JPH05304929A - 液状または流動状の食品 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 腸内フロ−ラの異常を改善する作用を有する
液状または流動状の食品を提供する。 【構成】 （Ａ）ウシラクトフェリンと、（Ｂ）少なく
とも０．０１％（重量）の水溶性の難消化性糖類、少な
くとも０．５％（重量）の牛血清アルブミン、少なくと
も０．５％（重量）の大豆蛋白質、鉄換算で少なくとも
１０ｍｇ／ｌの鉄剤のいずれか、またはこれらの任意の
混合物、とを含有する液状または流動状の食品。 【効果】 ヒトまたは動物の異常な腸内フロ−ラの細菌
構成を改善し、未熟児、新生児、幼児、老人、または手
術後の患者などの消化機能の低下したヒトの栄養食とし
て用いられると共に、継続的に使用することにより病原
菌に対する感染防御機能を高め、胃から大腸に至る消化
管において病原菌に起因する下痢、感染症の予防、およ
び治療に効果を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、腸内フローラ改善に
有効な液状または流動状の食品に関するものである。さ
らに詳しくは、この発明は、腸内フローラのアンバラン
スによって引き起こされるヒトおよび動物の疾病、特に
液状または流動状の食品を主食として摂取せざるをえな
いヒト、例えば経腸栄養を投与される患者、人工乳で哺
育される未熟児または乳児等で頻繁に発生する下痢およ
び感染症の治療と予防に有効な食品に関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】動物の腸内フロ−ラ（腸内菌叢）の構成
は、環境および食餌内容が安定であり、かつ宿主が健康
である限りほとんど一定している。しかし、この腸内フ
ローラの生態系は、宿主の年齢、疾病、微生物感染、ス
トレス、栄養成分、薬物投与等種々の要因により変動
し、時には異常な腸内フロ−ラが形成され、宿主の健康
に悪い影響を及ぼす原因となる。

【０００３】腸内フロ−ラを構成する常在細菌は、宿主
との関係から３群に分類されている。すなわち、第I群
は、正常な腸内フロ−ラで最優勢の細菌で宿主と共生的
関係にある細菌群である。第II群は、動物の出生後、最
初に出現し一度最優勢のフロ−ラを構成するがまもなく
減少し、以後中程度にとどまる細菌群である。第III群
は、腸内フロ−ラの中では少数派に属し、宿主の防御機
構を破って日和見感染を起こして病原性を発揮すること
のある細菌群である（光岡知足著、腸内菌叢の分類と生
態、５１−５２頁、食生活研究会発行、１９８６年）。

【０００４】第I群に属する菌種は、ビフィドバクテリ
ウム属に属する微生物（以下ビフィドバクテリウムと記
載する）、バクテロイデス属に属する微生物（以下バク
テロイデスと記載する）、ユウバクテリウム属に属する
微生物（以下ユウバクテリウムと記載する）等の嫌気性
細菌であり、動物種によってはラクトバチルス属（以下
ラクトバチルスと記載する）に属する微生物がこれに含
まれる。ビフィドバクテリウムとラクトバチルスは代表
的な有用細菌であり、宿主の健康に有用な細菌といわれ
ている。

【０００５】第II群に属する菌種は、エンテロバクテリ
アッセ−属に属する微生物（以下エンテロバクテリアッ
セ−と記載する）、ストレプトコッカス属に属する微生
物（以下ストレプトコッカスと記載する）等であり、宿
主の健康状態が悪化した時に増加する傾向がある。

【０００６】第III群に属する菌種は、病原株のエンテ
ロバクテリアッセ−属に属する微生物（以下病原エンテ
ロバクテリアッセ−と記載する）、スタフィロコッカス
属に属する微生物（以下スタフィロコッカスと記載す
る）、クロストリジウム属に属する微生物（以下クロス
トリジウムと記載する）であり、宿主にとって有害細菌
である。

【０００７】動物の健康状態を維持するためには、腸内
のビフィドバクテリウムとラクトバチルスを高い菌数レ
ベルに保持すると共に、病原エンテロバクテリアッセ
−、ストレプトコッカス、スタフィロコッカス、クロス
トリジウム等の有害細菌の増加を抑制し、低い菌数に保
持することが重要である。腸内フロ−ラの構成を正常に
維持または改善するためには、通常、抗生物質や、ラク
チュロ−ス、フラクトオリゴ糖等のビフィドバクテリウ
ム増殖因子、あるいは酸菌、ビフィドバクテリウム、エ
ンテロコッカス、クロストリジウム等の生菌製剤が投与
される。

【０００８】一方、乳中のラクトフェリンは感染防御作
用を有することが知られており、すでに調製粉乳に添加
されている。また、このラクトフェリンは歯牙や、消化
管細胞等への病原菌付着阻止効果があり、病原菌付着阻
止剤およびそれを含有する飲食品等への利用が開示され
てもいる（特開平３−２２０１３０号公報）。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、抗生物
質を使用した場合、腸内の有用菌・有害菌の別なく影響
を受け、ある菌株は薬剤耐性になり、また食品中への薬
剤の残留およびＲ因子による薬剤耐性の伝達の問題が惹
起することから、抗生物質の使用がきびしく規制される
ようになった。一方、ビフィドバクテリウム増殖因子お
よび生菌製剤に関しては、実験室レベルでは一定の効果
が認められているが、ヒト、または動物の飼育での応用
では必ずしも一定の効果が得られないことが多い。この
原因は、実際の飼育では腸内および外界の微生物学条件
が異なり、また環境条件が複雑であり、生菌製剤の場合
には使用される菌種、生菌量、飼料中での安定性、消化
管での生残性または定着性等に問題が残されているため
である。特に、使用菌種は動物の種および年齢によって
異なり、有効な菌株の選択は極めて難しい課題である。
ビフィドバクテリウム増殖因子は、理想的には腸内で
のビフィドバクテリウムだけの栄養基質となる物質であ
り、経口投与によってビフィドバクテリウムの増殖を促
進し、その結果、有害菌を抑制する。しかし、ビフィド
バクテリウム増殖因子および生菌製剤の投与は、直接有
害菌を抑制するわけではなく、間接的な効果を期待する
もので効力は微弱で速効性はない。また、ビフィドバク
テリウム増殖因子の効果に関しては、宿主の腸内にビフ
ィドバクテリウムが存在しなければ効果がなく、他の細
菌の基質になり得ないという保証もなく、ビフィドバク
テリウムの菌数が少なければ優勢に増殖するまで長時間
を必要とする。更に、ビフィドバクテリウム増殖因子は
低分子で、腸内容物の浸透圧を高めるため水分含量が増
加し、下痢等の副作用を有するものがある。

【００１０】一方、ラクトフェリンの抗菌活性に関して
は、試験管内の実験では大腸菌（エッシェリヒア・コ
リ）を中心にエンテロバクテリアッセ−、ストレプトコ
ッカス、ビブリオ属に属する微生物（以下ビブリオと記
載する）、シュ−ドモナス属に属する微生物（以下シュ
−ドモナスと記載する）、キャンジダ属に属する微生物
（以下キャンジダと記載する）等に抗菌活性を示すこと
が知られている。この抗菌活性は主に鉄を結合していな
いアポラクトフェリンで認められるが、鉄飽和ラクトフ
ェリンでは、その作用が大幅に低下する。また、エンテ
ロバクテリアッセ−、ストレプトコッカス、スタフィロ
コッカス、ビブリオ、シュ−ドモナスなど、動物の腸内
に存在する細菌に属する菌株のうち、ラクトフェリンに
非感受性である多くの菌株が存在することが知られてい
る［アーノルド等、インフェクション・アンド・イムニ
ティー（Arnold, R.R. et al;Infection and Immunit
y)、第28巻、893-898 ページ、１９８０年；牛島広治
等、感染症学雑誌、第６５巻、第１号、５４−６０頁、
１９９０年；および特開平３−１８１４２１号公報）。

【００１１】ラクトフェリンの生体内での生理活性に関
しては、無菌マウスを用いた大腸菌付着防止作用の試験
において、無菌マウスに病原性大腸菌を経口投与し、次
にウシラクトフェリン（１ｍｇ／０．２ｍｌ／日）を経
口投与し、その後マウスを解剖して摘出した腸管をホモ
ゲナイズし、菌数を計数したところ、ウシラクトフェリ
ン非投与群に比べて検出される病原性大腸菌の菌数が低
いことを開示している（前記特開平３−２２０１３０号
公報）。病原性大腸菌の付着に対するウシラクトフェリ
ンの影響については、田瓜等（第２５回日本無菌生物ノ
−トバイオロジ−学会総会、抄録第２２頁、１９９２
年）も報告している。その結果によれば、鉄不飽和ウシ
ラクトフェリン（１０ｍｇ／ｍｌ）含有飲料水を経口投
与した場合、無菌マウスに定着した毒素性大腸菌の腸管
粘膜付着阻止作用が認められる。

【００１２】このように、ウシラクトフェリンは無菌マ
ウス腸管への病原性大腸菌の付着防止作用を有すること
が知られているが、動物の腸内フローラを改善する作用
は知られていない。この発明の発明者等が同様の試験を
行った結果においても、通常の食餌を与える限り、飲料
水に添加したウシラクトフェリンには消化管内容物中の
大腸菌数を減少させる効果は全く認められなかった。

【００１３】ラクトフェリン添加乳の効果に関しては、
低出生体重児に６．５ｍｇ／１００ｍｌの濃度でラクト
フェリン添加乳を授乳した場合、糞便中の総菌数に占め
るビフィドバクテリウムの割合が高くなる傾向を示し、
スタフィロコッカスの検出率は低い傾向を示したことが
知られている（第３２回日本未熟児新生児学会講演抄録
集第８６頁、１９８７年）。同様に、低出生体重児に１
００ｍｇ／１００ｍｌの濃度でラクトフェリン添加乳を
授乳した場合、糞便中の総菌数に占めるビフィドバクテ
リウムの割合は高くなる傾向を示し、総菌数に占めるエ
ンテロバクテリアッセ−とクロストリジウムの構成比率
が低下する傾向のあったことが知られている（周産期医
学、第１９巻、第４号、第１２５−１２９頁、１９８９
年）。しかし、これらの報告には同時にエンテロバクテ
リアッセ−、クロストリジウム、スタフィロコッカス、
ストレプトコッカスの糞便中の菌数は、ラクトフェリン
添加乳の授乳期間中、ほとんど変化しないことも示され
ている。母乳中のラクトフェリンは１００〜５００ｍｇ
／１００ｍｌの濃度で含まれ特に初乳に多い。前述の文
献は母乳と同等の濃度でラクトフェリンを添加しても、
飛躍的には腸内フロ−ラが改善されないことを報告して
いる。また、育児用ミルクにウシラクトフェリンを添加
し、新生児に授乳しても腸内フロ−ラはほとんど何の影
響も受けないことも指摘されている［バルマー等、アー
カイブス・オブ・ディジーズ・イン・チャイルドフード
（Balmer, S.E. et al; Archives of Disease in Child
hood)第64巻、1685-1690 ページ、１９８９年］。即
ち、母乳と同一の濃度でラクトフェリンを乳中添加して
も有害細菌の細菌数の絶対値を低下させることはできな
い。 一方、幼若動物、未熟児、または新生児の発育初
期の腸内フロ−ラは、エンテロバクテリアッセ−、クロ
ストリジウム、スタフィロコッカス、ストレプトコッカ
ス等の有害細菌が優勢で、その細菌数の高い異常な腸内
フロ−ラを構成することが知られており、下痢および感
染症を惹起する原因になると考えられている。また、各
種疾患のため液状または流動状の食品しか摂取できない
患者、または人工乳だけで哺乳される乳児でも腸内フロ
−ラは有害細菌が高くなり、下痢および感染症を惹起す
る原因になると考えられている。

【００１４】このように液状または流動状の食品しか摂
取できない病人および幼若動物の疾病は経済的にも社会
的にも深刻な問題で、腸内フロ−ラの異常を改善するた
めの安全で有効な方法および腸内フロ−ラの異常を予防
する手段の開発が切望されているにもかかわらず、従来
公知の手段には多くの制約があった。

【００１５】この発明は、以上の通りの事情に鑑がみて
なされたものであり、液状または流動状の食品しか摂取
できない病人および幼若動物における腸内フロ−ラの異
常を改善ないしは予防するための安全で有効な手段を提
供することを目的としている。

【００１６】

【課題を解決するための手段】この発明の発明者等は、
上記の課題を解決するため、腸内フロ−ラの異常を改善
する作用を有する液状または流動状の食品を開発すべく
鋭意研究を行った結果、驚くべきことにウシラクトフェ
リンと各種の物質との組合わせは、生体内（腸管内）で
は試験管内と全く異なる作用を示すことを見出した。即
ち、試験管内では作用を示さないラクトフェリン濃度で
あっても、他の物質と組合わせて液状または流動状の食
品として摂取した場合、通常の動物（無菌動物ではない
動物）およびヒトの腸内フローラを格段に改善する作用
を有することを発見し、この発明を完成した。

【００１７】即ち、この発明は、（Ａ）ウシラクトフェ
リンと、（Ｂ）少なくとも０．０１％（重量）の水溶性
の難消化性糖類、少なくとも０．５％（重量）の牛血清
アルブミン、少なくとも０．５％（重量）の大豆蛋白
質、鉄換算で少なくとも１０ｍｇ／ｌの鉄剤のいずれ
か、またはこれらの任意の混合物、とを含有する液状ま
たは流動状の食品を提供する。

【００１８】以下、この発明の構成およびその好ましい
態様について詳しく説明する。

【００１９】なお、以下の説明において、百分率は、検
出率を除き特に断りのない限り重量による値である。

【００２０】この発明に使用する水溶性の難消化性糖類
は、本願出願人が既に出願した発明（特開平２−２２２
６５９号公報）に記載の方法により製造することができ
る（参考例１）。また、難消化性糖類の一種であるラク
チュロースは、市販品を用いるか、あるいは本願出願人
が既に出願した発明（特公昭５２−２９８４号公報）に
記載の方法により製造することもできる（参考例２）。

【００２１】この発明の食品は、腸内フロ−ラの改善に
有効な液状または流動状の食品であり、特にこれらの食
品を主食としても摂取できるように構成されている。摂
取時に液状または流動状の形態をとる食品であればいず
れの食品でも可能であり、牛乳、加工乳、乳清飲料等の
通常の液状食品、溶解することにより育児用ミルク、飼
料用ミルク、経腸栄養剤等に使用される粉末であっても
よい。経腸栄養剤としては、普通流動食、ブレンダ−
食、濃厚流動食等の完全流動食、または低蛋白流動食、
低脂肪流動食、低コレステロ−ル流動食、低ナトリウム
流動食、治療乳等の特殊流動食であってもよく、経口ま
たは経管により投与される。完全流動食は蛋白質、脂
肪、糖質、ミネラル、ビタミンがバランスよく配合さ
れ、特殊流動食は目的に応じて栄養素の配合が調整され
る。この発明に使用するウシラクトフェリン、難消化性
糖類、牛血清アルブミン、大豆蛋白質および鉄剤はいず
れも水溶性であるため、使用時に溶解して利用できる。
この他、ウシラクトフェリンを殺菌処理して添加する場
合、加熱による失活を防止するため、例えば溶解後ｐＨ
を酸性に調整し殺菌することができ、そのままあるいは
ｐＨを再調整することもでき、または凍結乾燥、噴霧乾
燥して粉末にすることもできる。育児用ミルク、飼料用
ミルク、経腸栄養剤等で脂肪を含有する粉末を製造する
場合には、たとえば、水相と油相を別々に調製し、乳化
剤、安定剤を添加し、均一に混合し、ホモゲナイザ−で
均質化し、濃縮し、乾燥し中間製品粉末を製造し、この
中間製品粉末にウシラクトフェリン、難消化性糖類、牛
血清アルブミン、大豆蛋白質、鉄剤その他の製品原料を
添加し、均一に混合して最終製品を製造することもでき
る。難消化性糖類および鉄剤は加熱による変性がほとん
どないため、製造工程のどの段階でも添加することがで
きる。腸内フロ−ラの改善に有効な添加量は、最終製品
中の濃度で、ウシラクトフェリン０．１％以上、難消化
性糖類０．０１−２％、牛血清アルブミン０．５−５
％、大豆蛋白質０．５−５％、鉄剤は鉄として１０−７
０ｍｇ／ｌである。

【００２２】次に試験例を示してこの発明の作用効果を
詳しく説明する。 （試験例１）まず、ウシラクトフェリンの生体内（腸管
内）における作用を調べるため、新生児の初期感染時期
および未熟児の腸内フローラ（田中吾朗、治療学、第１
４巻、第５号、５９４−５９７頁、１９８５年）に近似
した異常な腸内フローラを安定して保有する動物を作成
した。

【００２３】５週齢のＳＰＦマウス（ＳＬＣ）Ｂａｌｂ
／ｃ雌１０匹を、５匹ずつ２群に分けて糞食防止ネット
を入れたケージに入れ、１群を通常の固形食で１週間飼
育し、次に牛乳のみを自由摂取させて１週間飼育した。
他の１群を対照として常時固形食だけを与えて飼育し
た。尚、両群とも水を自由に摂取させた。

【００２４】各マウスの新鮮糞便を経時的に採取し、光
岡の方法（「腸内細菌の世界」、叢文社、１９８０年。
以下常法と記載する）に従って糞便中の有害細菌数を測
定した。

【００２５】その結果、糞便中のエンテロバクテリアッ
セ−、ストレプトコッカス、スタフィロコッカス、クロ
ストリジウムの細菌数は固形食飼育マウスの場合、それ
ぞれ対数値で、６．２±０．２、６．１±０．２、５．
２±０．３、７．０（検出限界）以下であるのに対し
て、牛乳飼育マウスの場合、それぞれ９．０±０．２、
８．２±０．２、８．１±０．２、９．８±０．９（検
出率６０％）であった。糞便中のこれらの細菌数は、飼
育の条件を変更しない限り数週間にわたりほぼ安定に維
持されていた。これらの結果から、牛乳で飼育すること
により、固形食で飼育したマウスに比べて有害細菌が１
００〜１０００倍以上多い異常な腸内フローラを、安定
して長期間保有するマウス（以下牛乳飼育マウスと記載
する）を作成することが可能となった。

【００２６】次に、ウシラクトフェリン添加乳による腸
内フローラの改善効果を試験した。 （試験例２）ウシラクトフェリンを０％、０．１％、
０．５％、１％、２％、５％、または７．５％の割合で
牛乳に添加し、滅菌した飲水瓶に分注し、試験例１で作
成した牛乳飼育マウスに、飲水瓶から経口的に自由摂取
させた。新鮮な糞便を経時的に採取し、糞便中の有害細
菌数を常法により測定した。０．１％以上のウシラクト
フェリンの投与によって、糞便中の有害細菌数は急激に
低下し、投与２日以降安定して低い水準に維持された。
１〜５％ウシラクトフェリン投与群の糞便中のエンテロ
バクテリアッセ−は、固形食飼育マウスの糞便中の細菌
数の水準近くまで低下し、クロストリジウムの細菌数は
検出限界以下に低下した。７．５％ウシラクトフェリン
投与群では、５％ウシラクトフェリン投与群と差異が認
められなかった。

【００２７】この結果から０．１％以上、望ましくは１
〜５％のウシラクトフェリンを含有する牛乳の経口投与
により、異常な腸内フローラを保有する動物の糞便中の
有害細菌数を短期間に低下させ、異常な腸内フローラを
改善する作用があることが判明した。尚、鉄飽和ラクト
フェリンおよび鉄不飽和ラクトフェリンについても同じ
試験を行ったが、腸内フローラを改善する同様の作用が
あることが判明した。

【００２８】次に、食物繊維または難消化性糖類が腸内
フロ−ラに影響を及ぼすことが知られている（印南敏、
及び桐山修八編：「食物繊維」２４２−２６１頁、第一
出版株式会社、１９８９年）ので、これらの物質をウシ
ラクトフェリンと併用した場合の相乗作用について述べ
る。 （試験例３）参考例１と同一の方法で製造したコンニャ
ク由来のグルコマンナンの加水分解物０．０１〜２％と
２％ウシラクトフェリンを牛乳に添加し、滅菌した飲水
瓶に分注し、試験例１で作成した牛乳飼育マウスに、飲
水瓶から経口的に２週間自由摂取させた。２週間目の新
鮮便を採取し、糞便中の腸内フロ−ラを常法により分析
し、細菌数を測定した。

【００２９】その結果を表１に示した。０．０１〜２％
グルコマンナンの加水分解物と２％ウシラクトフェリン
とを組み合わせて投与した場合、糞便中の有害細菌は低
下し、２％ウシラクトフェリン単独投与の場合よりさら
に低い水準に維持された。特に、グルコマンナン加水分
解物を０．１−１％の濃度範囲で２％ウシラクトフェリ
ンと併用すると糞便中の有害細菌はさらに低い水準に低
下し、優れた相乗的効果が認められた。

【００３０】

【表１】

【００３１】（試験例４）参考例２と同一の方法で製造
したラクチュロース６．０１〜５％と、２％ウシラクト
フェリンを牛乳に添加し、滅菌した飲水瓶に分注し、試
験例１で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲水瓶から経
口的に２週間自由に摂取させた。２週間目の新鮮便を採
取し、常法に従って糞便中の腸内フロ−ラを分析した。

【００３２】その結果を表２に示した。ラクチュロ−ス
は０．０１〜２％の範囲で、２％ウシラクトフェリンと
併用すると、マウス糞便中の有害細菌を相乗的に低下さ
せた。しかし、ラクチュロ−スは２％より高い濃度では
下痢を引き起こすため０．０１〜２％の範囲でウシラク
トフェリンと併用することが望ましく、腸内フロ−ラを
より改善する効果があることが判明した。

【００３３】

【表２】

【００３４】次に、腸内フローラ改善作用を有するその
他の物質をスクリーニングするために行った試験例を示
す。 （試験例５）各種蛋白質（牛血清アルブミン、大豆蛋白
質、カゼイン、卵アルブミン、またはリゾチーム）を最
終濃度５％、および各種鉄化合物を鉄換算で最終濃度７
０ｍｇ／ｌの割合で牛乳に添加し、試験例１で作成した
牛乳飼育マウスに、自由摂取させた。新鮮な糞便を経時
的に採取し、直ちにＤＨＬ寒天培地で大腸菌群の細菌数
を測定した。

【００３５】その結果、牛血清アルブミン、大豆蛋白質
およびクエン酸第一鉄ナトリウムを、各々単独で投与し
た場合にも、糞便中の大腸菌群の細菌数は、減少の程度
は異なるものの、ラクトフェリン投与の場合とほぼ同様
の傾向を示しながら減少した。この結果から牛血清アル
ブミン、大豆蛋白質および鉄剤にはマウスの腸内フロー
ラを改善する作用があることが判明した。一方、代表的
な蛋白質であるカゼイン、卵アルブミン、および抗菌蛋
白質であるリゾチーム等には生体内でまったく効果が認
められ無かった。

【００３６】そこで、以下の試験例では牛血清アルブミ
ン、大豆蛋白質、あるいは鉄化合物をウシラクトフェリ
ンと併用した場合の相乗効果について述べる。 （試験例６）ウシラクトフェリン２％と牛血清アルブミ
ン（シグマ社製）０．１〜７．５％を牛乳に添加し滅菌
した飲水瓶に分注し、試験例１で作成した牛乳飼育マウ
ス５匹に、飲水瓶から経口的に２週間自由に摂取させ
た。２週間目の新鮮便を採取し、常法に従って糞便中の
腸内フロ−ラを分析した。

【００３７】その結果を表３に示した。牛血清アルブミ
ン０．５〜５．０％の範囲でウシラクトフェリン２％と
併用すると、ウシラクトフェリン２％だけの場合と比較
して、有害細菌のエンテロバクテリアッセ−およびスタ
フィロコッカスが相乗的に低下した。従って、牛血清ア
ルブミンをウシラクトフェリンと併用する場合には、牛
血清アルブミン０．５〜５．０％が有効であることが判
明した。

【００３８】

【表３】

【００３９】（試験例７）ウシラクトフェリン２％と大
豆蛋白質（商標。「フジプロＣＬ」、不二製油社製）
０．１〜７．５％を牛乳に添加し滅菌した飲水瓶に分注
し、試験例１で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲水瓶
から経口的に２週間自由に摂取させた。２週間目の新鮮
便を採取し、常法に従って糞便中の腸内フロ−ラを分析
した。

【００４０】その結果を表４に示した。大豆蛋白質０．
５〜５．０％の範囲でウシラクトフェリン２％と併用す
ると、ウシラクトフェリン２％だけの場合と比較して、
有害細菌のエンテロバクテリアッセ−およびスタフィロ
コッカスが減少した。大豆蛋白質７．５％では不溶物が
少量析出し、飲水瓶がめずまりしたため、効果は見られ
なかった。従って、大豆蛋白質をウシラクトフェリンと
併用する場合には、大豆蛋白質０．５−５．０％が有効
であることが判明した。

【００４１】

【表４】

【００４２】（試験例８）ウシラクトフェリン２％とク
エン酸第一鉄ナトリウム（エーザイ社製）５０〜１５０
０ｍｇ／ｌ（鉄として５〜１５０ｍｇ／ｌ）を牛乳に添
加し、滅菌した飲水瓶に分注し、試験例１で作成した牛
乳飼育マウス５匹に、飲水瓶から経口的に２週間自由に
摂取させた。２週間目の新鮮便を採取し、常法に従って
糞便中の腸内フロ−ラを分析した。

【００４３】その結果を表５に示した。クエン酸第一鉄
ナトリウム１００〜７００ｍｇ／ｌ（鉄として１０〜７
０ｍｇ／ｌ）の範囲でウシラクトフェリン２％と併用す
ると、ウシラクトフェリン２％だけの場合と比較して、
有害細菌のエンテロバクテリアッセ−およびスタフィロ
コッカスが減少した。クエン酸第一鉄ナトリウム５０ｍ
ｇ／ｌまたは１５００ｍｇ／ｌの濃度では有害細菌のエ
ンテロバクテリアッセ−およびスタフィロコッカスが増
加し効果は見られなかった。従って、鉄化合物をウシラ
クトフェリンと併用する場合には、鉄として１０〜７０
ｍｇ／ｌの濃度範囲が有効であることが判明した。

【００４４】

【表５】

【００４５】次に、ラクトフェリンはｉｎ ｖｉｔｒｏ
で有用細菌であるビフィドバクテリウムの生育を促進す
ることが知られている（児玉明彦：日本小児科学会雑
誌、第８７巻、６号、１０００〜１０１３頁、１９８３
年。Ｐｅｔｓｃｈｏｗ，Ｂ．Ｗａｎｄ Ｔａｌｂｏｔ
ｔ，Ｒ．Ｄ．：Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃ
ｈ， ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．２，２０８−２１３，１９
９１）ので、ウシラクトフェリンと難消化性糖類、牛血
清アルブミン、大豆蛋白質、または鉄化合物との腸内フ
ロ−ラ改善に対する相乗的効果に関し、腸内フロ−ラの
有用細菌であるビフィドバクテリウムとラクトバチルス
におよぼす影響を調べた。 （試験例９）牛乳にウシラクトフェリン２％、ウシラク
トフェリン２％と難消化性糖類、牛血清アルブミン、大
豆蛋白質、クエン酸第一鉄ナトリウムをそれぞれ試験例
３、４および６〜８で最も効果のあった濃度で添加し、
滅菌した飲水瓶に分注し、試験例１で作成した牛乳飼育
マウス５匹に、飲水瓶から経口的に２週間自由に摂取さ
せた。２週間目の新鮮便を採取し、常法に従って糞便中
のビフィドバクテリウムとラクトバチルスを測定した。

【００４６】その結果を表６に示した。ウシラクトフェ
リン２％だけを添加した場合と比較して、ウシラクトフ
ェリン２％にラクチュロ−ス０．１％、コンニャク由来
のグルコマンナン加水分解物０．１％、牛血清アルブミ
ン５％、大豆蛋白質２．５％、またはクエン酸第一鉄ナ
トリウム７００ｍｇ／ｌ（鉄として７０mg／ｌ）をそれ
ぞれ添加した場合、いずれもビフィドバクテリウムとラ
クトバチルスが増加した。従って、難消化性糖類、牛血
清アルブミン、大豆蛋白質、または鉄化合物をウシラク
トフェリンと併用することによって、有用細菌であるビ
フィドバクテリウムとラクトバチルスが増加し、有害細
菌が減少し、一層腸内フロ−ラが改善されることが判明
した。

【００４７】牛乳の他、市販の乳清飲料、育児用ミル
ク、または経腸栄養剤についても、各試験例と同様に試
験したが、ほぼ同様の結果が得られた。

【００４８】

【表６】

【００４９】（参考例１）水溶性の難消化性糖類の製造
例 リン酸緩衝液（pH 6.5）80ｌにアスペルギルス属に属す
る微生物に由来するセルラーゼ（商品名：「セルラーゼ
Ａアマノ」、天野製薬製。繊維素糖化力15,000U/g）67g
を添加し、40℃に加温し、これに市販のコンニャク粉
4.0kg を加え、撹拌して溶解した。この混合液を40℃に
16時間保持して、酵素反応を行った後、この反応液を、
95℃で10分間加熱し、酵素反応を停止した。この反応液
を6000Ｇで遠心分離し、上澄液を陽イオン交換樹脂ダウ
エックス50Ｗ×８（Ｈ＋ ）1,000ml および陰イオン交
換樹脂ダウエックス１×８（ＯＨ− ）4,000ml に順次
通液して脱塩精製し、濃縮し、噴霧乾燥し、部分加水分
解物約2,800gを得た。この部分加水分解物の平均分子量
は2,000 であった。 （参考例２）ラクチュロースの製造例 市販の食用乳糖１００Ｋｇを９０℃に加温した温水２０
０Ｋｇ溶解し、これに５４０ｇの水酸化ナトリウムを水
１５Ｋｇに溶解した溶液を添加し、９０℃で５分間加熱
し、のち３０℃に冷却した。次いでこの反応液を陽イオ
ン交換樹脂および陰イオン交換樹脂層に通液して脱塩、
脱色し、固形分含量６０〜７０％に濃縮し、析出する乳
糖結晶を３回瀘別し、全固形分含量６９％のラクチュロ
ース・シロップ約３８Ｋｇを得た。

【００５０】得られたラクチュロース・シロップは、固
形分中約８０％のラクチュロースを含有していた。

【００５１】次に実施例を示してこの発明をさらに詳細
かつ具体的に説明するが、この発明は以下の実施例に限
定されるものではない。

【００５２】

【実施例】

実施例１ 牛乳１００ｌを７０℃、１５０Ｋｇ／ｃｍ２ の圧力で
均質化し、９０℃で１０分間殺菌し、この殺菌した牛乳
４８．５ｌにウシラクトフェリン（ベルギーのオレオフ
ィナ社製）１Ｋｇおよび５０％ラクチュロ−スシロップ
（森永乳業社製）０．５Ｋｇを添加して均一に溶解し、
最終濃度で２％のウシラクトフェリンおよび０．５％の
ラクツロ−スを含有する乳飲料約５０Ｋｇを調製した。

【００５３】この乳飲料を滅菌した飲水瓶に分注し、試
験例１で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲水瓶から経
口的に自由摂取させた。新鮮便を２日毎に２週間採取
し、常法に従って糞便中の細菌数を測定した。糞便中の
細菌数は、投与前の各細菌数を100%として比較すれば、
投与２日以降、平均してエンテロバクテリアッセ−が
１．５％に低下し、スタフィロコッカスが１６％に低下
し、クロストリジウムの細菌数は検出限界以下に低下し
た。 実施例２ ホエ−パウダ−（森永乳業社製）５Ｋｇ、蔗糖８．５Ｋ
ｇ、および参考例１と同一の方法で調製したコンニャク
由来のグルコマンナンの加水分解物０．５Ｋｇを、水５
２．８５Ｋｇに溶解し、１０℃に冷却し、１０％クエン
酸溶液３Ｋｇ、１％ペクチン溶液３０Ｋｇおよび香料
０．１５Ｋｇを添加して均一に溶解し、７０℃、１５０
Ｋｇ／ｃｍ２ の圧力で均質化し、９０℃で１０分間殺
菌し、乳清飲料を調製した。これとは別にウシラクトフ
ェリン（ベルギーのオレオフィナ社製）の２０％水溶液
１０ｌに１モルの塩酸を添加してｐＨを４に調整し、８
０℃で１５分間殺菌した。乳清飲料４５ｌにウシラクト
フェリン溶液５ｌを添加して均一に溶解し、上記グルコ
マンナンの加水分解物０．４５％およびウシラクトフェ
リン２％を含有する乳清飲料約５０ｌを得た。

【００５４】このグルコマンナンの加水分解物及びウシ
ラクトフェリンを含有する乳清飲料を滅菌した飲水瓶に
分注し、試験例１で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲
水瓶から経口的に自由摂取させた。新鮮便を２日毎に２
週間採取し、常法に従って糞便中の細菌数を測定した。
糞便中の細菌数は、投与前の各細菌数を100%とした比較
すれば、投与２日以降、平均してエンテロバクテリアッ
セ−が２．０％に低下し、スタフィロコッカスが１５％
に低下し、クロストリジウムの細菌数は検出限界以下に
低下した。 実施例３ 乳糖（ドイツのミライ社製）７．５Ｋｇ、脱脂粉乳（森
永乳業社製）２．５Ｋｇを水５０Ｋｇに溶解し、水相を
タンク内に調製した。一方、植物油１．９６Ｋｇ（太陽
油脂社製）とレシチン（味の素社製）０．０４Ｋｇを混
合溶解し、油相を調製した。タンク内の水相に油相を添
加し、攪拌して混合し、７０℃に加温し、ホモゲナイザ
−により１５０Ｋｇ／ｃｍ２ の圧力で均質化し、９０
℃で１０分間殺菌し、濃縮し、噴霧乾燥し、中間製品粉
末約１０Ｋｇを得た。この中間製品粉末７．２８Ｋｇに
脱塩ホエ−（オランダのドモ社製）０．５Ｋｇ、牛血清
アルブミン（シグマ社製）２．０Ｋｇ、炭酸カルシウム
０．０２Ｋｇおよびウシラクトフェリン（ベルギ−のオ
レオフィナ社製）０．２Ｋｇを添加し、ミキサ−で均一
に混合し、最終製品である粉乳約９．５Ｋｇを得た。

【００５５】この粉乳０．２Ｋｇを滅菌水１．８Ｋｇに
溶解し、最終濃度でウシラクトフェリン０．２％、牛血
清アルブミン２％を含む調乳液２Ｋｇを調製した。この
調乳液を試験例１で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲
水瓶から経口的に自由摂取させた。新鮮便を２週間後に
採取し、常法に従って糞便中の細菌数を測定した。糞便
中の細菌数は、投与前日の各細菌数を100%として比較す
れば、エンテロバクテリアッセ−が１．２％に低下し、
スタフィロコッカスが１６％に低下し、クロストリジウ
ムの細菌数は検出限界以下に低下した。 実施例４ ホエ−蛋白酵素分解物（森永乳業社製）１０．８Ｋｇ、
デキストリン（昭和産業社製）３６Ｋｇ、及び少量の水
溶性ビタミンとミネラルを水２００Ｋｇに溶解し、水相
をタンク内に調製した。一方、大豆サラダ油（太陽油脂
社製）３Ｋｇ、パ−ム油（太陽油脂社製）８．５Ｋｇお
よびサフラワ−油（太陽油脂社製）２．５Ｋｇ、レシチ
ン（味の素社製）０．２Ｋｇ、脂肪酸モノグリセリド
（花王社製）０．２Ｋｇおよび少量の脂溶性ビタミンを
混合溶解し、油相を調製した。タンク内の水相に油相を
添加し、攪拌して混合し、７０℃に加温し、ホモゲナイ
ザ−により１５０Ｋｇ／ｃｍ２ の圧力で均質化し、９
０℃で１０分間殺菌し、濃縮し、噴霧乾燥し、中間製品
粉末約５９Ｋｇを得た。これに蔗糖（ホクレン製）８．
２Ｋｇ、ウシラクトフェリン（ベルギ−のオレオフィナ
社製）７．５Ｋｇ、アミノ酸混合粉末（味の素社製）
０．２Ｋｇ、およびクエン酸第一鉄ナトリウム（エ−ザ
イ社製）０．１Ｋｇを添加し均一に混合し、経腸栄養食
粉末約７５Ｋｇを得た。 この経腸栄養食粉末を１５％
の濃度で水溶解し、ウシラクトフェリン１．５％および
クエン酸第一鉄ナトリウム２００ｍｇ／ｌ（鉄として２
０ｍｇ／ｌ）を含有する経腸栄養食を調製し、試験例１
で作成した牛乳飼育マウス５匹に、飲水瓶から経口的に
自由摂取させた新鮮便を２週間後に採取し、常法に従っ
て糞便中の細菌数を測定した。糞便中の細菌数は、投与
前の各細菌数を100%として比較すれば、エンテロバクテ
リアッセ−が１．１％に低下し、スタフィロコッカスが
８．５％に低下し、クロストリジウムの細菌数は検出限
界以下に低下した。 実施例５ カゼインナトリウム（ニュージーランド・デイリー・ボ
ード製）２１Ｋｇ、大豆蛋白質（商標。フジプロＣＬ：
不二製油社製）４．５Ｋｇ、アミノ酸混合粉末（味の素
社製）０．４Ｋｇ、レシチン（味の素社製）０．１Ｋ
ｇ、および少量の水溶性ビタミンとミネラルを水１５０
Ｋｇに溶解し水相調製した。一方、コ−ン油（太陽油脂
社製）３．８Ｋｇ、オリ−ブ油（太陽油脂社製）１５Ｋ
ｇおよび脂肪酸モノグリセリド（花王社製）０．２Ｋｇ
および少量の脂溶性ビタミンを混合溶解し、油相を調製
した。水相に油相を添加して攪拌混合し、７０℃に加温
してホモゲナイザ−により１５０Ｋｇ／ｃｍ２ の圧力
で均質化し、９０℃で１０分間殺菌し、濃縮、噴霧乾燥
し、粉末約４０Ｋｇを得た。これに蔗糖（ホクレン社
製）５３Ｋｇおよびウシラクトフェリン（ベルギーのオ
レオフィナ社製）７Ｋｇを添加して均一に混合し、飼料
用粉末約１００Ｋｇを得た。

【００５６】この粉末を２０％の濃度で水溶解し、ウシ
ラクトフェリン１．４％および大豆蛋白質０．８％を含
有する液状飼料を調製し、試験例１で作成した牛乳飼育
マウス５匹に、飲水瓶から経口的に自由摂取させた。新
鮮便を２週間後に採取し、常法に従って糞便中の細菌数
を測定した。糞便中の各細菌数は、投与前の細菌数を10
0%として比較すれば、エンテロバクテリアッセ−が１．
５％に低下し、スタフィロコッカスが１０％に低下し、
クロストリジウムの細菌数は検出限界以下に低下した。

【００５７】

【発明の効果】以上詳しく説明したとおり、この発明に
よって以下の効果を有する液状または流動状の食品が得
られる。 (1) ヒトまたは動物の異常な腸内フロ−ラの細菌構成を
改善する。 (2) 未熟児、新生児、幼児、老人、または手術後の患者
などの消化機能の低下したヒトの栄養食として用いられ
ると共に、継続的に使用することにより病原菌に対する
感染防御機能を高める。 (3) 胃から大腸に至る消化管において病原菌に起因する
下痢、感染症の予防、および治療に効果を有する。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｊ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＣＪ 8314−4Ｃ ＡＣＲ 8314−4Ｃ (72)発明者 露木 重雄 東京都新宿区上落合２−１−６ (72)発明者 寺口 進 東京都町田市成瀬2656−４ (72)発明者 小沢 和裕 神奈川県大和市深見台２−６−４ (72)発明者 保田 聡子 神奈川県横浜市緑区美しが丘１−18−３− 205

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】（Ａ）ウシラクトフェリンと、（Ｂ）少な
   くとも０．０１％（重量）の水溶性の難消化性糖類、少
   なくとも０．５％（重量）の牛血清アルブミン、少なく
   とも０．５％（重量）の大豆蛋白質、鉄換算で少なくと
   も１０ｍｇ／ｌの鉄剤のいずれか、またはこれらの任意
   の混合物、とを含有する液状または流動状の食品。
2. 【請求項２】液状または流動状の飲食品が、牛乳、加工
   乳、乳清飲料、育児用ミルク、または経腸栄養剤である
   請求項１の液状または流動状の食品。