JPH05252928A

JPH05252928A - 葉たばこの発黴防止方法

Info

Publication number: JPH05252928A
Application number: JP8654692A
Authority: JP
Inventors: Sen Tagawa; 閃多川; Yutaka Nakamura; 裕中村; Hidenori Hara; 秀紀原; Junichi Miki; 淳一三木
Original assignee: Japan Tobacco Inc
Current assignee: Japan Tobacco Inc
Priority date: 1992-03-11
Filing date: 1992-03-11
Publication date: 1993-10-05

Abstract

(57)【要約】【目的】本発明は、たばこの香喫味に対する影響がな
く、かつ経済性及び作業生において有効な発黴防止方法
を提供することを目的とする。【構成】葉たばこを収穫し、空気乾燥工程で乾燥し、
乾燥後の葉たばこを使用時まで貯蔵するに際して、収穫
後の任意の時期に、バチルス属（Bacillus属）に属する
細菌を、任意の回数だけ、葉たばこ表面に接種する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は空気乾燥種の葉たばこに
おける発黴を防止する方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、空気乾燥種の葉たばこを乾燥或い
は貯蔵する間の発黴が問題となっている。この発黴は、
アスペルギルス属、ペニシリウム属、及びアルタナリア
属等に属する黴が空気乾燥種の葉たばこに寄生するため
に発生する。発黴の激しいたばこは、香喫味が劣化して
しまうので商品価値が下がり、また著しく劣化したもの
は廃棄せざるをえないので、年間における損害額が大き
い。従って、現在、発黴防止のために多大な労力及び費
用が費やされている。

【０００３】一般に、たばこの種類は、大きく分けて、
バーレー種、在来種及び黄色種の３つに分けられる。葉
たばこは、畑から収穫後、乾燥されるが、乾燥方法はた
ばこの種類によって異なる。黄色種に対しては強制乾燥
が行われるのに対し、バーレー種及び在来種、すなわち
空気乾燥種に対しては空気中での自然乾燥が行われる。

【０００４】空気乾燥は約４５日間行われ、乾燥期間
は、黄変期、褐変期及び中骨乾燥期の３期間に大別され
る。空気乾燥種のたばこを乾燥する場合は、急激な脱水
を防止するため、これら全期間に渡って、適度な湿度条
件を維持する必要がある。従って、ある程度の湿度が保
持されるために発黴しやすい。約１５日目頃から褐変期
に入るが、この褐変期には細胞が死滅するため、特に黴
が生えやすい。また、葉たばこの中でも中骨の部分は最
後まで水分が蒸発しないため、他の部分に比べて黴が生
えやすい。

【０００５】一方、乾燥した葉たばこは、耕作農家或い
は原料工場の倉庫内で貯蔵されるが、この貯蔵期間中に
吸湿して発黴する場合もある。

【０００６】現在、自然乾燥を行った場合の発黴を防止
する方法としては、乾燥過程における加温による相対湿
度の低下、貯蔵過程における吸湿防止用の貯蔵袋の使
用、また特に耕作農家においては葉たばこの表面の黴の
刷毛による除去、工場においては定期的に葉たばこを積
み替える等が行われている。しかし、加温により相対湿
度を低下させるには限界がある。また、刷毛による除去
或いは積み替え等の場合は、その作業が重労働であり、
かつ人間の手によって行われるため除去作業中にアレル
ギー症状を起こす等の問題がある。

【０００７】また、従来、乾燥過程において、殺菌剤の
散布或いは燻蒸剤の使用等も検討されたが、いずれもた
ばこの香喫味への悪影響及び農薬残留等の安全性の問題
などから使用できなかった。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の課題
は、たばこの香喫味への悪影響がなく、かつ経済性及び
作業性においても有効な、葉たばこの発黴防止方法を提
供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に、本発明者らは、収穫後から乾燥処理終了までの葉た
ばこに散布した場合に、この葉たばこ上で増殖する抗黴
性微生物を用いた防黴方法を検討すべく、葉たばこ乾燥
室、土壌、発黴した葉たばこから種々の微生物を分離
し、その防黴性、定着性について鋭意研究を重ねた。そ
の結果、バチルス属に属する細菌が高い防黴効果を示す
ことを見い出し、この知見に基づいて本発明を完成する
に至った。

【００１０】すなわち、本発明によれば、葉たばこを収
穫し、空気乾燥工程で乾燥し、乾燥後の葉たばこを使用
時まで貯蔵するに際して、収穫後の任意の時期に、バチ
ルス属（Bacillus属）に属する細菌を、任意の回数だ
け、葉たばこ表面に接種することを特徴とする葉たばこ
の発黴防止方法が提供される。

【００１１】本発明の方法は、空気乾燥工程で乾燥され
るたばこに対して適用される。すなわち、典型的には、
バーレー種及び在来種であるが、これに限らず、空気乾
燥されるものであれば、いずれの種類のたばこにも適用
され得る。

【００１２】以下、本発明を詳細に説明する。

【００１３】まず、本発明の発黴防止方法で使用する細
菌を培養する。

【００１４】本発明の発黴防止方法に使用する細菌とし
ては、バチルス属に属する細菌であればいずれも用いる
ことができるが、特にバチルス・アミロリクエファシエ
ンス（Bacillus amyloliquefaciens）が防黴効果が高く
好ましい。

【００１５】バチルス・アミロリクエファシエンス（Ba
cillus amyloliquefaciens）は、本菌体の菌学的性質
を、マニュアル・オブ・マイクロバイオロジカル・メソ
ッド（Manual of Microbiological Method）記載の方法
に準じて検討し、これを基礎として、バージェス・マニ
ュアル・オブ・デタミネーティブ・バクテリオロジー第
８版（Bergey's Manual of Determinative Bacteriolog
y 8th Edition ）に従って検索することにより同定する
ことができる。

【００１６】本菌体の菌学的性質を以下に示す。

【００１７】Ｉ．形態的性質１．顕微鏡的所見桿菌。０．９×４．０〜４．５μｍ、波状に連鎖、楕円
形の内生胞子形成、１細胞に１個、位置は中央、グラム
陽性、抗酸性陰性。２．培養上所見（１）平板培養不整形、上面偏平、微細顆粒を生ずる、表面網状で辺縁
は鋸状、灰色。（２）斜面培養生育旺盛、平滑、全面に拡がり辺縁は鋸状、やや灰色を
呈す。僅かにアンモニア臭い。（３）生育中程度、表面に白膜を生じる。濁り少ない。
沈殿少ない。

【００１８】ＩＩ．生理的性質（１）生育温度：１５〜４２℃、最適３０〜３７℃ （２）生育ｐＨ：ｐＨ３．５〜１０．０、最適６．５〜
７．５（３）酸素要求性：好気的（４）ゼラチンの液化：濾斗状に液化（５）リトマスミルク：酸性、ペプトン化（６）インドールの生成：陰性（７）硝酸塩の還元：陽性（８）澱粉の加水分解：陽性（９）メチルレッド反応：陰性（１０）フォーゲスブロスカウエル反応：陽性（１１）カタラーゼの生成：陽性（１２）ウレアーゼの生成：陰性（１３）食塩濃度と生育：７％まで生育（１４）ソディウムアザイドによる生育阻害：０．０２
％で生育しない（１５）リゾチームによる生育阻害：０．００１％で生
育しない（１６）サブロー寒天培地での生育：生育する（１７）サブロー液体培地での生育：生育する（１８）０ーＦテスト：発酵的（１９）オキシダーゼ活性：陽性（２０）クエン酸の利用：陽性（２１）レシチナーゼ活性：陰性（２２）チロシナーゼ活性：陰性（２３）レバンの生成：陽性（２４）カゼインの加水分解：陽性（２５）フェニルアラニンの脱アミノ反応：陰性（２６）酸を生成し、ガスを生成しない：グルコース、
アラビノース、キシロース、マニトールなお、本発明で使用できるバチルス・アミロリクエファ
シエンスは、財団法人発酵研究所より入手できる（寄託
番号ＩＦＯ１４１４１）。

【００１９】本発明に使用する細菌を培養する培地とし
ては、細菌培養用として公知の肉汁培地を用いることが
できる。しかしこれに限定されるものではなく、通常の
細菌の培地として使用されるものであればいずれの培地
を用いてもよい。

【００２０】本発明に使用する細菌を培養する培養条件
としては、温度が３０〜４２℃、ｐＨが６．０〜８．０
の範囲にあることが好ましい。より好ましくは温度３７
℃、ｐＨ７．０である。本発明に使用する細菌は好気的
であるため酸素が必要である。

【００２１】本発明に用いる細菌は、培養後期に芽胞を
形成するため、対数増殖期以降の芽胞を大量に形成した
時点で培養を打ち切り、用いることが好ましい。本発明
に用いる細菌は、芽胞が発芽した後の栄養細胞の状態で
防黴効果を示す。芽胞を大量に形成した時点では、栄養
細胞に加えて多量の芽胞が存在し、この芽胞もまた発芽
することにより栄養細胞となり効果を発揮する。従っ
て、この時点で用いるのが数量的観点から最も効果的で
ある。

【００２２】本発明の細菌を一定期間培養した後、これ
を遠心分離することにより集菌する。集菌した菌体を特
定の緩衝液に浮遊させて菌液を作製する。

【００２３】本菌体を懸濁させる緩衝液としては、水又
はゼーレンゼンのリン酸緩衝液を用いることが好まし
い。

【００２４】本菌体を緩衝液に懸濁する割合としては、
緩衝液１ｍｌ当たり１０⁹〜１０¹⁰個の菌体を懸濁する
ことが好ましい。

【００２５】本菌液を直ぐに防黴処理に使用しない場合
は、雑菌汚染を防止するため低温で保存するのが望まし
い。保存温度としては１〜５℃が好ましい。

【００２６】次に、上記の方法で得た菌体を用いて、葉
たばこの防黴処理を行う。

【００２７】まず、必要な菌量を含んだ上記菌液に、水
を加えて接種液を作製し、この接種液を葉たばこに均一
に噴霧散布することにより接種する。この菌種は、収穫
直後から貯蔵時の任意の時期に行えばよい。

【００２８】好ましい接種時期は、収穫直後、又は空気
乾燥工程の褐変期であるが、乾燥工程に入る直前、空気
乾燥工程の黄変期又は中骨乾燥期、乾燥工程終了直後、
貯蔵中の適当な時期に行ってもよい。

【００２９】本発明において用いられる葉たばこ１枚当
たりの表面積（表裏の合計）は、在来種の場合、４００
〜２０００ｃｍ²、バーレー種の場合、５００〜２５０
０ｃｍ²である。

【００３０】接種菌量は、葉たばこ１枚当たり１０⁵〜
１０⁸個、好ましくは１０⁷〜１０⁸個であり、散布に
必要な接種液量は、収穫直後及び乾燥初期の葉たばこに
ついては１枚当たり２〜３ｍｌ、乾燥中期以降のものに
ついては０．５〜１ｍｌである。従って上記菌体を２０
〜５０倍量の水に懸濁し、接種液を作製することが好ま
しい。

【００３１】このようにして作製した散布液を目的の葉
たばこに散布することにより効果的に発黴を防止するこ
とができる。

【００３２】

【実施例】以下本発明の実施例を説明する。

【００３３】なお、実施例１及び２において、葉たばこ
１枚当たりの表面積が１５００〜１８００ｃｍ²のバー
レー種を用いた。

【００３４】実施例１肉汁培地（肉エキスブイヨン：肉エキス１０ｇ、ペプト
ン１０ｇ、食塩１ｇ、蒸留水１リットル）にバチルス・
アミロリクェファシエンスＩＦＯ１４１４１を接種し、
３７℃で７２時間振盪培養した。この菌体を含む培地を
５，０００ｒｐｍで遠心し、菌体分離し、これをゼーレ
ンゼンのリン酸緩衝液に浮遊させて洗浄した。再度遠心
分離することにより集菌し、培養液の４０分の１量のゼ
ーレンゼンのリン酸緩衝液に再浮遊させて１ｍｌ当たり
１０⁹個の菌液を得た。

【００３５】上記の方法で得られた菌液２ｍｌに水道水
４８ｍｌを加えて２５倍に希釈し、５０ｍｌの接種液を
作製した。処理区として、この接種液を、乾燥後の葉た
ばこ５０枚に散布した。すなわち、葉たばこ１枚当たり
４×１０⁷個のバチルス・アミロリクェファシエンスを
散布したことになる。

【００３６】対照区として、前記葉たばこ５０枚に対
し、水道水５０ｍｌを散布した。

【００３７】両区を２５℃で２４時間放置後、水分含量
を１５％（ドライベース）に調整し、温度２５℃、湿度
８５〜９５％に調整した恒温恒湿箱に入れた。Aspergil
lusochraceus 、Penicillium species を試験管で斜面
培養して分生胞子を形成させ、試験管１本分（胞子量と
して約１０⁵個）の胞子を各区に散布した。

【００３８】これを２か月間貯蔵し、両区の葉たばこの
発黴状況を比較した。本発明処理の発黴に及す影響を下
記表１に示す。

【００３９】

【表１】処理区の一部に中骨沿いに若干の発黴が認められたが、
対照区と比較して発黴の抑制効果は高く、本処理による
発黴抑制効果は高いと判定できる。

【００４０】更に本処理がたばこの香喫味に及ぼす影響
について両区を比較した。前記処理区と対照区を手巻た
ばこに巻き上げ、所内パネルによる試喫を行った。１：
２点法により同一品の判別を行った結果を下記表２に示
す。

【００４１】

【表２】上記表２より、バーレー種を乾燥した後、葉たばこに本
発明の処理を施しても、たばこの香喫味に何等影響を及
ぼさないといえる。

【００４２】実施例２実施例１と同様の方法により得られた菌液を、水道水で
２０倍に希釈し、５×１０⁷個／ｍｌの接種液を調製し
た。

【００４３】収穫直後のバーレー種の葉たばこ１００枚
を、麻縄のより目に葉柄を差し込み、葉の背合わせと腹
合わせに交互となるように連編みした。

【００４４】試験区として、本接種液を上記連編みされ
た葉たばこに１枚当たり２ｍｌとなるように散布した。
すなわち、１枚当たり１０⁸個を散布したことになる。
対照区としては、葉たばこ１枚当たり２ｍｌの水道水を
散布した。

【００４５】上記両区をパイプハウス内で１４日間吊り
込んで黄変させ、その後、木造乾燥室内に吊り込み褐
変、更に中骨乾燥させるという、全行程４５日間の乾燥
処理に供した。本乾燥処理の開始後３０日目に発黴調査
を行った。

【００４６】更に乾燥処理終了後の葉たばこ（水分含量
約１２％（ドライベース））を２５℃、８５〜９５％に
調製した恒温恒湿箱に貯蔵し、１か月後に発黴調査を行
った。両発黴調査の結果を下記表３に示す。

【００４７】

【表３】上記表３より、収穫直後に処理を行うことにより、乾燥
期間中、並びに貯蔵中の発黴を防止できることがわか
る。

【００４８】

【発明の効果】本発明の発黴防止方法を用いれば、ま
ず、耕作農家においては、発黴除去作業の必要がなくな
り、また発黴品の廃棄量を減らすことができるので生産
量の低下を防止することができる。原料工場において
は、倉庫内での蔵置中における発黴防止管理の回数を減
らすことができ、かつ発黴による不良原料の廃棄量を減
らすことができるので、製造原価を下げることができ
る。更に発黴除去作業中にアレルギー症状を起こすこと
がなくなるので人体衛生面の向上も期待できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者三木淳一栃木県小山市大字出井1900 日本たばこ産業株式会社葉たばこ研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】葉たばこを収穫し、空気乾燥工程で乾燥
し、乾燥後の葉たばこを使用時まで貯蔵するに際して、
収穫後の任意の時期に、バチルス属（Bacillus属）に属
する細菌を、任意の回数だけ、葉たばこ表面に接種する
ことを特徴とする葉たばこの発黴防止方法。
【請求項２】バチルス属（Bacillus属）に属する細菌
がバチルス・アミロリクエファシエンス（Bacillus amy
loliquefaciens）であることを特徴とする請求項１記載
の葉たばこの発黴防止方法。