JPH05222094A - Ｈｃｖに対する抗体の検出、ｈｃｖ感染の診断及びワクチンとしてのその予防に特異的な合成ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）または非Ａ非Ｂ
型肝炎ウイルス（ＮＡＮＢＨＶ）に対する抗体と免疫反
応性のあるペプチド、及びこのペプチドを抗原として用
いることで体液中のＨＣＶ或いはＮＡＮＢＨＶ抗体の存
在を検出する方法の提供。 【構成】 例えば以下のアミノ酸配列を持つペプチドを
含むペプチド構成物。 Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓ
ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ
−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−
Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｐ
ｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｘ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ_２及びアナログ、分節、
複合体及びそれらの重合体である。さらに免疫分析手順
に於いて上記のペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに
対する抗体の検出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢ
Ｈの診断法。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣ
Ｖ）感染または非Ａ非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）の診断並
びに予防に特異的なペプチドに関する。より詳細には、
本発明は体液中のＨＣＶに対する抗体の検出及びそれを
用いたイムノアッセイに特異的な合成ペプチドに関す
る。本発明はＨＣＶに対するモノクローナル及びポリク
ローナル抗体を誘導するための抗原としての組成物中、
並びにＮＡＮＢＨ或いはＨＣＶ感染を予防するためのワ
クチン中の免疫源としての合成ペプチドの利用法も含
む。 【０００２】 【従来の技術】近年、非Ａ非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）は
輸血後肝炎の最も一般的な型となっている。チンパンジ
ーへの接種を含む研究から、感染病原体はトガウイルス
科ファミリーに類似した、脂質を含むウイルスである証
拠が得られた。 【０００３】最近、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）と命名
されたこの病原体は、後に複数の構造タンパク質及び非
構造タンパク質にプロセスされる単一のポリプロテイン
をコードする、約１０キロベースのゲノムサイズを有す
るＲＮＡウイルスであると示された（１−４）。さらに
コンピューターを用いたタンパク質分析により、ＨＣＶ
は動物のペスティウイルス科及びフラビウイルス科、並
びに２つの植物ウイルススーパーグループのメンバーと
類似性をもつことが証明された（５）。 【０００４】さらに最近になって、多くの報告から、ウ
イルスの様々な領域の機能、及び変異体または近縁のウ
イルスから単離したゲノム断片間の関係について、首尾
一貫した理解が進んでいる。 【０００５】ＨＣＶの構造の要約を、ウイルスのＮ末端
側から、以下に述べる。ＨＣＶは構造タンパク質領域及
び非構造（ＮＳ）タンパク質領域から成る。構造タンパ
ク質領域はさらにキャプシド及びエンベロープタンパク
質に分けられる。ＮＳタンパク質領域はさらに、ＮＳ−
１からＮＳ−５領域に分けられる（３）。 【０００６】予想されるキャプシド領域（ＡＡ１−ＡＡ
１２０）は、Ｃ型肝炎感染の検出に於いて感度が上昇す
る、高い免疫反応性をもつ保存されたエピトープを含む
ことが示されている（６−８）。その領域はおそらく重
複の結果生じた、互いに相同で、黄熱病ウイルス（９）
及びフラビウイルス（表１Ａ）のＮ末端コア領域とも相
同性を有する。等長の２つの部分（ＡＡ１−ＡＡ６１，
ＡＡ６１−ＡＡ１２０）から成る。ペプチドVIIIＥ（Ａ
Ａ２−ＡＡ６２）及びIXＤ（ＡＡ６５−ＡＡ１１９）と
表され、出願シリアルNo．５５８，７９９で開示された
両半節共、免疫反応性であることが示されている。クロ
ーン２と称される、Ａｒｉｍａらによってクローニング
されたＮＡＮＢＨウイルスのゲノム断片は、ペプチドVI
IIＥ（表１Ｂ）中の３９〜４３番の残基と同一な、Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ配列を含み、それ
はこのクローン２断片の、類縁ウイルスで予想されるコ
ア領域中に位置する。Ｒｅｙｅｓら（１１）及びＡｒｉ
ｍａら（クローン１）（１２）によってクローニングさ
れたＮＡＮＢＨウイルス由来の２つの他の塩基配列は、
黄熱病ウイルスのキャプシド領域と塩基配列の類似性を
示す（表１Ｃ）。このように、多数の類縁ウイルスが存
在し、クローニングの容易さから明らかなように、それ
らはすべて高い免疫原性のキャプシド領域を有する。Ｃ
型肝炎の変異体（Ｊ，Ｊ−１，Ｊ−４）もこの領域は高
度に保存され（２−４）、従ってＡｒｉｍａらによって
記述された他のクローンはＨＣＶの変異体からと言うよ
りも寧ろ、別種のウイルス由来であり得る。 【０００７】Ｍｉｓｈｉｒｏとその共同研究者は、ＰＣ
ＲでＨＣＶ陽性の個体から得た血清に反応性を示すエピ
トープを含む、宿主細胞の塩基配列をコードするＮＡＮ
ＢＨに感染したチンパンジーの血漿から、ｃＤＮＡクロ
ーンを単離した（１３）。免疫反応性ペプチド（ＧＯＲ
エピトープ）の配列は、ＨＣＶにはコードされておら
ず、ゲノムの３／４に渡って塩基配列が発表されたＨＣ
Ｖ（１）またはゲノムの上流側１／４をカバーするＨＣ
Ｖの５′末端側塩基配列（２）とは似ていないことが報
告された。しかしながら、ＧＤＲエピトープ塩基配列の
検分から、ＵＢＩ出願シリアルNo．５５８，７９９に記
述されたペプチドVIIIＥにカバーされるＮ末端断片と４
７％相同であることが示された。より低い相同性が黄熱
病ウイルスキャプシドタンパク質（３３％）及びＡｒｉ
ｍａらのクローン１に対応するタンパク質断片（３７．
５％）との比較から得られた（１２）（表１Ｄを見
よ）。 【０００８】ＨＣＶ感染個体のＧＤＲエピトープ配列と
交叉反応する抗体の存在は、ＧＤＲエピトープとそれに
対応するＨＣＶキャプシドタンパク質の領域の構造上の
類似性から説明できる。以前Ｈｏｕｇｈｔｏｎらによっ
て固定され、Ｃ１００領域に対する抗体である抗−Ｃ１
００（抗−Ｃ１００陽性血清のすべてではないいくつか
に存在するという点で抗−ＧＤＲと共通の特徴をもつ、
ペプチドVIIIＥに対する抗体）と比べて、それらは急性
及び慢性ＮＡＮＢＨ患者の双方から得られた、抗Ｃ−１
００陰性血清（それらは一連の血清変換で抗−Ｃ１００
以前に現れる）でも検出され得、また抗−Ｃ１００の血
清変換状態以降にも検出され、さらに正常な対照の１〜
２％、ＨＢｓＡｇ陽性個体の１５〜２０％にも存在す
る。初期のＮＡＮＢＨアッセイでは、宿主限定的な細胞
質性抗原と反応することが報告され、実際に抗ＨＣＶキ
ャプシドタンパク質交叉反応が検出され得た。 【０００９】予想されるエンベロープ（ｅｎｖ）領域は
１２０番から４００番のアミノ酸から成る。フラビウイ
ルス科のｅｎｖ糖タンパク質は、ｅｎｖ領域がフリーな
ウイルス粒子の主要な抗原であり、フラビウイルスの生
物学に於いて中心的な役割をもつことから、免疫化の重
要な標的となる。ｅｎｖ領域は細胞受容体との結合を媒
介し、おそらく膜との融合を促進する。それはまた、予
防接種またはフラビウイルスの自然感染後の防御的免疫
反応を誘導し（１４，１５）、細胞性免疫を活性化する
（１６）。ｅｎｖ上のタイプ特異的エピトープは、フラ
ビウイルスに対する防御的免疫反応と最も強く関与した
ものである（１７〜１９）。米国と日本の株の比較に基
づくと、ＨＣＶのｅｎｖ領域には多数の超可変性領域が
存在し（２）、このことからエピトープの株特異的反応
性が示され得る。 【００１０】エンベロープのスモールＭタンパク質に加
え、非構造タンパクＮＳ−１は、デング熱に於ける防御
的免疫に寄与していることが示されている（２０，２
１）。塩基配列と疎水性プロファイルの検分は、ＨＣＶ
のＮＳ−１領域は２つの相似なドメインを含むことを示
した（表１Ｅ）。この領域の典型的なモチーフは、５つ
またはそれ以上のアミノ酸を挟むシステイン対である。 【００１１】ＮＳ−２領域の機能は知られておらず、そ
の特徴もほとんど報告されていない。 【００１２】黄熱病ウイルスとの類似性から、ＨＣＶの
ＮＳ−３領域は、ウイルスの複製に必要なプロテアーゼ
活性を含む可能性がある（２２）。黄熱病ウイルスで
は、Ｈｉｓ−５３，Ａｓｐ−７７及びＳｅｒ−１３８か
ら成る触媒３残基に対するＮＳ−３の部位特異的突然変
異誘発により、トリプシン様セリンプロテアーゼ活性部
位が同定された。ＨＣＶに於いて対応する領域はＮＳ−
３のＮ末端側１／３で、必須な残基はＨｉｓ−１１０
３，Ａｓｐ−１１２７及びＳｅｒ−１１８８である。Ｈ
ＣＶのＮＳ−３のこれ以外の領域は免疫反応性を示す領
域を含む。この領域は互いに相似な３つの副領域から成
り（表１Ｆ）、これらの副領域は、ＮＳ−１領域の反復
分節とわずかな相関を持つ。 【００１３】今日まで最も幅広く研究が行われた領域
は、ＮＳ−４非構造領域である。その機能は不明だが、
高い免疫反応性を示す領域を含み、Ｈｏｕｇｈｔｏｎら
により第一にＣ１００と命名された領域を含み（１）、
それは組換え技術を用いてＨＣＶ診断テストの基礎とな
った。Ｃ１００ＨＣＶ塩基配列の一部と黄熱病ウイルス
のそれに対応する領域の間には、高い構造上の相似が観
察される（表１Ｇ）。この領域はＮＡＮＢＨによる、ウ
イルスに対する抗体を主として検出するが（２３）、実
験的には、先行するＵｎｉｔｅｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ
ｌ Ｉｎｃ．の出願シリアルNo．５５８，７９９及び多
数の最近の報告が、テストの感度及び特異性が抗原とし
てＣ１００ポリペプチドに依存しているとするのは短絡
的であると示している。しかしながら、先行する出願シ
リアルNo．５５８，７９９で記述されているＮＳ−４領
域由来の合成ペプチドは非特異的反応性の問題を解決し
ている。 【００１４】ＨＣＶのＣ末端に隣接する非構造領域はＮ
Ｓ−５であり、ポリメラーゼ（ｐｏｌ）活性部位であ
る。この領域のＧｌｙ−Ａｓｐ−Ａｓｐ配列は、多くの
ウイルスを通じて保存されている（１１）。Ｍａｅｎｏ
らはＮＡＮＢＨの慢性期の患者から得た血清に特異的に
反応する免疫反応性のＮＳ−５領域中のｐｏｌ部位の上
流塩基配列に対応するクローンを単離した（２４）。 【００１５】何千もの血清と、何百もの注意深くデザイ
ンされた合成ペプチドを用いる血清学的確認を含む、幅
広い一連の実験を通じて、我々は免疫反応性ペプチドに
関与するキャプシドタンパク質をさらに解明し、エンベ
ロープ，ＮＳ−１，ＮＳ−２，ＮＳ−３及びＮＳ−５タ
ンパク質領域内に含まれる新たな免疫反応性エピトープ
を同定した。 【００１６】タンパク質表面の抗原性または免疫原性部
位を、最近“部位特異的血清学”と呼ばれる手法でマッ
ピングするため、合成ペプチドがますます用いられてき
ている。我々は、Ｕｎｉｔｅｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ
で、ＨＩＶのエンベロープ及びコアタンパク質上の高抗
原性エピトープを同定し、解明する手法として、また、
ＨＩＶ（以前はＨＴＬＶ−III と称されていた）に対す
る抗体を検出するための、高感度で特異的なイムノアッ
セイを開発する手法としてこれを用いた。１９８８年４
月５日発効の米国特許４，７３５，８９６号、及び１９
８９年１１月７日発効の米国特許４，８７９，２１２号
を見よ。それらの内容はここに、参照文献により完全に
編入されている（２８，２９）。後に、ＨＴＬＶ−Ｉ／
IIに感染した個体の抗体を検出するための合成ペプチド
を基にした診断アッセイの開発に於いて、より詳細にマ
ッピングされ、より解明されたＨＴＬＶ−Ｉ／IIに関す
る一連の合成ペプチドが用いられた（３０，３１）。１
９８９年５月２３日発効の米国特許４，８３３，０７１
号、１９８９年１月１３日提出のＵ．Ｓ．Ｓ．Ｎ．０７
／２９７，６３５号、１９９０年１月２４日提出のＵ．
Ｓ．Ｓ．Ｎ．０７／４６９，２９４号も見よ。これらの
アッセイは卓越した感度と他より優れた特異性を提供
し、あるケースでは２つのごく近縁のウイルス間の感染
を区別する能力を提供し、それによりウイルスライセー
トまたは組換えＤＮＡ由来タンパク質の双方に基づく生
物学的テストに伴われていた多くの問題を解決した。 【００１７】即ち、それゆえ、本発明の目的は、同定さ
れ、特質が明らかにされた免疫反応性のＨＣＶペプチド
を、ＨＣＶ感染を同定及びモニターするための検出また
は診断法の開発に用いることである。 【００１８】さらに、体液中のＨＣＶに対する抗体の存
在を検出し、ＮＡＮＢＨを診断するのに用いられるテス
ト試薬を化学合成することも目的である。 【００１９】もう一つの目的は、ヒトを含む健康な哺乳
動物に導入された時、意図した効果を有する抗ＨＣＶ抗
体の生産を刺激し、それによりＨＣＶ感染の予防を提供
するワクチンを開発することである。 【００２０】加えて、ＨＣＶに対するモノクローナル及
びポリクローナル抗体の生産のための、哺乳動物で用い
ることができる合成免疫原を提供することも目的であ
る。 【００２１】 【表１】黄熱病ウイルス（ＡＡ２−ＡＡ６８、上段；Ｒｅｆ．
９）及びＣ型肝炎ウイルス（ＡＡ２−ＡＡ６４、中段；
及びＡＡ６３−ＡＡ１１９、下段；Ｒｅｆ．２）の対応
するＮ末端キャプシドタンパク質由来のアミノ酸配列
（一文字表記）が相同性比較のために並べられている。
同一のアミノ酸一致は実線で囲まれ、ＰＡＭ−２５０マ
トリックスによる相同的な一致はコロンで継がってい
る。ダッシュは配列を最適化するために隣り合うアミノ
酸の間に挿入されたスペースを表す。 【００２２】 ＡｒｉｍａらのＮＡＮＢＨＶタンパク質クローン２（上
段；Ｒｅｆ．１０）の断片及びＣ型肝炎ウイルスのＮ末
端キャプシドタンパク質（ＡＡ２−ＡＡ５２、中段；及
びＡＡ６３−ＡＡ１１１、下段）のアミノ酸配列（一文
字表記）が相同性比較のために並べられている。同一の
アミノ酸一致は実線で囲まれ、ＰＡＭ−２５０マトリッ
クスによる相同的な一致はコロンで継がっている。ダッ
シュは配列を最適化するために隣り合うアミノ酸の間に
挿入されたスペースを表す。 【００２３】黄熱病ウイルス（ＡＡ５−ＡＡ６９、上段；Ｒｅｆ．
９）、Ｒｅｙｅｓらによってクローニングされた他のＮ
ＡＮＢＨＶの配列（ＡＡ１−ＡＡ５５、中段；図３、Ｒ
ｅｆ．１１）及びＡｒｉｍａらによってクローニングさ
れたもう一つのＮＡＮＢＨＶの配列（ＡＡ５−ＡＡ６
６、下段；Ｒｅｆ．１２）のＮ末端キャプシドタンパク
質由来のアミノ酸配列（一文字表記）が相同性比較のた
めに並べられている。同一のアミノ酸は実線で囲まれ、
ＰＡＭ−２５０マトリックスによる相同的な一致はコロ
ンで継がっている。ダッシュは配列を最適化するために
隣り合うアミノ酸の間に挿入されたスペースを表す。 【００２４】ＧＤＲエピトープ（上段；Ｒｅｆ．１３９）、先行出願
のＨＣＶ ＡＡ４−ＡＡ１９を表すＨＣＶキャプシドペ
プチドの断片（２段目）、Ａｒｉｍａらによって報告さ
れたＮＡＮＢＨＶ配列（クローン１）のＡＡ２２−ＡＡ
３７（３段目；Ｒｅｆ．１２）及び黄熱病ウイルスＮ末
端キャプシドタンパク質の断片（ＡＡ２−ＡＡ１９；Ｒ
ｅｆ．９）由来のアミノ酸配列（一文字表記）が相同性
比較のために並べられている。同一のアミノ酸一致は実
線で囲まれ、ＰＡＭ−２５０マトリックスによる相同的
な一致はコロンで継がっている。ダッシュは配列を最適
化するために隣り合うアミノ酸の間に挿入されたスペー
スを表す。 【００２５】ＨＣＶ ＮＳ−１タンパク質の２つの断片（上段、ＡＡ
４５９−ＡＡ５０８；および下段、ＡＡ５２０−ＡＡ５
６９）由来のアミノ酸配列（一文字表記）が相同性比較
のために並べられている。同一のアミノ酸一致は実線で
囲まれ、ＰＡＭ−２５０マトリックスによる相同的な一
致はコロンで継がっている。ダッシュは配列を最適化す
るために隣り合うアミノ酸の間に挿入されたスペースを
表す。 【００２６】 ３つのＨＣＶ株（Ｊ−１，Ｊ−４及びＪ）由来のＮＳ−
１タンパク質断片（ＡＡ４５９−ＡＡ５０８）のアミノ
酸配列（一文字表記）が相同性比較のために並べられて
いる。 【００２７】２つのＨＣＶ株（ＰＴ及びＪ）由来のＮＳ−１タンパク
質断片（ＡＡ５２０−ＡＡ５６９）のアミノ酸配列（一
文字表記）が相同性比較のために並べられている。 【００２８】 ２つのＨＣＶ株（ＰＴ及びＪ）由来のＮＳ−１タンパク
質断片（ＡＡ５２０−ＡＡ５６９）のアミノ酸配列（一
文字表記）が相同性比較のために並べられている。 【００２９】ＨＣＶ ＮＳ−３タンパク質の３つの断片（ＡＡ１１９
４−ＡＡ１２４１，上段；ＡＡ１２７６−ＡＡ１３２
４，中段；及びＡＡ１３６０−ＡＡ１４０７，下段）由
来のアミノ酸配列（一文字表記）が相同性比較のために
並べられている。同一のアミノ酸一致は実線で囲まれ、
ＰＡＭ−２５０マトリックスによる相同的な一致はコロ
ンで継がっている。ダッシュは配列を最適化するために
隣り合うアミノ酸の間に挿入されたスペースを表す。 【００３０】ＨＣＶ（ＡＡ１３４４−ＡＡ１３５６，上表；及びＡＡ
１４８６−１５００，下表）、ウシ下痢ウイルス（ＢＶ
Ｄ，ＡＡ２０２５−ＡＡ２０３７；ＡＡ２１８１−ＡＡ
２１９６）、ホッグコレラウイルス（ＨＯＧ，ＡＡ１８
８６−ＡＡ１８９８；ＡＡ２０４２−ＡＡ２０５７）及
び黄熱病ウイルス（ＹＦＶ ＡＡ１８００−ＡＡ１８１
２；ＡＡ１９４４−ＡＡ１９５８）のＮＳ−３タンパク
質領域（一文字表記）にコードされている、２つの高度
に保存された断片のアライメントが相同性比較のために
並べられている。 【００３１】 ＨＣＶ ＮＳ−４タンパク質及びそれに対応する黄熱病
ウイルスＮＳ−４タンパク質の断片（下段，ＡＡ２１０
９−ＡＡ２１７６，Ｒｅｆ．９）由来のアミノ酸配列
（一文字表記）が相同性比較のために並べられている。
同一のアミノ酸一致は実線で囲まれ、ＰＡＭ−２５０マ
トリックスによる相同的な一致はコロンで継がってい
る。ダッシュは配列を最適化するために隣り合うアミノ
酸の間に挿入されたスペースを表す。 【００３２】参考分献 １．Ｈｏｕｇｈｔｏｎ Ｍ，Ｃｈｏｏ Ｑ−Ｌ，Ｋｕｏ
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Ｔ，Ｙｏｓｈｉｚａｗａ Ｈ，Ｔｓｕｄａ Ｆ，Ｍｉｙ
ａｋａｗａ Ｙ，Ｍａｙｕｍｉ Ｍ：Ｔｈｅ ５′ｔｅ
ｒｍｉｎａｌｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｐ
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ｖａｃｃｉｎｅｓ．ヨーロッパ特許第０３８８２３２Ａ
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ｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｇｅｎｏｍｅ ｆｒｏｍ Ｊａ
ｐａｎｅｓｅｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ−
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ｆｌａｖｉｖｉｒｕｓｅｓ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｍ
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ｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｔｈｅ ｃａｐ
ｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ
Ｃ ｖｉｒｕｓ ｗｉｔｈ ａ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
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ｏｒｉ Ｃ，ｅｔ ａｌ：Ａ ｌａｍｂｄａ ｇｔ１１
−ｃＤＮＡ ｃｌｏｎｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｆｏｒ ｃ
ｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｇｅｎｅｒａ
ｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐｏｏｌｅｄ ｓｅｒｕｍ ｐｒｅ
ｓｕｍａｂｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄｂｙ ｈｅｐａｔｉ
ｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ
ｏｇｉａ Ｊａｐｏｎｉｃａ ２４：５４５（１９８
９）． １１．Ｒｅｙｅｓ ＧＲ，Ｐｕｒｄｙ ＭＡ，Ｋｉｍ
Ｊ，ｅｔ ａｌ：Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃＤ
ＮＡ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｖｉｒｕｓ ｒｅｓｐｏｎｓ
ｉｂｌｅ ｆｏｒ ｅｎｔｅｒｉｃａｌｌｙ ｔｒａｎ
ｓｍｉｔｔｅｄｎｏｎ−Ａ，ｎｏｎ−Ｂ ｈｅｐａｔｉ
ｔｉｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４７：１３３５（１９９
０）． １２．Ａｒｉｍａ Ｔ，Ｎａｇａｓｈｉｍａ Ｈ，Ｍｕ
ｒａｋａｍｉ Ｓ，ｅｔ ａｌ：Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ
ａ ｃＤＮＡ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａ
ｃｕｔｅ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉ
ｓ Ｃ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｆ
ｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｓｅｒｕｍＲＮＡ．Ｇａｓ
ｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｉａ Ｊａｐｏｎｉｃａ ２
４：５４０（１９８９）． １３．Ｍｉｓｈｉｒｏ Ｓ，Ｈｏｓｈｉ Ｙ，Ｔａｋｅ
ｄａ Ｋ，ｅｔ ａｌ：ｎｏｎ−Ａ，ｎｏｎ−Ｂ ｈｅ
ｐａｔｉｔｉｓ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉ
ｅｓ ｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｔ ｈｏｓｔ−ｄｅｒｉｖ
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ｒ ａｎ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｐｒｏｃｅｓｓ．Ｌ
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ｔｏ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ ＨＴＬＶ． 【００３３】 【課題を解決するための手段】本発明により、Ｃ型肝炎
ウイルス（ＨＣＶ）の仮定エンベロップタンパク質及び
非構造タンパク質ＮＳ−１，ＮＳ−２，ＮＳ−３及びＮ
Ｓ−５の、免疫反応性の高い領域に相当する、各々特定
の配列中に取り決められた、一連の合成ペプチドを固定
し、固相ペプチド合成により作成した。これらのペプチ
ドは、血清及び体液中でのＨＣＶに対する抗体の検出、
及び非Ａ型非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）の診断に有用であ
ることが認められた。その免疫反応性のために、これら
のペプチドは、また、Ｂａｌｂ／Ｃマウスのような健康
な哺乳類中及び、ＨＣＶ或いはＮＡＮＢＨＶの感染を予
防するワクチン合成の際に、抗ＨＣＶ抗体の産生を刺激
するのに有用であると期待される。 【００３４】本発明に従うと、抗ＨＣＶ抗体の検出及び
ＮＡＮＢＨの診断に有用なペプチド組成物は以下の配列
に相当する、ＨＣＶのエンベロップ，ＮＳ−１，ＮＳ−
２，ＮＳ−３及びＮＳ−５領域由来のペプチドから成
る： （ａ）Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ− Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ１ （ｂ）Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ− Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ− Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｘ Ｐｅｐ２ （ｃ）Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ− Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ− Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｘ Ｐｅｐ３ （ｄ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ Ｐｅｐ４ （ｅ）Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｓｎ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ− Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｘ Ｐｅｐ５ （ｆ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｉｌｅ− Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｘ Ｐｅｐ６ （ｇ）Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ− Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ− Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ− Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ７ （ｈ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ− Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ− Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ− Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ− Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ Ｐｅｐ８ （ｉ）Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ− Ｘ Ｐｅｐ９ （ｊ）Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ− Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ− Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ１０ （ｋ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ− Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｌａ− Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ− Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｘ Ｐｅｐ１１ （ｌ）Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ− Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ− Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ− Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｘ Ｐｅｐ１２ （ｍ）Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ− Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ− Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ− Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ Ｐｅｐ１３ （ｎ）Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｘ Ｐｅｐ１４ （ｏ）Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ Ｐｅｐ１５ （ｐ）Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ− Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ− Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ− Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ Ｐｅｐ１６ （ｑ）Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ− Ｇｌｙ−Ｘ Ｐｅｐ１７ （ｒ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｌａ− Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ− Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ− Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｘ Ｐｅｐ１８ （ｓ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ− Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ− Ｘ Ｐｅｐ１９ これら１９ペプチドが、やはり反応的で抗ＨＣＶ抗体の
検出及びＮＡＮＢＨの診断に有用であると認められたペ
プチドVIIIＥ（構造タンパク質領域由来のペプチド）、
ペプチドIIＨ及びＶ（非構造タンパク質領域由来のペプ
チド）の他に加えられている。 【００３５】ペプチドVIIIＥは次の配列を有する：Ｓｅ
ｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ
−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−
Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａ
ｓｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌ
ｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｖ
ａｌ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈ
ｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ， ペプチドIIＨは次の配列を有する：Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｓ
ｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−
Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｍｅ
ｔ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ
−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−
Ｌｅｕ−Ｘ， ペプチドＶは次の配列を有する：Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｌｙ
ｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ
−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−
Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｖ
ａｌ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｌｙ
ｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｌａ
−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−
Ｘ ここでＸは、−ＯＨあるいはＮＨ₂ であり、そこ（その
配列）からの類縁体、部分体、混合物、複合体及び重合
体を（ペプチドは）含んでいる。 【００３６】さらに、本発明によると、ペプチドのみ、
或いは、タンパク質にもしくはホモまたはヘテロダイマ
ー或いはさらに高度の重合体である重合担体にホモまた
はヘテロ機能（官能基）多価架橋試薬を使用して、連結
されている場合、或いは分枝形の多価リジン樹脂に直接
合成し結合している場合において、ペプチドは、ヒトを
含む、健康な哺乳類中に抗ＨＣＶ抗体の産生を誘導する
ために使用できる。 【００３７】方法は、各々、個々のペプチド、またはそ
れらの類縁体、部分体、混合物、結合体、或いは重合形
態のものを含む有効量のペプチド組成物を腹腔内または
皮下注射により健康な哺乳類の体内へ導入することから
なる。 【００３８】本発明に従うペプチドを、かぎとなる免疫
原として含むワクチンもまた、上記のように或いは、既
知の方法により、調製できるであろう。このようなワク
チン組成物はＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの予防に有効
であるだろうことが期待される。 【００３９】（図面の簡単な説明）図１は八量体ペプチ
ド免疫原のコンピューター生成構造の図である。 【００４０】（発明の詳細な説明）本発明に従って、１
９のペプチドと部分体を含むそれらの類縁体をＨＣＶの
非構造領域から選別し、化学的に合成した。その類縁体
を含むこれらのペプチドは体液中の抗ＨＣＶ抗体の検
出、ＮＡＮＢＨの診断及び抗ＨＣＶ抗体の産生を刺激す
ることにより健康な哺乳類のワクチン接種に有用であ
る。これらのペプチドは、以下の配列に取りきめられて
いる。 【００４１】 （ａ）Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ− Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ１ （ｂ）Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ− Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ− Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｘ Ｐｅｐ２ （ｃ）Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ− Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ− Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｘ Ｐｅｐ３ （ｄ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ Ｐｅｐ４ （ｅ）Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｓｎ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ− Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｘ Ｐｅｐ５ （ｆ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｉｌｅ− Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｘ Ｐｅｐ６ （ｇ）Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ− Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ− Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ− Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ７ （ｈ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ− Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ− Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ− Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ− Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ Ｐｅｐ８ （ｉ）Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ− Ｘ Ｐｅｐ９ （ｊ）Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ− Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ− Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｘ Ｐｅｐ１０ （ｋ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ− Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｌａ− Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ− Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｘ Ｐｅｐ１１ （ｌ）Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ− Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ− Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ− Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｘ Ｐｅｐ１２ （ｍ）Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ− Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ− Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ− Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ Ｐｅｐ１３ （ｎ）Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｘ Ｐｅｐ１４ （ｏ）Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ Ｐｅｐ１５ （ｐ）Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ− Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ− Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ− Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ Ｐｅｐ１６ （ｑ）Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ− Ｇｌｙ−Ｘ Ｐｅｐ１７ （ｒ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｌａ− Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ− Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ− Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｘ Ｐｅｐ１８ （ｓ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ− Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ− Ｘ Ｐｅｐ１９ これら１９ペプチドが、やはり反応的で抗ＨＣＶ抗体の
検出及びＮＡＮＢＨの診断に有用であると認められたペ
プチドVIIIＥ（構造タンパク質領域由来のペプチド）、
ペプチドIIＨ及びＶ（非構造タンパク質領域由来のペプ
チド）の他に加えられている。 【００４２】ペプチドVIIIＥは次の配列を有する：Ｓｅ
ｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ
−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−
Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａ
ｓｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌ
ｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ
−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｖ
ａｌ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈ
ｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ ペプチドIIＨは次の配列を有する：Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｓ
ｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−
Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｍｅ
ｔ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ
−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−
Ｌｅｕ−Ｘ ペプチドＶは次の配列を有する：Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｌｙ
ｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ
−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−
Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｖ
ａｌ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｌｙ
ｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｌａ
−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−
Ｘ ここでＸは、−ＯＨ或いはＮＨ₂ であり、そこ（その配
列）からの類縁体、部分体、混合物複合体及び重合体を
（ペプチドは）含んでいる。 【００４３】これらのペプチドは、結合体または部分
体、すなわち、末端アミノ酸に余分のアミノ酸が付加さ
れるためにより長いペプチド鎖、またはどちら側の末端
からでもアミノ酸が除かれるためにより短いペプチド鎖
を含んでもよい。 【００４４】これらのペプチドはまた、ＨＣＶの異なる
単離体間の、系統から系統への変化を適応させるよう
な、類縁体を含んでもよい。ＨＣＶは頻繁に変異をおこ
すことが示されている。つまり、ＤＴ，Ｊ，Ｊ−１及び
Ｊ−４（１−４）のような、様々な系統が存在すること
が予想される。 【００４５】保存的置換に対する調整及び非保存的置換
を含んでいる選択肢間の選択が前述の配列中で行われて
もよい（例、表１Ｅ，表８Ｃ，表１１参照、エンベロッ
プ及びＮＳ−１タンパク質の高度可変領域における可能
性のあるアミノ酸置換が示されている）。合成ペプチド
のこれらの類縁体は、従って、抗ＨＣＶ抗体によって認
識される免疫反応性が保持されている限り、様々な系統
を適応させるために、上記の配列に列挙されたアミノ酸
の置換、挿入及び／或いは欠失を含んでもよい。 【００４６】これらのペプチドは複合体から成ってもよ
い、つまり、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）またはヒト血
清アルブミン（ＨＳＡ）のような担体タンパク質と結合
していてもよい。またさらに、これらのペプチドは重合
体から成ってもよい、つまり、分枝形の八量体リジン樹
脂のような、重合樹脂上や、または二量、四量、八量、
十六量体のペプチドやその類縁体中に合成されてもよ
い。 【００４７】分枝ポリ−Ｌ−リジンはＬｙｓ₈ ，Ｌｙｓ
₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ，Ｌｙｓ₄ Ｌｙｓ₂ ＬｙｓＬｙｓ₂ Ｌ
ｙｓ，Ｌｙｓであるはずであり、最後のＬｙｓは、Ｌｙ
ｓ₄Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ−Ｙのように、Ｙが付くこ
とができて、ここでＹはＯＨ，−ＮＨ₂ である。 【００４８】発明に記述されている、体液中の抗ＨＣＶ
抗体の検出用や、ＮＡＮＢＨの診断用の検査試薬として
有用なポリペプチドのアミノ酸配列は、Ｈｏｕｇｈｔｏ
ｎｅｔ ａｌ．（１３），Ｏｋａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ
（２）及びＫａｔｏ ｅｔａｌ（４）から得たアミノ酸
配列情報に基づく、ＥＮＶ，ＮＳ−１，ＮＳ−２，ＮＳ
−３及びＮＳ−５と呼ばれているＨＣＶの仮定エンベロ
ップ及び非構造タンパク質のアミノ酸配列の部分に相当
するように選択される。 【００４９】抗原基解析に対してＨＣＶタンパク質の領
域を選ぶ際に、ＨＣＶエンベロップ及び非構造タンパク
質領域ＮＳ−１，ＮＳ−２，ＮＳ−３及びＮＳ−５に完
全に範囲が及ぶように、アミノ酸配列にして約４０マー
の大きさのペプチドを合成した。これらを、数千の患者
及び健康人血清をスクリーニングして、ＨＣＶへの特有
の（単一の）免疫反応性を基準にあらかじめ選んであっ
た特定の標本に対する免疫反応性について検査した。 【００５０】Ｐｅｐ１，Ｐｅｐ２，Ｐｅｐ３，Ｐｅｐ
４，Ｐｅｐ５，Ｐｅｐ６，Ｐｅｐ７，Ｐｅｐ８，Ｐｅｐ
９，Ｐｅｐ１０，Ｐｅｐ１１，Ｐｅｐ１２，Ｐｅｐ１
３，Ｐｅｐ１４，Ｐｅｐ１５，Ｐｅｐ１６，Ｐｅｐ１
７，Ｐｅｐｏ１８及びＰｅｐ１９と呼ばれる仮定エンベ
ロップ及び非構造タンパク質領域ＮＳ−１，ＮＳ−２，
ＮＳ−３及びＮＳ−５由来の１９ペプチドとその類縁体
が、陽性ＨＣＶ血清に対して特異的免疫反応性を有する
ことが識別された。 【００５１】現在、タンパク質構造について得ることの
できる情報では、科学者は免疫原性の高いエピトープに
対応するであろうアミノ酸配列を予想することはできて
いない。抗原または免疫原としてのペプチドの有用性は
実験的に決定しなければならない。“血清有効性確認反
応？”と呼ばれる広範なプロセスを通じてのみ、免疫反
応性のエピトープを識別及び特徴づけできてきた。次の
例は免疫反応性エピトープの識別がいかに困難であるか
を示している。 【００５２】例えば、ＮＳ−３領域中にコードされてい
るＣ３３ｃと呼ばれるクローンは、免疫反応性を有する
と報告された（３）。 【００５３】このクローンは２６５アミノ酸残基に及
ぶ。有用なペプチドは長さにして少くとも６アミノ酸は
なくてはならず、しかも適度な収量での合成ペプチドの
上限が１２０残基であると仮定すると、Ｃ３３ｃ領域由
来の考えられうる独立のペプチド数は２３，０２８であ
る。ＨＣＶゲノム全体に対してでは、その数は約２６
０，０００である。 【００５４】さらに、ペプチドの免疫効力の発揮には、
抽出条件が重大であることを示したが（実施例４Ｃ）、
従って単独に抽出された、この領域由来のペプチドは２
３，０２８の数倍になる。ｐＨ調整といった抽出後の変
化の可能性（実施例４Ｂ）によりさらに、おこりうる選
択は１０⁶ 以上にまで増大する。様々な位置でのアミノ
酸置換を考慮にいれるとこの数字は、急速に数百万まで
増大するであろう。ＨＣＶのコア領域では、ペプチドVI
IIＥとIXＤが最適の類縁体であったが、その領域とは対
照的に、ＮＳ−３／Ｃ３３ｃ領域ではより長いペプチド
はより短いペプチドほど好適ではない。例えば、表４，
４Ｄ上の４２マー２７９Ｂは表４Ｄで２７９Ａと呼ばれ
ている、３７マー・ペプチド３の３％の反応性しかな
い。Ｃ３３ｃ領域に及ぶ、試験された３０ペプチド中、
唯一有用なものが認められた。Ｈｏｕｇｈｔｏｎ ｅｔ
ａｌ（３）中で言及されている抗原性指標は、エピト
ープへの有用な目安（規準）ではないことが、ペプチド
３に対するプロファイルがその配列の３０％のみが陽性
で残り７０％については陰性であるので、判明した。血
清有効性確認の方法は、目標とするエピトープの予測さ
れる性質にも依存する。ＨＩＶ−１のｇｐ４１膜貫通ペ
プチドのような、普遍的免疫優性エピトープはウイルス
に感染していることがわかっている患者からの１つの代
表的血清サンプルによってスクリーニングできる。感染
した個人全員には認識されないエピトープ、または、抗
体が遅くまたは一時的にのみ産生されるようなエピトー
プ、及び特に、抗体を無効にしてしまうエピトープは、
大きい一団の血清によってスクリーニングしなければな
らない。例えば、表４Ａ中に示されているペプチド２７
２ＢはまずＨＣＶ感染者由来の８血清の一団について試
験した（パネル１）。 【００５５】８８０mAの吸収度で、明らかに陽性であっ
たのはただ１つのサンプルのみであった。３つは弱く反
応し（＜２００mA）、４つは陰性であった。 【００５６】免疫反応性エピトープの同定は、使用した
血清集団にも依存している。一団が、望ましいエピトー
プに対してもっとも血清陽性であるらしい集団をより強
く代表しているほど、エピトープが同定される機会が増
大する。例えば、ＮＳ−１領域由来で合成されたペプチ
ドは、抗体の無効化をおこすのに重要であると仮定され
ていたが、それらは新たに及び／または慢性的にＨＣＶ
に感染している人々由来の、非常に多くの数（ｎ＞２０
０）のサンプルにおいてスクリーニングしたところ、弱
く反応する、または陰性の結果しか与えなかった。しか
しながら、肝炎ウイルスの既知の風土病的地理学的地
域、台湾及び中国本土からの無症状性の人々由来の２４
サンプルの一団では、ＮＳ−１の複数のペプチドに対し
て、吸収度＞２０００mAの２つのサンプルがでた。 【００５７】結局、既に同定したエピトープから構成さ
れるアッセイの反応性の範囲を拡大することが、ねらい
とするペプチド／エピトープの望ましい目的であるなら
ば、そういう場合、感染の恐れはあるが、既知のエピト
ープに対して血清陰性である人々からの多数のサンプル
をスクリーニングに用いなければならない。 【００５８】不幸にして、臨床的に証明されかつ記録を
添付されている感染症例由来のもっとも重要なサンプル
は、スクリーニングの目的には不十分な量しか入手する
ことができない。これは、ペプチドの免疫反応性を決定
する血清有効性確認でぶつかる他の（新たな）問題点／
困難である。 【００５９】“血清有効性確認”プロセスは、同定する
エピトープが感染患者グループの部分集団でしか、抗体
を誘導しない場合、特に困難となる。このようなエピト
ープを同定のねらいとする場合、酵素イムノアッセイ試
験時に非常に弱い反応性を示す合成ペプチドに、特別の
注意を払わなければならない。 【００６０】幸い、合成ペプチドの吸収度のバックグラ
ンドが低いために弱い反応性を正確に検出できる。場合
によっては、バックグランドの示度に対して５０mAの吸
収度も、十分に意味があり、ペプチドのアミノ酸配列の
継続的改善を通して重要なエピトープの同定に導くこと
ができる。吸収度２００−３００mA以下の範囲で行う場
合、一貫性及び信頼性のある結果を得るには、最大限の
技術的熟達が要求される。例えば：表４Ｄ上に示されて
いるペプチド２６１Ｅと２６１Ｆは、８ＨＣＶ血清集団
メンバーの中のただ１つと（パネル−Ｉ）、それぞれ、
３０７及び２６９mAの吸収度で反応した。それでもこの
弱い反応性によって結果としてＰｅｐ３（または２７９
Ａ）の同定が導かれ、このペプチドに対して、一団の半
数が反応し、吸収度＞２０００mAを示す追加の反応する
サンプルもある。 【００６１】本発明によるペプチドの免疫反応性に基づ
き、これらのペプチドはまたＮＡＮＢＨを予防するワク
チンにも有用であると思われている。タンパク質と結合
している場合、或いは重合担体樹脂（例、八量体リジン
樹脂）上に合成されている場合、もしくはシステイン酸
化、またはジスルフィド架橋を誘導して、またはホモ或
いはヘテロ官能基（機能）多価架橋試薬の使用により、
ホモ或いはヘテロ二量体またはさらに高度の重合体に重
合化されている場合のポリペプチドは、健康な哺乳類中
の抗ＨＣＶ抗体の産生を刺激するために、健常な素質者
に取り入れさせることができる。 【００６２】合成ペプチドを用いる利点はわかってい
る。 【００６３】本発明に従うペプチドはウイルスから生物
学的に得られたものではないので、ワクチンを受ける予
定の健常な素質者を病原体を引き起こす疾患にさらす危
険はない。 【００６４】ペプチドは化学的に容易に合成できる。こ
のため、検査試薬またはワクチンを作成するプロセス間
のどの時においてもＨＣＶと掛かり合いをもつことがな
い。本発明のプロセスによって最小化できる他の問題
は、ＨＣＶ融合タンパク質と共に精製された抗原物質の
存在によってひきおこされる擬似陽性結果である。健常
者のなかには発現系由来の抗原性物質と交差反応する、
大腸菌や酵母タンパク質に対する抗体を有する人がい
る。これらの健常者由来の血清はイムノアッセイ中で陽
性反応を示すかもしれない。 【００６５】さらに、適切なアミノ酸修飾または置換に
よって、前述のアミノ酸配列に基づく種々のペプチド類
縁体が、低いバックグランドの示度を与える特性；また
はＨＣＶ抗体スクリーニングアッセイに有用な、固相に
対してよりいい結合能をもつように合成できる。 【００６６】その上、本発明のペプチド組成物は、合成
的に調製されているため、量を制御することが可能であ
り結果として、検査結果の再現性が保証できる。また、
非常に少量のペプチドしか各々の検査方法に必要とされ
ず、そしてペプチドを調製する費用が比較的低いので、
抗ＨＣＶ抗体に対する体液のスクリーニング、ＮＡＮＢ
Ｈ感染の診断、及びワクチンの調製のコストは比較的低
い。 【００６７】本発明に従って調製されたペプチドはＨＣ
Ｖ感染の検出及びＮＡＮＢＨ診断に、エンザイム−リン
クイムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）、酵素イム
ノドットアッセイ、凝集に基づいたアッセイ、或いは他
のよく知られているイムノアッセイ法中で検査試薬とし
て使用することで用いることができる。以下の実施例は
本発明を例証する役に立ち、また発明の範囲を制限する
ことに用いられるためのものではない。 【００６８】 【実施例】実施例１ 酵素結合イムノソルベントアッセイによるＨＣＶ合成ペ
プチドに関する相対免疫反応性（％）の測定 ＨＣＶ合成ペプチドの相対免疫反応性（％）がどのよう
に測定されるかを示す例として、９６穴プレートのウェ
ルを１０mM ＮａＨＣＯ₃ 緩衝液、ｐＨ９．５中５μｇ
／mlのIIＨ，Ｖ，VIIIＥ及びＰｅｐ１１の各ペプチドを
ウェル当たり１００μｌ用いて３７℃で１時間コートし
た。つぎに、ペプチドでコートしたウェルにＰＢＳ中３
重量％のゼラチン２５０μｌを入れて３７℃で１時間イ
ンキュベートして、非特異的なタンパク質結合部位をブ
ロックし、ＴＷＥＥＮ２０を０．０５体積％含むＰＢＳ
で３回洗浄し、乾燥させた。８種類のよく解析されたＨ
ＣＶ抗体陽性患者血清のパネルを含む試料を、２０体積
％ヤギ正常血清、１重量％ゼラチン、及び０．０５体積
％ＴＷＥＥＮ２０を含むＰＢＳで、それぞれ１：２０の
体積比で希釈した。希釈した試料２００μｌを各ウェル
に加え、３７℃で１５分間反応させた。 【００６９】つぎに、ウェルを０．０５体積％のＴＷＥ
ＥＮ２０を含むＰＢＳで６回洗浄して、結合していない
抗体を除いた。ホースラディッシュペルオキシダーゼが
結合しているヤギ抗ヒトＩｇＧを二次抗体トレーサーと
して用いて、陽性のウェル中で形成されたＨＣＶ抗体−
ペプチド複合体と結合させた。１体積％のヤギ正常血
清、０．０５体積％ＴＷＥＥＮ２０を含むＰＢＳで１：
１８００に希釈したペルオキシダーゼ標識ヤギ抗ヒトＩ
ｇＧ １００μｌを各ウェルに加え、３７℃でさらに１
５分間インキュベートした。 【００７０】ウェルを０．０５体積％ ＴＷＥＥＮ ２
０を含むＰＢＳで６回洗浄して結合していない抗体を除
去し、０．０４重量％オルトフェニレンジアミン（ＯＰ
Ｄ）、及び０．１２体積％過酸化水素水を含むクエン酸
ナトリウム緩衝液、ｐＨ５．０の基質混合液１００μｌ
と反応させた。 【００７１】この基質混合液を用いて、発色産物を形成
させてペルオキシダーゼを検出した。反応は１００μｌ
の１．０Ｍ Ｈ₂ ＳＯ₄ を添加することにより停止さ
せ、Ａ₄₉₂ nmを測定した。この実験で得られた各ペプチ
ドの相対免疫反応性の結果を、ペプチドIIＨを参考とし
て、以下の表Ａに示す。 【００７２】 実施例２ 酵素イムノアッセイによる、相対免疫反応性％に関す
る、よく解析された８種のＨＣＶ血清パネル（パネル
Ｉ）とＨＣＶキャプシドタンパク質関連ペプチドによる
ＨＣＶ免疫反応性の比較 最近岡本ら（８）によって開示された、ＨＣＶ ＥＩＡ
に基づいた３６マーのＨＣＶキャプシドタンパク質を、
ペプチドVIIIＡ，VIIIＢ，VIIIＥと免疫反応性の比較の
ために合成した（表２Ａ）。実施例１でのべた方法によ
り、免疫反応性の比較のために、５，１，及び０．２μ
ｇ／mlの濃度でペプチドをコートした。この３６マーは
VIIIＥの４７．８％の反応性しか示さなかった（表２
Ａ）。さらに重要なことに、血清学的確認のために用い
た我々のよく解析されたＨＣＶ血清パネルによって検査
した場合、８試料のうち７試料がVIIIＥと反応したのに
対して、８試料のうち４試料しか３６マーと反応しなか
った。ＩＸＤがＩＸＣよりも反応性が高くないことか
ら、この３６マーのＣ末端はペプチドのＨＣＶ免疫反応
性に寄与しているとはいえないことが示された（表２
Ａ）。 【００７３】さらに、フラヴィウイルス黄熱ウイルスの
キャプシド領域に相同な、アリマクローン１の配列に対
応する６１マーのペプチド、及び３０マー、４０マー及
び５０マーからなる断片を合成し、ＨＣＶの対応する領
域由来のペプチドVIIIＥと免疫反応性を比較した（表２
Ｂ）。クローン１の４０マー及び６０マーが最も強い反
応性を示した。しかし、これらはペプチドVIIIＥの免疫
反応性のそれぞれわずか２１．１％及び２０．７％であ
った。 【００７４】 実施例３ 酵素連結イムノソルベントアッセイによるＮＳ−１合成
ペプチドの相対免疫反応性（％） （Ａ）免疫反応性を持つＮＳ−１ペプチドの同定 ９６穴プレートのウェルを１０mM ＮａＨＣＯ₃ 緩衝
液、ｐＨ９．５中、５μｇ／mlの濃度で、ウェル当たり
１００μｌの、ＮＳ−１領域由来の配列によって合成し
た１６のペプチド（ペプチド２４１Ａ−Ｃ，２３１Ａ−
Ｅ，２３２Ａ−Ｄ，２３３Ｃ，２３４Ａ−Ｃで表す；表
３Ａ）で、３７℃で１時間コートした。各ペプチドの免
疫反応性を上述のように（実施例１参照）、８種類の血
清パネルを用いて測定した（パネルＩ）。 【００７５】１６種すべてのペプチドは血清パネルＩと
はほとんどまたは全く反応性を示さなかった。最も強い
反応性を示したペプチド、Ｐｅｐ１（表３Ａでは２３１
Ｃ）は、同じパネル上のペプチドVIIIＥと比較して１
３．９％の免疫反応性指数を持っていた。エピトープ認
識の単離例がある；例えば、試料４に関して、２３２シ
リーズのすべての類似物質は、７８５mAの吸光度をもつ
最長のペプチド２３２Ｄを除いては２０mA以下の吸光度
を有していた。しかしながら、残りの７種のパネル要素
は、２３２Ｄで調べた場合には陰性であった。 【００７６】これら１６種のＮＳ−１領域由来ペプチド
をさらに２００以上のＨＣＶ陽性血清でスクリーニング
して、ほとんどまたは全く免疫反応性を示さないことが
明らかになった後に、これら１６種のＮＳ−１ペプチド
の免疫反応性を別の血清で調べた。Ｃ型肝炎が見られる
地域、すなわち中国及び台湾出身者由来の血清試料パネ
ルを、これらのＮＳ−１タンパク質由来ペプチドに対す
る反応性に関して検査した。非Ａ非Ｂ肝炎の顕著な兆候
が見られない者から２４試料が選ばれ、彼らに関しては
実施例１１に記載されるＨＣＶ ＥＩＡ，Ｃ型に基づく
ペプチドは反応しなかった。２４試料のうち７試料（２
９％）はＮＳ−１領域由来のペプチド１種類以上と反応
し、この領域に反応する長期にわたって保護する抗体の
存在が示唆された。この７種のパネル（パネルII，ＣＨ
１−ＣＨ２と呼ぶ）を用いて、その免疫反応性に関して
これらのＮＳ−１ペプチドをさらに解析した。 【００７７】血清パネルIIに対して最も強い反応性を示
したペプチドはＰｅｐ１（表３Ａでは２３１Ｃ）であっ
た。このペプチドを標準として、その他の１５種のＮＳ
−１領域由来の各ペプチドの相対免疫反応性を表３Ａに
算出した。 【００７８】最も強い免疫反応性を持つアナログ４種
（Ｐｅｐ１、すなわち２３１Ｃ；Ｐｅｐ２、すなわち２
３２Ａ；２３３Ｃ及び２３４Ａ）に関する７種の血清パ
ネルIIからの詳細な結果を表３Ｂに示す。２３１Ｃと２
３２Ａの反応性は、２３１ＣではＣＨ−１とＣＨ−２が
最も強く、２３２Ａに対してはＣＨ−３からＣＨ−７が
より強いという点において、相補的である。 【００７９】（Ｂ）初期及び長期ＨＣＶ感染におけるＮ
Ｓ−１反応性 さらに、感染初期のＨＣＶ抗体陽性供与者（ｎ＝９）、
すなわちＡＬＴレベルが＞１００ i. u.／Ｌで最初に現
れた血漿交換供与者、及び、抗ＨＣＶの結果が過去の感
染を示すと思われる抗ＨＣＶまたはＨＢｃに反応性を示
すために血液供与から除外された無徴候者（ｎ＝１４）
の試料のパネルで試験した。これらの選択パネルは、Ｎ
Ｓ−１抗原を認識できる能力に基づき、数百のＨＣＶ陽
性血清から選ばれた。１６種のＮＳ−１ペプチドを用い
たパネルの検査の結果を表３Ｃに示す。どちらのグルー
プも２３２Ａ（Ｐｅｐ２）で表されるペプチドが最も強
い免疫反応性を有した。Ｐｅｐ２を標準として用いて、
各ペプチドの相対免疫反応性を算出した（表３Ｃ）。 【００８０】 実施例４ 酵素連結イムノソルベントアッセイによるＮＳ−３タン
パク質由来合成ペプチドに関する相対免疫反応性（％） （Ａ）ＮＳ−３タンパク質由来免疫反応性ペプチドの同
定 ９６穴プレートのウェルを、１０mM ＮａＨＣＯ₃ 緩衝
液、ｐＨ９．５中、５μｇ／mlの濃度で、ウェル当たり
１００μｌの、ＮＳ−３領域由来の配列によって合成し
た３０のペプチド（２６１Ａ−Ｆ，２６２Ａ−Ｆ，２７
２Ａ−Ｃ，２７４Ａ−Ｄ，２７５Ａ−Ｄ及び２７９Ａ，
Ｂ，Ｅ）で、３７℃で１時間コートした。各ペプチドの
免疫反応性は、８種のＨＣＶ血清パネル（パネルＩ）に
よって測定した。最も強い免疫反応性を示したペプチ
ド、Ｐｅｐ３、表４Ｄでは２７９Ａとして示されている
ものは、ペプチドVIIIＥと比較して２３．９％の相対免
疫反応性を持っていた（データは示さない）。Ｐｅｐ３
の免疫反応性を標準として用いて、他のＮＳ−３ペプチ
ドの相対免疫反応性を算出したところ（表４Ａ，４Ｂ，
４Ｃ及び４Ｄ）、そのほかの２９種すべてのペプチドは
辛うじて免疫反応性を示した。さらに驚くべきことに
は、３７マーのＰｅｐ３の配列は、ペプチド２６１Ｅ，
２６１Ｆ，２７４Ｂ，２７４Ｃ，２７４Ｄ，２７９Ｂ及
び２７９Ｅに完全に含まれているが、これら７種のより
長いペプチドは、その断片であるＰｅｐ３と比較した場
合、わずかに２．２％から３４％の範囲の相対免疫反応
性しか持たなかった。さらに驚くべきことは、Ｐｅｐ３
のＮ末端にわずか５残基が付加されただけで、ペプチド
の反応性が失われたことである（表４ＤのＰｅｐ３とペ
プチド２７９Ｂの相対免疫反応性を比較せよ）。 【００８１】 （Ｂ）ｐＨ調節によるペプチド免疫反応性の増強 それぞれ合成されて切断された産物である、３０種のＮ
Ｓ−３由来ペプチドのうち２９種の免疫反応性は辛うじ
て検出される程度ではあるが、いくつかのペプチドの立
体構造はｐＨ調節によって操作され、その免疫反応性が
増強される場合がある。 【００８２】Ｈ₂ Ｏ、ｐＨ４．０に１mg／mlの濃度で溶
解したペプチドを、希釈したＮａＯＨの添加によってｐ
Ｈ１１に滴定した。ｐＨ１１で５分後、ペプチド溶液の
ｐＨを希釈ＨＣｌで７．０まで下げた。このように処理
したペプチドの免疫反応性をｐＨ調節前の反応性と比較
した（表４Ｅ）。Ａ₄₉₂ nmで２倍から３倍の上昇が見ら
れた。幾つかの非反応性であった血清試料がｐＨ調節を
したペプチドと反応できた。例えば、血清試料１は２６
１Ｃと非反応性であるが、ｐＨ処理したペプチドで調べ
た場合には１４０１mAの吸光度を示した。ｐＨ調節によ
るペプチド２６１Ｃの相対免疫反応性は、標準のＰｅｐ
３（すなわち２７９Ａ）と比較して、３．２％から６
８．５％に上昇した。 【００８３】（Ｃ）ＨＦ切断後のペプチドの抽出条件の
免疫反応性に対する効果 ＨＦ切断後のペプチド免疫反応性に対する効果を調べる
ために、ＨＦ切断後のペプチド抽出条件を変化させた。
Ｐｅｐ３（すなわち２７９Ａ）はｐＨ２で酢酸で抽出し
たのに対して、Ｐｅｐ３′はｐＨ８で重炭酸アンモニウ
ムで抽出した。後者の抽出産物は、検査したすべての反
応性試料において反応性が減少した（表４Ｆ）。減少は
７７．６％から９９．３％の範囲であった。 【００８４】 実施例５ 酵素連結イムノソルベントアッセイによるＮＳ−５タン
パク質由来合成ペプチドに関する相対免疫反応性（％） ９６穴プレートのウェルを、ＨＣＶのＮＳ−５領域由来
の３種のペプチド（Ｐｅｐ４，Ｐｅｐ５及びＰｅｐ６と
呼ぶ）で、３７℃で１時間コートした。得られた結果
（表５）は、これらすべてのペプチドは、５種のＨＣＶ
陽性血清の特異的なグループと免疫反応性があることを
示している。 【００８５】 実施例６ 凝集検定によるＨＣＶ抗体の検出 本請求項中のペプチドは、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ固相法
に従って合成されたもので、低パーセントのグルタール
アルデヒド溶液存在下で、もしくはｍ−マレイミドベン
ゾイル−Ｎ−ヒドロキシサクシンイミドエステル（ｍ−
ｍａｌｅｉｍｉｄｏｂｅｎｚｏｙｌ−Ｎ−ｈｙｄｒｏｘ
ｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ ｅｓｔｅｒ；ＭＢＳ）等の
別の架橋剤を用いて、容易な架橋法によりウシ血清アル
ブミン（ＢＳＡ）に結合させることができる。 【００８６】上記のペプチド−ＢＳＡコンジュゲーショ
ンプロセスに基づいてコンジュゲートしたペプチドをｐ
Ｈ４．０で二重アルデヒド固定したヒトＯ赤血球上にと
りこませた。ペプチドコンジュゲートでコートした赤血
球を、それからＮａＢＨ₄ で処理して非特異的なタンパ
ク質の結合が起こらないようにした。ペプチドコンジュ
ゲートでコートした赤血球を次に、ＰＢＳで洗い、５％
標準ヒト血清−ＰＢＳ溶液でインキュベートした。この
ような工程を経た細胞を、次に、血清及び血漿の両方の
試料内のＨＣＶ抗体を検出するため、凝集検定に使用し
た。試料をサンプル希釈バッファーで１：１０に希釈
し、等量のインジケーターセルを希釈した試料に混合し
た。凝集パターンを１時間以内に整理し、アッセイの結
果は肉眼で読み取られた３パネルのよく特徴づけられた
血清変換者から連続的に採血し、上記のＨＣＶ受動赤血
球凝集検定（ｐａｓｓｉｖｅ ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎ
ａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）（ＰＨＡ）で、ペプチドVIII
Ｅ−ＢＳＡコンジュゲートと、ペプチドIIＨ−ＢＳＡコ
ンジュゲートを固相に使用してＨＣＶに対する抗体につ
いて試験した。その結果を、本ペプチドをベースとした
ＨＣＶＥＩＡ（フォーマットＣ、実施例１１に記載）及
びＣ１００をベースとしたＨＣＶＥＩＡ（表６）のＡ４
９２及びＳ／Ｃ比と比較した。 【００８７】簡単に述べると、本ペプチドをベースとし
たＥＩＡにおけるＡ４９２の増加（フォーマットＣ）が
現れる頃に、３パネルともＨＣＶ抗体がＰＨＡアッセイ
により検出され、ｒｃ１００をベースとしたＥＩＡはＨ
ＣＶＰＨＡの結果に比べ４〜８週の遅れがあった。 【００８８】実施例７ ＨＣＶペプチドでコートしたラテックス粒子を固相免疫
吸着剤として用いた凝集検定によるＨＣＶに対する抗体
の検出 前項の実施例で記載したペプチド−ＢＳＡコンジュゲー
ト工程を用いて結合させたペプチドVIIIＥ−ＢＳＡを、
ｐＨ９．５でラテックス粒子（０．４μサイズ）にとり
こませた。そのペプチドコンジュゲートでコートしたラ
テックス粒子を次に、ＢＳＡで処理して非特異的なタン
パク質の結合が起きないようにした。このようにコート
したラテックス粒子を、それから、ＨＣＶ抗体を検出す
るために凝集検定に使用した。試料をラテックス溶液
（０．５％）と１：１の比で混合した。凝集パターンは
１５分間で完了した。アッセイの結果は肉眼と顕微鏡検
査により読み取られた。よく特徴づけられた抗ＨＣＶポ
ジティブな血漿サンプルから連続的に希釈したサンプル
についての結果が表７にまとめてある。コーディング濃
度０．３mg／mLが、抗体検出に最適の感度を支えること
が見出された。特異性に対するコントロールとして正常
ドナーからのプールした血漿試料をペプチドVIII−ＢＳ
Ａコンジュゲートラテックスアッセイで試験したとこ
ろ、明らかにネガティブとされた。 【００８９】 実施例８ 免疫原／ワクチンの重要成分としての８量体ＨＣＶペプ
チド抗原の合成 低分子量マトリックスとなるコアを形成しているトリフ
ァンクショナルなアミノ酸（または類似アナログ）のシ
ーケンシャルな制限伸長の利用が、放射状に枝分かれし
た多量体ペプチド抗原系の形成の、根底にある基本的な
原理である。トリファンクショナルなアミノ酸のＢｏｃ
−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）もしくはジ−（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ
は、Ｎ^α−とＮ^ε−の両方のアミノ基が反応性末端とし
て利用できるので最も適している。例えばジ−（Ｂｏ
ｃ）−Ｌｙｓの第１レベルのカップリングにより、二価
のペプチド抗原としての反応性アミノ末端が２ケ所生じ
る。従ってジ−（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓとの第２，第３，第
４のステップをシーケンシャルに行うと、それぞれ４
価，８価，１６価のペプチド抗原が生産される。一例と
して、 〔Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−
Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇ
ｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｔｙ
ｒ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ
−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−
Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇ
ｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ〕₈ −Ｌｙｓ₄
−Ｌｙｓ₂−Ｌｙｓ 成る構造を持つ８量体ＨＣＶペプチドの免疫原を、我々
がモルモットの免疫処理に使用するプロトタイプの免疫
原として合成した。この８量体抗原は、小さなヘプタク
リジンのコア（＜２０％）を持ち、大部分（＞８０％）
が、コアマトリックスを囲んで層をなしている高密度の
均一なペプチド抗原により形成されている。このデザイ
ンは、従来のペプチド−キャリア−コンジュゲート（Ｐ
ＰＤやＫＬＨ等の大きなタンパク質キャリアと、その表
面にランダムで定まらない形で分布している低密度のペ
プチド抗原より成る）とは異なるものである。 【００９０】８量体ＨＣＶペプチドの免疫原の合成に当
たっては、Ｂｏｃ−アミノ酸樹脂の結合したベンズヒド
リルアミドとｔＢｏｃ化学を組み合わせて利用した。８
量体ヘプタリジンのコア樹脂は、エクストラ低ローディ
ング０．１４mmole/g ＭＢＨＡ（４−メチルベンズヒド
リルアミン；４−ｍｅｔｈｙｌ ｂｅｎｚｈｙｄｒｙｌ
ａｍｉｎｅ）樹脂上にジ−ｔ−Ｂｏｃ ＬｙｓをＢｉｏ
ｓｅａｒｃｈ９５００器で結合させることで調製した。
カップリングサイクル２回ごとにジ−（Ｂｏｃ）−Ｌｙ
ｓを用いて１回カップリングを行い次いで２つのキャッ
ピング反応（０．３Ｍアセチルイミダゾール／ＤＭＦジ
メチルホルムアミドを使用）を行った。最初のジ−（Ｎ
Ｈ₂ ）Ｌｙｓ−樹脂上に、さらに２回ジ−（Ｂｏｃ）−
Ｌｙｓをカップリングさせた後、合成８量体樹脂の置換
レベルをニンヒドリン試験により決定したところ、理論
的なカップリング率に基づいた計算から適当量の−ＮＨ
₂ 基があることが見出されたので、その後標準的なｔ−
Ｂｏｃ化学に従って予め定められたアミノ酸配列各々と
共に８量体ペプチド抗原の合成に使用した。 【００９１】酸に不安定なｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙ
ｌ；ｔ−Ｂｏｃ）をＮ−αアミノ酸の保護に使用した。
以下の機能的な側鎖保護基を使用した：Ｔｈｒ，Ｓｅ
ｒ，Ｇｌｕ及びＴｙｒにはｏ−ベンジルを；Ａｒｇには
Ｎ^δ−トルシを；ＨｉｓにはＢｏＭ（＝Ｂｏｃ−Ｎ^im−
ベンジルオキシメチル）を；ＬｙｓにはＮ^ε−ジクロロ
ベンジルオキシカルボニルを；ＣｙｓにはＳ−４−メチ
ルベンジルを；Ａｓｐにはｏ−シクロヘキシルを；Ｔｒ
ｐにはＣＨＯ基を使用した。次いでアミノ酸が配列に従
って付加された。その結果得られた８量体ペプチジル樹
脂を無水ＨＦにより切断した〔１０％（ｖ／ｖ）アニリ
ール存在下で０℃１時間〕。遊離してきた８量体抗原を
エーテルで２回洗い、酢酸で抽出した。それを凍結乾燥
して乾かし、免疫原として使用できるようにした。そう
した８量体免疫原のコンピューター画像を図１に示す。 【００９２】実施例９ エンベロープ／ＮＳ−１タンパク質由来の合成ペプチド
についての、エンザイムリンクしたイムノリルベントア
ッセイによる相対（％）免疫反応性 ９６ウェルプレートのウェルを２１の各ペプチド（２５
５Ａ−Ｃ；２４４Ａ，Ｂ；２５４Ａ−Ｃ；２４８Ａ−
Ｃ；２４７Ａ−Ｅ及び２４６Ａ−Ｅと命名されており、
ＨＣＶのエンベロープ／ＮＳ−１領域由来の配列で合成
されたもので１０mM ＮａＨＣＯ₃ バッファーｐＨ９．
５で５μｇ／mlを各ウェルごとに１００μｌずつ使用）
で３７℃１時間コートした。各ペプチドの免疫反応性
を、８名のＨＣＶ血清パネルにより測定した（パネル
１）。２１全てのペプチドがこの標準スクリーニングの
ＨＣＶパネル上での免疫反応性を示さなかった。しかし
ながら、ペプチド２５４Ｂはある１つのパネルメンバー
との弱い免疫反応性が見られ、さらに試験したところ、
アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）酵素活性
が上昇した（１００i.u.／Ｌ）抗ＨＣＶポジティブ（ペ
プチドVIIIＥとIIＨに対しポジティブ）なプラズマフェ
レシスドナー（ｐｌａｓｍａｐｈｅｒｅｓｉｓ ｄｏｎ
ｅｒ）由来のサンプルとも強く反応した。エンベロープ
／ＮＳ−１領域からのペプチドに対して反応するサンプ
ルパネルを選択するため、ＡＬＴレベルの上昇した抗Ｈ
ＣＶポジティブなプラズマフェレシスからの同様の９７
サンプルについて、ペプチド２５４Ｂを用いて試験を行
った。１つのサンプルが３．２１４の吸光度を示し、そ
れについで２．１８４を示すものも見られた。ペプチド
２５４Ｂと最も高い反応性を示すサンプル１７個を選
び、第３のパネル（パネルIII)を作成し、エンベロープ
／ＮＳ−１領域からの別の２０ペプチドの免疫反応性に
ついてスクリーニングを行った。ペプチド２５４Ｂをス
タンダードとして使用した時の相対（％）免疫反応性を
表８ａに示す。最も高い反応性を示す４ペプチド（２５
５ｃ（Ｐｅｐ７），２５４Ｂ（Ｐｅｐ８），２４７Ｂ
（Ｐｅｐ９）及び２４６Ｄ（Ｐｅｐ１０））に対する１
７サンプル各々の吸光度の個々の値を表８ｂに挙げる。 【００９３】４ペプチド各々に対してパネルIII のメン
バーに関して独特の免疫反応性パターンが観察された
（箱で囲んだ値を参照）ので、４ペプチドの全て、もし
くはそのアナログは、ＨＣＶ、特にエンベロープ／ＮＳ
−１関連タンパク質に対する抗体の検出とスクリーニン
グ用に考案されたイムノアッセイの開発に当たって、抗
原として利用できることがわかる。表８ｂに記載された
４ペプチドによって生じる、この“独特”だが“相補
的”な免疫反応性のパターンは、さらに、本ペプチドの
ＨＣＶ抗体検出用の抗体としての、ＨＣＶエンベロープ
／ＮＳ−１タンパク質に対する抗体の開発用の免疫原と
しての、そしてＨＣＶ感染の予防用のワクチンとしての
有用性を明示するものである。 【００９４】４ペプチド（Ｐｅｐ７，Ｐｅｐ８，Ｐｅｐ
９及びＰｅｐ１０）の全てがＨＣＶエンベロープ／ＮＳ
−１タンパク質の可変領域に由来するので、この４ペプ
チドの置換アナログの例を、表８ｃに示す。これは３種
の異なるＨＣＶ株由来のアミノ酸配列（一文字表記）の
情報に基づいている。 【００９５】パネルIII のサンプルのスクリーニングに
加えて、プラズマフェレシスのドナー（そのＡＬＴレベ
ルは上昇しているが、コア（例：ペプチドVIIIＥ）やＮ
Ｓ−４（例：ペプチドIIＨ）領域のＨＣＶスクリーニン
グＥＩＡとは反応しない）からのサンプルに対してもエ
ンベロープ／ＮＳ−１ペプチドを試験した。このサンプ
ルのうち６つは初期の血清変換サンプルと思われるもの
で１つまたはそれ以上のエンベロープ／ＮＳ−１ペプチ
ドに反応した（表８ｄ）。ＨＣＶＥＩＡに反応しないこ
れらのサンプルの吸光度の値はパネルIII のサンプルに
見られた値より低いものである。Ｐｅｐ７とＰｅｐ１０
の場合においては、その短いセグメント２２５Ｂ及び２
４６Ｃが、それぞれパネルIII のものと比較して高い免
疫反応性を与えた。 【００９６】 実施例１０ 免疫原／ワクチンの重要成分としての８量体ＨＣＶエン
ベロープ／ＮＳ−１ペプチドの合成 〔Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａ
ｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ｈｉ
ｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ
−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−
Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ
−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ〕₈ Ｌｙｓ
₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ（８量体Ｐｅｐ７）；〔Ｐｈｅ−Ｔｈ
ｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ
−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−
Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒ
ｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ
−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−
Ａｌａ〕₈ Ｌｙｓ₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ（８量体Ｐｅｐ８）；〔Ｖａｌ
−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−
Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａ
ｒｇ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａ
ｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−
Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ〕₈ Ｌｙｓ₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ
（８量体Ｐｅｐ９）及び〔Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａ
ｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｃｙ
ｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ
−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−
Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ａ
ｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌ
ｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ〕₈ Ｌｙ
ｓ₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ（８量体Ｐｅｐ１０），という構造
を持つ４種の８量体ＨＣＶエンベロープ／ＮＳ−１ペプ
チド免疫原を、実施例８に記載した一般的な化学的合成
法に従って各々合成し、我々が、モルモットやチンパン
ジーを免疫処理する際に免疫原として使用した。 【００９７】この８量体ペプチドを、混合液として健康
で実験に使用されたことのない動物に２５μｇ／混合液
／kg体重の薬量で皮内及び皮下の両方に注射する。その
際、２％ミョウバンを佐剤として使用する。最初の免疫
処理後、４ケ月間、月に一度の割合で、等量の薬剤でこ
の動物に二次免疫注射を行う。その動物から毎月採血
し、回収した免疫血清を、抗ＨＣＶエンベロープ／ＮＳ
−１免疫反応性についてモニターする。最後の免疫注射
後６ケ月してから、次いで、免疫処理したチンパンジー
に立証済の感染因子であるファクターVIIIの濃縮液を様
々な量（例：５０mL）で実験的に接種する。尚、ファク
ターVIIIはＨＣＶを含むことが知られており、以上の８
量体エンベロープ／ＮＳ−１ペプチドの混合液をＨＣＶ
感染の予防用ワクチンとして用いた時の効力を評価する
ために使用する。 【００９８】実施例１１ フォーマットＣを用いたペプチドをベースにしたエンザ
イムイム／アッセイ（ＥＩＡ）によるＨＣＶに対する抗
体の検出 合計２２１のよく特徴づけられた臨床標本を４グループ
（ａ）〜（ｄ）に分類し、代表的なＨＣＶペプチドをベ
ースにしたＥＩＡで試験した（プレートは、ペプチドII
Ｈ，Ｖ及びVIIIを各々５．３及び２μｇ／mLを含む混合
液をウェル当たり１００μｌ使用してコートした（フォ
ーマットＣ）。これは表Ｂに示すようにＨＣＶコア及び
非構造ペプチドの両方を含むものである）。 【００９９】 実施例１２ フォーマット１〜６を使用した、ペプチドをベースにし
たＨＣＶ ＥＩＡによるＨＣＶに対する抗体の検出 以下に記す５グループの血清標本： （ａ）アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）酵
素活性の上昇した（＞１００ｉ．ｕ．／Ｌ）プラズマフ
ェレシスドナー（ｎ＝３０）； （ｂ）ＡＬＴ酵素活性の上昇した（＞４５ｉ．ｕ．／
Ｌ）血液ドナー（ｎ＝１５）； （ｃ）慢性ＮＡＮＢＨ患者（ｎ＝３０）； （ｄ）別のウイルス感染者（ｎ＝１１）； （ｅ）自己免疫疾患者（ｎ＝９）；を本発明に記載した
代表的なＨＣＶペプチドをベースにしたＥＩＡキットで
分析した。その際プレートを以下のいずれかのフォーマ
ットでウェル当たり１００μｌでコートした： （ｉ）フォーマット１：ペプチドVIIIＥ，IIＨ及びＰｅ
ｐ１１（それぞれ０．５，３及び１μｇ／mL）； （ii）フォーマット２：ペプチドVIIIＥ及びＰｅｐ１１
（それぞれ０．５及び１μｇ／mL）； （iii)フォーマット３：ペプチドVIIIＥ，Ｐｅｐ１１及
びＰｅｐ８（それぞれ０．５，１及び１０μｇ／mL）； （iv）フォーマット４：ペプチドVIIIＥ及びＰｅｐ８
（それぞれ０．５及び１０μｇ／mL）； （ｖ）フォーマット５：ペプチドVIIIＥ，Ｐｅｐ１１及
びＰｅｐ１２（それぞれ０．５，１及び２μｇ／mL）； （vi）フォーマット６：ペプチドVIIIＥ及びＰｅｐ１２
（それぞれ０．５及び２μｇ／mL）。 【０１００】これらのキットは、コア、ＮＳ−４及びＮ
Ｓ−５（フォーマット１）、コア及びＮＳ−５（フォー
マット２，５及び６）、コア、ＮＳ−５及びＥＮＶ（フ
ォーマット３）そしてコア及びＥＮＶ（フォーマット
４）に相当する。 【０１０１】上の９５のよく特徴づけられたサンプルに
ついてフォーマット１〜６で試験した結果を表９に示
す。グループ（ａ）では、サンプルの（３０／３０）が
フォーマット１，２及び３に反応し；９０％（２７／３
０）がフォーマット４に反応し；９７％（２９／３０）
がフォーマット５及び６に反応したことが、その結果に
より示される。グループ（ｂ）及び（ｃ）では全てのサ
ンプルが６フォーマットの全てにポジティブであった。
グループ（ａ），（ｂ）及び（ｃ）については、実施例
１１に記載したフォーマットＣに反応することが示され
た。 【０１０２】グループ（ｄ）については３サンプルがフ
ォーマット１〜４に反応した。対照的に、これらのサン
プルはフォーマットＣに対してネガティブということが
示された。血清サンプル“８６”及び“１２４”は明ら
かにＰｅｐ１１の存在に対して反応していた。血清サン
プル“ＶＥＶ２５００”はフォーマット４及び５におい
てＰｅｐ８の存在によりポジティブということが示され
た。 【０１０３】グループ（ｃ）の血清サンプルは全て、フ
ォーマットＣを含む全てのフォーマットにネガティブで
あった。 【０１０４】 実施例１３ ランダム血液供与体に対する６ペプチド基盤ＨＣＶ Ｅ
ＩＡフォーマット（１−６）を用いた検査結果の比較 ランダム血液供与体試料（ｎ＝１００）はフォーマット
１−６に基づいて検査された。１００試料全てフォーマ
ット２，５及び６に関して陰性であった。試料１４は、
フォーマット１に於いて吸光度０．６８０であり、試料
３４は、フォーマット３，４に於いてそれぞれ吸光度
０．６０１及び０．５５１であった。平均吸光度及び標
準偏差の算定のために、＞０．５００の吸光値は解析か
ら除外された。表１０にフォーマット１−６に基づいた
１００試料の平均吸光度及び標準偏差を一覧にしてい
る。 【０１０５】 実施例１４ ＨＣＶ−反応性血清のサブタイピングに用いるＨＣＶ変
異株由来のペプチドアナログ ＥＮＶ及びＮＳ−１領域から得られた免疫反応性ペプチ
ドＰｅｐ７，Ｐｅｐ８，Ｐｅｐ９及びＰｅｐ１９、そし
て、ＨＣＶ株 ＨＣ−Ｊ１，ＣＤＣ／ＨＣＶ１，Ｈ，Ｈ
Ｃ−Ｊ４，ＨＣＶ−ＪＨ，ＨＣＶ−Ｊ，ＢＫ，ＨＣ−Ｊ
６及びＨＣ−Ｊ７は、表１１に従ったアミノ酸配列を持
つように合成された。免疫反応性ペプチドは、マイクロ
タイタープレートの各ウェルに５μｇ／mL溶液が１００
μＬずつ塗布されており、台湾、日本、ヨーロッパ、オ
ーストラリア、及び北アメリカからのＨＣＶ陽性血清を
分析し、そのＨＣＶ反応性から、例えばＨＣＶ−Ｊ１，
ＨＣ−Ｊ４，ＨＣ−Ｊ６及びＨＣ−Ｊ７といったサブタ
イプに分類するために用いられる。ＨＣＶの超変異領域
から得られたこれらのペプチドは、感染の原因となるＨ
ＣＶのサブタイプを識別するのに有用である。 【０１０６】 実施例１５ ＮＳ−５タンパク質由来合成ペプチドに対する免疫反応
性の比較 ９６穴プレートのウェルは、２３ペプチドの各々（２５
９Ａ−２５９Ｅ，２６０Ａ−２６０Ｃ，３０９Ａ−３０
９Ｃ、３１０Ａ−３１０Ｃ、３１１Ａ−３１１Ｃ、３１
２Ａ−３１２Ｃ及び３１４Ａ−３１４Ｃと称されてい
る）で３７°Ｃ１時間被膜されるが、これらはＮＳ−５
領域由来の配列に基づいて合成されており、ＮａＨＣＯ
₃ バッファーｐＨ９．５条件下、濃度５μｇ／mL、ウェ
ル当たり１００μＬになっている。各ペプチドの免疫反
応性は８メンバーＨＣＶ血清パネル（パネルＩ）によっ
て測定された。最大免疫反応性を持つペプチドはＰｅｐ
１１で、表１２に３０９Ｃとして示している。Ｐｅｐ１
１の免疫反応性をそのほかのＮＳ−５ペプチドの相対免
疫有効性を算出するために用いると、一連の３０９−３
１４のペプチドは実施例４のＰｅｐ４及びＰｅｐ５と同
等かそれ以上の反応性を持つことになる。Ｐｅｐ５がさ
らに１０残基（２５９ＥすなわちＰｅｐ１２）含むよう
に拡張すると、相対免疫有効性は、４７．６％から７
０．１％に増加する。 【０１０７】 実施例１６ ＮＳ−２タンパク質由来合成ペプチドの免疫反応性 ９６穴プレートにウェルは、ＨＣＶのＮＳ−２領域由来
の９合成ペプチドで３７℃１時間被膜された。その結果
（表１３）はペプチド２８９Ｂ（すなわちＰｅｐ１７）
がＡＬＴレベルの高くなった選択された抗ＨＣＶ陽性試
料と免疫反応性があることを示している。 【０１０８】 実施例１７ ＮＳ−３タンパク質由来合成ペプチドの初期ＨＣＶ感染
個体血清に対する免疫反応性 ９６穴プレートのウェルは、ＨＣＶのＮＳ−３領域由来
の合成ペプチド３１５Ｄ（すなわちＰｅｐ１８）で３７
℃１時間被膜された。この結果（表１４）は、ペプチド
３１５Ｄが、ＡＬＴレベルの高くなった血漿搬出供与体
由来のふたつの連なった試料と強く反応することを示し
ている。 【０１０９】 実施例１８ フォーマット７及び８を用いたペプチド基盤ＥＩＡによ
るＨＣＶ ＮＳ−１及びＥＮＶ領域に対する抗体の検出 ＡＬＴレベルの高くなった血漿搬出試料は典型的ＨＣＶ
ペプチド基盤ＥＩＡに関して、本発明に従い、（ｉ）Ｐ
ｅｐ１及びＰｅｐ１０Ｃ、それぞれ１０及び１０μｇ／
mL（フォーマット７，ＮＳ−１キット）、または、（i
i）Ｐｅｐ７及びＰｅｐ８、それぞれ１０及び１０μｇ
／mL（フォーマット８，ＥＮＶキット）で被膜されたプ
レートを用いて解析された。ＡＬＴレベルの高くなった
ＨＣＶ陽性試料に関する結果は表１５に示されており、
ＨＣＶ感染個体の部分集団はＮＳ−１及びＥＮＶタンパ
ク質に特有の領域に対する特異的体液性免疫応答を昂進
させていることを示唆している。 【０１１０】 実施例１９ ＨＣＶ抗原／ワクチンの構成物としての８量体ＨＣＶエ
ンベロープペプチドの置換アナログの合成 以下の構造を持つ８量体ＨＣＶエンベロープペプチドＰ
ｅｐ７，Ｐｅｐ８及びＰｅｐ１９の置換アナログ （ａ）〔Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａ
ｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｒ
ｇ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ
−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔ
ｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｉｌ
ｅ−Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ
−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−
Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−〕
₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−ＪＨより引用された配列を持つ
８量体Ｐｅｐ７のアナログ） （ｂ）〔Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｖ
ａｌ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｙ
ｓ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ
−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−
Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔ
ｒｐ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｖａ
ｌ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ
−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−
Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−〕
₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−Ｊ６より引用された配列を持つ
８量体Ｐｅｐ７のアナログ） （ｃ）〔Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｖ
ａｌ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｒ
ｇ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ
−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔ
ｒｐ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｖａ
ｌ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ
−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−
Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−〕
₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−Ｊ６より引用された配列を持つ
８量体Ｐｅｐ７のアナログ） （ｄ）〔Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｇｌ
ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ
−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａ
ｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅ
ｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ
−ＪＨより引用された配列を持つ８量体Ｐｅｐ８のアナ
ログ） （ｅ）〔Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｎ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌ
ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ
−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−
Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａ
ｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅ
ｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ
−Ｊ６より引用された配列を持つ８量体Ｐｅｐ８のアナ
ログ） （ｆ）〔Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌ
ｕ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ
−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−
Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍ
ｅｔ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−Ｊ７よ
り引用された配列を持つ８量体Ｐｅｐ８のアナログ） （ｇ）〔Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａ
ｌ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ
−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−
Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａ
ｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅ
ｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ
−Ｃｙｓ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（８量体Ｐｅｐ１９） （ｈ）〔Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａ
ｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａ
ｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ
−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−
Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａ
ｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅ
ｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ
−Ｃｙｓ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−ＪＨより引用され
た配列を持つ８量体Ｐｅｐ１９のアナログ） （ｉ）〔Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｎ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｉｌ
ｅ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｖａｌ
−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−
Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａ
ｒｇ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｖａ
ｌ−Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ
−Ｃｙｓ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−Ｊ６より引用され
た配列を持つ８量体Ｐｅｐ１９のアナログ） （ｊ）〔Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇ
ｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｉｌ
ｅ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｖａｌ
−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａ
ｒｇ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｉｌ
ｅ−Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ
−Ｃｙｓ−〕₈ Ｋ₄ Ｋ₂ Ｋ（ＨＣＶ−Ｊ７より引用され
た配列を持つ８量体Ｐｅｐ１９のアナログ） これら各々は実施例７に記述された一般的化学合成手順
に従っており、本発明に於けるモルモット及びチンパン
ジーの免疫時に抗原として用いられた。 【０１１１】これら８量体ペプチドは混合され、健康な
免疫されていない動物に皮内及び皮下注射（２％みょう
ばんをアジュバントとし、混合物当たり、体重１kg当た
り２５μｇ投与）された。最初の免疫化の後、４カ月の
間月に一度同じ投与量を与え、免疫を促進した。動物は
月に一度採血され、その免疫血清の抗ＨＣＶエンベロー
プ／ＮＳ−１免疫反応性がモニターされた。最後の投与
の後６カ月後に免疫化されたチンパンジーは、続いて、
様々な投与量（例えば５０mL）のＨＣＶを含むことが知
られている検査済み感染性ファクターIII 濃縮物を接種
され、これら８量体エンベロープペプチド混合物をＨＣ
Ｖ感染を防ぐためのワクチンとして用いる時の効果を評
価するが、最初にいくつかの血清学的／臨床学的マーカ
ーを評価し、続いてこれらの動物に於けるＮＡＮＢＨの
臨床学的徴候を観察する。 【０１１２】本発明は上述の実施例において例示されて
いるが、これは発明の範囲を制限するためのものではな
い。

【図面の簡単な説明】 【図１】８量体ペプチド免疫原のコンピューター生成構
造を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ｃ０７Ｋ 99:00 (31)優先権主張番号 ７１９８１９ (32)優先日 1991年６月24日 (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (72)発明者 バーバラ・ホセイン アメリカ合衆国ニューヨーク州11021，ニ ューヨーク，イースト・セブンティフィフ ス・ストリート 196

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 【請求項１】 以下の配列からなるグループから選択さ
   れたアミノ酸配列を持つペプチドを含むペプチド構成
   物。 （ａ）Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ− Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ１ （ｂ）Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ− Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ− Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｘ； Ｐｅｐ２ （ｃ）Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｓｐ− Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ− Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｘ； Ｐｅｐ３ （ｄ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ； Ｐｅｐ４ （ｅ）Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｓｎ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ− Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｘ； Ｐｅｐ５ （ｆ）Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｉｌｅ− Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ａｒｇ− Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｘ； Ｐｅｐ６ （ｇ）Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ− Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ− Ｔｙｒ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ− Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ７ （ｈ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ− Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ− Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ− Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ− Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ； Ｐｅｐ８ （ｉ）Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ− Ｘ； Ｐｅｐ９ （ｊ）Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ− Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ− Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ１０ （ｋ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ− Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｌａ− Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ− Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｘ； Ｐｅｐ１１ （ｌ）Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ− Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ− Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ− Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ− Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｘ； Ｐｅｐ１２ （ｍ）Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ− Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ− Ｓｅｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ− Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ； Ｐｅｐ１３ （ｎ）Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ− Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｘ； Ｐｅｐ１４ （ｏ）Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ− Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｘ； Ｐｅｐ１５ （ｐ）Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｔｒｐ− Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ− Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ− Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｘ； Ｐｅｐ１６ （ｑ）Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ− Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ− Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ− Ｇｌｙ−Ｘ； Ｐｅｐ１７ （ｒ）Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｌａ− Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ− Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ− Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｘ； Ｐｅｐ１８ （ｓ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ− Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ− Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ− Ｘ； Ｐｅｐ１９ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びアナログ、分節、
   混合物、複合体及びそれらの重合体である。 【請求項２】 以下のペプチドを含むような請求項１記
   載のペプチド構成物。 Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ− Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ− Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ− Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ａｌａ− Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ− Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ７ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びアナログ、分節、
   複合体及びそれらの重合体である。 【請求項３】 以下のペプチドを含むような請求項１記
   載のペプチド構成物。 Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ− Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ− Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ； Ｐｅｐ８ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びアナログ、分節、
   複合体及びそれらの重合体である。 【請求項４】 以下のペプチドを含むような請求項１記
   載のペプチド構成物。 Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ− Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ− Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ− Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ１０ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びアナログ、分節、
   複合体及びそれらの重合体である。 【請求項５】 以下のペプチドを含むような請求項１記
   載のペプチド構成物。 Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ− Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ− Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｘ； Ｐｅｐ１１ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びアナログ、分節、
   複合体及びそれらの重合体である。 【請求項６】 ペプチドVIIIＥが以下に示す配列である
   時ペプチドVIIIＥ及びＰｅｐ１１の混合物を含むペプチ
   ド構成物。 Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ− Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ− Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ； （VIIIＥ） Ｐｅｐ１１とは Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ− Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ａｒｇ− Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ− Ｔｈｒ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ− Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｘ； Ｐｅｐ１１ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項７】 請求項６の記載に加えさらに以下に示す
   配列を持つペプチドIIＨを含むペプチド構成物。 Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ− Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ− Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ− Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ− Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｘ； （IIＨ） ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項８】 請求項６の記載に加えさらに以下に示す
   配列を持つペプチドＰｅｐ８を含むペプチド構成物。 Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ− Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ− Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ； Ｐｅｐ８ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項９】 請求項６の記載に加えさらに以下に示す
   配列を持つペプチドＰｅｐ１２を含むペプチド構成物。 Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ａｌａ− Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｍｅｔ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ− Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｈｅ− Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ− Ａｒｇ−Ｘ； Ｐｅｐ１２ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂及びそれらのアナログ
   である。 【請求項１０】 ペプチドVIIIＥが以下に示す配列であ
   る時ペプチドVIIIＥ及びＰｅｐ８の混合物を含むペプチ
   ド構成物。 Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ− Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ− Ｇｌｎ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ− Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ− Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｘ； （VIIIＥ） Ｐｅｐ８とは Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ− Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ− Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ； Ｐｅｐ８ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項１１】 Ｐｅｐ７が以下に示す配列である時Ｐ
   ｅｐ７及びＰｅｐ８を含むなような請求項１記載のペプ
   チド構成物。 Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ− Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ− Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ− Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ａｌａ− Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ− Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ７ Ｐｅｐ８とは Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ− Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ− Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ− Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ− Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｘ； Ｐｅｐ８ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項１２】 Ｐｅｐ１が以下に示す配列である時Ｐ
   ｅｐ１及びＰｅｐ１０を含むような請求項１記載のペプ
   チド構成物。 Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｌａ− Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ− Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ− Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｖａｌ− Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ１ Ｐｅｐ１０とは Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ− Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ− Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ− Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ− Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｘ； Ｐｅｐ１０ ただしＸは−ＯＨまたは−ＮＨ₂ 及びそれらのアナログ
   である。 【請求項１３】 免疫分析手順に於いて請求項１記載の
   ペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の検
   出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１４】 免疫分析手順に於いて請求項６記載の
   ペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の検
   出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１５】 免疫分析手順に於いて請求項７記載の
   ペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の検
   出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１６ 免疫分析手順に於いて請求項８記載の
   ペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の検
   出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１７】 免疫分析手順に於いて請求項９記載の
   ペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の検
   出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１８】 免疫分析手順に於いて請求項１０記載
   のペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の
   検出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項１９】 免疫分析手順に於いて請求項１１記載
   のペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の
   検出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項２０】 免疫分析手順に於いて請求項１２記載
   のペプチド構成物を充分量用いたＨＣＶに対する抗体の
   検出法または、ＨＣＶ感染またはＮＡＮＢＨの診断法。 【請求項２１】 以下のペプチドから成るグループから
   選択された多量体ペプチドを含む抗原ペプチド。 〔Ｐｅｐｔｉｄｅ〕₁₆Ｌｙｓ₈ Ｌｙｓ₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ
   −Ｙ 〔Ｐｅｐｔｉｄｅ〕₈ Ｌｙｓ₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ−Ｙ 〔Ｐｅｐｔｉｄｅ〕₄ Ｌｙｓ₂ Ｌｙｓ−Ｙ 〔Ｐｅｐｔｉｄｅ〕₂ Ｌｙｓ−Ｙ ただし、Ｙは−ＯＨ₂ ，−ＮＨ₂ または機能基のある側
   鎖を持たないアミノ酸で、Ｐｅｐｔｉｄｅは以下から成
   るグループから選択されている。 （ａ）Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｌ
   ａ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｒｇ
   −Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−
   Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｓ
   ｅｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｔｙ
   ｒ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ
   −Ｍｅｔ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−
   Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａ
   ｓｎ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ； （ｂ）Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｖａ
   ｌ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ
   −Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−
   Ｍｅｔ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｔ
   ｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｒ
   ｐ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｖａｌ
   −Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−
   Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｇ
   ｌｙ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ； （ｃ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｖａ
   ｌ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｒｇ
   −Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−
   Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｓ
   ｅｒ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｒ
   ｐ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｖａｌ
   −Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−
   Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ａ
   ｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ； （ｄ）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｒ
   ｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ
   −Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−
   Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇ
   ｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓ
   ｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ
   −Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ； （ｅ）Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌ
   ｎ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ
   −Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−
   Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇ
   ｌｙ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓ
   ｐ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ
   −Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ａｌａ； （ｆ）Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌ
   ｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ
   −Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−
   Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｈ
   ｉｓ−Ａｒｇ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ａｓｐ−Ｍｅ
   ｔ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ
   −Ｔｈｒ−Ｌｅｕ； （ｇ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｓ
   ｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ
   −Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−
   Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｌ
   ｅｕ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−Ａｒ
   ｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
   −Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−
   Ｃｙｓ； （ｈ）Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓ
   ｎ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｖａｌ
   −Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−
   Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｖ
   ａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｒ
   ｇ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
   −Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−
   Ｃｙｓ； （ｉ）Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｓ
   ｎ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ
   −Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−
   Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａ
   ｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒ
   ｇ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｖａｌ
   −Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−
   Ｃｙｓ；ａｎｄ （ｊ）Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ａｓｎ−Ｇｌ
   ｙ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｒｐ−Ｉｌｅ
   −Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−
   Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
   ｌａ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ａｒ
   ｇ−Ｔｈｒ−Ｈｉｓ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−Ｍｅｔ−Ｉｌｅ
   −Ｖａｌ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｈｒ−Ｖａｌ−
   Ｃｙｓ．及びこれらのアナログ。