JPH05507501A - リンパ球応答と免疫関連疾患との阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

発明の分野 免疫学と医学の分野における本発明は天然ペプチドに近イベし、熱シヨツクタン パク質であるｈｓｐ６５あるいは１９７８球の認識と活性化のために誘導される ペプチドと拮抗するペプチドに関する。 本発明のペプチドはリンパ球活性化と増殖応答を阻害し、そして自己免疫、移植 への拒絶反応を含む免疫反応及び免疫関連疾患から患者を保護できる。 自己免疫は、゛部分的に外来分子あるいは抗原と個体（゛′自己′°）に従属す る分子構造との間の構造的相似性に基づいていると考えられている。 自己免疫疾患の記録は長くそして混乱がある。例えば多発性硬化症、重症筋無力 症、リュウマチ性関節炎そして全身性エリテマトーデスがこれに含まれる。これ ら疾患の全ての場合に、免疫応答は強力で特異的である。問題はこの免疫応答が 体の本質的な構成要素で指令されていることである。 数百万の人々が体の結合組織の関節に含まれる成分に対する自己免疫に関与する と考えられる慢性型関節炎を患っている。これらの容態にはリュウマチ性関節炎 、強直性を唯炎。 ライター症候群、およびその他の形式の反応性関節炎が含まれる。これらの疾患 の疫学的背景は知られていないが、先行する様々な微生物による感染が遺伝的に 受け入れ易い個体の刺１ｍ境作りに作用するように思われる。リュウマチ性関節 炎をもつ患者はミコバクテリア抗原に通常以上の反応性を示すことがあり、そし てミコバクテリアに免疫化した個体の１５０例中１Ｓ例が関節炎を引き起こすこ とが見いだされた。 Ｂ、実験的関節炎 アジュバント関節炎はミコバクテリア（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ＋・ｉａ）に対する 感受性系統のラットを免疫することによって誘導されるヒト関節炎の実験モデル である。免疫倹約１２日で発症する疾患はリュウマチ性関節炎のもつ多くの性質 を保有する。 まさにアジュバント関節炎はリュウマチ性関節炎のためのモデルであると考えら れてきた。関節炎を起こすためミコバクテリア抗原を含むアジュバントにて免疫 されたラットはミコバクテリア抗原に特異的な１９７８球を含んでいる。実際に 長期の’ｒｍ胞系とクコーンがそのように免疫されたラントから分離されており 、これらＴ！ａｌａはインビボで関節炎性疾患を誘導しさらにそれを修飾するこ とができる（ＨｏｌｏｓｈｉＬｚ。 ５ｃｉｅｎｃｅ、　＋９８３．２１９：５６；Ｈｏ１ｏｓｈｉｔｚ、　Ｊ、ｅｔ 　ａｌ、、　Ｊ、Ｃｌ１ｎ。 Ｊｎｖｅｓｔ、、！９８４．７３：２１１）’。 例えばＡ２ｂと称されるＴ細胞クローンは処理されたレービスラットに関節炎を 誘導することが示された（Ｈｏｌｏｓｈｉしｚ、Ｊ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｃ ｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、、　１９８４．７３＋２１１）　、対照的Ａ２ｃ細胞 で処理されたラットはアジュバント関節炎に抵抗性を得た（Ｃｏｈｅｎ、　１． Ｒ，ｅｔ　ａｔ、、　Ａｒｔｈｒｉｔｔ５Ｒｈｅｕｍ、、　１９８：ｉ。 ２９：８４１；　Ｃｏｈｅｎ、　１．Ｒ，１ｍｍｕｎ、　Ｒｅｖ、、　１９８６ ．９４＋５　）。 アジュバント関節炎の抗原的基礎についての第１の手がかりは、関節炎性Ｔ１ｍ 胞クロりンであるＡ２ｂがこれらの細胞を元来誘導した免疫源としてのミコバク テリアに応答するばかりでなく、粗軟骨抽出物さらにプロテオグリカン核タンパ ク質に富んだ抽出物にも応答することを見いだされている（Ｖａｎ　Ｅｄｅｎ、 Ｗ、ｅＬ　ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、（ＵＳＡ）、１９ ８５゜８２：５１１７）。上記Ｔ細胞クローンの両者によって認識される軟骨関 連自己構造とミコバクテリア間の擬態の原図となる最小抗原構造、つまりエピト ープはミコバクチリアル６５ｋＤ　熱シヨツクタンパク質（Ｈ４Ｆ）の残基１８ ０−１８８のアミノｖ万己列である（Ｖａｎ　Ｅｄｅｎ、　Ｗ、　ｅｔ　ａｌ、 。 Ｎａｔｕｒｅ　１９８８．３３］：１７１）。 知られている最も系統的に保存されたタンパク質の一つである（Ｓｅｔｔｅ、Ａ 、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ、　１９８６．３２４：２６０；　５ｈｔｎ ｎｊｃｋ。 Ｔ、Ｍ、、　Ｊ、ｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｉ、、　１９８７．１６９：１０８０ ：　Ｋａｕｆｆｍａｎ、　Ｓ、Ｈ，Ｅ、。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｔｏｄａｙ　１１：１２９　（１９９０＞）　、　ＨＳ　Ｐ は分子量力玉約９０．７０．６０並びに１Ｏ−３０ｋＤａの４つの主要な種類に 分類される。幾種かの６５ｋＤ　ＨＳＰは現在配列力（決定されている（Ｓｈｉ ｎｎｉｃｋ、　Ｔ、Ｍ、、　Ｊ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　１９８７．１６９：１ ０８０；　Ｔｈｏｌｅ、　Ｊ、Ｅ、Ｒ，ｅｔ　ａｌ、、　Ｍｉｃｒｏｂ、　Ｐａ ｔｈｏｇｅｎ、　１９８８．４ニア１；　Ｍｅｈｒａ、Ｖ、　ｅｔ　ａｌ、、　 Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ’ｌ　Ａｅａｄ、　Ｓｃｉ、　（ＵＳＡ）。 １９８６、８３ニア０１３；ＨｅｍｍＨｅｍｍ１ｎ、　Ｓ、　ｅｔ　ａｌ、、　 Ｎａｔｕｒｅ、　１９８８．３３３：３３０；　Ｖｏｄｋｉｎ、　Ｈ，Ｍ、　ｅ ｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｔ、　１９８８．１７０：１２２７；　 Ｒｅａｄｉｎｇ、　Ｄ、Ｓ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ、　１９８９．３ ３７：６３５；ｊｉｎｄａｌ、　Ｓ、　ｅｔ　ａｉ、、　Ｍｏ１．　ａｎｄ　Ｃ ｅ１１．　Ｂｌｏｔ、、　１９８９．９：２２７９）、部分配列については表１ を参照。 ＨＳ　Ｐは感染体、おそらく形質転換細胞の重要な抗原として作用する。ｐ！、 染時、Ｈ５Ｐは微生物と宿主ファゴサイトの両者から誘導される。扇胞内の病的 微生物の有力な抗原番よｈｓｐ６５　（ｈｓｐ６０系統の分子のヒト表現形）並 び（こｈｓρ７ｏとして知られたＨＳＰである。これらの極端な保存法に起因し て、ＨＳＰが自己免疫疾患との関連性をもつこと番よ驚くべきことではない。ク ローン化″自己反応性”Ｔｍ胞が、ヒトｈｓｐ６５とｈｓｐ７０に反応性である 正常供与体から得られた。 Ｄ、関節炎における熱シヨツクタンｚ＜り質への免疫性アジュバント関節炎はレ ービスラット並びに頻度（よ低（１力くフィッシャーあるいはＢＮラットに対し て油

【こ溶解したエムラベルクローシス（Ｍ、　Ｌｕｂｅ＋・ｃｕｌｏｓ＋ｓ） を使用して誘導される。 は乳動物相同のＨ３Ｐの発現はリュウマチ性関節炎患者とアジュバント関節炎を もったラントの患部関節組織で選択的に増大する（Ｋａｒｌｓｓｏｎ−Ｐａｒｒ ａ、　Ａ、に、　ｅＬ　ａｌ、、　５ｃａｎｄ、　Ｊ。 Ｉｍｍｕｎｕｌ、　３１：２８３−２８８（１９９０））。 本発明音とその協力者は２つの関節炎特異性Ｔリンパ球クローン、Ａ２ｂとＡ２ ｃの最小−Ｊ１１１配列がミコバクテリアｈｓｐ６５のアミノ酸配列１８０−１ ８７として明らかになったことを報告した（Ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｚｅｅ、　Ｒ，ｅ ｔ　ａｌ、、　Ｅｕｒ、　Ｊ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、　＋９：４３（＋９８９））　、位置１８７と１８８でのいか なるアミノ酸置換を持つペプチドも両ＴＲＩ胞クローンを完全に刺激した。この ことはこれらの位置が１８０−１８６のへブタペプチドの抗原性に影響しないこ とを示す。これは滑液組織内で発現されるＨＳＰａいはプロテオグリカン関連Ｈ ＳＰのｈｓｐ６５エピトープ間に擬態が起きていると考えられた。 レービスラットでの関節炎の誘導はｈｓｐ１８０−１８８４ナペプチドへのＴ細 胞の反応性と関係している。しかしながら、２つの異なった系統のラットである フィッシャーとＢＮ系ではそのような応答を起こすことができない、関節炎がス トレプトコッカス細胞壁（ＳＣＷ）を投与することによってフィッシャー系ラッ トに誘導される関連実験モデルにおいて、ＳＣＷｍ片とミコバクテリアｈｓｐ６ ５の両者へのＴ細胞反応性は欠けており、そして関節炎は発症しなかった（Ｖａ ｎ　ｄｅｎ　Ｂｒｏｅｋ、　Ｍ、Ｆ、　ｅＬ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅ ｄ、　１７０：４４９（１９８９））。 抵抗性状態は可溶性ミコバクテリアｈｓｐ６５で前処置することによってレービ ス　ラントアジュバント関節炎モデルにおいて人為的に誘導することができ、ノ ナペプチドに対して応答もまた低下させる。この処置はまたＳＣＷ誘導関節炎を 防ぎそして部分的にコラーゲン誘導関節炎も阻害する。誘導された非応答性にも ある程度の特異性があるように思われる。 若年性リュウマチ性関節炎（ＪＲＡ）を含むヒト関節炎において、ミコバクテリ アｈｓｐ６５へのＴ、ｉ！胞応答は、血液と比較して滑液中で上昇する：何人か の上昇した抗体応答を有するＪＲＡ患者からのＴ細胞は１８０−１８８ノナペプ チドに応答できるｈｓｐ６５に応答する（Ｌｙｄａｒｄ、　Ｐ、Ｍ、　ｅＬａｌ −＋　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｔｏｄａｙ　１１：２２８　（１９９０１）　ａ　Ｌ ／たがって、ミコバクテリアｈｓｐ６５の１８０−１８８ノナペプチドはは乳動 物の配列中に含まれていないので、ＪＲＡにおける特異的応答の大部分はＨＳ　 Ｐの非保存領域に対して指令されるように思われる。 自己制限性反応性関節炎患者からミコバクテリアｈＳｐ６５に誘導された滑液由 来Ｔ細胞クローンは、抗原の非保存Ｎ−末端ペプチドに反応した（Ｇａｓｔｏｎ 、　Ｊ、Ｓ、Ｈ，ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１４３：２４９４−２５００（１９９ｆ））、バージニア関 節炎（Ｖｅｒｓ　ｉ　ｎ　ｉ　ａ）において、１２０クローン中の１１［１がヒ トとミコバクテリアｈｓρ６５に共通の分配された（保存された）エピトープと 反応した（Ｌｙｄａｒｄ　ｅｔ　ａｌ、、参照、上述）・保存されたＨ５Ｐエピ トープへの特異性を有するヒトＴ細胞が、Ｎ生物抗原としてのＨ９Ｐが支配して いる正１０体中に存在している参チ申≠４ということは逆説的に思える。 天然ネットワークを形成するリンパ球が例えばＨ３Ｐのような制限された一連の 優勢自己抗体を指令するりセプターを運ぶと仮定されているこのネットワークを Ｈ５Ｐペプチドで予防接種して調整することができれば大きな利点があると思わ れる。。 スタッフォード等（ヨーロッパ特許広告公報ＥＰ１８１３６４　（５／２１／８ ６））　はたとえばミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　Ｈ−３７ ）−エム、カンサシイ（Ｍ、ｋａｎｓａｉｉ）、そじてエム、ヴアッカエ（Ｍ、 ｖａｃｃａｅ）のようなあるミコバクテリアの水性アセトン可溶性及び不溶性分 画を開示する。Ｈ−３７の可溶性分画は、不溶性分画がアジュバント関節炎に対 して抵抗性を導く免疫応答を引き起こすことが見いだされているのに対し、不溶 性分画は疾患の誘導の原因となると思われる。エム、バラカニ（Ｍ、ｖａｃｃａ ｅ）はアジュバント関節炎誘導成分を実質的に含んでないことが示された。さ゛ らに。 この公告公報では、１９２３球とのクローンとある種の系統について述べており 、これらは処置されたラット中への播種によって関節炎をもたらすために用いら れるミコバクテリアへの反応性の検討のために選択された。Ａ２と称されるひと つのＴ細胞系が処置ラット中への静脈注射（＋Ｖ）によって関節炎を誘導するこ とが見いだされた。Ａ２１ｓ胞はミコバクテリアで活性免疫化によって関節炎を 後発誘導することに対して非処置ラットをワクチン化するのに効果的である。細 胞系軟骨プロテオグリカンタンパク質と同様に全ミコノくクチ【ノアｔ＋＋ｂｅ ｒＣｕｌｏｓｉｓ）によって誘導される関節炎に対（７てラットを保護できる。 しかしながら、と述した文献のいずれも天然夕〉・バク質よりも短い明確に特定 された構造のペプチドを用いて抗原存在あるいはＴ細胞仲介免疫反応との干渉に よって、自己免疫疾患、あるいは移植拒絶並びに移植片対宿主疾患のような他の 望ましくない免疫的応答を阻害するための方法を具体的に述べてはいない。 ファンエデン等（Ｖａｎ　Ｅｄｅｎ、　Ｗ、　ｅｔ　ａｌ）はヨーロッパ特許公 告公ｆｉｌＥＰ３２２９９０　（７月５日、１９８９）で洩基有するポリペプチ ドを開示している。これらのポリペプチドは自己免疫疾患の診断組成物における 免疫源としてばかりでなく、自己免疫疾患の緩和並びに治療のため特にワクチン として医薬製剤における免疫源として用いることができる。 この文献ではどの残基が置換されたのかについての説明もないし、自己免疫疾患 を治療或いは予防するために有益なボリブチドを得るためにどのアミノ酸が適切 なＷｌ換基どして作用するのかについての説明もない。 発明の要約 上述した研究において前述の欠点を克服することが本発明の目的である。 本発明の他の目的はリンパ球の増殖応答を阻害するために改良された能力を有す るペプチドを提供することである。 さらに本発明の他の目的は、特にリュウマチ性関節炎並びに活動性関節炎のよう な自己免疫疾Φの病理に関連したＴＩＩＢ胞仲介免疫応答による、免疫関連疾、 患から、＠者を保護するペプチドを提供することである。 また別の本発明の目的は移植組繊と器官の拒絶反応を防ぐため免疫的に非特異的 試薬として作用するペプチドを提供することである。 本発明に係るペプチドは、特異的抗原への′ｒプリン球の増殖応答を阻害するこ とができる少なくとも７個のアミノミ！残基を有し、それは式ＴＦＧＬＱＬＥを 有するミコバクテリウム　ラベルクローシス（ＭｙｃｏｂａｃＬｅｒｉｕｍ　ｔ ｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）タンパク賀ｈｓｐ６５の位置１８０−１８６に対応す るが１位置１、８１．−１８３において１個ないし３個のアミノ酸の置換がある ことによって異なっているアミノ酸配列からなり、かつ、実験的関節炎における Ａ２ｂとＡ２ｃクローンのような抗原反応性リンパ球クローンによる認真に対し てｈｓｐ６５と拮抗するものである。 これらの置換は、修飾ｈｓｐ６５の１８０−１８６配列が抗原反応性Ｔリンパ球 、例えばエム、ラベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｔｕｍ　ｔｕｂｅｒｃ ｕｌｏｓｔｓ）に反応性Ｔリンパ球或いはそのエピトープ、好ましくはｈｓｐ６ ５．ないしミニリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）に反応性の１９２３球によって 認識され、かつ、Ｔｍ胞の増殖応答が阻害されのであれば如何なる形も可能であ る。 このように、本発明は１９２３球の特異的抗原への増殖応答を阻害できる少なく とも７つのアミノ酸残基のペプチドをは以下の式を有する： しかし１位１１８１から１８３に１側ないし３個のアミノ酸有し、最も好ましく は７個から９個のアミン！！２残基を有すＦＧＡＱＬＥＬＴ、ＴＡＧＬＱＬＥ、 ＴＡＧＬＱＬＥＬＴの方法に関する。好ましい態様において、自己免疫疾患は関 節炎である。 本発明はまた移植器官或いは組織を移植前および／またはｔｌＩ後に、本発明に 係るペプチードの有効量を患者に投与することからなるところの、患者に移植し たＩＩＩ器あるいは組織の拒絶反応を抑制又は防止する方法を提供する。 本発明はさらに１本発明のあらゆるペプチドに対しても特異的反応性を有するＴ リンパ球系式いはクローンに関し、また免疫仲介疾患、好ましくは関節炎の予防 あるいは抑制におけるそのような細胞の使用に関する。 図面についての簡単な説明 図１はミコバクテリア６５ｋＤタンパク質、ｈｓｐ６５の位置１８０−ｉ８８を 構成するノナペプチドのための２個のアミノ酸置換ネットワークを示す図である 。図１８は単一置換ネットワークを示しており、ここで１８０−１８８配列のあ らゆる残基が１９の異なったアミノ酸の各々によってｉｉ！換されている。図１ ｂは組み合わせ結合ネットワークを示しており、ここで１８０．１８１．並びに １８６での位置での置換が組み合わされている。 図２はＴＮ胞クり−ンＡ２ｃのＩｆｌｔｈ　ｓ　ｐ　６５の１８０−４８８ペプ チドへの！ｉ’ｌｌ激応答と拮抗ペプチドが刺激前に加えられたアラニン置換ペ プチドによる阻害を示すグラフである。 図３はペプチド１８０−１８８ペプチドの漸増する濃度でのＴ細胞増殖のＡ１８ ３による阻害の逆転を示すクラブである。 図４は刺激ｈｓｐ　６５の１８０−４８８ペプチドへのＴ細胞クローンＡ２ｂの 増殖応答と拮抗ペプチドが刺激と同時に加えられた場合のアラニン置換ペプチド によるその阻害を示すグラフである。 図５はＡ１８３の阻害活性の投与量依存性を表す実験の結果を示すグラフを含む 。 図６はミニリン塩基性タンパク質に特異的な脳を髄炎Ｔ細胞クローンであるＺＬ ａの応答がＡ１８３ペプチドによって阻害されることを示すグラフである。 図７はＡ１８３で免疫化或いは免疫化されなかった動物から得られたリンパ節細 胞のＡ１８３のさまざまな投与量への増殖応答を示すグラフである。 与が関節炎の重傷度を減少することを示すグラフである。 図９はペプチド１８０−１８８の単一アミノ酸置換変異体へのクローンＡ２ｂＴ 、ｍ胞のインビトロ増殖応答を示すグラフである。 図１０と図１１はｈｓｐ６５　（Ａ２ｂ）に対応するペプチド１８０−１８８と ＭＢＰ（Ｚｌａ）に対応するペプチド１０２０の単一アラニン置換変異ペプチド へのＴ、ｉｌａりｏ−：ｚＡ２ｂ　（１３ｆｉｔｌｏ）　とＴｉ１ｌ胞系Ｚｌａ 　（図１１）の増殖応答を示すグラフである。ペプチド１８０−１８８シリーズ は約２−３μｇ／ｍＩの濃度ｍ囲で試験され、そしてペプチド１０２０シリーズ は約５０μｇ／ｍｌの濃度で試験された。データは刺激インデックス（ＳＩ）と して表現されたー竺Ａ立旦蕉藍エエ二王崖至上！−− ペプチド非存在下での平均ｃｐｍ 図１２　と図１３は非刺激性単−アラニン置換ペプチド類似体と未修飾１８０− １８８ペプチドとの抗原存在での拮抗を示すグラフである。非刺激性アラニン置 換ペプチド類似体であるペプチド１．８Ｏ−１８８（１２図）とペプチド１０２ ０（図１３）はや」激ペプチド１８０−１８８の添加２時間前に５抗原存在細胞 とＡ２ｂＴＮ胞とともに前培養された。 拮抗は刺激ペプチドｌ　８０−１８８　（０，５μｇ／ｍｌ）の亜最適濃度下で Ｉｆ激した、拮抗ペプチドの種々濃度の存在下での増殖の減少を決定することに よって評価した。非刺激コントロール値は約２００ｅｐｍであった。示された結 果は３つの培地での平均ＣｐＱ１である。誤差は平均値の標準誤差を示す。 図１４はペプチドＡ１８３と同時投与されたときのエム。 ラベルクローシス（Ｍ、ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ　（Ｍ　ｔ　）　）での病気 誘導後の関節炎重症度の減少を示すグラフである。ラットはＰＢＳ　（ｎ＝３７ ）、ペプチドＡ　ｌ　８３　（２５（Ｉ　ｇ／ラット（ｎ＝１８））、あるいは ペプチドＡ　１８４　（２５０μｇ／ｍｌ　（ｎ　＝１９））のいづれかととも に不完全フロインドアジュバント中のＭｔによって協免疫された。結果は各々の グループの平３の予防効果を示すグラフである。ラットは７日前にＰＢＳ／ＤＤ Ａ　（コントロールグループ　ｎ；４）或いは５０μｇペプチド　Ａ　ｌ　８３ ／ＤＤＡ　（Ａ　ｌ　８３グループ　ｎ＝４）そして最初の日（ｄａｙ　Ｏ）に Ｍｔ、／ＩＦＡで免疫された。代表的な実験から得られた結果は各々のグループ の平均関節炎スコアーである。誤差を示す線は平均標準誤差を示す。 好ましいＭ４！ｌｌについての詳細な説明本発明は、ある位置ではアミノ酸が置 換されているが他の位置では置換されていない、ミコバクテリウム　ラベルクロ ーシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）　ｈ　ｓ　 ｐ　６５タンパク質の一部に対応する少なくとも７個のアミノ酸のペプチドが、 インビトロで測定されるようにＴリンパ球増殖応答のならびにインビボでの自己 免疫疾患のような免疫関連疾患のに対する強力でかつ広汎な阻害であることを本 発明者が発見したことに基づいている。 本発明のペプチドは以下の式を有するミコバクテリウムラベルクローシス（Ｍｙ ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）タンパク質ｈｓｐ６５の 位置１８０−１８６に対応するアミノ酸配列からなる少なくとも７個のアミノ酸 基をもつペプチドである： ＴＦＧＬＱＬＥ しかし、位置１８１−１８３で１個ないし３個のアミノ酸置換がある点でそれら のペプチドとは異なっている。好ましくは本発明のペプチドは２０個のアミノ酸 まで有する。最も好ましくは７個ないし９ａｌのアミノ酸を有する。 重要なことはこれらのペプチドが免疫系によって認識され（Ｔｉｔ胞あるいは抗 原存在細胞によって）そして１９２８球が特異的であるところの抗原への１９２ ８球の増殖応答を阻害できることである。この認識と阻害作用のため本発明のペ プチドは抗原反応性Ｔリンパ球による或いは抗原存亡細胞による認識に対する拮 抗剤として用いられる。ペプチドはそのような１９２８球の通常な刺激を阻害し 、さらに自己免疫疾患のような免疫関連疾患から患者を保護する。 特にｈｓｐ６５の、位置１８１と１８３の置換、もつとも好ましくは位置１８３ の置換それも特にアラニンでの置換によってはここで述べた望ましい性質を有し 、免疫関連疾患から患者を保護のために有益であるペプチドが１）られる。 また、下記式を有するモルモントミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）の７２− ８５位に対応するアミノａ記列からなる少なくとも７個のアミノＷ１残基のペプ チドであって’ｌ　Ｉｆないし３個のアミノｍ置換、少なくとも位置７９での１ 個のアミノ酸置換によって天然アミノ酸から異なっているペプチドも本発明の範 囲に包含されのちのと意図されている。 Ｑ　Ｋ　Ｓ　Ｑ　ＲＳ　Ｑ　Ｄ　Ｅ　Ｎ　Ｐ　Ｖこのペプドチビにおいて、好ま しくは少なくとも１個はアラニン置換である。ＭＢＰ配列に対応する好ましいペ プチドは式ＱＫＳＱＲＳＱＡＥＮＰＶをもつ。 本発明の方法に有益である置換ペプチドの同定は、関節炎開運ラントＴ側胞クロ ーンＡ２ｂとＡ２ｃによって例証されるように、インビトロのＴＩ胞増殖応答を 阻害する能力を試験することによって容易に行うことができる。 ここで用いられる用語″免疫関連疾患（ｉｍｍｕｎｅ−ｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｅ ａｓｅ）　”は免疫系が疾患の病理発生に関与している疾患あるいは免疫系の適 当な刺激が疾患から保護されている疾患を意味している。本発明に係わる免疫関 連疾患の好ましい例硬化症、全身性エリテマトーデス、自己免疫性甲状腺炎（橋 本甲状腺炎）、グレーブス病５炎症性腸疾患、自己免疫性葡Ｗ膜ｗｉ腹炎、そし て多発性筋炎等があげられるが、これらに限定されるものではない。 本発明に従って、関節炎特異的Ｔリンパ球クローンであるＡ２ｂ並びにＡ２ｃの ような免疫関連疾患と関連しているＴ細胞による！！！臓のためのミコバクテリ ウム　ラベルクロス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ）　、天然ミコバクテリウムラベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　 ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）　ｈ　ｓ　ｐ６５タンパク質、或いはその天然ペプ チド１８０−１８８と効果的に拮抗できるペプチドが提供される。他の実施例に おいて、ペプチドはＥＡＥ誘導性でかつＭＢＰ特異的Ｔ細胞系であるＺｌａによ る認識のためＭＢＰと拮抗する。 好ましくは、本発明のペプチドは、置換ｈｓｐ６５ペプチドであって、Ａ２ｂと Ａ　２　ｃ　ＴＪＢ胞クコクローンる認識のため天然ｈｓｐ６５ペプチド１８０ −１８８と効率的に拮抗でき、そのクローンによる天然ｈｓｐ６５誘導、あるい は天然ペプチド１８０−１８８誘導増殖の阻害として測定される。 最も好ましい態様は位置１８３　（Ａ１８３）がアラニンであるｈ　ｓ　ｐ　６ ５の１８０−１８６あるいは１８０−１８８ペプチドである。そのような置換は 、Ｔ細胞への結合、おそらく、Ｔ細胞リセプタ−（ＴＣＲ）、抗原存在細胞のＭ 　ＨＣ分子或いは両者に対してする結合にとって特に効果的な拮抗剤を創製する 。Ａ１８３ｆｔ換はまた関節炎特異性Ｔ！胞の増殖と活性化を阻害することに特 に効果的ペプチドを創製する。 加えて、その免疫原性（実施例参照）のため、Ａ１８３は、明らかにインビボで 有害な自己免疫応答を妨げ特異的なＴ細胞を誘導する。それ故、Ａ１８３は筆に 拮抗ペプチドとして考慮されるのでなく、″拮抗剤−修飾剤（ｃｏｎｎｐｅｔｉ ｔｏｒ−ｍｏｄｕｌａＬｏｒ）　”ペプチドとして考慮される。 用語″関節炎特異Ｔｍ胞（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ　Ｔ　ｃｅｌ ｌ）″は、関節炎を誘導すること、関節炎をワクチン化すること、６．いはその 他には疾患特異的に関節炎の誘導、維持もしくは抑制を修飾するＴ細胞の能力に よって関節炎と特に関連している、全ての１９２８球、Ｔリンパ球系或いはクロ ーンを意味するものである。特に、関節炎特異Ｔ細胞はエム。 ラベルクローシス（Ｍ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）であるｈｓｐ６５または 関節炎に関連するｈｓｐ６５のあらゆるアミノ酸配列のような抗原とインビトロ 或いはインビトロでの免疫反応性を有する。 Ｔ細胞阻害活性をもたらす置換の例としてはアラニンが下記のように置換された ものを含む： ″′′ペプチド１８１”　−（位置１８１でＦ−一＞Ａ；′″ペプチドＡ１８２ ″′−（位置１８２でＧ−−＞Ａ；のほんのいくつかがＴ細胞クローンの活性を 刺激できる。関節炎発症性Ａ２ｂクローンと保護性Ａ２ｃクローンは天然並びに 置換ペプチドへの応答における細かい特異性においては区別を示さなｌ／×これ らＴ細胞クローンの両者は同−ＴＣＲを有すると結論される。それ故、クローン のインビボ反応性における違いはＴＣＲ特異性に依存してない、例えば、別のリ ンフ才力イン生成のような抗原結合後誘導されるイフエクター（ｅｆｆｅｃｔｏ ｒ）経路における差異に起因すると結論される。 わずか数個の置換ペプチドが刺激活性を保持しているという事実はこのペプチド のβシート構造に起因していると考えられる（ｖａｎ　ｄ、ｅｒ　Ｚｅｅ、　Ｒ ，ｅＬａｔ上述）、、このｍ造はＭＭＣ分子自体（抗原存在細胞（ＡＰＣ）の場 合）と反応性Ｔリンパ球のＴＣＲとの相互作用においである程度の臨界条件が各 々の舛基に与えられているように考えられる。 表１はミコバクテリア　６５ｋＤの１８０−１８６アミノ酸配列を有する。Ｈ３ Ｐ６５類のタンパク質の配列比較を示す。この表において、異なったタンパク質 の一次配列はミコバクテリア　６５にタンパク質の１８お０−１８８配列に合致 するように配列しである。 表　１ ミコバクテリア６５ＫＤ１８０−１８６アミノ酸配列とｈ　ｓρタンパク質の配 列比較文献：　１．５ｈｉｎｎｉｃｋ、　Ｔ、Ｍ、　Ｊ、　ｏｆ　ＢａｃＬｅｒ ｉｏｌ、　１９８７゜１６９：Ｈ）８ｔ）；２．　Ｔｈｏｌｅ、Ｊ、Ｅ、Ｒ，ｅ ｔ　ａｔ、、　Ｍｉｃｒｏｂ。 Ｐａｔｈｏｇｅｎ、１９８８．４ニア１；　３．Ｍｅｈｐａ、　ｖ、ｅｔ　ａｌ 、、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａ１ｌＡｃａｄ、　Ｓｃｉ、　（ＵＳＡ＞１９８６．８３ ニア０１３；　４．ＨｅｍｍＨｅｍｍ１ｎ、　Ｓ、　ｅＬＱｌ、、　Ｎａｔｕｒ ｅ　１９８８．３：１１：３３０；５．　Ｖｏｄｋｉｎ、　Ｈ，Ｍ、　ｅｔ　ａ ｔ、、　Ｊ。 ＢａｃＬｅｒｉｏｌ、　１９８８．１７０：１２２７；　６、Ｒｅａｄｉｎｇ、 　Ｄ、Ｓ、　ｅｔ　ａｌ、。 Ｎａｔｕｒｅ　１９８９．３３７＋６５５；　Ｊｉｎｄａｌ、　Ｓ、ｅｔ　ａｌ 、、　、％ｌｕ１．　Ｃｅ１ｌ。 Ｂｉｏｌ、、１９８９．９：２２７９ ミコバクテリア　ｂ、５ｐ６５と約４０−６０％全体的な相互関係があるにもか がねらず、１８０−１８６配列はたった３つのアミノ酸が同一（Ｊ＋ｎｄａｌ　 ｅｔ　ａｌ、、）なだけであるから比較的非保存的と思われる。ヒトＰＩ配列に 基づいた合成ペプチドは、予期されたようにクローンＡ２ｂ、１１２びにＡ　２ 　ｃに非刺激性である。 しかしながら表１に示されたように、異なった生物の６５に、　Ｄ熱ショックタ ンパク質の１８０−１８６配列に対応する配列を有することが知られている単一 置換ネットワークの結果と比較すると１位置１８０がＴ−−＞Ｓ、１８１がＦ− −〉Ｌそして１８６がＥ　−−＞Ｄ　に置換されたより刺激性のある置換は原核 性生物並びに真核性生物両者の６５ｋＤ熱シヨツクタンパク質において同じ位置 （前表でボックスで囲った残基）に存在することが見いだされたところのアミノ 酸にだけ専らあることは注目される。９種の生物のうち７つにおいて、スレオニ ンあるいはセリンが位置１８０に存在してぃた。全９種の生物において、フェニ ルアラニン或いはロイシンのみが１８１に存在していた。そしてグルタミン酸或 いはアスパラギン酸のみが位１１８６に存在していた。 アラニンで１８０−１．８８ペプチドの天然配列を置換することに加えて、他の アミノ酸残基も同様に用いられる。タンパク質化学と構造についての詳細な記載 は以下の文献を明細書の記載として引用する（Ｓｃｈｕｌｚ、　Ｇ、Ｅ、ｅｔ　 ａｌ、、　Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓｏｆ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　５ｔｒｕｃｔｕｒｅ、 　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９７８；Ｃｒｅ ｉｇｈＬｏｎ、　Ｔ、Ｅ、、　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：　５ｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎ ｄ　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ、　Ｗ、Ｈ，Ｆｒｅｅｍａｎ　＆ 　Ｃｏ、、　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、　１９８３）　＊本発明のペプチド においてなされる置換の型はペプチドのβシート構造を破壊せず、そして宿主細 胞のＭＭＣ分子と相であるアラニンに似たアミノ酸が好ましく、例えばセリン、 スレオニン、あるいはグリシンが挙げられる。しかしながら他のアミノ酸も置換 基として排除されるものではない。 ＴＩＩ胞増殖応答と免疫疾患を防止または阻害するのに利用できるペプチドの機 能を少なくとも部分的に保持している「化学誘導体」を包含するものである。 本発明のペプチドの″′化化学誘導体心は通常のペプチド部分ではなくその他の 化学分子部分を含む。ペプチドの共有結合性修飾物も本発明の範囲内に含まれる 。そのような修飾物は選択された側端残基と反応する有機誘導試薬をペプチドの 狙ったアミノ酸残基と反応することによって分子中に挿入することができる。多 くのそのような化学誘導体そしてそれらを作る方法が当該分野内では良く知られ ている。限定されるものではないが。すなわち、米国特許３，９６９，２８７、 ３．６９１．０１６．　４．１９５．］、２８．　４．２４７．６４２、４，２ ２９．５３７そして４，３３０．４４０　：　（Ｔ、Ｅ、Ｃｒｅｉ、ｇｈｔｏｎ 、ＰｒｏＬｅｉｎｓ：　５Ｌｒｕｃい」ｒｅ　ａｎｄｍｏｌｅｃｕｌｅ　Ｐｒｏ ｐｅｒｔｉｅｓ、Ｗ、Ｈ，Ｆｒｅｅｍａｎ　８　Ｃ１）、、Ｓａｎ　Ｆ＋−ａｎ ｃｉｓｃｏ。 （１９８３））。 同様に本発明のペプチドの塩が本発明の範囲に含まれる。 ここで用いられるような用語塩（ｓａｌｔｓ）　＋＋とはカルボキシル基の塩と タンパク質の或いはペプチド分子のアミノ基のおよび例えばトリエタノールアミ ン、アルギニン、或いはりシン、ピペリジン、プロカイン等のアミンと形成され る有機塩基との塩を包含する。酸添加塩例えば＠酸、硫酸のような鉱酸との塩な らびに例えば酢酸或いは修酸のような有機酸との塩を包含する。 同様に本発明の範囲に、当該分野でよく知られているように、さまざまな支持体 或いは固定マトリックスに結合接続された前記ペプチドも包含される０本発明の ペプチドをインビボで酵素的分解すればそのペプチドは比較的短時間の寿命にな ることは理解される。そのような分解を防ぐ一つの方法はＤアミノ酸を含む合成 ペプチドを作ることであろう。 一つの可能な修飾は、溶解性に影響を及ぼす分子により、つまり、親木性残基例 えばセリン、或いは電荷を有する残基例えばグルタミン酸を〆付加することによ ってペプチドを拡張するためである。さらにペプチドは 例えば、ジスルフィド架橋を形成するためにシスティン残基を付加することによ って、望ましい配慮を安定にまたは保存する目的で拡張することもできる。 ペプチドを修飾する他の理由は投与後それを検出できるようにするためであろう 。これは直接に或いはチロシン添加後に続いて放射性ヨウドアイソトープで標識 を付けることによっておこなうことができる。 本発明に係る阻害ペプチドのための第１の要求は、ペプチドが天然或いは他の刺 激タンパク質或いはペプチド（天然ｈｓｐ６５或いはそれらから誘導されたや１ 激ペプチド）との結合のために十分に拮抗しうる程度に十分な親和性を持った５ 例えばＡ２上ならびにＡ２ｃのようなＴ１１胞或いは抗原存在細胞によって認識 されるようなＴＣＲおよび／またはＭＨＣ分子のためのりガントであることであ る。 ここで述べたペプチドに加えて、本発明は拮抗剤−修飾剤ペプチドに特異的な１ ９２８球を提供する。ラントにおいて類似するＡ４８３特ＪｉｌＴ細胞系の例は 実施例ＸＩＶで述べるＡＴＬ系がある。そのような細胞は、後述するようにイン ビボでの適当な免疫化とインビトロでの再や１激によって生成される。 本発明のペプチドに特異的であるヒトＴ［胞も本発明の範囲に含まれる。好まし くは関節炎のような免疫関連疾患の予防或いは治療を受けている患者なとの個体 から由来したものがよい。好ましくはそのようなＴ細胞系は予防的或いは治療的 効果を上げ、かつ如何なる潜在的な病的活性をも不活性化するような方法で処置 される。 自己免疫に対するワクチン化に適合するようにする方法或いは細胞を不活性化す るための方法は当該分野では良く知られており、それらの多くは本発明者等の幾 人かによって開発されてきた。そのような方法としては、静水圧での処置、グル タルアルデヒドのような化学架橋試薬での処置、サイトカラシンＢのような細胞 骨格破壊試薬での処置或いは低投与量の細胞での処置を含む（米国特許４，６３ ４．５９０そして４．７１６．０３８；コーエン、アイ、アール等（Ｃｏｈｅｎ 、　Ｉ。 Ｒ，ｅｔ　ａｌ）ヨーロッパ特許公ＮＥＰ２９１０４６；ニーエン５アイ、アー ル（Ｃｏｈｅｎ、　ＩＲ−ｅｔ　ａｌ）ヨーロッパ特許公報ＥＰ２９１０４６　 ；　Ｃｏｈｅｎ、　１．Ｒ，ｅＬ　ａｔ　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｒｅｖ、　９４： ５（１９８６）；　Ｌｉｄｅｒ、Ｏ，ｅＬ　ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ、Ａｃａ ｄ、Ｓｅｔ、ＬＩＳＡ８４：４５７７（１９８７）；　Ｌｉｄｅｒ、　Ｏ，ｅｔ 　ａｌ、、　５ｃｉｅｎｃｅ　２３９：　１８１（１９８８））。これら全ての 参照文献は本発明の記載として引用する。 ＡＴＬ、ＩＩ胞によって例証されるように本発明の拮抗剤−修飾剤に対しての特 異的なＴｍ胞と、疾患誘導Ｔ細胞（Ａ２上のＴ細胞）との間の抗原特異性レベル （恐らくＴ細胞レセプターレベルでの）での密接な関係のために１本発明のＴ細 胞は疾患誘導Ｔ、［胞の分配されたＴ細胞リセプターイデイオトープに対して指 令する調節性抗イデイオタイプあるいは抗クロノタイピンク応答を誘導すること が期待される。 疾患を誘導する（たとえば関節炎性）Ｔ３１Ｂ胞の発生あるいは作用の阻害によ って、そのような調節応答は疾患の発症を防ぐことができる。 本発明によるペプチドは免疫関連疾患を持っているかあるを防ぎうるに十分な量 が投与される。 本発明の範囲内に含まれると意図される免疫関連疾患には。 移植片の拒絶あるいは移植片対宿主疾患が関与する疾患がある。つまり移植臓器 の拒絶を抑制あるいは防ぐために、例えば本発明のペプチドは、特にＡ１８３ペ プチドは移ＭＲ官の移植前もしくはｔｉｉに、またはその両方において臓器移植 受容者に投与される。用語″直後いｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ　ａｆｔｅｒ）　”と は、移植後最初の数時間以内に投与されはじめることを意味して用いられる。し かしながら、この用語は、不当なほどの実験をすることなしに当業者であれば容 易に決定される移植後の処置期間を制限するものではない。 骨髄移植に続いて、あるいは妊＃！（母体の分配反応性Ｔ細胞が胎児中に入るこ とができる）に関連して起こりうる移植対宿主疾患において、外来組繊適合性抗 原を認識する１９２８球は、供与体から受容体へ移植され、受容体と反応すると 。 病的状態または死さえも導きうる。さまざまの炎症結果を導くことになる（例え ばＲｏｉｔｔ、　１．　ｅｔ　ａｔ、、　ｒｍｍｕｎｏｌｇｙ、　Ｔｈｅ　Ｃ。 Ｖ、　Ｍｏ５ｂｙ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｇｏｗｅｒ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｐｕｂｌ ｉｓｈｉｎｇ、　Ｌｏｎｄｏｎ。 １９８５を参照）、、つまり、一つの実施例において、本発明のペプチドを移植 片対宿主反応に感受性のある患者、つまり、骨髄移植を受けた受容者また感受性 のある妊娠中の婦人に、移植片による、宿主中での外来細胞のＢ！ｌを妨げるた め投与して、それにより移植片対宿主反応を処置している。 本発明の組成物の投与のための投与量の範囲は、例えばインビトロでのＴｍ胞増 殖あるいはインビボでの遅延性過感受性応答によって測定されたような刺激ペプ チドへの免疫応答を本質的に抑制しあるいは阻害し、かつ、免疫関連疾患が有意 に処置される量であればよい。投与量は、一般的免疫抑制、アナフィラキシ−反 応、望ましくない交差反応のような副作用を起こす程に多くてはならない。 本発明のペプチドの免疫関連疾患を処置するために用いる有効投与量は体重１ｋ ｇ当たり約１ｎｇから１００ｍｇ／ｋｇの範囲である。好ましい投与範囲は約Ｌ ｏｎｇから　１０ｍｇ／　ｋｇの間である。 さらに好ましい投与範囲は約１１００ｎと１ｍｇ／ｋｇの間である。有効な１９ ２８球の投与量は値々のＴ細胞系、患者、患者の臨床状態の関数であって、モし て側胞数は体重１ｋｇ当たり１０”＠から約１０９＠までの範囲で変化してよい 、投与量は受容者の年齢、性、健康状態、受容者の体重、もしあれば同時処置の 種類、処置の頻度そして望まれる効果の性質に依存するであろう。 投与経路は静脈注射、皮下注射、動脈内注射、筋肉的注射、吸入、腹腔内投与、 経鼻、Ｍ腔内投与、皮肉投与、経皮投与。 あるいはのようなその他の既知経路があげられる。 疾患あるいは障害に対する本発明の治療的使用は、受は入れられた処置／Ｍ埋を 使う当業者によって最もよく達成される。 そのような原理は当該分野で良く知られており、例えば、下記に記載されている 。 Ｆ３ｒａｕｎｗａｌｄ、　ｅｔ　ａｔ、、　ｅｄｓ、、　Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ 　Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｑ　ｏｆ＋ｔ＋ｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、口むｈ 　Ｅｄ、、　ｌｉｌｃＧｒａｗ−ｈｉｌｌ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒ′ｋ。 Ｎ、Ｙ、　ｔｌ’１ｇ７）。 それ自体が薬理学的に活性のある本発明のペプチド及びＴ細胞に加えて、医薬組 成物は医薬的に用いられうる製剤２に活性化合物の代謝を加工するのを促進する 賦形剤及び補助剤からなる適当な医薬に受容できる適切な担体を含む。 本発明の医薬組成物は発明の組成物の有益な効果が発現されるあらゆる動物に投 与される。そのような動物種としては当然のことながらヒトがあるが、本発明は これに何等副限されるものではない。 本発明の医薬組成物はその意図された目的を達成するため、例えば上述の経路に よって投与することができる。他の方法としであるいは同時に経口によって投与 することができる。 ペプチド、Ｔ細胞そして医薬組成物は丸塊投与によっであるいは時間を掛けての 逐次点滴によって非経口的に投与できる。移行性または生活性を増加させるため 、ペプチドは当該分野で知られた方法と化合物をもちいてリボゾーム中に取り込 ませることができる。 タブｌ／ットあるいはカプセルのように経口的に投与できる製剤、生薬のような 直腸に投与されうるの約０．０（’）１％から約９９％、そして注射あるいは経 口投与のため溶液の形の製剤は賦形剤とともに約０．０１から約９５％の活性成 分を含む。 適当な賦形剤としては、特に糖類例えばラクトースもしくは蔗糖もしくはマンニ トール、もしくはソルビトール、セルロース製剤および／または＃Ｉ酸カルシウ ム例えば燐酸トリカルシウム或いは燐酸水素カルシウム並びにデンプン粉、例え ばトウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼ ラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロー ス、カルボキシメチルセルロースおよび／もしくはポリビニルピロリドンを用い て作られたスターチペーストのような結合剤がある。経口的に用いられる他の医 薬製剤としてはゼラチンで作られたブツシュフィツト（ｐｕｓｈ−ｆ　ｉ　ｔ） カプセル、ゼラチンおよびグリセロールやソルビトールのような可塑剤でソフト カプセルや封入カプセルが含まれる。ブツシュフィツトカプセルは、ラクトース のような充填剤、デンプンのような結合剤モして／あるいはタルクやステアリン 酸マグネシウムのような滑剤そして任意に所望により安定剤と混合し顆粒の形で 活性化合物を含んでいる。柔らかいカプセルにおいては、活性化合物は、′ｒＸ 、いは液体パラフィンのような適当な液体に溶解あるいは懲濁させるのが好まし い。更に安定剤を加えることもできる。 直腸で用いられることが可能な製剤品としてはたとえば覚剤基剤と活性化合物の 一つ或いはそれ以上の混合物からなる坐剤を含んでいる。適当な覚剤基剤として は例えば天然あるいは合成トリグリセリド、あるいはパラフィン系炭化水素が挙 げられる。加えて活性化合物と基剤との混合物からなるゼラチン直腸カプセルを 用いることも可能である。可能な基材・＼−人材料としては例えば、液体トリグ リセリド、ポリエチレングリコールあるいはパラフィン系炭化水素を挙げること ができる。 非経口投与のための適当な調剤としては例えば水溶性塩、のような水溶性形のペ プチドの水溶液を含む、更に、ペプチドの懸濁液は適当な油性注射用懸濁液とし て投与することができる。適当なＷｔｎ溶性溶 媒あるいは賦形剤としては脂肪油５例えばゴマ油、或いは合成脂肪酸エステル、 例えばオレイン酸エチル或いはトルグリセリドを含む。水性注射用懸濁液は懸濁 液の粘性をあげるような物質を含む、たとえばナトリウムカルボキシメチルセル ロース、ソルビトール、モして／あるいはデキストランを包含する。懸濁液は所 望により安定剤を含むことができる。 ペプチドは注射による投与のため医薬的に受け入れられる非経口用賦形剤を用い て調剤される。これらの賦形剤は非毒性であって治療的効果があり、そして数多 くの調剤がレミントン（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ ｌ　５ｃｊｅｎｃｅｓ上述）に記載されている。賦形剤の例は水、食塩、リンガ −液、デキストコース溶液そしてハンクス平衡＠類溶液等が挙げられるが。 これらに限定されるものではない。 本発明に係る調剤はまた等張性、生理的ｐＨそして安定性を維持するための物質 のような付加的な小量含有していても良い。 本発明のペプチドは好ましくは凝集体及び池のタンパク質が実質的に含まれてい ない精製された型に調剤されるのが好ましく、約１．０ｎｇ／ｍｌから１００ｍ ｇ／ｍｌの濃度で調剤するのが好ましい。 前述した如く１本発明を一般的に記述したが、本発明は以下の実施例によってよ り一層容易に理解されるであろう。ただし、それらの実施例は例示として提示し たものであって、特記なき限り本発明を何等制限するものではない。 Ａ２ｂ及び２ｃのヘルパーＴ細胞クローンの分離、維持並びに性質については前 述（ＨｏｌｏｓｈｉＬｚ　ｅｔ　ａｌ上述）した。 要約するとエム、ラベルクローシス（！４．　Ｌｕｂｅｒｃｕｌ二）に反応性の Ｔ、１８胞系Ａ２は、始め、インコンプリートフロインドアジュバント（ＩＦＡ ）中のエム、ラベルクローシス（シーｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）で免疫された シービスラットの排水したリンパ節から分離された。　Ａ２系の継代培養は関節 炎起源性Ｔ細胞クローン、Ａ２ｂ、並びに保護されたＴＲｍ胞クロりンＡ２Ｃの 存在を明示した。両クローンはｈｓｐ６５の１８０−１８８ＩＩｉ基を含む同一 エビトープを認識する。長時間、インビトロで維持するため、Ｔ細胞クローンは 熱殺菌したエム、ラベルクローシスＣＭ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）で３日 間周期的に再刺激を行った。そして１週間、１０％牛脂児血清（Ｆｅ２）　、　 ｌ　Ｏ％ＥＬ−４上清（種々のＴＮ胞成長因子を含有）、２ｍＭグルタミン、抗 生物質ならびに１％非必須アミノ酸を含むダｌレベソコ峰飾イーグル培地（ギブ コ）のイスコブ修飾培地中で増殖された。 脳炎起原性ＺｌａヘルパーＴ細胞系の分離、維持法ならびに性質は前述した。要 約すると１モルモットミニリン塩基タンパク質（ＭＢＰ）のアミノ酸配列７２− ８５に反応性のＴ細胞１ｋＺｌａは、主にＣＦＡ中のモルモットＭＢＰを、各々 足せき（ｆｏｏｔ　ｐａｄ）に免疫した後９日目に排水したシービスラットのリ ンパ節から分離した。 ヘルパーＴＩａｌ胞系ＡＴＬはエム、ラベルクローシス（Ｍ、−ｔｕｂｅｒｃｕ ｌｏｓｉｓ）　（Ｈ３７Ｒａ　）の４　ｍｇ／ｍｌを含むＣＦＡ中の１００μｇ ／ｍｌのペプチドＡ１８３で後部足せきに免疫した後１００日目シービスラット の膝下リンパ節から分離した。 Ｔ細胞系は、ＡＰＣ類のように放射線処理（３０００ラド）した胸腺で、クロー ンＡ２の場合には１ｏμｇ／ｍｌの熱殺菌Ｍしで、Ｔ細胞系Ｚｌａの場合には１ ０　μｇ／ｍｌのＭＢＰ、あるし）はＴＲＩ胞系ＡＴＬ系の場合にはｌ　Ｏμｇ ／ｍｌペプチドＡ１８３で３−４日間周期的に再１’１Ｊｌｉを行った。そして ６カｉら７日間、１０％ＦＣ３，１０％ＥＬ−４上清（Ｉ　Ｌ　２１７にトｔ、 、テ）、２ｍＭグルタミン、２−ＭＥ、抗生物質ならびに１％非必須アミノ酸を 含むダルベンコ修飾イーグル培地（ギブコ）のイスコブ修飾培地中で増殖された 。 ９！ＬＬ立旦量 Ｔ細胞系の増殖応答は最終１８−２０時間の培養微細胞中に取り込まれた’Ｈ− チミジンを測定することによって分析した。細胞（２Ｘ１０’！胞／穴）は平底 ９６穴ミクロタイタープレート中で、抗原を有する細胞として放射線Ｗ＊された （１５００ラド）同系胸腺（１ＸＩＯ’細胞／穴）並びに種々の量の抗原の存在 下で４日間培養された。アイソトープの取り込み後、Ｉ［胞は収穫されそして常 法に従ってカウントされた。 拮抗分析 天然ペプチド１８０−１８８の認ＩＩ（およびＴ細胞の刺激）に対するペプチド の拮抗力を測定するため、拮抗ペプチドがＴ細胞と放射ＩＩ臓胸腺及び応答細胞 を含む培地に、刺激ペプチド１８０−１８８の添加１−２時間前に加えられた。 拮抗活性は拮抗ペプチドの一定濃度の存在下でのポジティブ増殖を達成するのに 必要とされる刺激ペプチドの濃度か、或いは刺激ペプチドの亜最適濃度（典型的 には０．５μｇ／ｍｌ）によって刺激される増殖の有意な減少を達成するのに必 要とされる拮抗ペプチドの濃度のいずれかを決定することによって測定された。 大ｔの合成ペプチド１８０−１８６．ＴＦＧＬＱＬＥＬＴ。 ペプチドＡ１８３．ＴＦＧＡＯＬＥＬＴ、ペプチドＡ１８４、ＴＦＧＬＡＬＥＬ Ｔ、ペプチド１０２０．ＱＫＳＯＲＳＱＤＥＮＰＶ、　ペプチド１０２８、ＱＫ ＳＱＲ５ＱＡＥＮＰＶ。 そしてペプチド１０２９、ＱＫＳＱＲ５ＱＤＡＮＰＶは固層技術によって合成さ れた（Ｖａｎ　Ｅｄｅｎ、　Ｗ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｎａｔｕｒｅ１９８８、３ ３１：１７１；　Ｓｔｅｗａｒｄ、　Ｊ、Ｍ、　ｅＬ　ａｌ　、、固層ペプチド 合成（パースケミカル　カンパニー、ロックフォード、イリノイ、１９８４）） 。ミコバクチリアル６５ｋＤタンパク質の１８０−１８８アミノ酸配列であると ころの非ペプチドから誘導された川−アラニン置換ペプチド誘導体はペプスキャ ン法（Ｇｅｙｓｅｎ、　Ｈ，Ｍ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｒｏｃ、Ｎａ目、　Ａｃ ａｄ、　ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　１９８４、８１＋３９９８：　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔ ｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　ｌ９８５．８２：１７８））によって合 成された。続いてその固層支持体からＴｔ離され。 前述したようにしてＴ細胞増殖分析に用いられた（ｖａｎ　ｄｅｒＺｅｅ　ｅｔ 　ａｌ前記）、。 モルモットＭＢＰの７２−８５アミノ酸配列であるペプチド１０２０から誘導さ れた、単一アラニン置換ペプチド誘導体は自動化同時性多層ペプチド合成（ＳＭ ＰＳ）によって調製された。ＳＭＰＳのセットアンプは標準オートサンプラー（ ギルソン　モデル２２１）を用いて展開された。３０ペプチドの同時合成のため に、６倍モル過剰量のＰｆｐ−活性化アミノｒＩｉ（セリンとスレオニンのＤｈ ｂＬ）を有する標準Ｆｍｏｃ−化物と、触媒としてＨｏｂＬが使われた。ペプチ ド類はＣ−末端アミドとして７．５ｍｇ１！Ｉｎ　／ペプチドから得られた（　 ０．２１ｍｅｑ／ｇ。 ＰＡＬ　７Ｍ樹脂、ミリゲン社１２）、ペプスキャンあるいはＳＭＰＳ法によっ て合成されたインビトロで測定される非阻害並びに阻害活性は、一般的固層合成 によって１１１１１されるアラニン置換ペプチド、Ａ１８４．１０２９並びにＡ １８３．１０２８で確認された。熱殺菌ミコバクテリウム　ラベルクローシス　 （Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）（ＭＬ）Ｈ３７Ｒ ａはＤ　Ｉ　ＦＣＯ研究所（デトコイト、ミシガン）から得られた。６５ｋＤミ コバクテリウム　ボビス（翌卯μｈｃｔｅ■ｕｍ　ｂｏｖｉｓ）　Ｂ　ＣＧ　Ｘ ｆＬ換えタンパク質がクローンされ、先に述べたようにして精製された（Ｔｈｏ ｌｅ　ｅｔ　ａｌ、、　１９８７；　Ｖａｎ　Ｅｄｅｎ　ｅｔ　ａｌ　、、　１ ９８８）。 ２系統のアミノ酸置換″ネットワーク″が調製された。″単一置換ネットワーク ″においては１８０−１８８配列の各々の残基は、各々１９の異なったアミノ酸 によって置換された（図１ａ）。″結合ネットワーク″においては、位置１８０ ．１８１並びに１．８６での置換が結合された（図１ｂ）。 その固層支持体からペプチドを分離するため（Ｖａｎ　ｄｅｒＺｅｅ、　Ｒ，ｅ ｔ　ａｌ、、上記）、７０％ギ酸が、ペプチドのＣ−末端から続くトリペプチド Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの一部分であるＡｓｐ−Ｐｒｏ結合を切断するために使 われた。ギ酸は蒸留によって除去され、残った乾燥ペプチドは、さらにｗＩ！さ れず直接に溶解された。拮抗ペプチドの活性は一般的固層技術によって合成され るアラニン置換ペプチドＡ１８３並びにＡ１８４で確認された。 実施例１■ ペプチドＡ１８３はＴ細胞のクローンにおける天然ペプチド１８０−１８８のイ ンビトロ増殖応答を阻害する１゛細胞クローンの増殖応答と合成ペプチドの天然 刺激ペプチド１８０−１８８に対する合成ペプチドの拮抗力が上記したようにし て測定された。 図２はアラニン置換ペプチドの存在下もしくは非存在下における　天然ペプチド １８０−１８８の亜最適濃度でのＡ２Ｃ細胞の応答を示す、Ａ１８３（位置１８ ３でアラニンで置換されたｈｓｐ６５　１８０　１８８　）のｔｏμｇ／ｍｌを 用いてＴ細胞とＡＰＣを前培養すると応答はほとんど完全に阻害された。Ａ１８ １も同様に作用は弱いが阻害した。位置１８２でアラニンにＷｌ喚されたペプチ ドはほんの少しの阻害を示した。位置１８０．１８４，１８５、或いは１８６が 置換されたペプチドは刺激ペプチドへの応答を阻害できなかった。 観察された阻害が選択されたアラニン置換ペプチドの毒性効果に起因する可能性 を除外するため、阻害ペプチドは刺激ペプチド１８０−１８８の濃度を漸増させ た条件Ｆで試験された。図３から見られるように、刺激１８０−１８８ペプチド は投与量依存性に阻害を乗り越える。それゆえに、置換ペプチドによる阻害は投 与量依存性拮抗の規則に従う、　さらに、Ｔ、ＩＩ胞ママイトジエンコンカナバ リンＡ（ＣｏｎＡ）への応答は＋　１８０−１８８応答を阻害できる濃度下での アラニン置換ペプチドの存在に影響されなかった。 拮抗ペプチドが前培養無しに刺激ペプチドと同時に加えられた時２、へ１８３は Ａ２　ｂｉｌｌ胞による認識と拮抗するが、しかし　Ａ１８１はしないことを図 ４は示す。 図５はＡ１８３の阻害活性の投与量依存性を明らかにする別の実験を示す。図５ ａ−５ｃにおいて、Ａ２ｂ細胞はＡＰＣと一定濃度のＡ１８３（１０μｇ／ｍｌ ）とともに培養した。１−２時間の前培養後、刺激抗原を０．１−１０μｇ／ｍ ｌの漸増する濃度に加えた（図５ａ：ミニペプチド１８０−１８８５ｂ：に固定 されそしてＡ１８３の濃度は］０と０．１μｇ／ｍｌの範囲で変化させた。拮抗 は上述したようにして測定された。 図５８はＡ　１８３　（１０ｉｔ　ｇ／ｍｌ）の一定濃度下での天然ペプチド１ ８０−１８８のポジティブ応答が刺激ペプチドの高濃度（１０μｇ／ｍｌ）での み観察されたことを示す。等濃度で阻害ペプチドＡ１８３は非常に効果的拮抗剤 である。 図５ｂと図５０は、全ｈｓｐ６５タンパク質（”６５ｋＤ”と言う）と殺菌され たエム、ラベルクローシス（Ｍ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）　（Ｍｅという ）へのＴ細胞の増殖応答がＡ１８３によって効果的に阻害されたことを示す。 図５ｄ、５ｅ並びに５ｆは、天然ペプチド１８０−１８８、ｈｓｐ６５そしてて 全エム、ラベルクローシス（シＬｕｂｅｒｃｕｌを示す。 本実施例において、Ａ１８３によって介在される阻害効果におけるＴｉ胞特異性 と疾患特異性が試験された。 アレルギー性脳を髄炎（ＥＡＥ）の実験ラットモデルにおいて、疾患はミニリン 塩基性タンパク質（ＭＢＰ）を用いた免疫化あるいはＺ　１　ａ　（Ｂｅｎ−Ｎ ｕｎ、　Ａ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ。 ＋２９：３０３（１９８２））のようなＭＢＰ反応性Ｔ細胞系の播種によって誘 発される。 ゛ｒ細胞系Ｚｌａの細胞は放射性ａｍ、された胸腺（ＡＰＣ）とＡ１８３（＋ｏ μｇ／ｍ１．）の一定濃度で前培養した。 前培養１−２時間後、刺激抗原、ミニリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）は０．１ −１０μｇ／ｍｌの濃度で加えられた。拮抗は上述したようにして行われた。 図６はＺｌａのＭＢＰへの増殖応答がＡ１８３によって阻害されることを示す。 Ｚｌａｌｌ胞系はＭＢＰのアミノ酸残基６８−８８を認識し、この配列はｈｓｐ 　６５の１８０−１８８残基とは配列的或いは構造的相似性が無いことが知られ ている。 それゆえ、Ａ１８３は抗原存在下で関与するＭＨＣクラスＩ＋分子（Ｒｔ　−Ｌ 　Ｂローカス産物）レベルでの結合への拮抗によって関節炎特異性Ｔ細胞クロー ンと脳を髄炎Ｔ、ＩＩ！胞系の両者を阻害するように思える。 拮抗ペプチドと阻害ペプチド、Ａ１８３が抗原存在細胞のＭＨＣ分子に結合し、 そしてそこに存在するか否か試験するだめに実験を行った。そのような結合とそ こでの存在はペプチドＡ１８３でインビボでのラットの免疫化がインビトロで応 答できるリンパ節細胞の発生を導くことを示すことによって推論される。 シービスラットはＩＦＡ中Ａ　ｌ　８３　（５００μｇ７ラツト）あるいはＩ　 ＦＡＩＬ独を足そくに皮下（ＳＣ）注射して免疫化し、１６日後、ラットの尾基 底部に、熱処理したエム、ラベルクローシス（Ｌ凰匝匹皿胚ｉｓ）　１ｍｇをＩ ＦＡに溶解した溶液を皮肉に注射して免疫化し、更に１１日後に、膝部リンパ節 （ＬＭ）を取り出し、Ｔ細胞を２　Ｘ　１０’ｉｌｌ胞／穴の細胞および１から ５０μｇ／ｍｌの範囲の種々の濃度のＡ１８３を用い１１市増殖アツセイにて試 験した。 図７は、免疫化或いはコントロールＬＮ、ｉｌ胞の種々の投与量のＡ１８３に対 する増殖応答を示し、適当な条件下でＡ１８３は免疫原性ペプチドとして機能す ることを示す。これらの結果は、また、高濃度（５０μｇ／ｍｌ）であってもＡ １８３はＴｌａ胞に対して固有の毒性作用を有しないことを示す。 Ａ２ｂＴ細胞クローンによるｈ　ｓ　ｐ６５残基１８０−１８８への応答が、ア ジュバント関節炎において支配的である。 ざらにＴ細胞クローンＺｌａによるＭＢＰへの応答も実験的アレルギー性脳をＵ 炎に支配的である。Ａ１８３はインビトロでこれらのクローン性Ｔ！［胞反応を 阻害するのでこれらの疾患誘導時におけるＡ１８３投与のインビボ効果が検討さ れた。 活性量ｓ炎がｒＦＡ中のエム、ラベルクローシス（Ｍ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓ ｉｓ）　２＋）０μｇの皮肉播種によってシービスラントで誘導された。Ａ１８ ３を投与した動物においては阻害ペプチドの１００μｇが接種原に加えられた。 トレンターム等（Ｊ、　Ｅｘｐ。 Ｍｅｄ、　１４６：８５７Ｊ６８（１９７７））によって記載されたシステムが 関節炎の悪化度を測定するために泪いられた。各々の足は紅斑、浮腹そして関節 の変形度に基づいてＯから４に分類された。最も高いスコアーは１６であった。 免疫後異なった日に関ｎ炎のスコアーが決定された。結果は図８に示されたよう に、５匹動物（コントロールグループ）と７匹の動物（Ａ１８３投与群）の平均 関節炎スコアーを示す、、標準偏差はバーによって示している。 図８は、エム、ラベルクローシス（Ｍ　、　Ｌｕｂｅｒｃｕ　ｌ　ａｓ　ｉ　ｓ ）とのＡ１８３の同時の投与は関節炎の悪化を有意に減少させる（　Ｐ　（０， ０２）ことを示す、Ａ１８３処置ラツトに起きる疾患は非常に緩やかで不可逆的 関節炎変形損傷を引き起こさなかった（平均最大疾患スコアーは４）。Ａ１８３ を投与しなかった動物は不可逆的強直性関節を有する重症の疾Φを起こしＡ１８ ３はＭＢＰ誘導実験アレルギー性暇！ｊ炎１ｊと１に乏）工粂 上記の実施例Ｖ１丁における関節炎実験と実質的に同様にして行われた実験にお いて、ＭＢＰによる免疫化と同時に投与されたＡ１８３はＥ　Ａ　Ｅの悪化を減 少させることが１！ｌ］明した。 Ｅ　Ａ　Ｅは両後足足そく中に生理食塩水中のＭＢＰとコンプリートフロインド アシュハント（エム、ラベルクローシス（Ｍ、封印ヒｕ１０ＳＬＳ）　−１ｍｇ ／ｍｌを含む）の１：１のエマルションのＯ，１ｍｌを投与することによってシ ービスラフトで誘導された。疾患の臨床症状は毎日記録され、ざらにＯから４の スケールに割り当てられた；０．症状無し；０．５嗜眠と体重減少；　１ハ行性 尾部；２、後足の皮弱性：３片帽Ｌ４、ｎ後肢の麻痺、瀕死の状態。 動物には、ＭＢＰの５０Ｉｉｇ　（アジュバント中で）のみか或いはＭＢＰの５ ０μｇおよびＡ１８３の５００μｇの両者を投与した。 結果は表２に示す。 Ａ１８３処置グループにおいては、４匹のラット中の１匹だけが麻痺を起こした のに対してにＭＢＰコントロール郡においては４匹のラット中の３匹が疾患を患 った。 表　２ Ａ１８３はＭ　Ｂ　Ｐ　ｍ導実験的アレルギー性脳を腿炎の悪化を減少させる ＭＢＰ　ＭＢＰ＋Ａ１８３ 播種ラット＃：　１２　３４　５　６　７　８ＥＡＥスコアー：　１　１　２　 ０．５　ｏ、５　０．５　１）、５　１全体重減少：　４０　５８５５　４５　 ３６　３１　２７４６（ｍｇ） 体重減少を示　１０／１６　１３／１７追跡実験において、ＥＡＥ誘導のための 免疫化を異なった方法で行った、この場合に尾部の基部皮肉にＯ，１ｍｌを投与 した。再度疾患発生における有意の遅延が観察された。さらに１体重に基づいて 、Ａ１８３播種動物はコントロールよりもより−［１１Ｆであった。 Ｍ　Ｂ　Ｐ抗原へのＴ、ＩＩ胞のインビトロ増植応答がＥ　Ａ　Ｅの誘導後３４ 日目に測定された。表３は、ＭＢＰとともに投与されたＡ１８３を投与したラッ トにおいては、Ｍ　Ｂ　Ｐを引き起こすＴＷ胞のレベルが減少しでいた。ＭＢＰ へのそのような減少応答は通常の免疫抑制の結果ではない、なぜならＡ１８３を 受けたラットからのＴＮ胞はインビトロでＡ１８３抗原に応答し、加えてＣｏｎ Ａへの正常などリフローナルＴｌｉ［胞応答を保有していた。 ＥＡＥにおいて、Ａ１８３を投与したラットからのＴ細胞のインビトロ１薙応答 ”Ｈチミジンの取り込み（ｃｐｍｘ　１Ｏ−３）イレヒゝトロ　濃度　播種　Ｍ ＢＰ　播種（ＭＢＰ＋　Ａ１ｆ３３）１−鰭ｊ−上土工土土土二旦 ＭＢＰ　０．１　！、４　１　１．３　１．２　１　１　１　１ＭＢＦ　１　１ ．９　１　２　１．６　１　１　１．６　１．５ＭＢＦ　１０　４．５　４　７ ．４　３．６　２．６　２　３．３　２．４１１１ＢＦ　２０　５．３　５．３ ７．８　４．４　２．７　１．７：３．３　３．２Ａ１ｇ３　１　１．２　１１ 　１　１．４１　１．４１．５Ａ１８３　１０　１　１１　１　５．０４．２５ ．２４．８Ａ１８３　５０　１．６　１　１　１．２　７．２　８．８８．４　 ９．５ＣｏｎＡ　２．５　７０　４４６３３　１４　３５　７４　２９　１２１ 実施例ｒｘ Ａ１８３はエム、ラベルクローシス　Ｍ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ抗原への ヒトＴＭ胞の増殖を阻害する Ａ１８３の阻害活性が異なる抗原特異性のＴｌｓ胞ばかりでなく異なったＭＨＣ 分子に限定されたＴ細胞にも作用するのか否かを調べるために、ヒトＴＷ胞の増 殖応答に対するＡ１８３の作用が検討された。 表４は慢性リュウマチ性関節炎を患った患者から得られたによって７６％まで阻 害された。抗原への非常に低い応答を示した患者（患者ＤＳとＶＯＳ）からの細 胞はＡ１８３によって阻害されなかりた。　そのような低い応答は、低い抗原特 異性応答というよりもむしろエム、ラベルクローシス（Ｍ、　ｔｕｂｅｒｃｕｌ ｏｓｉｓ）　１１品中に存在している分裂促進物質への非特異的反応を反映して いると考えられる：そのような非特異的応答はペプチドによって阻害されること は期待されない。 （ＭＴ）へのヒトリンパ球の抗原誘導増殖の阻害３Ｈチミジンの取り込み（全ｃ ｐｍ） 患者　ＭＴ　ＭＴ＋Ａ１８３　％阻害 Ｂ　Ｂ　５８７４　１６１２　７２ ＴＥＲ３５７４２４４０３２ ＤＵ　１７９４　４２１　７６ Ｋ　ＯＲ９６５８５８１６３２ Ｌ　ＯＮ　１７２３　１１５３　３３ ＥＬＡ　１６５１　７５９　５４ ＲＩＪ　８０３　６６８　１７ ＤＳ　４７２　４６９　１ ＶＯＳ　８４５　８５２　。 性を有する抗原性エピトープを含む粗抗原性標品である。遺伝的に異なった個体 は異なったＭＭＣ産物を発現する。異なつたＭＭＣ産物は粗標品から得られる数 多くのものから選択された抗原の異なったエピトープを提供するものと推定され ている。この化合物の多様性にも関わらず、Ａ１８３ペプチドはラットとヒト両 者の異なったＭＭＣ産物と相互に作用可能であろう。Ａ１８３は両者の種の抗原 特異性Ｔ細胞認識を阻害するばかりでなく、加えて上述したアジュバント関節炎 とアレルギー性脳を髄炎実験で示されたような自己免疫イフエクターＴ細胞のイ ンビボ発生とも効果的に相互作用する。 実施例Ｘ 刺激アミノ酸置換ペプチドについての検討Ａ、単一アミノ酸置換 ノナペプチド　ＴＦＧＬＱＬＥＬＴ中のどの残基がＡ２ｂ並びにＡ、　２　ｃ　 Ｔ細胞クローンの刺激のために必要なものであるかどうかを検討するため及び如 何なる置換が認識を許容できるかどうかを検討するためペプチド１８０−１８８ の単一置換ネットワークを調整した。このネットワークにおいてノナペプチドの 各々の残基は全て１９種類の他の可能なアミノ酸によって！を換された（図１参 照）。 全ての単一置換１８０−１８８変異種ペプチドによる刺激へのＡ２ｂならびにＡ ２ｃ細胞両者の増殖応答が決定された。 図９はＡ２ｂ　Ｔｌｓ胞クコクローンいての結果を示す。Ａ２ｃクローンについ ての結果も同様であった。　表５は位置１８０．１８１そして１８６での置換に ついての結果の限界アミノ酸配列（ｌ　ｉｍｉ　Ｌｅｄ、　ａｒｒａｙ）を表す ・表　５ ペプチド　クローンＡ２ｂへの １８０　１８６　増進応答（ＳＩ） −−−−−−Ｄ　１６ Ａ）示されたものは３つの刺激性単一置換ペプチドの全ての可能な組み合わせで ある。未変化の残基はダッシュで示されている。用いたペプチド濃度は約４μｇ ／ｍｌであった。データはＦｌｌ＆インデックス（ＳＩ）として表され１次のよ うに計算される： 平均　ｃｐｍ　（＋抗原）／平均ｃｐｍ　（−抗ｒｙｉ、＞同様の結果がクロー ンＡ２ｃでも得られた。 位置１８７と１８８でのｒＬ換を有する全てのペプチドはＴ趨胞りローン両肴を 同等に良好に刺激した、そして違いはオリジナルペプチドでは観察されなかった 。 典型的１８０−１８６配列内にはほとんど置換が認められなかった。位置１８２ ．１８３．１８４並びに１８５でのＷｔ置換ペプチドいずれも刺激性がなかった 。そして位置１８０．１８１．そして１８６で置換されたペプチドの少しがＴ細 胞クローンを刺激した。 高い増殖］゛細胞応ｒ　（Ｓ　Ｔ　＞　ｔｏ）を誘導した置換ペプチドは以下の 通りであった；位置１８０Ｔ−−＞Ｓ；位置１８１Ｆ−−）ＬＨそして位置１８ ６Ｅ−−＞Ｄ或いはＥ　−−＞Ｑ。 次の置換を有するペプチドも同様にＴ細胞クローン両者に刺激性であった：位置 １８０　Ｔ−−＞Ｄ或いはＴ−一＞Ｋ；位置１８２Ｆ−−＞Ｉ　；位置１８６　 Ｅ−−＞Ｈ，Ｌかしながら後者の置換ペプチドの存在下で見いだされた増殖応答 の程度は天然ペプチド１８０−１８８で得られた結果に比べ明確に劣っていた。 Ｂ、２或いは３置換を有するペプチドの置換２或いは３置換を有する置換ペプチ ドは非刺激性であることが判明した。＃Ａ−置換ネットワークで観察された結果 に基づいて、より良い刺激性置換、位置１８０Ｔ−−＞Ｓ、位置１８１Ｆ−−＞ Ｌそして位置１８６Ｅ−−＞Ｄが組み合わせた置換ペプチドの合成用に選択され た。組み合わせ置換ペプチドへのＡ２ｂ並びにＡ２ｃＴ１＆胞クローンの増殖応 答が決定された。 表５の下半分に示されているクローンＡ２ｂについての結果から観察されるよう に５位置１８０，１８１．そして１８６での２個或いは３個の組み合わせ置換を 有するペプチドのいずれも刺激性ではなかった。 実施例ＸＩ 非刺激性アラニン置換ペプチドの同定と拮抗阻害力２個の疾患関連Ｔ細胞エピト ープ、ミコバクチリアル６５ｋＤａタンパク質の１８０−１８８アミノｉ！２配 列とモルモフＭＢＰ　（ペプチド１０２０と称する）の７２−８５アミノ酸配列 に基づく拮抗ペプチドを設計するため、これらのエピトープ内のどの残基がＴ細 胞クローンＡ２ｂとＴＩＷ胞系Ｚｌａの刺激のために本質的なものであるかどう かを検討するために実験を行った。実験ではこれらＴｌａ胞の置換ペプチドへの 増殖応答を副定した。図１０に見られたように、Ｔ、１ｍ胞クり−ンＡ２ｂは天 然ペプチド１８０−１８８と７ラニン置換ペプチドＡ１８７とＡ１８８に応答し た１図１１はＴｉｔ胞系Ｚｌａが天然ＭＢＰペプチド１０２０に応答するばかり でなくアラニン置換ペプチド１ｏ２１．１０２４．１０２６．１０３０そして１ ０３２にも応答しそしてペプチド１０３１に対して非常に弱い応答を示した。ペ プチド１０２６はペプチド１０２０よりもより大きな増殖応答を誘導した６Ａ２ ｂ並びにＺｌａ細胞はＭＨＣクラスＩＩ　ＲＴＩ　Ｂｌ　１ｏｃｕｓ（Ｉ−Ａ） によって制限されるため（Ｂｏｏｔｓ、　Ａ、　！４．Ｈ，ｅｔａｌ、　Ｊ、Ｉ ｍｍｕｎｏｌ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ、　１９９１．投稿中）、クローンＡ２ｂが１ ８０−１８８シリーズとペプチド１０２ｏシリーズの非刺激性アラニン置換ペプ チドの阻害力を検討するために使われた。図１２から明らかなように、Ａ１８１ 並びにＡ１８３はペプチド１８０−１８８　（０，５μｇ／ｍｌ）　ヘの応答の 濃度依存性阻害を示した。ペプチドＡ１８２は僅かな阻害しか示さなかったがＡ １８０．Ａ１８４．Ａ、１８５並びにＡ１８６は拮抗阻害を示さなかった。 図１３に示されたように、置換ペプチド１０２０シリーズ中で、ペプチド１０２ ８のみがＡ１８３によって起こされた阻害力に匹敵するペプチド１８０−１８８ に応答するクローンＡ２ｂの強い濃度依存性の増殖阻害を起こした。阻害ペプチ Ａ１８３或いは１０２８の一定投与量が刺激ペプチド１８０−１８８の漸増する 濃度での存在下で試験されたとき、阻害は投与量に依存して克服することができ る、このことはＴ細胞に対する阻害ペプチドの如何なる非特異的毒性効果につい て立証するものである。さらに、Ａ１８３と１０２８の両者は〜ＩＢＰ或いはペ プチド１０２０へのＺｌａ細胞の増殖応答を阻害した。それに対してペプチドＡ １８４と１０２９は阻害しなかった。 上記の結果に基づいて５ペプチドＡ１８３と１０２８がアジュバント関節炎とＥ ＡＥ疾患モデルにおいて試験するために選択された。この実験においてペプチド Ａ１８４と１０２９をコントロールとして用いた。 ペプチドＡ１８３と１０２８はＥＡＥの発生防止するＥＡＥは基本的に実施例Ｖ ｌ１１に記述されたように、ＣＦＡに乳化した５０μｇ／ラットの脳炎起源性Ｍ ＢＰペプチド７２−８５（例えば、ペプチド１０２０）で誘導される。ペプチド １０２８　（５ｏｏμｇ／ラット）との協免疫化（ｃｏ−４ｍｍｕｎｉｚｅｄ） によりＥＡＥを完全に阻害したのに対し、ペプチドＡ１８３（５００μｇ／ラッ ト）との協免疫化はほとんど完全な阻害を示した（表６）、Ａ１８３で協免疫化 した８例の動物中僅か２例が軽度のＥＡＥの臨床症状を呈した。しかしながら、 これら２例の動物の最大疾患スコアーは０．５（如何なる麻痺も伴わない体重減 少）であった。これに対して、コントロールペプチド１０２９で協免疫化された 全ての動物は、コントロール疾患グループに匹敵する重症のＥＡＥを発生したく 表６）。 １０２８或いはＡ１８３との協免疫化はペプチド誘導Ｅ、ＡＥを阻害する 九灰四−率ｂ　開始　リ　最大４ 日数ｅ　を症度０ ｘｏ　２ｏ（ｓｏ　μｇ） ＋　ＰＢＳ　８／８　１２．９土１．４　５．８±１．７　２．０±１１０２０ （５０μｇ） ＋　１０２８　（５００μｇ）　Ｏ／８　−１０２０　（５０μｇ） ＋　Ａ１８３（５０（Ｉ　ｇ）　２／８　１３．０±０１±００．１±０．２１ ０２０（５０μｇ） ＋　１０２９　（５００μｇ）　８／８　１＋、ｓ±１．０　５．５±０．９　 ２．６±０．８”Ｅ　Ａ　ＥはＰＩ３５，１０２８　（ｓｏｏμｇ）　、　Ａ１ ８３　（５００μｇ）、或イハｌ　Ｏ２９（５ｏｏ、ｕｇ）　ｔ’９ｔ、化しｆ ：　１０２０　（５ｏμｇ）＋ＣＦＡ（Ｍｔ４ｏｏμｇ）の皮肉投与によって誘 導された。ラットは毎日観察され、４点スケールで評価化した。 ゝ試験された疾患／数の数値 ０疾患を発症した動物の疾患開始の平均日数（±ＳＤ）イａ 寒遼ゑ世 関節炎は実施例Ｖｌｌ＋に述べられたようにして誘導された。 図１４に示されたように、ペプチドＡ　１８３　（２ｓｏＩｉｇ／ラット）の存 在下でＭｔ／ＩＦＡで関節炎誘導後、非常に有意の関節炎重症度の減少がコント ロールグループとの比較において観察された（　ｐ　＞　０．００１）。インビ トロにおいて非拮抗性コントロールペプチドＡ１８４が使われた場合には疾患の 重症度に対して何の有意の効果も見られなかった（ｐ、０．０５）（図１４）。 興味あることに、Ｍｔ／ＩＦＡ接種原へＥ接種量連ペプチド１０２８（２５０μ ｇペプチド／ラット）の添加は疾患を減少させなかったＣＰ＞０．０５）　。 疾患が十分に明確化されたＭＢＰ関連ペプチドによって誘導されるＥＡＥと対比 して、アジュバント関節炎のための疾患誘導抗原は熱殺菌全ミコバクテリウム　 ラベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ） すなわち抗原の複合混合物である。にも関わらず、上述した結果は十分明確化さ れた単一の″ブロンキング″ペプチドが関節炎誘導を阻害できることを示してい る（図１４）。 関節炎の臨床症状が鎮静化したとき疾患誘導後４３日目に、ＰＢＳ、ペプチドＡ １８３或いはペプチドＡ１８４のいずれかとＭｔ／ＩＦＡとともに免疫した動物 の鼠径部リン、パ節（ＬＮ）が得られ抗原特異性増殖を試験した。代表的な実験 において、表７に表された結果はＬＮ細胞がＭｊあるいはｈｓｐ６５タンパク質 と誘導されたときのグループ間には違いは見られなかった。しかしながら、Ａ１ ８３とともに協免疫された動物からのＬＮ躍胞は、それ自身ペプチドＡ１８３へ の増殖性応答を示す、このグループにおいてペプチド１８０−１８８自体へのポ リクローナル増殖性応答はコントロールに対して増大した、しかしペプチドＡ１ ８４には非応答であった。コントロールペプチドＡ１８４と協免疫されたグルー プはペプチドＡ１８４．ペプチドＡ１８３　或いはペプチド１８０−１８８への ピリクローナル増殖応答を示さなかフた。 −−一−−−□−−□−□−□□−□−□−一−イ以且目堡下記で免疫されたラ ット Ｍｔ／−ＭＬ／Ａ１８３　ＭＬ／Ａ１８４最大関節炎スコアー　１６　１　１６ ａデータはＳＩとして表している。疾患誘導のため、ラットはＰＢＳ或いはＡ１ ８３（２５０μｇ）で乳化したＩＦＡ中のＭしく２５０μｇ）で或いはＰＢＳ中 のＡ１８４（２５０μｇ）で０８目に免疫した。 一―−−−−−−――−−−−−−−轡一一一■−−酔−――−―−―−−−一 圃一一一一−−――−１−一−−一−−一一　−一―−４同様に、実施例Ｘｌｌ のＥＡＥ疾患モデルにおいて、ペプチドＡ〕８３への増殖応答を示す協免疫動物 からのＬＮｍ胞は。 常にペプチド１８０−１８８への応答が増大したが、一方Ａ１８４への応答はな かった。 割奥夛−ス■ Ａ１８３に特異的Ｔ細胞系（ＡＴＬＪ或Ａ１８３の存在下で関節炎或いはＥＡＥ ｆｌ導に続いて発生する？リフローナルＴ細胞応答の性質と特異性は、（ａ）ペ プチドＡ１８３はシービスラットに免疫原性であること、そして（ｂ）ペプチド Ａ１８３での免疫化によって誘導される増殖性応答は天然ペプチド１８０−１８ ８に対する応答を含むことを示した。 しかしながら、この結果に基づいて、Ａ１８３を認識した同じＴｆｓ胞がペプチ ド１８０−１８８に応答するのかどうか決定することは可能ではない。この理由 によって、本発明者はＡ１８３特異的Ｔ細胞系を生成した。ラットは後足せきに ＣＦＡ中のＡ１８３　１００μｇを投与して免疫した。そして１０日後、膝部リ ンパｎ’ｓ胞が得られ、インビトロで４日間Ａ１８３（１０μｇ）で刺激した。 細胞は次に１週間ＩＬ２含有培地中で１週間増量され、そして抗原存在霧胞とし て同系の放射線照射胸腺の存在下でＡ１８３（１０μｇ／ｍｌ）によって４日間 再刺激された。表８はインビトロで６再刺激サイクル後得られたＡＴＬと称する ＣＤ４ゴ細胞系の抗原特異性を示す。 これらの細胞は劇的にＡ１８３によって刺激された。　さらに、ポリクローナル レベルでの結果と一致して、これらの同系細胞はペプチド１８０−１８８に良好 に応答した、しかしＡ１８４．ｈｓｐ６５　或いはＭｔには全く応答しなかった 。 これらの結果は、ペプチドＡ１８３に応答しない全Ｍｔ（クローンＡ２ｂとＡ２ ｃ）或いはｈｓｐ６５　（クローンＢ２）のいずれかを選択すること（Ｖａｎ　 Ｅｄｅｎ、　Ｗ、、　！ｍｍｕｎｏ１．　Ｒｅｖ。 １２１：５−２８（１９９１））によってよって得られたところのペプチド１８ ０−１８３特異性Ｔｗｌｌ胞系に特異的である先に発生したすべてのＴ細胞系と は著しい対照を示している。ＡＴＬ系のＴ細胞はペプチド１８０−１８８とＡ１ ８３の両者を認識するがｈｓｐ６５或いはＭｔ、を認識しない。 増殖応答 討　土日す止　（Ｃｍ±５Ｄ） −３９０±１０ Ｃｏ　ｎ　Ａ　２　、５　８７９９５±１７２６Ｍ　ｔ　１７８±３５ １０　２２０±４０ ６５　ｋ　Ｄ　２５　５１２±３４ ５０　４０３±７７ １８０−１８６　１　８２７２０±３５２０１．０　１２３１９４±１９７４ Ａ　１８３　１　８６２５６土１５５２１０　１３９５６８土２３】８ Ａ　１８４　１　５０８±１０２ 配列が重複しているペプチドを用０ての！密な特異性分析で、ペプチド１８０− １８８特異性Ａ２ｂクロ一ンによって認識される最小長（ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｚｅ ｅ　ｅｔ　ａｌ、＋上述）と比ゝて最適に認識されるペプチドの長さに１残基の 違Ｑ＼力警認められた。 ＡＴＬによって認識されるペプチドｉａはミコバクチリアル６５ｋＤａタンパク 質ｈｓｐ６５を自然加工した後には存在しないことが結論される。 要約として、ペプチドＡ１８３をＭｔと共に協免疫化するとペプチドＡ１８３と １８０−１８８に対する゛「細胞の応答の引き金と疾患減少の両者が起きた。Ａ １８３特異Ｔ、［胞系（ＡＴＬ）の生成は、ペプチドＡ１８３を認識するＴ′ｓ 胞がペプチド１８０−１８８に対して応答するだけでなくＭＥあるいはミコバク チリアル　６５ｋＤａタンパク質によっても応答することを明らかにした。これ らは、ミコバクチリアルタンパク質の加工後、クローンＡ２ｂによって認識され るが、ペプチドＡ１８３特異Ｔ１ａ胞系、ＡＴＬによって認識されないフラグメ ントが生成することを示す。このように、ペプチドＡ１８３の協免疫化は、Ｍｔ あるいはミコバクチリアル６５ｋＤａタンパク質で発火しても隠れている”Ｔｍ 胞のポピユレーションを発火する。 Ａ１８３との協免疫化による関節炎誘導の効果的阻害とＡ１８３が免疫原性であ ってそしてペプチド１８０−１８８に対してＴｍ胞応答を発揮するという事実に 基づき、実験は疾患誘導前７日にＡ１８３による予防的免疫化が、関節炎或いは ＥＡＥの発症に影響するか否かを試験するために企画された。結果は図１５に示 されている。 対象物はミコバクテリアに無関係なアジュバント（例えば、５ｎｉｐｐｅ、　Ｈ ，ｅＬ　ａｌ、、　Ｔｎ：　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ａｄｊｕｖａｎｔｓ 　ａｎｄＶａｃｃｉｎｅｓ、　Ｇ、　Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｅｓ　ｅｔ　ａｌ、、 　ｅｄｓ、　Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ。 Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　１９８８．　ｐｐ、４７−５９参照）であるジメチルジオ クタデシルアンモニウムブロマイド（ＤＤＡ）（イーストマンコダック社、ロチ ェスター、ニューヨーク、ニーニスニー）の５０μｇで免疫した。Ｍｔ／ＩＦＡ で疾患誘導前７日間の処置は前７日間ＰＢＳ／ＤＤＡを投与されたコントロール グループと比較して有意の減ψを示した（　ｐ　＜　ｏ、ｏｓ）。これに対して 、ペプチドＡ１８３での前７日間の予防的免疫化はＭＢＰペプチド１０２０で誘 導したＥＡＥの発症には干渉しなかった（ＩＲｔ大ＥＡＥスコアー２．２±１． ２）。 結論 本関節炎モデルにおいて、希釈したＡ２ｂ！ＩＩ胞での免疫化は疾患特異的調節 Ｔ細胞をトリガーすることによって保護を誘導することが知られている（Ｌｉｄ ｅｒ、　Ｏ，ｅＬ　ａｌ、　Ｐｒｏｃ。 Ｎａｔｌ。ＡＣａｄ、　Ｓｃｉ、　（（ＪＳＡ）　８４：４５７７−４５８７） ）　、　ＥＡＥシステムにおいて、異なったＭＢＰエピトープを認識するＴ細胞 は、これら細胞によって分配されるＴ細胞レセプターイデイオトープに対して交 差反応性免疫を誘導できることが最近報告された（Ｏｆｆｎｅｒ、　Ｈ，ｅｔ　 ａｔ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１４６：４１６５−４１７２（１９９１）） 　、　ツレ故、　不発ｔ’ＪＪ　ノＡ　Ｔ　Ｌ　ｍ　Ｕ　ト疾患誘１ｓＡＺｂ様 Ｔ細胞間の抗原特異性のレベルでの密接な関係（そしておそらくＴ細胞レセプタ ーレベルにおいても）によって、ＡＴＬ細胞の対の一方がインビボで５分配した Ｔ、ＩＢ胞レしプターイデイオトーブに対して調節性抗イデイオトープ応答の指 令を誘導することが提案されてる。関節炎起因細胞（或いはＡ２Ｂ型）を抑制す ることによって、この調節応答は関節炎の発症を防ぐことができる。 本概念はペプチドＡ１８３で疾患誘導前７日間予防的に免疫したラントが疾患を 減少させた上記の発見によっても支持される。疾患がアジュバント中のＭＢＰペ プチド１０２０で誘導されたＥＡＥモデルにおいて、Ａ１８３を用いた前処置は 無効であった。このことは、恐らく疾患が、Ａ１８３誘導ＡＴＬＩ調節Ｔ細胞と Ｔ細胞レセプターエピトープを分配しないＴａ２胞の無関係クローンによって仲 介されるためでろう。 （ａ）協免疫実験と比較して、Ａ１８３の非常に低い投与量で効果的であり、か つ。 （ｂ）ＥＡＥへの効果が見られなかった。 という理由により関節炎発症の阻害が洩っているＡ１８３による拮抗的ＭＨＣブ ロッキングによるものでは無いであろう。 結論として、上記した結果は、同じＭＨＣ分子であるがしかし異なった抗原特異 性を有するものにによって限定されたＴ細胞によるインビトロＴｌｌ胞増殖を効 果的に阻害するペプチドが開発できることを示している。しかしながら、インビ ボにおいて、Ａ１８３によって例証されるように疾患関連拮抗ペプチドは、ＭＨ Ｃブロンキングを示す（ペプチド誘導ＥＡ、　Ｅモデルによって示されたように ）ばかりでなく同様に疾患特異的抑制活性も示す。高度に複雑な抗原、全ミコバ クテリアによって誘導されたアジュバント関節炎において、拮抗ペプチドとの協 免疫化による疾患阻 害は。 調節（保護的）免疫応答の同時誘導ばかりでなく、拮抗剤と疾患発生エピトープ 間のＭＨＣ結合のための拮抗における相乗効果に明らかに関与している。そのよ うな新規の拮抗剤−モシュレータ−ペプチドの種々の性質は、抗原が比較的複雑 で多様な抗原存在構造がＭＨＣへテロザイゴート個体中に存在しているところの ヒトの自己免疫疾患の処置のために魅力的な道具となる。結論として、効果的な 治療的あるいは予防的ペプチドは、拮抗的にＭＨＣ分子に単に結合されているだ けではない。前述したごとく、本発明を十分に記載したが、当業者であれば、本 発明の精神ならびに範囲を逸脱することなくかつ不当な程の実験を要することな く、広い範囲の均等なパラメーター、濃度ならびにその他の条件を変えて同様な 発明を実施できることは容易に理解できるところである。本発明は特定の実施態 様につき記載したけれども、さらに改良も可能であることは理解できるであろう ９本願は、本発明の原理を一般的に追従し、かつ、当業者にとって公知のまたは 慣用されている手段の範躊にふくまれるような本願の記載から発展したもの、も しくは、下記の請求の範囲に記載する前述した本質的な特徴に適用されるような 本願の記載から発展したものを含むあらゆる変形例、用途ならびに連用形態をも 包含するものである。 図１ＡＩ８０　１８８ ■１０ｕｇ／ｍｌ　口１・ｑ／−１口Ｏｕｇ／ｍ１Ａｌａ　置換　Ａｌａ　ｆｌ ｉ換　Ａｌａ　Ｗ１換Ａｌａ置換ペプチドの添加 図３ 一一−Ａｌａ　ｉ８３　−”−条Ａｌａ−＋８３１８０−１８８　（ｕｇ／ｍｌ ＞ 図４ １０ｕｑ／ｍｌ　１ｕｇ／ｍｌ　ａ２０ｕｇ／ｍｌ■Ａｌａ　Ｒ換口Ａｌａ　置 換　Ａｌａ　Ｗ換Ａｌａ置換ペプチドの添加 口 豐　ν 図７ 二　二 閣　工ＦＡで発火したラット 口　ＩＦＡとＡ１８３で発火したラット図８ 免疫イε後の日数 図１２ 図１３ 平均関節炎スコアー 平均ｒＪｊＩｆｒＢ次スコアー 要約 少なくとも７個のアミノ酸好ましくは２０個までのアミノ酸、最も好ましくは７ 個ないし９個のアミノ酸を有し１式Ｔ丁：　ＧＬ　Ｑ　Ｌ　Ｅを有するミコバク テリウム　゛ンベルクローシス（ＭｙｃｏｂａｃＬｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕ ｌｏｓｉｓ）タンパク質ｈｓｐ６５の位１１８０−１８６に対応するアミノ酸配 列からなるが位置１８１−１８３において１個ないし３個のアミノｌ１ｉｉ！置 換によって前記アミノ酸配列から異なっているペプチドを開示する。 これらのペプチドはｂ　ｓ　ｐ　６５の認識のような１９２８球による抗原認識 を阻害・し、自己免疫関節炎のような免疫関連疾患から患者を保護でき、さらに 移Ｍ臓器或いは組織の拒絶反応を防ぐことができる。特にアラニンとの、ｈｓｐ ６５の位置１８３と１８１に対応する位置で単一のアミノ酸置換が好ましい、Ｔ ＫＩ胞系は上記ペプチドに特異的であって免疫関連疾患を治療しまたは予防する ための用途が同様に開示されている。 国際調査報告

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．特異的抗原に対するＴリンパ球の増殖応答を阻害することができる少なくと も７個のアミノ酸残基からなるペプチドであって、下記構造式； １８０　１８６ ＴＦＧＬＱＬＥ を有するマイコバクテリウム　シベルクローシスタンパク質ｈｓｐ６５の位置１ ８０−１８６に該当するアミノ酸配列からなるが、位置１８１−１８３のアミノ 酸の１個ないし３個が置換されることにより前記アミノ酸配列とは異なるアミノ 酸配列を有するペプチド。
2. ２．請求項１において、前記置換が１個のアラニン残基によりなされているもの 。
3. ３．請求項１において、アミノ酸配列がＴＦＧＡＱＬＥであること。
4. ４．請求項１において、アミノ酸配列がＴＦＧＡＱＬＥＬＴであること。
5. ５．請求項１において、アミノ酸配列がＴＦＧＬＱＬＥであること。
6. ６．請求項１において、アミノ酸配列がＴＦＧＬＱＬＥＬＴであること。
7. ７．請求項１において、特異抗原に反応性のあるＴリンパ球のＨＳＰ６５に対す る増殖応答を阻害することができるもの。
8. ８．請求項１において、特異抗原に反応性のあるＴリンパ球のミエリン塩基性タ ンパク質に対する増殖応答を阻害することができるもの。
9. ９．請求項１において、特異的抗原に反応性のあるＴリンパ球のマイコバクテリ ウムシベルクローシスに対する増殖応答を阻害することができるもの。
10. １０．特異抗原に対するＴリンパ級の増殖応答を阻害することができる少なくと も７個のアミノ酸残基からなるペプチドであって、下記構造式： ７２　８３ ＱＫＳＱＲＳＱＤＥＮＰＶ を有するモルモットミニリン塩基性タンパク質の位置７２−８３に該当するアミ ノ酸配列からなるが、前記アミノ酸の１個ないし３個が置換されることにより前 記アミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を有するペプチド。
11. １１．請求項１０において、前記置換がアラニン残基によりなされていて、前記 アミノ酸がＱＫＳＱＲＳＱＡＥＮＰＶであること。
12. １２．請求項１記載のペプチドの有効量を対象に投与することからなる自己免疫 疾患を有する対象を処置する方法。
13. １３．請求項１２において、前記疾患が関節炎であること。
14. １４．請求項１記載のペプチドの有効量を、移植臓器もしくは組織の移植前およ び直後に対象に投与することからなる対象中の移植臓器もしくは組織の拒絶反応 を抑制もしくは予防する方法。
15. １５．請求項１記載のペプチドと特異的に反応するＴリンパ級からなるＴリンパ 級細胞系。
16. １６．請求項２記載のペプチドと特異的に反応するＴリンパ級からなるＴリンパ 級細胞系
17. １７．請求項２記載のペプチドと特異的に反応するＴリンパ級からなるＴリンパ 級細胞系。
18. １８．請求項１５記載のＴリンパ級の有効量を対象に投与することからなる自己 免疫疾患に感受性のあるもしくは有する対象を処置する方法。