JPH0515363A - 液体培地による無糖培養法 - Google Patents
液体培地による無糖培養法Info
- Publication number
- JPH0515363A JPH0515363A JP19857591A JP19857591A JPH0515363A JP H0515363 A JPH0515363 A JP H0515363A JP 19857591 A JP19857591 A JP 19857591A JP 19857591 A JP19857591 A JP 19857591A JP H0515363 A JPH0515363 A JP H0515363A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- way valve
- tank
- carbon dioxide
- concentration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title claims description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title abstract description 12
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 81
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims abstract description 7
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 claims description 39
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 claims description 39
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 238000011109 contamination Methods 0.000 abstract description 14
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 abstract description 11
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 abstract description 8
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 abstract description 8
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 abstract 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 47
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 43
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 36
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 description 3
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 description 2
- 235000015816 nutrient absorption Nutrition 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000005068 transpiration Effects 0.000 description 2
- 238000004017 vitrification Methods 0.000 description 2
- 229930192334 Auxin Natural products 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 206010052804 Drug tolerance Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002363 auxin Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000026781 habituation Effects 0.000 description 1
- SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CNC2=C1 SEOVTRFCIGRIMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000012882 rooting medium Substances 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M21/00—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
- C12M21/02—Photobioreactors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/06—Nozzles; Sprayers; Spargers; Diffusers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
- C12M29/26—Conditioning fluids entering or exiting the reaction vessel
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/32—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of substances in solution
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
- C12M41/34—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of gas
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M43/00—Combinations of bioreactors or fermenters with other apparatus
- C12M43/06—Photobioreactors combined with devices or plants for gas production different from a bioreactor of fermenter
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 培地組成中にショ糖を含まない液体培地を使
用し、かつ強光下で液体培地に高濃度の炭酸ガスを供給
することにより、明期の炭酸ガス濃度を上昇させて植物
体の光合成を促進させるとともに、コンタミネーション
を抑制して植物体への雑菌汚染の惧れをなくして培養す
ることを目的とする。 【構成】 炭酸ガス濃度調整ボックス３で、炭酸ガスの
濃度を所定濃度に調整し、空気と混合された所定濃度の
炭酸ガスを明期に限定して、エアポンプ１０より吐出口
９を介して培養タンク１の底部に装備したエアレーショ
ン装置１０から液体培地２に圧送する。
用し、かつ強光下で液体培地に高濃度の炭酸ガスを供給
することにより、明期の炭酸ガス濃度を上昇させて植物
体の光合成を促進させるとともに、コンタミネーション
を抑制して植物体への雑菌汚染の惧れをなくして培養す
ることを目的とする。 【構成】 炭酸ガス濃度調整ボックス３で、炭酸ガスの
濃度を所定濃度に調整し、空気と混合された所定濃度の
炭酸ガスを明期に限定して、エアポンプ１０より吐出口
９を介して培養タンク１の底部に装備したエアレーショ
ン装置１０から液体培地２に圧送する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、液体培地による無糖培
養法に係り、詳しくは、液体培地で植物体を培養するに
あたり、植物体成長の主たる炭素源となるショ糖を含ま
ない液体培地を施用し、かつ強光下で液体培地に高濃度
の炭酸ガスを供給することにより、明期の炭酸ガス濃度
を上昇させて植物体の光合成を促進させるとともに、コ
ンタミネーション（培養タンク内に雑菌が繁殖する状
態）を抑制して雑菌汚染の危険のない植物体を増殖する
ことができる液体培地による無糖培養法に関するもので
ある。
養法に係り、詳しくは、液体培地で植物体を培養するに
あたり、植物体成長の主たる炭素源となるショ糖を含ま
ない液体培地を施用し、かつ強光下で液体培地に高濃度
の炭酸ガスを供給することにより、明期の炭酸ガス濃度
を上昇させて植物体の光合成を促進させるとともに、コ
ンタミネーション（培養タンク内に雑菌が繁殖する状
態）を抑制して雑菌汚染の危険のない植物体を増殖する
ことができる液体培地による無糖培養法に関するもので
ある。
【０００２】
【従来の技術】従来の組織培養法は、いわゆる従属栄養
培養法といわれているように、基本培地としてのＭＳ培
地に植物体成長の主たる炭素源となるショ糖を２％程度
含んだ培地で培養していた。
培養法といわれているように、基本培地としてのＭＳ培
地に植物体成長の主たる炭素源となるショ糖を２％程度
含んだ培地で培養していた。
【０００３】しかし、上記のような培地組織のものを使
用すると、培地中のショ糖がコンタミネーションを誘起
し、雑菌が培地中に浸入して植物体を汚染したり、ある
いは培養不能となる惧れがあった。そこで、従来の組織
培養法では、雑菌による汚染を回避するために培地を完
全滅菌することが必要不可欠であるうえ、コンタミネー
ションによる植物体の損失を抑制するため密閉度が高
く、しかも、容量の小さい培養タンクを使用しなければ
ならなかった。
用すると、培地中のショ糖がコンタミネーションを誘起
し、雑菌が培地中に浸入して植物体を汚染したり、ある
いは培養不能となる惧れがあった。そこで、従来の組織
培養法では、雑菌による汚染を回避するために培地を完
全滅菌することが必要不可欠であるうえ、コンタミネー
ションによる植物体の損失を抑制するため密閉度が高
く、しかも、容量の小さい培養タンクを使用しなければ
ならなかった。
【０００４】ところが、容量の小さい培養タンクを使用
すると、タンク内の相対湿度、暗期の炭酸ガス濃度が高
くなり、明期の炭酸ガス濃度が低くなるという培養タン
ク内の異常環境が発生して、植物体の成長が抑制される
許りでなく、環境調節と増殖作業の自動化が困難となる
不具合があった。
すると、タンク内の相対湿度、暗期の炭酸ガス濃度が高
くなり、明期の炭酸ガス濃度が低くなるという培養タン
ク内の異常環境が発生して、植物体の成長が抑制される
許りでなく、環境調節と増殖作業の自動化が困難となる
不具合があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記のような
実状に鑑み、従来の組織培養の不具合を一掃すべく、全
く新しい構想に基づいて創案されたものであって、特に
培地組成中にショ糖を含まない液体培地を使用し、かつ
強光下で液体培地に高濃度の炭酸ガスを供給することに
より、明期の炭酸ガス濃度を上昇させて植物体の光合成
を促進させるとともに、コンタミネーションを抑制し
て、植物体への雑菌汚染の惧れをなくし、培地の滅菌操
作を不要にしてプロセスを単純化し、容量の大きい培養
タンクの使用を可能にして、増殖の自動化を図ることが
できる液体培地による無糖培養法を提供することを課題
とする課題とするものである。
実状に鑑み、従来の組織培養の不具合を一掃すべく、全
く新しい構想に基づいて創案されたものであって、特に
培地組成中にショ糖を含まない液体培地を使用し、かつ
強光下で液体培地に高濃度の炭酸ガスを供給することに
より、明期の炭酸ガス濃度を上昇させて植物体の光合成
を促進させるとともに、コンタミネーションを抑制し
て、植物体への雑菌汚染の惧れをなくし、培地の滅菌操
作を不要にしてプロセスを単純化し、容量の大きい培養
タンクの使用を可能にして、増殖の自動化を図ることが
できる液体培地による無糖培養法を提供することを課題
とする課題とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】上記課題を解決するた
め、本発明が採用した技術手段は、エアレーション方式
の液体培養装置を施用して植物体を培養するにあたり、
ショ糖を含まない液体培地を培養タンクに充填し、該液
体培地に強光下で高濃度の炭酸ガスを供給することによ
って、培養タンク内の植物体を培養することを特徴とす
るものである。
め、本発明が採用した技術手段は、エアレーション方式
の液体培養装置を施用して植物体を培養するにあたり、
ショ糖を含まない液体培地を培養タンクに充填し、該液
体培地に強光下で高濃度の炭酸ガスを供給することによ
って、培養タンク内の植物体を培養することを特徴とす
るものである。
【０００７】
【作用】したがって本発明によれば、強光下で高濃度の
炭酸ガスが液体培地に供給されるので、明期の炭酸ガス
濃度が上昇され、強度の光照射と相俟って光合成が促進
され、植物体の成長に適した環境で培養することができ
る。そのうえ、液体培地には、ショ糖が含まれていない
ので、培養中コンタミネーションが抑制され、雑菌汚染
による植物体の損失も防止される。
炭酸ガスが液体培地に供給されるので、明期の炭酸ガス
濃度が上昇され、強度の光照射と相俟って光合成が促進
され、植物体の成長に適した環境で培養することができ
る。そのうえ、液体培地には、ショ糖が含まれていない
ので、培養中コンタミネーションが抑制され、雑菌汚染
による植物体の損失も防止される。
【０００８】
【実施例】本発明の実施例を添付図面を参照して詳細に
説明する。図１は培養タンクに充填された液体培地に強
光下で高濃度の炭酸ガスを供給する構成図を示し、Ａは
エアレーション方式の培養装置、Ｂは炭酸ガス供給装置
であって、培養タンク１は支持枠１ａによって定置され
ており、その内部には従来基本培地として使用されてい
るＭＳ培地にショ糖を含まない液体培地２が充填されて
いる。
説明する。図１は培養タンクに充填された液体培地に強
光下で高濃度の炭酸ガスを供給する構成図を示し、Ａは
エアレーション方式の培養装置、Ｂは炭酸ガス供給装置
であって、培養タンク１は支持枠１ａによって定置され
ており、その内部には従来基本培地として使用されてい
るＭＳ培地にショ糖を含まない液体培地２が充填されて
いる。
【０００９】３は炭酸ガス濃度調整ボックスであって、
該ボックス３内には外部に配置された炭酸ガスボンベ４
と連通接続されたガス供給口５が配設されており、該ガ
ス供給口５には電磁バルブ６が装備されて、炭酸ガス濃
度計７と連通接続されている。８はエアポンプまたはエ
アコンプレッサーであって、該エアポンプ（エアコンプ
レッサー）８の吐出口９と培養タンク１の底部に装備さ
れたエアレーション装置１０との間には可撓性管体１１
を介して連通接続されている。１２は上記炭酸ガス濃度
調整ボックス３に形成された外気吸入口、１３は培養タ
ンク１の密閉蓋体１ｂに開設されたガス排出口であっ
て、該ガス排出口１３と炭酸ガス濃度調整ボックス３と
の間には、仮想線で示すような可撓性管体１４からなる
炭酸ガス循環経路Ｃを形成して、炭酸ガスの浪費を防ぐ
ようにしてもよい。
該ボックス３内には外部に配置された炭酸ガスボンベ４
と連通接続されたガス供給口５が配設されており、該ガ
ス供給口５には電磁バルブ６が装備されて、炭酸ガス濃
度計７と連通接続されている。８はエアポンプまたはエ
アコンプレッサーであって、該エアポンプ（エアコンプ
レッサー）８の吐出口９と培養タンク１の底部に装備さ
れたエアレーション装置１０との間には可撓性管体１１
を介して連通接続されている。１２は上記炭酸ガス濃度
調整ボックス３に形成された外気吸入口、１３は培養タ
ンク１の密閉蓋体１ｂに開設されたガス排出口であっ
て、該ガス排出口１３と炭酸ガス濃度調整ボックス３と
の間には、仮想線で示すような可撓性管体１４からなる
炭酸ガス循環経路Ｃを形成して、炭酸ガスの浪費を防ぐ
ようにしてもよい。
【００１０】上記のような構成において、いま、強光下
で培養タンク１に充填された液体培地２に高濃度の炭酸
ガスを供給するには、先ず炭酸ガス濃度計７で所定のガ
ス濃度（１，０００〜２，０００ｐｐｍ）を設定する
が、炭酸ガス濃度調整ボックス３内のガス濃度が設定濃
度に満たない場合は、電磁バルブ６が自動的に開いて炭
酸ガスボンベ４より炭酸ガスがガス供給口５を介して上
記ボックス３に供給される。そして、上記ボックス３内
の炭酸ガスが設定濃度を満たすと、炭酸ガス濃度計７の
指示により電磁バルブ６が自動的に閉じられ、炭酸ガス
の供給が停止される。
で培養タンク１に充填された液体培地２に高濃度の炭酸
ガスを供給するには、先ず炭酸ガス濃度計７で所定のガ
ス濃度（１，０００〜２，０００ｐｐｍ）を設定する
が、炭酸ガス濃度調整ボックス３内のガス濃度が設定濃
度に満たない場合は、電磁バルブ６が自動的に開いて炭
酸ガスボンベ４より炭酸ガスがガス供給口５を介して上
記ボックス３に供給される。そして、上記ボックス３内
の炭酸ガスが設定濃度を満たすと、炭酸ガス濃度計７の
指示により電磁バルブ６が自動的に閉じられ、炭酸ガス
の供給が停止される。
【００１１】そこで、空気と混合された設定濃度の炭酸
ガスをエアポンプ（エアコンプレッサー）８により吐出
口９を介して培養タンク１の底部に装備したエアレーシ
ョン装置１０から液体培地２に圧送すると、空気は微細
な泡状を呈しながら液体培地２に溶け込んで溶存酸素が
増大するとともに、液体培地２には明期の炭酸ガス濃度
が上昇し、強度の光照射と相俟って光合成は促進され、
培養植物体の成長速度が従来の組織培養法（従来栄養培
養法）による培養に比し、それと同等以上となった。
ガスをエアポンプ（エアコンプレッサー）８により吐出
口９を介して培養タンク１の底部に装備したエアレーシ
ョン装置１０から液体培地２に圧送すると、空気は微細
な泡状を呈しながら液体培地２に溶け込んで溶存酸素が
増大するとともに、液体培地２には明期の炭酸ガス濃度
が上昇し、強度の光照射と相俟って光合成は促進され、
培養植物体の成長速度が従来の組織培養法（従来栄養培
養法）による培養に比し、それと同等以上となった。
【００１２】そのうえ、液体培地２に炭酸ガスを供給す
ると、上記のように明期の炭酸ガス濃度の上昇、光合成
の促進だけでなく、培養タンク１内の空気流動の促進、
相対湿度の低下がもたらされるので、これらの現象を適
切に制御すると、蒸散促進、養分吸収促進のほかビトリ
フィケーション（茎葉が水浸状になって水ストレスに弱
くなる状態）も抑制できることが確認された。しかも、
液体培地２にはショ糖が含まれていないので、培養中コ
ンタミネーションが抑制され、雑菌汚染による植物体の
損失の防止できた。培養は１日を明期と暗期とに分けて
行なうが、炭酸ガスの供給は明期のみに限定して行な
い、この場合の光照射照度は、従来の組織培養法におけ
る光照射照度（５ｋｌｘ）の２〜３倍程度、すなわち１
０ｋｌｘ以上とした。
ると、上記のように明期の炭酸ガス濃度の上昇、光合成
の促進だけでなく、培養タンク１内の空気流動の促進、
相対湿度の低下がもたらされるので、これらの現象を適
切に制御すると、蒸散促進、養分吸収促進のほかビトリ
フィケーション（茎葉が水浸状になって水ストレスに弱
くなる状態）も抑制できることが確認された。しかも、
液体培地２にはショ糖が含まれていないので、培養中コ
ンタミネーションが抑制され、雑菌汚染による植物体の
損失の防止できた。培養は１日を明期と暗期とに分けて
行なうが、炭酸ガスの供給は明期のみに限定して行な
い、この場合の光照射照度は、従来の組織培養法におけ
る光照射照度（５ｋｌｘ）の２〜３倍程度、すなわち１
０ｋｌｘ以上とした。
【００１３】上記の方法によって培養された植物体は、
分割されて馴化の工程へ移されるが、本発明において
は、馴化の工程に移す前に植物体を無菌状態で分割し、
オーキシン系の植物ホルモンを適量含んだ培地で１〜２
週間程度補助培養して、分割時の傷の治癒、ストレスの
除去および発根促進処理を行なってから馴化へ移した。
その結果、従来の方法のように、培養した植物体を分割
して発根用培地に移植し、発根後に馴化へ移したり、あ
るいは発根処理を行なわずに、分割した植物体を直ちに
馴化へ移したものに比し、馴化時の発根がスムーズに行
なわれ、活着率を向上させることができた。
分割されて馴化の工程へ移されるが、本発明において
は、馴化の工程に移す前に植物体を無菌状態で分割し、
オーキシン系の植物ホルモンを適量含んだ培地で１〜２
週間程度補助培養して、分割時の傷の治癒、ストレスの
除去および発根促進処理を行なってから馴化へ移した。
その結果、従来の方法のように、培養した植物体を分割
して発根用培地に移植し、発根後に馴化へ移したり、あ
るいは発根処理を行なわずに、分割した植物体を直ちに
馴化へ移したものに比し、馴化時の発根がスムーズに行
なわれ、活着率を向上させることができた。
【００１４】図２は培養タンク１および液体培地２の除
殺菌装置Ｄの構成図を示すものであって、該装置Ｄは培
養タンク１の除殺菌処理時以外は、培養タンク１から離
脱可能となっていて除殺菌作業の効率化を図るように構
成されているとともに、装置自体の除殺菌も可能とした
点に特徴を有するものである。
殺菌装置Ｄの構成図を示すものであって、該装置Ｄは培
養タンク１の除殺菌処理時以外は、培養タンク１から離
脱可能となっていて除殺菌作業の効率化を図るように構
成されているとともに、装置自体の除殺菌も可能とした
点に特徴を有するものである。
【００１５】すなわち、その配管系は２個の殺菌タンク
１５、１６が三方バルブ２１を介して連通接続され、該
三方バルブ２１は三方バルブ２２、２３、２６を介して
培養タンク１に連通接続され、該培養タンク１は三方バ
ルブ２５を介して殺菌タンク１６に連通接続されている
とともに、上記三方バルブ２５に連通接続された三方バ
ルブ２４を介して殺菌タンク１５に連通接続されてい
る。上記三方バルブ２４と２３との間にはポンプ１７お
よびイゼクタ１８が連通状に介装され、イゼクタ１８に
はオゾンガス発生機１９が連通接続され、また三方バル
ブ２２と２６との間にはフィルター部材Ｆ、Ｆを並列に
連通接続した除菌用フィルター２０が連通状に介装され
ている。２７、２８は培養タンク１に除殺菌処理装置Ｄ
を着脱するためのジョイント部材である。
１５、１６が三方バルブ２１を介して連通接続され、該
三方バルブ２１は三方バルブ２２、２３、２６を介して
培養タンク１に連通接続され、該培養タンク１は三方バ
ルブ２５を介して殺菌タンク１６に連通接続されている
とともに、上記三方バルブ２５に連通接続された三方バ
ルブ２４を介して殺菌タンク１５に連通接続されてい
る。上記三方バルブ２４と２３との間にはポンプ１７お
よびイゼクタ１８が連通状に介装され、イゼクタ１８に
はオゾンガス発生機１９が連通接続され、また三方バル
ブ２２と２６との間にはフィルター部材Ｆ、Ｆを並列に
連通接続した除菌用フィルター２０が連通状に介装され
ている。２７、２８は培養タンク１に除殺菌処理装置Ｄ
を着脱するためのジョイント部材である。
【００１６】ところで、上記のように構成された除殺菌
処理装置Ｄを用いて培養タンク１および液体培地２の除
殺菌処理を行なうには、次の順序によって行なう。 （１） 培養タンク１内の液体培地を殺菌タンク１５に
移す。その流路は、培養タンク１→ジョイント２７→三
方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ
１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方バルブ２
１を経て殺菌タンク１５に移す。 （２） 殺菌タンク１６に充填した殺菌液を培養タンク
１に移す。その流路は、殺菌タンク１６→三方バルブ２
５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方
バルブ２３→三方バルブ２６→ジョイント２８を経て培
養タンク１に移す。 （３） 培養タンク１内の殺菌液を殺菌タンク１６に戻
す。その流路は、培養タンク１→ジョイント２７→三方
バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１
８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方バルブ２１
を経て殺菌タンク１６に戻す。 （４） 殺菌タンク１５内の液体培地２を培養タンク１
に戻す。その流路は、殺菌タンク１５→三方バルブ２４
→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バ
ルブ２２→フィルター２０→三方バルブ２６→ジョイン
ト２８を経て培養タンク１に戻す。
処理装置Ｄを用いて培養タンク１および液体培地２の除
殺菌処理を行なうには、次の順序によって行なう。 （１） 培養タンク１内の液体培地を殺菌タンク１５に
移す。その流路は、培養タンク１→ジョイント２７→三
方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ
１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方バルブ２
１を経て殺菌タンク１５に移す。 （２） 殺菌タンク１６に充填した殺菌液を培養タンク
１に移す。その流路は、殺菌タンク１６→三方バルブ２
５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方
バルブ２３→三方バルブ２６→ジョイント２８を経て培
養タンク１に移す。 （３） 培養タンク１内の殺菌液を殺菌タンク１６に戻
す。その流路は、培養タンク１→ジョイント２７→三方
バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１
８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方バルブ２１
を経て殺菌タンク１６に戻す。 （４） 殺菌タンク１５内の液体培地２を培養タンク１
に戻す。その流路は、殺菌タンク１５→三方バルブ２４
→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バ
ルブ２２→フィルター２０→三方バルブ２６→ジョイン
ト２８を経て培養タンク１に戻す。
【００１７】次に除殺菌処理装置Ｄ自体の殺菌処理は、
次の順序で行なわれる。 （１） 培養タンク１を離脱して別途に、殺菌用のタン
ク（図示省略）をジョイント２７、２８を介して除殺菌
処理装置Ｄに接続する。 （２） 殺菌タンク１６に充填した殺菌液を次の流路に
循環させて殺菌タンク１６を殺菌する。すなわち、殺菌
タンク１６→三方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ
１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２
→三方バルブ２１を循環させて殺菌タンク１６を殺菌す
る。 （３） 殺菌タンク１６内の殺菌液を次の流路に循環さ
せて殺菌タンク１５を殺菌する。すなわち、殺菌タンク
１６→三方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→
イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方
バルブ２１→殺菌タンク１５→三方バルブ２４→ポンプ
１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２
→三方バルブ２１を循環させて殺菌タンク１５を殺菌す
る。 （４） 殺菌タンク１５内の殺菌液を次の流路に循環さ
せて配管系を殺菌する。すなわち、殺菌タンク１５→三
方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バルブ
２３→三方バルブ２６→ジョイント２８→殺菌用タンク
→ジョイント２７→三方バルブ２５→殺菌タンク１６→
三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バル
ブ２３→三方バルブ２６→ジョイント２８→殺菌用タン
ク→ジョイント２７→三方バルブ２５→殺菌タンク１６
を循環させて配管系を殺菌する。 （５） 殺菌タンク１６内の殺菌液で除菌用フィルター
２０を逆流洗浄する。その流路は、殺菌タンク１６→三
方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ
１８→三方バルブ２３→三方バルブ２６→フィルター部
材Ｆ、Ｆを経てドレン抜きする。 なお、上記のような順序で行なわれる培養タンク１およ
び液体培地２の除殺菌処理および除殺菌処理装置Ｄ自体
の殺菌処理に使用される殺菌液は、薬剤、オゾン水のど
ちらでもよい。
次の順序で行なわれる。 （１） 培養タンク１を離脱して別途に、殺菌用のタン
ク（図示省略）をジョイント２７、２８を介して除殺菌
処理装置Ｄに接続する。 （２） 殺菌タンク１６に充填した殺菌液を次の流路に
循環させて殺菌タンク１６を殺菌する。すなわち、殺菌
タンク１６→三方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ
１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２
→三方バルブ２１を循環させて殺菌タンク１６を殺菌す
る。 （３） 殺菌タンク１６内の殺菌液を次の流路に循環さ
せて殺菌タンク１５を殺菌する。すなわち、殺菌タンク
１６→三方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→
イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２→三方
バルブ２１→殺菌タンク１５→三方バルブ２４→ポンプ
１７→イゼクタ１８→三方バルブ２３→三方バルブ２２
→三方バルブ２１を循環させて殺菌タンク１５を殺菌す
る。 （４） 殺菌タンク１５内の殺菌液を次の流路に循環さ
せて配管系を殺菌する。すなわち、殺菌タンク１５→三
方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バルブ
２３→三方バルブ２６→ジョイント２８→殺菌用タンク
→ジョイント２７→三方バルブ２５→殺菌タンク１６→
三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ１８→三方バル
ブ２３→三方バルブ２６→ジョイント２８→殺菌用タン
ク→ジョイント２７→三方バルブ２５→殺菌タンク１６
を循環させて配管系を殺菌する。 （５） 殺菌タンク１６内の殺菌液で除菌用フィルター
２０を逆流洗浄する。その流路は、殺菌タンク１６→三
方バルブ２５→三方バルブ２４→ポンプ１７→イゼクタ
１８→三方バルブ２３→三方バルブ２６→フィルター部
材Ｆ、Ｆを経てドレン抜きする。 なお、上記のような順序で行なわれる培養タンク１およ
び液体培地２の除殺菌処理および除殺菌処理装置Ｄ自体
の殺菌処理に使用される殺菌液は、薬剤、オゾン水のど
ちらでもよい。
【００１８】更に上記除殺菌処理装置Ｄにおいては、配
管ラインの中途部にフィルター２０を設け、該フィルタ
ー２０により液体培地２に混入したゴミ、細菌等を除去
するようにしているが、フィルター２０の濾過能力には
限界があり、経時的に目詰りや劣化等を招くことに鑑
み、上記フィルター２０に代えて図３に示すように、配
管２９の中途部に中空円盤状の部材３０を所要数個連接
になる分離管３１の円心部３２を配管２９に連通して設
け、該分離管３１をモータ３３に歯車伝動機構３４を介
して連動連結して回転させるようにしてもよい。この場
合、液体培地２に混入しているゴミ、細菌等は遠心力に
より分離管３１の円周部に蓄積され、清浄な液体培地２
は円心部３２を通過することになる。
管ラインの中途部にフィルター２０を設け、該フィルタ
ー２０により液体培地２に混入したゴミ、細菌等を除去
するようにしているが、フィルター２０の濾過能力には
限界があり、経時的に目詰りや劣化等を招くことに鑑
み、上記フィルター２０に代えて図３に示すように、配
管２９の中途部に中空円盤状の部材３０を所要数個連接
になる分離管３１の円心部３２を配管２９に連通して設
け、該分離管３１をモータ３３に歯車伝動機構３４を介
して連動連結して回転させるようにしてもよい。この場
合、液体培地２に混入しているゴミ、細菌等は遠心力に
より分離管３１の円周部に蓄積され、清浄な液体培地２
は円心部３２を通過することになる。
【００１９】
【発明の効果】これを要するに本発明は、エアレーショ
ン方式の液体培養装置を旋用して植物体を培養する方法
であって、ショ糖を含まない液体培地を培養するタンク
に充填し、該液体培養地に強光下で高濃度の炭酸ガスを
供給することにより、培養タンク内の植物体を培養する
ようにしたから、従来の組織培養法（従属栄養培養法）
による培養に比し、次のような格別顕著な効果を奏す
る。 （１） 明期の炭酸ガス濃度が上昇され、強度の光照射
と相侯って光合成が促進されるので、植物体の成長に適
した環境下で培養することができる。 （２） 明期の炭酸ガス濃度の上昇、光合成の促進に付
随して培養タンク内の空気流動が促進され、相対湿度が
低下するので、これらの現象を適切に制御することによ
り、蒸散促進、養分吸収促進のほか、ビトリフィケーシ
ョンも抑制され、植物体の成長が均一化される。 （３） 液体培養地にショ糖が含まれていないので、培
養中コンタミネーションが抑制され、雑菌汚染による植
物体の損失を防止することができる。
ン方式の液体培養装置を旋用して植物体を培養する方法
であって、ショ糖を含まない液体培地を培養するタンク
に充填し、該液体培養地に強光下で高濃度の炭酸ガスを
供給することにより、培養タンク内の植物体を培養する
ようにしたから、従来の組織培養法（従属栄養培養法）
による培養に比し、次のような格別顕著な効果を奏す
る。 （１） 明期の炭酸ガス濃度が上昇され、強度の光照射
と相侯って光合成が促進されるので、植物体の成長に適
した環境下で培養することができる。 （２） 明期の炭酸ガス濃度の上昇、光合成の促進に付
随して培養タンク内の空気流動が促進され、相対湿度が
低下するので、これらの現象を適切に制御することによ
り、蒸散促進、養分吸収促進のほか、ビトリフィケーシ
ョンも抑制され、植物体の成長が均一化される。 （３） 液体培養地にショ糖が含まれていないので、培
養中コンタミネーションが抑制され、雑菌汚染による植
物体の損失を防止することができる。
【００２０】
【図１】培養タンク内の液体培養地に強光下で高濃度の
炭酸ガスを供給する構成図。
炭酸ガスを供給する構成図。
【図２】培養タンクおよび液体培地の除殺菌装置の構成
図。
図。
【図３】分離管の正面図。
１ 培養タンク ２ 液体培養地 ３ 炭酸ガス濃度調整ボックス ５ 炭酸ガスボンベ ８ エアポンプ ９ ガス吐出口 １０ エアレーション装置
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 【請求項１】 エアレーション方式の液体培養装置を施
用して植物体を培養する方法であって、ショ糖を含まな
い液体培地を培養タンクに充填し、該液体培地に強光下
で高濃度の炭酸ガスを供給することにより、培養タンク
内の植物体を培養するようにしたことを特徴とする液体
培地による無糖培養法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19857591A JPH0515363A (ja) | 1991-07-12 | 1991-07-12 | 液体培地による無糖培養法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19857591A JPH0515363A (ja) | 1991-07-12 | 1991-07-12 | 液体培地による無糖培養法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0515363A true JPH0515363A (ja) | 1993-01-26 |
Family
ID=16393460
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19857591A Pending JPH0515363A (ja) | 1991-07-12 | 1991-07-12 | 液体培地による無糖培養法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0515363A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012160360A2 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-29 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
-
1991
- 1991-07-12 JP JP19857591A patent/JPH0515363A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012160360A2 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-29 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
| WO2012160360A3 (en) * | 2011-05-20 | 2013-02-28 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
| EP2710135A2 (en) * | 2011-05-20 | 2014-03-26 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
| US9562244B2 (en) | 2011-05-20 | 2017-02-07 | Naturally Scientific Technologies Limited | Method of producing plant suspension cells in a growth medium enriched with carbonic acid |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5525505A (en) | Plant propagation system and method | |
| JP2001502526A (ja) | 細胞／組織を培養する装置および方法 | |
| WO1989007389A1 (fr) | Appareil comportant une solution de culture | |
| JPH0763354B2 (ja) | 親水性隔膜と疎水性隔膜とで形成した区画室を備える細胞成長リアクタ | |
| JPH0515363A (ja) | 液体培地による無糖培養法 | |
| CN109762723A (zh) | 一种用于光合细菌培养的装置 | |
| JPH08242842A (ja) | 微生物培養システム | |
| CN104221834A (zh) | 通气栽培装置及栽培系统 | |
| CN117356425B (zh) | 多层气雾培种植平台 | |
| CN217367522U (zh) | 一种黑莓无土栽培用水质净化装置 | |
| JPH11299377A (ja) | 個別給水・非循環型養液栽培装置 | |
| JPH03108423A (ja) | 水耕栽培管理システム | |
| JP2025524164A (ja) | 植物に成長培地を供給するためのシステム及び方法 | |
| JPH0315323A (ja) | 植物育成装置 | |
| CN211048025U (zh) | 一种杏鲍菇食用菌培养箱 | |
| JPS60156332A (ja) | 植物栽培装置 | |
| JP2001128570A (ja) | 養液栽培装置 | |
| JP2803336B2 (ja) | 植物の組織培養方法 | |
| CN219961602U (zh) | 一次性微型无菌温室 | |
| KR102615762B1 (ko) | 악취저감 시스템 | |
| JP2000041660A (ja) | 空気動力圧力差式淹浸バイオリアクター | |
| JP4245448B2 (ja) | 微生物培養システム | |
| KR100189574B1 (ko) | 분무식 식물조직배양 장치 | |
| JPS63240722A (ja) | 育苗装置 | |
| CN212232548U (zh) | 一种用于无土栽培装置 |