９ Ｓ＾　３８９６４

Claims (27)

【特許請求の範囲】
1. １．当該ペプチドのアミノ基に綜合した少なくとも１個のキレート形成基を有し 、該キレート形成基が検出可能な元素と錯体を作ることができ、かつ、かかるア ミノ基が標的レセプターに対し有意な結合親和性を持たない、成長因子、インシ ュリン、ＬＨＲＨ、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、サイロトロビン放出 ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、プロラクチン、血管作用性腸管ペプチド、アン ギオテンシン、インターフェロン、ＩＬ−１、ＩＬ−４およびＩＬ−６、ならび にこれらの類似体または誘導体よりなる群から選ばれる生物学的に活性なペプチ ド。
2. ２．成長因子がＥＧＦ、ＩＧＦ、線維芽細胞成長因子、腫瘍壞死因子、腫瘍化増 殖因子、血小板由来成長因子、神経成長因子もしくはボンベシンまたはそれらの 類似体または誘導体である請求項１に記載のペプチド。
3. ３．当該ペプチドのアミノ基に結合した少なくとも１個のキレート形成基を有し 、該キレート形成基が検出可能な元素と錯体を作ることができ、かつ、かかるア ミノ基が標的レセプターに対し有意な結合親和性を持たない、上皮成長因子、Ｌ ＨＲＨ、ＬＨＲＨ作動物質、ＬＨＲＨ拮抗物質、ボンベシンおよびボンベシン拮 抗物質ならびにこれらの類似体および誘導体よりなる群から選ばれる生物学的に 活性なペプチド。
4. ４．キレート形成基が二価の架橋基により間接的にアミノ基に結合している請求 項１または３に記載のペプチド。
5. ５．キレート形成基がアミド結合によりアミノ基に結合している請求項１または ４に記載のペプチド。
6. ６．キレート形成基がポリアミノポリカルボキシ基、式ＩＩａまたはＩＩｂ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩａ）▲数式、化学式、表等があります ▼（ＩＩｂ）［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は各々独立して、各々所望によりＯ Ｈ、Ｃ１−４アルコキシ、ＣＯＯＨまたはＳＯ３Ｈにより置換されているＣ１− ６アルキル、Ｃ６−８アリールまたはＣ７−９アリールアルキルであり、Ｒ４は ▲数式、化学式、表等があります▼または▲数式、化学式、表等があります▼（ 式中、＊を付した炭素原子はイミノ基に結合している）であり、ｎ′は１または ２であり、 ｉは２から６の整数であり、 ＴＴは独立して互いにアミド結合により結合したａまたはβアミノ酸である］ で示される基、 または式ＩＩＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）［式中、Ｒ２０、Ｒ２０ａ、Ｒ２ １、Ｒ２２およびＲ２３は各々独立して水素またはＣ１−４アルキルであり、 Ｘ２は、ペプチドのＮ−アミノ基と反応可能な基、または二価の架橋基と結合可 能な基のいずれかであり、ｍ′は２または３である］ で示される化合物から誘導される基、 式ＩＶ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＶ）［式中、Ｘ２は前記と同意義］ で示される化合物から誘導される基、 式Ｖ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）［式中、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ ２７、Ｒ２８およびＲ２９は各々独立して水素またはＣ１−４アルキルであり、 Ｘ２およびｍ′は前記と同意義である］で示される化合物から誘導される基、 式ＶＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩ）［式中、Ｘ２は前記と同意義であり 、 Ｘ３は、Ｃ１−４アルキレン、１または２個のＣＯ２Ｒ１０により、またはＣＨ ２ＣＯＲ３０、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨＣＨ２ＣＯ２Ｒ３０により置換されて いるＣ１−４アルキレン、フェニレン、またはＣＯ２Ｒ３０により置換されてい るフェニレン（式中Ｒ３０はＣ１−４アルキルである）であり、 Ｙ５は水素またはＣＯ２Ｒ３０である］で示される化合物から誘導される基、 ポルフィリン類から誘導される基またはデスフェラールから誘導される基である 、請求項１に記載のペプチド。
7. ７．キレート形成基が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリ アミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、Ｎ−ヒドロキシエチルーＮ，Ｎ′，Ｎ′−エチレン ジアミン三酢酸（ＨＥＤＴＡ）、エチレングリコール−Ｏ，Ｏ′−ビス（２−ア ミノエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−四酢酸（ＥＧＴＡ）、Ｎ，Ｎ′−ビス（ヒ ドロキシベンジル）エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ′−二酢酸（ＨＢＥＤ）、トリエ チレンテトラアミン六酢酸（ＴＴＨＡ）から誘導される基、置換ＥＤＴＡまたは 置換ＤＴＰＡから誘導される基、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン −Ｎ，Ｎ′，Ｎ′′，Ｎ′′′−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−テト ラアザシクロテトラデカン−Ｎ，Ｎ′，Ｎ′′，Ｎ′′′−四酢酸（ＴＥＴＡ） 、または式Ｉａ、ＩｂもしくはＩｃ：▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉａ ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉｂ）▲数式、化学式、表等があります ▼（Ｉｃ）［式中、Ｒ１０は−ＣＨ２ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体であり、 Ｒ１１は−Ａｌｋ−Ｘ１または▲数式、化学式、表等があります▼（式中ｎおよ びｍは各々独立して０、１、２または３であり、ＡｌｋはＣ１−１１アルキレン であり、Ｘ１は所望により保護基によって置換されていてもよい−ＮＣＳまたは ＮＨ２であり、環Ａは置換または非置換である）である］ で示される化合物から誘導される基である、請求項１に記載のペプチド。
8. ８．キレート形成基がＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、Ｎ′−ｐ−イソチオシア ナートベンジル−ジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′′，Ｎ′′−四酢酸、Ｎ ′−ｐ−イソチオシアナートフェネチル−ジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′ ′，Ｎ′′−四酢酸、Ｎ−｛２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル ｝−Ｎ′−｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−２−（ｐ−インチオシ アナートベンジル）−エチル｝−グリシン、式Ｉａ、ＩｂまたはＩｃ：▲数式、 化学式、表等があります▼（Ｉａ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉｂ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉｃ）［式中、Ｒ１０は−ＣＨ２ＣＯＯＨ またけその官能性誘導体であり、Ｒ１１は−（ＣＨ２）１−６−ＮＣＳ、ｐ−イ ソチオシアナートベンジルまたはｐ−イソチオシアナートフェネチルである］で 示される化合物、または式Ｖａ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖａ）で示される化合物から誘導される基 である、請求項１に記載のペプチド。
9. ９．成長因子、ペプチドホルモン、インターフェロン、およびサイトカインなら びにこれらの類似体または誘導体よりなる群から選ばれる生理学的ペプチドであ って、当該ペプチドのアミノ基に直接または二価の架橋基によって間接的に結合 したキレート形成基を有し、該キレート形成基がＮ′−ｐ−イソチオシアナート ベンジルージエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′′，Ｎ′′−四酢酸、Ｎ′−ｐ −イソチオシアナートフェネチル−ジエチレントリアミン−Ｎ，Ｎ，Ｎ′′Ｎ′ ′−四酢酸、Ｎ−｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］エチル｝−Ｎ′− ｛２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−２−（ｐ−イソチオシアナートベ ンジル）−エチル｝−グリシン、ＤＯＴＡ、Ｃ−官能化テトラアザシクロドデカ ン四酢酸、Ｃ−官能化テトラアザシクロテトラデカン四酢酸、Ｃ−官能化トリア ザシクロドデカン三酢酸、Ｃ−官能化トリアザシクロノナン三酢酸および式Ｖ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）〔式中、Ｒ２４、Ｒ２５、Ｒ２６、Ｒ ２７、Ｒ２８およびＲ２９は各々独立して水素またはＣ１−４アルキルであり、 ｍ′は２または３であり、Ｘ２はｐ−イソチオシアナートーベンジルまたは−フ エネチルである〕 で示される化合物から誘導され、該キレート形成基が検出可能な元素と錯体を作 ることができ、該アミノ基が標的レセプターに対し有意な待合親和性を持たない 、ペプチド。
10. １０．二価の架橋基が式（ａ１）： −Ｚ−Ｒ−ＣＯ−（ａ１） ［式中、Ｒは、Ｃ１−１１アルキレン、ヒドロキシ置換Ｃ２−１１アルキレン、 Ｃ２−１１アルケニレン、▲数式、化学式、表等があります▼、シクロヘキシレ ン、置換シクロヘキシレン、または式（ａ２）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ａ２）［式中、ｎおよびｍは前記と同意義 であり、環Ａは置換または非置換であり、 Ｒ５は天然または合成ａ−アミノ酸のＣａに結合した基である］で示される基で あり、 Ｚは、共有結合によりキレート形成基と反応することができる、官能基から誘導 される二価の基である］ で示される基である、請求項４または９に記載のペプチド。
11. １１．遊離型または塩の形の式ＶＩＩ：Ｒ３３−Ａ１−Ｂ１−Ｃ１−Ｄ１−Ｅ１ −Ｆ１−Ｇ１−Ｈ１−Ｉ１−Ｋ１−ＮＨ２（ＶＩＩ）［式中、Ｒ３３は水素、Ｃ １−７アシルまたはカルバモイルであり、Ａ１は、所望によりフェニル環におい てハロゲン、ＣＦ３、Ｃ１−３アルキルおよび／またはＣ１−３アルコキシによ って置換されていてもよいＤ−Ｐｈｅ、ａ−またはβ−ナアチル−Ｄ−アラニン 、所望により５または６位でハロゲンまたはＣ１−３アルコキシにより、そして ／または１位でホルミルまたはアセチルによって置換されていてもよいＤ−Ｔｒ ｐ、Ｄ−またはＬ−Ｐｒｏ、Ｄ−またはＬ−３，４−デヒドロプロリン、Ｄ−ま たはＬ−Ｓｅｒ、Ｄ−またはＬ−Ｔｈｒ、Ｄ−またはＬ−Ａｌａ、Ｄ−ビログル タミン、３−（９−アントリル）−Ｄ１Ｌ−アラニル、３−（２−フルオレニル ）−Ｄ，Ｌ−アラニルまたは３−（Ｈｅｔ）−Ｄ，Ｌ−アラニル［式中、Ｈｅｔ は、 ▲数式、化学式、表等があります▼または▲数式、化学式、表等があります▼〔 式中、Ａ２およびＡ３は、水素、Ｃ１−４アルキル、塩素および臭素よりなる群 から独立して選ばれ、 Ａ４はＯ、ＳまたはＮである］ から選ばれる複素環アリール基である］であり、Ｂ１は、所望によりフェニル環 においてハロゲン、ＮＯ２、Ｃ１−３アルキルまたはＣ１−３アルコキシによっ て置換されていてもよいＤ−Ｐｈｅ、所望により４位において塩素により置換さ れていてもよいＤ−ａ−メチルＰｈｅ、２，２−ジフェニルグリシンまたは３− （２−ナフチル）−Ｄ−アラニンであり、 Ｃ１は、所望により５または６位においてハロゲン、ＮＯ２またはＣ１−３アル コキシにより、そして／または１位においてホルミルまたはアセチルにより置換 されていてもよいＤ−Ｔｒｐ、３−（２−または１−（ナフチル）−Ｄ−アラニ ン、３−Ｄ−ビリジルアラニン、Ｄ−Ｔｙｒ、所望によりハロゲン、Ｃ１−３ア ルキルおよび／またはＣ１−３アルコキシにより置換されていてもよいＤ−Ｐｈ ｅ、Ｄ−３−Ｐｚ−Ａｌａ、Ｄ−Ｔｉｎ−ＧｌｕまたはＤ−Ｎｉｃ−Ｌｙｓであ り、 Ｄ１はし−Ｓｅｒであり、 Ｅ１は、Ｔｙｒ、所望によりフェニル環においてハロゲン、Ｃ１−３アルキルお よび／またはＣ１−３アルコキシによって置換されていてもよいＰｈｅ、Ｏｒｎ 、Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−Ｎｉｃ、ＭＰｉｃ−Ｌｙｓ、Ｐｉｃ−Ｌｙｓ、ＤＰｉｃ−Ｌ ｙｓ、ＭＰｉｃ−Ｌｙｓ、ＤＭＧ−Ｌｙｓ、Ｐｍｃ−Ｌｙｓ、Ｐｚｃ−Ｌｙｓ、 ＰｍＡＣＡｌａ、ＰｚＡＣＡｌａ、Ｈｉｓ、Ｄｐｏ、Ａｒｇ、３−（３−ビリジ ル）−Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｎ−（３−ビリジル）アセチル−ＬｙｓまたはＧｌｕ（ ｐＭｅＯ−フェニル）、Ｃｉｔ、ＨＯＢＬｙｓまたはＰｚＡＣＡｌａであり、 Ｆ１は、所望によりフェニル環においてハロゲン、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１−３ア ルキルまたはＣ１−３アルコキシによって置換されていてもよいＤ−Ｐｈｅ、所 望により５または６位においてハロゲン、ＮＯ２、および／またはＣ１−３アル コキシにより、そして／または１位においてホルミルまたはアセチルによって置 換されていてもよいＤ−Ｔｒｐ、３−（２−ナフチル）−Ｌ−アラニル、【配列 があります】Ｄ−３−（３−ビリジル）−Ａｌａ、Ｄ−Ｈｉｓ（Ｈまたはベンジ ル置換）、Ｄ−Ａｒｇ、Ｄ−ホモ−Ａｒｇ（Ｅｔ２）、Ｄ−Ｃｉｔ、Ｄ−ＨＣｉ 、Ｄ−Ｌｙｓ−Ｐｉｃ、Ｄ−Ｃｉｔ（Ｃ１−３−アルキル）、Ｄ−ＨＣｉ（Ｃ１ −３アルキル）、Ｄ−Ｇｌｕ（ＡＡ）またはａ−アミノ−ω−ウレイドーＣ２− ４アルカン酸であり、 Ｇ１は、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｎｖａｌ、Ｎ−ａ−メチルＬｅｕ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、 Ｍｅｔ、Ｔｙｒ、Ｖａ１、Ｉｌｅ、アロＩｌｅ、ＡｂｕまたはＡｌａであり、 Ｈ１は、Ａｒｇ、ＩＯｒｎ、Ｌｙｓ、ＩＬｙｓまたはＣｙｐ−Ｌｙｓであり、 Ｉ１は、Ｐｒｏ、ヒドロキシプロリン、３，４−デヒドロプロリン、Ｐｉｐであ り、 Ｋ１は、Ｄ−Ａｌａ、Ｄ−Ｌｅｕ、Ｇｌｙ、Ｄ−ＳｅｒまたはＳａｒである］ で示されるＬＨＲＨ拮抗物質である、請求項１に記載のペプチド。
12. １２．遊離型または塩の形の式ＩＸａ：▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ Ｘａ）（式中、Ｒ３６は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルカノイル、Ｃ ４−６シクロアルコキシカルボニルまたはＣ１−４アルコキシカルボニルであり 、 Ａ６は、直接結合またはＧｌｙ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｐｈｅ、Ａｓｐ、Ｎａｌ、Ｐ ｒｏ、β−ＡｌａまたはＧｌｐであり、Ｂ３は、直接結合またはＧｌｙ、Ｐｒｏ またはＡｓｎであり、Ｃ３は、直接結合またはＬｙｓまたはＤ−Ｎａｌであり、 Ｄ３は、直接結合またはＨｉｓ、ＭｅＨｉｓ、ＥｔＨｉｓ、ＰｒＨｉｓ、Ｇｌｎ 、Ｇｌｕ、（ＯＭｅ）−Ｇｌｐ、Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ｐａｌ、Ｐｈｅ 、Ｐｒｏ、Ａｒｇ、ＴｒｐまたはＴｈｒであり、 Ｅ３は、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｎａｌ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｐａｌであり、Ｆ３は、Ａ ｌａ、ＭｅＡｌａ、Ａｉｂ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ 、Ｎａｌ、Ｔｈｒ、ＡｒｇまたはＧｌｕであり、 Ｇ３は、Ｖａｌ、Ａｉｂ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｔｈｒ、ＰｈｅまたはＳｅｒであり 、 Ｈ３は、Ｇｌｙ、Ｓａｒ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｉｂ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、ＡｓＰ、 Ａｒｇ、Ｖａｌ、Ａｃ３ｃ、Ａｃ５ｃまたはＡｃ６ｃであり、 Ｉ３は、Ｈｉｓ、ＭｅＨｉｓ、Ａｉｂ，、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ａｌａ 、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ｐａｌ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ 、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＴｒｐまたはＮａｌであり、 Ｑは、Ｋ３−Ｒ３７〔式中、Ｋ３はＬｅｕ、ＭｅＬｅｕ、Ｉｌｅ、ＭｅＩｌｅ、 Ａｉｂ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、ＭｅＶａｌ、Ｐｈｅ、Ａｐｅ、ＭｅＡｐｅ、Ｍｅｔ、 Ｓｅｒ、Ｇｌｎ、ＧｌｕまたはＴｒｐであり、Ｒ３７はＣ１−３アルキルアミノ 、Ｃ１−４（ジアルキル）アミノまたはＣ１−３アルコキシである］、またはＱ はＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−１０アルキルアミノまたはＣ１−１０（ジアルキ ル）アミノである］で示されるボンベシン拮抗物質、または式ＩＸｂ：【配列が あります】（ＩＸｂ） ［式中、Ａ７は、水素、Ｂｏｃ、Ｌｙｓ、Ａｒｇであり、Ｂ４は、直接結合また はＡｓｎ、Ｔｈｒ、Ｇｌｐであり、Ｗは、ＧｌｙまたはＡｌａであり、 Ｘ６は、直接結合、Ｈｉｓ（Ｒ３４）、Ｐｈｅ、ＳｅｒまたはＡｌａであり、 Ｙ８は、直接結合、ＬｅｕまたはＰｈｅであり、Ｔ１は、アミノ、ＮＨ（ＣＨ２ ）４ＣＨ３、ベンジルアミノ、Ｍｅｔ−Ｒ３９、Ｌｅｕ−Ｒ３９、Ｉｌｅ−Ｒ３ ９、Ｉｌｅ−Ｒ３９またはＮｌｅ−Ｒ３９であり、 Ｒ３６は水素またはベンジルであり、 Ｒ３９はアミノ、ヒドロキシ、メトキシまたは−ＮＨＮＨ２である］で示される 化合物である、請求項１に記載のペプチド。
13. １３．キレート形成基が末端アミノ基に結合している請求項１に記載のペプチド 。
14. １４．キレート形成基が側鎖アミノ基に結合している請求項１に記載のペプチド 。
15. １５．ＤＴＰＡ−β−Ａｌａ−ｍＥＧＦ、［ＤＴＰＡ−β−Ａｌａ−Ｔｒｐ１４ ］−テトラガストリン、アセチル−ＤＰｈｅ（ｐＣｌ）−ＤＰｈｅ（ｐＣｌ）− ＤＴｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ（ＤＴＰＡ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− ＤＡｌａ−ＮＨ２、ＤＴＰＡ−ＤＮａｌ−（２）１−ＤＰｈｅ（ｐ−Ｃｌ）−Ｄ Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ（ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨ２ＯＨ）−Ｌｅｕ −Ｌｙｓ（ＣＨ２−ＣＨＯＨ−ＣＨ２ＯＨ）−Ｐｒｏ−ＤＡｌａ−ＮＨ２および アセチル−【配列があります】 （β−Ａｌａ−ＤＴＰＡ）−Ｌｅｕ−ＯＥｔであるペプチド。
16. １６．ａ）キレート形成基を有するペプチド内に存在する少なくとも１個の保護 基を除去し、または、 ｂ）各ペプチドが少なくとも１個のアミノ酸を保護または非保護型で含み、かつ その一方がキレート形成基を含む（ここでアミド結合は所望のアミノ酸配列が得 られるような状態で存在する）２個のペプチドフラグメントをアミド結合によっ て結合し、次いで所望により工程ａ）を実施し、または、 ｃ）キレート形成基がペプチドの所望のアミノ基に固定されるよう、キレート試 薬および保護または非保護型の所望ペプチドを結合し、次いで所望により工程ａ ）を実施し、または、ｄ）キレート形成基を有する非保護または保護ペプチドの 官能基を除去し、またはこれを他の官能基に変換して、キレート形成基を有する 別の非保護または保護ペプチドを得、そして後者の場合は工程ａ）を実施し、 そして、このようにして得られたペプチドを遊離型または塩の形で回収すること からなる、請求項１または９に記載のペプチドの製造方法。
17. １７．医薬としての使用のための遊離型または薬学上許容し得る塩の形の請求項 １または９に記載のペプチド。
18. １８．薬学的担体または希釈剤と組み合わせた、遊離型または薬学上許容し得る 塩の形の請求項１または９に記載のペプチドからなる医薬組成物。
19. １９．検出可能な元素と錯体を形成した遊離型または薬学上許容し得る塩の形の 請求項１または９に定義のペプチドからなるキレート。
20. ２０．検出可能な元素が蛍光またはα−、β−もしくはγ−放出元素である請求 項１９に記載のキレート。
21. ２１．医薬としての使用のための遊離型または薬学上許容し得る塩の形の請求項 １９に記載のキレート。
22. ２２．検出可能元素が蛍光またはγ−放出元素であるときには画像化試薬として の用途のための、または検出可能元素がａ−またはβ−放出元素であるときには 治療用途のための、遊離型の請求項１９に記載のキレート。
23. ２３．薬学的担体または希釈剤と組み合わせた、遊離型または薬学上許容し得る 塩の形の請求項１９に記載のキレートからなる医薬組成物。
24. ２４．遊離型または塩の形の該ペプチドを検出可能元素生成化合物と反応させる ことからなる、請求項１９に記載のキレートの製造方法。
25. ２５．請求項１または９に定義のペプチドおよび検出可能元素の単位用量をそれ らの混合のための指示とともに含む、画像化試薬または治療薬としての用途のた めの包装物。
26. ２６．式Ｘ１： Ａ−Ｚ−Ｒ−Ｚ２−Ｘ７（ＸＩ） ［式中、Ａはキレート形成基であり、 Ｚはキレート試薬と共有結合により反応できる官能基から誘導される二価の基で あり、 Ｒは、Ｃ１−１１アルキレン、ヒドロキシ置換Ｃ２−１１アルキレン、Ｃ２−１ １アルケニレン、▲数式、化学式、表等があります▼、シクロヘキシレン、置換 シクロヘキシレン、または式（ａ２）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ａ２）［式中、ｎおよびｍは各々独立して ０、１、２または３であり、環Ａは置換または非置換であり、 Ｒ５は天然または合成ａ−アミノ酸のＣａに結合した基である］で示される基で あり、 Ｚ２はＣＯＯＨまたはカルボキシ基の官能基である］で示される化合物または式 ＸＩＩ： Ａ−Ｚ′１−ＣＯ−Ｘ７（ＸＩＩ） ［式中、Ａは前記と同意義であり、 Ｚ′１は直接結合または−Ｚ−Ｒ（式中、ＺおよびＲは前記と同意義である）の いずれかであり、 Ｘ７は保護または非保護型の−ＮＨ−ＮＨ２または−Ｎ３である〕で示される化 合物。
27. ２７．標的組織の画像化のための診断薬の製造における遊離または薬学上許容し 得る塩の形の請求項１に記載のペプチドの用途。