JPH04506070A - エポスタンを用いるシチメンチョウにおける産卵の促進法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 エポスタンを用いるシチメンチ首つにおける産卵の促進性発明の分野 本発明はエポスタン（ｅｐｏｓｔａｎｅ）を用いるシチメンチ１つにおける産卵 の促進方法に関する。

情報の開示の陳述 エポスタンは、構造式： を有しくエノール形を表す）、かつ遮断（妊娠排除）剤としての利用性を有する （４α、５α、１７β）−４，５−二ポキシー３．１７−シヒドロキシー４．１ ７−シメチルアンドロストー２−工ン−２−カルボニトリルについての米国採用 名（Ｕｎｉｔｅｄ　５ｔａｔｅｓ　Ａｄｏｐｔｅｄ　Ｍａｎｅ）である［：１９ ８８　ＵＳＡＮおよびＵＳＰディクシ、ナソ、オブ。

ドラ・ノロ・ネイムズ（Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ　ｏｆ　Ｄｒｕｇ　Ｎａｍｅｓ） 、ｌ　９５１〜１９８７キ１−ミュラティブ・リスト（Ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ　 Ｌｉ５ｔ）］。

１９７９年７月３Ｂ発行のクリスチャンセン（Ｃｈｒｉｓｔ　１ａｎｓｅｎ）の 米国特許第４１６００２７号は、実施例１のパート（ｆ）の生成物、即ち、構造 式： ：３ を有する（これは、エポスタンのケト形を表す）４α、５β−エポキシ−１７β −ヒドロキシ−４，１７−シメチルー３−オキソアントロスタン−２α−カルボ ニトリルとしてのエポスタンを記載している。該特許はラットおよびサルにおけ るエポスタンの遮断的有用性を示す。

エポスタンは多数の哺乳動物種における多産性に対する効果について研究されて おり、該研究の公表された結果は、１９８９年３月には文献数が６６となった関 係書目を構成するが、どれも、いずれの鳥類種に関するものでもない。

関係書目がアブストラクトを含有する文献のうち３つは、排卵に関する。デ・プ オロ（Ｄａ　Ｐａｏｌｏ）（ジャーナル・オブ・エンドクリノロジー（Ｊ、Ｅｎ ｄｏｃｒｉｎｏｌ、）、　ｖａｔ、　１１８（１）、　５９〜６８頁、１９８８ ）およびシングーら（Ｓｙｎｄｅｒ　ｅｔ　ａ１Ｍプロシーディングズ・オプ・ ソサイエティ・）を−・エクスベリメンタル・バイオロジー・アンド・メディシ ン（Ｐｒｏｃ、Ｓｏｃ、Ｅｘｐ、Ｂｉｏｌ、１１ｅｄ、）、　ｖｏｌｌ　７６（ ３）、２３８〜２４２Ｌ　１９８４）は、エポスタンでのう・ノドにおける排卵 の抑制について示しており、ウシプ（ｆｅｂｂ）は（ジャーナル・オブ・リプロ タクシ１ンｅアンド・ファーティリティ（Ｊ、Ｒｅｐｒｏｄ、Ｆｅｒｔｉｌ、、 　ｖｏ１７９（１）、２３１〜２４０頁、１９８７）、エポスタンを用いての雌 羊における排卵速度の増加を示している。

鳥類橿におけるエポスタンの使用に関する出願人の知る限りの唯一の先行技術は 以下の通りである：（１）ニワトリにおける血漿プロゲステロンおよびエストラ ジオール濃度の用量関連増大を示す未発表の報告。該報告はスコツトランド、ミ ドロシアン（Ｍｉｄｌｏｔｈｉａｎ）のアプリカルチ１ラル・アンド・フード・ リサーチ・カランシル・ボウルトリイ・リサーチ・センター（Ａｇｒｉｃｕｌｔ ｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＣｏｕｎｃｉｌ　Ｐｏｕｌｔｒ ｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔａｒ）のビータ＋０ジエイ・シ＋　−プ（Ｐｅ ｔｅｒ　Ｊ、５ｈａｒｐ）から英国、ギルド７ｔ−ドＣＧｕｉｌｄｒｏｒｄ）に おけるスターリング・ウィンスロップ・グループ（Ｓｔｅｒｌｉｎｇ　ｌ１ｎｔ ｈｒｏｐＧｒｏｕｐ）　Ｌ　ｔ　ｄ　、のエイチ・ロイソン（Ｈルｏｉｓｏｎ） への１９８５年８月１９日付けの手紙の形態であり、その者を通じて該研究につ いてのエポスタンが供給されてきた；（ｉｉ）１９８６年１０月２３日付けの「 スターリング・ドラ・ノロ・インク・プレゼンテーシ１ン・トウ・フィナンシャ ル・コミニニテイ（ＳＴＥＲＬＩＮＧ　ＤＲＵＧ　ＩＮｃ、　ＰＲＥＳＥＮＴＡ Ｔ［０ＮＴｏ　ＦＩＩＩＡＮＣＩＡＬ　ＣＯＭＭＩＪＮＩＴＹＪなる題名の出版 物は、７９〜８０頁のエポスタンなる部分題名の部分において、「家禽における 産卵に対する内分泌［エポスタンの］影響もまた追及されている」および「この 後者が示すものはブロイラー産業において特に重要である」と第８０頁で述べて いる。最初の文は単に目標を述べているだけであり、種を特定していない。第２ の文は「特に重要な」種としてニワトリを特定しており、シチメンチ１つに言及 していない。従って、本発明は該出版物に記載されていないか、あるいは該出版 物から容易に案出されるものではない。さらには、以下に示すごとく、エポスタ ンはニワトリにおける産卵を促進するのに効果的でないことが判明した。

シチメンチ叢つ雌鳥の就巣性は、卵産出を停止しての攻撃的縄張巣保護および増 加する巣作り挙動によって特徴付けられる生理学的状態であり、それは、就巣雌 鳥を維持するのに必要なさらなる労働および施設の経費と共に、シチメンチック 産業での有意な経済的損失の結果となる。ここに記載し特許請求する発明はシチ メンチョウ産業における問題点の産卵的側面に対する解決についての要求を満た すものである。

発明の概要 本発明は、シチメンチョウ雌鳥の産卵周期の間に産卵される卵の数を有意に増加 させるのに十分な量のエポスタンを該シチメンチ璽つ雌鳥に投与することを特徴 とするシチメンチテウにおいて産卵を促進する方法である。

好ましい具体例を含む発明の詳細な記載シチメンチツウ雌鳥における産卵周期は 約６カ月間であり、それは継続している。該周期の終わり近くでは、産卵は減少 する。該周期の終わりにおいて、雌鳥は羽毛が抜は変わる。産卵は中止し、新し い周期が続いて起こると再度盛んになる。雌鳥は通常周期当たり７５〜９０個の 卵を生み、かくして、ｌ僅の卵は２．０〜２．５日毎となる。前記したごとく、 就業性もまたシチメンチョウ雌鳥における産卵に影響する因子である。従って、 本発明を実施するに際しては、就業性および卵生産性に関する因子ならびに産卵 自体に与えるエポスタンの効果も調べた。

産卵中の間に生まれる卵の数を有意に増加させるのに十分な量のエポスタンを用 いることができる。好ましい用量は０．１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。該エ ポスタンは、投与用には、医薬上許容されるいずれの経口または非経口投与形態 にも調製できる。該経口投与形態は固体または液体および、かくして顆粒剤、カ プセル剤、錠剤、液剤、懸濁剤または乳剤とすることができる。非経口投与形態 は液剤、懸濁剤または乳剤とできる。経口投与形態が好ましい。ゼラチンカプセ ルを用いることができるが、好ましい経口投与形態は顆粒剤であり、これは飼料 に混合することができ、あるいは飼料表面に置くことができる。産卵周期のうち の１日と少なく、あいろはすべての日までと多く日用量を与えることができる。

以下に記載するテストにおいては、該周期のうちＩＥｉおよび５週ｒＪ１（３〜 ７！間）についての日用量を用いた。

本発明の最初のテストにおいては、シチメンチゴウ雌鳥において、エポスタンの 単一の０，１．２５．２．５．５または１０　ｍｇ／　ｋｇの経口または非経口 用量がプロゲステロン、エストラジオール、フルチ響を測定した。該テストのた めに、１１０羽の雌鳥、５２週令、最初の周期のシチメンチョウ雌鳥をランダム に各々１１羽の１０群に分けた。エポスタンの経口用量をゼラチンカプセル中に て与えた。

非経口投与には、エポスタンをエタノール−綿実油（１０：９０）に濃度２０ｍ ｇ／ｍｅで溶解させ、皮下投与した。血液試料は投薬の１週間前ならびに投薬後 ６．１２．２４および４８時間に採取した。４種の血漿変数の分析をラジオイム ノア、２セイによって行った。

産卵は投薬前１２日問および投薬後３日間測定し、その時点で該雌鳥を犠牲にし た。データを分散分析法によって解析した。

哺乳動物における血漿プロゲステロン濃度に与えるエポスタンの効果とは翼なり 、この変数に対するエポスタンの用量または投与経路の有意な総じての効果はシ チメンチョウ雌鳥では観察されなかった。有意な（ｐ≦０．０００１）減少は投 薬後６および１２時間におけるサンプリング時期に関係していたが、これは、サ ンプリング時期の有意の総じての効果が示されないように、投薬後２４および４ ８（ｐ≦０．０００１）およびサンプリング時期（ｐ≦０．０２）に基づくエス トラジオール濃度の有意な減少が観察されたが、投与経路の効果は有意でなかっ た。総じてエポスタンの用量（ｐ≦０．０００１）および投与経路（ｐ≦０．０ ２）ならびにサンプリング時期（ｐ≦０．０３）に基づ（コルチスコステロン濃 度の有意な減少は観察された。エポスタンの用量もしくは投与経路またはサンプ リング時期がプロ力イン濃度に与える有意な総じての効果は観察されなかった。

産卵は、与えられた雌鳥の群および与えられた日数について定義され、パーセン ト雌鳥−日産生産として測定された。

パーセント雌鳥−ヨ卵生産＝（生んだ卵の数）Ｘ１００／（雌鳥数×日数） 第１のテストの卵生産の結果を第１表に掲げる。

第１のテスト−卵生産 エポスタン　パーセント雌鳥−日産卵 ０　４７．０　３４．５　２４．０　５１．７１．２５　３７．３　３５．５’ ２６，７　６０．０’２．５０　２７．１　３０．９　１２．０　４６．７５． ００　２９．８　３０．９”　２１．０　７０．０”１０．００　５７．３　３ ９．１　６６．７　５６．７ａ、ｂ；有意に異なる（ｐ≦０．０３）第１表に示 されるごとく、１．２５および５．０ｍｇ／ｋｇ非経口用量群は卵生産の有意な 増加を示した。これは刺激的と考えられる。

なぜならば、単一用量のみが各雌鳥に投与され、投薬後３日間の卵生産のみが測 定されたからである。

本発明の第２のテストにおいて、５週間の毎日のエポスタンの０．０．３１３． ０．６２５．１．２５および２．５０ｍｇ／ｋｇの経口用量が就業性傾向のある シチメンチョウ雌鳥におけるプロゲステロン、エストラジオール、コルチコステ ロン、プロラクチン、カルシウムおよび蛋白の血漿濃度、卵生産ならびに卵の特 性に与える効果を測定した。就業性傾向のある２００羽の第１周期のシチメンチ ョウ雌鳥を各４０羽の雌鳥の５群にランダムに分け、羽毛の抜は変りを誘導し、 それによりその第２の産卵周期を同調して開始させる。

エボスタンの日経口用量はゼラチンカプセル中にて投与し、産卵周期の第３週に 開始する。血液試料は各用量群において１０羽の雌鳥から毎日採取した。卵生産 および巣作り挙動を毎日６回測定した。

投薬の終了後２週間目に該雌鳥を犠牲にし、剖検時には、卵巣および子宮を調べ た。プロゲステロン、エストラジオール、コルチコステロンおよびプロラクチン 濃度の分析はラジオイムノアッセイによって行った。カルシウムおよび蛋白濃度 の解析は比色法で行った。χ鵞分析で行った卵の特徴および解検データ以外は分 散分析法によって解析した。

剖検時には、テストを完了した各雌鳥の卵巣を調べた。正常な卵巣はテスト期間 中の卵生産性を示すものと考えられた。腫れた、若いまたは退化した卵巣あるい は卵胞を有する卵巣はテスト期間の間の卵生産性の欠如を示すものである。正常 な卵巣を有する雌鳥の数（１１／３７．１０／３８．１９／２７．１３／４０） は非投薬群における（７／４０）よりもエポスタン（各々、０．３１３．０．６ ２５．１．２５．２．５０ｍｇ／ｋｇ）を投薬した群で有意に（ｐ≦０．２７） 大きかった。また、各卵巣を卵胞の階層構造の喪失および初代卵胞の数について も調べた。卵胞の階層構造の喪失を示す雌鳥の数（５／３５．９／３８．７／３ ６．８／４０）は非投薬群における（無し）よりもエポスタン（各々、０．３１ ３．０．６２５．１．２５ｍｇ／ｋｇ）を投薬した群において有意に（ｐ≦０． ０３４）大きかった。初代卵胞の数は非投薬群におけるよりもエポスタンでの投 薬群における方が有意に（ｐ≦０．０８）大であった。従って、エボスタンは、 就業性の傾向があるシチメンチョウ雌鳥において、閉鎖卵巣へ向けての傾向なら びにその結果としての非生産不能を有意に逆行させ、排卵用の卵胞の補充ならび にその結果としての卵をより多く生産する能力を有意に増大させる。

第■表 （濃度単位）　非投薬雌鳥　エポスタン投薬雌鳥プロゲステロン　５６１’　８ ２５” （ｐ　ｇ／ｍＱ　） エストラジオール　５７．６６′′　６１．１４′′（ｐ　ｇ／ｍ（１） フルチコステロン　３．９３’　５．０７″（ｎｇ／ｍ＋２） プロラクチン　１０４９　１０９５ （ｎ　ｇ／ｍ（１） カルシウム　１５．８　１６．１ （ｍｇ／ｍ＋２　） 蛋白　４．９８　５．０２ （／ｄＱ） ａ：有意に具なる（ｐ≦０．００６） ｂ；有意に異なる（ｐ≦０．０１） Ｃ：有意に異なる（ｐ≦０．００５’）プロゲステロン、エストラジオールおよ びコルチコステロンｍＲにおける増加は非生産的雌鳥におけるよりも生産的雌鳥 における方がより有意に（ｐ≦０．００１）増加した。また、血漿蛋白濃度は生 産的雌鳥において有意に（ｐ≦０．００１）増加した。血漿プロラクチン濃度は 生産的雌鳥において有意に（ｐ≦０．００１）記載された。

第２のテストの非生産結果を第■表に示す。

第■表 第２テスト−卵生産 パーセント雌鳥−日卵生産 エポスタン用　（ｍ　／にユーーーーーーーーー週　一旦　旦−１上ｌ　且−ｍ 　ニー２５　２−ｊ旦卵生産は、テスト期間の間、就業性の増大のため、非投薬 群において着実に減少した。エポスタンは投薬群においてこの傾向を部分的に逆 行させるようである。週５の間（投薬の第３週）、卵生産は０．３１３および０ ．６２５ｍｇ／ｋｇ用量群におけるよりも１．２５および２．５０ｍｇ／ｋｇ用 量群における方が有意に大であった（ｐ≦０．０４）。週６および７（投薬の第 ４および５週）の間、卵生産は、０，０．３１３および０．６２５ｍｇ／ｋｇ用 量群におけるよりも１．２５および２．５０ｍｇ／ｋｇ用量群における方が有意 に大であった（各々、ｐ≦０．０４および０．０１）。週８（投薬後楽１週）の 間、卵生産は０および０．３１３ｍｇ／ｌ　ｇ用量群よりも１．２５ｍｇ／ｋｇ 用量群の方が有意に大であった（ｐ≦０．００８）。

有意性のこのパターンは、非生産的であった、または死んだ雌鳥についての結果 を修正することによって、あるいは非投薬群に対して投薬群を正規化することに よっても大きく影響されない。

卵の重量および卵の殻の重量は投薬群においてわずかに減少したが、卵の比重は 投薬によって影響されなかった。これらの効果は重要とは考えられない。

ニワトリにおける比較テスト その活性産卵の終了に近いニワトリにおいて血漿ホルモン濃度および産卵効率に 与えるエポスタンの効果を測定するためにテストを行った。２００羽の雌鳥を該 テスト用に２０羽の雌鳥の１０群に分けた。二連の群において、０．１．２５． ２．５．５．０および１０ｍｇ／ｋｇにて、４週間毎日、飼料に入れてエポスタ ンを投与した。

プロゲステロン、エストラジオール、コルチコステロンおよびプロラクチンの血 漿濃度を、群の該連の組において測定した。卵生産および卵の品質はすべての群 で測定した。データの予備的評価により、エポスタンはニワトリにおいて血漿ホ ルモン濃度または卵生産の効率に対する主たる効果を有しないことが示された。

国際調査報告 嗜Ｍ＠１１ｍ１８ＡＩｌ＾ｓ畦ＩＩ＋・・”’ＰＣＴ／ＵＳ９０１０２９３３− ”ＩＩ”Ｉｗ”、Ａａｌ’１１・１ｅＲＮ６．ＰＣＴ／Ｉ↑Ｓ９０１０２９３３

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．シチメンチョウ雌烏の産卵周期の間に産卵される卵の数を有意に増加させる のに十分な量のエポスタンを該シチメンチョウ雌烏に投与することを特徴とする シチメンチョウにおいて産卵を促進する方法。
2. ２．エポスタンの量が１日当たり０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である請求の 範囲第１項記載の方法。
3. ３．産卵周期のうち１日だけと少なく、あるいはすべτの日と多く、日用量を投 与する請求の範囲第２項記載の方法。
4. ４．エポスタンを経口投与する請求の範囲第３項記載の方法。
5. ５．エポスタンを非経口投与する請求の範囲第３項記載の方法。
6. ６．シチメンチョウ雌烏における産卵の促進用の製剤の製造用へのエポスタンの 使用。
7. ７．エポスタンおよび医薬上許容される担体よりなることを特徴とするシチメン チョウにおける産卵促進用製剤。