JPH0478616B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

（産業上の利用分野） 本発明は抗真菌性用途、特に抗カンジダ菌用途
（公知のカンジダ症疾患の治療）に用いる薬剤組
成物に関する。 （従来技術） カンシダ症、特に膣カンジダ症の治療に最も通
常に用いられる抗生物質はポリエン類、特にナイ
スタチン（nistatin）である。そのようなポリエ
ン類は局所塗布に用いられる場合必ずしも効果的
であるとは限らず、全身投与は特定の患者に腎臓
の欠陥を引き起こすと思われる。 ミコナゾール（miconazole）を基礎とする抗
真菌性クリームおよびダステイングパウダーがジ
ヤンセン薬品会社（Janssen Pharmaceutical
Ltd.）からダクタリン（Daktarin）の商標で市
販されている。この生成物を用いた場合には刺激
があると報告されているので、局所塗布には別の
生成物が望まれている。 全身投与の殺真菌薬として他のイミダゾール、
ケトコナゾールが使用されているが、最近ケトコ
ナゾールで治療した患者に肝炎や肝臓の欠陥が報
告されている（セイフテイ・オブ・メデイスン
ズ・データ・シート委員会（Committee for
Safety of Medicines Data Sheet）1983年４月
およびスチユワート（J.C.M.Stewart）らによる
ニユー・アンチフアンガル・アンド・アンチバイ
ラル・ケモセラピイ（New antifungal and
antiviral chemotherapy）の記事、英国メデイ
カルジヤーナル、286、1802−1804（1983）参照）。 従つて、カンジタ症治療のための新たな抗生物
質の開発が望まれている。 「発明の要約」を記載し、その後にさらに従来
技術を記載する。それらがなければその内容が明
らかにならないからである。 （発明の要約） 本発明者らは、驚くべきことに、肝汁酸および
その簡単な誘導体が抗カンジダ活性を有すること
を見出した。 本発明の重要な特徴は、胆汁酸または胆汁酸の
COOH基とアミノ基および酸基を含む鎖原子
（chain atom）数３〜６のアミノ酸のNH₂との
間に形成される結合体（conjugate）である誘導
体、もしくはその様な酸または結合体の塩の少な
くとも１種の形を有する胆汁酸成分と、(2)医学的
に許容し得る局所用賦形剤を含有する局所用抗真
菌性医薬組成物に存在する。 本発明の別の特徴は、局所的真菌疾患、好まし
くはカンシダ症、および特に膣カンジダ症の治療
に用いる薬剤の製造のために胆汁酸成分を用いる
ことにある。 胆汁酸成分はまた真菌の成長に対し他の薬剤組
成物を保護するのに用いられる。従つて、本発明
の第２の特徴によれば、本発明は固体状または半
固体状の薬剤組成物を提供し、該組成物は少なく
とも以下の三成分： (1) 活性成分、 (2) 薬剤的に許容し得る賦形剤、および (3) 局所用および他のルートの投与形態に拘ら
ず、薬剤組成物の所望の目的に適合し得る上記
胆汁酸成分 を含む。この場合、活性成分自体は明らかに肝汁
酸成分ではない。即ち、前記胆汁酸成分は、真菌
類の攻撃に影響を受け易い常套の薬剤物質である
活性成分に対する添加剤である。 上述の胆汁酸は一般式： ［式中、Meはメチル基、Ｘは水素原子またはヒ
ドロキシル基（7α−位）、Ｙは水素またはヒドロ
キシル基（12α−位）およびＺは水素またはヒド
ロキシル基（6α−位）を示す］ を有する化合物である。 これらの化合物は： コール酸 3α、7α、12α−トリヒドロキシ−5β−
コラン−24−酸 デオキシコール酸 3α、12α−ジヒドロキシ−5β
−コラン−24−酸 リトコール酸3α−ヒドロキシ−5β−コラン−24
−酸 ケノデオキシコール酸 3α、7α−ジヒドロキシ
−5β−コラン−24−酸 ヒオデコール酸 6α、7α−ジヒドロキシ−5β−
コラン−24−酸 ヒオデオキシコール酸（Hyodeoxychloic acid）
お6α−ヒドロキシ−5β−コラン−24−酸 胆汁酸の塩は薬学的に許容し得るものであれば
よく、特に許容し得るものとしてナトリウムが挙
げられる。結合体はグリシン（NH₂CH₂COOH）
およびタウリン（NH₂CH₂CH₂SO₃H）との結合
体が例示され、アミノ酸のNH₂基と胆汁酸のカ
ルボキシル酸基との間に形成されるアミドであ
る。好ましくはアミノ酸は３または４の鎖原子数
を有する。 （第２従来技術の説明） 胆汁酸は種々の哺乳類、例えばヒトで製造さ
れ、大量に排泄される。このことは胆汁酸がヒト
に対して毒性を有するとは考えられないことを示
している。 種々の胆汁酸誘導体が胆汁の流れを増大するた
めに静脈内または経口的に、例えば催胆薬として
投与されてきた、ジヒドロコール酸（３，７，12
−トリオキソ−5β−コラン−24−酸）が最も活
性である。他に、牛の胆のう抽出物、コール酸、
グリコール酸ナトリウムおよびタウロコール酸ナ
トリウムが用いられる。参考として、「ザ・フア
マシユーテイカル・ベイシス・オブ・セラピユー
テイクス（The Pharmaceutical Basis of
Therapeutics）」（グツドマン（L.S.Goodman）
およびギルマン（A.Gilman））、第３版、マクミ
ラン社、ニユーヨーク1965、第1003〜1007頁およ
びメルクインデツクス、第10版、1983、エントリ
ー2183および8951が挙げられる。 ケノデオキシコール酸およびウルソデオキシコ
ール酸は胆石の予防と溶解のために経口投与され
た（参考文献として、オツクスフオードテキスト
ブツク・オブ・メデイスン（ウエザーオール
（Ed.D.J.Weatherall）、レトリングハム（J.G.G.
Ledlinghan）およびワレル（D.A.Warrell）、オ
ツクスフオードユニバーシテイープレス、第１
巻、セクシヨン12〜171（1983）、ザ・ランセツト
（The Lancet）［ベル（G.D.Bell）ら、1972年12
月９日、第1213〜1217頁］およびザ・ニユー・イ
ングランド・ジヤーナル・オブ・メデイスン［ダ
ンジンガー（R.G.Danzinger）ら、286、１〜８、
（1972）］が挙げられる）。 アミノ酸と結合したコール酸がバクテリア、例
えばバシルススブチリス（Bacillus subtilis）お
よびサツカロミセスセレビシエおよびカールスバ
ーゲンシス（Sccharomyces cerevisiae and
carlsbergensis）の成長に禁止的に働くことが知
られている。参考として、青沼（S.Aonuma）ら
の薬学研究、38、381〜392（1967）が挙げられる。
しかしながら、試験された化合物は大腸菌
（Escherichia coli）バクテリアおよび真菌性ア
スペリルスニガー（Asperillus niger）には効果
がなかつた。 抗カンジダ調製剤、フアンジゾーン
（Fnugizone）が静脈内投与され、アンフオテリ
シンＢと41mgの（アンフオテリシンを溶解するた
めの溶解剤として）デオキンコール酸ナトリウム
およびリン酸ナトリウム緩衝液を含有する20mlの
薬瓶の形で販売されている。毒性試験がフアンジ
ゾーンおよびデオキシコール酸ナトリウムに対
し、斎藤（K.Saito）により実施された（オドン
トロジー（Odontology）（日本歯科大学報）６
(5)、650〜671（1979））。この文献のどこにもデオ
キシコール酸ナトリウムが殺真菌活性を有するこ
とは示唆されていない。「フアンジゾーン」に関
する他の文献はガデブスス（H.H.Gadebusth）
らによるザ・ジヤーナル・オブ・インフエクシヨ
ンズ・デイジージズ（The Journal of infection
diseases）134、423−427（1976）およびフイツシ
ヤー（Paul B.Fisher）ら、インビトロ（In
vitro）、12、133−139（1976）が挙げられる。 マツキントツシユ（M.E.Macintosh）および
プリツチヤード（R.H.Pritchard）、ジエネツト
（Genet）、レス（Res.）カムブ（Camb.）、４、
320−322（1963）は表面活性剤ドデシル硫酸ナト
リウムおよびデオキシコール酸ナトリウムのアス
ペルジルスニドウランズ（Aspergillus
Nidulans）に対する影響を、それらが成長を促
すことを期待して調査された。デオキシコール酸
ナトリウムは成長を助長する効果があると結論
し、この発明がなされた後は彼等はデオキシコー
ル酸ナトリウムはニユーロスポラ（Neurospora）
およびシンセフアラストラム
（Syncephalastrum）の成長を助長することがわ
かつたと言及する。 上記開示からみれば、驚くべきことに、本発明
では胆汁酸もしくはその誘導体、例えば、デオキ
シコール酸ナトリウム、コール酸ナトリウム等は
カンジダ菌株に少なくとも静真菌作用があること
を見出した。 （図面の簡単な説明） 以下の実施例は図面に基づいて説明する。 第１図は種々の量のコール酸ナトリウムの存在
下におけるカンジダアルビカンス（Candida
albicans）の成長を示すプロツトを示す。 第２図はカンジダアルビカンスの未処理細胞の
写真である。 第３〜６図は、カンジダアルビカンスを種々の
量の異なる胆汁酸成分、すなわち、コール酸、ケ
ノデオキシコール酸、リトコール酸またはデオキ
シコール酸のナトリウム塩で処理した場合の細胞
の写真である。 （発明の内容） 胆汁酸成分は局所塗布に適当な常套の方法、例
えば、洞内塗布（膣、尿道または直腸）用のカプ
セル、坐剤またはペツサリー、あるいはゲル、軟
膏、クリーム等、ダステイングパウダーもしくは
エアロゾルスプレーに配合してもよい。坐剤また
はペツサリーは、例えば、体温で溶解するか、ま
たは体液により溶解するキヤリアーとして、カカ
オ油、グリセリン化ゼラチンまたはポリエチレン
グリコールを含んでもよい。胆汁酸成分は油性ま
たはワツク状バインダーにより軟膏またはクリー
ムとして調剤してもよい。水性層の存在下にクリ
ームとしてもよい。他の形態の例としては、液体
状希釈剤中に成分を含有するカプセル、成分とタ
ルク等とを混合したダステイングパウダーおよび
成分および不活性プロペラントを含有するエアロ
ゾルボンベが挙げられる。 好ましい形態としては、例えば、それぞれの成
分の効能に基づいて１〜５重量％の胆汁酸成分を
含む軟膏またはクリームである。 催胆薬または胆石溶解のための胆汁酸成分をそ
の様な用途に必要な量含有するコール酸の経口投
与用の錠剤は本発明の範囲には含まれない。他の
錠剤およびピル、例えば膣内投与用のものは本発
明の範囲に含まれる。それらは所望の目的に応じ
て常套の不活性賦形剤を含有してもよい。上記ペ
ツサリーは英国特許明細書第2047093A号（ナシ
ヨナル・リサーチ・デイベロツプメント・コーポ
レイシヨン）に開示された如きウレタン基を通し
て架橋し、ポリエチレンオキシドを含む残基を有
するポリマー状キヤリアーを賦形剤として用いる
除放性組成物として配合してもよい。 本発明の特に好ましい態様では、胆汁酸は抗炎
症剤、特にステロイド系、最も好ましくはコルチ
コステロイド系のもの、例えばベタメタゾン、フ
ルオシノロンアセトニド、ベクロメタゾンジプロ
ピオネート、ヒドロコルチゾン、コルチゾンまた
はコルチゾールと組み合わせてもよい。これらの
組成物は皮膚の真菌性疾患の治療に有効である。 また本発明の組成物はミコナゾールと同種の局
所的真菌性感染症の治療に有効であると予想され
る。 胆汁酸およびその誘導体はまた、口部または上
部呼吸導へ口内または鼻孔内塗布のためにエアロ
ゾルとして配合してもよいと考えられる。 本発明の第２の特徴、すなわち、胆汁酸または
その誘導体を真菌の攻撃を抑制するために、薬剤
調製、例えば錠剤、カプセル、クリーム、軟膏、
ペツサリーおよび坐剤として使用する場合に、錠
剤は胆汁酸成分で被覆してもよく、他に真菌の攻
撃に抵抗性を付与するのに効果的な少量の胆汁酸
成分を含む調製を用いてもよい。これは通常、治
療、特に催胆薬としての使用量より少ない。一般
に１投与ユニツトにつき胆汁酸またはその誘導体
の量は１〜10mg、特に約５mgである。この方法に
おいて、特に真菌の攻撃が問題である湿式造粒工
程によつて得られた錠剤の保護が可能となる。 以下の実施例により本発明を説明する。実施例
中、重量／容量として表わされる量は、即ち、
ｇ／100mlである。 実施例 １ 使用したカンジダアルビカンス（Candida
albicans）の株はA39（ブーツPLC、ノツチンガ
ム、イングランドによつて供給される臨床用単離
物）およびCMI45348（コモンウエルス・マイコ
ロジカル・インステイテユート
（Commonwealth Mycological lustitute）、フエ
リーレイン、キユー、サリーTW9 3AF、イング
ランドから通常の研究用デポジツトとして市販）
であつた。 前記カンジダアルビカンスをシエイクカルチヤ
ー中の水性媒体中において、オービタル・インキ
ユベータ中で140rpmで30℃、18時間育成するこ
とによりスターターカルチヤーを得た。使用した
媒体は組成： トリス1.2ｇ；NaCl 0.1ｇ；アンモニウムタ
ルトース 5.0ｇ；アンモニウムニトレート
1.0ｇ；KH₂PO₄ 1.0ｇ；MgSO₄・7H₂O 0.5
ｇ；CaCl₂ 0.1ｇ；グリコース100ｇ；及びビチ
オン１×10^-5ｇ（１中） を有した。これにミネラル塩溶液（H₃BO₃ ６
mg；（NH₄）₆MoO₂₄・4H₂O 26mg；FeCl₃・6H₂O
100mg；CuSO₄5HO₂ 40mg；MnCl₂・4H₂O ８
mg；およびZnCI₂ 200mg（ミネラル塩溶液100ml
につき））を１につき1.0ml加えた。次いで、こ
のスターターカルチヤーの５mlアリコートを同じ
組成を有する別の媒体の100ml容積に移し、それ
に所望のテスト濃度のコール酸ナトリウム水溶液
を加えた。対照実験として、コール酸ナトリウム
は何も加えなかつた。これらのカルチヤーを
140rpm、30℃でインキユベートし、光学濃度を
所定の間隔で420ｍで測定した。 使用したコール酸のナトリウム塩の濃度（塩と
して計算した）および反応は以下の通りであつ
た： 対 照 反応なし 0.001％ｗ／ｖ 反応なし 0.01％ｗ／ｖ 反応なし 0.1％ｗ／ｖ 0.2％ｗ／ｖ 重要な反応なし 0.3％ｗ／ｖ 0.4％ｗ／ｖ 第１図に示す如き反応 0.5％ｗ／ｖ ３時間後成長なし 0.1％ｗ／ｖ 〃 第２図はカンジダアルビカンス（A39株）の通
常の対照細胞を示し、第３図は0.4％ｗ／ｖコー
ル酸ナトリウムの存在下に30℃、６時間成育させ
た同一株の細胞を示す。第３図に示す細胞と通常
のカンジダアルビカンスの細胞の間の基本的の違
いは、(a)第３図においてレモン型のイースト状セ
ルは完全に分割していないが、比較的厚い「ネツ
ク」部によつて結合されており、(b)第３図におけ
る細胞壁には割れがあり（一方、通常のカンジダ
細胞にはそれらはない）。第３図の細胞の形態は
アンチミクロバイアル・エージエンツ・アンド・
ケモセラピー（Antimicrobial Agents and
Chemotherapy）、７、704−711（1975）において
デノリン（S.De Ncllin）およびボージヤーズ
（M.Borgers）によつて観察された抗真菌剤ミコ
ナゾールで処理したカンジダアルビカンス、特に
その第２図に類似している。 実施例 ２ ケノデオキシコール酸、リトコール酸およびデ
オキシコール酸のナトリウム塩を用いて実施例１
の工程を繰り返した。これらの塩はコール酸ナト
リウムよりも水に対する溶解性が小さい。溶解性
の問題の故に、添加剤の異なる濃度のでの量的な
データが得られなかつた。それにも関わらず、実
験データは各々の塩が生物の細胞構造に第３図に
示したネツク効果と同様の影響を示した。この影
響はミコナゾール処置で見られたものであるの
で、これらの他の胆汁酸の塩もまた抗カンジダ効
果を有するものと結論する。 詳しくは、ケノデオキシコール酸塩処理（１％
ｗ／ｖナトリウム塩）はイーストセルを30℃で６
時間成長後不十分に分割し、長い菌糸状の構造が
増加した（第４図参照）。前記ネツク状効果が明
らかに見られる。リトコール酸塩処理（１％ｗ／
ｖ、ナトリウム塩）は30℃で６時間成長の後同様
の効果が見られた（第５図）。デオキシコール酸
塩0.05％ｗ／ｖ、ナトリウム塩）を用いた場合
も、細胞の長い「ネツキング」および不完全分割
が見られた（第６図）。 実施例 ３ 寒天上でのカンジダアルビカンスA39を抑制す
る本発明の種々の胆汁酸、およびその誘導体の効
果をスプレツドプレートテスト（spread plate
test）およびシーデイツドプレートテスト
（seaded plate test）で表わした。プレートは９
cmの直径を有した。両者のテストにおいてカンジ
ダ生物体の10⁷〜10⁸細胞／mlのカルチヤーを用い
た。シーデイドプレートテストにおいて１mlのカ
ルチヤーを寒天中に分散し、総容量20mlとし、次
いで寒天を固化させた。スプレツドプレートテス
トにおいて0.1mlのカルチヤーを既に固化した寒
天上に撒いた。胆汁酸およびその誘導体の１％
ｗ／ｖ溶液を蒸留水、所望によりエタノール中で
形成し、膜過により殺菌した。殺菌５mmデイス
ク（ワツトマンAA）をこれらの溶液中に浸漬
し、殺菌ペトリ皿において乾燥させた。次いで、
それらをプレートの表面上に置き、１デイスク当
たり胆汁酸またはその誘導体の略0.2mgを与えた。
次いでプレートを30℃で24時間インキユベートし
た。透明な区域によつて表わされた抑制ゾーンを
記録した。略どのケースにおいても、それらはデ
イスクのエリアを超えていた。カンジダアルビカ
ンスは最初の５mmのエリアからインキユベーシヨ
ン中に外見上成長し、胆汁酸またはその誘導体は
それを抑制する剤として十分有力であつた。 結果を以下の表に示す。多くの胆汁酸およびそ
の誘導体が両テストにおいて優れた抑制効果を示
した。それらの２つのシーデイドプレートテスト
においてだけ効果的であつたが、それらのそのテ
ストにおける性能はある種の抗カンジダ活性を示
している。

【表】

【表】 【図面の簡単な説明】

第１図は種々の量のコール酸ナトリウムの存在
下におけるカンジダアルビカンス（Candida
Albicans）の成長を示すプロツトを示す。 第２図はカンジダアルビカンスの未処理細胞
（生物の形態）を表す顕微鏡写真（図面の代用写
真）である。 第３〜６図はカンジダアルビカンスを種々の量
の異なる胆汁酸成分、即ち、コール酸、ケノデオ
キシコール酸、リトコール酸またはデオキシコー
ル酸のナトリウム塩で処理した場合の細胞（生物
の形態）を表わす顕微鏡写真（図面の代用写真）
である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ (1) 一般式： ［式中、Meはメチル基を示し、Ｘ、Ｙおよび
   Ｚはそれぞれ独立して、水素原子またはヒドロ
   キシル基を示す。］ を有する肝汁酸または上記式中のCOOH基と
   アミノ基および酸基を含む鎖原子数３〜６のア
   ミノ酸のNH₂基との間に形成される結合体で
   ある誘導体、もしくはそのような酸または結合
   体の医薬的に許容し得る塩の少なくとも１種を
   有する肝汁酸成分および (2) 医薬的に許容し得る局所用賦形剤 を含有する局所用抗真菌性医薬組成物。 ２ カンジタ症の治療に使用する第１項記載の医
   薬組成物。 ３ 肝汁酸成分がケノデオキシコール酸もしくは
   医薬的に許容し得るその塩である第１項記載の医
   薬組成物。 ４ 真菌性膣疾患の治療に使用する第３項記載の
   医薬組成物。 ５ 肝汁酸成分がデオキシコール酸もしくは医薬
   的に許容し得るその塩である第１項記載の医薬組
   成物。 ６ 真菌性膣疾患の治療に使用する第５項記載の
   医薬組成物。