JPH0518973A

JPH0518973A - 免疫学的測定方法及び試薬

Info

Publication number: JPH0518973A
Application number: JP19736591A
Authority: JP
Inventors: Yoshio Takahashi; 良夫高橋
Original assignee: SHIMA KENKYUSHO KK
Current assignee: SHIMA KENKYUSHO KK
Priority date: 1991-07-12
Filing date: 1991-07-12
Publication date: 1993-01-26

Abstract

(57)【要約】［目的］免疫学的反応により測定しようとする成分
の量に応じて、高感度で測定範囲の広い測定系とするこ
と。［構成］免疫学的反応により測定しようとする成分の
量に応じて、該測定しようとする成分と反応する成分を
不溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子を選択も
しくは組合せし、これに必要に応じて測定しようとする
成分と反応する成分、該反応する成分と反応する成分を
不溶化した粒子径が０．１μｍ以上の担体粒子を添加
し、検体と反応させる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は免疫学的測定方法及び試
薬にかかるものである。

【０００２】

【従来の技術】生体内の主要構成成分から微量成分ま
で、その測定には免疫学的測定方法が使用されている。

【０００３】免疫学的測定方法としてはＲＩＡ、ＥＩ
Ａ、ラテックス−ＴＩＡ（Ｌ−ＴＩＡ）、ＴＩＡ、一元
免疫拡散法等の定量法、或はＨＡＩＲ、ＨＡＲ、ＬＡＩ
Ｒ、ＬＡＲ等の半定量法が確立されており、いずれの免
疫学的測定方法を採用するかは測定しようとする成分の
異常低値〜異常高値までの含有量により決められる。

【０００４】ＲＩＡ、ＥＩＡ等は高感度であるため、ホ
ルモン、腫瘍マーカー等の微量成分の測定に汎用されて
いる。又Ｌ−ＴＩＡは比較的高感度であるためｎｇ／ｍ
ｌ〜μｇ／ｍｌの成分の測定に使用されている。更にＴ
ＩＡはμｇ／ｍｌ〜ｍｇ／ｍｌまでの測定対象に適用さ
れ、生化学自動分析装置により測定可能なため、Ｉｇ
Ｇ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４、ＣＲＰ等の定量に広
く普及している。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、ＲＩＡ
には放射性物質取扱のための設備、廃棄物処理の問題が
ある。ＥＩＡは操作が複雑であり、自動化するためには
専用機が必要である。両方法ともＬｐ（ａ）等の中程度
の濃度の含有成分の場合、例えばＬｐ（ａ）のＥＩＡ測
定試薬（バイオプール社）では検体の５１倍希釈を２回
繰り返して２６０１倍に希釈する等希釈倍数を高くする
必要があり、希釈操作の煩雑さ、使用するピッペットチ
ップや試験管の数が多いこと及び希釈誤差が大きな問題
となっている。

【０００６】又、Ｌ−ＴＩＡはホモジニアスな反応系で
あるため、抗原過剰による凝集阻止現象が生じ偽陰性と
なり易いことから、通常１０μｇ／ｍｌ以上の場合には
検体の希釈操作が必要となる。

【０００７】ＴＩＡは検出感度が低いことから、ポリエ
チレングリコール（ＰＥＧ）を用いて増感するため、Ｒ
Ｆ等の影響により非特異反応を生じ偽陽性となり易いこ
とが指摘されている。又、血清ＩｇＧの測定の場合、測
定しようとする成分が高濃度であることから、抗ＩｇＧ
抗体を大量に使用する必要があるが、そのため抗体過剰
となって検出不能域も拡大してしまう。更に、一般に抗
原抗体反応は抗原と抗体の最適比付近で急激に起こるた
め、測定範囲が最適比前後のごく狭い範囲に限られてし
まう欠点があった。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明は上述の従来の課
題を解決するためになしたもので、免疫学的反応により
測定しようとする成分の量に応じて、該測定しようとす
る成分と反応する成分を不溶化した粒子径が０．１μｍ
以下の担体粒子と、前記測定しようとする成分と反応す
る成分、該反応する成分を不溶化した粒子径が０．１μ
ｍよりも大きい担体粒子の少なくとも一種とを組み合わ
せ、測定しようとする成分を含む検体と反応させること
を特徴とする免疫学的測定方法及び試薬にかかるもので
ある。

【０００９】ここで該当する免疫学的反応には抗原抗体
反応、補体結合反応、変性ＩｇＧ−ＲＦ反応等がある。

【００１０】測定しようとする成分とは、前記免疫学的
反応に関与する反応成分のいずれかをいい、抗原、抗
体、補体、ＲＦ等がある。

【００１１】測定しようとする成分と反応する成分と
は、前記免疫学的反応に関与する反応成分のいずれか他
方をいい、例えば測定しようとする成分が抗原である場
合には抗体となる。該反応成分が抗体である場合にはポ
リクローナル抗体、モノクローナル抗体のいずれも使用
可能であり、二価抗体、一価抗体のいずれでもよい。

【００１２】担体粒子としては、ラテックス粒子、金属
コロイド粒子等が反応性、分散安定性の面で有利であ
る。微小粒径の担体粒子を製造することは高度の技術を
必要とするが、最近市販されているものが使用可能であ
る。測定しようとする成分の含有量が高い場合には、粒
子径は小さい方が試薬ブランクが低くなり、反応系に多
量に加えることが可能となり、免疫学的反応の両成分の
比率を適切な範囲とし得る。

【００１３】担体粒子の粒子径は０．１μｍ以下であれ
ばよいが、０．１μｍ以下の担体粒子を複数種類組み合
せることも可能であり、例えば平均粒子径が０．０５μ
ｍ以下の担体粒子と０．０３μｍの担体粒子を組み合わ
せるとよい。又、平均粒子径の異なる三種類以上の担体
粒子を組み合わせてもよい。

【００１４】担体粒子に免疫学的反応の一方の成分を不
溶化する方法としては、一般的な物理的吸着法、或は水
溶性カルボジイミドや二官能性試薬による化学的結合法
が用いられる。

【００１５】以上の免疫学的反応の一方の成分を不溶化
した担体粒子と組み合わせて用いるものとしては、測定
しようとする成分と反応する成分、或は該反応する成分
を不溶化した粒子径が０．１μｍよりも大きい０．３μ
ｍ好ましくは０．２５μｍまでの担体粒子のいずれか、
又は両方がある。

【００１６】測定しようとする成分を含む検体として
は、血清、血漿、血液、尿、腹水、胸水、髄液等の体
液、或は細胞、組織等の培養液、抽出液が用いられる。

【００１７】測定しようとする成分を含む検体との反応
の検出手段としては、一般的に使用される光学的な検出
手段が用いられる。すなわち、一定時間反応後の濁度変
化量を波長０．３〜０．８μｍにおける吸光度及び／又
は散乱光強度の増加量として測定する。測定感度を上げ
るためには測定波長は短いほうが有利であるが、ラテッ
クスの粒子径を大きくすると測定感度が上昇するが試薬
ブランクも高くなるので、例えば一般的な生化学自動分
析装置の吸光度測定上限は２．０〜３．０であるから光
学的な検出手段の測定上限を越えないよう波長を長くす
るのがよい。又、測定しようとする成分の含有量が高い
ため測定範囲を広くとりたい場合にも波長が長いほうが
よい。

【００１８】

【作用】測定しようとする成分と反応する成分を不溶化
した担体粒子の粒子径が０．１μｍ以下であると、最も
短い波長である０．３μｍにおける試薬ブランクが低い
ため、担体粒子濃度を高くすることが可能になり、より
高濃度の測定しようとする成分の測定が可能になり、し
かも測定しようとする成分が低濃度であっても生じた免
疫学的反応の量に応じて吸光度等の増加が検出できるた
め、測定範囲が著しく広くしかも直線的な標準曲線が得
られる。

【００１９】すなわち、測定感度を上げ且つ測定範囲を
低濃度側に広げるためには、担体粒子の粒子径を大きく
することと測定波長を短くすることが有効であり、又測
定範囲を高濃度側に広げるためには、担体粒子の粒子径
を小さくすることと測定波長を長くすることが有効であ
る。

【００２０】更に、測定しようとする成分と反応する成
分を加えることにより、測定範囲が高濃度側に拡大され
る。このとき、低濃度側の測定範囲は若干狭められる
が、測定しようとする成分の濃度からみて問題とならな
いこともある。

【００２１】測定しようとする成分と反応する成分が例
えば抗体であるときは、二価抗体、一価抗体のいずれも
使用可能であるが、二価抗体の場合には一価抗体に比べ
低濃度側の反応性の低下が少ない。

【００２２】又、測定しようとする成分と反応する成分
を不溶化した粒子径が０．１μｍ以上の担体粒子を加え
ることにより、反応性が増大され低濃度側の測定範囲が
広げられる。測定しようとする成分と反応する成分を不
溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子が測定しよ
うとする成分の含有量に対して十分量あるときには、前
記粒子径が０．１μｍ以上の担体粒子の添加により高濃
度側の測定範囲を狭めることなく、反応性が増大され、
低濃度側の測定範囲が広げられる。

【００２３】すなわち、測定しようとする成分と反応す
る成分の添加により、高濃度側の測定範囲が広げられ、
測定しようとする成分と反応する成分を不溶化した粒子
径が０．１μｍ以上の担体粒子の添加により反応性の増
大と低濃度側の測定範囲拡大が成し得られる。

【００２４】更に又、測定しようとする成分と反応する
成分、及び測定しようとする成分と反応する成分を不溶
化した粒子径が０．１μｍ以上の担体粒子の両方の添加
により、測定範囲が著しく拡大され、反応性も増大し、
広い測定範囲に亘って直線性の高い標準曲線が得られ
る。

【００２５】又、測定しようとする成分と反応する成分
を不溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子を複数
種類組み合わせることにより、測定範囲が拡大され、反
応性が増大し、標準曲線が直線化される。

【００２６】更に、測定波長を短くすると、免疫学的反
応に基ずく一定反応時間後の濁度変化量が鋭敏に検出さ
れ、感度が向上する。このとき試薬ブランクも若干上昇
するので、測定しようとする成分の含有量がかなり高い
場合には担体粒子濃度も高くする必要があるため、測定
波長を長くするとよい。

【００２７】すなわち、測定波長を短くすれば、検出感
度が増大し、低濃度側の測定範囲が拡大され、測定波長
を長くすれば高濃度側の測定範囲が拡大される。

【００２８】このように、担体粒子の粒子径の選択、担
体粒子の粒子径の異なる種類の組み合せの選択、測定し
ようとする成分と反応する成分の添加、測定しようとす
る成分と反応する成分を不溶化した粒子径が０．１μｍ
以上の担体粒子の添加、測定波長の選択により、反応性
が高く、広い測定範囲に亘って直線性の良好な標準曲線
が得られ、測定しようとする成分の濃度範囲に適した測
定系を提供することができる。

【００２９】

【実施例】

実施例１市販の粒子径０．０５、０．０８、０．０９、０．１
０、０．１２μｍのポリスチレンラテックス粒子に、夫
々ウサギ抗ＡＦＰ抗体を常法により物理的吸着させて感
作する。０．１％ＢＳＡを含む０．２Ｍグリシン−Ｎａ
Ｃｌ緩衝液（ｐＨ７．２）により浮遊して感作ラテック
ス試薬を得た。

【００３０】０．１％ＢＳＡを含む０．１Ｍグリシン−
ＮａＣｌ緩衝液（反応用緩衝液とする）３５０μｌにＡ
ＦＰ標準液１０μｌを加え、次いで前記各感作ラテック
ス試薬を夫々加え、反応開始後１分と５分の０．３４μ
ｍにおける吸光度を測定し、吸光度差を求めた。

【００３１】結果は

【図１】に示す通りであり、粒子径が０．０５及び０．
０８μｍの場合では、ＡＦＰ０〜１０μｇ／ｍｌまでほ
ぼ直線的に増加する標準曲線が得られた。粒子径０．０
９及び０．１０μｍの場合は２μｇ／ｍｌまで直線的に
増加し、６μｇ／ｍｌまで漸増する標準曲線が得られ
た。１μｇ／ｍｌの吸光度差は夫々０．１５５、０．２
００であり、測定感度は従来のものと同等であるが、測
定範囲が２倍以上広くなっている。０．１２μｍの場合
は、１μｇ／ｍｌまで直線的に増加し、６μｇ／ｍｌま
で漸増する標準曲線が得られた。１μｇ／ｍｌの吸光度
差は０．１９０であり、測定感度、測定範囲とも従来の
Ｌ−ＴＩＡと同様であるが、抗原過剰により吸光度差の
減少するＡＦＰ濃度は１０μｇ／ｍｌからであり、従来
のＬ−ＴＩＡが４μｇ／ｍｌであるのに対し、著しく高
くなり、より信頼性が向上した。

【００３２】すなわち、標準曲線の直線性の範囲は粒子
径０．０５μｍでは０〜１０μｇ／ｍｌ、０．０８μｍ
では０〜６μｇ／ｍｌ、０．０９及び０．１０μｍでは
０〜２μｇ／ｍｌ、０．１２μｍでは０〜１μｇ／ｍｌ
であった。いずれの場合も担体粒子の粒子径が小さいた
め、直線性の範囲及び吸光度が増加する抗原濃度の範囲
が拡大され、且つ測定波長を０．３４μｍと短くするこ
とにより測定感度が向上した。

【００３３】実施例２市販の粒子径０．０３μｍのポリスチレンラテックス粒
子にヤギ抗ＣＲＰ抗体を感作し、浮遊液にて０．１５％
に浮遊し、感作ラテックス試薬を得た。

【００３４】反応用緩衝液３００μｌ、ＣＲＰ標準液５
μｌ、感作ラテックス試薬５０μｌとして、前記実施例
１と同様に反応し、吸光度差を求めた。

【００３５】結果は

【図２】に示す通りであり、検出感度０．１ｍｇ／ｄ
ｌ、測定上限２０ｍｇ／ｄｌとなり、従来のＴＩＡの検
出感度０．５ｍｇ／ｄｌに比べ著しく感度が高く、従来
のＬ−ＴＩＡの非希釈測定時の感度０．３ｍｇ／ｄｌ及
び測定上限１５ｍｇ／ｄｌに比べても感度が高く測定範
囲も広い。

【００３６】実施例３粒子径０．０３、０．０５、０．１２μｍのポリスチレ
ンラテックス粒子にヤギ抗ヒトアルブミン抗体を夫々感
作し、ＢＳＡを含まない浮遊液にて０．１５％に浮遊し
感作ラテックス試薬を得た。

【００３７】０．１Ｍグリシン−ＮａＣｌ緩衝液４００
μｌ、アルブミン標準液５μｌ、感作ラテックス試薬５
０μｌとして反応し、反応開始後１分と２分の０．６６
μｍにおける吸光度を測定し、吸光度差を求めた。

【００３８】結果は

【図３】に示す通りであり、粒子径が０．０３μｍの場
合では、反応性は非常に低いがアルブミン２００μｇ／
ｍｌまで直線的な標準曲線が得られた。粒子径０．０５
μｍの場合は反応性が若干高くなり、１００μｇ／ｍｌ
まで直線となった。粒子径０．１２μｍ場合は反応性が
著しく高いが、直線性の範囲は５０μｇ／ｍｌまでであ
り、１００μｇ／ｍｌ、２００μｇ／ｍｌで吸光度が順
次減少した。

【００３９】実施例４前記実施例３で調製した粒子径０．０３μｍと０．０５
μｍと０．１２μｍの感作ラテックス試薬を夫々１：
０：１、２：０：１、１：１：１に混合し、感作ラテッ
クス試薬８０μｌとして前記実施例３と同様に反応し、
吸光度差を求めた。

【００４０】結果は

【図４】に示す通りであり、いずれも２００μｇ／ｍｌ
まで略直線的な標準曲線が得られた。このように、個々
の粒子径の感作ラテックス試薬単独では反応性が低いこ
と、或は測定範囲が狭いこと等により、必ずしも満足で
きる測定系となり得ない場合でも、これらを適当に組み
合わせることにより、臨床的要求に対し必要にして充分
な測定系が得られる。

【００４１】実施例５前記実施例３で調製した粒子径０．０５μｍの感作ラテ
ックス試薬に抗アルブミン二価抗体及び抗アルブミン一
価抗体（Ｆａｂ）を１００、８０μｇ／ｍｌの濃度に夫
々加え、０．１Ｍグリシン−ＮａＣｌ緩衝液３５０μ
ｌ、アルブミン標準液５μｌ、感作ラテックス試薬８０
μｌとして反応し、反応開始後１分と５分の０．３４μ
ｍにおける吸光度を測定し、吸光度差を求めた。

【００４２】結果は

【図５】に示す通りであり、感作ラテックス試薬単独で
は非常に測定感度が高いが、測定範囲が５０μｇ／ｍｌ
までと若干狭いのに対し、抗アルブミン二価抗体又は抗
アルブミン一価抗体を添加することにより、測定範囲が
２００μｇ／ｍｌまで広がりしかも反応性は低下するも
のの測定感度は充分に維持されていた。

【００４３】実施例６前記実施例３で調製した粒子径０．０５μｍの感作ラテ
ックス試薬を２００μｌ用い、測定波長を０．５７μｍ
として前記実施例５と同様に反応し、吸光度差を求め
た。

【００４４】結果は

【図６】に示す通りであり、アルブミン２００μｇ／ｍ
ｌまで直線的で高感度な標準曲線が得られた。

【００４５】実施例７粒子径０．０３と０．０５μｍのポリスチレンラテック
ス粒子に夫々ヤギ抗Ｌｐ（ａ）抗体を感作し、浮遊液に
より夫々０．１２％、０．２％に浮遊して感作ラテック
ス試薬を得た。更に、これらの一部を用いて０．０３μ
ｍと０．０５μｍの比を１：１、１：２に夫々混合し
た。

【００４６】反応用緩衝液３５０μｌ、Ｌｐ（ａ）標準
液を５μｌ、前記感作ラテックス試薬を５０μｌとして
前記実施例１と同様に反応し、吸光度差を求めた。

【００４７】結果は

【図７】に示す通りであり、粒子径が０．０３μｍの場
合はＬｐ（ａ）が１００ｍｇ／ｄｌまで直線的に増加す
るが、反応性がやや低い。０．０５μｍの場合は、反応
性が高いが直線性の範囲が５０ｍｇ／ｄｌまでであり、
必要とするＬｐ（ａ）の測定範囲２〜６０ｍｇ／ｄｌよ
りも若干狭い。１：１混合の場合及び１：２混合の場合
は、Ｌｐ（ａ）１００ｍｇ／ｄｌまで直線性が得られ、
しかも反応性も高く検出感度が１ｍｇ／ｄｌであり、臨
床的な要求を満足することができた。

【００４８】又、粒子径の異なる二種類の感作ラテック
ス試薬の混合比を変えることにより任意の反応性を持た
せることができるとともに、感作する抗体又は抗原の力
価の差を是正することができ、ロット間差の少ない試薬
の提供が容易に可能となる。

【００４９】実施例８粒子径０．０５μｍのポリスチレンラテックス粒子にヤ
ギ抗ヒトＩｇＭ抗体を水溶性カルボジイミドを用いた化
学的結合法により感作し、浮遊液により０．３％に浮遊
して感作ラテックス試薬を得た。

【００５０】反応用緩衝液にヤギ抗ヒトＩｇＭ一価抗体
（Ｆａｂ）を０及び０．５ｍｇ／ｍｌの濃度に加えたも
の３００μｌ、ＩｇＭ標準液５μｌ、感作ラテックス試
薬２０μｌを用いて前記実施例１と同様に反応し、反応
開始前の吸光度及び反応開始５分後の吸光度を測定し、
吸光度差を求めた。

【００５１】結果は

【図８】に示す通りであり、Ｆａｂを加えない場合はＩ
ｇＭ０．２ｍｇ／ｍｌまで直線性があり、測定範囲が
０．４ｍｇ／ｍｌまでの高感度な標準曲線が得られ、Ｆ
ａｂを反応用緩衝液に加えた場合は、若干反応性が低下
するが６．４ｍｇ／ｍｌまで感度良好な標準曲線が得ら
れた。

【００５２】

【発明の効果】以上述べたように本発明によれば下記の
種々の優れた効果が得られる。

【００５３】１．本発明の方法によれば、測定しようと
する成分の量に応じて、測定しようとする成分と反応す
る成分を不溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子
に、測定しようとする成分と反応する成分、又は該反応
する成分を不溶化した粒子径が０．１μｍ以上の担体粒
子のいずれかもしくは両方を添加して反応させるので、
測定しようとする成分の測定レンジを包含する広い測定
系とすることができる。従って、検体の無希釈測定が可
能となり、希釈操作の煩雑性、希釈誤差を回避するとと
もに、使用する器具の数を減少することができる。

【００５４】２．粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子を
複数種類組合せることにより、標準曲線を直線化するこ
とができるとともに、高濃度側及び低濃度側の測定範囲
を拡大することができる。従って、測定しようとする成
分の過剰による偽陰性も減少する。

【００５５】３．測定しようとする成分を含む検体との
反応による濁度変化量を光学的に測定するので、一般的
な自動分析装置に適用でき、特殊な専用機械を必要とし
ない。

【００５６】４．測定波長を短くすれば測定感度を高
め、測定波長を長くすれば高濃度側測定範囲を拡大する
ことができる。

【００５７】５．本発明の試薬によれば、担体粒子の粒
子径を０．１μｍ以下としたので、試薬ブランクが小さ
いため、多量に反応系内に加えることが可能となり、高
濃度側測定範囲が著しく拡大される。しかも、短い波長
により測定することにより検出感度も向上し、ＰＥＧを
加えて増感する必要がないか、もしくは僅かのＰＥＧの
添加で充分であるためＲＦ等による非特異反応が生じに
くく、特異性が高い。

【００５８】６．前記試薬に測定しようとする成分と反
応する成分を添加することにより、更に高濃度側測定範
囲を拡大することができる。

【００５９】７．前記試薬に測定しようとする成分と反
応する成分を不溶化した粒子径が０．１μｍ以上の担体
粒子を添加することにより、更に低濃度側測定範囲を拡
大することができる。

【００６０】８．更に、担体粒子の粒子径が０．１μｍ
以下で且つ平均粒子径の異なる複数種類の担体粒子を組
み合わせることにより、直線性の良好な広い測定範囲の
標準曲線が得られる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の効果を示した説明図である。

【図２】本発明の効果を示した説明図である。

【図３】本発明の効果を示した説明図である。

【図４】本発明の効果を示した説明図である。

【図５】本発明の効果を示した説明図である。

【図６】本発明の効果を示した説明図である。

【図７】本発明の効果を示した説明図である。

【図８】本発明の効果を示した説明図である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】免疫学的反応により測定しようとする成
分の量に応じて、該測定しようとする成分と反応する成
分を不溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子と、
前記測定しようとする成分と反応する成分、該反応する
成分を不溶化した粒子径が０．１μｍよりも大きい担体
粒子の少なくとも一種とを組み合わせ、測定しようとす
る成分を含む検体と反応させることを特徴とする免疫学
的測定方法。
【請求項２】粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子を複
数種類組み合わせる請求項１記載の免疫学的測定方法。
【請求項３】粒子径が０．０５μｍ以下の担体粒子と
０．０３μｍ以下の担体粒子とを組み合わせる請求項２
記載の免疫学的測定方法。
【請求項４】一定時間反応後の濁度変化量を光学的に
測定する請求項１、２又は３記載の免疫学的測定方法。
【請求項５】波長０．３〜０．８μｍにおける吸光度
及び／又は散乱光強度の増加を測定する請求項４記載の
免疫学的測定方法。
【請求項６】免疫学的反応の一方の成分を不溶化した
粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子からなることを特徴
とする免疫学的測定試薬。
【請求項７】免疫学的反応の一方の成分と該一方の成
分を不溶化した粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子とか
らなることを特徴とする免疫学的測定試薬。
【請求項８】免疫学的反応の一方の成分が少なくとも
二価抗体、一価抗体のいずれかである請求項７記載の免
疫学的測定試薬。
【請求項９】免疫学的反応の一方の成分を不溶化した
粒子径が０．１μｍ以下の担体粒子と粒子径が０．１μ
ｍより大きい担体粒子からなる免疫学的測定試薬。
【請求項１０】免疫学的反応の一方の成分を不溶化し
た担体粒子の粒子径が０．１μｍ以下で且つ平均粒子径
が異なる複数種類の担体粒子からなる請求項６、７、８
又は９記載の免疫学的測定試薬。