JPH0519659B2 - - Google Patents
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- JPH0519659B2 JPH0519659B2 JP59264863A JP26486384A JPH0519659B2 JP H0519659 B2 JPH0519659 B2 JP H0519659B2 JP 59264863 A JP59264863 A JP 59264863A JP 26486384 A JP26486384 A JP 26486384A JP H0519659 B2 JPH0519659 B2 JP H0519659B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
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- G01N33/555—Red blood cell
- G01N33/556—Fixed or stabilised red blood cell
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Description
イ 発明の目的
産業上の利用分野
ある種のウイルスはその粒子表面に動物赤血球
を凝集させる性質を有するHA抗原
（Hemagglutination Antigen）と呼ばれる成分
を保有している。抗ウイルス抗体は、このHA抗
原と動物赤血球の凝集反応を抑制する。このよう
な性質を利用し、HA抗原を用いる赤血球凝集抑
制（HI、Hemagglutination Inhibition）試験に
よつて抗ウイルス抗体価を定量できる。 各種ウイルスの臨床検査でもつとも多いもの
は、風疹ウイルスに対する抗体価定量であり、本
ウイルスの感染診断または感染既往の診断を行な
う際に、広く一般に用いられている血清学的手法
はHI試験である。特に妊娠初期での風疹感染は
先天性風疹児の出産につながり出産期の妊婦にと
つて大きな関心事であり、妊婦のスクリーニング
検査にも、風疹HI抗体価検査が広く取り入れら
れている。 本発明は、以上のような赤血球凝集抑制反応に
基づく風疹HI試験に用いる風疹HA抗原の安定化
法に関する。 従来の技術 広く一般に実施されている風疹HI抗体価検査
には、風疹HA抗原が用いられる。風疹HA抗原
液は、検査時ごとの力価調整操作の簡便化のため
に、または測定値の再現性および検査精度を確保
するために、長期間抗原力化が低下せず安定であ
ることが望まれる。また安定化によつて、数少な
い検体を取り扱う検査室における試薬そのものの
浪費を防止できる。そのため、風疹HA抗原を安
定に保つ様々な方法が研究されてきた。例えば、
ハロネン（P.E.Halonen）らは風疹感染細胞内よ
り風疹HA抗原をPH9.0のグリシン緩衝液で抽出
し、４℃および−70℃で保存し、数週間安定であ
ることを報告している［Proc.Soc.Exp.Biol.
Med.，125、162−267（1967）］。また現在市販さ
れている風疹HA抗原［フロー（Flow）社製］
には、PH9.0〜9.5、４℃で24時間安定であるが、
PHが低下すると不安定になる、との記載がある。
また殺菌剤としてアジ化ナトリウムを0.1％程加
える方法もある。 発明が解決しようとする問題点 風疹HA抗原の安定化のために様々な研究がな
されてきたが、未だ前述の要件を満たすほど安定
なものは開発されていない。本発明者らは、長期
間安定な風疹HA抗原液の開発にあたり、まず抗
原液のPHの違いによる安定性の相違を検討し、従
来の風疹HA抗原液のPHではあまり安定ではな
く、さらに高いPHでより安定であることが判明し
た。また保存中の微生物汚染によりHA抗原価が
低下するためアジ化ナトリウムを0.1％程加えて
いたが、上述のようにPHを調整しアジ化ナトリウ
ムを加えることでHA抗原の安定性が相乗効果的
に増大した。 ロ 発明の構成 問題点を解決するための手段 風疹HA抗原液は、PH値を9.6以上に、好ましく
は9.7〜11.0に、さらに好ましくは約10に調整す
ることにより安定化できる。なお、このPH調整に
は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化
カルシウム、水酸化アルミニウム等、一般的な塩
基を用いて実施可能である。風疹HA抗原液は所
望により凍結乾燥できるが、このPH調整は凍乾の
前後いずれに実施してもよく、凍乾前に調整した
PH値は凍乾再生後もほとんど変化せず安定化が保
たれる。さらに、以上にようにPH値を調整した風
疹HA抗原液にアジ化ナトリウムを添加すると、
好ましくはアジ化ナトリウムを0.05〜10％（ｗ／
ｖ）濃度となるように添加すると、0.05％以上の
添加により静菌効果が得られ、１％以上の添加に
より静菌効果以上の安定化効果が得られ、安定性
が増加する。また、アジ化ナトリウムを１〜10％
（ｗ／ｖ）濃度となるように添加することのみに
よつて安定化することができる。 作 用 本発明の風疹HA抗原液は従来の風疹HA抗原
液と比較し長期間抗原力価が低下せず安定であ
る。また本発明によるPH値、アジ化ナトリウムの
添加は風疹HI抗体価検査における抗体価に影響
を及ぼさず、従来の抗原と同様に使用できる。 実施例 以下に、実施例により本発明の実施態様を示す
がこれらの実施例は何ら本発明を限定するもので
はない。 実施例 １ 培養ビンに、BHK−21（仔ハムスター腎細胞）
を培養し、風疹ウイルスＭ−33株を接種し、37℃
で３〜７日間培養した後、培養液を集める。採取
した風疹HA抗原液500mlを不活し、2N水酸化ナ
トリウムでPH10.0に調整する。生じた沈澱を濾
過、遠心分離などの操作で除去し、PH値が10.0の
風疹HA抗原液を得る。所望により、１バイアル
当り２mlの精製水で溶解したとき約80倍のHA価
を示す量を分注し、凍結乾燥する。 上記の方法と同様にしてPH値が9.6以上の風疹
HA抗原液が得られ、所望により凍結乾燥しう
る。 実施例 ２ 実施例１で得たPH値が10.0の風疹HA抗原液に、
凍乾再生液のアジ化ナトリウム濃度が0.1％
（ｗ／ｖ）となるようにアジ化ナトリウムを添加
し、アジ化ナトリウムを添加したPH10.0の風疹
HA抗原液を得る。所望により、実施例１と同様
に凍結乾燥する。 上記の方法と同様にして、PH値が9.6以上かつ
アジ化ナトリウム濃度が0.05〜10％（ｗ／ｖ）の
風疹HA抗原液が得られ、所望により凍乾する。 実施例 ３ 実施例１と同様に風疹HA抗原液を採集し、ア
ジ化ナトリウム濃度が１〜10％（ｗ／ｖ）となる
ようにアジ化ナトリウムを加える。 ハ 発明の効果 風疹HA抗原の採取法 培養ビンにBHK−21を培養し、風疹ウイルス
Ｍ−33株を接種し、37℃で培養し３〜７日目の培
養液を集め、感染性ウイルスを不活化し、風疹
HA抗原とした。 風疹HA抗原価（HA価）の測定法 HA価の測定は、予研法に準じた術式で実施し
た。即ち、血清および抗原の希釈は、ウシ血清ア
ジブミン（BSA）0.1％、ゼラチン0.005％を含ん
だベロナール緩衝液［VBS（＋）］を用い、Ｕ型
マイクロプレート上でHA抗原を２倍階段希釈す
る。さらに0.25％ガチヨウ赤血球を加え、よく混
和し、冷蔵庫内で静置する。約１時間後、血球が
完全凝集した最高希釈倍数をもつて、その抗原の
HA価とする。 実験例 １ 採取した風疹HA抗原に2N水酸化ナトリウム
を加えPHを7.5〜12まで調整し、各PHの抗原液の
４℃保存でのHA価の安定性を測定した。その結
果を第１図に示すが、PH10.0に調整した抗原液は
約２ケ月間HA価の低下はみられない。またPH値
が9.5以下および12では不安定であつた。 実施例 ２ 採取した風疹HA抗原を凍乾し精製水で溶解
後、PHを2N水酸化ナトリウムで10.0に調整し４
℃で保存すると、少なくとも１ケ月間HA価の低
下はみられない。 実験例 ３ 実施例１でPH10.0に調整した風疹HA抗原を凍
乾し、精製水で溶解し４℃で保存すると、少なく
とも２ケ月間HA価の低下はみられない。 実験例 ４ 採取した風疹HA抗原にアジ価ナトリウムを０
〜20％（ｗ／ｖ）加え、PHを7.5〜8.0に調整し各
抗原液を４℃で保存しHA価を測定した。結果を
第２図に示すが、HA価の低下しやすいPH7.5〜
8.0でもアジ化ナトリウムを５〜10％加えたもの
は約２週間安定である。また１〜20％加えたもの
も、加えないものよりも安定である。 実験例 ５ 採取した風疹HA抗原に2N水酸化ナトリウム
を加えPHを10.0または7.5に調整し、各PHの抗原
液を２分し一方にアジ化ナトリウムを５％（ｗ／
ｖ）加え、他方には加えない。このとき、アジ化
ナトリウムを加えた抗原液はそれぞれPH値が10.0
から9.7に、7.5から7.7になる。これらの抗原液を
４℃で保存し、HA価を測定した結果を第３図に
示す。PH10.0でアジ化ナトリウムを５％加えた抗
原液は４℃で約140日HA価の低下はみられず、
他の水準抗原液より安定である。 実験例 ６ 上記のような安定化HA抗原を用いて風疹HI抗
体価を測定した。HI抗体価測定は予研法の術式
で行ない、使用器具および試薬はマイクロタイタ
ー法でHA価測定と同じものを用いた。HI抗体価
はHA抗原を抑制する血清の最高希釈倍数で表わ
される。その結果を次の表１に示す。
を凝集させる性質を有するHA抗原
（Hemagglutination Antigen）と呼ばれる成分
を保有している。抗ウイルス抗体は、このHA抗
原と動物赤血球の凝集反応を抑制する。このよう
な性質を利用し、HA抗原を用いる赤血球凝集抑
制（HI、Hemagglutination Inhibition）試験に
よつて抗ウイルス抗体価を定量できる。 各種ウイルスの臨床検査でもつとも多いもの
は、風疹ウイルスに対する抗体価定量であり、本
ウイルスの感染診断または感染既往の診断を行な
う際に、広く一般に用いられている血清学的手法
はHI試験である。特に妊娠初期での風疹感染は
先天性風疹児の出産につながり出産期の妊婦にと
つて大きな関心事であり、妊婦のスクリーニング
検査にも、風疹HI抗体価検査が広く取り入れら
れている。 本発明は、以上のような赤血球凝集抑制反応に
基づく風疹HI試験に用いる風疹HA抗原の安定化
法に関する。 従来の技術 広く一般に実施されている風疹HI抗体価検査
には、風疹HA抗原が用いられる。風疹HA抗原
液は、検査時ごとの力価調整操作の簡便化のため
に、または測定値の再現性および検査精度を確保
するために、長期間抗原力化が低下せず安定であ
ることが望まれる。また安定化によつて、数少な
い検体を取り扱う検査室における試薬そのものの
浪費を防止できる。そのため、風疹HA抗原を安
定に保つ様々な方法が研究されてきた。例えば、
ハロネン（P.E.Halonen）らは風疹感染細胞内よ
り風疹HA抗原をPH9.0のグリシン緩衝液で抽出
し、４℃および−70℃で保存し、数週間安定であ
ることを報告している［Proc.Soc.Exp.Biol.
Med.，125、162−267（1967）］。また現在市販さ
れている風疹HA抗原［フロー（Flow）社製］
には、PH9.0〜9.5、４℃で24時間安定であるが、
PHが低下すると不安定になる、との記載がある。
また殺菌剤としてアジ化ナトリウムを0.1％程加
える方法もある。 発明が解決しようとする問題点 風疹HA抗原の安定化のために様々な研究がな
されてきたが、未だ前述の要件を満たすほど安定
なものは開発されていない。本発明者らは、長期
間安定な風疹HA抗原液の開発にあたり、まず抗
原液のPHの違いによる安定性の相違を検討し、従
来の風疹HA抗原液のPHではあまり安定ではな
く、さらに高いPHでより安定であることが判明し
た。また保存中の微生物汚染によりHA抗原価が
低下するためアジ化ナトリウムを0.1％程加えて
いたが、上述のようにPHを調整しアジ化ナトリウ
ムを加えることでHA抗原の安定性が相乗効果的
に増大した。 ロ 発明の構成 問題点を解決するための手段 風疹HA抗原液は、PH値を9.6以上に、好ましく
は9.7〜11.0に、さらに好ましくは約10に調整す
ることにより安定化できる。なお、このPH調整に
は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化
カルシウム、水酸化アルミニウム等、一般的な塩
基を用いて実施可能である。風疹HA抗原液は所
望により凍結乾燥できるが、このPH調整は凍乾の
前後いずれに実施してもよく、凍乾前に調整した
PH値は凍乾再生後もほとんど変化せず安定化が保
たれる。さらに、以上にようにPH値を調整した風
疹HA抗原液にアジ化ナトリウムを添加すると、
好ましくはアジ化ナトリウムを0.05〜10％（ｗ／
ｖ）濃度となるように添加すると、0.05％以上の
添加により静菌効果が得られ、１％以上の添加に
より静菌効果以上の安定化効果が得られ、安定性
が増加する。また、アジ化ナトリウムを１〜10％
（ｗ／ｖ）濃度となるように添加することのみに
よつて安定化することができる。 作 用 本発明の風疹HA抗原液は従来の風疹HA抗原
液と比較し長期間抗原力価が低下せず安定であ
る。また本発明によるPH値、アジ化ナトリウムの
添加は風疹HI抗体価検査における抗体価に影響
を及ぼさず、従来の抗原と同様に使用できる。 実施例 以下に、実施例により本発明の実施態様を示す
がこれらの実施例は何ら本発明を限定するもので
はない。 実施例 １ 培養ビンに、BHK−21（仔ハムスター腎細胞）
を培養し、風疹ウイルスＭ−33株を接種し、37℃
で３〜７日間培養した後、培養液を集める。採取
した風疹HA抗原液500mlを不活し、2N水酸化ナ
トリウムでPH10.0に調整する。生じた沈澱を濾
過、遠心分離などの操作で除去し、PH値が10.0の
風疹HA抗原液を得る。所望により、１バイアル
当り２mlの精製水で溶解したとき約80倍のHA価
を示す量を分注し、凍結乾燥する。 上記の方法と同様にしてPH値が9.6以上の風疹
HA抗原液が得られ、所望により凍結乾燥しう
る。 実施例 ２ 実施例１で得たPH値が10.0の風疹HA抗原液に、
凍乾再生液のアジ化ナトリウム濃度が0.1％
（ｗ／ｖ）となるようにアジ化ナトリウムを添加
し、アジ化ナトリウムを添加したPH10.0の風疹
HA抗原液を得る。所望により、実施例１と同様
に凍結乾燥する。 上記の方法と同様にして、PH値が9.6以上かつ
アジ化ナトリウム濃度が0.05〜10％（ｗ／ｖ）の
風疹HA抗原液が得られ、所望により凍乾する。 実施例 ３ 実施例１と同様に風疹HA抗原液を採集し、ア
ジ化ナトリウム濃度が１〜10％（ｗ／ｖ）となる
ようにアジ化ナトリウムを加える。 ハ 発明の効果 風疹HA抗原の採取法 培養ビンにBHK−21を培養し、風疹ウイルス
Ｍ−33株を接種し、37℃で培養し３〜７日目の培
養液を集め、感染性ウイルスを不活化し、風疹
HA抗原とした。 風疹HA抗原価（HA価）の測定法 HA価の測定は、予研法に準じた術式で実施し
た。即ち、血清および抗原の希釈は、ウシ血清ア
ジブミン（BSA）0.1％、ゼラチン0.005％を含ん
だベロナール緩衝液［VBS（＋）］を用い、Ｕ型
マイクロプレート上でHA抗原を２倍階段希釈す
る。さらに0.25％ガチヨウ赤血球を加え、よく混
和し、冷蔵庫内で静置する。約１時間後、血球が
完全凝集した最高希釈倍数をもつて、その抗原の
HA価とする。 実験例 １ 採取した風疹HA抗原に2N水酸化ナトリウム
を加えPHを7.5〜12まで調整し、各PHの抗原液の
４℃保存でのHA価の安定性を測定した。その結
果を第１図に示すが、PH10.0に調整した抗原液は
約２ケ月間HA価の低下はみられない。またPH値
が9.5以下および12では不安定であつた。 実施例 ２ 採取した風疹HA抗原を凍乾し精製水で溶解
後、PHを2N水酸化ナトリウムで10.0に調整し４
℃で保存すると、少なくとも１ケ月間HA価の低
下はみられない。 実験例 ３ 実施例１でPH10.0に調整した風疹HA抗原を凍
乾し、精製水で溶解し４℃で保存すると、少なく
とも２ケ月間HA価の低下はみられない。 実験例 ４ 採取した風疹HA抗原にアジ価ナトリウムを０
〜20％（ｗ／ｖ）加え、PHを7.5〜8.0に調整し各
抗原液を４℃で保存しHA価を測定した。結果を
第２図に示すが、HA価の低下しやすいPH7.5〜
8.0でもアジ化ナトリウムを５〜10％加えたもの
は約２週間安定である。また１〜20％加えたもの
も、加えないものよりも安定である。 実験例 ５ 採取した風疹HA抗原に2N水酸化ナトリウム
を加えPHを10.0または7.5に調整し、各PHの抗原
液を２分し一方にアジ化ナトリウムを５％（ｗ／
ｖ）加え、他方には加えない。このとき、アジ化
ナトリウムを加えた抗原液はそれぞれPH値が10.0
から9.7に、7.5から7.7になる。これらの抗原液を
４℃で保存し、HA価を測定した結果を第３図に
示す。PH10.0でアジ化ナトリウムを５％加えた抗
原液は４℃で約140日HA価の低下はみられず、
他の水準抗原液より安定である。 実験例 ６ 上記のような安定化HA抗原を用いて風疹HI抗
体価を測定した。HI抗体価測定は予研法の術式
で行ない、使用器具および試薬はマイクロタイタ
ー法でHA価測定と同じものを用いた。HI抗体価
はHA抗原を抑制する血清の最高希釈倍数で表わ
される。その結果を次の表１に示す。
【表】
表１から明らかなように、抗原液のPHを11以
上、またアジ化ナトリウム濃度を20％以上にする
とHI抗体価は低くなる。しかし、安定化抗原液
の至適PH10.0および５％アジ化ナトリウム添加時
ではHI抗体価に影響がなく、従来の抗原と同様
に使用できる。 以上のように本発明の風疹HA抗原安定化法に
より、試薬の浪費を防止して抗原の有効利用がで
きるため数少ない検体を取り扱う検査室でも簡易
に検査でき、検査成績の再現性および精度が確保
される。
上、またアジ化ナトリウム濃度を20％以上にする
とHI抗体価は低くなる。しかし、安定化抗原液
の至適PH10.0および５％アジ化ナトリウム添加時
ではHI抗体価に影響がなく、従来の抗原と同様
に使用できる。 以上のように本発明の風疹HA抗原安定化法に
より、試薬の浪費を防止して抗原の有効利用がで
きるため数少ない検体を取り扱う検査室でも簡易
に検査でき、検査成績の再現性および精度が確保
される。
第１図は風疹HA抗原の安定性とPHの関係、第
２図は風疹HA抗原液の安定性とアジ化ナトリウ
ム濃度の関係、第３図は風疹HA抗原液の安定性
と溶液PHおよびアジ化ナトリウムの添加濃度の関
係を示す。各図とも横軸は保存日数、縦軸は風疹
HA抗原価を示す。
２図は風疹HA抗原液の安定性とアジ化ナトリウ
ム濃度の関係、第３図は風疹HA抗原液の安定性
と溶液PHおよびアジ化ナトリウムの添加濃度の関
係を示す。各図とも横軸は保存日数、縦軸は風疹
HA抗原価を示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 風疹HA抗原液のPH値を9.6以上に調整するこ
とを特徴とする風疹HA抗原の安定化法。 ２ PH値が9.7〜11.0である特許請求の範囲第１
項に記載の方法。 ３ PH値が約10である特許請求の範囲第１項に記
載の方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59264863A JPS61142466A (ja) | 1984-12-14 | 1984-12-14 | 風疹ｈａ抗原の安定化法 |
| US06/792,316 US4690819A (en) | 1984-12-14 | 1985-10-28 | Method for stabilizing rubella HA antigen |
| DE8585113912T DE3577480D1 (de) | 1984-12-14 | 1985-10-31 | Verfahren zur stabilisierung vom ha-antigen der roeteln. |
| EP85113912A EP0187215B1 (en) | 1984-12-14 | 1985-10-31 | Method for stabilizing rubella ha antigen |
| GB8530265A GB2168356B (en) | 1984-12-14 | 1985-12-09 | Method for stabilizing rubella ha antigen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59264863A JPS61142466A (ja) | 1984-12-14 | 1984-12-14 | 風疹ｈａ抗原の安定化法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61142466A JPS61142466A (ja) | 1986-06-30 |
| JPH0519659B2 true JPH0519659B2 (ja) | 1993-03-17 |
Family
ID=17409259
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59264863A Granted JPS61142466A (ja) | 1984-12-14 | 1984-12-14 | 風疹ｈａ抗原の安定化法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4690819A (ja) |
| EP (1) | EP0187215B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61142466A (ja) |
| DE (1) | DE3577480D1 (ja) |
| GB (1) | GB2168356B (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0696619B2 (ja) * | 1989-09-28 | 1994-11-30 | 三洋化成工業株式会社 | 高吸水性ポリマー組成物及びその製造方法ならびにそれからなる高吸水性物品 |
| AU1917300A (en) | 1998-12-01 | 2000-06-19 | Viral Antigens, Inc. | Improved specificity in the detection of anti-rubella igm antibodies |
| US20100062418A1 (en) * | 2006-11-22 | 2010-03-11 | Mach Patrick A | Inactivated and dried biological preparations |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3553312A (en) * | 1968-02-26 | 1971-01-05 | Flow Lab | Process for producing rubella-virus hemagglutinating antigen |
| CA943066A (en) * | 1968-10-31 | 1974-03-05 | Betty L. Lanius | Hemagglutination inhibition test for viruses |
| US3777014A (en) * | 1971-02-02 | 1973-12-04 | Beckman Instruments Inc | Method and reagents for the diagnosis of viral diseases |
| JPS5912991B2 (ja) * | 1976-02-02 | 1984-03-27 | 武田薬品工業株式会社 | 風疹ｈｉ抗体測定用希釈液 |
| US4195074A (en) * | 1977-03-01 | 1980-03-25 | Abbott Laboratories | Process for producing a soluble rubella antigen |
| US4313927A (en) * | 1979-10-19 | 1982-02-02 | Ames-Yissum Ltd. | Immunoassay method for detecting viral antibodies in whole blood samples |
| US4403037A (en) * | 1980-10-10 | 1983-09-06 | American Hoechst Corporation | Erythrocyte preparations and use thereof in hemagglutination tests |
| US4590156A (en) * | 1982-05-21 | 1986-05-20 | The University Of Tennessee Research Corporation | Agglutination assay and product for rubella antibody |
-
1984
- 1984-12-14 JP JP59264863A patent/JPS61142466A/ja active Granted
-
1985
- 1985-10-28 US US06/792,316 patent/US4690819A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-31 DE DE8585113912T patent/DE3577480D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-10-31 EP EP85113912A patent/EP0187215B1/en not_active Expired
- 1985-12-09 GB GB8530265A patent/GB2168356B/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2168356B (en) | 1989-06-14 |
| EP0187215B1 (en) | 1990-05-02 |
| GB2168356A (en) | 1986-06-18 |
| JPS61142466A (ja) | 1986-06-30 |
| EP0187215A1 (en) | 1986-07-16 |
| DE3577480D1 (de) | 1990-06-07 |
| US4690819A (en) | 1987-09-01 |
| GB8530265D0 (en) | 1986-01-22 |
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