JPH05168497A - エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試薬 - Google Patents
エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試薬Info
- Publication number
- JPH05168497A JPH05168497A JP35700191A JP35700191A JPH05168497A JP H05168497 A JPH05168497 A JP H05168497A JP 35700191 A JP35700191 A JP 35700191A JP 35700191 A JP35700191 A JP 35700191A JP H05168497 A JPH05168497 A JP H05168497A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alanyloxy
- reagent
- esterase
- protease
- test piece
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 title claims abstract description 23
- 239000004365 Protease Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 title claims abstract description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 title abstract description 15
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 title abstract description 12
- -1 ester compound Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 12
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 claims abstract description 5
- 108010000849 leukocyte esterase Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 12
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 9
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000000058 esterolytic effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical group [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 1
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- JNTPTNNCGDAGEJ-UHFFFAOYSA-N 6-chlorohexan-1-ol Chemical compound OCCCCCCCl JNTPTNNCGDAGEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 150000003944 halohydrins Chemical class 0.000 abstract 1
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 7
- 150000001989 diazonium salts Chemical class 0.000 description 7
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 7
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 6
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 6
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 6
- 239000010408 film Substances 0.000 description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 4
- NYEWDMNOXFGGDX-UHFFFAOYSA-N 2-chlorocyclohexan-1-ol Chemical compound OC1CCCCC1Cl NYEWDMNOXFGGDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 3
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PLOHTJPTRQIWDY-UHFFFAOYSA-N 1-chloroheptan-2-ol Chemical compound CCCCCC(O)CCl PLOHTJPTRQIWDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XFGANBYCJWQYBI-UHFFFAOYSA-N 11-bromoundecan-1-ol Chemical compound OCCCCCCCCCCCBr XFGANBYCJWQYBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MCVKFFFLKMUGRG-UHFFFAOYSA-N 1h-indol-3-yl 2-benzamidopropanoate Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1OC(=O)C(C)NC(=O)C1=CC=CC=C1 MCVKFFFLKMUGRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AAMCLCZHZXKWRV-UHFFFAOYSA-N 2-bromocyclohexan-1-ol Chemical compound OC1CCCCC1Br AAMCLCZHZXKWRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GCSDUESLOKFUOP-UHFFFAOYSA-N 4-bromocyclohexan-1-ol Chemical compound OC1CCC(Br)CC1 GCSDUESLOKFUOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FCMCSZXRVWDVAW-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-1-hexanol Chemical compound OCCCCCCBr FCMCSZXRVWDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DPNLUCKAZIFDLB-UHFFFAOYSA-N 7-chloroheptan-1-ol Chemical compound OCCCCCCCCl DPNLUCKAZIFDLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMXIEASXPUEOTG-UHFFFAOYSA-N 8-bromooctan-1-ol Chemical compound OCCCCCCCCBr GMXIEASXPUEOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N benzene Substances C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N methyl phenyl ether Natural products COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 2
- GKQHIYSTBXDYNQ-UHFFFAOYSA-M 1-dodecylpyridin-1-ium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 GKQHIYSTBXDYNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 241000978776 Senegalia senegal Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical group 0.000 description 1
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- ASIDMJNTHJYVQJ-UHFFFAOYSA-N bromo-dodecanol Chemical compound OCCCCCCCCCCCCBr ASIDMJNTHJYVQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- PCKPVGOLPKLUHR-UHFFFAOYSA-N indoxyl Chemical group C1=CC=C2C(O)=CNC2=C1 PCKPVGOLPKLUHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920006316 polyvinylpyrrolidine Polymers 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 229920006186 water-soluble synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000012866 water-soluble synthetic resin Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】本発明は、エステル分解酵素又は蛋白分解酵素
の作用により開裂した際に検知可能な応答を生じるエス
テル化合物である基質と、反応促進剤として一般式
［１］ 【化１】 ［式中、Ｒは少なくとも１つのハロゲン原子で置換され
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表す。］で示される化合物を含んで成ることを
特徴とするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用
試薬、及び該測定用試薬を吸収性担体、又はフィルム上
に保持させて成ることを特徴とする白血球検出用試験片
の発明である。 【効果】本発明に係る測定用試薬を担体に保持させて成
る試験片を用いることにより白血球の検出を迅速且つ高
感度に行うことができる。
の作用により開裂した際に検知可能な応答を生じるエス
テル化合物である基質と、反応促進剤として一般式
［１］ 【化１】 ［式中、Ｒは少なくとも１つのハロゲン原子で置換され
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表す。］で示される化合物を含んで成ることを
特徴とするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用
試薬、及び該測定用試薬を吸収性担体、又はフィルム上
に保持させて成ることを特徴とする白血球検出用試験片
の発明である。 【効果】本発明に係る測定用試薬を担体に保持させて成
る試験片を用いることにより白血球の検出を迅速且つ高
感度に行うことができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、例えば白血球エステラ
ーゼ、白血球プロテアーゼ等のエステル分解酵素又は蛋
白分解酵素の測定用試薬に関する。
ーゼ、白血球プロテアーゼ等のエステル分解酵素又は蛋
白分解酵素の測定用試薬に関する。
【０００２】
【発明の背景】尿中白血球の検出は尿路感染症や腎疾患
の診断の指標となり、従来尿沈渣鏡検法が広く用いられ
てきたが、この方法は手間及び時間がかかり熟練者を必
要とするという問題点があった。これに対し近年、白血
球中のエステラ−ゼ（プロテア−ゼ）活性を利用した簡
便な白血球検出用試験片が見い出されており、一部実用
に供されている。この方法には基質として用いたエステ
ル化合物を白血球エステラ−ゼにより加水分解させてア
ルコ−ル（フェノ−ル）成分を生じさせ、これを直接呈
色させる方法や、ジアゾニウム塩を共存させ、酵素反応
によって生じたアルコ−ル（フェノ−ル）成分がジアゾ
ニウム塩とカップリングして呈色する反応を利用する方
法等があり、基質として用いるエステル化合物として
は、前者の方法の場合にはスルホンフタレインエステル
類（特開昭５５−２９９２号公報）、アゾ染料エステル
類（特公昭６１−４２７４９号公報）等があり、後者の
方法の場合にはフェノキシ−アミノ酸エステル類（特公
昭６１−４５９８２号公報）、インドキシルエステル類
（特公平２−４３４８０号公報）、フェニルピロキシル
エステル類（特公昭６２−４１７１０号公報）等が知ら
れている。
の診断の指標となり、従来尿沈渣鏡検法が広く用いられ
てきたが、この方法は手間及び時間がかかり熟練者を必
要とするという問題点があった。これに対し近年、白血
球中のエステラ−ゼ（プロテア−ゼ）活性を利用した簡
便な白血球検出用試験片が見い出されており、一部実用
に供されている。この方法には基質として用いたエステ
ル化合物を白血球エステラ−ゼにより加水分解させてア
ルコ−ル（フェノ−ル）成分を生じさせ、これを直接呈
色させる方法や、ジアゾニウム塩を共存させ、酵素反応
によって生じたアルコ−ル（フェノ−ル）成分がジアゾ
ニウム塩とカップリングして呈色する反応を利用する方
法等があり、基質として用いるエステル化合物として
は、前者の方法の場合にはスルホンフタレインエステル
類（特開昭５５−２９９２号公報）、アゾ染料エステル
類（特公昭６１−４２７４９号公報）等があり、後者の
方法の場合にはフェノキシ−アミノ酸エステル類（特公
昭６１−４５９８２号公報）、インドキシルエステル類
（特公平２−４３４８０号公報）、フェニルピロキシル
エステル類（特公昭６２−４１７１０号公報）等が知ら
れている。
【０００３】しかしながら、これらの基質を用いた方法
は何れも反応に長時間を要し、検出感度が低いという欠
点があった。この欠点を克服するためにエステラ−ゼ
（プロテア−ゼ）の反応促進剤を添加することにより反
応速度を向上させる試みも種々なされているが、未だに
充分な感度が得られるには至っていない。
は何れも反応に長時間を要し、検出感度が低いという欠
点があった。この欠点を克服するためにエステラ−ゼ
（プロテア−ゼ）の反応促進剤を添加することにより反
応速度を向上させる試みも種々なされているが、未だに
充分な感度が得られるには至っていない。
【０００４】
【発明の目的】本発明は、上記した如き状況に鑑みなさ
れたもので、より高感度でより迅速な白血球の検出を可
能にするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試
薬を提供することを目的とするものである。
れたもので、より高感度でより迅速な白血球の検出を可
能にするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試
薬を提供することを目的とするものである。
【０００５】
【発明の構成】本発明は、エステル分解酵素又は蛋白分
解酵素の作用により開裂した際に検知可能な応答を生じ
るエステル化合物である基質と、反応促進剤として一般
式［１］
解酵素の作用により開裂した際に検知可能な応答を生じ
るエステル化合物である基質と、反応促進剤として一般
式［１］
【化３】 ［式中、Ｒは少なくとも１つのハロゲン原子で置換され
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表わす。］で示される化合物を含んで成ること
を特徴とするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定
用試薬の発明である。また、本発明は、前記の基質と反
応促進剤とを含んで成る試薬組成物を、吸収性担体、又
はフィルム上に保持させて成ることを特徴とする白血球
検出用試験片の発明である。本発明者らは、上記目的を
達成すべく鋭意研究を重ねた結果、少なくとも１つのハ
ロゲン原子で置換されたアルコ−ル類がエステル分解酵
素又は蛋白分解酵素の反応促進剤として有効であること
を見い出し、本発明に到達した。
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表わす。］で示される化合物を含んで成ること
を特徴とするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定
用試薬の発明である。また、本発明は、前記の基質と反
応促進剤とを含んで成る試薬組成物を、吸収性担体、又
はフィルム上に保持させて成ることを特徴とする白血球
検出用試験片の発明である。本発明者らは、上記目的を
達成すべく鋭意研究を重ねた結果、少なくとも１つのハ
ロゲン原子で置換されたアルコ−ル類がエステル分解酵
素又は蛋白分解酵素の反応促進剤として有効であること
を見い出し、本発明に到達した。
【０００６】本発明に係る一般式［１］で示される化合
物に於て、Ｒで示される少なくとも１つのハロゲン原子
で置換された炭化水素基の炭素数としては、特に限定さ
れないが、６個以上が好ましく、また、ハロゲン原子の
置換部位は特定されない。その具体例としては、例えば
6-クロロ-1-ヘキサノ−ル、6-ブロモ-1-ヘキサノ−ル、
2-クロロシクロヘキサノ−ル、2-ブロモシクロヘキサノ
−ル、4-ブロモシクロヘキサノ−ル、1-クロロ-2-ヘプ
タノ−ル、7-クロロ-1-ヘプタノ−ル、8-ブロモ-1-オク
タノ−ル、11-ブロモ-1-ウンデカノ−ル、12-ブロモ-1-
ドデカノ−ル、2-クロロシクロヘキサノール等を挙げる
ことができる。これらは何れも公知化合物であり、市販
されているので、容易に入手することができるが、これ
以外の化合物でも勿論構わない。
物に於て、Ｒで示される少なくとも１つのハロゲン原子
で置換された炭化水素基の炭素数としては、特に限定さ
れないが、６個以上が好ましく、また、ハロゲン原子の
置換部位は特定されない。その具体例としては、例えば
6-クロロ-1-ヘキサノ−ル、6-ブロモ-1-ヘキサノ−ル、
2-クロロシクロヘキサノ−ル、2-ブロモシクロヘキサノ
−ル、4-ブロモシクロヘキサノ−ル、1-クロロ-2-ヘプ
タノ−ル、7-クロロ-1-ヘプタノ−ル、8-ブロモ-1-オク
タノ−ル、11-ブロモ-1-ウンデカノ−ル、12-ブロモ-1-
ドデカノ−ル、2-クロロシクロヘキサノール等を挙げる
ことができる。これらは何れも公知化合物であり、市販
されているので、容易に入手することができるが、これ
以外の化合物でも勿論構わない。
【０００７】本発明に係る基質は、エステル分解酵素又
は蛋白分解酵素により開裂した際に検知可能な応答を生
じるものであれば何れにてもよく、利用される応答反応
としては、蛍光反応、又は呈色反応等が挙げられる。例
えば呈色反応を利用して測定を行う場合、用いられる基
質としては、例えば3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ
-アラニルオキシ]インド−ル、3-[Ｎ-(トルエン-4'-ス
ルホニル)-L-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ジ
フェニルカルバモイル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-アセチル-Ｌ-アラニルオキシ]インドール、3
-[Ｎ-ホルミル-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ
-(ベンジルオキシカルボニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-イ
ンドール、3-[Ｎ-(ベンゾイル)-Ｄ,Ｌ-アラニルオキシ]
-インドール、3-[Ｎ-(5',5'-ジメチル-3'-オキソ-シク
ロヘキセン-1'-イル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-(2'-ニトロベンゼン-スルフェニル)-Ｌ-アラ
ニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニ
ル)-Ｌ-アラニルオキシ]-5-フェニルピロ−ル、3-(Ｎ-
アセチル-Ｌ-アラニルオキシ)-5-フェニルピロール、1-
[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]ナフ
タリン、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニル
オキシ]-1-メトキシナフタリン、チアゾール-2-アゾ-4'
-[1'-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキ
シ)-5'-メトキシナフタリン]、チアゾール-2-アゾ-1'-
[2'-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキ
シ)ナフタリン]、チアゾ−ル-2-アゾ-4'[1'-(N-ベンジ
ルオキシカルボニル-L-アラニルオキシ)-ナフタリン]、
2-メトキシ-4-ニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベン
ジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナフタリ
ン]、6-メトキシ-ベンゾチアゾール-2-アゾ-2'-[1'(Ｎ-
ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタ
リン]、2,5-ジメトキシ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベ
ンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,4-ジニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ベンゼン]、1
-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-3-
メトキシベンゼン、ジ-アセチル-3',3"-ジブロム-5',5"
-ジクロル-フェノールスルホンフタレイン、ジ-アセチ
ル-3',5',3",5"-テトラブロム-フェニルスルホンフタレ
イン、ジ-アセチル-4,5,6,7,3',5',3",5"-オクタブロム
-フェノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジルカル
ボニル-Ｌ-アラニル)-3',5',3",5 "-テトラブロム-フェ
ノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジルオキシカ
ルボニル-Ｌ-フェニルアラニル)-3',5',3",5"-テトラブ
ロム-フェノールスルホンフタレイン、3-[Ｎ-(ｐ-トシ
ルアラニルオキシ)-4-ニトロベンゼン等を挙げることが
できるがこれらに限定されない。
は蛋白分解酵素により開裂した際に検知可能な応答を生
じるものであれば何れにてもよく、利用される応答反応
としては、蛍光反応、又は呈色反応等が挙げられる。例
えば呈色反応を利用して測定を行う場合、用いられる基
質としては、例えば3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ
-アラニルオキシ]インド−ル、3-[Ｎ-(トルエン-4'-ス
ルホニル)-L-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ジ
フェニルカルバモイル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-アセチル-Ｌ-アラニルオキシ]インドール、3
-[Ｎ-ホルミル-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ
-(ベンジルオキシカルボニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-イ
ンドール、3-[Ｎ-(ベンゾイル)-Ｄ,Ｌ-アラニルオキシ]
-インドール、3-[Ｎ-(5',5'-ジメチル-3'-オキソ-シク
ロヘキセン-1'-イル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-(2'-ニトロベンゼン-スルフェニル)-Ｌ-アラ
ニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニ
ル)-Ｌ-アラニルオキシ]-5-フェニルピロ−ル、3-(Ｎ-
アセチル-Ｌ-アラニルオキシ)-5-フェニルピロール、1-
[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]ナフ
タリン、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニル
オキシ]-1-メトキシナフタリン、チアゾール-2-アゾ-4'
-[1'-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキ
シ)-5'-メトキシナフタリン]、チアゾール-2-アゾ-1'-
[2'-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキ
シ)ナフタリン]、チアゾ−ル-2-アゾ-4'[1'-(N-ベンジ
ルオキシカルボニル-L-アラニルオキシ)-ナフタリン]、
2-メトキシ-4-ニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベン
ジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナフタリ
ン]、6-メトキシ-ベンゾチアゾール-2-アゾ-2'-[1'(Ｎ-
ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタ
リン]、2,5-ジメトキシ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベ
ンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,4-ジニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ベンゼン]、1
-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-3-
メトキシベンゼン、ジ-アセチル-3',3"-ジブロム-5',5"
-ジクロル-フェノールスルホンフタレイン、ジ-アセチ
ル-3',5',3",5"-テトラブロム-フェニルスルホンフタレ
イン、ジ-アセチル-4,5,6,7,3',5',3",5"-オクタブロム
-フェノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジルカル
ボニル-Ｌ-アラニル)-3',5',3",5 "-テトラブロム-フェ
ノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジルオキシカ
ルボニル-Ｌ-フェニルアラニル)-3',5',3",5"-テトラブ
ロム-フェノールスルホンフタレイン、3-[Ｎ-(ｐ-トシ
ルアラニルオキシ)-4-ニトロベンゼン等を挙げることが
できるがこれらに限定されない。
【０００８】本発明に係る測定用試薬は、生体試料、特
に尿中のエステル分解酵素又は蛋白分解酵素、特に白血
球中に存在するエステラーゼ又はプロテアーゼの測定に
最適であり、これを用いることにより尿中の白血球を迅
速且つ高感度に検出することができる。本発明に係る測
定用試薬は、液状試薬としても勿論使用可能であるが、
特に試験片として使用する場合が最も有利である。
に尿中のエステル分解酵素又は蛋白分解酵素、特に白血
球中に存在するエステラーゼ又はプロテアーゼの測定に
最適であり、これを用いることにより尿中の白血球を迅
速且つ高感度に検出することができる。本発明に係る測
定用試薬は、液状試薬としても勿論使用可能であるが、
特に試験片として使用する場合が最も有利である。
【０００９】本発明に係る一般式［１］で示される反応
促進剤化合物の測定用試薬中の濃度は、反応即進効果が
認められ、且つ目的とする酵素活性の測定に支障のない
量であれば特に限定することなく挙げられるが、例えば
試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持させるため
に用いられる含浸液中の濃度としては、通常０.１〜１
０％（Ｗ／Ｖ）程度が好ましく挙げられる。本発明に係
る基質の反応液中の濃度は、目的とする酵素活性を検出
し得る量であれば特に限定することなく挙げられるが、
例えば試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持させ
るために用いられる含浸液中の濃度としては、通常０.
１〜１０ｍＭ程度が好ましく挙げられる。
促進剤化合物の測定用試薬中の濃度は、反応即進効果が
認められ、且つ目的とする酵素活性の測定に支障のない
量であれば特に限定することなく挙げられるが、例えば
試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持させるため
に用いられる含浸液中の濃度としては、通常０.１〜１
０％（Ｗ／Ｖ）程度が好ましく挙げられる。本発明に係
る基質の反応液中の濃度は、目的とする酵素活性を検出
し得る量であれば特に限定することなく挙げられるが、
例えば試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持させ
るために用いられる含浸液中の濃度としては、通常０.
１〜１０ｍＭ程度が好ましく挙げられる。
【００１０】これらの基質の中には、エステラ−ゼによ
り加水分解されて生じるアルコ−ル（フェノ−ル）成分
が自己酸化縮合することにより呈色するものもあるが、
ジアゾニウム塩を反応系に加えれば、反応時間が短縮さ
れ、呈色感度が高くなるのでより好ましい。加えるジア
ゾニウム塩としては、例えば尿中白血球の検出に於ては
他の尿中成分の影響を受けにくいものが好ましく、例え
ば2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム-テト
ラクロロジンケ−ト、1-ジアゾ-2-ナフト−ル-4-スルホ
ン酸ナトリウム、4-ジメチルアミノベンゼンジアゾニウ
ム-テトラフルオロボレ−ト、2,4-ジメトキシベンゼン
ジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト、4-メトキシベ
ンゼンジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト等を挙げ
ることができる。またその使用濃度は特に限定されない
が、例えば試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持
させるために用いられる含浸液中の濃度としては、通常
０.１〜１０ｍＭ程度が好ましく挙げられる。
り加水分解されて生じるアルコ−ル（フェノ−ル）成分
が自己酸化縮合することにより呈色するものもあるが、
ジアゾニウム塩を反応系に加えれば、反応時間が短縮さ
れ、呈色感度が高くなるのでより好ましい。加えるジア
ゾニウム塩としては、例えば尿中白血球の検出に於ては
他の尿中成分の影響を受けにくいものが好ましく、例え
ば2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム-テト
ラクロロジンケ−ト、1-ジアゾ-2-ナフト−ル-4-スルホ
ン酸ナトリウム、4-ジメチルアミノベンゼンジアゾニウ
ム-テトラフルオロボレ−ト、2,4-ジメトキシベンゼン
ジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト、4-メトキシベ
ンゼンジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト等を挙げ
ることができる。またその使用濃度は特に限定されない
が、例えば試験片の形で用いる場合、吸収性担体に保持
させるために用いられる含浸液中の濃度としては、通常
０.１〜１０ｍＭ程度が好ましく挙げられる。
【００１１】本発明に係るエステル分解酵素又は蛋白分
解酵素の測定用試薬中には一般式［１］で示される反応
促進剤とエステル化合物である基質以外に、ｐＨを６〜
１０に保持し得る緩衝剤と、また必要に応じ前記した如
きジアゾニウム塩、更に要すれば安定化剤、湿潤剤等の
試薬類が含まれていても良く、その使用量、使用濃度等
は、通常この分野で使用される使用量、濃度範囲等から
適宜選択すれば足りる。
解酵素の測定用試薬中には一般式［１］で示される反応
促進剤とエステル化合物である基質以外に、ｐＨを６〜
１０に保持し得る緩衝剤と、また必要に応じ前記した如
きジアゾニウム塩、更に要すれば安定化剤、湿潤剤等の
試薬類が含まれていても良く、その使用量、使用濃度等
は、通常この分野で使用される使用量、濃度範囲等から
適宜選択すれば足りる。
【００１２】本発明で用いられる緩衝剤の種類として
は、ｐＨを６〜１０、好ましくは７〜９に保ち、検知可
能な応答反応を阻害しないものであれば何れのものでも
よく、例えばホウ酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、トリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝剤、バルビツ−
ル酸塩緩衝剤等を挙げることができるが、勿論これらに
限定されるものではない。また、これら緩衝剤の測定用
試薬中の使用濃度としては、ｐＨを６〜１０、好ましく
は７〜９に保持し得る量であれば特に限定されることな
く挙げられるが、例えば本発明に係る測定用試薬を吸収
性担体に保持させるために用いられる緩衝液中の濃度と
しては、通常０.１〜１Ｍが好ましく挙げられる。
は、ｐＨを６〜１０、好ましくは７〜９に保ち、検知可
能な応答反応を阻害しないものであれば何れのものでも
よく、例えばホウ酸塩緩衝剤、リン酸塩緩衝剤、トリス
（ヒドロキシメチル）アミノメタン緩衝剤、バルビツ−
ル酸塩緩衝剤等を挙げることができるが、勿論これらに
限定されるものではない。また、これら緩衝剤の測定用
試薬中の使用濃度としては、ｐＨを６〜１０、好ましく
は７〜９に保持し得る量であれば特に限定されることな
く挙げられるが、例えば本発明に係る測定用試薬を吸収
性担体に保持させるために用いられる緩衝液中の濃度と
しては、通常０.１〜１Ｍが好ましく挙げられる。
【００１３】また、安定化剤としては、例えばリン酸ト
リモルホリド等、湿潤剤としては、例えば、ポリビニル
ピロリドン、ポリエチレングリコ−ル、ラウリルピリジ
ニウムクロリド、ポリオキシエチレンノニルフェニルエ
−テル等を挙げることができるが勿論これらに限定され
るものではない。
リモルホリド等、湿潤剤としては、例えば、ポリビニル
ピロリドン、ポリエチレングリコ−ル、ラウリルピリジ
ニウムクロリド、ポリオキシエチレンノニルフェニルエ
−テル等を挙げることができるが勿論これらに限定され
るものではない。
【００１４】本発明に係る白血球検出用試験片は、一般
式［１］で示される化合物と基質、及び緩衝剤と、ジア
ゾニウム塩、更に要すれば通常ドライケミストリーの分
野で用いられる例えば安定化剤、湿潤剤等の試薬類を含
んで成る試薬組成物を常法により吸収性担体に含浸、乾
燥させることにより保持させるか、或は該試薬組成物を
常法に従いフィルム上に塗布又はコーティングして保持
させることにより容易に調製し得る。本発明の調製方法
を、吸収性担体を用いる場合を例にとり、より具体的に
示すと以下の如くになる。
式［１］で示される化合物と基質、及び緩衝剤と、ジア
ゾニウム塩、更に要すれば通常ドライケミストリーの分
野で用いられる例えば安定化剤、湿潤剤等の試薬類を含
んで成る試薬組成物を常法により吸収性担体に含浸、乾
燥させることにより保持させるか、或は該試薬組成物を
常法に従いフィルム上に塗布又はコーティングして保持
させることにより容易に調製し得る。本発明の調製方法
を、吸収性担体を用いる場合を例にとり、より具体的に
示すと以下の如くになる。
【００１５】即ち、一般式［１］で示される化合物、基
質、ｐＨ６〜１０、好ましくは７〜９に保持し得る緩衝
剤及びジアゾニウム塩、更に要すれば安定化剤、湿潤剤
等の必要な試薬類を、水或はメタノール，エタノール等
のアルコール、アセトン，ジメチルホルムアミド（ＤＭ
Ｆ）等の極性溶媒、若しくはこれら極性溶媒と水との混
合溶媒中に適宜組み合わせて溶解して、１種又は２種以
上の含浸液を調製し、適当な吸収性担体を該含浸液中に
１乃至数回浸漬、乾燥した後、必要に応じて適宜所定の
大きさに切断すれば、本発明の試験片を得ることができ
る。このようにして得られた試験片はそのまま使用して
も良いし、例えばポリ塩化ビニル，ポリスチレン等のフ
ィルム片等の支持体の一端に接着して使用しても良い。
質、ｐＨ６〜１０、好ましくは７〜９に保持し得る緩衝
剤及びジアゾニウム塩、更に要すれば安定化剤、湿潤剤
等の必要な試薬類を、水或はメタノール，エタノール等
のアルコール、アセトン，ジメチルホルムアミド（ＤＭ
Ｆ）等の極性溶媒、若しくはこれら極性溶媒と水との混
合溶媒中に適宜組み合わせて溶解して、１種又は２種以
上の含浸液を調製し、適当な吸収性担体を該含浸液中に
１乃至数回浸漬、乾燥した後、必要に応じて適宜所定の
大きさに切断すれば、本発明の試験片を得ることができ
る。このようにして得られた試験片はそのまま使用して
も良いし、例えばポリ塩化ビニル，ポリスチレン等のフ
ィルム片等の支持体の一端に接着して使用しても良い。
【００１６】本発明の試験片を調製するために使用され
る吸収性担体やフィルムとしては、ドライケミストリー
の分野で通常用いられているものであれば特に限定され
ることなく挙げられるが、吸収性担体としては例えば濾
紙、不織布、ガラス繊維等が好ましく挙げられ、フィル
ムとしては厚さ３００μｍ前後のポリスチレンシート等
が好ましく挙げられる。
る吸収性担体やフィルムとしては、ドライケミストリー
の分野で通常用いられているものであれば特に限定され
ることなく挙げられるが、吸収性担体としては例えば濾
紙、不織布、ガラス繊維等が好ましく挙げられ、フィル
ムとしては厚さ３００μｍ前後のポリスチレンシート等
が好ましく挙げられる。
【００１７】本発明の試験片をフィルムを用いて調製す
る際、必要な試薬を保持した薄膜を形成するためには、
適当な膜形成剤を用いることが必要となる。これらの膜
形成剤としては、通常ドライケミストリーの分野で用い
られているものであれば特に限定されることなく挙げら
れるが、例えばポリビニルアルコール樹脂，ポリビニル
ピロリドン樹脂，ポリアクリルアミド樹脂，ポリエチレ
ンオキサイド樹脂，若しくはポリ酢酸ビニル樹脂等の水
溶性合成樹脂、メチルセルロース，ヒドロキシエチルセ
ルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシ
プロピルメチルセルロース若しくはカルボキシメチルセ
ルロース等の水溶性セルロース誘導体、デンプン，多糖
類，ゼラチン，カゼイン，アラビアゴム，若しくはアル
ギン酸ナトリウム等の天然高分子等が挙げられる。
る際、必要な試薬を保持した薄膜を形成するためには、
適当な膜形成剤を用いることが必要となる。これらの膜
形成剤としては、通常ドライケミストリーの分野で用い
られているものであれば特に限定されることなく挙げら
れるが、例えばポリビニルアルコール樹脂，ポリビニル
ピロリドン樹脂，ポリアクリルアミド樹脂，ポリエチレ
ンオキサイド樹脂，若しくはポリ酢酸ビニル樹脂等の水
溶性合成樹脂、メチルセルロース，ヒドロキシエチルセ
ルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシ
プロピルメチルセルロース若しくはカルボキシメチルセ
ルロース等の水溶性セルロース誘導体、デンプン，多糖
類，ゼラチン，カゼイン，アラビアゴム，若しくはアル
ギン酸ナトリウム等の天然高分子等が挙げられる。
【００１８】尚、本発明に係る測定用試薬は、これを試
験片に保持させて使用する以外にも、例えばこれを直接
検体中に添加溶解して測定に供するとか、該測定用試薬
を含有する溶液中に検体を添加して測定を行う等も可能
なので、このようにして測定を実施してもよい。以下
に、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発
明はこれらによって何等限定されるものでない。
験片に保持させて使用する以外にも、例えばこれを直接
検体中に添加溶解して測定に供するとか、該測定用試薬
を含有する溶液中に検体を添加して測定を行う等も可能
なので、このようにして測定を実施してもよい。以下
に、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発
明はこれらによって何等限定されるものでない。
【００１９】
実施例１ ［試験片の調製］濾紙を下記の溶液１に浸漬し、乾燥し
た後、溶液２に浸漬し、乾燥して試験片を作製した。 （含浸液１） ホウ酸 ２．４７ｇ 塩化ナトリウム １．４６ｇ 水酸化ナトリウム ０．３５７ｇ ポリビニルピロリドン Ｋ−３０（和光純薬工業(株)製） ２．０ｇ 蒸留水 全量１００ｍｌ（ｐＨ８．０） （含浸液２）下記化合物を表１記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させたもの
を含浸液２とした。尚、比較のため促進剤無添加のもの
も調製、使用した。 1-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ］ナフタリン ７４．０ｍｇ 2,4-ジメトキシベンゼンジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト ５０．３ｍｇ ［操作法及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離し
た白血球画分を添加した生理食塩水に浸漬後直ちに引き
上げ、１０分後にプレテスターＲＭ−４０５（和光純薬
工業（株）製）を用い、測定波長５６５ｎｍ（参照波長
７６０ｎｍ）に於ける反射率を測定した。結果を表１に
示す。
た後、溶液２に浸漬し、乾燥して試験片を作製した。 （含浸液１） ホウ酸 ２．４７ｇ 塩化ナトリウム １．４６ｇ 水酸化ナトリウム ０．３５７ｇ ポリビニルピロリドン Ｋ−３０（和光純薬工業(株)製） ２．０ｇ 蒸留水 全量１００ｍｌ（ｐＨ８．０） （含浸液２）下記化合物を表１記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させたもの
を含浸液２とした。尚、比較のため促進剤無添加のもの
も調製、使用した。 1-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ］ナフタリン ７４．０ｍｇ 2,4-ジメトキシベンゼンジアゾニウム-テトラフルオロボレ−ト ５０．３ｍｇ ［操作法及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離し
た白血球画分を添加した生理食塩水に浸漬後直ちに引き
上げ、１０分後にプレテスターＲＭ−４０５（和光純薬
工業（株）製）を用い、測定波長５６５ｎｍ（参照波長
７６０ｎｍ）に於ける反射率を測定した。結果を表１に
示す。
【表１】
【００２０】実施例２ ［試験片の調製］実施例１と同様にして下記の溶液を用
い試験片を作製した。 （含浸液１）実施例１の溶液１と同じ （含浸液２）下記化合物を表２記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させたもの
を含浸液２とした。尚、比較のため促進剤無添加のもの
も調製、使用した。 3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]インド−ル ９８．５ｍｇ ［測定及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離した
白血球画分を添加した尿に浸漬後直ちに引き上げ、１０
分後にプレテスターＲＭ−４０５を用い、測定波長６３
５ｎｍに於ける反射率を測定した。結果を表２に示す。
い試験片を作製した。 （含浸液１）実施例１の溶液１と同じ （含浸液２）下記化合物を表２記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させたもの
を含浸液２とした。尚、比較のため促進剤無添加のもの
も調製、使用した。 3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]インド−ル ９８．５ｍｇ ［測定及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離した
白血球画分を添加した尿に浸漬後直ちに引き上げ、１０
分後にプレテスターＲＭ−４０５を用い、測定波長６３
５ｎｍに於ける反射率を測定した。結果を表２に示す。
【表２】
【００２１】実施例３ ［試験片の調製］実施例１と同様にして下記の溶液を用
い試験片を作製した。 （含浸液１）実施例１の溶液１と同じ （含浸液２）下記化合物を表３記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１〜５％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させた
ものを含浸液２とした。尚、比較のため、反応促進剤無
添加のものも調製、使用した。 3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]インド−ル ９８．５ｍｇ 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム-テトラクロロジンケ−ト ６４．８ｍｇ ［測定及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離した
白血球画分を添加した尿に浸漬後直ちに引き上げ、２分
後にプレテスターＲＭ−４０５を用い、測定波長５６５
ｎｍ（参照波長７６０ｎｍ）に於ける反射率を測定し
た。結果を表３に示す。
い試験片を作製した。 （含浸液１）実施例１の溶液１と同じ （含浸液２）下記化合物を表３記載の各促進剤のメタノ
−ル溶液（１〜５％(ｗ/ｖ)）１００ｍｌに溶解させた
ものを含浸液２とした。尚、比較のため、反応促進剤無
添加のものも調製、使用した。 3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]インド−ル ９８．５ｍｇ 2-メトキシ-4-モルホリノベンゼンジアゾニウム-テトラクロロジンケ−ト ６４．８ｍｇ ［測定及び結果］上記各試験片をヒト全血より単離した
白血球画分を添加した尿に浸漬後直ちに引き上げ、２分
後にプレテスターＲＭ−４０５を用い、測定波長５６５
ｎｍ（参照波長７６０ｎｍ）に於ける反射率を測定し
た。結果を表３に示す。
【表３】 表１〜表３から明らかなように、本発明に係る各種促進
剤を用いた本発明の試験片は何れも促進剤を含有しない
ものに比べ呈色感度の顕著な向上が見られた。
剤を用いた本発明の試験片は何れも促進剤を含有しない
ものに比べ呈色感度の顕著な向上が見られた。
【００２２】
【発明の効果】以上述べた如く、本発明は例えば白血球
エステラーゼ，白血球プロテアーゼ等のエステル分解酵
素又は蛋白分解酵素の測定用試薬を提供するものであ
り、本発明に係る測定用試薬を担体に保持させて成る試
験片を用いることにより白血球の検出を迅速且つ高感度
に行うことができる点に顕著な効果を奏する発明であ
り、斯業に貢献するところ極めて大なる発明である。
エステラーゼ，白血球プロテアーゼ等のエステル分解酵
素又は蛋白分解酵素の測定用試薬を提供するものであ
り、本発明に係る測定用試薬を担体に保持させて成る試
験片を用いることにより白血球の検出を迅速且つ高感度
に行うことができる点に顕著な効果を奏する発明であ
り、斯業に貢献するところ極めて大なる発明である。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成４年１２月１６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００６】本発明に係る一般式［１］で示される化合
物に於て、Ｒで示される少なくとも１つのハロゲン原子
で置換された炭化水素基の炭素数としては、特に限定さ
れないが、６個以上が好ましく、また、ハロゲン原子の
置換部位は特定されない。その具体例としては、例えば
6-クロロ-1-ヘキサノ−ル、6-ブロモ-1-ヘキサノ−ル、
2-クロロシクロヘキサノ−ル、2-ブロモシクロヘキサノ
−ル、4-ブロモシクロヘキサノ−ル、1-クロロ-2-ヘプ
タノ−ル、7-クロロ-1-ヘプタノ−ル、8-ブロモ-1-オク
タノ−ル、11-ブロモ-1-ウンデカノ−ル、12-ブロモ-1-
ドデカノ−ル等を挙げることができる。これらは何れも
公知化合 物であり、市販されているので、容易に入手
することができるが、これ以外の化合物でも勿論構わな
い。
物に於て、Ｒで示される少なくとも１つのハロゲン原子
で置換された炭化水素基の炭素数としては、特に限定さ
れないが、６個以上が好ましく、また、ハロゲン原子の
置換部位は特定されない。その具体例としては、例えば
6-クロロ-1-ヘキサノ−ル、6-ブロモ-1-ヘキサノ−ル、
2-クロロシクロヘキサノ−ル、2-ブロモシクロヘキサノ
−ル、4-ブロモシクロヘキサノ−ル、1-クロロ-2-ヘプ
タノ−ル、7-クロロ-1-ヘプタノ−ル、8-ブロモ-1-オク
タノ−ル、11-ブロモ-1-ウンデカノ−ル、12-ブロモ-1-
ドデカノ−ル等を挙げることができる。これらは何れも
公知化合 物であり、市販されているので、容易に入手
することができるが、これ以外の化合物でも勿論構わな
い。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正内容】
【０００７】本発明に係る基質は、エステル分解酵素又
は蛋白分解酵素により開裂した際に検知可能な応答を生
じるものであれば何れにてもよく、利用される応答反応
としては、蛍光反応、又は呈色反応等が挙げられる。例
えば呈色反応を利用して測定を行う場合、用いられる基
質としては、例えば3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ
-アラニルオキシ]インド−ル、3-[Ｎ-(ジフェニルカル
バモイル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-ア
セチル-Ｌ-アラニルオキシ]インドール、3-[Ｎ-ホルミ
ル-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ベンジル
オキシカルボニル)-Ｌ-アラニ ルオキシ]-インドール、
3-[Ｎ-(ベンゾイル)-Ｄ,Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-(5',5'-ジメチル-3'-オキソ-シクロヘキセン
-1'-イル)-Ｌ-アラニル オキシ]-インドール、3-[Ｎ-
(2'-ニトロベンゼン-スルフェニル)-Ｌ-アラニルオキ
シ]-インドール、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-
アラニルオキシ]-5-フ ェニルピロ−ル、3-(Ｎ-アセチ
ル-Ｌ-アラニルオキシ)-5-フェニルピロール、1-[Ｎ-
(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]ナフタリ
ン、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキ
シ]-1-メトキシナフタリン、チアゾール-2-アゾ-4'-[1'
-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-
5'-メトキシナ フタリン]、チアゾール-2-アゾ-1'-[2'-
(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナ
フタリン]、チアゾ−ル-2-アゾ-4'[1'-(N-ベンジルオキ
シカルボ ニル-L-アラニルオキシ)-ナフタリン]、2-メ
トキシ-4-ニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジル
オキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナフタリン]、6-
メト キシ-ベンゾチアゾール-2-アゾ-2'-[1'(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラ ニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,5-ジメトキシ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベン
ジ ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,4-ジニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ベンゼン]、1
-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-3-
メトキシベンゼン、ジ-アセチル-3',3"-ジブロム-5',5"
-ジクロル-フェノールスルホンフタレイン、ジ-アセチ
ル-3',5',3",5"-テトラブロム-フェノ−ルスルホンフタ
レイン、ジ-アセチ ル-4,5,6,7,3',5',3",5"-オクタブ
ロム-フェノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジル
オキシカルボニル-Ｌ-アラニル)-3',5',3",5"-テトラブ
ロム-フェノールス ルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-フェニルアラニル)-3',5',3",
5"-テトラブロム-フェノールスルホンフタレイン、3-
[Ｎ-(ｐ-トシルアラニルオキシ)-4-ニトロベンゼン等を
挙げることができるがこれらに限定されない。
は蛋白分解酵素により開裂した際に検知可能な応答を生
じるものであれば何れにてもよく、利用される応答反応
としては、蛍光反応、又は呈色反応等が挙げられる。例
えば呈色反応を利用して測定を行う場合、用いられる基
質としては、例えば3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ
-アラニルオキシ]インド−ル、3-[Ｎ-(ジフェニルカル
バモイル)-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-ア
セチル-Ｌ-アラニルオキシ]インドール、3-[Ｎ-ホルミ
ル-Ｌ-アラニルオキシ]-インドール、3-[Ｎ-(ベンジル
オキシカルボニル)-Ｌ-アラニ ルオキシ]-インドール、
3-[Ｎ-(ベンゾイル)-Ｄ,Ｌ-アラニルオキシ]-インドー
ル、3-[Ｎ-(5',5'-ジメチル-3'-オキソ-シクロヘキセン
-1'-イル)-Ｌ-アラニル オキシ]-インドール、3-[Ｎ-
(2'-ニトロベンゼン-スルフェニル)-Ｌ-アラニルオキ
シ]-インドール、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-
アラニルオキシ]-5-フ ェニルピロ−ル、3-(Ｎ-アセチ
ル-Ｌ-アラニルオキシ)-5-フェニルピロール、1-[Ｎ-
(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]ナフタリ
ン、3-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキ
シ]-1-メトキシナフタリン、チアゾール-2-アゾ-4'-[1'
-(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-
5'-メトキシナ フタリン]、チアゾール-2-アゾ-1'-[2'-
(Ｎ-ベンジルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナ
フタリン]、チアゾ−ル-2-アゾ-4'[1'-(N-ベンジルオキ
シカルボ ニル-L-アラニルオキシ)-ナフタリン]、2-メ
トキシ-4-ニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジル
オキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)ナフタリン]、6-
メト キシ-ベンゾチアゾール-2-アゾ-2'-[1'(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラ ニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,5-ジメトキシ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベン
ジ ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ナフタリ
ン]、2,4-ジニトロ-ベンゼン-アゾ-4'-[1'-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-アラニルオキシ)-ベンゼン]、1
-[Ｎ-(ｐ-トルエンスルホニル)-Ｌ-アラニルオキシ]-3-
メトキシベンゼン、ジ-アセチル-3',3"-ジブロム-5',5"
-ジクロル-フェノールスルホンフタレイン、ジ-アセチ
ル-3',5',3",5"-テトラブロム-フェノ−ルスルホンフタ
レイン、ジ-アセチ ル-4,5,6,7,3',5',3",5"-オクタブ
ロム-フェノールスルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジル
オキシカルボニル-Ｌ-アラニル)-3',5',3",5"-テトラブ
ロム-フェノールス ルホンフタレイン、ジ-(Ｎ-ベンジ
ルオキシカルボニル-Ｌ-フェニルアラニル)-3',5',3",
5"-テトラブロム-フェノールスルホンフタレイン、3-
[Ｎ-(ｐ-トシルアラニルオキシ)-4-ニトロベンゼン等を
挙げることができるがこれらに限定されない。
Claims (7)
- 【請求項１】エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の作用
により開裂した際に検知可能な応答を生じるエステル化
合物である基質と、反応促進剤として一般式［１］ 【化１】 ［式中、Ｒは少なくとも１つのハロゲン原子で置換され
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表わす。］で示される化合物とを含んで成るこ
とを特徴とするエステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測
定用試薬。 - 【請求項２】ハロゲン原子が、塩素原子又は／及び臭素
原子である、請求項１に記載の測定用試薬。 - 【請求項３】検知可能な応答が、呈色反応である、請求
項１又は２に記載の測定用試薬。 - 【請求項４】エステル分解酵素又は蛋白分解酵素が白血
球エステラーゼ又は白血球プロテアーゼである請求項１
〜３の何れかに記載の測定用試薬。 - 【請求項５】エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の作用
により開裂した際に検知可能な応答を生じるエステル化
合物である基質と、反応促進剤として一般式［１］ 【化２】 ［式中、Ｒは少なくとも１つのハロゲン原子で置換され
た炭化水素基（直鎖状、分枝状、環状の何れでもよ
い。）を表わす。］で示される化合物とを含んで成る試
薬組成物を、吸収性担体、又はフィルム上に保持させて
成ることを特徴とする白血球検出用試験片。 - 【請求項６】ハロゲン原子が、塩素原子及び／又は臭素
原子である、請求項５に記載の試験片。 - 【請求項７】検知可能な応答が、呈色反応である、請求
項５又は６に記載の試験片。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35700191A JPH05168497A (ja) | 1991-12-25 | 1991-12-25 | エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35700191A JPH05168497A (ja) | 1991-12-25 | 1991-12-25 | エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05168497A true JPH05168497A (ja) | 1993-07-02 |
Family
ID=18451866
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35700191A Withdrawn JPH05168497A (ja) | 1991-12-25 | 1991-12-25 | エステル分解酵素又は蛋白分解酵素の測定用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05168497A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0661280A1 (en) * | 1993-12-29 | 1995-07-05 | Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. | Novel amino acid ester and reagent composition for detecting leucocytes or elastase in body liquid |
| US5512450A (en) * | 1994-08-22 | 1996-04-30 | Bayer Corporation | Test device for determining the presence of leukocyte cells, esterase or protease in a test sample |
| WO2008001840A1 (fr) * | 2006-06-28 | 2008-01-03 | Kumamoto University | Procédé de diagnostic d'une maladie rénale/urologique |
| WO2012090995A1 (ja) | 2010-12-28 | 2012-07-05 | ライオン株式会社 | 口腔状態の判定方法、並びにそのために用いられる分析用具、装置、及びプログラム |
| JP2017184734A (ja) * | 2016-03-30 | 2017-10-12 | 栄研化学株式会社 | エステラーゼ及び／又はプロテアーゼ検出用試験片 |
-
1991
- 1991-12-25 JP JP35700191A patent/JPH05168497A/ja not_active Withdrawn
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0661280A1 (en) * | 1993-12-29 | 1995-07-05 | Kyoto Daiichi Kagaku Co., Ltd. | Novel amino acid ester and reagent composition for detecting leucocytes or elastase in body liquid |
| US5512450A (en) * | 1994-08-22 | 1996-04-30 | Bayer Corporation | Test device for determining the presence of leukocyte cells, esterase or protease in a test sample |
| WO2008001840A1 (fr) * | 2006-06-28 | 2008-01-03 | Kumamoto University | Procédé de diagnostic d'une maladie rénale/urologique |
| JP5481662B2 (ja) * | 2006-06-28 | 2014-04-23 | 国立大学法人 熊本大学 | 腎臓・泌尿器疾患の診断方法 |
| WO2012090995A1 (ja) | 2010-12-28 | 2012-07-05 | ライオン株式会社 | 口腔状態の判定方法、並びにそのために用いられる分析用具、装置、及びプログラム |
| US9500649B2 (en) | 2010-12-28 | 2016-11-22 | Arkray, Inc. | Analytical tool and method for determining a condition of an oral cavity |
| JP2017184734A (ja) * | 2016-03-30 | 2017-10-12 | 栄研化学株式会社 | エステラーゼ及び／又はプロテアーゼ検出用試験片 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0224830B1 (en) | Gram negative bacteruria test | |
| JP3784869B2 (ja) | 体液中の白血球の濃度を比色法により測定するための改良法 | |
| US8859221B2 (en) | Method for measuring high density lipoprotein cholesterol | |
| US20090269735A1 (en) | Sample pretreatment solution for immunological test and method for using the same | |
| JPS6322260B2 (ja) | ||
| JPS6021454A (ja) | 過酸化物活性化物質の測定用試験組成物及び試験具 | |
| FI78926B (fi) | Bestaemning av esterasaktivitet i ett flytande prov. | |
| JP3667370B2 (ja) | 生物学的試料中の蛋白質の測定方法 | |
| JP4214271B2 (ja) | クレアチニン測定用試験片 | |
| IE54067B1 (en) | Method for preparing an analytical element preventing reagent migration | |
| US4132527A (en) | Diagnostic compositions, diagnosing instruments, and methods of manufacturing same | |
| JP2022529552A (ja) | 体液及び創傷関連生体分子の分析システム | |
| CA1041408A (en) | Diagnostic agent for sacaharides | |
| JPH054031B2 (ja) | ||
| EP1030931A1 (en) | Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition | |
| JP6965008B2 (ja) | エステラーゼ及び／又はプロテアーゼ検出用試験片 | |
| JPWO2004015424A1 (ja) | 蛋白質測定用試験片およびその製造方法 | |
| JPH1048193A (ja) | 体液中のマグネシウム測定用試験片 | |
| JPS63137698A (ja) | アルカリ性ホスフアタ−ゼ測定用分析素子 | |
| JP2522970B2 (ja) | 体液中のクレアチニン定量用試験片及びその製法 | |
| AU2650601A (en) | Urinary trypsin inhibitor assay containing a chelating agent | |
| JP2002243743A (ja) | 被検物質の検出方法 | |
| JP3185018B2 (ja) | 酸化還元反応に基づくｐｏｄ様活性物質測定用組成物 | |
| CN119846189A (zh) | 一种白细胞酯酶检测试纸及其制备方法和阴道炎检测试剂盒及泌尿系统感染检测试剂盒 | |
| JPH04200395A (ja) | ペルオキシダーゼ作用物質検出用試験片 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 19990311 |