JPH05500061A - 甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンのプロドラッグ誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンのプロドラッグ誘導体技術分野 本発明は、新規な過渡プロドラッグ形態の甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（Ｔ ＲＨ；チロリベリン）（ｐＧｌｕ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−ＰｒｏＮＨ２）に関腰さら にそのプロドラッグの製造方法、そのようなプロドラッグを含む薬剤の組成、及 びそのプロドラッグの使用方法に関する。

本明細書において、「プロドラッグ」という用語は、混血動物、例えば人に投与 されると、承認されている薬品、すなわち、ＴＲＨに変換するＴＲＨの誘導体を 意味する。

用語「過渡」とは、承認された薬品（親のＴＲＨ）が放出されるようにプロドラ ッグ形態が転化するという意味であり、分割される部分は無毒であるかまたは無 毒の代謝物が生成されるように代謝されることを意味する。

これらの新規なプロドラッグ形態のＴＲＨは、ＴＲＨのある種のＮ−アルコキシ カルボニル誘導体であり、粗化合物に比べて、好ましい高い親油性を持っており 、親ＴＲＨの生体内の例えば血液内での酵素分解や不活性化を防止＝Ｊ能である 。

背景技術 ＴＲＨは、前脳下垂体からの甲状腺トロピンの合成と分泌を制御する視床下部の ペプチドである。１９６９年にＴＲＨが発見されて以来、ペプチドは、種々の内 分泌物や中枢神経系に関連する生物活動のみならず、様々な神経病、憂Ｗや精神 分裂病を含む神経精神的不調の処置も有用であることが、明らかになってきてい る（例えば、メトカルフ、１９８２；ジャクソン、１９８２；グリフイン１９８ ６．１９８７；ルーセン、１９８８を参照）。しかしながら、診療分野でのＴＲ ＩＩの使用は、代謝作用が急激であること、クリアランスと、脳への到達が少な いことなどにより、制約を受けている（例えば、メトカルフ、１９８２；ヒツチ ェンズ、１９８３、グリフイス、１９８７を対照）。血液−脳の障壁をＴＲＨが うまく通過できないのは、主として親油性が乏しいためである（バンクス＆カス チン、１９８５）。ねずみと人の静脈内の研究では、ＴＲＨの血漿半減期はたっ たの４−６分であることが明らかにされている（バッシン＆ウティガー、１９７ ３；モーレイ他、１９７９；ダンタス他；　１９８８　；イバーセン、１９８８ ）。

この短い生物学的半減期は、主として体内の液体と組織内に存在する酵素によっ て、トリペプチドの急激な分解によるのであり、特に、いわゆるＴＲＨ＊有のピ ログルタミル・アミノペプチダーゼ漿液の酵素を含むピログルタミル・アミノペ プチダーゼによる分解である（バウアー他、１９８１；バウアー、１９８８；ウ ィルク他、１９８８）。後者の酵素は、人あ血漿内でＴＲＨを急激に代謝させる のに大きな役割を演じている（バウアー、１９８８）。

従って、この分野では、ＴＲＨの酵素による急激な不活性化と不十分な親油性を 回避する必要がある。

本発明に基づくプロドラッグによれば、酵素による不活性化の阻市と、親油性の 向上が可能であることが判明している。

発明の要約 本発明の合成物は、ＴＲＨのＮ−アルコキシカルボニル誘導体であり、親薬剤よ りも良い親油性を持ち、ＴＲＨよりも血液−脳障壁をａ過可能であり、生体内で 酵素による不活性化に対してＴＲＨを守ることができ、温血動物、例えば人間に 投薬されたときには、活性親Ｔ　ＲＨに徐々に転化し、有効期間が長くなる。こ れらの特徴により、この化合物は治療薬剤として有効である。

本発明の化合物は、次の一般式により表わされる。

及び なお、Ｒ■は、アルキル基、アラルキル括、アルケニル基、シクロアルキル基よ り構成される基より選択され、これらの基ではアルキル、アラルキル、アルケニ ルまたはシクロアルキルは非置換、あるいは、ハロゲン原子、例えばＣ１または Ｂ「、水酸基、１〜６個の炭素原子を含む直鎖または分岐鎖アルコキシ基から構 成される基から選択された一個以上の置換基で置換されており、薬剤として承認 されている酸が付加された塩である。

ここで、用語「アルキル」は、Ｃ１−１５アルキルを意味しており、直鎖あるい は分岐鎖であり、メチル、イソプロピル、オクチルまたはデシルなどである。用 語「アルケニル」は、Ｃ２−１５−モノ不飽和脂肪族炭化水素基を意味し、直鎖 あるいは分岐鎖てあり、プロペニル、ペンテニルなどである。用語「シクロアル キル」は、４〜７個の炭素原子を含むラジカルであり、例えばシクロヘニルであ る。用語「アラルキル」は、アルキレン−アリル型の基を表わし、アリルはフェ ニールやナフチルなどの基を含んでおり、アルケレン部分は１〜６個の炭素原子 有しており、直鎖または分岐鎖であってもよく、例えば、メチレン等である。

ＴＲＨは、２つの互変異性形態で存在していて、Ｎ　（１）−Ｈ互変体（ａ）と Ｎ　（３）−Ｈ互変体（ｂ）である。

中性水溶液内では、ＴＲＨの互変異性平衡状態は、Ｎ　（３）−Ｈの形に転位す る（ジラール、他、１９８６）。クロロホルム中の反応により、種々のヒスジン 誘導体におけるイミダシル基のアシル化が、Ｎ（１）とＮ（３）の両方で生じて いることが知られている。イソブチル・クロロフォルムによってα−アミノ保護 ヒスチジン誘導体がアシル化すると、Ｎ（３）−置換インブチルオキシカルボニ ル誘導体が、必ず生成されることが知られており、さらに同じ誘導体がアダマン チルオキシカルボニル・フッ化物と反応して、１：２の割合でＮ（１）−とＮ（ ３）−置換誘導体からなる異性体混合物が生成される（グランボルド他、１９７ ９．１９８１）。本発明において、用語ｒＴＲＨのＮ−アルコキシルカルボニル 誘導体」は、式１に示されたＮ（１）−置換誘導体、またはこれらの混合物を表 わし、置換はＴＲＨのイミダシル部分の窒素原子の−っで行なわれる。

ここで用いられている用語「無毒の薬剤として承認された酸が付加された塩」は 、一般に式１の無毒の酸を付加した塩の化合物を表わし、無毒の無機またはを濃 酸によって形成されている。例えば、塩には、塩酸、臭酸、硫酸、スルファミン 酸、硝酸、燐酸等の無機塩から誘導されるもの；酢酸、プロピオン酸、こはく酸 、フマール酸、マレイン酸、酒石酸、くえん酸、グリコール酸、乳酸、ステアリ ン酸、りんご酸、パモイック酸、アスコルビン酸、フェニル酢酸、安息香酸、グ ルタミン酸、サリチル酸、スルファニル酸、メタンスルホン酸等の何機酸から誘 導されるものが含まれる。

他の態様では、本発明は、薬剤として承認されている担体あるいは賦形剤、およ び式１の化合物により構成される薬剤合成物に関するものであり、このような化 合物の治療上の使用に関するものである。

さらに他の態様では、本発明は、式１の化合物を作る方法に関する。

内生酵素によってＴＲＩ（が急激に代謝されるという聞届を回避するために、近 年数種類のＴＲＨの類似物が作られてきている。これら多数の類似物は、ＴＲＨ と同様に、非置換イミダシル基を有するし一ヒスチヂイル残留物を含むトリペプ チドであり、例えばＣＧ３５０９．ＣＧ３７０Ｂ、ＲＸ７７３６８．ＤＮ１４１ ７、ｔｖＩＫ−７７１，ＹＭ１４６７３．ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−（３，３’　−ジ メチル）−ＰｒｏＮＩ１２などである。しかし、これらの化合物は、様々な程度 の代謝不安定性、親油性に限度があること、および脳への到達度が少ないなどの 問題を持っている（メトカリフ、１９８２；ヒチェンズ、１９８３）。

ＩＩＩ　ｙｙｓｕ　ｃｃ　ｓｎｓ ここで説明されているプロドラッグの原理は、ＴＲＨ類似物（例えば、遊離イミ ダシル基を有するヒスチジン残留物を含むトリペプチド）等にも適用でき、この ようなＴＲＩ類似物のイミダシル基で形成されるＮ−アルコジカルボニル誘導体 は、本発明の一部を構成するものとする。

発明の詳細な説明 式１の化合物の例を以下に説明する。なお、Ｒ１は、次の基の一つである、すな わち、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、第２ブチル、ペンチ ル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ペンタデシル、ｔ−ブチ ル、アリル、８−ハイドロキシオクチル、２−クロロエチル、８−イソプロポキ シオクチル、ベンジル、フェネチル、２−ブテニル、シクロヘキシルまたはシク ロベンチルである。

本発明の式１によるプロドラッグ化合物は、親Ｔ　ＲＨか使用される条件下で使 用可能である。この化合物は、経口、身体の特定部分、非経口、直腸から、口腔 、または投薬形式の吸入、あるいは無７ｆＪの通常の薬品として承認される担体 、補助薬、溶剤を含む薬剤として投与可能である。好ましい投与形態は、非経口 的注射である。

本発明の化合物は、種々の方法で８凋製可能である。一つの方は式２による化合 物に反応させることである。

塩素、臭素、ヨウ素、弗素、４−ニトロフェニルオキシ話である。好ましい脱離 基は塩素である。反応は、通常ジオキシン、アセトン、”１セトニトリル、Ｎ、 Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ピリジン等の溶液、水、また は水−非プロトン性溶媒の混合液の中で、摂氏−１０度から８０度で、３０分か ら７２時１７１行なわれる。アルカリ全屈炭酸塩などの塩基、またはトリエチル アミンまたはピリジン等の何機塩基のあるところで、反応させるのが好ましい。

Ｘが塩素である式２の化合物及びこれらを調製する方法は、いくつかの文献に記 載されている。例えば、マツツナ−他（１９６４）。

本発明に基づく化合物の他の調製方法は、Ｔ　ＲＨを弐３のアルコキシ蟻酸無水 物と反応させることである。

（／Ｒ０ＣＯ）２０　ＩＩ＋ ■ なお、Ｒ１は前に定義した通りである。通常、反応は水か水−非プロトン性溶媒 混合液の中で行なわれる。

式１の化合物の酸が付加された塩を作るために、上記化合物は、薬剤として認め られる無機または有機酸を用いては準の方法で処理される。

本発明を、さらに次の例によって説明するが、これらは発明を限定するものと解 釈してはならない。調製された化合物のクロマトグラフィツクデータが表１に示 されている。先に述べたように、クロロホルメイトにおけるＴＲＨの反応により 、イミダシル基のＮ（１）−またはＮ（３）−置換基が生成される。しかし、下 記の例によって説明される化合物は、圧倒的（〉９０％）または完全に、ＩＩＰ ＬＣ分析と力学的研究に基づき決定された単一の生成物により構成されていた。

生成物は、Ｎ（３）−置換の誘導体であると思われる。

実施僻月： Ｎ−オクチルオキシカルボニルＴＲＨ（式１．Ｒ１−オクチルオキシり　Ｎ。

Ｎ−ジメチルホルムアシドの１０ｍ１中にＴＲＨ（３ｍｍｏ　１，１．０９ｇ） が溶解した溶液に、３．６ｍｍｏ　Ｉ　（０，７２ｒｎ＋）のｎ−オクチルクロ ロホルメイトに溶かした３、６ｍｍｏ　ｌ　（０，５１ｍ１）のトリメチルアミ ンを加えた。

この混合物は、室温で２．５時間撹拌され、６０ｍ１の水の中に注入され、エチ ルアセテート（２ｘ７５ｍｌ）を用いて抽出した。抽出されたエチルアセテート 抽出物を、水（２ｘ５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫化ナトリウムで脱水し、真空状 態で乾燥させた。得られた残留物を、エチルアセテート−エーテル−石油エーテ ルから再結晶させ、収率を７０％、Ｍｐ７９−８２°Ｃの表記の化合物を得た。

分子ｆ　：計算によると、Ｃ２５Ｈ３８Ｎ８０Ｂ　、Ｉ　Ｒ２０：　Ｃ１５５− ９６；　Ｒ７、５１；Ｎ、１５．’６６゜実測：Ｃ，５６，０７，Ｈ，７，６９ ；Ｎ、１５゜４４゜すなわち、Ｃ２５ＩＩ３８ＮＧＯｏ、ｌＨ２Ｏとすると計算 上、Ｃ：Ｈ：Ｎ−５５，９６７７，５１＋１５．６６であり、分析の結果、Ｃ： Ｈ：Ｎ−５６，Ｃ７：７．６９　：　１５．４４より、上記構造と判断した。

実施例２： Ｎ−オクチルオキシカルボニルＴＲＨ，塩酸塩（式１；Ｒ１−オクチル基）実施 例１で述べた如く得られた化合物は、エチルアセテート（２ｍｌ）中で溶かされ 、２．５ＭメタノールＨＣＩ溶ｉｆ＆０．２５ｍ１が加えられた。次にエーテル 、石油エーテルを加えることによって、表記の化合物を沈澱させた。−２０”Ｃ で４時間放置した後、沈澱物を濾過し、エーテルで洗い、燐ベントオキシドを入 れた容＝の上部に置き真空状態で乾燥させた。収率は８５％。

実施例３− Ｎ−へキシルオキシカルボニルＴＲＨ（式１；Ｒ１−ヘキシル基）２０ｍｌのア セトニトリル中にＴＲＨ（１ｍｍｏ　１，３６２ｍｇ）を混合した物に、１．２ ｍｍｏｌのｎ−ヘキシル・クロロホルメイト１．２ｍｍｏｌのトリエチルアミン を加え、１．２ｍｍｏｌのｎ−ヘキシル・クロロホルメイトを加えた。

この混合物を、室温で５時間撹拌し、減圧状態で蒸発させた。得られた残留物を 、水（１０ｒｎ＋）とエチル・アセテート（２０ｍｌ）の中で溶解させた。有機 相を分離し、水相を２０ｍ１のエチルアセテートで再度抽出した。抽出された抽 出物を２％の炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄してから、無水硫化ナトリウムを 用いて脱水させ、減圧状態で乾燥させた。ｔすられな残留物をエタノール−エー テル−石油エーテルから再結晶させ、最後に燐ベントオキシドを入れた容器の上 部に置き、真空状態で乾燥させ、収率を６７％、ＭＰ７１−７３℃の表記化合物 を？１１た。

分に二計ｎ＋＝よると、Ｃ２３Ｈ３４Ｎ６０Ｇ、ｌＨ２Ｏ：　Ｃ，５４，３２； Ｈ，７゜１４；Ｎ、１６．５２゜判明：Ｃ，５４，２０，Ｈ，７，２５，Ｎ。

１６．４０゜すなわち、Ｃ２３Ｈ３４Ｎ６０６．ｌＨ２Ｏとすると計算上、Ｃ： Ｈ：Ｎ−５４，３２ニア、１４：１６．５２で有り、分析の結果Ｃ：　Ｈ：　Ｎ −５４゜２０　：　７．２５　：１６．４０より上記構造と判定した。

実施例４： 実施例１と実施例３の手順に従い、適切なりロロホルメイトを用いて、本発明に Ｕづ＜ＴＲＨのＮ−アルコキシカルボニル誘導体をさらに得た。これらの誘導体 の構造と特性を表１に示す。

本発明の誘導体とＴＲＨとの親油性を、１−オクタツールと０．０２Ｍ燐酸緩’ ｆＡｔｉｌｋ　（ＰＨ７，４）間の化合物の見かけの分配係数（Ｐ）を測定して 評価した。

得られたｌｏｇＰ値を表１に示す。得られた結果から、親ＴＲＩよりもはるかに 高い親油性を持つプロドラッグ誘導体を調製可能であることが分かる。式１の化 合物のＲ１−置換基を適切に選択することによって、種々のさらに所望の親油性 を持つプロドラッグ誘導体を容易に得ることができる。

逆相カラム・クロマトグラフィーによって得られたクロマトグラフィツク容量が 、種々の化合物の相対親油性のＪＰＩ定に通常用いられる。溶質の容量ファクタ ーに゛を次のように定義する。

システムを用い、さらにＮｏｖａ−ＰａｋＣＮＨＰＲａｄ　ｉ　ａ　１Ｐａｋ　 （商品名）逆相カラム（８ｘ１００ｍｍ）（水系）を用いて、測定すると、種々 の誘導体は表１にあるようなに°値を示した。これらのデータは、親ＴＲＨに関 して、Ｎ−アルコキシカルボニル誘導体がより高い親油性を持つことを示してい る。

バッファー水溶液または８０％の人の血景液並びにピログルタミル・アミノペプ チダーゼ（ボーリンジャー、マンハイム、ＦＲＧより得た子牛の肝臓より調製し た）を含む緩衝液（ｐＨ７，４）の中に、式１の種々の化合物を入れて３７℃に 保ｔ“ルた。誘導体の初期濃度は、１０’−１０’の範囲であった。複数回溶液 の一部をサンプルとして取り出し、Ｔ　ＲＨのみならず残り（そのまま）の誘導 体についてＨＰ　Ｌ　Ｃによって分析した。血漿溶液については、取り出したサ ンプル（２５０μｍ）を、メタノール−水（１：　１　ｖ／ｖ）に硫酸亜鉛の２ ％溶液５゜ＯμＩに加え、血漿を脱法白化した。混合後、３分間１３，０００ｒ ｐｍで遠心う）離し、上澄み２０μｍを前述のようにＨＰＬＣにより分析した。

ピログルタミル・アミノペプチダーゼ酵素の研究に用いた反応条件は、パンダガ ードとモス（１（，１８９）により説明された前述の条件と同しである。

分＃ｒｒ方法： Ｔ　ＲＩＩとその誘導体の測定にＨＰ　Ｌ　Ｃ法を用いた。この方法では、前述 の逆Ｆ目カラｌ、に、濃度Ｉｎ’Ｍのトリエチルアミンを加えた（１．１９６の 燐酸中にＩｎ−５Ｃ１９ｏ　Ｖ　／　Ｖのアセトニトリルより構成される移動相 システムを用いて、周囲温度で溶出させた。なお、アセトニトリルの濃度を、適 切なｆ♀持時間（３−８分）を得るために各化合物について３Ｂ整した。種々の 誘導体を加水分解して生成されるＴ　ＲＨの静１定のために、アセトニトリル− １０−３Ｍｈリエチルアミンを含む０゜１９６燐酸（１：　２０ｖ／ｖ）より成 る移動ト目システムを用いた。流量は１．５ｍ１ｍ１ｎ−’であり、カラム流出 を吸光度２１５　ｎ　ｍでモニターした。化合物の定量化は、同一条件の下で分 析した漂準物質のピーク値を測定することにより行なった。

誘尋（・トの分解は、全ての反応溶液の中で厳密な１次反応速度を示すものであ った。透導体の疑似１次反応速度と分解の半減期を、時間に対する残留誘導体の ’ＩＪ数の線形図の曲線から計算した。

図１に示されているように、ｐＨ−領域０．３−１０の水溶液内のＴＲＨに関し て、化合物を定量的に加水分解した。これらは、ｐＨ５−６で、最高の安定性を かした（図２と比較）。ｐＨ５，８，２０℃において、Ｎ−オクチルオキシカル ボニルが１０９６分解する時間は、７６時間であることが判明した。ｐＨ７，４ と′３７℃では、加水分解の半減期は９〜３７時間であった（表２）。

ピログルタミル・アミノペプチダーゼ（ＰＡＰａ　ｓ　ｅ　１）が存在する場合 には、Ｔ　ＲＨは急激に分解される。Ｔ　ＲＨが４分で半減する条件下では、種 々のＮ−アルコキシカルボニル誘導体は、表２のデータから分かるようにより安 定した。

人の血漿がある場合には、Ｎ−アルコキシカルボニル誘導体はＴＲＨよりもさら に顕８な安定性を示した。表２から分かるように、分解の半減期は０．　５〜６ ゜６ｎ、’ｊ間であった、−）ｊＴＲＩｉは半減期９分で分解した。ＴＲＨのプ ロドラッグとしての誘導体を考えるとき、決定的な点は明らかに分解経路である 。理想的には、化合物を、イミダシルで守られた部分で血漿中で加水分解し、定 量的にＴＲＨを放出することである。驚いたことには、誘導体に関してはこれは 事実であった。

血漿中でなされる反応を、反応式１に示されるように図解できる。血漿の酵素触 奴作用のみでｔく自然な加水分角ｌにより、Ｎ−アルコキシカルボニル誘導体は 、イミダシル・カルバミン酸塩の部分により専ら加水分解され、血漿中にＴ　Ｒ Ｈを生成する。ＴＲＨに特４丁のピログルタミル・アミノダーゼ酵素（ＰＡＰ　 ａ　ｓ　ｅＩＩ）があるために、このＴＲＨは分解して、ピログルタミン酸とＬ −ヒスチジル−し−プロリネアミドを生成する。後右のプロセス（すなわち、Ｔ ＲＨの分解）では、８０％の人の血漿と３７℃のとき、低濃度ＴＲＨ（２ｘＦＯ ’Ｍ以下）での１次半減期はり分てあった。ところがＴＲＨの分解は、濃度が高 いときは零次反応速度に従うことが判明した。８０９６の人間の血漿と３７℃で は、７．２ｘｌＯ’Ｍ　ｍｉ　ｎ−’零次反応速度定数を、１０−’−１０−３ Ｍの初期ｉｎ度のＴＲＨに定めた。

８０２６の人の血漿溶液と３７℃にお！フるＮ−アルコキシカルボニル誘導体の ＴＲＨへの定ユ的転化が、上述のＨＰＬＣＭ理を用いてＴＲＨ用の反応溶液を分 析することによって、証明された。

いくつかの透導体に関して得られたデータが図３と図４に示されている。図示の 如く、ＴＲＨが人の血漿溶液内で誘導体から生成される。誘導体の初期濃度が最 も高い溶液内で生成されるＴ　ＲＨの大部分は、使用された濃度が、ＴＲＨは零 次反応速度に応じて不活性化されているという事実に基づくものである。このこ とは、単位時間当りの分解の割合で換算して、不活性化率は、濃度が高くなるに 連れて減少するということを意味している。図３．４に示される如きＴＲＨの時 間経過にλ１する連続反応経路における反応速度分析結果を示した。その結果、 異なる１１７期の誘導体濃度において、Ｔ　ＲＨは化学量論量（〉９０％）で形 成されることが明らかになった。

これらの実験から、Ｎ−アルコキシカルボニル誘導体は、親である活性化合物が 生体内で放出されるのと同様な条件下で放出されるという点において、ＴＲＨの プロドラッグ誘導体であることが事実上証明された。さらに、式１の化合物のＲ １−置換基を適切に選択することによって、加水分解の割合とＴ　ＲＩＩ生成を 制御し、容易に変更可能であることは明かである。徐々に加水分解する誘導体は 、ＴＲＨ貯蔵所として作用し、血液内の急激な酵素分解から誘導されたＴＲＨを 守る。

表１： ＴＲＨと種々のＴＲＨ誘導体の分配係数（Ｐ）とクロマトグラフィックキャパン ティーファクター（ｋ′） 化合物　ｌｏｇ　Ｐ”　ｌｏｇ　ｋ’ Ｔｌ：ＩＨ−２，４６＜０．４ ＣＨ（ＣＨ３）２−０．８０　０．９６ｎ−Ｃ４Ｈ９−０，４７１，０７ ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２−０．４４　１．０９ｎ−ＣｓＨ１３０，７１１２９ ｎ−Ｃ８Ｈ１７１，８８ｊ、５０ ＣＨ２Ｃ６Ｈ５−０，１１ Ｃ６Ｈ，ｏ（ｃｙｄｏｈｅｘｙリ　０．６０　１．２８ＣＨ２Ｃ８２Ｃ１−１， １０ ＣＨ（Ｃ２Ｈ５）２０．２０ ＣＨ（０３Ｈ７）２１．２０ ＣＨ２ＣＨ（０２Ｈ５）Ｃ４Ｈ９１，８２ａ：オクタノールと０．０２Ｍ燐酸塩 緩衝液ｐＨ７，４（２１℃）表２・ Ｔ　ＲＨとその種々のＮ−アルコキンカルボニル誘導体の加水分解率データ３７ ℃の半減期 化合物 ｐＨ７，４ピログルタミル・　８ｏ％ｖ、’ｖ血漿Ｃ６Ｈ１ｏ（ｃｙｃｌｏｈｅ ｘｙｌ）　３６．８　ｈ　２２　ｍｉｎ　６．４　ｈａ・このデータは、ピログ ルタミル・アミノペプチダーゼ（０，０１ｕｎ　ｉ　ｔ／ｍｌ）を含む緩衝液 （ｐＨ７，４）内での分解の半減期である。

プロドラッグの経皮吸収 本発明によるプロドラッグを経てＴ　ＲＩＩか皮膚を通して吸収される可能性を 、人の皮膚のサンプルを用いてガラス内で拡散実験して評価した。

検屍解削により得られた人の腹部全体の皮膚を使用した。皮膚を一１８℃で保存 し、使用に先立ち室温で徐々に溶かした。皮下脂肪をすべて除去し、皮膚を細か ＜９Ｊった。削り取った皮膚を開放フランツ拡散セルに入れた。拡散セルは、０ ゜７０ｃｍ”の拡散面積を有した。皮膚の真皮を、受容媒体（０，０５Ｍアイソ トニック・憐酸塩緩衝液、ｐＨ７，２）に入れ、この受容媒体を磁石の撹拌子を 入れて撹拌し、循環ウォータバスを用いて３７℃の定温に保持した。

５％　ｗ／ｖ溶液として、化合物を０．０５Ｍ燐酸塩援衝緩衝液終ｐＨ６，０） またはプロピレン・グリコール（１００または２００μｍ）に入れた。適時に、 １　ｎｎｌのサンプルを受容用から取り出し、新しい緩衝液と取り替えた。サン プルを直ちにＴ　ＲＩＩとプロドラッグ成分に関して、前述のＨＰＬＣ法で分析 した。

各試形剤中の各化合物の浸透性を３回ずつ検査した。

ＴＲＩＩの場合、測定可能な量の化合物は、２００時間に及ぶ拡散実験の間、受 容用に検出されなかった。ＴＲＨの検出限度は、約０．５μｇｍｌ”であった。

これと対比して、より親油性のあるＮ−オクチルオキシカルボニルＴＲＨ誘導体 は、容易に皮膚を通過した。濃度５％の水溶液安定した溶剤が認められた。基本 的には、適用された全てのプロドラッグが、人の溶剤を？７た。オクチルオ牛ジ カルボニル・プロドラッグ誘導体が皮膚をよぐ通過するということは、水と混合 し易いことと、高い溶解性によるものと説明できよう。

本発明のプロドラッグを経てＴＲＩを皮膚から浸透させる可能性を、通常の非経 口からのＴＲＨ投与量と、皮膚からの浸透量とを比較することにより、評価する ことができる。

皮膚からの浸透テストの際のバッチの大きさは２０Ｇｍ２であり、１６μｇ／ｈ ／ｃｍ２の融剤を使用すると、約２４時間で７．６ｍｇまたは３２０．ｃｚｇＴ ＲＨ／ｈを浸透させることが可能であることを、簡単に計算できる。この量は点 滴または注射により２４　＋＋ｒｒ間に放出されるＴＲＨの二と同じ（０，５− ５ｍｇ）である。

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Ｃｈｅｗ、　Ｒｅｖ、６４，１９６４．６４５−６８７メトカルフ、　Ｇ、：　 Ｂｒａｉｎ　Ｒｃｓ、　Ｒｅｖ、４．１９８２，３８９−４０８モーレイ、Ｊ、 Ｅ、　、ガーヴアン、Ｔ、Ｊ、、バーケイ、Ａ、Ｅ。

ウティガー、　Ｒ，Ｄ、　、ネアー、Ｍ、　Ｇ、バラ、Ｃ，Ｍ、　＆バーシュ　 マン。

Ｊ、　Ｍ、：　Ｊ、Ｃｌ１ｎ、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎ、Ｍｅｔａｂ、　４ｇ、１９ ７９，３７７−３８０ウイルク、Ｓ、、スエン、Ｃ，−５，＆ウィルク、Ｅ、Ｋ 。

図１は、３７℃において０．０２Ｍはう酸塩緩衝液の中で、プロドラッグ誘導体 を加水分解する際のＮ−オクチルオキシカルボニル−ＴＲＨ（式１；Ｒ１−オク チル基）（Ｏ）とＴＲＨ（０）の時間経過を示す。

図２は、３７℃の水溶液中のＴＲＨのＮ−オルチルオキシカルボニル誘導体の加 水分解のｐＨの変化を示す。

図３は、３７℃で８０％の人の血漿にＮ−へキシルオキシカルボニル−ＴＲＨ示 す。

図４は、３７℃で８０％の人の血漿にＮ−オクチルオキシカルボニル−ＴＲＨ示 す。

、ｙ：ｉ ｌｏｇ　Ｋｏゎ。

％　ＴＲＨ χＴＲＨ 国際調査報告 １、ｌ＠ｌ、ｌｌｌ＋、ｓｊｌ　Ａｌユ１．ｌ、。、。ＰＣＴ／ＤＫ　９０１０ ０２２Ｂ国際調査報告

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. １．一般式１で表わされるＴＲＨ誘導体、▲数式、化学式、表等があります▼ なお、Ｒ１は、アルキル基、アラキル基、アルケニル基、シクロアルキル基から 選択され、これらのアルキル、アラキル、アルケニルまたはシクロアルキル基は 非置換または、ハロゲン原子、例えばＣ１またはＢｒ、より構成される基、水酸 基、あるいは１〜６個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖のアルコキシ基より 選択される１以上の置換基で置換されており、薬剤として承認されている酸を付 加した塩である。
2. ２．請求項１に記載のＴＲＨ誘導体であって、Ｒ１は、メチル、エチル、プロピ ル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ヘキシル、オクチル、シクロヘキシル 、ベンジル、２−クロロエチル、または２−エチルヘキシルであることを特徴と する。
3. ３．請求項１に記載の式１に基づくＴＲＨ誘導体を調製する工程において、式２ によるアシル化剤とＴＲＨを反応させることを特徴とする、▲数式、化学式、表 等があります▼ Ｒ１は請求項１で定義した通りであり、Ｘは塩素、臭素、または４−ニトロフェ ニルオキシの如き適切な脱離基である。
4. ４．請求項１及び２に記載の化合物において、薬剤として承認されている賦形剤 と薬効量の化合物よりなる薬剤。
5. ５．非経口投与に用いた請求項４に記載の薬品調合剤。
6. ６．鼻腔、経口、経皮、口腔投与に用いた請求項４に記載の薬品調合剤。
7. ７．請求項１と２に記載の治療用の化合物。
8. ８．治療用薬剤を調製するための請求項１または２に記載の化合物の使用。
9. ９．ＴＲＨ類似品のＮ−アルコキシカルボニル誘導体（すなわち、遊離イミダゾ ル基を有するＬ−ヒスチジル残基を含有するトリペプチド）、この誘導体ではア ルコキシカルボニル基は請求項１に定義した通りであり、前記ＴＲＨ類似品のイ ミダゾル基の窒素原子に付加されていることを特徴とする。
10. １０．請求項９に記載の化合物であって、ＴＲＨ類似品はＮ−末端アミノ酸とし てＬ−ブロリニアミドを含有していることを特徴とする。
11. １１．請求項９に記載の化合物であって、ＴＲＨ類似品はＣＧ３５０９，ＣＧ３ ７０３，ＲＸ７７３６８，ＭＫ−７７１、ＤＮ１４１７とＹＭ−１４６７３であ ることを特徴とする。