JPH04501410A - エクジステロイドにもとづく水和脂質ラメラ相またはリポソーム - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 エフジステロイドにもとづく水和脂質ラメラ相またはリポソーム 本発明は、本質的にエフジステロイド、好ましくはエクジステロン、またはその 誘導体の一つを含むリポソームまたは水和脂質ラメラ相にもとづいた組成物（Ｃ ｏ■ｐｏｓＩｔｌｏｎｓ）と、それに取り込まれる化粧、製剤学的、特に皮膚病 理学的、植物衛生（ｐｈｙｔｏｍｍｎｉｔｍｒｙ　）組成物または養蚕のための 組成物とに関するものである。

エフジステロイドは２．３、ｔ４−トリヒドロキシ−△−７−６−ケドステロイ ドのグループの一種である。これはα−エクジソンもしくは（２βｌ　３β、１ ４α−２２／Ｒ／、２５−ペンティドロ牛シー７−コレスチンー６−オン）：　 ２−デオキシエクジソンもしくは（３β。

１４β、２２／Ｒ／、２５−テトラヒドロ亭シー５−β−７−コレスチンー６− オン）；　エクジステロン４１）Ｌ＜はβ−エクジソンもしくは２βｌ　３β、 １４，２０β。

２２．２５−ペンタヒドロキシー７−コレスチンー６−オン；　β−エクジソン −２２−アセテートもしくは２０−ヒドロキシエクジソン−２２−アセテートも しくは７−コレスチンー２βｌ　３β、１４，２０．　２０／Ｒ／２５−ヘキシ オール−６−オン−２２−アセテート−５−ヒドロキシ−エツジステロン５βの 、７−コレスチンー２β、　３β、５．　１４．　２０．　２２／Ｒ／２５−ペ ンタヒドロキシ−５β、５−コレスタン−６−オンから作られる。エフジステロ イド、特にエクジステロン（ある場合においては、β−エクジソンまたはクラス トエフジンとも呼ばれる）は文献中においてよく知られたものであり、またメル クインデックス（Ｍｅｒｃｋ　Ｉｎｄｅｘ）（１０版、　１９８３　年、　５０ ５　頁、ＨＱ３４　）　Ｏ）に記載されている。

エフジステロイド、特にエクジステロンは、動物界と植物界の両方で昆虫によっ て重要な役目を果たしている。

昆虫が保持しているこれらのホルモンは、成長や生殖を調整する役目をしている 。エフジステロイドは特に成虫になるまでのさまざまな変態過程に関連するもの である。

（ＣＮＲ３ＮＲ３出版二層力ロフ（ＢｒａｋａｌｏＨ）氏らによる”　Ｅｎｊｅ ｕｘ　ａｔ　Ｐｒｏｂｌｅｍａｔｉｑｕｅｉ”生物学　１９９０参照）０植物に おいては、これらの物質の作用は完全に明らかになっていないが、それらは開花 時に作用していると思われる。　（ＣＩＥＮＣＩ＾ｅ　Ｃｕ１ｔｕｒａ　（１１ ０）　３２　＠　Ｎｎ　１０ベージ１３８４から１３９０参照）。

そして、化粧、製剤学的、特に皮膚病理学的組成物に含まれる水和脂質ラメラ相 もしくはリポソームには、様々なを効な成分が取り込まれる事に関してはすでに 知られている（ＦＲ−Ａ−２５４０３８１）。

現在、エクジステロン、前記エフジステロイド誘導体、前記エフジステロイドも しくはエクジステロイド誘導体を含む植物または動物性抽出物は、水和脂質ラメ ラ相またはリボソー・ムの少なくとも一部に取り込まれることによって、この物 質まだは抽出物の活性が非常に高まることを偶然にも発明した。また、このこと は、すでに知られているエフジステロイドそのもののあらゆる作用および前記抽 出物に含まれるエフジステロイドのあらゆる作用が含まれる。さらに、このよう な活性の上昇は皮膚の再生や老化防止に関する活性にもあてはまる。

その結果、相乗効果は、エクジソン、このましくはエクジステロンまたはエフジ ステロイド誘導体、あるいは前記エフジステロイドを含む植物性または動物性抽 出物が水和脂質ラメラ相、リポソームの少なくとも１部分に取り込まれることに よって得られる。

よって、本発明の目的はエクジソン、このましくはエクジステロンまたはエクジ ステロイｔ１誘導体、あるいは前記エフジステロイドを含む植物性または動物性 抽出物の新たな処方に関する新規な技術的問題を解決することにある。すなわち 、その効果を高め、化粧品、製剤学的、特に皮膚病理学的分野において使用可能 なものにすることである。

本発明はこの新たな新規技術問題を十分に解決するものである。

まず第１に、本発明は水和脂質ラメラ相もしくはリポソームにもとづく組成物に 関するものて、前記水和脂質ラメラもしくはリポソームにエフジステロイド、エ フジステロイド誘導体、またはそれらの一つを含む植物性または動物性抽出物の 少なくとも１つが含有されることを特徴とする。

本発明の実施態様によれば、前記エフジステロイドはエクジステロンまたはエク ジステロン誘導体で、特にアシル化、ヒドロキシル化されたもの、あるいは後者 のデオキシ誘導体である。

本発明の特にのぞましい実施態様によると、前記エクジステロン誘導体はβ−エ クジソン−２−アセテート、β−エクジンンー３−アセテート、β−エクジソン −２゜３−ダイアセテート、β−エクジンンー２．　３．　２２−トリアセテー ト、β−エクジソン−２，３，２２，２５−テトラ−アセテート；　６−ヒトロ キシエクジステロンと２−デオキシエクジステロンから成る群から選ばれる。

別の実施！＠様によると、前記エフジステロイドは、９−エクジソンもしくはそ の誘導体の１つ、特にアセテートに関するものである。

本発明の他の特性にもとづけば、エフジステロイド、好ましくはエクジステーン を含む前記動物性もしくは植物性抽出物はポリポジウムヴルガール（乙えり。ヨ ＬＬＬＩ□ムヨ亘、アジ、ガデ牛エベンス（Ａ　ｕ　ａ　ｄｅｅｕｍｂａｎｓま たはシアノチズアラクノイデア（Ｃａｎｏｔ　ｓ　ａｒｍｃｈｎｏｌｄｅａ）か ら得られる抽出物である。

エフジステロイドもしくはその誘導体は脂質相の水相性脂質ラメラ相もしくはリ ポソームのすくなくとも一部分に取り込まれることを本発明の特徴とする。

本発明に関する詳細な説明および請求の範囲の各項において、　「脂質相」また は「脂質ラメラ相」という用語にもちいられている「脂質」とは、いわゆる脂肪 族炭素鎖を意味するもので、通常５個以上の炭素原子を含むものを指す。

本発明によれば両親媒性脂質が用いられる。すなわち、イオン性、または非イン オ性の親水性基または親脂質性基を持つ分子によって構成される。

特に、これらの脂質のなかで、われわれがとりあげるものは、リン脂質、ホスホ アミノ脂質、グリコ脂質、ポリキシレン脂肪アルコール、ポリオルエステル、そ してポリ牛ジエチレンが付加されたもの（ｏｐｔｌｏｎａｌｌｐｏｌｙｏｘｙａ ｔｈｙｌａｎａｔａｄ）である。

例几ば、このような物質は卵白または、大豆のレシチン、ホスファチジルセリン 、スフィンゴミリエン、セラミド、セレブロシド、あるいはポリグリセロールオ 牛シエテレネートステアレートで構成される。

本発明の好適な実施態様によれば、エフジステロイドの濃度は前記リポソームの 重量に対しての０．００１〜３０％、好ましくは前記脂質相の重量に対して０． ０１〜１０％に相当する。

本発明にもとづくエフジステロイドの少なくともひとつを少なくとも部分的に含 む水和性脂質ラメラ相またはリポソームの調製は、活性物質、特にステロイドを 水和性脂質ラメラ相またはリポソームに取り込む既知の方法によってなされよう 。

もっとも簡単な方法は、バングハム（Ｂ　ａ　ｎ　ｇ　ｈ　ａ　ｍ）の文献（分 子生物学：　Ｍｏ１．　Ｂｌｏｌ、１９６５年１３巻　２３ｇ−２５２ページ） に記載された方法で、脂質を揮発性の有機溶媒に溶解し、ロータリーエバポレー ターでこの有機溶媒を蒸発させることによって回転フラスコの内壁に付着した薄 い膜を形成させる。このよううな膜が付着した回転フラスコに水を加えて振とう し、リポソームの懸濁液を得る。この方法における改良点は、均質なリポソーム を得るために超音波処理することである。

本発明の好ましい実施態様によれば、脂質相の成分を微粒子化（ａｔｏｓｉｚｍ 口ｏｎ　）する方法がもちいられる。この微粒子化（ｉｔｏｍＩｚａｔｌｏｎ　 ）のあとに必要に応じて圧力下での均質化によつて水溶性媒体への分散がなされ る。

詳しくは、ＥＰ−Ｂ！−００８７９９３およびＦＲ−Ａ−２５３４４８７または Ｅ　Ｐ　−８１−１０７５５９ニ！己載された方法を参照せよ。

本発明の好ましい実施態様によれば、エフジステロイドまたはその誘導体あるい はそれを含有した植物または動物油′出物は脂質相にとりこまれる。よって、微 粒子化の前に、エフジステロイドまたはその誘導体、あるいはそれを含む抽出物 を、大豆レシチンのような少な（とも一つの両親媒性脂質、必要に応じて、コレ ステロールまたはβ−シストステロールのような親脂質性または親水性の化合物 に溶解する。

溶媒は、このましくはジクロロメタン、クロロホルムまたはメタノール、あるい はそれらの混合物の一つから選択される。

このような有機溶液は好ましくはα−トコフェノールのような好酸化剤がふくま れる。

得られた脂質粉末を適当な水溶性媒体、たとえばＰａ５ｖＩ衝液、グルコース溶 液またはＮａｃｌ溶液に拡散させる。このようにして、脂質粉末が相対的に少な い（すなわち液相の約９０％以上９０％、の間）か、もしくは多い（すなわち液 相の約９０％以上）かによって、わずかに水和した脂質ラメラ相またはリポソー ムが得られるが、このことはすでにＥＰ−Ｂｌ−００８７９９３に開示されてい る。

本発明の好適な実施態では脂質相成分の微粒子化方法が用いられ、この微粒子化 は水溶性媒体において拡散のあとに続き、その後必要に応じて加圧下でのホモゲ ナイゼーシ■ン（均質化）をおこなった。この点についてはＥＰ−Ｂｌ−００８ ７９９３およびＦＲ−Ａ−２５３４４８７またはＥＰ−Ｂｌ−１０７５５９に開 示された方法を参照せよ。

本発明の好適な実施態様によれば、エフジステロイドまたはその誘導体、あるい はそれを含む植物または動物抽出物は、脂質相に取り込裏れる。よりて微粒子化 （ａｔｏ＋５ｉｚａｔｌｏｎ　）前に、エフジステロイドまたはその誘導体、あ るいはそれを含む抽出物を脂質相成分とともに、大豆レシチンのような両親媒性 脂質のすくなくとも一つと必要に応じてコレステロールまたはβ−シストステロ ールのような脂溶性かっ疎水性化合物とを含む有機溶液に溶解する。溶媒は好ま しくは、ジクロロメタン、クロロホルムまたはメタノール、またはそれらの混合 物のひとつから選択される。

有機溶液に、好ましくはα−トコフェノールのような抗酸化剤を加えるとよい。

得られた脂質粉末をてきとうな水溶性媒体、たとえばＰＢＳ緩衝液、グルコース 溶液またはＮａｅｆ溶液に拡散させる。

既に挙げられた特許（ＥＰ−Ｂｌ−００８７８９３）に開示されたような液相の ９０％以上に相対的に多（拡散させるか、あるいは約５０％から約９０％までに 相対的に少な（拡散させるかどうかのどちらかに依存したリポソーム溶液または 、わずかに水和した脂質ラメラ相を得る方法が得られる。

本発明の好適な実施態様によれば、特にリポソーム組成物の場合であるが、必要 に応じて得られた組成物をホモゲナイズした後に、水和脂質ラメラ相またはリポ ソーム組成物をゲルとともに混合してゲル化させる。ここで用いられるゲルはと ニルポリマー、特に商標カルボポール”　９４０　（Ｃａｒｂｏｐｏｌ”　９４ ０　）で市販されているゲルが好ましい。また、このゲル化方法はＥＰ−Ｂｌ− ００８７９９３、特にその実施例のところに開示されている。

エフジステロイドまたはその誘導体、好ましくはエクジステロンまたはその誘導 体は、単離された形で、または入手可能な天然のソースから、または化学合成に よって得られた抽出物の形で得られる。エフジステロイドの主要な天然のソース は昆虫でまた特に多数の植物から得ることができる。まだい（っかの化学合成方 法も開発された。

か゛の エフジステロイド、特にαまたはβ−エクジソンは、昆虫に極わずかしか含まれ ていない。例えば、蛾Ｂｏｍｂｙｘ■ｏｒｌには、体重あたり５．１０−”％し か含まれていない。

（Ａ、Ｂｕｔｅｎａｎｄｔｅｔ　ａｌ、、ｚ、　Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ、Ｂ、 　、　９３８９　（１９５４）＃照）。

よって、昆虫からエフジステロイドの抽出は産業化が困難であった。

しかしながら、ハンガーおよびリフタの特許文献、（Ｈｕｎｇｅｒ−Ｒｌｃｃｌ 　特許　ＣＨ−Ａ−４７８５６５）では、幼虫もしくはｃｈｒｙｓａｌｉｄｓか らエクジステロンを抽出し、化粧品用組成物の合成方法について開示されている 。

か５の エフジステロイド含有量は、特にエクジステロンは、種により大きく異なる。例 えばΔ−立−九−Ｌ−Ｌ」Ｌ」と」二ｈｅｓ−ａｓ　ｅｒａの種子に含まれるエ クジステロンの濃度は０．０２５　％、　Ｓｅｓｕｖｌｕｍ　ｏｒｔｕｌａｃａ ｓｔｒｕｍでは０．３５％、植物全体を使うか根を使うかによって異なるがＣａ 　ｏｔｌｓ　５ｒａｃｈｎｏｉｄＬ上では１．２〜２，９％である。ここで示さ れたパーセント表示は、重量にもとづく。

エフジステロイド、特にエクジステロンの抽出に適した植物は、育種が容易な５ ｅｒｒａｔｕｌａ　ｓｏｇｄｌａｎａ、Ｒｈａｐｏｒ＋ｔｌｃｕｍ　ｉｎｔｅｇ ｒｉｆｏｌｌｕｍ　（Ｈｏｒｒｊｃｕｌｔｕｒａｌ　Ａｂｓ。

Ｒａｓ口ｔｅｌ’　ｎｙｅ　Ｒｅ５ｕｒｓｙＯＣＯ５１−０１５４６、（１９８ ０）１６巻、　ＮＧ２１９３〜１９１１　ページ（ロシア）ｉｌ照）である。ま た、以下の植物からの抽出も可能である。

−５ａｒｒａｔｕｌａ　ｔｌｎｅｔｏｒｉａ　（ＨＵＴ−０２９３９０）　；− ５ｅｒｒａｔｕｌａ　Ｉｎｅｒ＋＊ｌ５（Ｓυ−１１４６０５０）　ニーＡｃｈ ｙｒａｎｔｈｅｓ　ｆａｕｒｌｅｌ、　ａｍｍｒａｎｔｈａｅｅａ（ＰＲ−１５ ２５３８５’）−Ｃｙａｔｈｕｌａ　（ＰＲ−１５２５３８５）　；−＾ｊａｇ ａ　ｄａｅｕｍｂｅｎｓ　（ＪＰ−４６−０１４６６５）；−Ｐｆａｆｆｌａ　 １ｒｅｓ１ｎｏｌｄａｓ（Ｄｅｒｖｅｎｔ　８ｇＧ−０４５８０６またはＪＰ− ６３００２９２８）； −Ｐｌａｆｆｌｉ　ｐｉｎｌｅｕｌａｔａ（Ｄｅｒｖｅｎｔ　８４−０５２４２ ３またはＪＰ−５９−０１０８００）； −ＰｏｌｙｐｏｄＩｕｍ　ｙｕｌｇａｒｅ　（Ｊ、ＪＩＺＢＡ　ｅｔ　ａｌ、Ｔ ａｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ、（１９６〕）、ペ　−　ジ　１ｌｉｌ１ ９．　ＵＳ　３　５２７　７フフ、Ｃ５１３１０６）； ＝　Ｋ１１ａｄｉｎａ　５ｅｅｄ　（ＤＥ−２２０１９９１）；−ｌｐｏｍｅｉ 　ｐｅｔａｌｏｌｄｅｉ　（ＤＥ−２８３４７０３）；−５目ａｎｅｗ（ＯＵＴ 　０２９３９０およびＳＵ　９２４０５１）；−ＣｙａｎｏＬｌｓ　ａｒｍｅｈ ｎｏｌｄａａ　（Ｃ１＾、　８９−１７６３５２および　ＭＩＥＮＳＣ［ＩＵＩ 　ＬＩＮ　ｅｌ　ｍｌ、＾ＣＴＡ　ＣＩＩＩＭＩＣＡ　５ＩＮＩＣ＾、１９７１ １．３６＠、ＮＯ３，ベージ１３？−１４１（中国語）エフジステロイドの原料 となる植物は、これらに限定されるものではない。

また、いくつかの抽出物は、エクジステロンに加えてアセチル化された誘導体も 含まれる。　（Ｃ，Ａ、８９−１７６３５２）。また、化学合成でエフジステロ イドを得ることも可能である。　（例えば、ＵＳ−Ａ−３３５４１５２、ＵＳ− ３３５４１５４，５ＵＳ−３３７８５４９、ＵＳ−３４５５９０５，ＦＲ−１４ ９４３７１；　ＵＳ−３４４０２４１；　ＦＲ−１５２４９２４；　ＵＳ−３３ ７８５４９、ＦＲ−Ａ−１４９８２３７参照）。

植物からのエフジステロイドの一般的な抽出方法は、ィマイらの文献（Ｐｈａｒ ｍ、Ｂｕｔ　１．　（１９６９）１７　（２）　３４０−２）に開示されている 。

新鮮な植物体を、その植物体の重量に対して５倍量のメタノールによって７セレ ーシ嘗ンし、ホモゲナイズおよびろ過処理する。この操作は（りかえしておこな う。

その後、抽出物を濃縮し、水を加えて３０％メタノール／水溶液にする。

この溶液をヘキサン抽出する。３０％メタノール分画を再び濃縮してエチルアセ テートで抽出する。水溶性分画をｎ−ブタノールで抽出する。ブタノール抽出産 物を蒸留濃縮し、クロロホルム−メタノール混合物を用いたシリカゲルクロマト グラフィイにかける。エタノール・無色の針状結晶体として得られる。

さらに、い（つかのエフジステロイドが商業的に入手可能である。例えば、エク ジステロン、５−ヒドロキシエクジステロ′ン、２−デオ牛シーエクジステロン 、エツジステロン−２２−アセテート、α−エクジンン、２−デオキシα−エク ジソンはシグマ（Ｓ　Ｉ　ＧＭＡ）から入手可能であり、そのカタログに記載さ れた番号はＳＩＧＭＡ　Ｈ５１４２、ＳＩＧＭＡ　Ｐ　９５３１、ＳＩＧＭＡ　 Ｄ　７７７５、ＳＩＧＭＡ　Ｈ５２６７、ＳＩＧＭＡ　Ｅ　９００４、ＳＩＧＭ Ａ　Ｄ　７９００くはエクジトテロン、あるいはその誘導体を、水和脂質ラメラ 相またはリポソームの少なくとも一部分の形で含む本発明にもとづく組成物は多 （の利用方法がある。

よりて、本発明の第２の特徴は、組成物は化粧、製剤学的、特に皮膚病理学的な もので、組成物は前に定義するような水和脂質ラメラ相もしくはリポソームの一 部分に、エフジステロイド、エフジステロイド誘導体、植物性もしくは動物性抽 出物に含まれる前記エフジステロイドもしくはエフジステロイド誘導体の少なく とも１つを含むを特徴とする。また、エフジステロイドの化粧または薬品として の用途は、特に抗老化製品、抗しわ製品、日焼は更生製品、髪の強壮剤、痩痕形 成剤は特に傷、炎症、静脈瘤性潰瘍もしくはやけど抗ストレッチマーク剤１１０ ｌ１０−５ｔｒｅｔｃｈ　ｓ　血管壁の抵抗力改善を目的とした薬剤に関係した ものである。さらに、薬品として、これらの物質は親水性脂質の低下また抗アテ ロース性動脈硬化症、および鎮痛作用がある。特にエフジストロン抗寄生虫ワク チン、特に抗住血吸虫症剤の合成および抗ウィル剤に使われる。

前記組成物に含まれるエフシステロイド、もしくは誘導体の濃度はｏ、ｏｏｉ〜 ５％の間、より好ましい濃度は組成物の全重量のｏ、ｏｏｓ〜１％以上である。

本発明の第３の特徴は、組成物が養蚕に関するものであり、その組成物は水和脂 質ラメラ相もしくはリポソームの少なくとも、一部分にエフジステロイド、また は工クジステロイド誘導体、あるいはそれらを含有する植物性もしくは動物性抽 出物を含むものである。

エフジステロイド、もしくはその誘導体に含まれる養蚕組成物の標準濃度は０． ０００１〜１％の間、好ましくは組成物の全重量のｏ、ｏｏｏｓ〜０．０１％の 間である。

養蚕におけるエクジステロンをもちいることは、カイ：ｌ　（Ｂｏｍｂ　ｘ　５ ｏｒｔによる絹糸産生の増加に応じた変態因子として知られている。ＰＲ−Ａ− ２２１２０９４、ＪＰ−４６−０１４６６５；　ＪＰ４Ｓ−０３７５５４を見よ ）。

よって、本発明にもとづ（組成物をカイコの幼虫にスプレーするか、カイコのエ サにまぜるこ七によって用いることができよう。

本発明の第４の特徴は、本発明はまた植物衛生（ｐｈｙｔｏｓａｎｉｔａｒｙ） 組成物に関するもので、エフジステロイドまたはエフジステロイド誘導体、ある いはそれらの一つを含む植物または動物抽出物の少なくとも一つを少なくとも部 分的にリポソームまたは水和脂質ラメラ相を基本とする本発明にもとづいた組成 物からなる。この場合に使用される組成物の濃度は、組成物全重量に対して、０ ．００１〜５％重量、このましくはｏ、　ｏｏｏｓ〜１％重量であ　る。

エクジソンが殺虫剤または抗線虫剤として、使用されることに関してはＭＬ−Ａ −６７１０５２９、ＪＰ　４７−００３５５０；　ＤＥ−２２０１；　ＦＲ−Ａ −１２３８：　Ｃ５−１１１１３６に記載されテイル。

これらの利用方法すべてにおいて、エフジステロイド、好ましくはエクジステロ ンの少なくとも１つが少なくとも部分的に水和脂質ラメラ相またはリポソームに 含まれることによって、その物質の活性が取り込まれていない場合に比べて顕著 に増加する。

このように、これは熟練技術者にも全く予想できない、決定的な技術の進歩であ る。以下、他の発明の特徴と新規性に関する目的は、発明の限定範囲をつけずに 簡単な図を入れたいくつかの実施例を用い明解に説明される。

とくに示されない限り、実施例において用いられるパーセントは重量％である。

日にもとづ　ｌ エクジステロン　１リポソームの ０．２５ｇの商業的に入手したエクジステロン、４．５ｇの大豆レシチン、およ び０．５ｇのβ−シストステロールをディクロロメタン−メタノール（４：　１ ）混合物に溶解する。

この溶液を４５℃に温められた回転フラスコの中で減圧工状！！（約２００−／ Ａｇ）で蒸発させる。そして、リビッド溶液１９９．７５ｇの中から０．２ｇ／ ｌのモノポタシウムリン酸（＋＋ｏｎｏｐｏＬａｓｓｌｕｉ　ｐｈｏｓｐｈａｔ ｅ）と１．４４ｇ／ｌのディソディウムリン酸（ｄｌｓｏｄｌｕｍ　ｐｈｏｓｐ ｈａｔ）とを含む溶液１９９．７５ｇに得られた脂質状のものを取り、この組成 物を１時間、撹拌した。

リポソームを宵する溶液は、超音波処理（１５分、１ｓａＷ、４℃）を使うこと により均質化される。この溶液に等量のカーボール（Ｃ１ｒｂｏｐｏｌ）　９４ ０　Ｒゲルを混ぜることにより、１．２５％のゲルを得ることができる。

リポソームに基づくゲル組成物２５０ｇには０．１％のエクジステロンが含まれ ている。

６に　とづ　２３ ＬＬ！ステロン２２−アセテユニ亙且Ｊ□ｌ：ｚ９９ステロンを　む　メラ　の ディクロロメタン（ｄｉｅｈｌｏｒｏ−ｍｅｔｈａｎｅ）　３００　中に以下の 混合物を溶解する： 大豆レシチン　３６．０ｇ α−トコフェロール　０．５ｇ β−シストステロール　４．０ｇ エクジストロン＊　０．３ｇ エクシステロン ２２−アセテ−）＊　０．２ｇ 得られた溶液を特許：　ＥＰ−Ｂｌ−０１７９９３にもとづく方法にしたがって 、５５℃でスプレーし、これにょ１て微粉末状の成分からなる混合物を作る。

このようにして得られた２０ｇの脂質粉末をローラーミル（ｒｏｌｌｅｒ　ｍ目 ｌ）の力をかりて、実施例１に記載したようにして、８０ｇの水溶液に拡散させ る。

これによって、約０．２４％のエフジステロイドを有し、わずかに水和した脂質 ラメラ相が得られる（実施例２）。

そしてさらに得た１５ｇ脂賀０粉末を前記と同様の水溶液に分散させ２時間撹拌 した。これによって非常に水和したラメラ相またはリポソーム水溶液を、例えば 特許ＥＰ−Ｂｌ−０１０７５５９に述べられたような加圧型ホモゲナイザーによ ってホモゲナイズすることによって得ることができる。均質化（ホモゲナイズ） された溶液（実施例３）に、平均直径１００　ｎｍのリポソームが含まれる。

エフジステロイドの含有量は水溶液のおよそ０．０４％賃量である。

日にもとづ　４ １こ　も　と　づ　く　の　ふ　に　る　皮ふ構造（ｃｕｔｃ＋＋ｅｏｕｓ　１ ｔｒａｅｔｕｒｅ）の再生に対する本発明組成物の活性は、′皮ふ切開に対する 傷跡（５ｃａｒ）形成能によって示す。

体重が約２５０ｇで無毛のラットを５０匹用意し、１０匹を１グループとして５ つのグループを作る。そして、そのうちの１グループを未処置の対照群とする。

ベトンパラビタールナトリウム麻酔下、それぞれのラットに、液体窒素て冷した 直径１３＋ｗのメタルプローブ（ｍｅｔａｌ　ｐｒｏｂａ）を１５秒間、肩甲骨 上の皮ふにあてて傷をつける。

そして、４つのグループのラットに５〜７日間、傷に５　の試料による処置をほ どこした。

１〜４グループは、それぞれ以下の試料Ａ〜Ｄによる処置をそれぞれほどこした 。

製品Ａ二　本発明の実施例１記載にもとづ（エフジストロンを０．１％含むリポ ソーム溶液、 製品Ｂ：０．６２５にカーボポール（Ｃ１ｒｂｏｐｏｌ）　９４０　Ｒゲルに含 まれる０、１％の浮遊遊離エクジステロン、 製品Ｃ：０．６２５％カーボポール　９４０Ｒゲル、製品Ｄ：　実施例１にもと づいて調製されたリポソーム懸濁液、エクジステロンを含んでいない動物の傷の 回復度合いを毎日、投与時にチェックし、比較する。

このかさぶた（　５ｃａｂ）の消失によって実験の終了と動物が犠牲となる時が 決まり、この動物の皮ふを取りのぞいて処置された部分の組織化学的研究がなさ れる。

試験される製品（試料）によって処置が開始されてから、かさぶたがきえるまで の経過日数を記録する。それぞれの平均値をステ講−テフトを検定によって比較 する。

その結果を第１表に示す。

第１表 これらの結果から、エクジステロン含有リポソーム（製品人）は、傷をつけた後 の皮ふ再生に対して、他の製品と比較して顕著な、あるいはたいへん顕著な高活 性を示した。

特に、このすぐれた効果は同濃度のエクジステロンを含むカーボポールゲル＜ｇ Ｊ品Ｂ）と比較してたいへん顕著であった。

さらに、きず踵部域の組織化学的研究による、製品Ａまたは製品Ｂによって処理 された動物に関する結果を第■表に示した。

第■表 かさぶた’　ｅｌｅａｔｒｌｚａｔｌｏｎに　づ　の スコア表示ニ ー：　強いかさぶた形成反応 十：　中間の　β ◆＋：　弱い 十＋＋：　正常構造 かさぶた形成反応（ｃ１ｃｍｔｒｌｚａ口ｏｎ　ｒｅａｃ口ｏｎ）は、破壊され た基底層を有する鯨細胞症の表皮、皮ふ・表皮結合部分の水腫、真皮における多 くの線維弁の存在によって特徴づけられる。

よって、傷をつけた後の皮ふ再構築は、かさぶた形成反応を弱める。ここでまた あきらかなことは、製品Ａ（本発明にもとづ（組成物）は、製品Ｂ（遊離エクジ ステロン）に比べて再構築活性が高いことである。

裏１」１旦 １こ　づ　ふ　・　ゲル 実施例１にもとづ（組成物をゲル状の皮ふ病学的組成物として用いることができ る。

このゲルを特にやけど、きりきず、またはひびゎれにもちいる。この場合、約８ 〜１５日間、このましくは１日に２回使用する。また、外科的および形成外科き ずのかさぶた形成を促進させるのにも用いることができる。

Ｌ１五五 にもとづ　日ｆけ　口 ２％のカルボポール９４０５ゲルと５ｏ−ｓｏ　＜重量比）で混合した後、実施 例３にもとづいたゲル組成物を太陽弾力線維症（ｇｏｌａｒ　ｅｌａｓｔｏｓｉ ｓ）および化学的変化を及ぼす光線による老化（ａｃｔ＋ｎｌｅ　ａｇｅｉｎｇ ）保存可能な化粧品用組成物として用いることができる。

裏」１匹ニー Ｕにもとづ　・　を六　クリーム このクリームの組成は以下のとおりである。

大豆レシチン　１．９５ｇ β−シトステロール　０．０５ｇ ５ｇエフジステロイド　０．２ｇ （以下のものからなる： エクジステロン”　０．１２ｇ エクジステロンー２２−アセテート＋０．０８ｇエマルジ震ンのためのエクシビ エント オイルインウォター、＋　ｑｓｐ　１００ｇ保護剤十参料 ＊商業 一方、実施例３にもとづくリポソーム懸濁液と、スクアレン（ｓｑｕ＋＋Ｉａｎ ｅ）にもとづいたオイルーインーウォターエマルジ謬ンとをそれぞれ別々に調製 した。

そしてエマルジー７５に対してリポソーム懸濁液が１となるようにして混合し、 例えばラセン状か（はん器を用いて中ぐらいの速度でか（はんする。

このようにして得られたクリームを毎日、顔につけることによって皮ふが回復し 、そして若さと輝きが保たれる。

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Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．水和脂質ラメラ相またはリポソームにもとづく組成物であって、前記水和脂 質ラメラ相または前記リポソーム内に、少なくとも部分的に、エクジステロイド と、エクジステロイド誘導体と、前記エクジステロイドまたは前記エクジステロ イド誘導体を含む植物または動物抽出物とからなる群から選択される少なくとも 一つの成分を含有することを特徴とする。
2. ２．請求の範囲第１項にもとづく組成物であって、前記エクジステロイドはエク ジステロン、またはエクジステロン誘導体、特に後者のアシル化、ヒドロキシル 化またはデオキシ誘導体であることを特徴とする。
3. ３．請求の範囲第１項または第２項にもとづく組成物であって、前記エクジステ ロイドは、β−エクジソン−２−アセテート、β−エクジソン−３−アセテート 、β−エクジソン−２，３−ジアセテート、β−エクジソン−２，３、２２−ト リアセテート、β−エクジソン−２，３，２２，２５−テトラアセテ−ト、５− ヒドロキシエクジステロンおよび２−デオキシエクジステロンから選択きれるエ クジステロン誘導体であることを特徴とする。
4. ４．請求の範囲第１項にもとづく組成物であって、前記エクジステロイドは§− エクジソンまたは後者の誘導体、特にアセテートであることを特徴とする。
5. ５．請求の範囲第１項ないし第４項のいずれか一項にもとづく組成物であって、 エクジステロイド、好ましくはエクジステロンを含む前記抽出物は、ポリポジゥ ムヴルガール、アジュガデキュベンスまたはシアノチスアラクノイデアの抽出物 であることを特徴とする。
6. ６．　請求の範囲第１項ないし第５のいずれか一項にもとづく組成物であって、 前記エクジステロイドまたは後者の誘導体またはそれを含有する植物または動物 抽出物は、すくなくとも部分的に、水和脂質ラメラ相またはリポソームの脂質相 に取り込まれることを特徴とする。
7. ７．請求の範囲集６項にもとづく組成物であって、エクジステロイドの濃度は脂 質相の重量に対して０．００１〜３０％、好ましくは０．０１〜１０％の範囲内 であることを特徴とする。
8. ８．水和脂質ラメラ相またはリポソームにもとづく化粧用または薬剤学的、特に 皮ふ病学的組成物は、請求の範囲第１項ないし第７項のいずれか一項にもとづく 水和脂質ラメラ相またはリポソームにもとづく組成物を含むことを特徴とする。
9. ９．請求の範囲第８項にもとづく組成物であって、エクグステロイドの濃度は、 前記組成物の全重量に対して０．００１〜５％、このましくは０．０５％〜１％ の範囲内であることを特徴とする。
10. １０．養蚕のための組成物であって、前記組成物は請求の範囲第１項ないし第６ 項のいづれか一項記載にもとづく水和脂質ラメラ相またはリポソームにもとづく 組成物を含み、このましくはエクジステロイドの濃度は前記組成物の全重量に対 して０．０００１〜１％、このましくは０．０００５〜０．０１％の範囲内であ ることを特徴とする。
11. １１．植物衛生組成物であって、養蚕のための組成物であって、前記組成物は請 求の範囲第１項ないし第６項のいづれか一項記載にもとづく水和脂質ラメラ相ま たはリポソームにもとづく組成物を含み、このましくはエクジステロイドの濃度 は前記組成物の全重量に対して０．０００１〜５％、このましくは０．０００５ 〜１％の範囲内であることを特徴とする。
12. １２．キズ跡形成組成物または抗シワ組成物のような皮ふ構造再成のための化粧 用組成物であって、前記組成物は請求の範囲第１項ないし第７項のいずれか一項 にもとづく水和脂質ラメラ相またはリポソーム、あるいは請求の範囲第８項また は第９項に定義されたような組成物を含むことを特徴とする。