JPH04501651A - 細胞ブロック収集方法と装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 細胞ブロック収集方′法と装置 本発明は主として動物細胞、組織などを流動体より分離しかかる粒子を顕微鏡検 査に用いるのに適せる状態で収集するための方法ならびに装置に係わるものであ る。

本発明は特にいわゆる「微細針に吸出し生検吸出し物」又はその他少量の解剖学 的生検の処理に有用であるがその他粒子物質をその浮遊液から分離収集する用途 にも利用される。本発明の装置は米国特許第２８，１６５号、４．０３４，８８ ４号、４，２２０．２５２号ならびに４．４２１，２４６号に記載せるタイプの いわゆる「カセット」である。

発明の背景及び要約 一般に、動物細胞の顕微鏡検査の場合、先ず比較的大量の液ときわめて少数の細 胞とよりなる体液のサンプルが採取される。細胞の検査を容易ならしめるため細 胞を体液より除きこれを濃縮状態で収集する必要がある。

一般に、細胞は普通の試験管のようなガラス又はプラスチック製の容器内に細胞 含有液を入れ、次いでその容器を遠心分離機の受け部に配置し、この分離機の回 転により容器の外端又は底部に細胞を移動させることにより液からの分離が行わ れる。次に液は容器を傾けて上澄みを流し去り、濃縮細胞と若干量の液を容器底 部に残す。

次に、寒天などの少量の粘液物質を容器内に入れ、細胞及び粘液物質の混合物を 再び遠心分離機にかける。この第２回目の遠心分離工程により底面に濃縮細胞を 伴った上記物質の「ボタン」が形成される。次に、このボタンは容器から除かれ 余分の物質は入念にトリミングを施される。トリミングされたボタンはパラフィ ンブロック内に取付けられ、顕微鏡スライド上に取付けるのに適した細胞の厚さ に薄く切られる。

容器よりのボタンの除去は微妙な作業である。通常木製のアプリケータにより行 われ、きわめてしばしばボタンが破れる。ボタン又はその際残ったものは、主要 面に溝又は孔を設けた矩形状の上下両部品よりなる「カセット」と呼ばれる包囲 体内におかれる。次いで、トリミングを施したボタンを含有したカセットが適宜 溶液に浸されパラフィンブロック内に取付けるためのトリミングされたボタンに 対する用意を整える。

上述の先行技術による方法には若干の顕著な欠点が伴っている。その中で一つの 欠点とする所は、液の下方レベル内に細胞が依然浮遊中にこの液の上澄みを静か に流す必要がある点であり、これにより若干の細胞が失われる可能性が伴ったり 、若しくは細胞の濃縮度の均一性が傾瀉中低減することになる。もう１つの欠点 は遠心分離を二度行う必要がある点にある。更にもう１つの欠点は細胞をボタン の底部上に有し細胞を含有する部分をボタンの破壊の危険なしに除去する手段が 設けられていない点にある。

本発明は、液容器の底部近くの固定位置に全体的におくことができかつ容器から の除去を容易ならしめる上方突起を設けた下方カセット部分を使用することによ り上述の欠点を解決するものである。このカセット下方部分は粘液物質のボタン を受けるような形状になっている。

ボタンをその空胴部に入れた状態の下方カセット部が先ず容器底部内に嵌め込ま れ、次に体液が容器内へ注入される。遠心分離工程生細胞はボタンの頂面に粘着 し、そのため細胞を乱さずに液を容易に注出させることができる。ボタンと粘着 細胞を保持する下方カセット部分を次いで分離した突起により除去する。次に、 上方カセット部分が下方カセット部に取付けられ、浸透などの通常の工程がこれ に続いて行われる。

このように、本発明の利点は主として上述の先行技術による装置及び方法におけ る欠点の全面的解決にある。

その他の利点ならびに長所については、本発明の下記好適実施例の説明及び添付 図面より当業者には自明の事柄第１図は遠心分離機の一部を示し、 第２図は第１図の底部の線２−２による断面図、第３図は細胞ブロックの形成に 用いるカセットの下方部分の平面図、 第４図は第３図の装置の断面図、 第５図は液容器の断面図で、第３図及び第４図の装置がこの装置の頂面上に粘液 性物質を伴った状態で液容器内に配置されており、 第６図は遠心分離工程後における第５図の一部を示す断面図、 第７図はカセットの上方部分を示す平面図、第８図は第７図の側面図、 第９図は第６図に示す下方カセット部の側面図で、このカセット部は第７図及び 第８図の上方カセット部に被覆されかつこれに取付けられており、 第１０図は粘着細胞層をもつ粘液ボタンを含有する組立カセットの断面図、 第１１図は第５図と同様なるも本発明の更に別の例を示す断面図である。

好適実施例の説明 第１図において、遠心分離機の一部が図示されており、この分離機には図示省略 の回転駆動軸に嵌合するようになったハブ１が含まれている。このハブ１にベー ス３が接続されており、ベースには若干本数の外方に向けられたアーム５が設け られており、アームの外端にはそれぞれ２つの平行間隔部分７が形成されている 。この部分７は液容器１３を保持するための受け具１１を支持する枢着ピン９を 保持するよう構成されている。遠心分離機がハブ１の軸線を中心として回転した 時第１図の頂部の点線に示したように受け具１１が水平位置に向は上方に揺動し 液容器１３内の液は液容器の外端又は底部１５（策２図参照）に向かって働く遠 心力を受ける。本発明の方法は図示一般型式のすべての標準型遠心分離機に利用 でき、本発明の装置はさまざまな形状の受け具１１及び液容器１３に適合するよ う構成できるも、受は具１１に対しては最も簡単な構造は円筒形の形状で金属製 のもので、液容器には円筒形本体及び丸みのある底部１５を備えた標準のガラス 又はプラスチック製の「試験」管のものである。

本発明の装置又はカセットが第３図から第９図に示される。装置には、液容器１ ３の底部１５の形状に合致する皿状の形態に示された下方部分１７が設けられる 。然しなから、この下方部分１７はかんでんその他粘液分泌物のボタンを受ける のに適した上方に（遠心分離中は内方に）開口する空胴部を形成する限り底部１ ５の形状に合致する必要は必ずしもないのである。第１１図に示す如く、部分１ ７は平らな底壁を有し管１３の下方内壁に具合良く嵌まり込むような寸法のほぼ 円筒形の形状に形成することができる。

第３図及び第４図に示すように、下方部分には上面２１から下面２３に延びる複 数個の細溝孔１９が形成されている。細溝孔を示しているが液の通過を許容する 任意の様式の開口で十分であり、従って下方部分１７は単に孔を設けたもので良 く、この開口の形状は重要ではない。

下方部分１７のリム上の都合の良い個所に上方に突出する耳状部２５が設けられ 部分１７の取扱いを容易ならしめている。耳状部２５は取外しできるのが好まし く、図示例のカセット構造の場合取外し可能のものでなければならぬ。図面にお いて、耳状部２５に刻み目２６が示されそこで部分１７のリムに合体し耳状部の 折り取りを容易ならしめる。

本発明のカセットの上方部分２７が平面図でほぼ矩形状に第７図に示されている 。上面２９から下面３１にかけ下方部分１７の溝堀とほぼ同じ領域にわたり延び る細溝１９が形成されている。この上方部分２７の領域は対応する下方部分１７ の領域のように単に孔を設けたもので良い。上方部分２７の下面３１から下方に 突出するよう突起３３が内側に曲がり形状づけられバイアスがかけられ第９図及 び第１０図に示すように突起で２個の部品を一体に保持して下方部分１７の上方 に上方部分２７を滑らせることを可能ならしめる。上方部分２９は必ずしも短形 である必要はなく、図示の如き全体形状に形成することによりラベル貼付のため の表面が得られる。

上方及び下方のカセット部２７及び１７は連室プラスチック材又は樹脂材より型 成形するのが好ましいけれど、第１１図の実施例の場合、材料は遠心分離工程中 における下方カセット部分１７の崩壊を防止するのに充分な強度を具えねばなら ない。

図示例のカセットを用いて本発明の方法を実施する場合、かんでんその他粘液分 泌材のボタン３５を下方部分１７の上面２１におき、これを第５図と第１１図に 示すように液容器１３の底部１５におく。次に、採集すべき微粒子（動物細胞、 組織、その他）を含有する液を液容器１１内におき、液容器を第２図に示すよう に遠心分離機１１に入れる。液体を遠心分離にかけ浮遊粒子を第６図、第１０図 及び第１１図に示すように層状３７の粘液分泌ボタン３５の上面（遠心分離工程 中）に移動せしめこれに粘着させる。容器１３を遠心分離機から取り外し、液を 取り去り、耳状部２５を上方に引張って下方部分１７を容器１３の外へ持ち上げ 、ボタン３５及び層３７との接触を避ける。次に、耳状部２５が下方部分１７よ り除かれ、上方部分２７が下方部分１７上に滑らせ突起３３で２個の部品を一体 に組立て保持する。被覆されたボタン３５及び層３７を伴った組立カセットが次 いで普通に処理を受ける。第１１図の実施例において、下方部分１７の外部壁内 に溝を設は上方部分２９の突起３３を受けるのが好ましい。下方部分が第１１図 の如く平らな底部をした円筒形の形状のものである時は、第９図及び第１０図の 構造における如くカセットは傾斜しないのでカセットの積み重ねが容易となる。

補正書の翻訳文提出書　（特許法側８４条のＫｍ）

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. １．処理可能な状態における動物細胞などの粒子の収集方法にして、液容器内に 有孔性部材をおき、該部材の内面に隣接して寒天などの粘液性の物質をおき、容 器内の粘液性物質の内部に微粒子を含む液をおき、粘液性物質の方向に力を加え それにより液より粘液性物質の表面上に粒子を収集する処理可能な状態における 動物細胞などの粒子の収集方法。
2. ２．有孔性部材を受け具から粒子をかく乱せずに除去する段階を有する請求の範 囲第１項による方法。
3. ３．粘液性物質を第２の有孔性部材で被覆しカセットを形成する段階を有する請 求の範囲第２項による方法。
4. ４．動物細胞などの粒子を収集するための装置にして、液を遠心分離機にかける ための装置の液容器の内面の底部に固定できるような形状を有する多孔性部材を 有し、前記内面の部分が遠心分離中遠心分離機の軸線から遠く離れており、前記 部材は寒天などの粘液性物質の層を支持することができる動物細胞などの粒子を 収集するための装置。
5. ５．液容器からの部材の除去を容易ならしめるための除去装置を有する請求の範 囲第４項による装置。
6. ６．第１部材に結合され粘液性物質を包装することのできる第２の有孔性部材を 有する請求の範囲第５項による装置。
7. ７．部材が丸く第２部材は矩形状である請求の範囲第６項による装置。
8. ８．丸い部材は皿形状のものである請求の範囲第７項による装置。
9. ９．丸い部材は円筒形の側壁と平らな底壁を有する請求の範囲第７項による装置 。
10. １０．細胞ブロック類を保持するためのカセットにして、それぞれ有孔性壁部分 を設けた上方部分及び下方部分を有し、下方部分は該部分が遠心分離機液容器の 底部近くの固定位置に配置できるよう形状が付与され、２つの部分が互いに取付 けられた時上方部分に対向するよう構成された空胴部を有し、更に、上方部分の 有孔性壁部分を下方部分の空胴部とは反対においた状態で上方部分を下方部分に 取付けるための装置を有する細胞ブロック類を保持するためのカセット。
11. １１．下方部分が平面図で丸い請求の範囲第１０項によるカセット。
12. １２．上方部分が平面図で矩形状である請求の範囲第１１項によるカセット。
13. １３．遠心分離機液容器から配置済みの下方部分の除去を容易ならしめる装置を 有する請求の範囲第１０項によるカセット。
14. １４．前記装置は下方部分に対する上方部分の取付け前に下方部分から取外し可 能である請求の範囲第１１項によるカセット。