JPH04502901A - シーピーエフペプチド組成物およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 シービーエフ　ペプチド組成物およびその用途本発明はペプチドの用途とペプチ ドを含む組成物に関する。

特に、本発明はシービーエフ　ペプチドおよび類似体およびそれの誘導体として 知られるペプチドの薬学的使用と組成物を目的としている。

本発明に用いられるシービーエフ　ペプチドは文献に記載され、次の配列からな る： 上記はアミノ酸用単字コードで表示される。

シービーエフ　ペプチドの評論は、Ｒｉｃｈｔｅｒ　Ｋ、Ｅｇｇｅｒ、Ｒ，。

およびＫｒｅｉ１ｆ１９８６１Ｊ、Ｂｉｏｌ、ＣｈｅＩＩ＋２６１．３６７６− ３６８０；Ｗａｋａｂａｙａｓｈｉ。

Ｔ、　、　Ｋａｔｏ、　Ｈ，およびＴａｃｈｉｂａｂａ、Ｓ、　（１９８５１Ｎ ｕｃｌｅｉｃ　Ａｃ１ｄｓ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ１３、１８１？−１８２８；Ｇｉ ｂｓｏｎ、Ｂ、Ｗ、、Ｐｏｕｌｔｅｒ、Ｌ、、Ｗｉｌｌｅａｍｓ、Ｄ、Ｈ，、お よびＭａｇｇｉｏ、　Ｊ、　Ｅ、　（１９８６１Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ　 ２６１．５３４１−５３４９゜見出すことができる。

既発付報告にはこれらペプチドに帰する作用はない。事実、クレール他は最近紙 に「これらペプチドは生物学的活性を有するかどうかは現在知られていない」と 述べている。

（Ｖｌａｓａｋ、　Ｒ，、Ｗｉｂｏｒｇ、　Ｏ，、Ｒｉｃｈｔｅｒ、　Ｋ、　、 　Ｂｕｒｇｓｃｈｗａｉｇｅｒ、　Ｊ、　Ｖ、　、およびＫｒｅｉｌ、Ｇ、　、 　（１９８７１Ｅｕｒ、Ｊ、Ｂｉｃｈｅｍ、　１６９．　ｐ、　５３１　。

本発明の一面としてシービーエフ　ペプチドおよび／または生物学的活性類似体 またはそれの誘導体および薬物担体からなる組成物がある。

本発明の他の面としてシービーエフ　ペプチドおよび／または生物学的活性類似 体またはそれの誘導体が標的細胞の成長を抑制するため投与される方法がある。

類似体および／または誘導体の用語はシービーエフ　ペプチドより多いか少いア ミノ酸を有し、シービーエフ　ペプチドのアミノ酸において一つまたはそれ以上 の変化を有するペプチドを含む。

シービーエフ　ペプチドは類似体と誘導体と共に時として集合的にシービーエフ 　ペプチドと称せられる。

シービーエフ　ペプチドは好ましくは次の塩基性ペプチド構造Ｘを含みニ ーＲ，−Ｒ，−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ，−Ｒ３−Ｒ１−−Ｒ１−Ｒ＋−Ｒｓ−Ｒ ＋−Ｒ＋−Ｒ４−Ｒｓ−ＲＩＲｌは疎水性アミノ酸であり、Ｒ，は疎水性アミノ 酸または塩基性親水性アミノ酸、Ｒ８は塩基性親水性アミノ酸、Ｒ４は疎水性ま たは中性親水性アミノ酸、Ｒ５は塩基性または中性親水性アミノ酸である。

前記塩基性構造は爾後Ｘとして符号で表わされる。

疎水性アミノ酸はＡｌａ、Ｃｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、 Ｖａｌ、ＴｒｐおよびＴｙｒである。

中性親水性アミノ酸はＡ８ｎ、Ｇｌｎ、ＳｅｒおよびＴｈｒである。

塩基性親水性アミノ酸はＬｙｓ、　ＡｒｇおよびＨｉｓである。

シービーエフ　ペプチドは前記記載のアミノ酸のみ含むか。

アミノおよび／またはカルボキシル端またはアミノとカルボキシル双方における 追加のアミノ酸を含む。概して、ペプチドは４０アミノ酸以上は含まない。

前記塩基構造を含むシービーエフ　ペプチドは好ましくはアミノ端において１− ４追加アミノ酸を有するものとする。従って、このペプチドは構造式 ％式％ Ｘは前記記載の塩基性ペプチド構造であり、Ｙはであって％Ｒ＋　、Ｒｓ　、Ｒ ｓは既に述べである。

塩基性ペプチド構造のカルボシキル端はまた１−１３にわたる追加アミノ酸を有 してもよい。

好ましい実施例として、塩基性構造はカルボキシル端において１−７追加アミノ 酸を有し、それが次の如く表わされる：Ｘ−Ｚ Ｘは前記に述べられた塩基性ペプチド構造であり、２はであって、Ｒ１，Ｒ４は 既に述べられておりＲＢはプロリンまたは疎水性アミノ酸である。

好ましきペプチドは次の構造式で表わされる：（Ｙｌ　ａ−Ｘ　−（Ｚ）　ｂ Ｘ、Ｙおよび２は既に述べられており、ａは０または１であって、ｂは０または １である。

本発明に用いられるペプチドのごときシーピーエフの代表例として次の（墨字ア ミノ酸コード）ごとく表わされるペプチドを記載してよい： Ｇ１２Ｓ３ＬＧ４ＡＬＫＡ５ＬＫＩＧ６７８ＬＧＧ９　ｆｌｏｌ　ＱＱ８＝Ａ、 Ｍ、Ｆ、Ｌ ９＝Ａ、Ｓ、Ｔ １０＝Ｐ、Ｌ　である。

数字のアミノ酸は塩基性シーピーエフ　ペプチド構造または類似体またはそれの 誘導体いづれにも組合せても使用できる。

シービーエフ　ペプチドおよび／または類似体および／またはそれの誘導体はイ オン　チャネル形成ペプチドである。ペプチドまたはイオン透過単体を形成する イオン　チャネルは中性または合成脂質膜にイオンの浸透性を増大するものであ る。

Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ　ｅｔ　ａｌ、ＰＮＡｓ　Ｖｏｌ、８５　Ｐ、５０７２ −７６（１９ｇ８７月）はペプチドがイオン　チャネル特性を有するかどうか従 ってイオン透過単体であるかどうかを示す方法論を述べている。ここに使用され るイオン　チャネル形成ペプチドはＣｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ他の方法により決定 されるイオン　チャネル形成特性を有するペプチドである。

一般に、シービーエフ　ペプチドおよび／または類似体またはそれの誘導体は中 性ｐｕの少なくとも２０ｍｇ／ｍｌ濃度に水溶である。このペプチドは更に非溶 血性即ち必要濃度における血球を破壊しない。このペプチド構造はペプチド分子 の屈曲性を備えている。ペプチドを水に入れると両親媒性構造を帯びなくなる。

ペプチドが油状面または膜に接するとペプチド鎖は折りたたんで棒状構造となる 。

シービーエフ　ペプチドおよび／またはその誘導体は、抗生物質、抗ウイルス薬 剤、抗菌性物質、抗腫瘍−薬剤、抗精子薬剤として、ならびにその他の生物学的 活性機能を発揮するものとして使用することができる。

この明細書中で使用する「抗菌性」という用語の意味は、ポリペプチドが、細菌 、かび類、ウィルスその他の微生物の増殖を禁止、防止、あるいは破壊すること を意味する。

また「抗生物質」の意味は、この発明において使用されるペプチドが、通常の細 胞、組織または器官の生物学的機能とは異なり、生体系がこれらのポリペプチド に接触する際に、この生体系を死滅または破壊する効果、あるいは生体系の成長 あるいは増殖を防止する効果を生じることである。

また「抗精子性」という用語は、この発明において使用されるポリペプチドが、 精子の移動性を禁止、防止または破壊するという意味に使用する。

さらに「抗ウイルス性」という用言吾は、この発明において使用されるポリペプ チドが、ウィルスの増殖を禁止、防止または破壊する意味に使用する。

Ｆ抗１１１４性ｊという用語は、この発明のポリペプチドが、細菌、かび、原生 動物類その他の複数種の微生物に対して、広範囲の潜在的対抗性を備える。また これらのポリペプチドにより、ポリペプチドに対して鋭敏な微生物によって生起 される微生物性感染を処理あるいは制御する方法が実現される。この処理は微生 物感染を受けやすいホスト器官あるいは組織に、ポリペプチドの少なくとも１種 の抗菌性量を投与することによって可能となる。

これらのポリペプチドが抗性にすぐれているために、細菌性汚染に敏感な物質の 防腐剤あるいは殺菌剤としても有用である。

さらにこの発明のペプチドを、フィラー、無毒緩衝液あるいは生理的食塩水など の無毒性薬剤担体またはベヒクルと結合あるいは置換させることができる。この ような薬剤組成物は、生体の局所あるいは全身的使用において、液体、固体、半 固体、注射溶液、錠剤、軟膏、洗浄液、ペースト、カプセルその他適宜な形態で 使用することができる。これらのポリペプチドの全身用では、補助剤、プロテア ーゼ抑制剤あるいは適切な薬剤との組合せの形で使用することができ、このよう な組合せは、原生動物、ウィルスその他の有害微生物に起因する感染症を制御す るために必要かつ有益であることが認められる。

この発明のペプチドは、特に動物に対して、抗性、抗腫瘍性、抗ウイルス性、抗 菌性あるいは抗精手性の少なくともその一作用を生起させるために必要な量にお いて、ホストの生物体に投与することができる。

用途によっては、この発明の組成物には、抗菌性、抗ウイルス性、抗腫瘍性、抗 生物質性を備える前記ペプチドの１種または数種が、その抗菌性、抗ウイルス性 、抗腫瘍性および抗生物質性の各々を発揮する有効量の一部またはすべてに相当 する量だけ含有されているものとする。

局所用薬剤として使用する場合は、ペプチドは少なくとも重量でＯ，１％含まれ ているものとする０通常ペプチドが１．０％を超える必要はない。

全身投与（静脈、皮下、腹腔）の場合は、活性ペプチドの量は、血清レベルに達 する量、すなわち少なくとも約５μｇ／ｍｌが使用されるが、一般にペプチドの 血清レベルは５００μｇ／ｍｌを超える必要はない、好適な血清レベルは約１０ ０μｇ／ｍｌである。この血清レベルは、全身投与すべき組成物中に約１０ｍｇ ／ｋｇのペプチドが混入されれば達成できる。

一般に一種または多種のペプチドの一回投与量は、ｌｏｏｍｇ／ｋｇを超える必 要はない。

本発明は次の例により述べられる。がその発明の範囲はそれにより限定されるも のでない。

表ＩはペプチドＧＦＧＳＦＬＧＬＡＬＫＡＡＬＫＩＧＡＮＡＬＧＧＡＰ（１（ｌ 　シービーエフおよびペプチドＧＦＡＳＦＬＧＫＡＬＫＡＡＬＫＩＧＡＮＬＬＧ ＧＴＰＱＱ　シービー工フの杭軸菌性を示す。

表■は数種の最近およびかびに対するシービーエフ（Ｉ）およびシービーエフ（ ＩＩ）の最小数抑制濃度を示す。

表■は数種の相異なる種類の原生動物を物理的に崩壊させるに必要なシービーエ フ（Ｉ）およびシービーエフ（ＩＩ）の最小数必要濃度を表示する。各件共ペプ チドは滲透膨化を誘導する。

（解説）細胞は１０％胎児子件血清でＭＥＭにおいて培養された。ペプチドは細 胞の融合性ローンを含むウェルに直接付加され、３７℃で３０分間培養された。

細胞の９０％以上をトリパンブルーに浸透して亡失さした濃度が分る。

本発明の数多の変化は前記教示に照らして可能であり、添付請求項範囲内であれ ば発明は特に記載された以外にも実施できる。

Claims (17)

【特許請求の範囲】
1. （１）シーピーエフペプチドまたは生物学的活性類似体またはそれの誘導体およ び薬物担体である少なくとも１個のペプチドからなる組成物。
2. （２）ペプチドが次の塩基性構造Ｘを含み：−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ２−Ｒ１− Ｒ１−Ｒ２−Ｒ１−−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ５−Ｒ１Ｒ１は 疎水性アミノ酸であり、Ｒ２は塩基性親水性アミノ酸または疎水性アミノ酸、Ｒ ３は塩基性親水性アミノ酸、Ｒ４は疎水性または中性親水性アミノ酸、Ｒ５は塩 基性または中性親水性アミノ酸である請求項１記載の組成物。
3. （３）ペプチドが次の構造を含み： Ｙ−Ｘ− Ｘは請求項２の塩基性ペプチド構造であり、ＹはＲ５−；Ｒ２−Ｒ５−；Ｒ１− Ｒ５−またはＲ２−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ５である請求項２記載の組成物。
4. （４）ペプチドが次の塩基性構造を含み：−Ｘ−Ｚ− Ｘは請求項２の塩基性ペプチド構造であり、ＺはＲ１；Ｒ１−Ｒ１；Ｒ１−Ｒ１ −Ｒ４；Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４；Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６； Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６−Ｇｌｎ；またはＲ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６ −Ｇｌｎ−Ｇｌｎ，であって、Ｒ６はプロリンまたは疎水性アミノ酸である請求 項２記載の組成物。
5. （５）ペプチドが次の塩基性構造を含み：（Ｙ）ａ−Ｘ−（Ｚ）ｂ ＹおよびＺは既に請求項３および４に記載され、ａまたは０または１であり、ｂ は０または１である請求項１記載の組成物。
6. （６）シーピーエフペプチドまたは生物学的活性類似体またはそれの誘導体が標 的細胞の成長を抑制するに必要な量使用される請求項１記載の組成物。
7. （７）ペプチドが次の構造を有し、： Ｇ１２Ｓ３ＬＧ４ＡＬＫＡ５ＬＫＩＧ６７８ＬＧＧ（１０）ＱＱ１＝Ｆ，Ｌ ２＝Ｇ，Ａ ３＝Ｆ，Ｌ ４＝Ｋ，Ｌ ５＝Ａ，Ｇ，Ｔ ６＝Ａ，Ｔ ７＝Ｈ，Ｎ ８＝Ａ，Ｍ，Ｆ，Ｌ ９＝Ａ，Ｓ，Ｔ １０＝Ｐ，Ｌ である請求項１記載の組成物。
8. （８）少なくとも１個のシーピーエフペプチドまたは類似体またはそれの誘導体 を標的細胞の成長を抑制するに必要な量投与することからなる標的細胞の成長を 抑制する方法。
9. （９）投与が動物宿主に必要抗腫瘍量である請求項８記載の方法。
10. （１０）投与が動物宿主に必要抗ウィルス性量である請求項８記載の方法。
11. （１１）投与が動物宿主に必要抗菌性量である請求項８記載の方法。
12. （１２）投与が動物宿主に必要抗生物質量である請求項８記載の方法。
13. （１３）投与が動物宿主に必要抗精子性量である請求項８記載の方法。
14. （１４）ペプチドが次の塩基性構造Ｘを含み：−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ２−Ｒ１ −Ｒ１−Ｒ３−Ｒ１−−Ｒ１−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ５−Ｒ２Ｒ１は疎水 性アミノ酸であり、Ｒ２は塩基性親水性アミノ酸または疎水性アミノ酸、Ｒ３は 塩基性親水性アミノ酸、Ｒ４は疎水性または中性親水性アミノ酸、Ｒ５は塩基性 または中性親水性アミノ酸である請求項８記載の方法。
15. （１５）ペプチドが次の構造を含み： Ｙ−Ｘ− Ｘは請求項１４の塩基性ペプチド構造であり、ＹはＲ６−；Ｒ３−Ｒ５−；Ｒ１ −Ｒ２−Ｒ５−またはＲ２−Ｒ１−Ｒ２−Ｒ５である請求項１４記載の方法。
16. （１６）ペプチドが次の塩基性構造を含み：−Ｘ−Ｚ− Ｘは請求項１４の塩基性ペプチド構造でありＺはＲ１；Ｒ１−Ｒ３；Ｒ１−Ｒ１ −Ｒ４；Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４；Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６； Ｒ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６−Ｇｌｎ；またはＲ１−Ｒ１−Ｒ４−Ｒ４−Ｒ６ −Ｇｌｎ−Ｇｌｎ，であってＲ６はプロリンまたは疎水性アミノ酸である請求項 １４記載の方法。
17. （１７）ペプチドが次の塩基性構造を含み：（Ｙ）ａ−Ｘ−（Ｚ）ｂ ＹおよびＺは既に記載されａは０または１でありｂは０または１である請求項８ 記載の方法。