JPH046345B2 - - Google Patents
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- JPH046345B2 JPH046345B2 JP18238087A JP18238087A JPH046345B2 JP H046345 B2 JPH046345 B2 JP H046345B2 JP 18238087 A JP18238087 A JP 18238087A JP 18238087 A JP18238087 A JP 18238087A JP H046345 B2 JPH046345 B2 JP H046345B2
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Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
産業上の利用分野
本発明は微生物を培養して医薬、農薬、工業用
薬品等を製造する工程中で菌体分離を効率良く行
う為の凝集処理方法に関するものである。 従来の技術 微生物の生産する抗生物質、ホルモン、酵素素
等を利用する目的で微生物を培養する発酵工業は
数多い。これら発酵工業における培養方法は、各
種の栄養を含む培養液中に微生物を浮遊させて行
う方法が一般的である。培養が終了した段階で加
熱やPH調整を行つた後、デカンターやプリコート
フイルター等により微生物菌体と培養液を分離す
る。 従来の技術の問題点 上記培養液中の微生物は過性が悪い為、多量
の硅藻土を過助剤やプリコート剤として使用す
るが、これら硅藻土の混入した菌体は焼却もでき
ず投棄する他はなかつた。菌体が必要な場合はデ
カンターを用いるが、微生物菌体の沈降性は悪
く、処理能力が低い上、菌体ケーキの含水率も高
かつた。 問題点を解決する方法 菌体を凝集させる事により分離効率は大幅に高
まる。 しかし、鉄塩やアルミニウム塩の如き無機凝集
剤を添加すると液や菌体を汚染する。廃水処理の
一分野である生物処理法においては、微生物の集
合体である汚泥の脱水に有機高分子凝集剤を使つ
ている。しかし、これら汚泥中の微生物は自己凝
集能を持ち、集合体を形造つているのに対し、培
養液中の微生物は集合する事なく分散している為
か有機高分子凝集剤を添加しても凝集しない。 本発明者は種々検討の結果、菌体分散液のPHを
2.0〜4.5望ましくは2.5〜4.0に調整しポリカルボ
ン酸塩を添加混合する事によつて菌体に被凝集能
を付与し、カチオン系有機高分子凝集剤を添加す
る事により菌体を凝集せしめ、効率良く液と分離
する事に成功した。 本発明に用いるポリカルボン酸塩としては
CMC、アルギン酸塩、ポリアクリル酸塩、ポリ
アクリルアミド加水分解物、ポリアクリロニトリ
ル加水分解物、ポリアクリル酸エステル加水分解
物等があげられ、対イオンとしてナトリウム、カ
リウム、アンモニウム等1価のカチオンを有する
水溶性高分子が使用される。 ポリカルボン酸塩の添加はPH調整の前後任意の
時点で行う事ができ、PH調整と同時に行う事もで
きる。 本発明に用いるポリカルボン酸塩はPH7.0にお
ける1規定食塩水中の極限粘度が1dl/g以上望
ましくは2dl/g以上の高分子が使用され、菌体
乾物当り0.1%〜2%添加混合する。ポリカルボ
ン酸塩の添加混合後、カチオン性有機高分子凝集
剤を添加する事により菌体を凝集させる。 本発明に使用される有機高分子凝集剤としては
アクリル系カチオンモノマーとアクリルアミドの
共重合体の中で1.5meq/g〜4.5meq/gのカチ
オン当量を持つものが有効であり、望ましくは
2meq/g〜4meq/gのカチオン当量を持つもの
が特に効果的である。分子量は高い程凝集力が強
く1規定食塩水中における極限粘度5dl/g以上
のものが使用される。 本カチオン性凝集剤製造に供されるアクリル系
カチオンモノマーとしてはジアルキルアミノアル
キル(メタ)アクリルアミド、ジアルキルアミノ
アルキル(メタ)アクリレート及びこれらをハロ
ゲン化アルキル、ハロゲン化ベンジル、ジアルキ
ル硫酸等で四級化したカチオンモノマーがあげら
れ、これら2種類以上を共重合させる事が可能で
ある。上記カチオンモノマー中のアルキル基は通
常メチル基又はエチル基等の低級アルキル基から
選ばれる。 本目的に使用するカチオン性高分子凝集剤は、
カチオン性高分子凝集剤相互は勿論、若干量のア
ニオン性又はノニオン性の高分子凝集剤を混合す
る事も可能である。 かかるカチオン性高分子凝集剤は菌体乾物に対
し少なくとも0.2%以上望ましくは0.5%以上の添
加を必要とする。 作 用 微生物菌体表面にはカルボキシル基とアミノ基
が共存し、等電点以上のPHでは負に帯電し、以下
では正に帯電する。 等電点は約4〜5付近のPHであり、本発明の適
用範囲では菌体は正に帯電している。この為、液
中のポリカルボン酸は菌体表面に吸着する事によ
つて菌体相互を結合し、集合体をつくる事により
被凝集能を持つと考えられる。 実施例 1 グルコース、酵母エキス、栄養塩からなる培養
液にてaspergillusを培養した菌体濃度1%の液
を試験に供した。 本培養液200mlを容量500mlのガラスビーカーに
所定量の高分子水溶液を添加後、先端に直径5mm
長さ20mmの丸棒を3本付した撹拌棒を用いて
1000rpmで20秒間撹拌した。ポリカルボン酸塩は
0.1%水溶液として添加し上記の撹拌を行い、塩
酸にてPH調整をした後、カチオン性高分子を0.2
%水溶液として添加し再度同様に撹拌し凝集を行
つた。 凝集液を面積38cm2の40メツシユ・ナイロンスク
リーンにて重力過を行つた後、圧力4Kg/cm2に
て30秒間プレスして得たケーキの含水率を測定し
た。 ポリカルボン酸塩とカチオン性高分子の添加量
は培養液に対して各100ppmであり、含水率測定
条件は105℃15時間である。下記表中、「100ml
過時間」とは重力過において初期液100mlが
流出するまでに要する時間である。 供試凝集剤 Γポリカルボン酸塩 アルギン酸ソーダ[η]=3.1dl/g Γカチオン性高分子 メタクリロイロキシエチルトリメチル アンモニウムクロライド・アクリルアミド 共重合物 [η]=8.0dl/g カチオン当量値=3.3meq/g 試験結果
薬品等を製造する工程中で菌体分離を効率良く行
う為の凝集処理方法に関するものである。 従来の技術 微生物の生産する抗生物質、ホルモン、酵素素
等を利用する目的で微生物を培養する発酵工業は
数多い。これら発酵工業における培養方法は、各
種の栄養を含む培養液中に微生物を浮遊させて行
う方法が一般的である。培養が終了した段階で加
熱やPH調整を行つた後、デカンターやプリコート
フイルター等により微生物菌体と培養液を分離す
る。 従来の技術の問題点 上記培養液中の微生物は過性が悪い為、多量
の硅藻土を過助剤やプリコート剤として使用す
るが、これら硅藻土の混入した菌体は焼却もでき
ず投棄する他はなかつた。菌体が必要な場合はデ
カンターを用いるが、微生物菌体の沈降性は悪
く、処理能力が低い上、菌体ケーキの含水率も高
かつた。 問題点を解決する方法 菌体を凝集させる事により分離効率は大幅に高
まる。 しかし、鉄塩やアルミニウム塩の如き無機凝集
剤を添加すると液や菌体を汚染する。廃水処理の
一分野である生物処理法においては、微生物の集
合体である汚泥の脱水に有機高分子凝集剤を使つ
ている。しかし、これら汚泥中の微生物は自己凝
集能を持ち、集合体を形造つているのに対し、培
養液中の微生物は集合する事なく分散している為
か有機高分子凝集剤を添加しても凝集しない。 本発明者は種々検討の結果、菌体分散液のPHを
2.0〜4.5望ましくは2.5〜4.0に調整しポリカルボ
ン酸塩を添加混合する事によつて菌体に被凝集能
を付与し、カチオン系有機高分子凝集剤を添加す
る事により菌体を凝集せしめ、効率良く液と分離
する事に成功した。 本発明に用いるポリカルボン酸塩としては
CMC、アルギン酸塩、ポリアクリル酸塩、ポリ
アクリルアミド加水分解物、ポリアクリロニトリ
ル加水分解物、ポリアクリル酸エステル加水分解
物等があげられ、対イオンとしてナトリウム、カ
リウム、アンモニウム等1価のカチオンを有する
水溶性高分子が使用される。 ポリカルボン酸塩の添加はPH調整の前後任意の
時点で行う事ができ、PH調整と同時に行う事もで
きる。 本発明に用いるポリカルボン酸塩はPH7.0にお
ける1規定食塩水中の極限粘度が1dl/g以上望
ましくは2dl/g以上の高分子が使用され、菌体
乾物当り0.1%〜2%添加混合する。ポリカルボ
ン酸塩の添加混合後、カチオン性有機高分子凝集
剤を添加する事により菌体を凝集させる。 本発明に使用される有機高分子凝集剤としては
アクリル系カチオンモノマーとアクリルアミドの
共重合体の中で1.5meq/g〜4.5meq/gのカチ
オン当量を持つものが有効であり、望ましくは
2meq/g〜4meq/gのカチオン当量を持つもの
が特に効果的である。分子量は高い程凝集力が強
く1規定食塩水中における極限粘度5dl/g以上
のものが使用される。 本カチオン性凝集剤製造に供されるアクリル系
カチオンモノマーとしてはジアルキルアミノアル
キル(メタ)アクリルアミド、ジアルキルアミノ
アルキル(メタ)アクリレート及びこれらをハロ
ゲン化アルキル、ハロゲン化ベンジル、ジアルキ
ル硫酸等で四級化したカチオンモノマーがあげら
れ、これら2種類以上を共重合させる事が可能で
ある。上記カチオンモノマー中のアルキル基は通
常メチル基又はエチル基等の低級アルキル基から
選ばれる。 本目的に使用するカチオン性高分子凝集剤は、
カチオン性高分子凝集剤相互は勿論、若干量のア
ニオン性又はノニオン性の高分子凝集剤を混合す
る事も可能である。 かかるカチオン性高分子凝集剤は菌体乾物に対
し少なくとも0.2%以上望ましくは0.5%以上の添
加を必要とする。 作 用 微生物菌体表面にはカルボキシル基とアミノ基
が共存し、等電点以上のPHでは負に帯電し、以下
では正に帯電する。 等電点は約4〜5付近のPHであり、本発明の適
用範囲では菌体は正に帯電している。この為、液
中のポリカルボン酸は菌体表面に吸着する事によ
つて菌体相互を結合し、集合体をつくる事により
被凝集能を持つと考えられる。 実施例 1 グルコース、酵母エキス、栄養塩からなる培養
液にてaspergillusを培養した菌体濃度1%の液
を試験に供した。 本培養液200mlを容量500mlのガラスビーカーに
所定量の高分子水溶液を添加後、先端に直径5mm
長さ20mmの丸棒を3本付した撹拌棒を用いて
1000rpmで20秒間撹拌した。ポリカルボン酸塩は
0.1%水溶液として添加し上記の撹拌を行い、塩
酸にてPH調整をした後、カチオン性高分子を0.2
%水溶液として添加し再度同様に撹拌し凝集を行
つた。 凝集液を面積38cm2の40メツシユ・ナイロンスク
リーンにて重力過を行つた後、圧力4Kg/cm2に
て30秒間プレスして得たケーキの含水率を測定し
た。 ポリカルボン酸塩とカチオン性高分子の添加量
は培養液に対して各100ppmであり、含水率測定
条件は105℃15時間である。下記表中、「100ml
過時間」とは重力過において初期液100mlが
流出するまでに要する時間である。 供試凝集剤 Γポリカルボン酸塩 アルギン酸ソーダ[η]=3.1dl/g Γカチオン性高分子 メタクリロイロキシエチルトリメチル アンモニウムクロライド・アクリルアミド 共重合物 [η]=8.0dl/g カチオン当量値=3.3meq/g 試験結果
【表】
実施例 2
実施例1と同一の菌体培養液を塩酸にてPH3.5
に調整し試験に供した。PH調整を事前に行う以外
は実施例1と同様の操作を、表2に記載の凝集剤
添加量にて、実施例1と同様の重力過試験を行
つた。 試験結果
に調整し試験に供した。PH調整を事前に行う以外
は実施例1と同様の操作を、表2に記載の凝集剤
添加量にて、実施例1と同様の重力過試験を行
つた。 試験結果
【表】
実施例 3
グルコース、酵母エキス、栄養塩から成る培養
液にてStreptmycesを培養した菌体濃度1%の液
のPHを塩酸にて3.0に調整し試験に供した。 下記の凝集剤を用いて実施例1と同様の操作に
より重力過試験を行つた。 供試凝集剤
液にてStreptmycesを培養した菌体濃度1%の液
のPHを塩酸にて3.0に調整し試験に供した。 下記の凝集剤を用いて実施例1と同様の操作に
より重力過試験を行つた。 供試凝集剤
【表】
【表】
試験結果
【表】
【表】
効 果
本発明により微生物菌体は容易に凝集し、母液
と菌体の分離効率は大幅に向上する。 その為、過助剤として従来使われてきた多量
の硅藻土が不要になる為、菌体を焼却処理する事
も可能になる。 洗浄が容易になる為、有価物の回収率も向上す
る等の利点がある。
と菌体の分離効率は大幅に向上する。 その為、過助剤として従来使われてきた多量
の硅藻土が不要になる為、菌体を焼却処理する事
も可能になる。 洗浄が容易になる為、有価物の回収率も向上す
る等の利点がある。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 発酵液中の微生物菌体をカチオン性高分子凝
集剤を用いて凝集させる前処理として、発酵液の
PHを2.0〜4.5に調整する事、及び、1規定食塩水
中における極限粘度が1dl/g以上のポリカルボ
ン酸塩を添加する事の2点を必須用件とする微生
物菌体の凝集分離方法。 2 カチオン性高分子凝集剤のイオン当量値が
1.5〜4.5meq/gであり、且つ1規定食塩水中に
おける極限粘度が5dl/g以上である事を特徴と
する特許請求の範囲第1項に記載する微生物菌体
の凝集分離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18238087A JPS6427463A (en) | 1987-07-23 | 1987-07-23 | Separation of cell |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18238087A JPS6427463A (en) | 1987-07-23 | 1987-07-23 | Separation of cell |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6427463A JPS6427463A (en) | 1989-01-30 |
| JPH046345B2 true JPH046345B2 (ja) | 1992-02-05 |
Family
ID=16117300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18238087A Granted JPS6427463A (en) | 1987-07-23 | 1987-07-23 | Separation of cell |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6427463A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20130230073A1 (en) * | 2010-11-25 | 2013-09-05 | Carl Zeiss Smt Gmbh | Method and arrangement for determining the heating condition of a mirror in an optical system |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001138744A (ja) | 1999-11-18 | 2001-05-22 | Aisin Seiki Co Ltd | 車両用サンルーフのサンシェード |
-
1987
- 1987-07-23 JP JP18238087A patent/JPS6427463A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20130230073A1 (en) * | 2010-11-25 | 2013-09-05 | Carl Zeiss Smt Gmbh | Method and arrangement for determining the heating condition of a mirror in an optical system |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6427463A (en) | 1989-01-30 |
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