JPH05194192A - 分散性の改善された温度感受性ｍｌｖ型リポソ−ム - Google Patents
分散性の改善された温度感受性ｍｌｖ型リポソ−ムInfo
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- JPH05194192A JPH05194192A JP21555092A JP21555092A JPH05194192A JP H05194192 A JPH05194192 A JP H05194192A JP 21555092 A JP21555092 A JP 21555092A JP 21555092 A JP21555092 A JP 21555092A JP H05194192 A JPH05194192 A JP H05194192A
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- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
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- Public Health (AREA)
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- Medicinal Preparation (AREA)
- Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 分散性の改善された温度感受性ＭＬＶ型リポ
ソ−ムを製造する。 【構成】 ジパルミトイルホスファチジルコリンと負電
荷を有する１，２−ジアシル−グリセロリン脂質（但
し、１位および２位のアシルは、互いに独立してパルミ
トイルまたはステアロイルである）を、２０：１〜８：
２の重量比で含有することを特徴とする分散性の改善さ
れた温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ム。 【効果】 本発明のリポソ−ムは、内包薬物を、約３７
℃以下ではほとんど放出させずに約４０〜約４４℃にお
いて最も効率よく放出させることができ、またすぐれた
分散性を有する。よって、癌、腫瘍等に対する局所温熱
療法に効果的に利用することが出来、更に注射剤として
の適用が可能である。更に、ＭＬＶ型であるので、工業
上、大量生産も容易である。
ソ−ムを製造する。 【構成】 ジパルミトイルホスファチジルコリンと負電
荷を有する１，２−ジアシル−グリセロリン脂質（但
し、１位および２位のアシルは、互いに独立してパルミ
トイルまたはステアロイルである）を、２０：１〜８：
２の重量比で含有することを特徴とする分散性の改善さ
れた温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ム。 【効果】 本発明のリポソ−ムは、内包薬物を、約３７
℃以下ではほとんど放出させずに約４０〜約４４℃にお
いて最も効率よく放出させることができ、またすぐれた
分散性を有する。よって、癌、腫瘍等に対する局所温熱
療法に効果的に利用することが出来、更に注射剤として
の適用が可能である。更に、ＭＬＶ型であるので、工業
上、大量生産も容易である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ジパルミトイルホスフ
ァチジルコリン（以下、ＤＰＰＣと言う）と負電荷を有
する１，２−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位
および２位のアシルは、互いに独立してパルミトイルま
たはステアロイルである）を、２０：１〜８：２の重量
比で含有することを特徴とする分散性の改善された温度
感受性ＭＬＶ型リポソ−ムに関する。よって、本発明リ
ポソ−ムは、注射剤として局所温熱療法に使用すること
が可能である。
ァチジルコリン（以下、ＤＰＰＣと言う）と負電荷を有
する１，２−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位
および２位のアシルは、互いに独立してパルミトイルま
たはステアロイルである）を、２０：１〜８：２の重量
比で含有することを特徴とする分散性の改善された温度
感受性ＭＬＶ型リポソ−ムに関する。よって、本発明リ
ポソ−ムは、注射剤として局所温熱療法に使用すること
が可能である。
【０００２】
【先行技術】従来、温度感受性リポソ−ムのリン脂質と
しては、主として側鎖に飽和アシル基をもつホスファチ
ジルコリンを基本成分とし、例えばＤＰＰＣ、ジステア
ロイルホスファチジルコリン（以下、ＤＳＰＣと言
う）、パルミトイルステアロイルホスファチジルコリン
等を単独または混合して使用することが特開平２−１４
０４号等に開示されている。また温熱療法に関しては、
特に約４２℃前後の温度で癌、腫瘍等に対して優れた治
療効果が得られることが、癌の臨床の第３２巻、第１３
号（１９８６年）や総合臨床の第３７巻、第１号（１９
８８年）に報告されている。上記温熱療法との併用によ
り、より優れた治療効果を得るための温度感受性リポソ
−ムとは、内包薬物を、体温付近ではほとんど放出させ
ず、約４２℃前後で最も効率よく放出できる温度感受性
を有するものであり、その脂質膜の基本成分としては、
膜相転移温度が約４２℃であるＤＰＰＣが用いられてい
た。
しては、主として側鎖に飽和アシル基をもつホスファチ
ジルコリンを基本成分とし、例えばＤＰＰＣ、ジステア
ロイルホスファチジルコリン（以下、ＤＳＰＣと言
う）、パルミトイルステアロイルホスファチジルコリン
等を単独または混合して使用することが特開平２−１４
０４号等に開示されている。また温熱療法に関しては、
特に約４２℃前後の温度で癌、腫瘍等に対して優れた治
療効果が得られることが、癌の臨床の第３２巻、第１３
号（１９８６年）や総合臨床の第３７巻、第１号（１９
８８年）に報告されている。上記温熱療法との併用によ
り、より優れた治療効果を得るための温度感受性リポソ
−ムとは、内包薬物を、体温付近ではほとんど放出させ
ず、約４２℃前後で最も効率よく放出できる温度感受性
を有するものであり、その脂質膜の基本成分としては、
膜相転移温度が約４２℃であるＤＰＰＣが用いられてい
た。
【０００３】
【発明が解決すべき課題】しかし、これまで広く用いら
れていた脂質膜がＤＰＰＣとＤＳＰＣ等からなる温度感
受性リポソ−ムは、凝集性が強く分散性が悪いので、注
射剤に適用するのは困難であった。また、凝集防止剤と
して電荷脂質を添加するにしても、電荷脂質がＤＰＰＣ
の膜相転位温度に及ぼす影響は、その種類、添加量等に
よって異なるため一概に予測出来ず、種々ある電荷脂質
の中から好適なものを選択して、前記温度感受性を維持
したまま分散性を改善するのは、当業者といえども極め
て困難であった。またリポソ−ムは、通常その形態によ
り、多重層リポソ−ム（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａ ｖ
ｅｓｉｃｌｅ、以下ＭＬＶと略記）、小さな一枚膜リポ
ソ−ム（ｓｍａｌｌ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ ｖｅｓｉｃ
ｌｅ、以下ＳＵＶと略記）、大きな一枚膜リポソ−ム
（ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ ｖｅｓｉｃｌｅ、
以下ＬＵＶと略記）の３種類に大きく分けられ。しか
し、実用性の高い温度感受性リポソ−ムとしては、これ
までＳＵＶ型かＬＵＶ型のものしか報告されていなかっ
た。ＭＬＶ型は製造上スケ−ルアップに適しているにも
かかわらず、温度変化に対する応答性あるいは膜相転位
温度での放出性が悪いこと等の理由でほとんど使用され
なかった。ＭＬＶ型が温度感受性リポソ−ムとしては不
適であったことは、バイオシミカエトアルバイオフィジ
ィカアクタ（Biochimica et BiophysicaActa,732(1983)
289-299）に報告されている結果からも明らかである。
また通常の方法で得られたＭＬＶは、普通そのままでは
粒子径が大きく、体内において毛細血管をスム−ズに通
過するには物理的に困難であったり、また網内系のマク
ロファ−ジに捕獲されやすい等の理由で、注射剤への適
用は困難であった。実際、前記特開平２−１４０４号に
開示されているリポソ−ムも、専らＬＵＶ型を対象とす
るものであり、ＭＬＶ型のものは、何ら具体的に開示さ
れていない。
れていた脂質膜がＤＰＰＣとＤＳＰＣ等からなる温度感
受性リポソ−ムは、凝集性が強く分散性が悪いので、注
射剤に適用するのは困難であった。また、凝集防止剤と
して電荷脂質を添加するにしても、電荷脂質がＤＰＰＣ
の膜相転位温度に及ぼす影響は、その種類、添加量等に
よって異なるため一概に予測出来ず、種々ある電荷脂質
の中から好適なものを選択して、前記温度感受性を維持
したまま分散性を改善するのは、当業者といえども極め
て困難であった。またリポソ−ムは、通常その形態によ
り、多重層リポソ−ム（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａ ｖ
ｅｓｉｃｌｅ、以下ＭＬＶと略記）、小さな一枚膜リポ
ソ−ム（ｓｍａｌｌ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ ｖｅｓｉｃ
ｌｅ、以下ＳＵＶと略記）、大きな一枚膜リポソ−ム
（ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ ｖｅｓｉｃｌｅ、
以下ＬＵＶと略記）の３種類に大きく分けられ。しか
し、実用性の高い温度感受性リポソ−ムとしては、これ
までＳＵＶ型かＬＵＶ型のものしか報告されていなかっ
た。ＭＬＶ型は製造上スケ−ルアップに適しているにも
かかわらず、温度変化に対する応答性あるいは膜相転位
温度での放出性が悪いこと等の理由でほとんど使用され
なかった。ＭＬＶ型が温度感受性リポソ−ムとしては不
適であったことは、バイオシミカエトアルバイオフィジ
ィカアクタ（Biochimica et BiophysicaActa,732(1983)
289-299）に報告されている結果からも明らかである。
また通常の方法で得られたＭＬＶは、普通そのままでは
粒子径が大きく、体内において毛細血管をスム−ズに通
過するには物理的に困難であったり、また網内系のマク
ロファ−ジに捕獲されやすい等の理由で、注射剤への適
用は困難であった。実際、前記特開平２−１４０４号に
開示されているリポソ−ムも、専らＬＵＶ型を対象とす
るものであり、ＭＬＶ型のものは、何ら具体的に開示さ
れていない。
【０００４】よって、上記温度感受性を有しかつ分散性
のよい温度感受性リポソ−ム、その中でも特にＭＬＶ型
の開発が要望されていた。
のよい温度感受性リポソ−ム、その中でも特にＭＬＶ型
の開発が要望されていた。
【０００５】
【課題を解決するための手段】上記状況に鑑み、本発明
者らは鋭意検討した結果、リポソ−ム主構成成分として
ＤＰＰＣ、および電荷脂質として負電荷を有する１，２
−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位および２位
のアシルは、互いに独立してパルミトイルまたはステア
ロイルである）を、２０：１〜８：２の重量比で使用す
れば、内包薬物の放出性が約３７℃以下では極めて低い
が、約４０〜約４４℃で最も良くかつ分散性の改善され
た温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ムが得られることを見出
し、本発明を完成した。
者らは鋭意検討した結果、リポソ−ム主構成成分として
ＤＰＰＣ、および電荷脂質として負電荷を有する１，２
−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位および２位
のアシルは、互いに独立してパルミトイルまたはステア
ロイルである）を、２０：１〜８：２の重量比で使用す
れば、内包薬物の放出性が約３７℃以下では極めて低い
が、約４０〜約４４℃で最も良くかつ分散性の改善され
た温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ムが得られることを見出
し、本発明を完成した。
【０００６】本明細書中において、負電荷を有する１，
２−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位および２
位のアシルは、互いに独立してパルミトイルまたはステ
アロイルである）とは、ホスファチジルセリン、ホスフ
ァチジルグリセロ−ル、またはホスファチジン酸のう
ち、１，２位のアシル基が共にパルミトイルであるか、
共にステアロイルであるか、またはパルミトイルとステ
アロイルであるものを意味し、具体的には、ジパルミト
イルホスファチジルセリン（以下、ＤＰＰＳという）、
ジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（以下、Ｄ
ＰＰＧという）、ジパルミトイルホスファチジン酸（以
下、ＤＰＰＡという）、ジステアロイルホスファチジル
セリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロ−ル、
ジステアロイルホスファチジン酸（以下、ＤＳＰＡとい
う）、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチ
ジルセリン、１−パルミトイル２−ステアロイルホスフ
ァチジルグリセロ−ル、１−パルミトイル２−ステアロ
イルホスファチジン酸等が例示されるが、好ましくはＤ
ＰＰＳ、ＤＰＰＧ、ＤＰＰＡ、ＤＳＰＡであり、更に好
ましくは、ＤＰＰＡである。以下、本明細書中において
は、これらの負電荷を有する１，２−ジアシル−グリセ
ロリン脂質を、便宜上単に、負電荷脂質という。ＤＰＰ
Ｃと負電荷脂質の構成比は、重量比で、ＤＰＰＣ：負電
荷脂質＝２０：１〜８：２である。ＤＰＰＣに対する負
電荷脂質の割合が下限以下であれば、リポソ−ムの分散
性が改善されず好ましくない。また、上限以上であれ
ば、約３７℃以下でも内包薬物が放出されやすくなるの
で、局所温熱療法には不適なリポソ−ムとなる。
２−ジアシル−グリセロリン脂質（但し、１位および２
位のアシルは、互いに独立してパルミトイルまたはステ
アロイルである）とは、ホスファチジルセリン、ホスフ
ァチジルグリセロ−ル、またはホスファチジン酸のう
ち、１，２位のアシル基が共にパルミトイルであるか、
共にステアロイルであるか、またはパルミトイルとステ
アロイルであるものを意味し、具体的には、ジパルミト
イルホスファチジルセリン（以下、ＤＰＰＳという）、
ジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（以下、Ｄ
ＰＰＧという）、ジパルミトイルホスファチジン酸（以
下、ＤＰＰＡという）、ジステアロイルホスファチジル
セリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロ−ル、
ジステアロイルホスファチジン酸（以下、ＤＳＰＡとい
う）、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチ
ジルセリン、１−パルミトイル２−ステアロイルホスフ
ァチジルグリセロ−ル、１−パルミトイル２−ステアロ
イルホスファチジン酸等が例示されるが、好ましくはＤ
ＰＰＳ、ＤＰＰＧ、ＤＰＰＡ、ＤＳＰＡであり、更に好
ましくは、ＤＰＰＡである。以下、本明細書中において
は、これらの負電荷を有する１，２−ジアシル−グリセ
ロリン脂質を、便宜上単に、負電荷脂質という。ＤＰＰ
Ｃと負電荷脂質の構成比は、重量比で、ＤＰＰＣ：負電
荷脂質＝２０：１〜８：２である。ＤＰＰＣに対する負
電荷脂質の割合が下限以下であれば、リポソ−ムの分散
性が改善されず好ましくない。また、上限以上であれ
ば、約３７℃以下でも内包薬物が放出されやすくなるの
で、局所温熱療法には不適なリポソ−ムとなる。
【０００７】また、本発明リポソ−ムの内包薬物として
は、局所温熱療法に適したものであれば、特に限定され
ず幅広く使用可能である。例えば、シスプラチンおよび
シスジアンミン（グリコラト）白金（以下、２５４−Ｓ
という）等の金属錯体、ブレオマイシンおよびアドリア
マイシン等の制癌抗生物質、５−フルオロウラシル、メ
トトレキセ−ト等の代謝拮抗剤、天然型または遺伝子組
替え型インタ−フェロン（α、β、γ）、天然型または
遺伝子組替え型インタ−ロイキン２等のリンホカイン
類、あるいはプレドニン、リンデロン、セレスタミン等
の抗炎症剤等が例示される。尚、２５４−Ｓは、特公昭
６３−７１９４号に記載の方法により合成できる。
は、局所温熱療法に適したものであれば、特に限定され
ず幅広く使用可能である。例えば、シスプラチンおよび
シスジアンミン（グリコラト）白金（以下、２５４−Ｓ
という）等の金属錯体、ブレオマイシンおよびアドリア
マイシン等の制癌抗生物質、５−フルオロウラシル、メ
トトレキセ−ト等の代謝拮抗剤、天然型または遺伝子組
替え型インタ−フェロン（α、β、γ）、天然型または
遺伝子組替え型インタ−ロイキン２等のリンホカイン
類、あるいはプレドニン、リンデロン、セレスタミン等
の抗炎症剤等が例示される。尚、２５４−Ｓは、特公昭
６３−７１９４号に記載の方法により合成できる。
【０００８】内包薬物の封入量は、治療目的、薬効量、
リポソ−ム投与量、内水相の浸透圧等を考慮して適宜選
択されるが、通常は内水相に対する溶解度が低い場合
は、飽和濃度になるまで封入される。
リポソ−ム投与量、内水相の浸透圧等を考慮して適宜選
択されるが、通常は内水相に対する溶解度が低い場合
は、飽和濃度になるまで封入される。
【０００９】更に、本発明リポソ−ムは、内水相の浸透
圧比を高めることにより、内包薬物の放出性を特異的に
高めることが可能である。即ち、浸透圧調整後も各種温
度における内包薬物の放出傾向は、浸透圧調整前とほと
んど変わらず、約３７℃以下ではやはり極めて低い放出
性を維持しているが、約４０〜約４４℃においては最も
良い放出性を示す。浸透圧比は必ずしも限定されない
が、好ましくは生理的等張液の１．５〜２倍である。浸
透圧調整剤としては、水可溶性で生理的に許容なもので
あれば、特に制限なく使用可能であり、塩類（例、食
塩）、糖類（例、グルコ−ス、キシリト−ル，マンニッ
ト）、アミノ酸類（例、グリシン，アスパラギン酸）等
が例示される。
圧比を高めることにより、内包薬物の放出性を特異的に
高めることが可能である。即ち、浸透圧調整後も各種温
度における内包薬物の放出傾向は、浸透圧調整前とほと
んど変わらず、約３７℃以下ではやはり極めて低い放出
性を維持しているが、約４０〜約４４℃においては最も
良い放出性を示す。浸透圧比は必ずしも限定されない
が、好ましくは生理的等張液の１．５〜２倍である。浸
透圧調整剤としては、水可溶性で生理的に許容なもので
あれば、特に制限なく使用可能であり、塩類（例、食
塩）、糖類（例、グルコ−ス、キシリト−ル，マンニッ
ト）、アミノ酸類（例、グリシン，アスパラギン酸）等
が例示される。
【００１０】本発明リポソ−ムの製造方法は、基本的に
は、ＭＬＶの一般的製造方法が適用可能である。即ち、
まず、負電荷脂質をクロロホルム等の溶媒に完全に溶解
させた後、減圧法等で溶媒を除去し、均一な脂質の被膜
を形成させる。次に、医薬活性成分及び浸透圧調整剤等
を含有した水溶液を加え、負電荷脂質の膜転移温度以上
の温度で乳濁化を行ない、リポソ−ム分散液を得る。こ
れをポリカ−ボネ−トメンブレンを装着した加圧濾過器
でサイジング処理するかまたは高圧乳化器、超音波乳化
器等で微細化処理したものを、更に透析、ゲル濾過、遠
心分離等で処理することにより本発明リポソ−ムが得ら
れる。本発明リポソ−ムは、優れた分散性を有するので
適宜サイジング処理等の方法を選択すれば、ほぼ粒径の
揃った均一な粒子として得られる。その粒度分布は、約
０.０３〜約０.５μｍ、好ましく約０.１〜約０.３μｍ
である。また、水溶液中においても、特に凝集防止剤等
を添加しなくても安定な分散性を示すので、注射剤への
適用が極めて容易である。
は、ＭＬＶの一般的製造方法が適用可能である。即ち、
まず、負電荷脂質をクロロホルム等の溶媒に完全に溶解
させた後、減圧法等で溶媒を除去し、均一な脂質の被膜
を形成させる。次に、医薬活性成分及び浸透圧調整剤等
を含有した水溶液を加え、負電荷脂質の膜転移温度以上
の温度で乳濁化を行ない、リポソ−ム分散液を得る。こ
れをポリカ−ボネ−トメンブレンを装着した加圧濾過器
でサイジング処理するかまたは高圧乳化器、超音波乳化
器等で微細化処理したものを、更に透析、ゲル濾過、遠
心分離等で処理することにより本発明リポソ−ムが得ら
れる。本発明リポソ−ムは、優れた分散性を有するので
適宜サイジング処理等の方法を選択すれば、ほぼ粒径の
揃った均一な粒子として得られる。その粒度分布は、約
０.０３〜約０.５μｍ、好ましく約０.１〜約０.３μｍ
である。また、水溶液中においても、特に凝集防止剤等
を添加しなくても安定な分散性を示すので、注射剤への
適用が極めて容易である。
【００１１】本発明について更に詳細に説明するため
に、以下に実施例、参考例および実験例を示すが、これ
らは何等本発明を制限するものではない。なお、以下に
おいてリン脂質の比率はすべて重量比で表わすものとす
る。
に、以下に実施例、参考例および実験例を示すが、これ
らは何等本発明を制限するものではない。なお、以下に
おいてリン脂質の比率はすべて重量比で表わすものとす
る。
【００１２】実施例１ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）２
ｍｇ含有のクロロホルム溶液から、ロ−タリ−エバポレ
−タ−で溶媒を除去しナスコルベンの内壁に脂質の皮膜
を形成させた後、減圧下で乾燥を行なった。次に、この
ナスコルベンに、５６ｍＭ ５（６）−カルボキシフル
オレッセイン（以下、ＣＦと言う）と２％グルコ−ス含
有の１０ｍＭリン酸緩衝液０.６ｍｌを加え、５０℃の
湯浴上で半振盪により乳濁化を行なった。この様にして
得られたリポソ−ム分散液を、孔径０.２μｍのニュク
レポア メンブラン（Ｎｕｃｌｅｐｏｒｅ ｍｅｍｂｒａ
ｎｅ，野村マイクロサイエンス（株）製）を装着したエ
クストル−ザ−（リペックス バイオメンブラン社製）
に、４回繰り返して通過させてサイジング処理を行なっ
た後、内包されなかったフリ−のＣＦからリポソ−ムを
ゲル濾過により分離することにより、ＤＰＰＣ：ＤＰＰ
Ａ＝９：１のＭＬＶリポソ−ムを調製した。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）２
ｍｇ含有のクロロホルム溶液から、ロ−タリ−エバポレ
−タ−で溶媒を除去しナスコルベンの内壁に脂質の皮膜
を形成させた後、減圧下で乾燥を行なった。次に、この
ナスコルベンに、５６ｍＭ ５（６）−カルボキシフル
オレッセイン（以下、ＣＦと言う）と２％グルコ−ス含
有の１０ｍＭリン酸緩衝液０.６ｍｌを加え、５０℃の
湯浴上で半振盪により乳濁化を行なった。この様にして
得られたリポソ−ム分散液を、孔径０.２μｍのニュク
レポア メンブラン（Ｎｕｃｌｅｐｏｒｅ ｍｅｍｂｒａ
ｎｅ，野村マイクロサイエンス（株）製）を装着したエ
クストル−ザ−（リペックス バイオメンブラン社製）
に、４回繰り返して通過させてサイジング処理を行なっ
た後、内包されなかったフリ−のＣＦからリポソ−ムを
ゲル濾過により分離することにより、ＤＰＰＣ：ＤＰＰ
Ａ＝９：１のＭＬＶリポソ−ムを調製した。
【００１３】実施例２〜４ 生理的に等張としたリン酸緩衝塩水溶液（以下、ＰＢＳ
溶液と略す）に２０％ラット血清を加えて調製した溶液
に、生理的等張液に対する浸透圧比が１,１.５,２にな
るようにグルコ−スを加えて調製した５６ｍＭ ＣＦ含
有の３種類の溶液を用意する。各溶液０.６ｍｌを、実
施例１の方法で得られたＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝９：１の
乾燥被膜（総脂質量２０ｍｇ）に加えた後、実施例１と
同様の方法で乳濁化を行ない更にサイジング処理するこ
とにより、粒径はすべて約０.２μｍであるが内水相の
浸透圧が異なる３種類のＣＦ内包リポソ−ムを得た。生
理的等張液に対する内水相の浸透圧比が１,１.５,２の
リポソ−ムをそれぞれ実施例２，実施例３，実施例４と
する。
溶液と略す）に２０％ラット血清を加えて調製した溶液
に、生理的等張液に対する浸透圧比が１,１.５,２にな
るようにグルコ−スを加えて調製した５６ｍＭ ＣＦ含
有の３種類の溶液を用意する。各溶液０.６ｍｌを、実
施例１の方法で得られたＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝９：１の
乾燥被膜（総脂質量２０ｍｇ）に加えた後、実施例１と
同様の方法で乳濁化を行ない更にサイジング処理するこ
とにより、粒径はすべて約０.２μｍであるが内水相の
浸透圧が異なる３種類のＣＦ内包リポソ−ムを得た。生
理的等張液に対する内水相の浸透圧比が１,１.５,２の
リポソ−ムをそれぞれ実施例２，実施例３，実施例４と
する。
【００１４】実施例５,６ 実施例１の方法により、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝９：１の
乾燥被膜を２検体調製し、一方には、２５４−Ｓ １０
０ｍｇ含有の５％キシリト−ル溶液１０ｍｌを加え、他
方には、２５４−Ｓ １００ｍｇ含有の７.５％キシリト
−ル溶液１０ｍｌを加えた後、実施例１と同様の方法で
処理することにより、粒径が約０.２μｍであるが内水
相の浸透圧が異なる２種類の２５４−Ｓ内包リポソ−ム
を得た。これを、遠心分離機（１０００００×ｇ，２時
間）かけてリポソ−ムを集めた後、ＰＢＳ溶液で再分散
して約２ｍｌとし、測定用試料とした。生理的等張液に
対する内水相の浸透圧比が１,１.５のリポソ−ムをそれ
ぞれ実施例５，実施例６とする。
乾燥被膜を２検体調製し、一方には、２５４−Ｓ １０
０ｍｇ含有の５％キシリト−ル溶液１０ｍｌを加え、他
方には、２５４−Ｓ １００ｍｇ含有の７.５％キシリト
−ル溶液１０ｍｌを加えた後、実施例１と同様の方法で
処理することにより、粒径が約０.２μｍであるが内水
相の浸透圧が異なる２種類の２５４−Ｓ内包リポソ−ム
を得た。これを、遠心分離機（１０００００×ｇ，２時
間）かけてリポソ−ムを集めた後、ＰＢＳ溶液で再分散
して約２ｍｌとし、測定用試料とした。生理的等張液に
対する内水相の浸透圧比が１,１.５のリポソ−ムをそれ
ぞれ実施例５，実施例６とする。
【００１５】実施例７ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１６
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）４
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝８：２のリポソ−ム
を得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）４
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝８：２のリポソ−ム
を得た。
【００１６】実施例８ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１６
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（Ｄ
ＰＰＧ）４ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実
施例３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水
相の浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＧ＝８：２の
リポソ−ムを得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（Ｄ
ＰＰＧ）４ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実
施例３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水
相の浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＧ＝８：２の
リポソ−ムを得た。
【００１７】実施例９ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（Ｄ
ＰＰＧ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実
施例３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水
相の浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＧ＝９：１の
リポソ−ムを得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルグリセロ−ル（Ｄ
ＰＰＧ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実
施例３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水
相の浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＧ＝９：１の
リポソ−ムを得た。
【００１８】実施例１０ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝９：１のリポ
ソ−ムを得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝９：１のリポ
ソ−ムを得た。
【００１９】実施例１１ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１６
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）４ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝８：２のリポ
ソ−ムを得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）４ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝８：２のリポ
ソ−ムを得た。
【００２０】実施例１２ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジステアロイルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）２
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＳＰＡ＝９：１のリポソ−ム
を得た。
ｍｇとジステアロイルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）２
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＳＰＡ＝９：１のリポソ−ム
を得た。
【００２１】実施例１３ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１６
ｍｇとジステアロイルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）４
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＳＰＡ＝８：２のリポソ−ム
を得た。
ｍｇとジステアロイルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）４
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＳＰＡ＝８：２のリポソ−ム
を得た。
【００２２】参考例１ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰ
Ｃ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
１と同様の方法により、ＤＰＰＣ：ＤＳＰＣ＝９：１で
電荷脂質を含まないリポソ−ムを調製した。
ｍｇとジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰ
Ｃ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
１と同様の方法により、ＤＰＰＣ：ＤＳＰＣ＝９：１で
電荷脂質を含まないリポソ−ムを調製した。
【００２３】参考例２ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇとジオレオイルホスファチジン酸（ＤＯＰＡ）２ｍ
ｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同様
の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧比
は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＯＰＡ＝９：１のリポ
ソ−ムを調製した。
ｍｇとジオレオイルホスファチジン酸（ＤＯＰＡ）２ｍ
ｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同様
の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧比
は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＯＰＡ＝９：１のリポ
ソ−ムを調製した。
【００２４】参考例３ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇと卵黄ホスファチジン酸（ＥＹＰＡ）２ｍｇ含有の
クロロホルム溶液を使用して、実施例３と同様の方法に
より、生理的等張液に対する内水相の浸透圧比は１.５
であるが、ＤＰＰＣ：ＥＹＰＡ＝９：１のリポソ−ムを
調製した。参考例４ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇと１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジン
酸（ＰＯＰＡ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用し
て、実施例３と同様の方法により、生理的等張液に対す
る内水相の浸透圧比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＰＯ
ＰＡ＝９：１のリポソ−ムを調製した。
ｍｇと卵黄ホスファチジン酸（ＥＹＰＡ）２ｍｇ含有の
クロロホルム溶液を使用して、実施例３と同様の方法に
より、生理的等張液に対する内水相の浸透圧比は１.５
であるが、ＤＰＰＣ：ＥＹＰＡ＝９：１のリポソ−ムを
調製した。参考例４ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１８
ｍｇと１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジン
酸（ＰＯＰＡ）２ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用し
て、実施例３と同様の方法により、生理的等張液に対す
る内水相の浸透圧比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＰＯ
ＰＡ＝９：１のリポソ−ムを調製した。
【００２５】参考例５ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１２
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）８
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝６：４のリ
ポソ−ムを調製した。参考例６ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１０
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）１
０ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と
同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透
圧比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝５：５の
リポソ−ムを調製した。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）８
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝６：４のリ
ポソ−ムを調製した。参考例６ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１０
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）１
０ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と
同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透
圧比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝５：５の
リポソ−ムを調製した。
【００２６】参考例７ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１４
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）６
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝７：３のリ
ポソ−ムを調製した。参考例８ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１２
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）８ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝６：４のリポ
ソ−ムを得た。
ｍｇとジパルミトイルホスファチジン酸（ＤＰＰＡ）６
ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例３と同
様の方法により、生理的等張液に対する内水相の浸透圧
比は１.５であるが、ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝７：３のリ
ポソ−ムを調製した。参考例８ ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）１２
ｍｇとジパルミトイルホスファチジルセリン（ＤＰＰ
Ｓ）８ｍｇ含有のクロロホルム溶液を使用して、実施例
３と同様の方法により、生理的等張液に対する内水相の
浸透圧比が１.５でＤＰＰＣ：ＤＰＰＳ＝６：４のリポ
ソ−ムを得た。
【００２７】実験例１ 実施例１より得られるＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ＝９：１の本
発明リポソ−ムおよび参考例１より得られるＤＰＰＣ：
ＤＳＰＣ＝９：１のリポソ−ムについて、バイオ シミ
カ エト バイオフィジカ アクタ（Biochimica et Bioph
ysica Acta）の第１０２９巻、第２８７頁、（１９９０
年）に記載の方法に準じて、動的光散乱法により粒度分
布を測定した。結果を図１に示す。ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ
＝９：１の本発明リポソ−ムは、平均粒径が約０.２μ
ｍの粒度分布を示し、分散性の改善効果が見られた。一
方、ＤＰＰＣ：ＤＳＰＣ＝９：１のリポソ−ムは、粒径
がかなり不均一で相当大きなものも存在することから強
い凝集性を有すると言える。
発明リポソ−ムおよび参考例１より得られるＤＰＰＣ：
ＤＳＰＣ＝９：１のリポソ−ムについて、バイオ シミ
カ エト バイオフィジカ アクタ（Biochimica et Bioph
ysica Acta）の第１０２９巻、第２８７頁、（１９９０
年）に記載の方法に準じて、動的光散乱法により粒度分
布を測定した。結果を図１に示す。ＤＰＰＣ：ＤＰＰＡ
＝９：１の本発明リポソ−ムは、平均粒径が約０.２μ
ｍの粒度分布を示し、分散性の改善効果が見られた。一
方、ＤＰＰＣ：ＤＳＰＣ＝９：１のリポソ−ムは、粒径
がかなり不均一で相当大きなものも存在することから強
い凝集性を有すると言える。
【００２８】実験例２ 実施例２〜４より得られる３種類のＣＦ内包リポソ−ム
を、各種温度の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液中で
１０分間インキュベ−トした後、ＣＦの放出量を測定し
た。結果を図２に示す。各リポソ−ム共、約４２℃で最
高のＣＦ放出率を示したが、生理的等張液よりも浸透圧
を高くしたものは、等張のものに比べてより良好な温度
感受性を示した。
を、各種温度の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液中で
１０分間インキュベ−トした後、ＣＦの放出量を測定し
た。結果を図２に示す。各リポソ−ム共、約４２℃で最
高のＣＦ放出率を示したが、生理的等張液よりも浸透圧
を高くしたものは、等張のものに比べてより良好な温度
感受性を示した。
【００２９】実験例３ 実施例２〜４より得られる３種類のＣＦ内包リポソ−ム
について、４２℃の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液
中でＣＦの放出速度を測定した。結果を図３に示す。浸
透圧を高めたリポソ−ムは、瞬時に約７０〜約８０％の
放出率を示し、等張のものに比べＣＦの放出が速やかで
あった。
について、４２℃の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液
中でＣＦの放出速度を測定した。結果を図３に示す。浸
透圧を高めたリポソ−ムは、瞬時に約７０〜約８０％の
放出率を示し、等張のものに比べＣＦの放出が速やかで
あった。
【００３０】実験例４ 実施例４より得られる浸透圧が生理的等張液の２倍のリ
ポソ−ムについて、室温下、懸濁状態で７週間保存後そ
の試料の一部を２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液に加
えて、各種温度で１０分間インキュベ−トした後、ＣＦ
の放出量を測定した。結果を図４に示す。７週間保存し
た後も温度感受性は初期の状態とほとんど変わりなく、
また３６℃以下では内包物も９０％以上保持されてい
た。
ポソ−ムについて、室温下、懸濁状態で７週間保存後そ
の試料の一部を２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液に加
えて、各種温度で１０分間インキュベ−トした後、ＣＦ
の放出量を測定した。結果を図４に示す。７週間保存し
た後も温度感受性は初期の状態とほとんど変わりなく、
また３６℃以下では内包物も９０％以上保持されてい
た。
【００３１】実験例５ 実施例５および実施例６より得られた各測定用試料０.
１ｍｌを各種温度の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液
１ｍｌに加え、５分間インキュベ−ションした後、ただ
ちに冷却し、次に各溶液を微量高速冷却遠心機（トミ−
精工（株）製）により、遠心濾過（３０００ｒｐｍ，３
０分間）にかけて、その濾液中の２５４−Ｓ濃度をＨＰ
ＬＣにより定量した。結果を図５に示す。 (ＨＰＬＣ条件) 担体：リクロソロブＮＨ2（lichrosorobＮＨ2） 移動相：ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ＝８：２ 流速：１.５ｍｌ／分 測定波長：２２０ｎｍ 図５より、２５４−Ｓ内包リポソ−ムは良好な温度感受
性を示し、特に内水相の浸透圧を高めたものが良好であ
った。
１ｍｌを各種温度の２０％ラット血清含有のＰＢＳ溶液
１ｍｌに加え、５分間インキュベ−ションした後、ただ
ちに冷却し、次に各溶液を微量高速冷却遠心機（トミ−
精工（株）製）により、遠心濾過（３０００ｒｐｍ，３
０分間）にかけて、その濾液中の２５４−Ｓ濃度をＨＰ
ＬＣにより定量した。結果を図５に示す。 (ＨＰＬＣ条件) 担体：リクロソロブＮＨ2（lichrosorobＮＨ2） 移動相：ＣＨ3ＣＮ／Ｈ2Ｏ＝８：２ 流速：１.５ｍｌ／分 測定波長：２２０ｎｍ 図５より、２５４−Ｓ内包リポソ−ムは良好な温度感受
性を示し、特に内水相の浸透圧を高めたものが良好であ
った。
【００３２】実験例６ 実施例３および参考例２〜４より得られた、ＤＰＰＣに
対する構成比はすべて１／９であるが、ホスファチジン
酸のアシル基の種類が異なる４種のリポソ−ムを使用し
て、実験例２と同様の方法により各温度におけるＣＦの
放出率を測定した。結果を図６に示す。負電荷脂質にＤ
ＰＰＡを使用した本発明リポソ−ムは、放出率が３８℃
以下では極めて低いが、約４２℃で最も良い傾向を示し
た。一方、その他のものは、３７℃以下でもかなりの放
出率を示し、またそれより高温では温度依存性が見られ
ずほぼ８０％近い値を示した。
対する構成比はすべて１／９であるが、ホスファチジン
酸のアシル基の種類が異なる４種のリポソ−ムを使用し
て、実験例２と同様の方法により各温度におけるＣＦの
放出率を測定した。結果を図６に示す。負電荷脂質にＤ
ＰＰＡを使用した本発明リポソ−ムは、放出率が３８℃
以下では極めて低いが、約４２℃で最も良い傾向を示し
た。一方、その他のものは、３７℃以下でもかなりの放
出率を示し、またそれより高温では温度依存性が見られ
ずほぼ８０％近い値を示した。
【００３３】実験例７ 実施例３、実施例７および参考例５，６，７より得られ
た、ＤＰＰＡのＤＰＰＣに対する添加率が異なる５種の
リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の方法により各
温度におけるＣＦの放出率を測定した。結果を図７に示
す。本発明リポソ−ム（実施例３、実施例７）は、放出
率が３７℃以下では極めて低いが、約４２℃で最も良い
傾向を示したのに対し、ＤＰＰＡの添加率を増加させた
その他のものは３７℃以下でもかなりの放出率を示し
た。実験例８ 実施例８、９より得られた負電荷脂質がＤＰＰＧである
本発明リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の方法に
より各温度におけるＣＦの放出率を測定した。結果を図
８に示す。ＣＦの放出は、３７℃以下ではほとんど見ら
れず、約４０〜約４２℃で良い傾向を示した。
た、ＤＰＰＡのＤＰＰＣに対する添加率が異なる５種の
リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の方法により各
温度におけるＣＦの放出率を測定した。結果を図７に示
す。本発明リポソ−ム（実施例３、実施例７）は、放出
率が３７℃以下では極めて低いが、約４２℃で最も良い
傾向を示したのに対し、ＤＰＰＡの添加率を増加させた
その他のものは３７℃以下でもかなりの放出率を示し
た。実験例８ 実施例８、９より得られた負電荷脂質がＤＰＰＧである
本発明リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の方法に
より各温度におけるＣＦの放出率を測定した。結果を図
８に示す。ＣＦの放出は、３７℃以下ではほとんど見ら
れず、約４０〜約４２℃で良い傾向を示した。
【００３４】実験例９ 実施例１０、１１および参考例８より得られた、負電荷
脂質がＤＰＰＳである３種のリポソ−ムを使用して、実
験例２と同様の方法により各温度におけるＣＦの放出率
を測定した。結果を図９に示す。本発明リポソ−ム（実
施例１０、１１）は、放出率が３７℃以下では極めて低
いが、約４０〜約４４℃で良い傾向を示した。実験例１０ 実施例１２、１３より得られた、負電荷脂質がＤＳＰＡ
である本発明リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の
方法により各温度におけるＣＦの放出率を測定した。結
果を図１０に示す。ＣＦの放出は、３７℃以下ではほと
んど見られず、約４２〜約４４℃付近で良い傾向を示し
た。
脂質がＤＰＰＳである３種のリポソ−ムを使用して、実
験例２と同様の方法により各温度におけるＣＦの放出率
を測定した。結果を図９に示す。本発明リポソ−ム（実
施例１０、１１）は、放出率が３７℃以下では極めて低
いが、約４０〜約４４℃で良い傾向を示した。実験例１０ 実施例１２、１３より得られた、負電荷脂質がＤＳＰＡ
である本発明リポソ−ムを使用して、実験例２と同様の
方法により各温度におけるＣＦの放出率を測定した。結
果を図１０に示す。ＣＦの放出は、３７℃以下ではほと
んど見られず、約４２〜約４４℃付近で良い傾向を示し
た。
【発明の効果】本発明の温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ム
は、内包薬物を、約３７℃以下ではほとんど放出させず
に約４０〜約４４℃において最も効率よく放出させるこ
とができ、またすぐれた分散性を有する。よって、癌、
腫瘍等に対する局所温熱療法に効果的に利用することが
出来、更に注射剤としての適用が容易である。更に、Ｍ
ＬＶ型であるので、工業上、大量生産も容易である。
は、内包薬物を、約３７℃以下ではほとんど放出させず
に約４０〜約４４℃において最も効率よく放出させるこ
とができ、またすぐれた分散性を有する。よって、癌、
腫瘍等に対する局所温熱療法に効果的に利用することが
出来、更に注射剤としての適用が容易である。更に、Ｍ
ＬＶ型であるので、工業上、大量生産も容易である。
【図１】図１は、本発明リポソ−ムの分散性について、
負電荷脂質を含まないリポソ−ムと比較検討したもので
ある。(Ａ)は、実施例１より得られた本発明リポソ−ム
の粒度分布、(Ｂ)は、参考例１より得られたリポソ−ム
の粒度分布を示す。
負電荷脂質を含まないリポソ−ムと比較検討したもので
ある。(Ａ)は、実施例１より得られた本発明リポソ−ム
の粒度分布、(Ｂ)は、参考例１より得られたリポソ−ム
の粒度分布を示す。
【図２】図２は、実施例２〜４より得られた、ＣＦ内包
で負電荷脂質としてＤＰＰＡを含む本発明リポソ−ムに
ついて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
で負電荷脂質としてＤＰＰＡを含む本発明リポソ−ムに
ついて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
【図３】図３は、実施例２〜４より得られた前記本発明
リポソ−ムについて、４２℃におけるＣＦの放出速度を
示す。縦軸は放出率（％）、横軸は時間（分）を示す。
リポソ−ムについて、４２℃におけるＣＦの放出速度を
示す。縦軸は放出率（％）、横軸は時間（分）を示す。
【図４】図４は、実施例４より得られた本発明リポソ−
ムについて、７週間後の安定性を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
ムについて、７週間後の安定性を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
【図５】図５は、実施例５および６より得られた２５４
−Ｓ内包で負電荷脂質としてＤＰＰＡを含む本発明リポ
ソ−ムについて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は
放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
−Ｓ内包で負電荷脂質としてＤＰＰＡを含む本発明リポ
ソ−ムについて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は
放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
【図６】図６は、実施例３および参考例２〜４より得ら
れた、ＤＰＰＣに対してアシル基の種類が異なるホスフ
ァチジン酸を添加した種々のリポソ−ムについて、放出
率と温度との関係を示す。縦軸は放出率（％）、横軸は
温度（℃）を示す。
れた、ＤＰＰＣに対してアシル基の種類が異なるホスフ
ァチジン酸を添加した種々のリポソ−ムについて、放出
率と温度との関係を示す。縦軸は放出率（％）、横軸は
温度（℃）を示す。
【図７】図７は、実施例３、実施例７および参考例５、
６、７より得られた、ＤＰＰＣに対するＤＰＰＡの添加
率が異なる種々のリポソ−ムについて、放出率と温度と
の関係を示す。縦軸は放出率（％）、横軸は温度（℃）
を示す。
６、７より得られた、ＤＰＰＣに対するＤＰＰＡの添加
率が異なる種々のリポソ−ムについて、放出率と温度と
の関係を示す。縦軸は放出率（％）、横軸は温度（℃）
を示す。
【図８】図８は、実施例８、９より得られた、ＤＰＰＣ
に対するＤＰＰＧの添加率が異なる２種のリポソ−ムに
ついて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
に対するＤＰＰＧの添加率が異なる２種のリポソ−ムに
ついて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は放出率
（％）、横軸は温度（℃）を示す。
【図９】図９は、実施例１０、１１および参考例８より
得られた、ＤＰＰＣに対するＤＰＰＳの添加率が異なる
３種のリポソ−ムについて、放出率と温度との関係を示
す。縦軸は放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
得られた、ＤＰＰＣに対するＤＰＰＳの添加率が異なる
３種のリポソ−ムについて、放出率と温度との関係を示
す。縦軸は放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
【図１０】図１０は、実施例１２、１３より得られた、
ＤＰＰＣに対するＤＳＰＡの添加率が異なる２種のリポ
ソ−ムについて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は
放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
ＤＰＰＣに対するＤＳＰＡの添加率が異なる２種のリポ
ソ−ムについて、放出率と温度との関係を示す。縦軸は
放出率（％）、横軸は温度（℃）を示す。
Claims (3)
- 【請求項１】ジパルミトイルホスファチジルコリンと負
電荷を有する１，２−ジアシル−グリセロリン脂質（但
し、１位および２位のアシルは、互いに独立してパルミ
トイルまたはステアロイルである）を、２０：１〜８：
２の重量比で含有することを特徴とする分散性の改善さ
れた温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ム。 - 【請求項２】内水相の浸透圧比が、生理的等張液の１.
５〜２倍である請求項１記載の温度感受性ＭＬＶ型リポ
ソ−ム。 - 【請求項３】粒径が０.０３〜０.５μｍである請求項１
または２記載の温度感受性ＭＬＶ型リポソ−ム。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21555092A JPH05194192A (ja) | 1991-08-21 | 1992-07-20 | 分散性の改善された温度感受性ｍｌｖ型リポソ−ム |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3-235414 | 1991-08-21 | ||
| JP23541491 | 1991-08-21 | ||
| JP21555092A JPH05194192A (ja) | 1991-08-21 | 1992-07-20 | 分散性の改善された温度感受性ｍｌｖ型リポソ−ム |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05194192A true JPH05194192A (ja) | 1993-08-03 |
Family
ID=26520924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21555092A Pending JPH05194192A (ja) | 1991-08-21 | 1992-07-20 | 分散性の改善された温度感受性ｍｌｖ型リポソ−ム |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05194192A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1995026185A1 (en) * | 1994-03-28 | 1995-10-05 | Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. | Liposome with increased retention volume |
| US5484915A (en) * | 1993-07-09 | 1996-01-16 | Zeneca Limited | Sulphonated manganese phthalocyanines and compositions thereof |
| JP2009269871A (ja) * | 2008-05-09 | 2009-11-19 | Fancl Corp | リポソーム製剤 |
| KR20100087030A (ko) * | 2007-11-05 | 2010-08-02 | 셀젼 코퍼레이션 | 치료제를 함유하는 신규 온도 감응성 리포솜 |
| JP2013508315A (ja) * | 2009-10-23 | 2013-03-07 | バイオ−ベスト アーペーエス | 保存安定性が改善されたｓｐｌａ２加水分解性リポソーム |
| JP2014503582A (ja) * | 2011-01-28 | 2014-02-13 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 親水性プロドラッグの局所放出用担体 |
-
1992
- 1992-07-20 JP JP21555092A patent/JPH05194192A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5484915A (en) * | 1993-07-09 | 1996-01-16 | Zeneca Limited | Sulphonated manganese phthalocyanines and compositions thereof |
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| KR20100087030A (ko) * | 2007-11-05 | 2010-08-02 | 셀젼 코퍼레이션 | 치료제를 함유하는 신규 온도 감응성 리포솜 |
| JP2011502134A (ja) * | 2007-11-05 | 2011-01-20 | セルシオン コーポレイション | 治療薬を含有する新規な温度感受性リポソーム |
| US8642074B2 (en) | 2007-11-05 | 2014-02-04 | Celsion Corporation | Thermosensitive liposomes containing therapeutic agents |
| JP2009269871A (ja) * | 2008-05-09 | 2009-11-19 | Fancl Corp | リポソーム製剤 |
| JP2013508315A (ja) * | 2009-10-23 | 2013-03-07 | バイオ−ベスト アーペーエス | 保存安定性が改善されたｓｐｌａ２加水分解性リポソーム |
| JP2014503582A (ja) * | 2011-01-28 | 2014-02-13 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 親水性プロドラッグの局所放出用担体 |
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