JPH04502961A - 二重吸収被分析物検出 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 二菫吸収被分析物検出 発明の背景 本発明は、例えばイムノアッセイを用いて被分析物を検出する器具及び方法に関 するものである。

試料中の被分析物は、被分析物に対する標識された免疫学的結合相手及び標識を 検出しうるようにする試薬のような種々の試薬で試料を処理することによって検 出することができる。しばしば、試料は種々の試薬による処理の間に洗浄しなけ ればならない。

正確なアッセイは、試料に対してＩＩＮされる反応物質の量及び反応を行う時間 の制御に依存することが多い。様々な熟練度及び経験の者がアッセイキットを用 いることができるようにこれらの変数を制御して、個々の技術の差が実質的に結 果を変化させることがないようにすることが望ましい。発色指示薬を評価しなけ ればならない場合、特に背景色が発生する場合には、−貫性及び正確性が困難で ある可能性がある。試験試薬を試験して、時間の経過により低下する可能性のあ るこれらの活性を確認しなければならない。また、アッセイを行うのに必要な時 間を減少させることが望ましい。被分析物の濃度が比較的低い極めて少ない容量 の試料を試験する、及び／又は、被分析物濃度における比較的小さな差を検出す る能力を有していることが望ましい。最後に、複雑な遠心分離装置を用いること なく全血試料を試験することが望ましい。

イムノアッセイにおいて試薬を加えかつ洗浄する一つの方法は、吸収材料を用い て、液状の洗浄剤及び試薬を、固体基質（例えば膜）を通して他の反応物質が固 定化されている部分へ移動させるものである。

Ｃｏ１ｅらの米国特許第４，２４６．３３９号においては、試験容器２０の底部 の微孔性膜２２を通して液体を吸引するための吸着材料１８を有するイムノアッ セイ試験具が開示されている。吸着材料は膜から離れて弾力をもって傾けられて おり、これら両方に共に力が加えられて傾きを克服した場合のみに膜を通して液 体を吸引する。吸着材料１８は、疎水性の表面層３６及び湿潤性のバルク部分３ ８を育している。試薬は連続的に試験壁に加えられ、各試薬が容器内に所定時間 滞留した後に、膜及び吸着材料に共に力が加えられて、次の試薬が加えられる前 に液体を吸引除去する。

トムの米国特許第４，３６６．２４１号は、２つの水分を吸収しゃすいゾーン（ ｂｉｂｕｌｏｕｓ　ｚｏｎｅ）　、第一のゾーン（免疫学的吸収ゾーン（ｉ＋ｎ ｍｕｎｏａｂｓｏｒｂｉｎｇ　ｚｏｎｅ＞＞はその中に非拡散的に固定された分 析のための結合相手（ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐａｒｔｎｅｒ）を有し、第二のゾーン は受容ゾーンにある層で、直接または間接に第一のゾーンから液体を受容する関 係にあり、第一のゾーンを通過し出て来た液体を受け取る第二の層、を有する免 疫学的検定装置を開示する。前記免疫学的吸収ゾーンは、防護被覆中の孔によっ て暴露された水平な試験片の一部である。

ホーシンの米国特許第４．６２３．４６１号は、周囲のゾーンにより囲まれた反 応ゾーンを有する水平な吸収材料に試料を供給するフィルターを有する試験装置 を開示する。吸収材料の環状リング４０は、周囲のゾーンを取り囲んで位置し、 液体は半径方向に流れ、反応ゾーンから出て行き、周囲のゾーンを通り、吸収材 料へと流れ込む。

バグシャインの米国特許第３．８８８．６２９号は一種の結合相手で予備処理で きるマトリックスパッド（ｍａｔｒｉｘ　ｐａｄ）　１７を有する検定装置を開 示する。

吸収材料２３はマトリックスパッドを通る濾過の速度を増大させるため、マトリ ックスパッド１７と直接に接触させられる。

近藤の米国特許第４，２７０，９２０号は、ひとつの水平な支持の上に設けられ た複数の反応物層を開示する。多孔質の分散層（ｓｐｒｅａｄｉｎｇ　１ａｙｅ ｒ：ＩＬ　（図１の４０、または図３の４１および４４）は、サンプルを反応物 層中に移動するように分散させ、比較的少量のサンプルも反応物層全体に均一に 分散される。

ローレンスの米国特許第４．３６５，９７０号、オークスマンの米国特許第４゜ ５７８．３５８号、ブリューワーの米国特許第４，４８６，５４０号、およびグ アンダーノの米国特許第４．５４１．９８７号は、試験パッドまたはスライドに 陽性および陰性のコントロールスポットを有する試験装置を開示する。

出願人、アグリテックシステムズ株式会社は、陽性および陰性のコントロールス ポットを有する免疫学的検定装置を販売してきている。スポットの分離は反応物 を互いに十分に離してスポットすることにより保たれる。

数々の会社（例えば、シンテックス　アクレーベル、およびハイブリテラクズア イコン）が、固体支持体として膜を使用した、必要物をすべて備えた免疫学的検 定装置を販売してきている。Ｔｅ１ｓｓ　ａｎｄ　Ｂｌａｎｋｓｔｅｉｎ、Ａｍ ｅｒｉｃａｎ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　ＰｒｏｄｕｃμＨＲｅｖｉｅｗ、　Ｍａｙ／ Ｊｕｎｅ（１９８７）　参照。反応試薬が保持されたラテックス粒子が凝集作用 の検定（ａｇｇｕｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ　ａｓｓａｙｓ）においては使用されて いる、Ｂｒａｎｇｓ、　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔ ｓ　Ｒｅｖｉｅｗ、　Ｍａｙ／Ｊｕｎｅ　（１９８７）。

本発明の１つの態様は、一般的には水透過性、水不溶性反応域に液体−移動可能 に接触されたコントロール吸収体を持つ試験器具を特徴とするものであって、サ ンプル中の被分析物を少なくとも１つの液体試薬で処理する場合に形成される検 出可能な反応生成物を保持するのに適している。このコントロール吸収体は予め 定めた、限定された、標準の、液体吸収容量を持ち、サンプルが反応域を通過し た後、サンプルからの液体の予め定められた量を吸収するのに適している。その 予め定められ、限定された、標準の量は、存在する試薬容量及び濃度、反応生成 物の検出方法、及び識別が望ましい被分析物の濃度を考慮に入れることにより、 被分析物をの信頼ある検出が可能になるように選択される。コントロール吸収体 及び反応域を形成する手段は、試験器具中に次のように配置される。すなわち、 容積中にコントロール吸収体を充填することにより、液体サンプルを受けるよう に露出されている第一の反応域とこの第一の反応域とは離れているコントロール 吸収体と液体移動可能な関係にある第二の域との間に、予め定められ、限定され た流れを効率的に計量するような、配置である。

本発明の他の態様は、一般的に次のような物からなる器具に特徴がある。　すな わち、吸収体溜め、コントロール吸収体又は反応域と液体移動可能に接続される 位置から離されている第一の位置に吸収体溜めを保持する手段、及びこの第一の 位置から吸収体溜めがコントロール吸収体及び／又は反応域と液体移動可能に接 続される第二の位置に、吸収体溜めを移動するための手段、からなる。

この２つの態様は、単一の器具に結合することができる。それによって、コント ロール吸収体は、吸収体溜めが第一の位置にある間に、予め定められた量のサン プルを反応域中に吸い込み、次いで、吸収体溜めを第二の位置に移動し、さらに 、反応域を形成する手段を少な（とも１つの液体試薬を接触させ、この試薬を反 応域を通じて吸収体溜めに吸い込むことができる。

本発明の好ましい実施態様は以下の特徴を含む。第一位置には、吸着体リザーバ ーが反応域上部に保持され、第一位置から、静止し、反応域上部に接する移動溶 液中に留まる第二位置に移動する。溶液試薬の大部分は、リザーバーがさらに移 動する事なく、反応域上部を通って吸着体リザーバーに引きあげられる。掛けが ねの手段（ｌａｔｃｈ　ｍｅａｎｓ）は、吸着体リザーバーが第二位置に固定さ れている間、吸着体リザーバーが第二位置から第一位置へ動くことを制止するた めに用いられる。この器具は、検出産物が形成された後、掛けがねを外す手段を 含み、反応産物が検出されている間、吸着体リザーバーは、第一位置に戻る。検 出産物を形成するために反応に加わるす（なくとも１つの反応物は、反応域に含 まれ；例えば、被分析物に対する特異的結合物は反応域に含有でき、被分析物を そこに留める。

反応域は被分析物にとって不浸透性のものである。反応域は平坦な部材上に仕切 られ、反応域の２つの領域はその部材の反対面にある。反応産物は産物の特徴に より、例えば色素強度、光学密度、反射密度、ｐＨ，蛍光または伝導度などで検 出できる。例えば、反応域を規定している手段の外観で検出できる。上記反応域 の周りの対比域は、特徴的検出に関して反応域を対比させることにより、検出を 補助する。強度の尺度には、試料被分析物の定量的検出を補助することが含まれ る。反応域はテストヘッドに含まれ、吸着体リザーバーは、そのテストヘッドに 関して同心に位置し、テストヘッドに関して折り重なった吸着体リザーバーの移 動を可能にする。テストヘッドには、少なくとも１つの制御領域および少なくと も１つの反応域を、各々の制御領域および各々の反応域を分離させる分離体とと もに含む。また、テストヘッドは、溶液が反応域に到達できる少なくとも１つの 開口部、および溶液が制御域に到達できる少なくとも１つの第２開口部を有する 水不浸透性の面板からなる。この試験器具は、試薬包装サイズでほとんどの試薬 が反応域に供給されるように形成されている。検出できる反応産物をを検出する ために、この器具には、クロモフォアからの着色基質を形成するために加える選 択された展開物も含む。

第三に、本発明は、分析物（ａｎａ　］　ｙ　ｔ　ｅ）を少なくとも１種の液体 試薬と反応させて検出可能な反応生成物を形成することを特徴とする試料中の分 析物の検出方法である。試料を反応ゾーン（ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｚｏｎｅ）と接 触させ、それにより、前以て決定した一定の試料容量を、反応ゾーンを規定する 手段を通って流れるようにさせる。

好ましくは次のように行うのが良い。すなわち、吸収剤の容器（ａｂｓｏｒｂｅ ｎｔ　ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）を第１の位置に保ちながら、試料を反応ゾーンと接 触させ、それによって前以て決定した一定の試料容量を流して反応ゾーンを規定 する手段を通過させる。その後、吸収剤の容器を移動してコントロール吸収剤（ ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｂｓｏｒｂｅｎｔ）と接触させる。吸収剤の容器とコントロ ール吸収剤との接触を維持しながら、反応ゾーンを液体試薬の少なくとも１種と 接触させると、試薬が反応ゾーンを通って吸収剤の容器に流れ込む。

吸収剤の容器を第２の位置に維持している間に、反応ゾーンをこの反応ゾーンを 通って吸収剤の容器に流れ込むことのできる１種又はそれ以上の追加試薬と接触 させることが可能である。反応ゾーンで分析物を反応物と反応させるために、試 料を吸収した後かつ吸収剤の容器を第２の位置に移動する前に、あらかじめ定め た時間をみておく。検出可能な生成物が形成された後は、反応生成物の検出を可 能にするため吸収剤の容器を第１の位置に戻してよく、一方、吸収剤の容器は第 １の位置、すなわち、吸収剤の容器によってもたらされる反応ゾーンへの継続的 な流入がない位置にある。吸収剤の容器は、望ましい反応を制御するために選択 された、あらかじめ定めた長さの時間第１の位置に維持することができ、その結 果、反応ゾーンと接触させた試料の容量及びその接触継続時間の双方が制御され る。この装置のテストヘッド（ｔｅｓｔ　ｈｅａｄ）は一端にあり、試料および 液体試薬（１種若しくは複数種）に浸漬するために下方に置く。それから、検出 可能な生成物が形成された後に、当該生成物を検出する間この装置の上下を逆に してテストヘッドを上方に置く。

本発明には、極微体積のサンプルを用いて容易に行うことができる、極めて迅速 なアッセイが含まれる。かかる本発明のアッセイによれば、増強したバックグラ ウンド対照物と信頼しつる標品とともに、信頼度の高い試験結果を読み取ること ができる。試験器具は、組み立てや使用中に誤差を生じないようにしながら、簡 単に組み立てることができる。本発明のアッセイ全体を通して見ると、コストは 一般にかなり少なくてすむ。反応ゾーンが最小なのでゾーンの外に流れがロスす ることが無く、このため使用する試薬は最小量ですむ。また、必要な工程の数も 少なくなるため、オペレーターがミスする機会も少なくなる。さらに、試薬を混 合して測定したりしないですむうえ、試験中に有効に働く内部標品を用いるため に試験結果の信頼性が高くなっている。

本発明のその他の特徴や利点は、本発明の好ましい実施態様を記述した以下の記 載、図面および特許請求の範囲から明白であろう。

図１は、イムノアッセイ用キットを示す図である。

図２は、図１のディツプスティックの分解図である。

図２ａは、図２のディツプスティックのキャップと円筒部を示す図である。ただ し、ディツプスティックの一部は描かれていない。

図３は、図２のディツプスティックを組み立てた状態を示す図である。ただし、 一部外壁を取り去っである。

図４は、図１の４−４に沿って切った図２のディツプスティックの断面図である 。ただし、解り易くするために一部省略しである。

図５は、図２ａの５−５に沿って切った図２のディツプスティックの断面図であ る。ただし、解り易くするために一部省略しである。

図６は、図４の６−６に沿って切った断面図である。

図７ＡおよびＢは、それぞれ図２のディツプスティックの２つの操作状態を示す 図である。

図８は、図１のキットを用いて行うアッセイの５つの工程を、極めておおざっば に示した図である。

図９は、図８のアッセイの結果を判断するポイントを示した図である。

構造 第１図において、免疫アッセイキット１０は、ディツプスティック（浸漬棒）１ ２および試薬用トレー１４を含み、該トレーは透明な蓋１６を有する。トレー１ ４中には下記に詳述する４つのウェル１８ａ−１８ｄが存在する。トレー１４は またディツプスティック１２を受ける長いスロット１５およびサンプルを受け入 れる円形サンプルウェル１９も含んでいる。

第２図−第６図において、ディツプスティック１２は、テストヘッド２０．バレ ル（胴部）２４およびキャップ４０を含む。テストヘッド２０（第６図に最もよ く示されている）はサンプルウェル１９およびウェル１８ａ−１８ｄ中に浸漬で きる大きさである。テストヘッド２０はその面２２に三つの液体−受容開口を有 する。円形開口２１ａおよび２１ｂは、後述するように、それぞれ陽性および陰 性コントロール用の開口である。開口２３は分析物（アナライト）検出用の開口 である。陽性コントロール開口２１ａの向かいには試験結果を読み取る時のテス トヘッドの正確な位置を決めるために、インデックスノツチ（指示切り欠き部） ２５が存在する。

第２図−第５図において、ディツプスティックのバレル２４は軸方向に伸びる三 つのフィン（ひれ状部）３５を有し、これらはバレルの内周面に等間隔に配置さ れ且つバレルと一体的である。第４図および第５図に示すとおり、フィン３５は ディツプスティックの頭部領域まで伸びて、その部分で第２図および第５図に詳 細に示す様に放射状フィン２６の形で終わっている。フィン２６は主（もしくは コントロール）吸収体３０の三つの放射状凹部２８内に嵌まる形で配置されてお り、そして各々組立の間にデプスマトリックス３２を貫くように設計された鋭い エツジ２７の形で終わっている。

円筒形の吸収体貯蔵部３８はバレル２４の中に存在し、以下に詳細に説明される 。軸状のリブ３５が吸収体貯蔵部の中心に存在する。バレル２４は、その外周か ら外側に張り出した位置決めブロック（インデキシングブロック）５２も含む。

デプスマトリックス３２は、後述するように微粒子を吸収することができるグラ スファイバー製の膜（例えばＧｅｌｍａｎ　Ａ／Ｅ：Ｐａ１ｌ　０−１０）であ ってよい。

コントロール吸収体３０は親水性のポリエチレン物質であり、そのなかに鋳造さ れたスロット２８を持っている。各々のテストにおいて、所望の最適サンプル量 を決定し、そしてコントロール吸収体の深さおよび多孔度を適当に選択する。

反応ゾーンを２１ｉ遇して動くサンプルに望まれる典型的量は４００μ】より少 なく、確実に１ｍｌより少ない（最も好ましくは１５０−２００μｌよりも少な い）。

１００−１５０μＪの量に対する適当なコントロール吸収体は、直径０．４１０ インチおよび厚さ０．１００インチの多孔性ポリエチレン（平均孔径４０μ）で ある。そのような材料は、米国ＧＡのＦａｉｒｂｕｒｎのＰｏｒｅｘ　Ｔｅｃｈ ｎｏｌｏｇｙまたは米国、ニューヨーク州プルツクリンのＣｈｒｏｍｅｘ　Ｉｎ Ｃ１から入手可能である。

吸収体貯蔵部３８は３．５ないし４．５デニールの延伸酢酸セルロース繊維から なる。繊維は、浸透速度を高めて全アッセイ時間を減少させるために、バレル軸 と平行に（液体の移動方向に沿って）配置させてよい。繊維はトリアクテン（ｔ ｒｉａｃｔｅｎ）のような可塑剤で処理してかたくし、流れを改善する。吸収体 貯蔵部は、液体の全量が反応ゾーンを通過して移動するために余裕を持つ大きさ であることが必要で、例えば少なくとも約５ｍｌ必要である。

キャップ４０は複数の交差メンバー４６および、吸収体貯蔵部３８を第４図に示 す状態にきつく保持するためのオフセットリブ４３を含んでいる（第５図）。

キャップ４０の内部の位置決め用空間（ｉｎｄｅｘｉｎｇ　ｖｏｉｄ）５０は、 バレル２４の外部の位置決めブｏ−７り（ｉｎｄｅｘｉｎｇ　ｂｌｏｃｋ）５２ と適合する。リッジ４７はキャップ４０の内周の周囲に広がっており、バレル２ ４の外周の周状リッジ４４および５４と適合している。

組立 ディツプスティック（ｄ　ｉｐＳ　ｔ　ｉ　ｃｋ）の固体部は射出成型されたポ リプロピレン等の適当なプラスチックである。そのバレルとテストヘッドは別個 の部品として成型する。溜め３８は交差部材（ｃｒｏｓｓ　ｍｅｍｂｅｒｓ）４ ６とリブ４３との間に挟まれ、そのため溜めはコントロール吸収体３０からは離 れて保持される。キャップ４０をバレル２４の端部にキャップの割出しボイド（ ｉ　ｎｄｅｘｉｎｇ　ｖｏｉｄ）５０を割出しブロック５２の上に位置させて押 しかぶせる。うね４７をうね４４越しに噛ませるが、うね５４越しには噛ませな い。このため吸収体の溜め３８は、第７図の位置Ａに示されるように、コントロ ール吸収体３０から離れて保持される。

組み立て後、微小マイクロ粒子（ｍｉｃｒｏｐａｒｔ　１ｃｌｅｓ）をテストヘ ッドの開口部を通して検定領域にスポットする。具体的にいうと、抗−被分析物 抗体を持つラテックスのマイクロ粒子は分析物の検出用開口部を通して深さマト リックス（ｄｅｐｔｈ　ｍａｔｒｉｘ）の上にスポットすることができる。クロ マゲン（ｃｈｒｏｍａｇｅｎ）ラベル（例えば酵素）を含有するラテックス粒子 を陽コントロール２１ａを通してスポットする。試料又は試剤に対して非反応性 の粒子を陰コントロール２１ｂを通してスポットする。ラテックスの微小粒子は ポリスチレンから製造することができる。蛋白質をその粒子に公知の方法で固定 化する。例えば、パンゲス（Ｂａｎｇｓ）著、均一なラテックス粒子（Ｕｎｉｆ ｏｒｍ　Ｌａｔｅｘ　Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）、セラゲン　ダイアグノスティック ス（Ｓｅｒａｇｅｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を参照されたい。この粒子を反 応帯域に滴下されるべき緩衝液に懸濁させる（例えば、問題になっている酵素に 適切な標準的生理食塩水緩衝液に０．　５〜１．０重量％加える）。

使用 使用者は、スロット１５に組みこんだディツプスティック１２とトレー１４をお おう蓋１６とを備えたキット１０を受けとる。蓋を取り除いた後、試料と検定の 正確な性質に依存する原案に従って、試料を竪穴１４に加える。　ディツプステ ィック１２をスロットから取り出す。この段階でキャップ４０を取りはずし、吸 収体貯槽３８をコントロール吸収体から一定の間隔だけ離す（第７図の位置Ａ） 。

テストヘッド２０を試料用竪穴１９に浸す（第８図の工程１）。反応域３２から 取り出される試料の量をコントロール吸収体３０によりめる。具体的には、コン トロール吸収体の多孔度と大きさは反応域へと吸引される試料容積を制御する。

コントロール吸収体３０の容量は制限されている、すなわち、コントロール吸収 体は竪穴１９内のすべての試料を吸収するわけではない。むしろ、吸収体３０が 最大限まで満たされると、反応域への試料の流れ（すなわち、反応域の流入面か ら流出面へ）は止まる。この方法で、コントロール吸収体３０の容量は反応域へ の（実験的に）予め定めた試料の流れの程度を計って、信頼できる検知を与える 。この流れは、反応域で得られる試薬の量、検知されるパラメーターの強度、ど の区別を望むかについての検体の水準、試料粘度および得られる試料容積に依存 する。

ディツプスティックが所望の試料容積を吸収すると（例えば１０秒）（第８図の 工程２）、テストヘッドを試料用竪穴から取り除く（第８図の工程３）。使用者 はキャップを内側に（テストヘッドの方向）に押す。隆起部４７は隆起部５４と 係合すると、かちりという音がきこえる。この位置で（第７図の位置Ｂ）、吸収 体貯槽３８をコントロール吸収体と接触させて（第８図の工程４）、液体を検定 域３２およびコントロール吸収体３０から貯槽３８へと吸い出す。

次いでディツプスティックを試薬用穴１８ａ〜１８ｄへと順次大れる（第８図の 工程５）。各穴は、摩擦によりディツプスティックを直立して保持できる大きさ のものである。検定域へ供給される各々の試薬の量の制御は次の二つの方法のど ちらかにより実施できる： （１）　各々の穴への浸漬時間を制御する：（２）　穴に入れる試薬の量を制限 しそして穴にある全量を吸収するのに十分な浸漬時間を確保する。

微小球はデプスマトリックスに捕捉されそして発色生成物は微小球に残存するの で、デプスマトリックス内で発色がおこる。

第９Ａ図に示すようにして結果を読みとる。

以下の実施例で酵素結合した免疫収着剤の試料検定を記述するが、本発明の範囲 を制限するものではない。

実施例 標準的な技術によりラテックス微粒子に結合させた抗ウイルス抗体を深いマトリ ックス３２の分析物検出部分の２３を通じてスポットする。酵素を含んだ同様な ラテックス微粒子を分析領域３２のポジティブコントロール部分２１ａを通じて スポットする。粒子をネガティブコントロール部分２１ａを通じてスポットする 。

試薬溝を以下のようにして満たす： １８ａ：　抗体−酵素結合（３０秒−２分）１８ｂ：　洗浄液（６０秒） １８Ｃ：　酵素基質（３０−６０秒） １８ｄ：　停止液−一酵素活性を停止させる、および／またはｐＨあるいはイオ ン強度を変化させるか、あるいは阻害剤の添加により基質を沈殿させるかのどち らかの溶液。

適当な系はよく知られたアルカリホスファターゼ系およびホースラディツシュペ ルオキシダーゼＨ２Ｏ２系を含む。

１８ａ−１８ｄのそれぞれの溝は、テストヘッドに詰められるとき試薬を放出す るスポンジ粒子５６ａ−５６ｄ内に吸収されたわずかに過度の該試薬を含む。

このようにして、船積みおよび貯蔵における蒸発による試薬の損失が避けられる 。

他の具体例 他の具体例は次の請求の範囲内にある。例えば、テストヘッド中ではバレルから の別々の小片でよい。制御吸収体及びデプスマトリックスは単一のエレメントと して製造できる。例えば、吸収性多孔質ポリエチレン支持体はセルロース物質を 用いて頂部表面に圧縮された孔を有するようにすることができる。

テストトレーは覆いを省略して収縮包装プラスチックフィルム中に包装できる。

テストトレーはウェルの配置を変えることによって変化できる。例えば、サンプ ルウェル１９はディブスチックスロット１．５の一端に移動でき、ウェル１８ａ −１８ｃｌはそれぞれのウェルの間に含まれる溝によって離れて位置して、滴下 する液体を含み、ウェルを汚染することを避ける。

免疫学的検定技術の範囲はこの特許出願に記載された比色技術、放射線及び蛍光 技術を含む装置によって行われる。その装置の大きさは検定容量に応じて調節で きる。プレフィルタ−を用いて、全血検体中の赤面細胞のような検定を妨げるサ ンプルの望ましくないエレメントを取り除くことができる。　テストヘッド中の 開口及び孔の数は増加できる。例えば、異なる開口中に異なるアナライト結合剤 をスポットすることにより、多くの検定を同じサンプルにおいて行える。

例えば、そのテストは自動読み取り装置によって読み取ることができる。外観検 査によることもできる。

ＦＩＧ、／ ＦＩＧ、　６ 浄書（内容に変更なし） ＦＩＧ、　７ａ　ＦＩＧ、　７ｂ 位ｆＡ　位置Ｂ 浄書（内容に変更なし） ＦＩＧ、８ 浄書（内容に変更なし） ＦＩＧ、９ 陰　陽 −一一一−＾−−−１轍　ＰＣτ／’ＪＳｌａ／Ｃ”ＯＺ９

Claims (31)

【特許請求の範囲】
1. １．液体試料中の被分析物を少なくとも一種の液体試薬で処理し検出可能な生成 物を形成することによる、前記按分析物を検出するための試験器具であって、ａ ）前記液体試料を受け取るために露出されている第一領域及び該第一領域から間 隔を置いて配置されている第二領域からなり、前記検出可能な反応生成物を保持 するようになっている、水透過性、水不溶性反応域を画定する手段；及び ｂ）前記反応域画定手段の第二領域と液体一移動関係にあり、所定の、制限され た、標準、液体吸収能を有するコントロール吸収体、からなり、該コントロール 吸収体及び反応域画定手段は、コントロール吸収体が、能力一杯に充満されるま では、前記第一及び第二領域の間で所定の制限された流量を有効に計量するよう に、前記器具中に配置されており、前記所定の、制限された、標準、容積を前記 按分析物の信頼できる検出を可能にするように選択する前記試験器具。
2. ２．ｃ）吸収体貯蔵部； ｄ）前記コントロール吸収体と接触し液体移動させる場所から離れている第一の 位置に吸収体貯蔵部を保持する手段；及びｅ）前記第一の位置から、前記コント ロール吸収体と接触し液体移動させる第二の位置に前記吸収体貯蔵部を移動させ る手段を更に含み、それにより、前記吸収体貯蔵部が前記第一の位置にある間に 、前記コントロール吸収体が前記反応域画定手段に吸収される試料容量を制御し 、その後、前記吸収体貯蔵部を前記第二の位置に移動させ、前記反応域画定手段 が前記吸収体貯蔵部に引かれる少なくとも一種の液体試薬と接触している、請求 項１記載の試験器具。
3. ３．ｃ）吸収体貯蔵部； ｄ）前記コントロール吸収体と接触し液体移動させる場所から離れ且つ上に配置 されている第一の位置に吸収体貯蔵部を保持する手段；及びｅ）前記第一の位置 から前記吸収体貯蔵部を移動させ、前記反応域と接触し液体移動させる第二の位 置に保持する手段を更に含む、請求項１記載の試験器具。
4. ４．液体試料中の被分析物を少なくとも一種の液体試薬で処理し検出可能な生成 物を形成することによる、前記被分析物を検出するための試験器具であって、ａ ）前記検出可能な反応生成物を保持するようになっている、水透過性、水不溶性 反応域を画定する手段； ｂ）吸収体貯蔵部； ｃ）前記反応域画定手段と接触し液体移動させる場所から離れ且つ上に配置され ている第一の位置に吸収体貯蔵部を保持する手段；及びｄ）前記第一の位置から 前記吸収体貯蔵部を移動させ、前記反応域画定手段と接触し液体移動させる第二 の位置に保持する手段；とからなり、それにより、前記吸収体貯蔵部が前記第一 の位置にある間に前記試料を前記反応域画定手段に導入し、前記吸収体貯蔵部を 前記第二の位置に移動させ、複数の前記液体試薬を別々に前記反応域画定手段に 接触させ、前記吸収体貯蔵部へ向けて上方に引く、前記試験器具。
5. ５．液体試料中の被分析物を少なくとも一種の液体試薬で処理し検出可能な生成 物を形成することによる、前記被分析物を検出するための試験器具であって、ａ ）前記検出可能な反応生成物を保持するようになっている、水透過性、水不溶性 反応域を画定する手段； ｂ）前記反応域画定手段の第二領域と液体移動関係にあり、所定の、制限された 、標準、液体吸収能を有するコントロール吸収体、であり、該コントロール吸収 体及び反応域画定手段は、コントロール吸収体が、能力一杯に充満されるまでは 、前記第一及び第二領域の間で所定の制限された流量を有効に計量するように、 前記器具中に配置されており、前記所定の、制限された、標準、容積を前記被分 析物の信頼できる検出を可能にするように選択し；ｃ）吸収体貯蔵部； ｄ）前記コントロール吸収体と接触し液体移動させる場所から離れ且つ上に配置 されている第一の位置に前記吸収体貯蔵部を保持する手段；ｅ）前記第一の位置 から前記吸収体貯蔵部を移動させ、前記反応域画定手段と接触し液体移動させる 第二の位置に保持する手段；及びｆ）前記第二の位置から第一の位置への前記吸 収体貯蔵部の移動を制限するラッチ手段とからなり、 それにより、前記吸収体貯蔵部が前記第一の位置にある間に前記試料を前記反応 域画定手段に導入し、前記吸収体貯蔵部を前記第二の位置に移動させ、複数の前 記液体試薬を別々に前記反応域画定手段に接触させ、前記吸収体貯蔵部へ向けて 上方に引く、前記試験器具。
6. ６．反応域を画定する該手段が、該検出可能な生成物を生成するための反応に関 与する少なくとも一の反応物から成る請求項１または４に記載の試験器具。
7. ７．反応域を画定する該手段が、該分析物を透過しないものである請求項１また は４に記載の器具。
8. ８．反応域を画定する該手段の該第一領域と該第二領域とが、平面部材表面の両 側に位置する請求項１または４に記載の試験器具。
9. ９．該反応生成物は目視で検出し、反応域を画定する該手段は外部から目視でき るものである請求項１または４に記載の試験器具。
10. １０．該反応生成物は、色強度、光学濃度、反射濃度、ｐＨ、蛍光および導電率 から成る群から選択される該反応域の特性を決定することによって検出する請求 項１または４に記載の試験器具。
11. １１．該反応域の特性に関して該反応域を対照することによって、該特性を決定 することを補助するために、該反応域を取り囲む対照領域を画定する手段からさ らに成る請求項１０に記載の試験器具。
12. １２．試料分析物の定量的な検出のための強度スケールからさらに成る請求項１ ０に記載の試験器具。
13. １３．反応域を画定する該手量はテストヘッド中にあり、該吸収体リサーバーは 該テストヘッド関して同心円状に配置され、該テストヘッドに関して該吸収体リ サーバーが入れ子式に動くことができるものである請求項２または４に記載の試 験器具。
14. １４．該吸収体リサーバーが、該第一位置から該第二位置へ動くことを制止する ための掛け金手段から成り、 該吸収体リサーバーが該第二位置にて掛け金がかけられている状態で、複数の該 液体試薬が該反応域に導入される請求項３または４に記載の試験器具。
15. １５．該検出可能な生成物が生成した後に該掛け金を解除するための手段から成 り、 反応生成物が検出されると該吸収体リサーバーが該第一位置に戻るものである請 求項１４に記載の試験器具。
16. １６．反応域を画定する該手段は、該コントロール吸収体を集積したものである 請求項１または４に記載の試験器具。
17. １７．反応域を画定する該手段は、該コントロール吸収体の面に備えられたもの である請求項１または４に記載の試験器具。
18. １８．反応域を画定する該手段は、少なくとも一の反応域および少なくとも一の コントロール領域を画定するものであり、それぞれのコントロール領域をそれぞ れの反応領域から孤立させるための手段から成る請求項１または４に記載の試験 器具。
19. １９．反応域を画定する該手段およびコントロール領域は、それぞれの反応域間 に液体を流通せしめるための少なくとも一の開口部、および、それぞれのコント ロール領域間に液体を流通せしめるための少なくとも一の開口部を有する水不透 過性の板から成る請求項１８に記載の試験器具。
20. ２０．該反応域に複数の試薬を供給するための試薬容器からさらに成る請求項１ または４に記載の試験器具。
21. ２１．反応域を画定する該手段が該分析物と特定の結合を形成するためのパート ナーから成る請求項１または４に記載の試験器具。
22. ２２．該液体試薬が、検出可能な反応生成物を発生させるための手段から成る請 求項１または４に記載の試験器具。
23. ２３．試料中の分析物を、少なくとも１つの液体試薬と反応させて検出可能な反 応生成物を形成することによって該分析物を検出する方法であって、下記からな る方法： ａ）反応帯域を限定する上記手段の上記第２領域と液体移行関係にあるコントロ ール吸収体であって、 該コントロール吸収体はあらかじめ決められた限定された標準の液体吸収能力を 有し、上記コントロール吸収体と反応帯域を限定する上記手段とは、上記装置に おいて、能力一杯にまで充填された該コントロール吸収体が上記第１領域と第２ 領域との間のあらかじめ決められた限定された流れを効果的に計量し、上記あら かじめ決められた、限定された、標準の容量を選択して上記分析物の信頼できる 検出を可能にするように位置している吸収体；ｂ）上記試料を、反応帯域を限定 する上記手段と接触させ、それによって上記あらかじめ決められた試料容量を、 反応帯域を限定する上記手段に流通させること； ｃ）上記検出可能な反応生成物を形成させること；そしてｄ）該反応生成物を検 出すること。
24. ２４．上記装置が、吸収体貯蔵器；該コントロール吸収体と接触している液体移 行部から離れている第１位置に該吸収体貯蔵器を保持する手段；および該吸収体 貯蔵器を上記第１位置から該コントロール吸収体と接触している液体移行部にあ る第２位置へと動かす手段からなる請求の範囲第２３項の方法であって、下記段 階からなる方法： ａ）該試料を、吸収体貯蔵器が第１位置にある間に反応帯域を限定する上記手段 と接触させ； ｂ）その後で、コントロール吸収体と接触している吸収体貯蔵器を動かし；そし て ｃ）吸収体貯蔵器が上記コントロール吸収体との接触を維持している間に、該反 応帯域を上記液体試薬の少なくとも１つと接触させて該試薬を該反応帯域を経て 上記吸収体貯蔵器へと通す。
25. ２５．さらに、上記吸収体貯蔵器を上記コントロール吸収体と接触させながら反 応帯域をもう１つの上記液体試薬に接触させることからなる請求の範囲第２４項 の方法。
26. ２６．上記液体試薬の１つがあらかじめ決められた量で供給され、該量の実質的 にすべてが上記反応帯域を流通するまで請求の範囲第２１項の段階ｃ）が遂行さ れる、請求の範囲第２４項の方法。
27. ２７．上記液体試薬の１つが過剰に供給され、請求の範囲第２１項の段階ｃ）が あらかじめ決められた時間行われる請求の範囲第２４項の方法。
28. ２８．反応帯域を限定する手段が少なくとも１つの反応体を内包し、更に、上記 分析物を上記反応体と反応させるために、請求の範囲第２１項の段階ａ）の後で あって請求の範囲第２１項の段階ｃ）の前にあらかじめ決められた時間を置くこ とからなる請求の範囲第２４項の方法。
29. ２９．上記検出可能な生成物が形成され、その後、吸収体貯蔵器は上記第１位置 に戻され、吸収体貯蔵器が第１位置に存在することによって反応帯域を通過する 連続した液体流が引き起こされることなく、該吸収体貯蔵器が第１位置にある間 に反応生成物の検出を可能にする請求の範囲第２４項の方法。
30. ３０．吸収体貯蔵器が所望の反応をコントロールするのに選択されたあらかじめ 決められた長さの時間第１位置に維持され、それによって反応帯域に接触された 試料の容量と、該試料と反応帯域の接触持続との両方がコントロールされる請求 の範囲第２４項の方法。
31. ３１．上記装置が、反応帯域を限定する手段からなるテストヘッドをその１端に 有する請求の範囲第２４項の方法であって、下記段階からなる方法：ａ）上記テ ストヘッドを下方に向いた該装置とともに上記試料中および上記液体試薬中に浸 し；そして ｂ）上記検出可能な反応生成物が形成された後、該装置を回転させて該生成物の 検出の間、上記テストヘッドをその頂点に位置させる。