JPH04506475A - 酵素クリーナー - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 酵素クリーナ一 本発明は、ミクロ濾過または限外濾過メンプランの処理に使用することができ、 液相中での貯蔵において安定なプロテアーゼおよびグルカナーゼを含有する酵素 クリーナーに関する。

メンプラン法、例えば限外濾過またはミクロ濾過は、重要性が高まりつつあり、 食品工業においても有効に用いられる。その−例は、ビールの脱アルコールであ る。

メンプランは、その透過性を保つために、清浄して表面および孔の沈積物を除去 しなければならない。

そのような清浄工程においてプロテアーゼ溶液が既に用いられており、それは他 のクリーナーと組み合わせられる場合もある。これは、問題を起こすことがあり 、沈澱が生成し得るので、酵素クリーナー、すなわち、酵素および界面活性剤成 分の両方を含有し、所望により緩衝剤および錯化剤を含有する濃厚液が必要であ る。

しかし、そのような濃厚物は、貯蔵安定性に関して厳しい条件を満足しなければ ならない。

従って、本発明の課題は、活性成分に加えて、酵素安定剤をも含有する濃厚物を 提供することであった。

従って、本発明は、 ・　１０００〜９００００Ｕ／■ｌのプロテアーゼ・　５〜５００ＢＧＵ、／ｍ ｌのグルカナーゼ・　１−１０重量％のアニオン性および／またはノニオン性界 面活性剤 ・　２０〜６０重量％の親水性有機溶媒・　１種またはそれ以上のホウ素の酸お よび／またはその可溶性塩・　所望により、緩衝剤および／または錯化剤を含有 する液体酵素クリーナーに関する。

本発明のクリーナーは、タンパク質含有沈積物を溶解するためにプロテアーゼを 含有する。適当なプロテアーゼは、ズブチリシン型のプロテアーゼ、例えばズブ チリシン・カールスベルク（Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）またはズブチリシンＢＰＮ’ である。中性プロテアーゼを使用してもよい。メタロプロテアーゼの場合は、紙 対に錯化剤と共に使用しないことが重要である。プロテアーゼは、１０００〜９ ００００Ｕ／　ｍ　ｌ　、好ましくは３０００〜３００００Ｕ、／＋ｌの酵素活 性が得られるような量で使用する（タンパク質として、精製したズブチリシン・ カールスベルクは、約２００００００　Ｕ／ｇのプロテアーゼ活性を有する）。

プロテアーゼ活性は、標準ＥＰＥ−バリン法によって測定した。

この方法は、例えば、西独特許出願ＤＥ３７３４０４７号に記載されている。

ある種の多糖の沈積を防止するために、本発明の液体酵素クリーナーは、グルカ ナーゼを含有する。グルカナーゼは、５〜５００ＢＧＵ／＋＋＋１の量で使用す る。ある種の非特異的アミラーゼ活性をも有する枯草菌のエンドグルカナーゼを 、グルカナーゼとして有利に使用し得る。

適当な市販品は、例えば、ノヴオ・インダストリ社（Ｎｏｖ。

Ｉ　ｎｄｕｓｔｒｉ　Ａ　Ｓ　、デンマーク）の製品の［セレフロ（Ｃｅｒｅｆ ｌｏ。

商標）」である。

β−グルカナーゼは、標準ＤＮＳ法によって測定した。ｐＨ８の５０＋ｓＭ　Ｎ ａＡｃ緩衝液中の１％β−グルカン溶液［ジグ？　（Ｓ　ｉｇａ＋ａ）、オーダ 一番号Ｇ−６５１３］を基質として使用した。試験インキュベージジン時間は、 ４０℃で１５分間であった。還元糖の定量は、グルコースの標準曲線との比較に よって行なった。２つの同一サンプル間の最大偏差は１０％であった（標準ＤＮ Ｓ−ジニトロサリチル酸試薬）。

更に、本発明の液体酵素クリーナーは、１−１０重量％のアニオン性および／ま たはノニオン性界面活性剤を含有する。好ましい一態様においては、アニオン性 界面活性剤を主に、または専ら使用する。適当なアニオン性界面活性剤は、好ま しくは分枝したアルキル基中に８〜１２個の炭素原子を有するパラフィン、脂肪 アルコールおよび／またはアルキルフェノールのスルフェートおよび／またはス ルホネートである。他の適当なアニオン性界面活性剤は、エステルスルフェート およびエトキシ化アルコールまたはエトキシ化フェノールのスルフェートである 。前記アニオン性界面活性剤のうち、パラフィンスルホネートが現在好ましい。

本発明の液体酵素クリーナーは、２０〜４０重量％の親水性有機溶媒をも含有す る。好ましい親水性有機溶媒は、炭素原子数６個までの一官能性または多官能性 アルコールであり、それらのうち、二官能性アルコール、例えばエチレンゲルコ ールおよびとりわけプロピレングリコール（１，２−プロピレングリコール）が 好ましい。液体三官能性アルコール、例えばグリセロールを使用してもよい。

本発明の液体酵素クリーナーは、ホウ素の酸または１種のその水溶性塩をも含有 する。それらの化合物は、プロテアーゼおよびプロテアーゼ製剤用の既知の安定 剤である。驚くべきことに、それらは、プロテアーゼの存在下に、グルカナーゼ に対して有効な安定剤であることがわかった。本発明の目的に適当な安定剤は、 ホウ酸およびその水溶性塩、とりわけホウ酸カリウムもしくはナトリウムまたは アンモニウム、並びにメタホウ酸、ホウ砂またはより高度に縮合したホウ酸、例 えば五ホウ酸およびその塩、例えば五ホウ酸ナトリウムまたは五ホウ酸カリウム である。

ホウ素の酸またはその塩は通例、濃厚物の形格の液体クリーナーに対して０．５ 〜５重量％の量で使用する。

本発明の液体酵素クリーナーは、ｐＨ値約７に調節することが好ましい。これは 、アルカリ、例えば水酸化ナトリウムを加えることによって行ない得る。しかし 、緩衝作用を育する物質を加えてもよい。本発明に従って使用するそのような物 質は、ｐ）（値約７、すなわち５〜９、好ましくは６〜８に調節することのでき る、強酸および弱塩基、または強塩基および弱酸から成る既知の緩衝系である。

リン酸のナトリウムおよびカリウム塩が好ましい。緩衝剤は、液体酵素クリーナ ーに直接加えてよい。しかし、緩衝剤を清浄溶液中に入れるか、または清浄前も しくは後に別に適用してもよい。このことは、錯化剤にも当てはまる。

本発明の液体クリーナー中に使用し得る適当な錯化剤は、アミノカルボン酸塩、 例えばエチレンジアミン四酢酸またはニトリロ酢酸の水溶性塩である。他の適当 な錯化剤は、ホスホン酸゛、例えばヒドロキシ−またはアミノアルキレン−１， １−ジホスホン酸である。

錯化ヒトＣキノカルボン酸、例えばクエン酸を使用してもよい。

本発明の液体酵素クリーナーは、限外濾過またはミクロ濾過メンプランの清浄に 使用する。とりわけ、ビールの脱アルコールにおいてそのようなメンプランの清 浄に使用し得る。本発明のクリーナーは、例えばシリコーンメンプラン、セルロ ースアセテートメンプラン、ジルコニウムジオキシドメンプランなどを包含する 多くのメンプラン材料と適合性である。

本発明の酵素クリーナーは、前記適用に加えてフィルタープレスなどの清浄にも 使用し得る。

実際に適用のため、すなわち、例えばビールの脱アルコール用に用いられる種類 の薄フイルム複合メンプランを清浄するためには、酵素クリーナーを０．１〜１ 重量％の使用濃度に希釈し、例えば５０℃の温度で、３０分間作用させる。使用 条件下に確実に特定のｐｉ（値とするように、緩衝剤溶液が存在し得る。使用条 件下に好ましいＰＨ値は、例えば８．０〜８，５である。所望により、酵素的清 浄の後に、酸性清浄（例えば、０．３重量％の酸性界面活性剤含有りリーナーに よる）および要すれば第２の酵素的清浄を行ない得る。

実施例 実施例１ 下記成分を含有する液体クリーナー１００ｋｇを混合によって調製した： １．２−プロピレングリコール　４０，０　重量％プロテアーゼ溶液［マキサタ ーゼ（Ｍａｘａｔａｓｅ。

商標）、フリュスイヒ（ｆ　ｌｕｅｓｓｉｇ）］　７　、５　重量％グルカナー ゼ溶液［セレフロ（商標）２０　ＯＬ。

ノヴオ］　１２．５　重量％ パラフィンスルホネート（４０重量％）　５．０　重量％ホウ酸　０．９　重量 ％ 水酸化ナトリウム（５０重量％）　０．４２　重量％ＮａＨａＰ０．　０．０３ 　重量％ Ｎａ＊ＨＰＯ４０，０９４重量％ このクリーナーは、約８５００　Ｕ／ｍｌのプロテアーゼおよび約２００ＢＧＵ ／ｍｌのβ−グルカナーゼを含有していた。

濃厚液のｐＨ値は、水酸化ナトリウムを加えることによって７に調節した。更に 、 リン酸三カリウム　１５重量％ トリポリリン酸カリウム（５０％）　２０重量％水酸化カリウム（４５重量％） 　２８重量％トリロン（Ｔｒｉｌｏｎ、商標）ＢＳ　２７重量％水　１００重量 ％とする から、緩衝溶液を調製した。

この緩衝剤は、使用溶液のｐ）（を約８の値に調節する。

実施例２ ビールの脱アルコールに用いた薄フイルム複合メンプランを清浄するために、最 初にメンプランを２０℃の水で５〜ｌＯ分間濯いだ。

次いで、メンプランを、１％緩衝溶液（実施例１ｂ）および０，３％クリーナー 溶液（実施例１ａ）で５０℃で３０分間処理した。メンプランを２０℃の水で濯 いだ（５〜ｌＯ分間）後、従来の酸性クリーナーの０．３％溶液で５０℃で１５ 分間処理した。次いで、水で濯ぎ、再度本発明のクリーナー溶液および緩衝剤で 処理した後、２０℃の水で濯いだ。

実施例３ 本発明のクリーナー溶液を貯蔵試験に付した。３か月後、β−グルカナーゼの残 留活性は約５０％であり、これと比較してボレート不含有のクリーナーにおいて は１２％であった。

国際調査報告 −一−ｍ”ＰＣＴ　／　ＥＰ　９０　／　１）ＩＱｆＴ’ｒ国際調査報告

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．１０００〜９００００Ｕ／ｍｌのプロテアーゼ５〜５００ＢＧＵ／ｍｌのグ ルカナーゼ１〜１０重量％のアニオン性および／またはノニオン性界面活性剤 ２０〜６０重量％の親水性有機溶媒 １種またはそれ以上のホウ素の酸および／またはその可溶性塩所望により、緩衝 剤および／または錯化剤を含有する液体酵素クリーナー。
2. ２．プロテアーゼとして、ズブチリシンプロテアーゼ、とりわけズブチリシン・ カールスベルクおよび／またはズブチリシンＢＰＮ′が存在することを特徴とす る請求項１記載の酵素クリーナー。
3. ３．グルカナーゼとして、枯草菌のエンドグルカナーゼ（所望により非特異的ア ミラーゼ活性を有する）が存在することを特徴とする請求項１または２記載の液 体クリーナー。
4. ４．アニオン性界面活性剤として、パラフィン、脂肪アルコール、アルキルフェ ノールまたは後二者のエトキシ化生成物のスルフェートおよび／またはスルホネ ートが存在することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の液体酸素クリ ーナー。
5. ５．親水性溶媒として、炭素原子数６個までの一価または多価アルコール、とり わけ１．２−プロピレングリコールが存在することを特徴とする請求項１〜４の いずれかに記載の液体酵素クリーナー。
6. ６．ホウ酸、そのナトリウムもしくはカリウム塩、ホウ砂または五ホウ酸の塩が 存在することを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の酵素クリーナー。
7. ７．緩衝剤としてリン酸の塩を使用することを特徴とする請求項１〜６のいずれ かに記載の酵素クリーナー。
8. ８．錯化剤として、アミノカルボン酸、例えばエチレンジアミン四酢酸もしくは ニトリロ詐酸、ホスホン酸またはヒドロキシカルボン酸を使用することを特徴と する請求項１〜７のいずれかに記載の酵素クリーナー。
9. ９．請求項１〜８記載の酵素クリーナーの、とりわけ食品工業における、 ミクロ濾過または限外濾過メンブランの処理のための用途。