JPH04632B2 - - Google Patents

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JPH04632B2
JPH04632B2 JP57119890A JP11989082A JPH04632B2 JP H04632 B2 JPH04632 B2 JP H04632B2 JP 57119890 A JP57119890 A JP 57119890A JP 11989082 A JP11989082 A JP 11989082A JP H04632 B2 JPH04632 B2 JP H04632B2
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lactobacillus
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Seikenkai
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Description

【発明の詳細な説明】
本発明は、新規なラクトバシラス
（Lactobacillus）に関するものであり、更に詳し
く言えば、Na2S・9H2Oに対して制限された抵抗
性を示し、Na2S・9H2OないしNH3によつては
発育促進は受けないが特定環境の下では、これら
２者を減少する能力を有する新規なラクトバシラ
ス・クリアランス（Lactobacillus clearans）に
関する。 従来知られている乳酸桿菌の性状は、グラム陽
性、嫌気性または微好気性、無芽胞桿菌で、菌種
によつて球桿菌状、湾曲状、コリネ状、糸状など
の形状を呈する。運動性はなく、カタラーゼ陰
性、硝酸塩を還元しない、またゼラチンを分解せ
ず、インドール、硫化水素を産生しない。或る種
のものは両端染色性を示し、蛋白分解性、脂肪分
解性はあつても極めて微弱であり、好気的条件よ
りも嫌気的ないし微好気的条件で良く発育し、糖
分解性が強く、耐酸性でグルコースの醗酵により
50％以上の収率で乳酸を産生し、酢酸の添加によ
つて、その発育が促進される。動植物に対する病
原性はない。 またこれらの菌の栄養要求は高く、かなり良い
栄養組成の培地を使用しなければ発育出来ないこ
とも知られている。すなわちアミノ酸、ペプチ
ド、核酸関連物質、ビタミン、塩類、脂肪酸また
はそのエステル、糖類が必要である。 ところで、此等のラクトバシラスの「種」への
分類に関する評価事項は、従来○イ糖分解能、○ロガ
ス産生、○ハ旋光性、○ニ発育温度範囲、○ホ発育PH域
であつた。（p576〜578、Bergeys Manual of
Determinative Bacteriology、第８版参照）。 しかしながら前記評価事項の内、○ホの発育PH
は、菌の適応力によつて、ある程度可変的なもの
であり、○ハの旋光性は生体内よりもむしろ製品に
係る問題であり、強いて生棲地である腸内、口
腔、さらに膣内と相関のある評価事項を求めれ
ば、餌料分解との関係で○イの糖分解能が存在する
のみであつた。つまり、菌とその生棲地との因果
関係、さらにそこにおける働きとの関係は、高い
相関では示されておらず、腐敗物の充満した、ま
た外敵の侵入に抗して生棲し、かつ５×
108cells／ｇも生存する所での働きに基づいた分
類とは非常に縁の遠いものとなつており、その矛
盾は今日ラクトバシラスの研究自体を著しく拘束
する原因となつている。何故ならば、分類は研究
を進展させるための基本となるからである。従つ
て、此の様な現状においてラクトバシラスについ
ては、自然の生棲条件が充分に考慮され、かつそ
の活躍の様相の加味された分類の一日も早く確立
されることが望まれていた。 例えば、経口的に投与された食・餌料は腸で分
解されて漸次生体に吸収されながら、一方では腐
敗過程とたどり排泄されて行く。この腐敗物質の
形成は腸内の腐敗菌に負う所大であるが、この物
質は腸管をとりまく血管を通じて吸収もされ、ま
た腸管や、そこに存在する血管を直接おびやかし
ている。例えば腸管内で形成されるアンモニア唯
一つの物質による腸管破損の修復のために、鶏に
おける実験では、飼料の４％のエネルギーが費や
されているとの報告もある。 かかる状態におかれている腸内における物質
に、直接かかわりある面を有する菌として、ラク
トバシラスの中にH2SやNH3の如き腸内悪性物
質を減少する機能を有する菌のかなり存在するこ
とが、本発明者らによつて明らかにされたこと
は、（）ラクトバシラスの有益性がこれまでの
疫学的ないし統計学的検討の見地から離れて、実
際に糞便物質のレベルで証明された極めて画期的
な事柄であり、（）更に細菌学的見地で言えば
従来の分類法の矛盾の根本的解決を迫る有力な素
材となり、分類のための基準を従来のものと全く
変えて設定すべきことを強く示唆するものであ
る。けだしこのことは上記２つの物質が酪酸と共
に腸内有毒物の代表であるのみならず、種々の腸
内Ｓ、Ｎ、Ｃ−化合物の代替物質であることから
も当然のことである。 これまで屡々述べ来つた様にラクトバシラス分
類上の評価事項とその生棲地の関係についての従
来の研究は充分ではなく、両者を関連づけるもの
は上述せる様に少なかつたが、新しい思想として
ラクトバシラス分類の評価事項にNa2S・9H2Oお
よびNH3を導入した所、従来良く知られる菌の
性質ひいてはその命名と上記２物質の間に極めて
高い相関のあることが明らかとなつた。すなわ
ち、これらの物質に対する態度を基にして、ラク
トバシラスを次の幾つかの群に分類する事が出来
る。 決して腸内には在住出来ないとされる菌群一
これらはNa2S・9H2OおよびNH3に敏感で、
かつ両物質の低減能力はない。 腸内に定住性を有すると言はれて来たアシド
フイラス（acidophilus）の様な菌群−これら
はNa2S・9H2OおよびNH3に鈍感であるが両
物質の低減能力はない。 上記ならびにに属する菌は、何れも先輩た
ちの分離した菌株をNa2S・9H2OおよびNH3に
対する態度から分離し直したものであるが、別
途、本発明者等は既に栄養要求性が低く、かつそ
の低い栄養要求性の培地の下で醋酸の如き低級脂
肪酸によつてのみならず、Na2S・9H2Oおよび
NH3によつても発育促進される乳酸桿菌の存在
することを特許第938917号および第936213号さら
に特願昭49−134773号で明らかにした。ところ
で、今回本発明者等は、従来全く知られなかつた
性状を保有する乳酸桿菌の一群の存在することを
突き止めた。この一群の菌は栄養要求の点では従
来良く知られている市販の乳酸桿菌などと同じく
〔（Ｓ／Ｗ）＋ビタミン＋カザミノ酸〕培地で発育
出来る栄養要求の菌から、上記特許第938917号お
よび第936213号さらに特願昭49−134773号（特公
昭57−49193号公報）に開示したような低い栄養
要求の菌にまたがり、しかも、それらの菌の性状
は前記した従来の乳酸桿菌に見られる乳酸桿菌の
定義にすべて一致するものである。 しかしながら、それに加えるにNa2S・9H2Oお
よびNH3の何れか、または双方の存在によつて
発育促進は示さないが、発育生存環境中において
上記の何れの物質をも減少せしめる作用を有する
特性がある。また、従来良く知られるラクトバシ
ラスと栄養要求の点で同じく低くないものも多い
にも拘らず、有毒物質の消化能力については、継
代による力価の変動が極めて少く、安定している
ことから、菌自らに備わつた本質的なものである
ことが確認出来た。 従つて本発明者等は、本発明に係る新規な菌を
新種としラクトバシラス・クリアランス
（Lactobacillus Clearans）と命名した。 かつてロシアの天才、メチニコフが
（Mechinjkov：1845〜1916）人体老化の主因を腸
内の腐敗醗酵によつて形成される毒物のためであ
るとして中毒説をかかげ、その対策としてヨーグ
ルトを愛飲することが老化防止に役立つと提唱し
た。そして今、本発明者らが明瞭に有毒物質をお
だやかに減少せしめる一群の菌を見出すことにな
つたのであり、この事はとりも直さず本発明菌に
よる食品こそ正にメチニコフの学説を具現したも
のと言えよう。しかも本発明の新菌群のNa2S・
9H2OおよびNH3など一連の有毒物質の減少能力
が、本明細書中に示した実験データーからも明ら
かなように、極めて温和で、かつ毒物との間で
の、ある種のバランス状態を維持している生体へ
の衝撃度が少い点は高く評価されるべきものであ
る。 本発明者らは、特許第938917号および第936213
号および特願昭49−134773号においてNa2S・
9H2OおよびNH3による発育促進菌を開示した。
しかしながら我々は上記の様な歴史的意味合より
も、むしろ該菌の利用の面、さらには強力な力価
の保持などについて詳細な研究を行つた。その後
今日まで10年近い才月を経たにも拘らず、上記特
許に係る菌の周辺に存在した本発明による生物学
上ならびに産業上高度に有意義な菌群についての
活用はおろか、それらに関する文献的報告に全く
接していない。 ところで、本発明菌においてはその分離法が重
要であり、その選択を誤らなければ本発明菌種
（L.clearans）に属する菌を幾株も短期間に単離
することが可能である。 かくして、本発明によれば、他の点では従来良
く知られるラクトバシラスと変る所が無いとみな
されるにも拘らず、腸内の有毒物質をかなりの高
率で減少せしめる機能を有する菌を容易に分離入
手し得ることは特筆すべきことである。 また、本発明菌はラクトバシラスの内、腸内生
棲菌の中から分離したのであるから、生来他の腸
内細菌とはある種の共棲を行うことにすでに馴さ
れており、従つてこれを人体に投与した時もすで
に腸内に構築されている菌叢に動揺を与えること
はほとんど無い点もまた大書すべきである。 本発明による新規な菌株の内の４株についての
実験データーの一部を以下に示す。肉エキス５
ｇ、ペプトン５ｇ、Na2S・9H2O0.5ｇ、ブドウ
糖１ｇ、CaCO31ｇおよび水１（PH中性）より
成る培地に、本発明による微工研寄託受理番号
6587、6588、6589、6590の４種の菌株を接種し、
37℃で培養し、各24、48、72時間目のNa2S・
9H2Oの減少を調べた。その結果を第１表に示
す。
【表】 第１表の結果からわかるように、Na2Sの様に
ほとんど栄養とは思い難いほどの物さえも驚くべ
き速度で減少して行くことが良く判る。上記の表
の結果はNa2S・9H2O500mg（0.5ｇ）を添加した
場合のものであるが、これが1000mg、1300mg添加
の場合もNa2S・9H2Oの減少量は余り変らない。
Na2S・9H2O減少量の測定方法の１つは0.1％の
醋酸鉛の溶液を滴下することからなり、その滴下
量は培地の１％量が適当である。滴下後直ちによ
く振盪し、その色調（黒〜灰〜白色）により
Na2Sの残溜分を比色判定するか、またはメチレ
ンブルー吸光光度法で測定する。 次に、肉エキス５ｇ、ペプトン５ｇ、ブドウ糖
１ｇ、CaCO31ｇ、NH30.5ml（100％換算）およ
び水１（PH中性）より成る培地に、第１表にお
けると同じ４菌株を接種し、37℃で各24、48、72
時間培養したときにNH3がどの程度減少したか
を調べた。その結果を次の第２表に示す。
【表】 第２表の結果からわかるように、菌株によつて
NH3の大きな減少量を示す菌も存在する。この
実験は培地にNH3を0.5ml添加しているが、これ
を1.3mlにしても減少量は上表のそれと余り変ら
ない。NH3減少量の測定方法は市販のネスラー
試薬（沃化第２水銀−2W／ｖ％）の10％溶液を
滴下することからなり、その滴下量は培地の１％
量で、滴下後直ちによく振盪し、その色調（橙〜
黄）により残溜分を比色判定するかインドフエノ
ール法により吸光光度計で測定する。 本発明による新規な菌群の分離方法は次の通り
である： (1) 培地１中に肉エキス５ｇ、ペプトン５
ｇ、Na2S・9H2OおよびNH3夫々0.3ｇ、酪酸
ナトリウム３ｇ、ブドウ糖５ｇ、CaCO33ｇを
含有する組成のもの、またはペプトン５ｇ、
Na2S・9H2OおよびNH3夫々0.3ｇ、酪酸ナト
リウム５ｇ、ブドウ糖10ｇ、CaCO33ｇを含有
する組成のものを作り、PHを中性に修正し、こ
れに人畜の糞便を稀釈塗布し、37℃で嫌気培養
を行う。 (2) 出現コロニーの内、コロニー周囲に透明感の
あるものを釣菌する。 (3) LBS培地（※）に拡げ、37℃で２日間培養
する。 （※）トリプテイカーゼ10ｇ、酵母エキス５
ｇ、肉エキス10ｇ、KH2PO46ｇ、クエン酸二
アンモニウム２ｇ、グルコース20ｇ、tween80
１ｇ、酢酸ナトリウム40ｇ、SolutionB15ml、
氷酢酸（99.5％）3.7ml、PH調整、減菌不要；
SolutionB：FeSO4・7H2O0.5ｇ、MnSO4・
nH2O2.47ｇ、NaCl0.5ｇ、MgSO4・7H2O10
ｇ、水250ml。 (4) 生育コロニーを釣菌し、肉エキス10ｇ、ペプ
トン10ｇ、NaCl2ｇ、ブドウ糖10ｇ、石灰５
ｇ、寒天10ｇから成る高層培地に穿刺培養を行
ない、ガス非産生菌のみを残す。 (5) 乳酸桿菌の性状に合致するかどうかの各種テ
ストを行ない分類学上乳酸桿菌に入ることを確
認する。 (6) 溶血性テストを行ない、非溶血のもののみを
残す。 (7) Na2S・9H2OおよびNH3を減少せしめるや
否やを調べる。（使用培地と検査法を前出）。 (8) 菌の栄養要求の試験を行う。 (9) 上記(7)と(8)とさらに糖分解能を併せ考察し、
分類を行う。 (10) 高級から低級の栄養に到る種々の培地中でμ
※を測定する。 (11) μの低い菌を放棄した後、残つた菌株につ
いては各種の動物に投与判定を下す。 ※ 対数増殖期t0における細菌数がn0が、t1
においてn1になつたとすると、μは次式で表わ
される： μ＝2.303（logn1−logn0）／t1−t0 本発明菌の性状について述べると次の通りであ
る。 本発明菌の代表的菌の形態学的性質は次の第
３表の通りである。
【表】 (注) 上記の形態は、肉汁培地に培養した
時の結果であるが、肉汁寒天に培養
した場合も同型態を示した。(37℃培養)
本発明菌の各種培地における生育形態は次の
第４表の通りである。
【表】 本発明菌の生理学的性質は次の第５表の通り
である。
【表】
【表】 △：分解が極めて徐々に行われる。
本発明による微工研寄託菌の栄養要求は次の
通りである。なお、基礎培地には無機塩とブド
ウ糖の代表としてStephenson−Wethamの培
地を用いた。以下（Ｓ−Ｗ）培地と略す。
【表】 またシスチンは他の含硫アミノ酸に置換しても
成績は同じである。 第６表の成績から次のことが判る。 微工研寄託番号6589と6590は、無機物＋ブドウ
糖＋シスチンのみで発育出来ることが判る。また
微工研寄託番号6588はその上にビタミンB1の存
在が必要である。 微工研寄託番号6587はビタミンB1、Ｃおよび
パントテン酸の何れの単独でも発育出来ないが、
２者の組合せで発育出来るようになる。 次に従来良く知られている腸内在住性乳酸桿菌
と本発明菌との比較をすれば次の通りである。乳
酸桿菌の内、アシドフイラス（acidophilus）、ブ
レビイス（brevis）、フアーメンタム
（fermentum）等は、通常腸内生棲性を有すると
言はれている。これらの菌がNa2S・9H2Oおよび
NH3にどの様な挙動を示すかということはこれ
ら２物質が（NaS・9H2OおよびNH3）腸内の汚
物の代表と考えられるので極めて注目される事柄
である。被検菌として、ラクトバシラス・アシド
フイラス（L.acidophilus）にATCCの4357、
4962、9857、ラクトバシラス・プレビス（L.
brevis）にATCC8003、ラクトバシラス・フアー
メンタム（L.fermentum）にATCC12369をそれ
ぞれ選んで実験を行つたが、500mgのNa2S・
9H2Oを培地に投入したとき、これらの菌は本願
明細書第12頁および第13頁に記載の測定方法では
これに手をつけないことが明らかとなつた。 結論として、本発明の菌群は、Na2S・9H2Oお
よびNH3またはそれらの延長線上の物質とも見
なし得る硫化水素、硫化アンモニウム、メチルメ
ルカプタン、エチルメルカプタン、ジメチルサル
フアイド、ジエチルサルフアイド、アセトアルデ
ヒド、スカトール、メチルアミン、エチルアミ
ン、ジエチルアミン、トリエチルアミン（実施例
２参照）などを減少せしめる能力を有する点で、
従来良く知られている菌株とは著しく異るが、な
おラクトバシラスの諸特性はすべて備えており、
投与中止による腸内よりの退去を早く、現在のと
ころでは上述を点以外では、Na2S・9H2O及び
NH3への抵抗性の点でようやく相違が認められ
る程度である。 以上の事実を実験によつて示せば次の通りであ
る。 基礎培地として肉エキス10ｇ、ペプトン10ｇ、
NaCl2ｇ、グルコース１ｇ、CaCO31ｇ、酵母エ
キス0.1ｇよりなる培地（PH6.0〜7.0）１に
Na2S・9H2Oをそれぞれ0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、
1.5、1.7、1.9、2.1、2.3、2.5ｇ、またNH3をそれ
ぞれ1.0、1.3、1.7、2.0、3.0、4.0、5.0、5.5、6.0
ｇ添加して37℃で72時間培養し、各菌のNa2S・
9H2OおよびNH3に対する抵抗性を調べた、その
結果は次の第７表の通りである。
【表】 第７表の結果から、従来公知のラクトバシラス
と本発明菌とのNa2Sに対する抵抗性がNa2S・
9H2Oの培地中濃度0.7ｇ／を境として明瞭に異
なり、従来公知のそれよりも強いことがわかる。
NH3に対する抵抗性の相異もNH3濃度2.0ｇ／
で認められるが、Na2Sの場合に比して稍不明瞭
である。 また上記と同じ基礎培地を使用し、先に本発明
者等が特願昭49−134773号において開示した
Na2S・9H2OおよびNH2に対して極めて顕著な
抵抗性を示す５種類のラクトバシラス（微工研寄
託番号1946、2779、2780、2781、2782）と本発明
菌との同様な抵抗性を調べた。その結果は次の第
８表の通りである。ただし、第７および第８表の
成績は、培地成分として使用される肉エキスやペ
プトンなどの性能の相違により幾分か変動するこ
とがある。また抵抗性もペニシリン抵抗株と同じ
く人為的に上下せしめ得るが、比等も、本発明の
範畤に入るのは当然である。また、人為的に抵抗
性を増減せしめていない分離菌を此処では自然分
離菌と呼ぶことにする。
【表】
【表】 第８表の結果から、特願昭49−134773号に開示
されているNa2SおよびNH3に対して大きな抵抗
性を有するラクトバシラスに対し、本発明菌の抵
抗性は明らかに劣つている、本実験ではNa2S・
9H2O濃度1.9ｇ／（幾分かの巾を持たして）を
境にしてこれ以上の濃度で発育できないことがわ
かる。本発明菌のNH3に対する抵抗性は6587を
除き何れも優れている。 第７表と第８表の結果から、本発明菌は
Na2S・9H2Oの濃度0.7〜1.9ｇ／の範囲内で抵
抗性を有し発育することができるという点で従来
公知のラクトバシラスと明確に区別されるもので
あり、またNH3に対しても適度の抵抗性を有す
るので、適当な飲食物と共に服用して人体の整
腸、健康促進のために極めて有用な用途をもつて
いる。なお、本発明菌が特願昭49−134773号の菌
よりもNa2S・9H2Oに対し抵抗性の少いことは、
服用に際し人体への急激な影響がなく、反つて好
ましい場合も多い。 以下実施例によつて本発明菌の有用性を説明す
る。 実施例 １ 本来腐敗し易いクリームに本発明菌を投与、な
いしは投与後発酵増菌せしめた場合、如何程、腐
敗への時間を延ばす事ができるか、またその時の
菌数との関係はどうなつているかを検べた。 実験に用いたクリームとその成分は次の通りで
ある。〓カスタードクリーム：小麦粉75ｇ、砂糖
125ｇ、牛乳500ml、卵黄４個、無塩バター５ｇ；
〓ホイツプクリーム：生クリーム１本、砂糖10
ｇ。 菌と識別名：従来良く知られているラクトバシラ
ス・アシドフイラス、ラクトバシラス・ブレブ
イス、ラクトバシラス・フアーメンタムなどを
HWグループ、市販に供されている大量生産に
適する様に充分練り上げられている菌をＣグル
ープ、そして本発明菌群をTIグループの名称
で以下記述する。 実験Ａ：クリーム中に各グループの乳酸菌を接種
増菌せしめた時の成績 上記HWグレープ、Ｃ−グループおよびTIグ
ループに属する菌を、無菌化したカスタードクリ
ーム１ｇ当りそれぞれ5000万細胞注入し、37℃に
放置した時の48、72、96時間後の菌の増殖の程度
を第１図にグラフで示した。 第１図のグラフから明らかなように、TIグル
ープの菌数の増加が他のグループに較べて非常に
大きいことが良く判る。菌株によつて異なるが、
培養72時間では109個を越える菌株も多々存在す
る。また添加菌量5000万細胞という数字である
が、この数は製造時の最適添加量を検討した結
果、得られたものである。しかしながら本発明を
実施するに当つては必らずしも此の数字に拘束さ
れるものではない。 実験Ｂ：雑菌がクリーム中に混入、それが増殖し
た時の菌数 従来、大腸菌、ブドウ球菌および枯草菌を以つ
て一般雑菌ないし腐敗菌の内の強力なるものの代
表と見做し得ることが判つているので、この３者
のクリーム中での発育を調べることにより腐敗の
進行ひいてはクリーム中の保存性の如何を検討し
た。 ブドウ球菌209P、大腸菌ATCC25922ならびに
枯草菌ATCC6633をカスタードクリーム１ｇ当り
それぞれ５細胞、１万細胞および５千万細胞添加
して増殖せしめた時の増殖の様子を調べた。その
結果は第２図，，の通りである。 第２図のグラフからも明らかな様に、最も増殖
力の強いのはブドウ球菌であり、また１万細胞、
さらに５千万細胞の感染では破壊的なまでの菌の
増殖が認められ、ホイツプクリームに於いて、１
日以上の保存が危険なことを実験データは教えて
いる。 実験Ｃ：無菌クリームに雑菌と本発明菌とをそれ
ぞれ接種・増殖せしめた時の菌数 (イ)クリーム製造開始時、(ロ)増殖の途上、(ハ)製造
後に雑菌の人為的に混入せしめた場合の夫々の菌
の増減、つまり干渉を調べ、食品として何れが優
れているかを検討した。 実験は、ラクトバシラスの添加量としては5000
万細胞とし、雑菌は実験Ｂの如く添加量として５
細胞、１万細胞、５千万細胞の場合について行な
つたが、これらの全てを示すことは唯混乱を倍加
するのみと思われ、また今日の食品製造技術の進
歩からみて不必要の面もあると思われるので、そ
のうちの代表的なデーターを記載し、他は必要に
応じて触れることにする。 大腸菌との関係で見た実験 (イ) クリームに乳酸菌と大腸菌を同時添加し、
37℃で発酵した場合。 (1) 雑菌により本発明のラクトバシラスの受
ける影響 大腸菌５細胞／ｇの場合：HW、Ｃおよ
びTIグループの何れのラクトバシラスも
何ら増殖に影響を受けなかつた。１万細
胞／ｇ添加の場合：HWおよびＣグループ
のラクトバシラスは10〜30％減の菌数であ
つた。これに対してTIグループは影響を
受けなかつた。 (2) ラクトバシラスにより大腸菌の受ける影
響 ラクトバシラスの存在しない場合に較
べ、大腸菌５細胞／ｇの場合に増殖菌数は
HWグループにより1/2〜1/3、Ｃグループ
により1/4〜1/20、TIグループにより1/40
〜1/300（菌により稍異る）に減ずること
が明らかとなつた。 大腸菌の１万細胞の場合は総じて５細胞
の場合の２倍と値、つまり、HWグループ
によつては変わらず、Ｃグループによつて
は1/2〜1/10、TIグループにより1/20〜1/
１５０の増殖菌数となつた。 (ロ) ラクトバシラス添加発酵開始48時間後、大
腸菌を添加した場合。 (1) 大腸菌によりラクトバシラスの受ける影
響 ラクトバシラスの増殖に及ぼす大腸菌の
影響は、５細胞、１万細胞の何れの添加の
場合でも殆んどないことが明らかとなつ
た。 (2) 大腸菌の受ける影響 ５細胞のものに於ては同時添加の場合に
較べて1/2〜1/20の菌数になつており、特
にTIグループの菌を先行培養している時
には、僅かに１×102個ないしそれ以下で
あつた。１万細胞添加の場合も同時添加の
１／２〜1/10程度であつた。 (ハ) 乳酸発酵終了後、大腸菌を添加した場合 (1) ラクトバシラスの受ける影響 何れのグループのラクトバシラスも殆ん
ど影響を受けないことが明らかとなつた。 (2) 大腸菌の受ける影響 HWおよびＣグループの菌の場合、(ロ)−
(2)の場合と余り変わらいがTIグループに
於ては、５細胞の添加では全く増殖が認め
られず、１万細胞の場合も37℃保存で１×
105〜２×105個、つまり、10倍から20倍程
度に増殖するに過ぎないことが明らかとな
つた。 枯草菌およびブドウ球菌との関係で見た実験 上記大腸菌に於けると同様の実験を行なつた
所、枯草菌の場合はラクトバシラスの増殖によ
り受ける干渉によつて、枯草菌の菌数は大腸菌
の場合のほぼ50％程度となり、またブドウ球菌
の場合は大腸菌の140％前後であつた。 以上の実験結果から明らかなように、本発明菌
のTIグループの添加増殖によつて雑菌の増殖は
強く抑えられ、保存期間を延長することが可能な
ことが明らかである。ことに今日、製造技術の進
歩によつて雑菌の侵入を極端に少なくすることが
可能になりつつあり、従つて、TIグループの菌
の添加と相俟つて、従来不安がられて来たクリー
ムの腐敗防止に大きく役立つものである。 さらに、クリームの種類についてであるが、ホ
イツプクリームの場合の増殖菌数はカスタードク
リームの７割前後であつた。 実施例 ２ スキムミルク10ｇ、砂糖10ｇ、寒天0.2ｇ、水
100mlを素材として、これを減菌し、本発明によ
る菌（微工研寄託番号6587、6588、6589、6590）
を無菌的に投与し、24時間醗酵せしめて作つたヨ
ーグルトを１日２個（朝、夕）、計約4000億細胞
を投与した時の菌と人体との関係を調べた。その
結果を第９表および第10表に示す。 １つの菌株によるヨーグルトは夫々５人の成人
に投与したが、極端に異なる成績を示すものは見
当らなかつたので、総合的結果を表中に纒めて記
入した。
【表】 上表にも示した様に、４株ともこれを大量かつ
長期間投与しても、生体への悪影響は全くない。
それのみでなく、すべての実験者から連続嚥下開
始３日目頃からすでに疲労感の減少と一層の快便
の症状が得られた。
【表】 滞溜時間については、排泄菌量が投与菌量の1/
１０にまで減少するに要する期間を以て示した。こ
の場合も糞便排泄量を１日300ｇとして計算した。
例えば6587菌においては、連日4000億細胞投与
し、連日1500億細胞排泄にしていたものが投与中
止して後400億細胞以下の排泄量に落ちるまでの
日数が、５人の実験者において、２日から３日の
間であつた事を示している。 以上は投与中止後、本発明菌の腸内よりの退去
が例外を除けば割合早いことを物語つている。 腸内在住菌については、被検者に固有のラクト
バシラスを含めて８種類の正常腸内細菌叢の菌属
を遂一追跡調査した。結果は第10表に示す如く、
投与中、投与中止後にかけて菌種の脱落など変動
は余り認められなかつた。 ラクトバシラスについてはかつて無害性、非病
原であることの証明に精一杯であつたが、今日で
は、ある量以上のラクトバシラスが生体の、こと
に粘膜部に生棲することが健康の維持に必要不可
欠であることが明らかとなつて来た。この様な知
見を踏えて、本発明菌によれば、非常に腐敗し易
いものとして現在も取扱いに最大の注意を払つて
いる食用クリームに、本発明菌の様に自己増殖
力、排他力が共に強い菌を注入し、あるいはさら
にそこで増菌せしめることは、クリームの腐敗延
長に役立つのみでなく、これを飲食することによ
り、腸内における腐敗物の減少その他整腸作用な
どに有効であることがわかる。 また最近開発されつつある抗生物質は、効果も
極めて大でありかつ抗菌スペクトルも広く、従つ
て人体に投与するときに腸内細菌叢のかなりの動
揺も時として生じることになる。このような場合
に本発明菌を多量投与すれば、薬物投与停止後の
菌叢の修復、および健康体えの恢復に役立つ。以
上に述べた詳細な説明を要約すれば、本発明乳酸
桿菌は、従来長く知られるL.bulgaricusなどより
も生体内での活動力は強く、反対にL.deodorans
よりも弱い、そのためL.deodoransでは強過ぎる
が、従来菌では心もとないような局面での活用が
存する。すなわち保健用として口腔用、内復用、
坐薬（婦人用を含む）、さらにナプキンやタンポ
ンとの共存や混在なども有用である。この事を更
に簡略に述べれば、L.deodoransは菌の交代力を
有するが故に医薬的活用面が適しているのに対
し、L.clearansは生体内での交代力まではなく、
唯同棲的で、その間本菌特有の仕事を行う故、保
健的ないし健康指向の面での活用が適切である。
よつて本発明は保健ならびに産業上極めて大きな
有用性を有している。
【図面の簡単な説明】
第１図は本発明菌および比較菌をクリーム中で
培養したときの増殖曲線および培地PHの変化を示
すグラフであり、第２図，，はブドウ球
菌、大腸菌、枯草菌のクリーム中での増殖曲線を
示すグラフである。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 下記のの性質、、およびを有するこ
    とを特徴とする新規ラクトバシラス・クリアラン
    ス： 肉エキス５ｇ、ペプトン５ｇ、ブドウ糖１
    ｇ、CaCO31ｇ、水１（PH中性）にNa2S・
    9H2O0.5ｇ及び／又はNH30.5ml（100％アンモ
    ニアとして）を添加したときに、Na2S・9H2O
    とNH3の双方を減少せしめることができる； ステフアンソン・ウエサムの培地〔（Ｓ−Ｗ）
    と略す；KH2OP41ｇ、MgSO4・7H2O0.7ｇ、
    NaCl1ｇ、（NH4）2HPO44ｇ、FeSO4・
    7H2O0.03ｇ、ブドウ糖５ｇ〕にビタミン
    〔Ａ：900国際単位、B1：１mg、B2：１mg、
    B6：１mg、B12：5γ、ニコチン酸アミド：16
    mg、パントテン酸カルシウム：８mg、Ｃ：64
    mg、D2：120国際単位〕及びカザミノ酸１ｇよ
    りなる培地に該菌を培養し、その対数増殖期に
    Na2S・9H2O0.05ｇ及び／又はNH30.5mlを添
    加しても発育促進作用を示さない； 自然分離菌はNa2S・9H2Oに対して従来公知
    の乳酸菌よりは強く、ラクトバシラス・デオド
    ランスよりは弱い抵抗性を示す； グラム陽性菌、桿状、運動性なく、カタラー
    ゼ陰性、硝酸塩を還元せず、ゼラチンを分解せ
    ず、インドール、硫化水素を生成せず、ブドウ
    糖、乳糖よりの乳酸形成能力は高く、酢酸、添
    加によつて発育促進される。
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