JPH0559051A - アポビンカミン酸アミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新しい制癌効果増強作用を有する化合物を提
供する。 【構成】 式 （式中、Ｒ¹及びＲ²はそれぞれ水素原子もしくは炭素原
子数１〜８個のアルキル基を示すか、またはＲ¹とＲ²は
一緒になって炭素原子数２〜６個のアルキレン鎖を示
し、Ｒ³は水素原子または炭素原子数１〜５個のアルキ
ル基を示す。）で表わされるアポビンカミン酸アミド誘
導体及びその酸付加塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、制癌効果増強剤として
有用なアポビンカミン酸アミド誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】これまでに報告されている制癌効果増強
剤は主としてカルシウム拮抗剤である。細胞内カルシウ
ムイオンは心筋、平滑筋細胞に於ける化学伝達物質であ
り、筋の興奮−収縮連関に於て重要な役割を果たしてい
る。カルシウム拮抗剤は、カルシウムイオンの細胞内へ
の流入を阻害することにより、主薬理作用を発揮する。
従って、癌細胞での制癌効果増強を期待するとき、カル
シウム拮抗剤はその主薬理作用のために、心血管系に対
し逆に臨床的副作用を引き起こし、その制癌効果増強剤
としての発展が妨げられているのが現状である。一方、
本発明の化合物は、ビンカミン骨格を有している。この
骨格を有する化合物は多くの誘導体が開発されている
が、制癌効果増強作用を有するものは知られていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、強い
制癌効果増強作用を有する化合物を提供することにあ
る。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは前記課題を
達成するために鋭意研究を進めた結果、ある種のアポビ
ンカミン酸アミド誘導体が強い制癌剤効果増強作用を有
することを見いだし、本発明を完成した。すなわち、本
発明は、式

【０００５】

【０００６】（式中、Ｒ¹及びＲ²はそれぞれ水素原子も
しくは炭素原子数１〜８個のアルキル基を示すか、また
はＲ¹とＲ²は一緒になって炭素原子数２〜６個のアルキ
レン鎖を示し、Ｒ³は水素原子または炭素原子数１〜５
個のアルキル基を示す。）で表わされるアポビンカミン
酸アミド誘導体及びその酸付加塩である。

【０００７】本発明においてアルキル基とは、メチル
基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−
ブチル基、イソブチル基、ｎ−ペンチル基などの直鎖状
あるいは分枝鎖状のアルキル基をいう。酸付加塩とは、
無機酸又は有機酸が付加した塩を示す。この場合使用す
る無機酸又は有機酸には特に制限はないが、例えば塩
酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸、蟻酸、酢酸、プロピオン
酸、グリコール酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、アス
コルビン酸、サリチル酸、乳酸、リンゴ酸、メタンスル
ホン酸、パラトルエンスルホン酸が挙げられる。

【０００８】本発明の化合物は、例えば下記の方法によ
り製造することができる。 ［Ａ法］

【０００９】

【００１０】（反応式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記と同
義である。） ［Ｂ法］

【００１１】

【００１２】（反応式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記と同
義である。） Ａ法によれば特開平１−１５６９７７号公報により公知
である式（II）で表わされる１０−アルカノイルアポビ
ンカミン酸をアミド化することにより容易に製造するこ
とができる。すなわち、まず式（II）の化合物をベンゼ
ン系溶媒（例えば、ベンゼン、トルエンなど）中、アミ
ド系溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドな
ど）触媒量存在下、ハロゲン化剤（例えば、塩化チオニ
ル、臭化チオニル、オギザリルクロライドなど）と、室
温〜１２０℃で反応させカルボン酸ハライドとする。反
応時間は、１０分間〜８時間である。次いで、カルボン
酸ハライドをハロゲン系溶媒（例えば、ジクロロメタ
ン、クロロホルムなど）またはベンゼン系溶媒中、３級
アミン（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエ
チルアミンなど）存在下または非存在下、式 Ｒ¹Ｒ²Ｎ
Ｈ （式中、Ｒ¹及びＲ²は前記と同義である。）で表わ
される化合物またはその塩酸塩と−１０℃〜室温で反応
することにより式（Ｉ）の化合物が得られる。反応時間
は１０分間〜２４時間である。

【００１３】また、Ｂ法によれば、式（III）で表わさ
れるアポビンカミン酸アミド誘導体を、フリーデルクラ
フツ反応によりアシル化することにより容易に製造する
ことができる。すなわち、式（III）の化合物を、ルイ
ス酸（例えば、塩化アルミニウム、塩化第二鉄、四塩化
スズ、四塩化チタンなどの一般にフリーデルクラフツ反
応に使用し得るルイス酸）存在下、アシル化剤（例え
ば、アセチルクロライド、無水酢酸、プロピオニルクロ
ライドなど）と溶媒中（例えば、塩化メチレン、塩化エ
チレン、二硫化炭素、四塩化炭素、ニトロメタン、ニト
ロエタン、ニトロベンゼンなどの一般にフリーデルクラ
フツ反応に用いられる溶媒の単独または混合）、０℃〜
６０℃で反応することにより式（Ｉ）の化合物が得られ
る。反応時間は１０分間〜２４時間である。

【００１４】本発明の化合物は制癌剤と併用して本発明
の効果を奏する。併用する制癌剤としては特に制限はな
いが、例えばアドリアマイシン、ダウノルビシン、マイ
トマイシンＣ、ブレオマイシン、アクチノマイシンＤの
ごとき抗腫瘍性抗生物質、ビンクリスチン、ビンブラス
チン、エトポシドのごとき植物由来物質、５−フルオロ
ウラシル、メトトレキセート、シトシンアラビノシドの
ごとき代謝拮抗剤などの制癌性物質が含まれる。式
（Ｉ）の化合物の投与方法としては、制癌剤と同時にあ
るいはその前後に、制癌剤と配合して、又は別々に投与
することができる。すなわち、式（Ｉ）の化合物を単独
で各種の剤形の製剤にし、各種制癌剤と別々に投与する
こともできるが、両者を予め配合しておき、これらを各
種の剤形の製剤にした後投与することもできる。製剤の
剤形としては、制癌剤の種類により、あるいは患者の症
状、年齢及び治療の目的に応じて適宜、錠剤、顆粒剤、
散剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁化剤などの経口投
与剤、注射剤、坐剤などの非経口投与剤を選択すること
ができる。これらの製剤は、常用の賦形剤（例えば、結
晶セルロース、デンプン、乳糖など）、結合剤（例え
ば、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリ
ドンなど）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タル
クなど）などを用いて製造することができる。式（Ｉ）
の化合物の投与量は、成人を治療する場合で５０〜１５
００ｍｇであり、これを１日１〜３回に分けて投与する
が、この投与量は患者の年齢、体重、症状により適宜増
減することができる。

【００１５】

【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説
明する。 （実施例１）Ｎ，Ｎ−ペンタメチレン−１０−アセチルアポビンカミ
ン酸アミド １０−アセチルアポビンカミン酸（３ｇ）をベンゼン
（１００ｍｌ）に懸濁し、塩化チオニル（１０ｍｌ）、
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）を加え３
０分、還流した。ベンゼンを減圧下濃縮した。残渣に再
びベンゼン（１００ｍｌ）を加え、ピペリジン（５ｍ
ｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液を水洗後、
乾燥し減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付しエーテルで溶出した。溶出液を濃縮
し酢酸エチルより再結晶することにより、無色針状結晶
（３ｇ）を得た。 ｍ．ｐ．１８５〜１９５℃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ），７．７８
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈｚ），７．１３（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｓ），２．８
〜４．０（８Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），１．２
０〜２．１０（９Ｈ，ｍ），０．９５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
７Ｈｚ） 実施例１に準じて下記の化合物を製造した。Ｎ−ｎ−ヘキシル−１０−アセチルアポビンカミン酸ア
ミド塩酸塩 ｍ．ｐ．１９０〜１９５℃（分解）（塩化メチレン−酢
酸エチルから再結晶，以下、融点の数値の後の括弧内の
溶媒名は、その溶媒から再結晶したことを示す。） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），８．８０（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈ
ｚ），７．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈｚ），
７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．６９（１Ｈ，
ｓ），５．０４（１Ｈ，ｂｒｓ），２．６２（３Ｈ，
ｓ），１．００（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９０
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ） （実施例２）Ｎ，Ｎ−ジメチル−１０−アセチルアポビンカミン酸ア
ミド １０−アセチルアポビンカミン酸（４００ｍｇ）をベン
ゼン（２０ｍｌ）に懸濁し、塩化チオニル（０．４ｍ
ｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４滴）を加え２
０分、還流した。ベンゼンを減圧下濃縮した。残渣にジ
クロロメタン（２０ｍｌ）を加え、氷冷し、ジメチルア
ミン塩酸塩（３２０ｍｇ）、トリエチルアミン（０．６
ｍｌ）を加え、室温で３０分攪拌した。反応液を水洗
し、硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過、濃縮した。残渣
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付しクロロホ
ルムで溶出した。溶出液を濃縮し酢酸エチルより再結晶
することにより、無色プリズム結晶（１４７ｍｇ）を得
た。 ｍ．ｐ．１９１〜１９３℃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐｍ）；
８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．７９（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝９Ｈｚ），５．３７（１Ｈ，ｓ），４．２７（１Ｈ，
ｂｒｓ），３．１８（３Ｈ，ｓ），２．９０（３Ｈ，ｂ
ｒｓ），２．６５（３Ｈ，ｓ），１．０１（３Ｈ，ｔ，
Ｊ＝８Ｈｚ） 実施例２に準じて下記の化合物を製造した。Ｎ−エチル−１０−アセチルアポビンカミン酸アミド塩
酸塩 ｍ．ｐ．２７０〜２７３℃（エタノール） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．５２（１Ｈ，ｂｒｓ），８．８２（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈ
ｚ），７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），
７．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．７０（１Ｈ，
ｓ），５．０５（１Ｈ，ｂｒｓ），３．７０（２Ｈ，
ｍ），２．９２〜３．３５（６Ｈ，ｍ），２．６２（３
Ｈ，ｓ），１．４８〜２．１２（６Ｈ，ｍ），１．１９
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝
７Ｈｚ） （実施例３）Ｎ−ｎ−ブチル−１０−アセチルアポビンカミン酸アミ
ド塩酸塩 １０−アセチルアポビンカミン酸（４００ｍｇ）をベン
ゼン（２０ｍｌ）に懸濁し、塩化チオニル（０．４ｍ
ｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）を
加え３０分、還流した。ベンゼンを減圧下濃縮した。残
渣にジクロロメタン（２０ｍｌ）を加え、氷冷し、ブチ
ルアミン（０．４ｍｌ）を加え、室温で３０分攪拌し
た。反応液を水洗し、硫酸マグネシウムで乾燥後、濾
過、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィーに付しメタノール−クロロホルム（１：５０）で溶
出した。溶出液を濃縮し、残渣をエタノールに溶解し４
Ｎ−塩酸酢酸エチル溶液（０．５ｍｌ）を加えた。析出
した沈澱物を濾取しメタノール−酢酸エチルより再結晶
することにより、無色針状結晶（１０７ｍｇ）を得た。 ｍ．ｐ．３２１℃（分解） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．８０（１Ｈ，ｂｒｓ），８．８０（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝５Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈ
ｚ），７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），
７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．６９（１Ｈ，
ｓ），５．０３（１Ｈ，ｂｒｓ），２．６２（３Ｈ，
ｓ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９５
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ） 実施例３に準じて下記の化合物を製造した。Ｎ，Ｎ−ジエチル−１０−アセチルアポビンカミン酸ア
ミド塩酸塩 ｍ．ｐ．２８９〜２９１℃（エタノール） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆） δ（ｐｐｍ）；１１．７５
（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈ
ｚ），７．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），
７．１７（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．４０（１
Ｈ，ｓ），５．１７（１Ｈ，ｂｒｓ），３．４５〜３．
８５（４Ｈ，ｍ），２．９１〜３．２９（６Ｈ，ｍ），
２．６２（３Ｈ，ｓ），２．１２（２Ｈ，ｍ），１．８
２（２Ｈ，ｍ），１．６２（２Ｈ，ｍ），１．２５（３
Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）Ｎ−ｎ−プロピル−１０−アセチルアポビンカミン酸ア
ミド ｍ．ｐ． １３５〜１３８℃（酢酸エチル） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐｍ）；
８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．７９（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），７．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝９Ｈｚ），６．００（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），５．
７２（１Ｈ，ｓ），４．１８（１Ｈ，ｂｒｓ），２．９
６〜３．５７（６Ｈ，ｍ），２．６４（３Ｈ，ｓ），
１．３０〜２．０８（１０Ｈ，ｍ），１．０２（６Ｈ，
ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）Ｎ−ｎ−ペンチル−１０−アセチルアポビンカミン酸ア
ミド塩酸塩 ｍ．ｐ．２０５〜２１４℃（分解）（塩化メチレン−酢
酸エチル） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），８．８０（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈ
ｚ），７．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈｚ），
７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．６９（１Ｈ，
ｓ），５．０５（１Ｈ，ｂｒｓ），２．６２（３Ｈ，
ｓ），１．００（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９２
（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）Ｎ，Ｎ−ヘキサメチレン−１０−アセチルアポビンカミ
ン酸アミド ｍ．ｐ．１７２〜１７４℃（酢酸エチル） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；８．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．７４
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈｚ），７．２０（１
Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｓ），
４．１８（１Ｈ，ｂｒｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），
０．９３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）Ｎ−ｎ−ブチル−１０−イソブチリルアポビンカミン酸
アミド塩酸塩 ｍ．ｐ．２１２〜２２３℃（分解）（塩化メチレン−酢
酸エチル） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．７２（１Ｈ，ｂｒｓ），８．８０（１Ｈ，
ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｓ），７．８３
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，２Ｈｚ），７．２４（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ），５．６９（１Ｈ，ｓ），５．０
４（１Ｈ，ｂｒｓ），３．７７（１Ｈ，ｓｅｐｔｅｔ，
Ｊ＝７Ｈｚ），１．２３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．２２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９９（３Ｈ，
ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ），０．９５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ）Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピル−１０−アセチルアポビ
ンカミン酸アミド塩酸塩 ｍ．ｐ．２００〜２０２℃（２−プロパノール） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．７５（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２８（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８Ｈ
ｚ，２Ｈｚ），７．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ），
５．４４（１Ｈ，ｓ），５．１４（１Ｈ，ｂｒｓ），
３．３０〜３．８８（４Ｈ，ｍ），２．８３〜３．２９
（８Ｈ，ｍ），２．６１（３Ｈ，ｓ），１．０８〜２．
２７（１２Ｈ，ｍ），０．９８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈ
ｚ）Ｎ，Ｎ−テトラメチレン−１０−アセチルアポビンカミ
ン酸アミド ｍ．ｐ．１９７〜１９９℃（酢酸エチル） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐｍ）；
８．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．７８（１Ｈ，
ｄｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈｚ），７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝８Ｈｚ），５．４３（１Ｈ，ｓ），４．２２（１Ｈ，
ｂｒｓ），３．６８（２Ｈ，ｍ），２．８７〜３．３２
（８Ｈ，ｍ），２．６５（３Ｈ，ｓ），２．５８（２
Ｈ，ｍ），１．３６〜２．１３（１０Ｈ，ｍ），１．０
１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７Ｈｚ）Ｎ，Ｎ−ジ−ｎ−プロピル−１０−アセチルアポビンカ
ミン酸アミド塩酸塩 ｍ．ｐ．１９２〜１９４℃（２−プロパノール） ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆，２００ＭＨｚ） δ（ｐｐ
ｍ）；１１．６７（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２７（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８Ｈ
ｚ，２Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｍ），５．４０（１
Ｈ，ｂｒｓ），５．１７（１Ｈ，ｂｒｓ），３．３０
（４Ｈ，ｍ），２．９７〜３．９９（６Ｈ，ｍ），２．
６２（３Ｈ，ｓ），１．３０〜２．２５（１０Ｈ，
ｍ），０．９８（６Ｈ，ｍ），０．７２（３Ｈ，ｔ，Ｊ
＝７Ｈｚ）

【発明の効果】本発明の化合物は、制癌剤の抗腫瘍効果
を顕著に増加させるものである。すなわち、本発明の化
合物は、制癌剤に対し耐性を持たない癌細胞の制癌剤に
対する感受性を高めるのみならず、耐性を有する癌細胞
においても当該薬剤感受性を増強させ、その結果、これ
を制癌剤とともに用いれば制癌剤に耐性となった癌及び
自然耐性で難治療性の癌に対して治癒を期することが可
能となる。また、従来、制癌剤は治療効果を期待するた
めに、可能な限り高い量を投与されることが多いが、本
発明の化合物は、癌細胞の制癌感受性を増強させるた
め、制癌剤の使用量を少なくし、毒性発現の少ない低用
量で抗腫瘍効果を得ることも可能である。以下、本発明
の効果を試験例により説明する。 （試験例） ［制癌剤耐性癌細胞内への制癌剤取り込み
増強効果試験］制癌剤耐性癌細胞内への制癌剤取り込み
増強効果試験は、キャンサー・リサーチ（Cancer Resea
rch），第４１巻，１９６７〜１９７２ページ（１９８
１年）に記載の方法に従って行った。ヒト卵巣癌細胞Ａ
２７８０のアドリアマイシン耐性株２７８０ＡＤ［ロー
ガン（Ａ．Ｍ．Ｒｏｇａｎ）ら，サイエンス（Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ），第２２４巻，第９９４〜９９６ページ（１９
８４年）］を５％牛胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０
培養液中に１×１０⁶個／ｍｌ懸濁した。この癌細胞懸
濁液を、２４穴のマルチウェル培養プレートに１穴あた
り１ｍｌ播種し、５％炭酸ガスを通気しながら３７℃で
培養した。２４時間後に培養液を２０ｎｍの³Ｈ−ビン
クリスチン（以下、³Ｈ−ＶＣＲと略称する。）（１×
１０⁴ｄｐｍ／ｐｍｏｌ）、５％牛胎児血清、１０ｍＭ
ヘペス緩衝液を含むＲＰＭＩ−１６４０培養液０．５ｍ
ｌと交換した。被験化合物（Ｎ，Ｎ−ペンタメチレン−
１０−アセチルアポビンカミン酸アミド）をジメチルス
ルホキシドに溶解した後、リン酸緩衝食塩水で希釈し、
この溶液５μｌ（培養液中に於ける被験化合物の濃度は
１．０μｇ／ｍｌ及び１０．０μｇ／ｍｌ）を前記培養
液に加え、５％炭酸ガスを通気しながら３７℃で２時間
培養を続けた後、細胞内に取り込まれた³Ｈ−ＶＣＲ量
を液体シンチレーションカウンターで測定した。効果は
薬物無処理の対照群に取り込まれた³Ｈ−ＶＣＲ量に対
する割合（％）で表した。結果を表１に示した。

【００１６】

【表１】

【００１７】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 中池 司郎 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内 (72)発明者 畑山 勝男 東京都豊島区高田３丁目24番１号 大正製 薬株式会社内 (72)発明者 鶴尾 隆 神奈川県南足柄市塚原4828−15

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式 （式中、Ｒ¹及びＲ²はそれぞれ水素原子もしくは炭素原
   子数１〜８個のアルキル基を示すか、またはＲ¹とＲ²は
   一緒になって炭素原子数２〜６個のアルキレン鎖を示
   し、Ｒ³は水素原子または炭素原子数１〜５個のアルキ
   ル基を示す。）で表わされるアポビンカミン酸アミド誘
   導体及びその酸付加塩。