JPH0552836A - 試験終了表示方法および試験終了表示体付き検出試験装置 - Google Patents
試験終了表示方法および試験終了表示体付き検出試験装置Info
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 クロマトグラフ等の毛管移動媒体を利用して
被検査流体中の特定物質の検出試験を行う際に、毛管移
動媒体の所定位置に有色体及び／又は反応型発色剤の１
つ又は２つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下
流終端又はその付近に有色体用の捕捉材及び／又は反応
型発色剤の残りの成分を固定化しておくことによって、
試験の終了を呈色表示する。 【効果】 試験の終了時における鮮明な呈色状態又は色
変化により、試験の終了を明確に表示することができ、
更に毛管移動媒体や被検査流体の色、種類、性状等に応
じて有色体や反応型発色剤の色や種類等を適宜選択する
ことによって試験終了時の呈色状態を毛管移動媒体や被
検査流体自体の色と明確に区別できるようにすることが
可能である。
被検査流体中の特定物質の検出試験を行う際に、毛管移
動媒体の所定位置に有色体及び／又は反応型発色剤の１
つ又は２つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下
流終端又はその付近に有色体用の捕捉材及び／又は反応
型発色剤の残りの成分を固定化しておくことによって、
試験の終了を呈色表示する。 【効果】 試験の終了時における鮮明な呈色状態又は色
変化により、試験の終了を明確に表示することができ、
更に毛管移動媒体や被検査流体の色、種類、性状等に応
じて有色体や反応型発色剤の色や種類等を適宜選択する
ことによって試験終了時の呈色状態を毛管移動媒体や被
検査流体自体の色と明確に区別できるようにすることが
可能である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、クロマトグラフ媒体等
の毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検
出試験する方法および装置であって、特に試験の終了を
呈色表示するようにした方法および装置に関する。
の毛管移動媒体を使用して被検査流体中の特定物質を検
出試験する方法および装置であって、特に試験の終了を
呈色表示するようにした方法および装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】クロマトグラフ法等により被検査流体中
の特定物質を検出試験する際に、試験終了の表示が必要
な場合がある。従来は、クロマトグラフ媒体の下流終端
付近にｐＨ指示薬や水分試験紙を施して、試験の終了を
色の変化により表示または検知している。ｐＨ指示薬に
よる方法は、被検査流体がｐＨ指示薬を施した下流終端
位置まで毛管移動した時のｐＨ変化に伴う呈色状態の変
化を利用したものである。また、水分試験紙による方法
は、被検査液体が毛管移動によって水分試験紙を配置し
た下流終端位置に到達した際の、試験紙の液体吸収に伴
う色の変化を利用したものである。
の特定物質を検出試験する際に、試験終了の表示が必要
な場合がある。従来は、クロマトグラフ媒体の下流終端
付近にｐＨ指示薬や水分試験紙を施して、試験の終了を
色の変化により表示または検知している。ｐＨ指示薬に
よる方法は、被検査流体がｐＨ指示薬を施した下流終端
位置まで毛管移動した時のｐＨ変化に伴う呈色状態の変
化を利用したものである。また、水分試験紙による方法
は、被検査液体が毛管移動によって水分試験紙を配置し
た下流終端位置に到達した際の、試験紙の液体吸収に伴
う色の変化を利用したものである。
【０００３】しかしながら、ｐＨ指示薬は通常最初から
一定の色を有しており、無色から有色に変化するものは
極めて少ない。しかも、ｐＨの変化前の色と変化後の色
とが近似している場合が多く、試験の終了を明確に表示
しにくいという欠点がある。更に、ｐＨ指示薬のある呈
色表示部の前位置等に、ｐＨを安定させるための緩衝液
域を設けておく必要がある。
一定の色を有しており、無色から有色に変化するものは
極めて少ない。しかも、ｐＨの変化前の色と変化後の色
とが近似している場合が多く、試験の終了を明確に表示
しにくいという欠点がある。更に、ｐＨ指示薬のある呈
色表示部の前位置等に、ｐＨを安定させるための緩衝液
域を設けておく必要がある。
【０００４】また、水分試験紙の場合は、紙を着色して
おかないと、乾燥状態と吸水状態とで色の違いを生じな
いため、やはり最初から一定の色に着色されており、し
かも乾燥時の色と吸水時の色は同系色であるために、色
の区別がしにくく、試験の終了を明確に表示できない。
その上、水分試験紙位置まで到達した被検査液体がその
後の時間経過に伴って蒸発してしまうと水分試験紙が再
度乾燥して、元の色に戻ってしまい、試験の終了を表示
できなくなるという欠点がある。
おかないと、乾燥状態と吸水状態とで色の違いを生じな
いため、やはり最初から一定の色に着色されており、し
かも乾燥時の色と吸水時の色は同系色であるために、色
の区別がしにくく、試験の終了を明確に表示できない。
その上、水分試験紙位置まで到達した被検査液体がその
後の時間経過に伴って蒸発してしまうと水分試験紙が再
度乾燥して、元の色に戻ってしまい、試験の終了を表示
できなくなるという欠点がある。
【０００５】
【発明の内容】本発明者らは上記した従来技術における
ような欠点のない、毛管移動媒体による検出試験の終了
を明確に表示できる方法を求めて研究を行ってきた。そ
の結果、クロマトグラフ媒体等の毛管移動媒体の所定位
置に有色体を施す共に、毛管移動媒体の下流終端または
その付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検査流体の
毛管移動に伴って下流終端部へと移動してきた有色体を
該捕捉材で捕捉させると、その部分に鮮明な呈色が発現
して試験の終了を明確に表示できることを見出した。
ような欠点のない、毛管移動媒体による検出試験の終了
を明確に表示できる方法を求めて研究を行ってきた。そ
の結果、クロマトグラフ媒体等の毛管移動媒体の所定位
置に有色体を施す共に、毛管移動媒体の下流終端または
その付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検査流体の
毛管移動に伴って下流終端部へと移動してきた有色体を
該捕捉材で捕捉させると、その部分に鮮明な呈色が発現
して試験の終了を明確に表示できることを見出した。
【０００６】更に、本発明者らは、上記の有色体および
その捕捉材の組み合わせの代わりに、反応型発色剤を使
用して、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の１つ
または２つ以上の成分を施すと共に、下流終端またはそ
の付近に反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査
流体の毛管移動に伴って下流終端へと移動してきた反応
型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分を該残りの成分
と反応させ発色させた場合にも、同様に鮮明な発色また
は色変化を生じて試験の終了を明確に表示できることを
見出した。
その捕捉材の組み合わせの代わりに、反応型発色剤を使
用して、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の１つ
または２つ以上の成分を施すと共に、下流終端またはそ
の付近に反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査
流体の毛管移動に伴って下流終端へと移動してきた反応
型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分を該残りの成分
と反応させ発色させた場合にも、同様に鮮明な発色また
は色変化を生じて試験の終了を明確に表示できることを
見出した。
【０００７】したがって、本発明は、毛管移動媒体を
使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法に
おいて、毛管移動媒体の所定位置に有色体を施すと共
に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に有色体用
の捕捉材を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下
流終端側に移動してきた有色体を捕捉材で捕捉して試験
の終了を呈色表示することを特徴とする方法である。
使用して被検査流体中の特定物質を検出試験する方法に
おいて、毛管移動媒体の所定位置に有色体を施すと共
に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に有色体用
の捕捉材を位置させ、被検査流体の毛管移動に伴って下
流終端側に移動してきた有色体を捕捉材で捕捉して試験
の終了を呈色表示することを特徴とする方法である。
【０００８】更に、本発明は、毛管移動媒体を使用し
て被検査流体中の特定物質を検出試験する方法におい
て、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の１つまた
は２つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下流終
端またはその付近に反応型発色剤の残りの成分を位置さ
せ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動し
てきた反応型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分を該
残りの成分と反応・発色させて試験の終了を呈色表示す
ることを特徴とする方法である。また、上記の方法と
の方法は併用してもよく、したがって本発明は、上記
の方法との方法を組み合わせた方法をも包含する。
て被検査流体中の特定物質を検出試験する方法におい
て、毛管移動媒体の所定位置に反応型発色剤の１つまた
は２つ以上の成分を施すと共に、毛管移動媒体の下流終
端またはその付近に反応型発色剤の残りの成分を位置さ
せ、被検査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動し
てきた反応型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分を該
残りの成分と反応・発色させて試験の終了を呈色表示す
ることを特徴とする方法である。また、上記の方法と
の方法は併用してもよく、したがって本発明は、上記
の方法との方法を組み合わせた方法をも包含する。
【０００９】更に、本発明は上記した方法を実施するの
に使用する、毛管移動媒体、その所定位置に施した有色
体および／或いは反応型発色剤の１つまたは２つ以上の
成分、並びに毛管移動媒体の下流終端またはその付近に
配置した有色体用の捕捉材および／または反応型発色剤
の残りの成分を備えていることを特徴とする試験終了表
示体付きの検出試験装置を包含する。
に使用する、毛管移動媒体、その所定位置に施した有色
体および／或いは反応型発色剤の１つまたは２つ以上の
成分、並びに毛管移動媒体の下流終端またはその付近に
配置した有色体用の捕捉材および／または反応型発色剤
の残りの成分を備えていることを特徴とする試験終了表
示体付きの検出試験装置を包含する。
【００１０】上記において「毛管移動媒体を使用した検
出試験」とは、毛管媒体中を被検査流体を毛管移動させ
てその中に含まれる各成分の分配係数や吸着程度の差を
利用して特定の物質を検出したり、分離する検出試験を
いい、その代表例は毛管移動媒体として紙、布帛、粒状
物等のクロマトグラフ媒体を用いたクロマトグラフ法を
挙げることができる。しかしながら、クロマトグラフ法
に限定されず、毛管移動媒体を利用する同種の検出試験
法は、いずれも本発明に包含される。また、上記におい
て「毛管移動媒体の下流終端」とは、毛管移動媒体の試
料採取部を設ける一方の側を上流側とし、被検査流体が
該上流側から毛管移動媒体の他方の端部に向かって毛管
移動していく該他方の側を下流側とし、下流終端とは毛
管移動媒体の該下流側の端部をいう。更に「下流終端の
付近」とは、毛管移動媒体の下流終端の近傍であって、
下流終端に到達する前の位置をいう。
出試験」とは、毛管媒体中を被検査流体を毛管移動させ
てその中に含まれる各成分の分配係数や吸着程度の差を
利用して特定の物質を検出したり、分離する検出試験を
いい、その代表例は毛管移動媒体として紙、布帛、粒状
物等のクロマトグラフ媒体を用いたクロマトグラフ法を
挙げることができる。しかしながら、クロマトグラフ法
に限定されず、毛管移動媒体を利用する同種の検出試験
法は、いずれも本発明に包含される。また、上記におい
て「毛管移動媒体の下流終端」とは、毛管移動媒体の試
料採取部を設ける一方の側を上流側とし、被検査流体が
該上流側から毛管移動媒体の他方の端部に向かって毛管
移動していく該他方の側を下流側とし、下流終端とは毛
管移動媒体の該下流側の端部をいう。更に「下流終端の
付近」とは、毛管移動媒体の下流終端の近傍であって、
下流終端に到達する前の位置をいう。
【００１１】上記の方法で使用する有色体とは、それ
自体が毛管移動媒体や被検査流体とは異なる色を有し、
捕捉材を配置した位置で捕捉材により捕捉されて有色体
自体の色を発現し、試験の終了を表示し得る着色体をい
う。有色体と捕捉材との組み合わせとしては、有色体と
捕捉材との間の物理的な付加作用や吸着作用を利用する
もの、化学反応や生物学的反応を伴って有色体を捕捉材
位置に捕捉すもの等のいずれをも採用できる。そのうち
でも、有色体として有色磁性粒子等の有色磁性体を使用
し、捕捉材として磁石等の磁場発生部材を使用して、該
有色磁性体を磁力によって毛管移動媒体の下流終端また
はその付近に捕捉して有色体の色に基づく呈色を生じさ
せるのが、簡単で便利である。
自体が毛管移動媒体や被検査流体とは異なる色を有し、
捕捉材を配置した位置で捕捉材により捕捉されて有色体
自体の色を発現し、試験の終了を表示し得る着色体をい
う。有色体と捕捉材との組み合わせとしては、有色体と
捕捉材との間の物理的な付加作用や吸着作用を利用する
もの、化学反応や生物学的反応を伴って有色体を捕捉材
位置に捕捉すもの等のいずれをも採用できる。そのうち
でも、有色体として有色磁性粒子等の有色磁性体を使用
し、捕捉材として磁石等の磁場発生部材を使用して、該
有色磁性体を磁力によって毛管移動媒体の下流終端また
はその付近に捕捉して有色体の色に基づく呈色を生じさ
せるのが、簡単で便利である。
【００１２】また、上記の方法で使用する反応型発色
剤とは、２または３以上の反応性成分からなっていて、
それらが反応することによって無色から特定の色に発色
するか、または最初の色とは異なった色に色変化する発
色剤をいう。反応型発色剤としては、化学反応を伴う発
色剤、生物反応を伴う発色剤、またはその両方を伴う発
色剤のいずれをも使用することができる。例えば、検出
試験装置が、イムノアッセイ等に利用されるものの場合
は、反応型発色剤の１つまたは２つ以上の成分を酵素発
色性基質または酵素として、それを毛管移動媒体の所定
位置に施し、残りの成分をそれに対応した酵素または酵
素発色性基質として、それを毛管移動媒体の下流終端ま
たはその付近に位置させて、両者の反応による発色また
は色変化により試験の終了を表示するようにするとよ
い。
剤とは、２または３以上の反応性成分からなっていて、
それらが反応することによって無色から特定の色に発色
するか、または最初の色とは異なった色に色変化する発
色剤をいう。反応型発色剤としては、化学反応を伴う発
色剤、生物反応を伴う発色剤、またはその両方を伴う発
色剤のいずれをも使用することができる。例えば、検出
試験装置が、イムノアッセイ等に利用されるものの場合
は、反応型発色剤の１つまたは２つ以上の成分を酵素発
色性基質または酵素として、それを毛管移動媒体の所定
位置に施し、残りの成分をそれに対応した酵素または酵
素発色性基質として、それを毛管移動媒体の下流終端ま
たはその付近に位置させて、両者の反応による発色また
は色変化により試験の終了を表示するようにするとよ
い。
【００１３】そして、上記で使用する有色体およびその
捕捉材並びに反応型発色剤としては、各々の検出試験の
種類や内容に応じて、実施しようとしている検出試験の
妨害にならないものを選択して使用するのがよい。ま
た、有色体および反応型発色剤の該１つまたは２つ以上
の成分は、途中で毛管移動媒体に吸着されたり付着する
ことがなく、被検査流体の毛管移動に伴って毛管移動媒
体の下流終端まで円滑に移動できるものを選択して使用
するのがよい。また、有色体およびその捕捉材並びに反
応型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分と該残りの成
分は、毛管移動媒体上の検出試験の妨げにならず、しか
も試験の終了を明確に表示し得る位置にそれぞれ設ける
必要がある。
捕捉材並びに反応型発色剤としては、各々の検出試験の
種類や内容に応じて、実施しようとしている検出試験の
妨害にならないものを選択して使用するのがよい。ま
た、有色体および反応型発色剤の該１つまたは２つ以上
の成分は、途中で毛管移動媒体に吸着されたり付着する
ことがなく、被検査流体の毛管移動に伴って毛管移動媒
体の下流終端まで円滑に移動できるものを選択して使用
するのがよい。また、有色体およびその捕捉材並びに反
応型発色剤の該１つまたは２つ以上の成分と該残りの成
分は、毛管移動媒体上の検出試験の妨げにならず、しか
も試験の終了を明確に表示し得る位置にそれぞれ設ける
必要がある。
【００１４】通常、捕捉材および／または反応型発色剤
の該残りの成分は、毛管移動媒体上の下流終端またはそ
の付近に適当な手段により固定して設けるのがよい。ま
た、有色体および／或いは反応型発色剤の該１つまたは
２つ以上の成分は、捕捉材および／または反応型発色剤
の該残りの成分を設けた位置から所定の間隔をあけて、
それよりも上流側に、被検査流体の毛管移動に伴って下
流側に移動し得るようにして施すのがよい。その間隔
は、検出試験装置の未使用時に両者間で捕捉や反応が生
じないような距離としておく。有色体および反応型発色
剤の該１つまたは２つ以上の成分が検出試験を何ら妨害
しない場合には、それらを毛管移動媒体の上流端側に施
してもよいが、通常は、検出しようとする特定物質の検
出域から外れた下流側に設けるのが安全であり好まし
い。
の該残りの成分は、毛管移動媒体上の下流終端またはそ
の付近に適当な手段により固定して設けるのがよい。ま
た、有色体および／或いは反応型発色剤の該１つまたは
２つ以上の成分は、捕捉材および／または反応型発色剤
の該残りの成分を設けた位置から所定の間隔をあけて、
それよりも上流側に、被検査流体の毛管移動に伴って下
流側に移動し得るようにして施すのがよい。その間隔
は、検出試験装置の未使用時に両者間で捕捉や反応が生
じないような距離としておく。有色体および反応型発色
剤の該１つまたは２つ以上の成分が検出試験を何ら妨害
しない場合には、それらを毛管移動媒体の上流端側に施
してもよいが、通常は、検出しようとする特定物質の検
出域から外れた下流側に設けるのが安全であり好まし
い。
【００１５】また、毛管移動媒体の下流終端またはその
付近に捕捉材および／または反応型発色剤の該残りの成
分を配置するに当たって、その配置形状は毛管移動媒体
を横切る直線状としたり、花型、星型、その他の任意の
形状にすることができ、その場合にはその配置形状に応
じた直線状、花型、星型等の呈色状態を発現させること
ができ、試験の終了を一層明確に表示することができ
る。
付近に捕捉材および／または反応型発色剤の該残りの成
分を配置するに当たって、その配置形状は毛管移動媒体
を横切る直線状としたり、花型、星型、その他の任意の
形状にすることができ、その場合にはその配置形状に応
じた直線状、花型、星型等の呈色状態を発現させること
ができ、試験の終了を一層明確に表示することができ
る。
【００１６】本発明の内容の理解のために、近年開発さ
れたイムノクロマトグラフ法（U.R.Charaborty et al.,
Ann. Biol. clin.,1990,48, 403-408 ; R.F. Zuk et a
l.,CLINICAL CHEMISTRY, Vol.31, No.7, 1985）を例に
とって、本発明を図１〜２により具体的に説明する。
れたイムノクロマトグラフ法（U.R.Charaborty et al.,
Ann. Biol. clin.,1990,48, 403-408 ; R.F. Zuk et a
l.,CLINICAL CHEMISTRY, Vol.31, No.7, 1985）を例に
とって、本発明を図１〜２により具体的に説明する。
【００１７】図１および図２において、１はクロマトグ
ラフ媒体、２は裏打ちフイルム、３は試料（検体）採取
部、４は検体中の測定対象抗原と特異的に反応する標識
した抗体（以後「標識抗体」という）の乾燥物を施した
位置、５は検体中の測定対象抗原と別の位置で特異的に
反応する抗体（以後「固定化抗体」という）をクロマト
グラフ媒体に固定化してある位置（検出部）、６は有色
磁性粒子、７は磁石（ゴム磁石等）、８は酵素発色性基
質（酵素）、そして９は固定化された酵素（酵素発色性
基質）を示す。
ラフ媒体、２は裏打ちフイルム、３は試料（検体）採取
部、４は検体中の測定対象抗原と特異的に反応する標識
した抗体（以後「標識抗体」という）の乾燥物を施した
位置、５は検体中の測定対象抗原と別の位置で特異的に
反応する抗体（以後「固定化抗体」という）をクロマト
グラフ媒体に固定化してある位置（検出部）、６は有色
磁性粒子、７は磁石（ゴム磁石等）、８は酵素発色性基
質（酵素）、そして９は固定化された酵素（酵素発色性
基質）を示す。
【００１８】図１において、測定対象抗原を含有する検
体を試料採取部３に施すと、毛管移動によって該抗原を
含む検体が下流側へと移動してゆき、位置４で標識抗体
と抗原・抗体反応を生じて標識された反応物を生ずる。
この標識された反応物はクロマトグラフ媒体上を更に下
流側へと毛管移動してゆき、検出部５で固定化抗体と更
に抗原・抗体反応を生じて検出部５に捕捉されて標識に
よる発現を行って、測定対象抗原の有無等の検出が行わ
れる。検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続
け、有色磁性粒子位置６に達し、該有色磁性粒子を随伴
しながら更に下流側に移動して磁石７位置に到達し、そ
こで磁石７によって捕捉されて有色磁性粒子に色に基づ
く呈色を発現して、試験の終了、すなわち検体がクロマ
トグラフ媒体の下流終端またはその付近に到達したこと
を明確に表示する。
体を試料採取部３に施すと、毛管移動によって該抗原を
含む検体が下流側へと移動してゆき、位置４で標識抗体
と抗原・抗体反応を生じて標識された反応物を生ずる。
この標識された反応物はクロマトグラフ媒体上を更に下
流側へと毛管移動してゆき、検出部５で固定化抗体と更
に抗原・抗体反応を生じて検出部５に捕捉されて標識に
よる発現を行って、測定対象抗原の有無等の検出が行わ
れる。検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続
け、有色磁性粒子位置６に達し、該有色磁性粒子を随伴
しながら更に下流側に移動して磁石７位置に到達し、そ
こで磁石７によって捕捉されて有色磁性粒子に色に基づ
く呈色を発現して、試験の終了、すなわち検体がクロマ
トグラフ媒体の下流終端またはその付近に到達したこと
を明確に表示する。
【００１９】図１において、磁石７は、検出試験装置と
一体に設けておいても、または着脱自在に設けておいて
も、或いは個別に準備しておき各々の試験内容等に応じ
て試験時に適当な位置に取り付けるようにしてもよい。
また、その場合に使用する有色磁性体の例としては、磁
性を有する着色したポリマー粒子；鉄、コバルト、ニッ
ケルまたはそれらの化合物等からなる着色した磁性物質
自体；体内にマグネタイトを持っている着色標識した細
菌（例えば走磁性細菌）等を挙げることができる。
一体に設けておいても、または着脱自在に設けておいて
も、或いは個別に準備しておき各々の試験内容等に応じ
て試験時に適当な位置に取り付けるようにしてもよい。
また、その場合に使用する有色磁性体の例としては、磁
性を有する着色したポリマー粒子；鉄、コバルト、ニッ
ケルまたはそれらの化合物等からなる着色した磁性物質
自体；体内にマグネタイトを持っている着色標識した細
菌（例えば走磁性細菌）等を挙げることができる。
【００２０】また、図２においては、図１の場合と同様
に、試料採取部３に供給された測定対象抗原を含有する
検体が毛管移動によって下流側へと移動してゆき、位置
４で標識抗体と抗原・抗体反応を生じて標識された反応
物を生じ、この標識された反応物が検出部５で固定化抗
体と更に抗原・抗体反応を生じて検出部５に捕捉されて
標識により発現して、測定対象抗原の有無等の検出が行
われる。検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続
けて、８の位置の酵素発色性基質（酵素）に達し、その
後該酵素発色性基質（酵素）を随伴しながら更に下流側
に毛管移動して、固定化された酵素（酵素発色性基質）
９に到達し、そこで反応を生じて発色または色変化を起
こし、試験の終了を明確に表示する。
に、試料採取部３に供給された測定対象抗原を含有する
検体が毛管移動によって下流側へと移動してゆき、位置
４で標識抗体と抗原・抗体反応を生じて標識された反応
物を生じ、この標識された反応物が検出部５で固定化抗
体と更に抗原・抗体反応を生じて検出部５に捕捉されて
標識により発現して、測定対象抗原の有無等の検出が行
われる。検体の残部はその後も下流側へと毛管移動を続
けて、８の位置の酵素発色性基質（酵素）に達し、その
後該酵素発色性基質（酵素）を随伴しながら更に下流側
に毛管移動して、固定化された酵素（酵素発色性基質）
９に到達し、そこで反応を生じて発色または色変化を起
こし、試験の終了を明確に表示する。
【００２１】図２のものでは、酵素発色性基質および酵
素の組合せの外に、酵素／酵素基質／発色性成分の組み
合わせを使用してもよい。その場合には、酵素、酵素基
質および発色性成分の１つまたは２つを所定の同じ位置
または別々の位置に施し、残りの２つまたは１つの成分
を毛管移動媒体の下終端またはその付近に固定して設け
るのがよい。その際の固定化は、この種の物質に対して
通常使用されている固定化方法を採用するのがよい。
素の組合せの外に、酵素／酵素基質／発色性成分の組み
合わせを使用してもよい。その場合には、酵素、酵素基
質および発色性成分の１つまたは２つを所定の同じ位置
または別々の位置に施し、残りの２つまたは１つの成分
を毛管移動媒体の下終端またはその付近に固定して設け
るのがよい。その際の固定化は、この種の物質に対して
通常使用されている固定化方法を採用するのがよい。
【００２２】反応性発色剤である酵素発色性基質／酵素
の組合わせの例としては、アルカリホスファターゼ／５
−クロロー４−ブロモ−３−インドホスフェートからな
る組合せ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ／２−ニトロフェ
ニル・β−Ｄ−ガラクトシドからなる組合わせ等を挙げ
ることができる。また、反応性発色剤である酵素／酵素
基質／発色性成分の組合せの例としては、ペルオキシダ
ーゼ／ヒドロペルオキシド／２，２’−アジノビス（３
−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）ジアンモ
ニウム塩（ＡＢＴＳ）からなる組合せ、グルコースオキ
シダーゼ／グルコース／ＡＢＴＳからなる組合せ等を挙
げることができる。
の組合わせの例としては、アルカリホスファターゼ／５
−クロロー４−ブロモ−３−インドホスフェートからな
る組合せ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ／２−ニトロフェ
ニル・β−Ｄ−ガラクトシドからなる組合わせ等を挙げ
ることができる。また、反応性発色剤である酵素／酵素
基質／発色性成分の組合せの例としては、ペルオキシダ
ーゼ／ヒドロペルオキシド／２，２’−アジノビス（３
−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）ジアンモ
ニウム塩（ＡＢＴＳ）からなる組合せ、グルコースオキ
シダーゼ／グルコース／ＡＢＴＳからなる組合せ等を挙
げることができる。
【００２３】また、上記した酵素発色性基質／酵素の組
合せ、および酵素／酵素基質／発色性成分の組合せの代
わりに、通常の化学反応によって発色し得る複数の化合
物の組合せを使用してもよく、そのような例としては、
カリウム塩／コバルト亜硝酸ナトリウム、臭化物／硝酸
銀、硝酸銀／ジフェニルアミン、第１鉄塩／フェリシア
ン化カリウム、ヨウ素／デンプン等を挙げることができ
る。
合せ、および酵素／酵素基質／発色性成分の組合せの代
わりに、通常の化学反応によって発色し得る複数の化合
物の組合せを使用してもよく、そのような例としては、
カリウム塩／コバルト亜硝酸ナトリウム、臭化物／硝酸
銀、硝酸銀／ジフェニルアミン、第１鉄塩／フェリシア
ン化カリウム、ヨウ素／デンプン等を挙げることができ
る。
【００２４】更に、図１に示すものと図２に示すものを
組み合わせてもよく、その場合には、有色磁性粒子６の
位置と酵素発色性基質（酵素）８の位置は互いに離して
おいても、または互いに悪影響を及ぼさない時は同じ位
置にしてもよい。更に、磁石７の位置と酵素（酵素発色
性基質）９の位置は多少ずれしておいても、または同じ
位置にしておいてもよい。
組み合わせてもよく、その場合には、有色磁性粒子６の
位置と酵素発色性基質（酵素）８の位置は互いに離して
おいても、または互いに悪影響を及ぼさない時は同じ位
置にしてもよい。更に、磁石７の位置と酵素（酵素発色
性基質）９の位置は多少ずれしておいても、または同じ
位置にしておいてもよい。
【００２５】図１および図２に示したものは、ほんの一
例であり、本発明はそれに限定されるものではない。そ
こで用いる毛管移動媒体等は、この種の検査試験におい
て従来から知られているいずれのものを使用してもよ
く、またそれらの形状もストリップ状だけでなくカラム
状等種々の形状とすることができる。
例であり、本発明はそれに限定されるものではない。そ
こで用いる毛管移動媒体等は、この種の検査試験におい
て従来から知られているいずれのものを使用してもよ
く、またそれらの形状もストリップ状だけでなくカラム
状等種々の形状とすることができる。
【００２６】そして、本発明においては、毛管移動媒体
の下流終端またはその付近における有色体用の捕捉材ま
たは反応型発色剤の該残りの成分の配置位置、毛管移動
媒体の材質や厚さ、毛管移動媒体の形状等を変えたり、
或いは毛管移動媒体は下流終端部に別の吸水体を設ける
等の方法を採用することによって、被検査流体が捕捉材
または反応型発色剤の該残りの成分の配置位置に到達す
るまでの時間、すなわち試験終了表示を発するまでの時
間を変化調節することができる。
の下流終端またはその付近における有色体用の捕捉材ま
たは反応型発色剤の該残りの成分の配置位置、毛管移動
媒体の材質や厚さ、毛管移動媒体の形状等を変えたり、
或いは毛管移動媒体は下流終端部に別の吸水体を設ける
等の方法を採用することによって、被検査流体が捕捉材
または反応型発色剤の該残りの成分の配置位置に到達す
るまでの時間、すなわち試験終了表示を発するまでの時
間を変化調節することができる。
【００２７】そして、本発明は、毛管移動媒体を使用す
る検出試験法のいずれに対しても適用可能であり、例え
ば上記したイムノクロマトグラフ法のような免疫学的試
験法、毛管移動媒体を利用する化学分析等に有効に使用
できる。また、被検査流体は液体および気体のいずれの
形態であってもよい。以下に本発明を実施例により具体
的に説明するが、本発明はそれにより限定されない。
る検出試験法のいずれに対しても適用可能であり、例え
ば上記したイムノクロマトグラフ法のような免疫学的試
験法、毛管移動媒体を利用する化学分析等に有効に使用
できる。また、被検査流体は液体および気体のいずれの
形態であってもよい。以下に本発明を実施例により具体
的に説明するが、本発明はそれにより限定されない。
【００２８】
《実施例 １》試料採取部（親水性多孔性プラスチッ
ク；縦×横×厚さ＝５０ｍｍ×８ｍｍ×４ｍｍ）を上流
端（始端側）に有し、ポリエステルフイルムで裏打ちし
たナイロン・テトロン混紡織物（厚さ２５０μｍ）から
なる毛管移動媒体（幅８ｍｍ、長さ１００ｍｍ）を備え
たクロマトグラフを準備した。毛管移動媒体の始端から
１０ｍｍの位置に金コロイド粒子で標識された抗ヒト絨
毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）ポリクロナール抗体の凍
結乾燥物１０μｇを施した。また、該標識抗体の位置か
ら１０ｍｍ離れた下流位置に抗ＨＣＧポリクロナール抗
体を固定化した。更に、該固定化抗体から１０ｍｍ下流
の位置に、青色磁性ポリスチレンラテックス粒子（固形
分１％；ポリサイエンスＩｎｃ.社製)３０μｌを施し、
また該青色磁性ポリスチレン粒子を施した位置から３０
ｍｍ下流（毛管移動媒体の始端から７０ｍｍの位置）
に、ゴム磁石（パイロット社製；マグシート；幅×長さ
×厚さ＝８ｍｍ×１ｍｍ×１ｍｍ）をポリエステル裏打
ちフイルム側に貼って、図１に示した検出試験具を作成
した。
ク；縦×横×厚さ＝５０ｍｍ×８ｍｍ×４ｍｍ）を上流
端（始端側）に有し、ポリエステルフイルムで裏打ちし
たナイロン・テトロン混紡織物（厚さ２５０μｍ）から
なる毛管移動媒体（幅８ｍｍ、長さ１００ｍｍ）を備え
たクロマトグラフを準備した。毛管移動媒体の始端から
１０ｍｍの位置に金コロイド粒子で標識された抗ヒト絨
毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）ポリクロナール抗体の凍
結乾燥物１０μｇを施した。また、該標識抗体の位置か
ら１０ｍｍ離れた下流位置に抗ＨＣＧポリクロナール抗
体を固定化した。更に、該固定化抗体から１０ｍｍ下流
の位置に、青色磁性ポリスチレンラテックス粒子（固形
分１％；ポリサイエンスＩｎｃ.社製)３０μｌを施し、
また該青色磁性ポリスチレン粒子を施した位置から３０
ｍｍ下流（毛管移動媒体の始端から７０ｍｍの位置）
に、ゴム磁石（パイロット社製；マグシート；幅×長さ
×厚さ＝８ｍｍ×１ｍｍ×１ｍｍ）をポリエステル裏打
ちフイルム側に貼って、図１に示した検出試験具を作成
した。
【００２９】上記で作成した検出試験具の試料採取部に
尿（検体）１ｍｌを浸み込ませて、イムノクロマトグラ
フ法による試験を行ったところ、抗ＨＣＧポリクロナー
ル抗体が固定化された箇所に検体中のＨＣＧが検出され
た。また、試験開始から３分後にゴム磁石位置に青色磁
性ポリスチレン粒子に基づく青色が観察されて、試験の
終了が呈色表示された。また、ゴム磁石の位置を毛管移
動媒体の始端から８０ｍｍに変えたところ、４分後に青
色呈色による試験終了表示がなされた。
尿（検体）１ｍｌを浸み込ませて、イムノクロマトグラ
フ法による試験を行ったところ、抗ＨＣＧポリクロナー
ル抗体が固定化された箇所に検体中のＨＣＧが検出され
た。また、試験開始から３分後にゴム磁石位置に青色磁
性ポリスチレン粒子に基づく青色が観察されて、試験の
終了が呈色表示された。また、ゴム磁石の位置を毛管移
動媒体の始端から８０ｍｍに変えたところ、４分後に青
色呈色による試験終了表示がなされた。
【００３０】《実施例 ２》実施例１で使用した検出試
験具の毛管移動媒体のゴム磁石を張り付けた下流終端部
分に濾紙(Bio-rad gel dryer;Bio-rad社製；縦５０ｍ
ｍ、横８ｍｍ、厚さ０.８５ｍｍ）を１枚または２枚重
ねて厚くし、且つゴム磁石の位置を毛管移動媒体の始端
から５５〜６５ｍｍの位置にした他は実施例１と同様に
して検出試験を行ったところ、試験終了を表示するまで
に要した時間は下記の表１に示すとおりであった。
験具の毛管移動媒体のゴム磁石を張り付けた下流終端部
分に濾紙(Bio-rad gel dryer;Bio-rad社製；縦５０ｍ
ｍ、横８ｍｍ、厚さ０.８５ｍｍ）を１枚または２枚重
ねて厚くし、且つゴム磁石の位置を毛管移動媒体の始端
から５５〜６５ｍｍの位置にした他は実施例１と同様に
して検出試験を行ったところ、試験終了を表示するまで
に要した時間は下記の表１に示すとおりであった。
【００３１】
【表１】 Bio-rad gel dryer枚数 ゴム磁石の位置 試験終了表示までの時間 (始端からの距離)) １ 枚 ６０ｍｍ ３分 ６５ｍｍ ４分 ２ 枚 ５５ｍｍ ３分 ６０ｍｍ ４分
【００３２】上記表１の結果から、磁石の位置および／
または毛管移動媒体の状態（材質）等を変えることによ
って、試験終了を表示するのに要する時間を変化調節で
きることがわかる。
または毛管移動媒体の状態（材質）等を変えることによ
って、試験終了を表示するのに要する時間を変化調節で
きることがわかる。
【００３３】《実施例 ３》実施例１に使用した検出試
験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わり
に、毛管移動媒体の始端から４５ｍｍの位置に２ｍＭ
ＭgＣｌ2−１０ｍＭ５−クロロー４−ブロモ−３−イン
ドホスフェートの１０μｌをスポイトで施し、また磁石
を設ける代わりに毛管移動媒体の始端から６０ｍｍの位
置にウシ腸由来のアルカリホスファターゼの３μｇを物
理吸着により固定化した検出試験具を使用した他は、実
施例１と同様にして検体の検出試験を行った。その結
果、抗ＨＣＧポリクロナール抗体が固定化された箇所に
検体中のＨＣＧが検出された。また、ウシ腸由来のアル
カリホスファターゼを固定化した位置に液が到達してか
ら３０〜６０秒後に青色の発色が明瞭に発現して試験の
終了を確認することができた。
験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わり
に、毛管移動媒体の始端から４５ｍｍの位置に２ｍＭ
ＭgＣｌ2−１０ｍＭ５−クロロー４−ブロモ−３−イン
ドホスフェートの１０μｌをスポイトで施し、また磁石
を設ける代わりに毛管移動媒体の始端から６０ｍｍの位
置にウシ腸由来のアルカリホスファターゼの３μｇを物
理吸着により固定化した検出試験具を使用した他は、実
施例１と同様にして検体の検出試験を行った。その結
果、抗ＨＣＧポリクロナール抗体が固定化された箇所に
検体中のＨＣＧが検出された。また、ウシ腸由来のアル
カリホスファターゼを固定化した位置に液が到達してか
ら３０〜６０秒後に青色の発色が明瞭に発現して試験の
終了を確認することができた。
【００３２】《実施例 ４》実施例１に使用した検出試
験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わり
に、毛管移動媒体の始端から４０ｍｍの位置にウレアハ
イドロジェンパーオキサイド（Sigma社製）１２.５μｇ
を施し、毛管移動媒体の始端から５０ｍｍの位置に西洋
ワサビ由来ペルオキシダーゼ２μｇを施し、また磁石を
設ける代わりに毛管移動媒体の始端から６０ｍｍの位置
にＡＢＴＳ４．５μｇを固定化した検出試験具を使用し
た他は実施例１と同様にして検体の検出試験を行った。
その結果、ＡＢＴＳを固定化した位置に液が到達してか
ら３０〜６０秒後に緑色の発色が明瞭に発現して試験の
終了を確認することができた。
験具において、青色磁性ポリスチレン粒子を施す代わり
に、毛管移動媒体の始端から４０ｍｍの位置にウレアハ
イドロジェンパーオキサイド（Sigma社製）１２.５μｇ
を施し、毛管移動媒体の始端から５０ｍｍの位置に西洋
ワサビ由来ペルオキシダーゼ２μｇを施し、また磁石を
設ける代わりに毛管移動媒体の始端から６０ｍｍの位置
にＡＢＴＳ４．５μｇを固定化した検出試験具を使用し
た他は実施例１と同様にして検体の検出試験を行った。
その結果、ＡＢＴＳを固定化した位置に液が到達してか
ら３０〜６０秒後に緑色の発色が明瞭に発現して試験の
終了を確認することができた。
【００３３】
【発明の効果】試験の終了時に鮮明な呈色状態または色
変化を発現させることが可能なため、試験の終了を明確
に表示することができる。毛管移動媒体および被検査流
体の色、種類、性状等に応じて有色体や反応型発色剤の
色や種類等を適宜選択することことができ、それによっ
て試験終了時の呈色状態を毛管移動媒体や被検査流体自
体の色と明確に区別できるようにすることが可能であ
る。 有色体や反応型発色剤を選択することによって、試験終
了表示部分を試験終了前の無色の状態から有色に発色さ
せることが可能であり、その場合には試験の終了が極め
て明確に表示できる。
変化を発現させることが可能なため、試験の終了を明確
に表示することができる。毛管移動媒体および被検査流
体の色、種類、性状等に応じて有色体や反応型発色剤の
色や種類等を適宜選択することことができ、それによっ
て試験終了時の呈色状態を毛管移動媒体や被検査流体自
体の色と明確に区別できるようにすることが可能であ
る。 有色体や反応型発色剤を選択することによって、試験終
了表示部分を試験終了前の無色の状態から有色に発色さ
せることが可能であり、その場合には試験の終了が極め
て明確に表示できる。
【図１】本発明の検出試験装置の一例を示す図である。
【図２】本発明の検出試験装置の別の例を示す図であ
る。
る。
１ クロマトグラフ媒体 ２ 裏打ちフイルム ３ 試料採取部 ４ 標識抗体 ５ 固定化抗体 ６ 有色磁性粒子 ７ 磁石 ８ 酵素発色性基質（酵素） ９ 固定化された酵素（酵素発色性基質）
Claims (9)
- 【請求項１】 毛管移動媒体を使用して被検査流体中の
特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の
所定位置に有色体を施すと共に、毛管移動媒体の下流終
端またはその付近に有色体用の捕捉材を位置させ、被検
査流体の毛管移動に伴って下流終端側に移動してきた有
色体を捕捉材で捕捉して試験の終了を呈色表示すること
を特徴とする方法。 - 【請求項２】 有色体が有色磁性粒子であり、そして有
色体用の捕捉材が磁場発生部材である請求項１の方法。 - 【請求項３】 毛管移動媒体を使用して被検査流体中の
特定物質を検出試験する方法において、毛管移動媒体の
所定位置に反応型発色剤の１つまたは２つ以上の成分を
施すと共に、毛管移動媒体の下流終端またはその付近に
反応型発色剤の残りの成分を位置させ、被検査流体の毛
管移動に伴って下流終端側に移動してきた反応型発色剤
の該１つまたは２つ以上の成分を該残りの成分と反応・
発色させて試験の終了を呈色表示することを特徴とする
方法。 - 【請求項４】 反応型発色剤の該１つまたは２つ以上の
成分が酵素発色性基質または酵素であり、残りの成分が
それに対応した酵素または酵素発色性基質である請求項
３の方法。 - 【請求項５】 反応型発色剤が化学反応型の発色剤であ
る請求項３の方法。 - 【請求項６】 反応型発色剤が化学反応および酵素反応
を伴う発色剤である請求項３の方法。 - 【請求項７】 反応型発色剤が、酵素、酵素基質および
反応型発色成分の組み合わせからなる請求項６の方法。 - 【請求項８】 請求項１および請求項３の方法を組み合
わせた方法。 - 【請求項９】 毛管移動媒体、その所定位置に施した有
色体および／或いは反応型発色剤の１つまたは２つ以上
の成分、並びに毛管移動媒体の下流終端またはその付近
に配置した有色体用の捕捉材および／または反応型発色
剤の残りの成分を備えていることを特徴とする試験終了
表示体付きの検出試験装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24021791A JPH0552836A (ja) | 1991-08-28 | 1991-08-28 | 試験終了表示方法および試験終了表示体付き検出試験装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24021791A JPH0552836A (ja) | 1991-08-28 | 1991-08-28 | 試験終了表示方法および試験終了表示体付き検出試験装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0552836A true JPH0552836A (ja) | 1993-03-02 |
Family
ID=17056195
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24021791A Pending JPH0552836A (ja) | 1991-08-28 | 1991-08-28 | 試験終了表示方法および試験終了表示体付き検出試験装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0552836A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6194225B1 (en) | 1997-09-18 | 2001-02-27 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Immunochromatography-assisted device |
| WO2002037108A1 (en) * | 2000-10-27 | 2002-05-10 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Reagent and method for detecting substance |
| EP1226434A4 (en) * | 1999-10-15 | 2005-04-06 | Wavesense Llc | SYSTEMS AND METHODS FOR PERFORMING MAGNETIC CHROMATOGRAPHY ASSAYS |
| JP2012189453A (ja) * | 2011-03-10 | 2012-10-04 | Toppan Printing Co Ltd | 標識磁性粒子を用いた被検物質の検出方法、及び被検物質の検出システム |
-
1991
- 1991-08-28 JP JP24021791A patent/JPH0552836A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6194225B1 (en) | 1997-09-18 | 2001-02-27 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Immunochromatography-assisted device |
| EP1226434A4 (en) * | 1999-10-15 | 2005-04-06 | Wavesense Llc | SYSTEMS AND METHODS FOR PERFORMING MAGNETIC CHROMATOGRAPHY ASSAYS |
| NO331708B1 (no) * | 1999-10-15 | 2012-03-05 | Wavesense Llc | Systemer og fremgangsmåter for utføring av magnetisk kromatografianalyser |
| WO2002037108A1 (en) * | 2000-10-27 | 2002-05-10 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Reagent and method for detecting substance |
| JP2002202310A (ja) * | 2000-10-27 | 2002-07-19 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | 物質の検出試薬及び検出方法 |
| US7090984B2 (en) | 2000-10-27 | 2006-08-15 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | Device and method for detecting substance |
| JP2012189453A (ja) * | 2011-03-10 | 2012-10-04 | Toppan Printing Co Ltd | 標識磁性粒子を用いた被検物質の検出方法、及び被検物質の検出システム |
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