JPH05281187A - 液体および流動性溶液の微生物含量の迅速測定法およびこの方法を実施するための装置 - Google Patents
液体および流動性溶液の微生物含量の迅速測定法およびこの方法を実施するための装置Info
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- JPH05281187A JPH05281187A JP4298160A JP29816092A JPH05281187A JP H05281187 A JPH05281187 A JP H05281187A JP 4298160 A JP4298160 A JP 4298160A JP 29816092 A JP29816092 A JP 29816092A JP H05281187 A JPH05281187 A JP H05281187A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 生物電気化学槽において電流測定手段を用い
て液体の細菌含量を測定する方法であって、メディエー
ターの酸化状態や試料またはフィルターに含まれている
ことがある電子放出性物質等の干渉物質の影響を防止す
るものを提供する。 【構成】 メディエーターを最初に生物電気化学槽(1)
中で酸化した後、試料の細菌を含有する捕獲装置(11)と
接触させて、電極（101, 201）に第一の応答を生じさ
せ、当該細菌を殺してしまった後、再度、捕獲装置(11)
と接触させて、干渉物質による第二の応答を生じさせ、
これを第一の応答から差し引くことを特徴とする方法。
この方法を実行するための装置も提供される。
て液体の細菌含量を測定する方法であって、メディエー
ターの酸化状態や試料またはフィルターに含まれている
ことがある電子放出性物質等の干渉物質の影響を防止す
るものを提供する。 【構成】 メディエーターを最初に生物電気化学槽(1)
中で酸化した後、試料の細菌を含有する捕獲装置(11)と
接触させて、電極（101, 201）に第一の応答を生じさ
せ、当該細菌を殺してしまった後、再度、捕獲装置(11)
と接触させて、干渉物質による第二の応答を生じさせ、
これを第一の応答から差し引くことを特徴とする方法。
この方法を実行するための装置も提供される。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、生物電気化学槽を用い
る流体試料中の細菌活性の迅速測定に関する。更に具体
的には、本発明はかかる測定を行う方法であって、細菌
の応答をかなり増加させることができ、基底電流(base
current)によりおよび／または測定自体と相互作用する
ことがある物質によって生じる干渉を除くことができる
方法に関する。
る流体試料中の細菌活性の迅速測定に関する。更に具体
的には、本発明はかかる測定を行う方法であって、細菌
の応答をかなり増加させることができ、基底電流(base
current)によりおよび／または測定自体と相互作用する
ことがある物質によって生じる干渉を除くことができる
方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】液体および流動性溶液の細菌含量の測定
は、一般に食品産業、環境汚染の監視、産業廃棄物の監
視、臨床分析および医学的診断のような広い様々な分野
において特に重要である。
は、一般に食品産業、環境汚染の監視、産業廃棄物の監
視、臨床分析および医学的診断のような広い様々な分野
において特に重要である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】液体の細菌含量を測定
するのに現在用いられている標準的方法は、所定の環境
条件下および適当な培地中で試料を培養した後、細菌の
コロニーの計数を行うことにあるが、これらの方法の主
要な欠陥は、目に見えるコロニーを形成するには少なく
とも１８時間を要するという分析時間、およびコロニー
を個々に計数しなければならないことにある。
するのに現在用いられている標準的方法は、所定の環境
条件下および適当な培地中で試料を培養した後、細菌の
コロニーの計数を行うことにあるが、これらの方法の主
要な欠陥は、目に見えるコロニーを形成するには少なく
とも１８時間を要するという分析時間、およびコロニー
を個々に計数しなければならないことにある。
【０００４】近年提案された代替的分析方法には、試料
に存在する細菌の代謝活性の直接測定に基づき、適当な
メディエーターを用いて生物電気化学槽において電流測
定法により行われる生物電気化学型のものがある。
に存在する細菌の代謝活性の直接測定に基づき、適当な
メディエーターを用いて生物電気化学槽において電流測
定法により行われる生物電気化学型のものがある。
【０００５】細菌含量の迅速測定に生物電気化学槽を使
用することは、過去数年に亙り多くの研究者によって研
究されてきた。例えば、Appl. Microbiol. Biotechnol.
(1988) 28, 26およびJ. Appl. Bacteriol. (1988) 66,
49に記載の研究報告に言及されている。
用することは、過去数年に亙り多くの研究者によって研
究されてきた。例えば、Appl. Microbiol. Biotechnol.
(1988) 28, 26およびJ. Appl. Bacteriol. (1988) 66,
49に記載の研究報告に言及されている。
【０００６】生物電気化学的検出装置のもう一つの態様
は、欧州特許出願第２２１，６６３号明細書（生物電気
化学槽における微生物活性を測定する方法及び装置）；
第２１９，２４７号明細書（生物電気化学槽および関連
電極）；第２３８，３２２号明細書（生物電気化学槽の
メディエーター）；第３５２，１３８号明細書（生物電
気化学電極）に記載されている。記載されているシステ
ムの幾つかは、分析を行う前にフィルター上で細菌の濃
縮を行ない、他のシステムは槽の電極の特殊な形状に関
するものであり、更に他のシステムは、電子を測定電極
に伝達するのに用いられるメディエーターの特殊な組成
物に関するものである。
は、欧州特許出願第２２１，６６３号明細書（生物電気
化学槽における微生物活性を測定する方法及び装置）；
第２１９，２４７号明細書（生物電気化学槽および関連
電極）；第２３８，３２２号明細書（生物電気化学槽の
メディエーター）；第３５２，１３８号明細書（生物電
気化学電極）に記載されている。記載されているシステ
ムの幾つかは、分析を行う前にフィルター上で細菌の濃
縮を行ない、他のシステムは槽の電極の特殊な形状に関
するものであり、更に他のシステムは、電子を測定電極
に伝達するのに用いられるメディエーターの特殊な組成
物に関するものである。
【０００７】しかしながら、これら総ての既知のシステ
ムは、その装置を用いて得られる測定値がメディエータ
ーの酸化の状態、基底電流並びに試料および／またはフ
ィルターに含まれることがあるメディエーターへの電子
放出性物質との相互作用によって影響されることがある
という欠点を有する。
ムは、その装置を用いて得られる測定値がメディエータ
ーの酸化の状態、基底電流並びに試料および／またはフ
ィルターに含まれることがあるメディエーターへの電子
放出性物質との相互作用によって影響されることがある
という欠点を有する。
【０００８】
【課題を解決するための手段】それ故、本発明の主な目
的は、生物電気化学槽において電流測定手段を用いて細
菌含量を測定するシステムであって、既知技術のシステ
ムの欠点および不都合な点を克服することができる装置
を提供することにある。
的は、生物電気化学槽において電流測定手段を用いて細
菌含量を測定するシステムであって、既知技術のシステ
ムの欠点および不都合な点を克服することができる装置
を提供することにある。
【０００９】本発明の主な特徴によれば、細菌の活力と
成長を促進するのに必要な総てのイオンを含む適当な塩
溶液に溶解された生物電気化学槽の電子伝達メディエー
ターを、最初に、電極に適当な電位差が加えられている
測定槽内部に再循環させることによって、これを酸化す
る。メディエーターが動作電極と接触し完全に酸化さ
れ、電極間の対応する電流が一定水準に降下してしまっ
た後、試料に含まれる細菌を予め捕獲しておいたフィル
ターを回路に挿入し、メディエーターと細菌との間の接
触によって生じる応答を電極で検出して、記録し、この
時点でフィルターを再度回路から切り離して強力な殺生
物剤で洗浄し、細菌が殺されてしまった後、フィルター
をメディエーター回路に再度挿入し、メディエーターと
細菌と共にフィルター上に予め含まれていた任意の干渉
物質（フィルター自体を作り上げている物質を含む）と
の間で接触させることによって新たな応答を生じさせ
る。この装置によって提供される測定値は、前記の二つ
の応答の差によって構成されている。
成長を促進するのに必要な総てのイオンを含む適当な塩
溶液に溶解された生物電気化学槽の電子伝達メディエー
ターを、最初に、電極に適当な電位差が加えられている
測定槽内部に再循環させることによって、これを酸化す
る。メディエーターが動作電極と接触し完全に酸化さ
れ、電極間の対応する電流が一定水準に降下してしまっ
た後、試料に含まれる細菌を予め捕獲しておいたフィル
ターを回路に挿入し、メディエーターと細菌との間の接
触によって生じる応答を電極で検出して、記録し、この
時点でフィルターを再度回路から切り離して強力な殺生
物剤で洗浄し、細菌が殺されてしまった後、フィルター
をメディエーター回路に再度挿入し、メディエーターと
細菌と共にフィルター上に予め含まれていた任意の干渉
物質（フィルター自体を作り上げている物質を含む）と
の間で接触させることによって新たな応答を生じさせ
る。この装置によって提供される測定値は、前記の二つ
の応答の差によって構成されている。
【００１０】この方法では、測定値は、メディエーター
の酸化の状態によって変化する可能性のある追加の電流
による干渉が除かれ且つ試料またはフィルターに含まれ
ていることがあるメディエーターへの電子放出性物質に
より生じる可能性のあるすべての干渉が除かれているの
で、細菌含量のみに依存している。
の酸化の状態によって変化する可能性のある追加の電流
による干渉が除かれ且つ試料またはフィルターに含まれ
ていることがあるメディエーターへの電子放出性物質に
より生じる可能性のあるすべての干渉が除かれているの
で、細菌含量のみに依存している。
【００１１】下記の応用の例から一層明確になるよう
に、基底電流を制限し一定に保持することによって、応
答の選択性および水準をかなり増加させることができ
る。
に、基底電流を制限し一定に保持することによって、応
答の選択性および水準をかなり増加させることができ
る。
【００１２】対照電極の保護として適当な遮断膜を適用
して小さなイオンによる電流の通過を許容するとともに
この電極とメディエーターとの間の直接接触を防止して
当該電極によるメディエーターの還元を防止することに
より、メディエーターが酸化されてしまった後の基底電
流を極めて低い一定の値で安定化させることができる。
して小さなイオンによる電流の通過を許容するとともに
この電極とメディエーターとの間の直接接触を防止して
当該電極によるメディエーターの還元を防止することに
より、メディエーターが酸化されてしまった後の基底電
流を極めて低い一定の値で安定化させることができる。
【００１３】本発明のもう一つの目的および利点は、添
付の図面を参照した次の本発明の詳細な説明の中で一層
明確になるであろう。
付の図面を参照した次の本発明の詳細な説明の中で一層
明確になるであろう。
【００１４】図面について、特に図１について説明すれ
ば、本発明による流動性溶液の細菌含量を測定する装置
は、自体公知のやり方で電極を収容した生物電気化学槽
１を備えている。電極の間にはメディエーターを含む被
分析溶液が循環させられる。更に具体的には、該電極は
動作電極１０１と対照電極２０１から成り、動作電極１
０１は焼結グラファイトまたは他の導電性物質から作ら
れ、好ましくは前記の溶液に対して透過性である多孔性
ディスクから成ることが好ましく、対照電極２０１は典
型的には銀または塩化銀から成り、例えば槽の底へセリ
グラフ法によって印刷することができる。この電極は、
小さなイオンに対しては透過性であるが、試験において
用いられるメディエーターに対しては透過性でない特殊
な膜（遮断膜、図示せず）によって被覆するのが好都合
である。
ば、本発明による流動性溶液の細菌含量を測定する装置
は、自体公知のやり方で電極を収容した生物電気化学槽
１を備えている。電極の間にはメディエーターを含む被
分析溶液が循環させられる。更に具体的には、該電極は
動作電極１０１と対照電極２０１から成り、動作電極１
０１は焼結グラファイトまたは他の導電性物質から作ら
れ、好ましくは前記の溶液に対して透過性である多孔性
ディスクから成ることが好ましく、対照電極２０１は典
型的には銀または塩化銀から成り、例えば槽の底へセリ
グラフ法によって印刷することができる。この電極は、
小さなイオンに対しては透過性であるが、試験において
用いられるメディエーターに対しては透過性でない特殊
な膜（遮断膜、図示せず）によって被覆するのが好都合
である。
【００１５】２はメディエーターを収容する容器を表わ
している。このいわゆる「メディエーター」は、好まし
くは微生物から電子を受け取る比較的低い酸化還元電位
を有する物質から成り、可逆的電気化学特性を有し、化
学的に安定であり、非自動酸化性であり、通常は水性溶
液に可溶性である。本発明による方法の実施に用いられ
る典型的なメディエーターは、ナトリウムまたはカリウ
ムフェロシアニド、またはベンゾキノン、或いはそれら
の混合物である。
している。このいわゆる「メディエーター」は、好まし
くは微生物から電子を受け取る比較的低い酸化還元電位
を有する物質から成り、可逆的電気化学特性を有し、化
学的に安定であり、非自動酸化性であり、通常は水性溶
液に可溶性である。本発明による方法の実施に用いられ
る典型的なメディエーターは、ナトリウムまたはカリウ
ムフェロシアニド、またはベンゾキノン、或いはそれら
の混合物である。
【００１６】容器２は、チューブ３と遮断ソレノイド弁
４とを介して、蠕動ポンプ６の吸引側に接続したチュー
ブ５と連通している。ポンプ６の吐出側は、遮断ソレノ
イド弁８を有する枝別れしたライン７および遮断ソレノ
イド弁１０を有する循環ライン９と連通し、この弁はま
たアブソリュートフィルター１１の入口側と連通して試
料に含まれる細菌を保持し、濃縮するようになってい
る。フィルター１１は、それぞれの試験を行った後には
取り替えなければならないが、全細菌を保持するための
フィルターエレメントを有し、分析を行う試料がアブソ
リュートフィルターに直接吐出することができない場合
には、このエレメントの前にプレフィルターを取り付け
ることができる。
４とを介して、蠕動ポンプ６の吸引側に接続したチュー
ブ５と連通している。ポンプ６の吐出側は、遮断ソレノ
イド弁８を有する枝別れしたライン７および遮断ソレノ
イド弁１０を有する循環ライン９と連通し、この弁はま
たアブソリュートフィルター１１の入口側と連通して試
料に含まれる細菌を保持し、濃縮するようになってい
る。フィルター１１は、それぞれの試験を行った後には
取り替えなければならないが、全細菌を保持するための
フィルターエレメントを有し、分析を行う試料がアブソ
リュートフィルターに直接吐出することができない場合
には、このエレメントの前にプレフィルターを取り付け
ることができる。
【００１７】フィルター１１の出口は、遮断ソレノイド
弁１４を介して排出容器１５と接続しているチューブ１
３と一つの側で連通するチューブ１２と連通している。
他方の側で、チューブ１２は遮断ソレノイド弁１８を介
してチューブ１７と連通している。チューブ１７は、ま
た槽１の入口と連通している。槽１の出口は、チューブ
２４を介してポンプ６の吸引側と連通している。
弁１４を介して排出容器１５と接続しているチューブ１
３と一つの側で連通するチューブ１２と連通している。
他方の側で、チューブ１２は遮断ソレノイド弁１８を介
してチューブ１７と連通している。チューブ１７は、ま
た槽１の入口と連通している。槽１の出口は、チューブ
２４を介してポンプ６の吸引側と連通している。
【００１８】１９は、以下に更に詳細にその目的につい
て記載する予定の殺生物性液体の容器を表わす。殺生物
性物質としては、分析を行う細菌の菌株を殺すように設
計された物質であればよく、例えば次亜塩素酸ナトリウ
ム、ホルムアルデヒドおよび二酸化塩素を用いることが
できる。
て記載する予定の殺生物性液体の容器を表わす。殺生物
性物質としては、分析を行う細菌の菌株を殺すように設
計された物質であればよく、例えば次亜塩素酸ナトリウ
ム、ホルムアルデヒドおよび二酸化塩素を用いることが
できる。
【００１９】容器１９は、チューブ１６と遮断ソレノイ
ド弁２０を介して、アブソリュートフィルター１１の入
口側に接続している。
ド弁２０を介して、アブソリュートフィルター１１の入
口側に接続している。
【００２０】２１は、電極１０１および２０１からのデ
ーターを処理する電子回路を表わし、２２は結果を読み
取るディスプレイを表わし、２３はプリンターを表わ
し、これらは両方とも処理回路２１と接続している。
ーターを処理する電子回路を表わし、２２は結果を読み
取るディスプレイを表わし、２３はプリンターを表わ
し、これらは両方とも処理回路２１と接続している。
【００２１】本発明による方法を実施するときには、メ
ディエーターを含む溶液、栄養基質および適当な緩衝液
を、容器２に導入する。次いで、この装置のフロー回路
の弁１０および１８を閉じて、同時に枝別れした回路７
の弁８と容器２と接続した弁４を開いて、ポンプ６を作
動させる。この方法では、メディエーターを含む溶液
を、チューブ５、ポンプ６、チューブ７、ソレノイド弁
８、チューブ１７、槽１およびチューブ２４から成る回
路に導入して、循環するメディエーターが完全に酸化さ
れてしまうまでそこを再循環させる。同時に、分析を行
う試料の適当量をアブソリュートフィルター１１を通し
て濾過し、含まれている全細菌をこのフィルター内に保
持させる。
ディエーターを含む溶液、栄養基質および適当な緩衝液
を、容器２に導入する。次いで、この装置のフロー回路
の弁１０および１８を閉じて、同時に枝別れした回路７
の弁８と容器２と接続した弁４を開いて、ポンプ６を作
動させる。この方法では、メディエーターを含む溶液
を、チューブ５、ポンプ６、チューブ７、ソレノイド弁
８、チューブ１７、槽１およびチューブ２４から成る回
路に導入して、循環するメディエーターが完全に酸化さ
れてしまうまでそこを再循環させる。同時に、分析を行
う試料の適当量をアブソリュートフィルター１１を通し
て濾過し、含まれている全細菌をこのフィルター内に保
持させる。
【００２２】濾過が終了したならば、フィルター１１を
適当な溶液、例えばＮａ2ＨＰＯ4４０ｍＭ、ＮａＨ2Ｐ
Ｏ4２０ｍＭ、（ＮＨ4）2ＳＯ4７．６ｍＭおよびＮａＣ
ｌ２０ｍＭ（ｐＭ＝６．５）で洗浄した後、ソレノイド
弁１０および１８を開き、ソレノイド弁８を閉じて、メ
ディエーターフロー回路に挿入する。この段階中におい
て、ソレノイド弁１４および２０も閉じられる。それ
故、この段階中において、メディエーターはポンプ６か
らチューブ９までおよびソレノイド弁１０を介してアブ
ソリュートフィルター１１中へと流れ、後者からチュー
ブ１２、ソレノイド弁１８およびチューブ１７を介して
槽１へと流れ、そこでメディエーターは多孔性電極１０
１を通過して、対照電極２０１を通過した後、出口２４
に到達する。この方法では、メディエーターは、細菌と
良く接触した後、槽に戻る前にアブソリュートフィルタ
ーを通過するときに濾過を受けるので、細菌による槽の
汚染を回避することができる。フィルターを通してから
数秒以内に、装置の応答が電極１０１、２０１で検出さ
れ、記録される。次に、弁１０および１８を閉じること
によってフィルターを回路から切り離し、弁２０および
１４を開いた後、保存容器１９に含まれている殺生物性
溶液を通過させ、これを次に保存容器１５に排出する。
次いで、弁１４および２０を閉じて、フロー回路を弁１
０および１８を開くことにより回復し、これにより電極
に新たな応答を生じる。前記の２つの応答の差を自動的
に装置によって細菌含量の測定値へと変換する。
適当な溶液、例えばＮａ2ＨＰＯ4４０ｍＭ、ＮａＨ2Ｐ
Ｏ4２０ｍＭ、（ＮＨ4）2ＳＯ4７．６ｍＭおよびＮａＣ
ｌ２０ｍＭ（ｐＭ＝６．５）で洗浄した後、ソレノイド
弁１０および１８を開き、ソレノイド弁８を閉じて、メ
ディエーターフロー回路に挿入する。この段階中におい
て、ソレノイド弁１４および２０も閉じられる。それ
故、この段階中において、メディエーターはポンプ６か
らチューブ９までおよびソレノイド弁１０を介してアブ
ソリュートフィルター１１中へと流れ、後者からチュー
ブ１２、ソレノイド弁１８およびチューブ１７を介して
槽１へと流れ、そこでメディエーターは多孔性電極１０
１を通過して、対照電極２０１を通過した後、出口２４
に到達する。この方法では、メディエーターは、細菌と
良く接触した後、槽に戻る前にアブソリュートフィルタ
ーを通過するときに濾過を受けるので、細菌による槽の
汚染を回避することができる。フィルターを通してから
数秒以内に、装置の応答が電極１０１、２０１で検出さ
れ、記録される。次に、弁１０および１８を閉じること
によってフィルターを回路から切り離し、弁２０および
１４を開いた後、保存容器１９に含まれている殺生物性
溶液を通過させ、これを次に保存容器１５に排出する。
次いで、弁１４および２０を閉じて、フロー回路を弁１
０および１８を開くことにより回復し、これにより電極
に新たな応答を生じる。前記の２つの応答の差を自動的
に装置によって細菌含量の測定値へと変換する。
【００２３】図２は、横軸が時間を表わし、縦軸が電極
１０１，１０２におけるμＡで表わした電流を表わして
いる線図を示している。時間１から時間２までの線図の
第一の部分は、メディエーター液体の酸化のための下降
段階を表わしている。時間２から時間３間での部分(a)
は、生菌を有するフィルターを挿入した後の電極におけ
る第一の応答パラメーターを表わしている。時間３から
時間４まで、殺生物剤で洗浄して、時間４で洗浄したフ
ィルターを挿入する。(b)は、電極における生菌による
ものでなくフィルター上に存在する還元性物質の応答パ
ラメーターを表わす。差（a-b)は、試料の細菌含量の応
答を表わす。この差は、２１で適当に処理され、次いで
２２および２３において通常の方法で表示される。
１０１，１０２におけるμＡで表わした電流を表わして
いる線図を示している。時間１から時間２までの線図の
第一の部分は、メディエーター液体の酸化のための下降
段階を表わしている。時間２から時間３間での部分(a)
は、生菌を有するフィルターを挿入した後の電極におけ
る第一の応答パラメーターを表わしている。時間３から
時間４まで、殺生物剤で洗浄して、時間４で洗浄したフ
ィルターを挿入する。(b)は、電極における生菌による
ものでなくフィルター上に存在する還元性物質の応答パ
ラメーターを表わす。差（a-b)は、試料の細菌含量の応
答を表わす。この差は、２１で適当に処理され、次いで
２２および２３において通常の方法で表示される。
【００２４】前記の装置を用いて得られる応答の幾つか
を、適当な媒質中で各種の濃度に希釈した個々の菌株に
ついて下記に揚げるが、この装置によって得られる応答
を、（通常のプレート−計数法を用いて測定した）フィ
ルター上の細菌の総量とともに示しているものである。
を、適当な媒質中で各種の濃度に希釈した個々の菌株に
ついて下記に揚げるが、この装置によって得られる応答
を、（通常のプレート−計数法を用いて測定した）フィ
ルター上の細菌の総量とともに示しているものである。
【表１】
【００２５】本発明の別の態様では、試料の濾過の後
に、フィルターを適当な培養条件下で所定の時間インキ
ュベーションし、次いで回路に挿入して測定を行うこと
ができるようにする。これにより装置の感度を実質的に
増加させることが可能であり、更に、特定の培養環境お
よび媒質を採用することによって、前記の装置を所定の
菌株に選択的にすることができる。
に、フィルターを適当な培養条件下で所定の時間インキ
ュベーションし、次いで回路に挿入して測定を行うこと
ができるようにする。これにより装置の感度を実質的に
増加させることが可能であり、更に、特定の培養環境お
よび媒質を採用することによって、前記の装置を所定の
菌株に選択的にすることができる。
【００２６】本発明は、記載されたおよび例示された態
様に制限されるものではなく、特許請求の範囲に実質的
に記載されているように、本発明の思想の最も広い範囲
内にあるあらゆる変更および修正を包含するものであ
る。
様に制限されるものではなく、特許請求の範囲に実質的
に記載されているように、本発明の思想の最も広い範囲
内にあるあらゆる変更および修正を包含するものであ
る。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明による方法で実施する為の装置の略図。
【図２】図１による装置の測定電極で検出されるシグナ
ルを例示する略図。
ルを例示する略図。
１ 生物電気化学槽 ２ メディエーター収容容器 １１ フィルター １５ 排出容器 １９ 殺生物性液体容器 ２１ 電子回路 ２２ ディスプレイ ２３ プリンター １０１ 動作電極 ２０１ 対照電極
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 フランコ アイオルフィ イタリア国、 ジェノバ、 コルソ ペロ ーネ 11番地
Claims (9)
- 【請求項１】 生物電気化学槽において電流測定手段を
用いて液体の細菌含量を測定する方法であって、メディ
エーターを最初に槽中で酸化した後、試料の細菌を含有
するフィルターと接触させて、電極に第一の応答を生じ
させ、当該細菌を殺してしまった後、最後にフィルター
と再度接触させて、干渉物質による第二の応答を生じさ
せ、これを第一の応答から差し引くことを特徴とする方
法。 - 【請求項２】 メディエーターが細菌を生かしておくの
に必要な総てのイオンを含む塩溶液に溶解されている、
請求項１に記載の方法。 - 【請求項３】 生物電気化学槽の対照電極が、小さなイ
オンを透過するが微生物の代謝活性の電流測定法による
検出に用いられる従来のメディエーターには不透過性で
ある膜で保護されている、請求項１または２に記載の方
法。 - 【請求項４】 生物電気化学槽の動作電極が、焼結グラ
ファイトまたは他の多孔性の導電性物質から成る、請求
項１または２に記載の方法。 - 【請求項５】 分析を行う試料の濾過を、アブソリュー
トフィルターを用いて行い、これを、次に洗浄して、メ
ディエーターを酸化した後に測定回路に挿入する、請求
項１または２に記載の方法。 - 【請求項６】 測定回路にフィルターを挿入する前に、
フィルターに保持された細菌を、適当な培養条件下にて
インキュベーションを行う、請求項５に記載の方法。 - 【請求項７】 請求項１〜６のいずれか１項に記載の生
物電気化学槽において電流測定手段を用いて液体の細菌
含量を測定する方法であって、メディエーターを含む溶
液の槽回路中への導入；メディエーターが完全に酸化さ
れてしまうまでの溶液の循環；アブソリュートフィルタ
ーによる試料の分離濾過；フィルターの洗浄；フィルタ
ーの槽回路中への挿入；第一の電流測定による応答の検
出；殺生物剤を用いるフィルターの更なる洗浄；フィル
ターの回路中への再度の挿入；第一の応答から差し引か
れる第二の電流測定による応答の検出；得られたデータ
ーの細菌含量の測定値への転換、の段階を有して成る方
法。 - 【請求項８】 前記の請求項のいずれか１項に記載の方
法を実施する装置であって、生物電気化学槽；槽の出口
を槽の入口に接続する第一のフロー回路；この回路中で
メディエーター液体を循環させる手段；槽の出口をアブ
ソリュートフィルターの入口に接続し、このフィルター
の出口を槽の入口に接続する前記の第一のフロー回路と
並列な第二のフロー回路；前記の第一のまたは前記の第
二のフロー回路を交互に循環させるための弁手段；前記
の第一のフロー回路と連通して、一定量のメディエータ
ー溶液を供給するように設計されたメディエーター液体
の保存容器；前記のアブソリュートフィルターと連通し
て、殺生物性液体をその中に導入させるように設計され
た殺生物性液体の保存容器；および生物電気化学槽の電
極の出力に接続され、前記の電極によって供給される電
気測定によるデーターを処理するデーター処理回路を有
して成る装置。 - 【請求項９】 殺生物性液体をアブソリュートフィルタ
ーに再循環して使用できるようにされている請求項８に
記載の装置。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT91A000150 | 1991-06-18 | ||
| ITGE910150A IT1253176B (it) | 1991-11-20 | 1991-11-20 | Metodo per la determinazione rapida del contenuto di microorganismi nei liquidi e soluzioni fluide,ed apparecchiatura per l'attuazione di tale metodo. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05281187A true JPH05281187A (ja) | 1993-10-29 |
Family
ID=11354152
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4298160A Pending JPH05281187A (ja) | 1991-11-20 | 1992-10-12 | 液体および流動性溶液の微生物含量の迅速測定法およびこの方法を実施するための装置 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5348862A (ja) |
| EP (1) | EP0543090B1 (ja) |
| JP (1) | JPH05281187A (ja) |
| AT (1) | ATE132908T1 (ja) |
| AU (1) | AU654197B2 (ja) |
| CA (1) | CA2079301A1 (ja) |
| DE (1) | DE69207561T2 (ja) |
| ES (1) | ES2082301T3 (ja) |
| IT (1) | IT1253176B (ja) |
| ZA (1) | ZA926506B (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002330752A (ja) * | 2001-05-08 | 2002-11-19 | Sanden Corp | 微生物数測定装置 |
| JP2008220372A (ja) * | 2007-03-12 | 2008-09-25 | Ali Spa | 消費者向けの流体および半流体食品を製造し供給する機械と方法 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6391577B1 (en) | 1999-03-03 | 2002-05-21 | Susan R. Mikkelsen | Rapid electrochemical assay for antibiotic and cytotoxic drug susceptibility in microorganisms |
| FR2792338B1 (fr) | 1999-04-15 | 2001-08-10 | France Etat | Procede et dispositif de determination de l'existence d'une activite biologique de micro-organismes |
| US7144496B2 (en) * | 2000-11-02 | 2006-12-05 | Pall Corporation | Biological fluid analysis device |
| US7238496B2 (en) * | 2002-08-06 | 2007-07-03 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Rapid and automated electrochemical method for detection of viable microbial pathogens |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4246343A (en) * | 1979-05-02 | 1981-01-20 | University Of Virginia And National Aeronautics & Space Administration | Microbial detection and enumeration method and apparatus |
| US4264728A (en) * | 1979-08-17 | 1981-04-28 | The United States Of America As Represented By The Administrator Of The National Aeronautics And Space Administration | Indirect microbial detection |
| US4517291A (en) * | 1983-08-15 | 1985-05-14 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Biological detection process using polymer-coated electrodes |
| US4614716A (en) * | 1984-12-14 | 1986-09-30 | Rohrback Technology Corporation | Filter cell for electrochemically measuring enzyme concentrations |
| GB8523630D0 (en) * | 1985-09-25 | 1985-10-30 | Pena Ltd Paul De | Bioelectrochemical cell measurement |
| GB8523631D0 (en) * | 1985-09-25 | 1985-10-30 | Pena Ltd Paul De | Bioelectrochemical cell |
| EP0238322B1 (en) * | 1986-03-19 | 1992-02-26 | Paul De La Pena Limited | Mediators for bioelectrochemical cells |
| GB8817421D0 (en) * | 1988-07-21 | 1988-08-24 | Medisense Inc | Bioelectrochemical electrodes |
-
1991
- 1991-11-20 IT ITGE910150A patent/IT1253176B/it active IP Right Grant
-
1992
- 1992-08-14 EP EP92113870A patent/EP0543090B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-14 AT AT92113870T patent/ATE132908T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-08-14 DE DE69207561T patent/DE69207561T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-08-14 ES ES92113870T patent/ES2082301T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-08-18 AU AU21122/92A patent/AU654197B2/en not_active Ceased
- 1992-09-21 US US07/947,477 patent/US5348862A/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-09-28 CA CA002079301A patent/CA2079301A1/en not_active Abandoned
- 1992-10-12 JP JP4298160A patent/JPH05281187A/ja active Pending
-
1993
- 1993-05-12 ZA ZA926506A patent/ZA926506B/xx unknown
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002330752A (ja) * | 2001-05-08 | 2002-11-19 | Sanden Corp | 微生物数測定装置 |
| JP2008220372A (ja) * | 2007-03-12 | 2008-09-25 | Ali Spa | 消費者向けの流体および半流体食品を製造し供給する機械と方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5348862A (en) | 1994-09-20 |
| ITGE910150A1 (it) | 1993-05-20 |
| AU2112292A (en) | 1993-05-27 |
| ITGE910150A0 (it) | 1991-11-20 |
| EP0543090B1 (en) | 1996-01-10 |
| IT1253176B (it) | 1995-07-10 |
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| DE69207561T2 (de) | 1996-06-05 |
| CA2079301A1 (en) | 1993-05-21 |
| ZA926506B (en) | 1993-12-23 |
| ATE132908T1 (de) | 1996-01-15 |
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| AU654197B2 (en) | 1994-10-27 |
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