JPH0565824B2 - - Google Patents
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- JPH0565824B2 JPH0565824B2 JP59086153A JP8615384A JPH0565824B2 JP H0565824 B2 JPH0565824 B2 JP H0565824B2 JP 59086153 A JP59086153 A JP 59086153A JP 8615384 A JP8615384 A JP 8615384A JP H0565824 B2 JPH0565824 B2 JP H0565824B2
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56911—Bacteria
- G01N33/56944—Streptococcus
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
（産業上の利用分野）
本発明は診断用スクリーニング試薬に係り、殊
に溶連菌（溶血性連鎖球菌）感染症の診断のため
に使用されるスクリーニング試薬及びその調製法
に係る。 （従来の技術） SLO即ちストレプトリジンＯはヒト由来連鎖
球菌の産生する溶血性毒素であつて抗原性を有し
ているために、溶連菌が体内でSLOを産生する
と、このSLOに対する抗体であるASLO（抗スト
レプトリジンＯ）が生成される。従つて、血清を
検体としてASLO価を測定する方法は溶連菌感染
症の診断法として汎用されるに至つている。 このASLO価測定法としては、従来ランツ−ラ
ンダール法が採用されて来た。この従来法は結果
が診断の根拠に供するに足るものとは云え、稀釈
度の異なる数種の血清液を必要とする面倒があ
り、又ASLO価測定処理方法も煩雑であると云う
欠陥を有していた。このランツ−ランダール法の
欠陥を幾分なりとも改善するために、マイクロタ
イター法が開発されたが、この方法においても稀
釈血清（1/10）を必要とし且つランツ−ランダー
ル法と同様にウサギ又はヒトＯ型赤血球浮遊液を
必要とする。 ASLO価を測定する上記両方法においてランツ
−ランダール法ではASLO価166単位を、又マイ
クロタイター法では160単位を基準として、これ
より下限値の場合には正常、上限値の場合には異
常と判断している。ここで留意すべきことは、診
断は、唯一回の検査で得られた値に基き下される
のではなく、臨床症状に応じ経過を追つて何回か
検査を行ないASLO価の推移変動を考慮してなさ
れる点にある。上記両従来法は正常値を示す検体
に関しても、異常値を示す検体に関しても、これ
らに関係なく同様の処理操作を必要とするもので
あり、検査能率の大幅な向上を期待することがで
きないと謂う欠陥を有している。 このために、正常値を示すことが明らかな検体
（陰性検体）と異常値を示す可能性のある検体
（陽性検体）とを判別する、所謂「スクリーニン
グ試薬」が研究開発され、陽性検体についての
み、上記の公知のASLO価測定法により精密測定
を行ない、これによつて検査能率の向上を達成し
ている。 現在知られているこの種のスクリーニング試薬
としては、ポリスチレンラテツクス粒子（以下単
に「ラテツクス」と称する）に直接的にSLOを
吸着させた懸濁液や、ラテツクスを牛血清アルブ
ミン溶液で予備処理してラテツクスへのSLOの
吸着を促進させたものがある。 溶血毒差であるSLOをラテツクスに直接的に
吸着させると、初期感作では活性が生じないか或
いは出現しても直ぐに失われてしまうので、活性
をもたらすためには感作回数を増す必要性があ
り、例えば1600単位のSLO溶液で２〜３回感作
させてSLO活性が初めて出現する程度であり、
その吸着量は甚だ低い。吸着促進剤として前記の
牛血清アルブミンを用いてラテツクスを処理する
場合にも、1600単位のSLO溶液を用いる感作で
１回だけでは吸着量が低く、従つて数回の感作処
理を必要としていた。１回の感作処理に通例30分
間程度の処理時間を要するのみならずラテツクス
へのSLOの上限吸着量を然程高くなし得なかつ
たのが実情であり、このためにASLO価測定開始
前に検体を稀釈するか或いはSLO溶液により検
体中のASLOを中和する必要性があつた。 （発明が解決しようとする問題点） 従来のスクリーニング試薬における除上の問題
点に鑑みて、本発明は先ず第１にラテツクスへの
SLOの吸着性を高め、これによつて感作処理回
数の減少延いては処理時間及び労力を節減し、稀
釈SLOの使用可能性（コストダウン）をもたら
し、更には検定に際して被検血清を稀釈したり又
はSLO溶液による中和を行なう必要性を無から
しめようとするものである。 本発明が解決しようとしている第２の問題点は
検定結果の信頼度が極めて高く、従つて陰性検体
と陽性検体とが明確に区別でき、これにより良好
なスクリーニングをもたらそうとするものであ
る。 （問題点を解決するための手段及び作用） 上記の目的を達成するための本発明による診断
用スクリーニング試薬は、ラテツクス粒子への
SLO吸着促進剤がカゼインであることを特徴と
している。 本発明方法によれば、この診断用スクリーニン
グ試薬は、ラテツクス粒子をカゼイン溶液で予備
処理し、次いでSLO溶液で感作させることによ
り調製することができる。 SLO吸着促進剤としてカゼインを用い、本発
明方法に従つて、このカゼイン溶液でラテツクス
を予備処理し、次いでSLO溶液をラテツクスに
吸着させると、該ラテツクスは吸着促進物質とし
て従来の牛血清アルブミンを使用した場合と比較
して５〜10倍のSLO活性を示し、このために従
来では1600単位のSLO溶液で２〜３回感作処理
することが必要とされて来たのが、本発明によれ
ば800単位のSLO溶液による１回感作で従来より
も高いSLO活性を発現させることができ、従つ
て処理に関する時間の短縮及びコストの著るしい
低減が達成される。 更に、本発明によるスクリーニング試薬はマイ
クロタイター法によるASLO価が160以上の検体
に関して極めて明確な凝集（陽性）反応を示し且
つASLO価が160以下の検体に関しては非凝集
（陰性）反応を示し、この場合にASLO価160以上
の検体に関して陰性反応を示すことはない。この
ことは本発明による試薬がスクリーニング目的に
極めて好適であることを示している。 （調製例及び試験例） 次に、本発明によるスクリーニング試薬の調製
例並びにSLO活性、検定結果とマイクロタイタ
ー法により測定されたASLO価との相関試験等に
関連して本発明を更に詳細に説明する。 調製例 １ (1) 前処理 10ｍＭ燐酸緩衝液（PH7.4）を用いて次の溶
液を調製する。 (a) ５％ポリスチレンラテツクス液 （ラテツクスとしては日本合成ゴム株式会社
のTMMUTEX−商標−を使用） (b) 0.5％カゼイン溶液 （カゼインとしてはメルク社製の
HAMMARSTEN−商標−を使用） (c) 800単位のSLO溶液 (2) 試薬調製 上記ラテツクス液(a)及びカゼイン溶液(b)を各
２ml宛採取して混合し、37℃で60分間インキユ
ベートした後に30000×ｇで20分間遠心して上
清を除去し、次いで上記緩衝液を用いて全量を
２mlとなした。 得られたカゼイン処理ラテツクス（５％）液
を１％に稀釈し、上記SLO溶液(c)２mlを採取
添加し、室温で30分間インキユベートした後に
遠心して上清を除去し、次いで上記緩衝液を用
いて全量を２mlとし、音波振動により分散させ
て試薬となした。 調製例 ２ 調製例１と同様にして、但し５％ラテツクス液
の代りに0.5％ラテツクス液を使用し0.5％カゼイ
ン液で予備感作（37℃、60分）させた処、同様の
試薬が得られた。 SLO活性試験例 ポリスチレンラテツクスに直接的にSLOを感
作させた場合、吸着促進剤として周知の牛血清ア
ルブミンを使用してSLOを感作させた場合及び
本発明に従い吸着促進剤としてカゼインを使用し
てSLOを感作させた場合につき、ラテツクス試
薬のSLO活性と感作回数との関係を調べた処、
第１図のグラフに示される如き結果が得られた。 尚、このSLO活性試験において、未処理ラテ
ツクスの場合（）及び牛血清アルブミン処理ラ
テツクスの場合（）に関して使用されたSLO
溶液は1600単位のものであり、一方カゼイン処理
ラテツクスの場合（）に関して使用された
SLO溶液は調製例において使用されている800単
位のものであつた。 第１図のグラフから明らかなように、本発明に
従つてカゼインで予備感作させたラテツクスは
800単位のSLO液による１回感作で約1000単位の
SLO活性を示し、従つて160単位程度が問題とな
る被検血清のスクリーニング試薬として充分以上
の感度をもたらし得ることが判り、一方未処理ラ
テツクスや牛血清アルブミン処理ラテツクスでは
感作処理回数を相当増さねば必要とされる感度を
達成し得ないことが判つた。 マイクロタイター法により測定されたASLO価と
判定結果との相関試験 () 本発明によるスクリーニング試薬 各被検血清につき、調製例１によるスクリー
ニング試薬を用い下記要領で判定した。 試験方法： 被検血清50μをスライド板上に滴下し、こ
れにスクリーニング試薬を50μ添加して充分
に混合した後に、スライド板をローリングし、
３分後に下記４段階法で判定する。 −：凝集が認められない ±：凝集が定かでない ＋：若干の凝集が認められる ＋＋：顕著な凝集が認められる () 某社から市販のスクリーニング試薬 各被検血清につき、某社から市販のスクリー
ニング試薬を用い下記要領で判定した。 試験方法： 被検血清10μをスライドを板上に滴下し、
これに血清稀釈液（緩衝液）を0.05ml添加して
充分に混和する。次いでスクリーニング試薬
0.025mlを採取添加し、スライド板を15秒程ロ
ーリングして混和した後水平回転機（80〜
100rpm）に移し又はローリング混和を継続し
て反応させ、上記スクリーニング試薬添加後３
分後に、上記第（）項と同様に４段階法で判
定した。 () マイクロタイター法によるASLO価測定上
記第（）及び（）項で試験に供した各血清
につき、常法に従いマイクロタイター法を使用
してASLO価を測定した。 () 相関試験 上記第（）項で得た判定結果と上記第
（）項で得たASLO価測定結果とをグラフに
プロツトした処第２図に示される結果が得ら
れ、一方上記第（）項で得た判定結果と上記
第（）項で得たASLO価測定結果とをグラフ
にプロツトした処第３図に示される結果が得ら
れた。 第２図と第３図とを比較すれば明らかなよう
に、本発明によるスクリーニング試薬は、異常
か正常かを判断すべきASLO価160単位を境に
し、それより下限値では明らかな陰性反応を呈
し、それより上限値では明らかな陽性反応を呈
し、従つて感度が高く信頼性に優れていること
が判り、一方従来公知のスクリーニング試薬で
はASLO価が高いにも拘らず陰性乃至疑陽性反
応を呈する場合があるので、信頼性が低いこと
が判る。 カゼインの種類がSLO活性に及ぼす影響 本発明に使用されるSLO吸着促進剤としてカ
ゼインが、その種類に依存してラテツクス粒子へ
のSLO吸着能に差異が生じるか否かを確認する
ために、市販の各種カゼンインにつき検討した結
果は下表に示される通りであり有意の差は認めら
れなかつた。 尚、電気泳動法による試薬も試みたが、蛋白質
及び脂質の永動パターンにカゼインの種類に基因
する違いは認められなかつた。
に溶連菌（溶血性連鎖球菌）感染症の診断のため
に使用されるスクリーニング試薬及びその調製法
に係る。 （従来の技術） SLO即ちストレプトリジンＯはヒト由来連鎖
球菌の産生する溶血性毒素であつて抗原性を有し
ているために、溶連菌が体内でSLOを産生する
と、このSLOに対する抗体であるASLO（抗スト
レプトリジンＯ）が生成される。従つて、血清を
検体としてASLO価を測定する方法は溶連菌感染
症の診断法として汎用されるに至つている。 このASLO価測定法としては、従来ランツ−ラ
ンダール法が採用されて来た。この従来法は結果
が診断の根拠に供するに足るものとは云え、稀釈
度の異なる数種の血清液を必要とする面倒があ
り、又ASLO価測定処理方法も煩雑であると云う
欠陥を有していた。このランツ−ランダール法の
欠陥を幾分なりとも改善するために、マイクロタ
イター法が開発されたが、この方法においても稀
釈血清（1/10）を必要とし且つランツ−ランダー
ル法と同様にウサギ又はヒトＯ型赤血球浮遊液を
必要とする。 ASLO価を測定する上記両方法においてランツ
−ランダール法ではASLO価166単位を、又マイ
クロタイター法では160単位を基準として、これ
より下限値の場合には正常、上限値の場合には異
常と判断している。ここで留意すべきことは、診
断は、唯一回の検査で得られた値に基き下される
のではなく、臨床症状に応じ経過を追つて何回か
検査を行ないASLO価の推移変動を考慮してなさ
れる点にある。上記両従来法は正常値を示す検体
に関しても、異常値を示す検体に関しても、これ
らに関係なく同様の処理操作を必要とするもので
あり、検査能率の大幅な向上を期待することがで
きないと謂う欠陥を有している。 このために、正常値を示すことが明らかな検体
（陰性検体）と異常値を示す可能性のある検体
（陽性検体）とを判別する、所謂「スクリーニン
グ試薬」が研究開発され、陽性検体についての
み、上記の公知のASLO価測定法により精密測定
を行ない、これによつて検査能率の向上を達成し
ている。 現在知られているこの種のスクリーニング試薬
としては、ポリスチレンラテツクス粒子（以下単
に「ラテツクス」と称する）に直接的にSLOを
吸着させた懸濁液や、ラテツクスを牛血清アルブ
ミン溶液で予備処理してラテツクスへのSLOの
吸着を促進させたものがある。 溶血毒差であるSLOをラテツクスに直接的に
吸着させると、初期感作では活性が生じないか或
いは出現しても直ぐに失われてしまうので、活性
をもたらすためには感作回数を増す必要性があ
り、例えば1600単位のSLO溶液で２〜３回感作
させてSLO活性が初めて出現する程度であり、
その吸着量は甚だ低い。吸着促進剤として前記の
牛血清アルブミンを用いてラテツクスを処理する
場合にも、1600単位のSLO溶液を用いる感作で
１回だけでは吸着量が低く、従つて数回の感作処
理を必要としていた。１回の感作処理に通例30分
間程度の処理時間を要するのみならずラテツクス
へのSLOの上限吸着量を然程高くなし得なかつ
たのが実情であり、このためにASLO価測定開始
前に検体を稀釈するか或いはSLO溶液により検
体中のASLOを中和する必要性があつた。 （発明が解決しようとする問題点） 従来のスクリーニング試薬における除上の問題
点に鑑みて、本発明は先ず第１にラテツクスへの
SLOの吸着性を高め、これによつて感作処理回
数の減少延いては処理時間及び労力を節減し、稀
釈SLOの使用可能性（コストダウン）をもたら
し、更には検定に際して被検血清を稀釈したり又
はSLO溶液による中和を行なう必要性を無から
しめようとするものである。 本発明が解決しようとしている第２の問題点は
検定結果の信頼度が極めて高く、従つて陰性検体
と陽性検体とが明確に区別でき、これにより良好
なスクリーニングをもたらそうとするものであ
る。 （問題点を解決するための手段及び作用） 上記の目的を達成するための本発明による診断
用スクリーニング試薬は、ラテツクス粒子への
SLO吸着促進剤がカゼインであることを特徴と
している。 本発明方法によれば、この診断用スクリーニン
グ試薬は、ラテツクス粒子をカゼイン溶液で予備
処理し、次いでSLO溶液で感作させることによ
り調製することができる。 SLO吸着促進剤としてカゼインを用い、本発
明方法に従つて、このカゼイン溶液でラテツクス
を予備処理し、次いでSLO溶液をラテツクスに
吸着させると、該ラテツクスは吸着促進物質とし
て従来の牛血清アルブミンを使用した場合と比較
して５〜10倍のSLO活性を示し、このために従
来では1600単位のSLO溶液で２〜３回感作処理
することが必要とされて来たのが、本発明によれ
ば800単位のSLO溶液による１回感作で従来より
も高いSLO活性を発現させることができ、従つ
て処理に関する時間の短縮及びコストの著るしい
低減が達成される。 更に、本発明によるスクリーニング試薬はマイ
クロタイター法によるASLO価が160以上の検体
に関して極めて明確な凝集（陽性）反応を示し且
つASLO価が160以下の検体に関しては非凝集
（陰性）反応を示し、この場合にASLO価160以上
の検体に関して陰性反応を示すことはない。この
ことは本発明による試薬がスクリーニング目的に
極めて好適であることを示している。 （調製例及び試験例） 次に、本発明によるスクリーニング試薬の調製
例並びにSLO活性、検定結果とマイクロタイタ
ー法により測定されたASLO価との相関試験等に
関連して本発明を更に詳細に説明する。 調製例 １ (1) 前処理 10ｍＭ燐酸緩衝液（PH7.4）を用いて次の溶
液を調製する。 (a) ５％ポリスチレンラテツクス液 （ラテツクスとしては日本合成ゴム株式会社
のTMMUTEX−商標−を使用） (b) 0.5％カゼイン溶液 （カゼインとしてはメルク社製の
HAMMARSTEN−商標−を使用） (c) 800単位のSLO溶液 (2) 試薬調製 上記ラテツクス液(a)及びカゼイン溶液(b)を各
２ml宛採取して混合し、37℃で60分間インキユ
ベートした後に30000×ｇで20分間遠心して上
清を除去し、次いで上記緩衝液を用いて全量を
２mlとなした。 得られたカゼイン処理ラテツクス（５％）液
を１％に稀釈し、上記SLO溶液(c)２mlを採取
添加し、室温で30分間インキユベートした後に
遠心して上清を除去し、次いで上記緩衝液を用
いて全量を２mlとし、音波振動により分散させ
て試薬となした。 調製例 ２ 調製例１と同様にして、但し５％ラテツクス液
の代りに0.5％ラテツクス液を使用し0.5％カゼイ
ン液で予備感作（37℃、60分）させた処、同様の
試薬が得られた。 SLO活性試験例 ポリスチレンラテツクスに直接的にSLOを感
作させた場合、吸着促進剤として周知の牛血清ア
ルブミンを使用してSLOを感作させた場合及び
本発明に従い吸着促進剤としてカゼインを使用し
てSLOを感作させた場合につき、ラテツクス試
薬のSLO活性と感作回数との関係を調べた処、
第１図のグラフに示される如き結果が得られた。 尚、このSLO活性試験において、未処理ラテ
ツクスの場合（）及び牛血清アルブミン処理ラ
テツクスの場合（）に関して使用されたSLO
溶液は1600単位のものであり、一方カゼイン処理
ラテツクスの場合（）に関して使用された
SLO溶液は調製例において使用されている800単
位のものであつた。 第１図のグラフから明らかなように、本発明に
従つてカゼインで予備感作させたラテツクスは
800単位のSLO液による１回感作で約1000単位の
SLO活性を示し、従つて160単位程度が問題とな
る被検血清のスクリーニング試薬として充分以上
の感度をもたらし得ることが判り、一方未処理ラ
テツクスや牛血清アルブミン処理ラテツクスでは
感作処理回数を相当増さねば必要とされる感度を
達成し得ないことが判つた。 マイクロタイター法により測定されたASLO価と
判定結果との相関試験 () 本発明によるスクリーニング試薬 各被検血清につき、調製例１によるスクリー
ニング試薬を用い下記要領で判定した。 試験方法： 被検血清50μをスライド板上に滴下し、こ
れにスクリーニング試薬を50μ添加して充分
に混合した後に、スライド板をローリングし、
３分後に下記４段階法で判定する。 −：凝集が認められない ±：凝集が定かでない ＋：若干の凝集が認められる ＋＋：顕著な凝集が認められる () 某社から市販のスクリーニング試薬 各被検血清につき、某社から市販のスクリー
ニング試薬を用い下記要領で判定した。 試験方法： 被検血清10μをスライドを板上に滴下し、
これに血清稀釈液（緩衝液）を0.05ml添加して
充分に混和する。次いでスクリーニング試薬
0.025mlを採取添加し、スライド板を15秒程ロ
ーリングして混和した後水平回転機（80〜
100rpm）に移し又はローリング混和を継続し
て反応させ、上記スクリーニング試薬添加後３
分後に、上記第（）項と同様に４段階法で判
定した。 () マイクロタイター法によるASLO価測定上
記第（）及び（）項で試験に供した各血清
につき、常法に従いマイクロタイター法を使用
してASLO価を測定した。 () 相関試験 上記第（）項で得た判定結果と上記第
（）項で得たASLO価測定結果とをグラフに
プロツトした処第２図に示される結果が得ら
れ、一方上記第（）項で得た判定結果と上記
第（）項で得たASLO価測定結果とをグラフ
にプロツトした処第３図に示される結果が得ら
れた。 第２図と第３図とを比較すれば明らかなよう
に、本発明によるスクリーニング試薬は、異常
か正常かを判断すべきASLO価160単位を境に
し、それより下限値では明らかな陰性反応を呈
し、それより上限値では明らかな陽性反応を呈
し、従つて感度が高く信頼性に優れていること
が判り、一方従来公知のスクリーニング試薬で
はASLO価が高いにも拘らず陰性乃至疑陽性反
応を呈する場合があるので、信頼性が低いこと
が判る。 カゼインの種類がSLO活性に及ぼす影響 本発明に使用されるSLO吸着促進剤としてカ
ゼインが、その種類に依存してラテツクス粒子へ
のSLO吸着能に差異が生じるか否かを確認する
ために、市販の各種カゼンインにつき検討した結
果は下表に示される通りであり有意の差は認めら
れなかつた。 尚、電気泳動法による試薬も試みたが、蛋白質
及び脂質の永動パターンにカゼインの種類に基因
する違いは認められなかつた。
【表】
試験例 １
（吸着促進剤の濃度とSLO活性との関係）
10ｍＭ燐酸緩衝液（PH7.4）を用いて調製され
た５％ポリスチレンラテツクス液を超音波処理し
てラテツクス液を調製した。 このラテツクス液１mlに対して、１mlのカゼイ
ン液（0.1、0.5、1.0又は2.0％）或は対照として
の牛血清アルブミン液（0.1、0.5、1.0又は2.0％）
を添加し、室温において60分間インキユベート
し、次いで1500rpmで20分間遠心して上清を除去
することにより予備感作ラテツクスを得た。 各予備感作ラテツクスに上記の緩衝液を添加し
て全量を５mlとなし、これに800単位のSLO溶液
５mlを添加し、室温において30分間インキユベー
トし、1500rpmで60分間遠心して上清を除去し、
これに上記の緩衝液を添加して全量を５mlとな
し、次いで超音波処理することによりSLO感作
ラテツクス試薬を得た。 これらの各SLO感作ラテツクス試薬における
SLO活性を調べた結果は第４図のグラフに示さ
れる通りであり、カゼインの場合には濃度が低い
場合にも高いSLO吸着効果を示し、一方牛血清
アルブミンの場合には濃度を上昇させてもSLO
吸着効果は余り高くならないことが判る。 試験例 ２ 試験例１と同様に、但しSLOの吸着促進剤と
して１％のカゼイン、卵アルブミン又は牛血清ア
ルブミン液を使用して予備感作ラテツクス液を調
製し、このラテツクス液と等量のSLO溶液（800
単位）とを用いて５回感作させることにより
SLO感作ラテツクス試薬を調製した。 これらの各SLO感作ラテツクス試薬のSLO活
性を調べ、カゼインを予備感作させた試薬が示す
SLO活性を100％として相対値を算出した処、予
備感作のために卵アルブミンを用いた場合には50
％であり、又牛血清アルブミンを用いた場合には
13％であり、カゼインによるSLO吸着効果が有
意に優れていることが判明した。
た５％ポリスチレンラテツクス液を超音波処理し
てラテツクス液を調製した。 このラテツクス液１mlに対して、１mlのカゼイ
ン液（0.1、0.5、1.0又は2.0％）或は対照として
の牛血清アルブミン液（0.1、0.5、1.0又は2.0％）
を添加し、室温において60分間インキユベート
し、次いで1500rpmで20分間遠心して上清を除去
することにより予備感作ラテツクスを得た。 各予備感作ラテツクスに上記の緩衝液を添加し
て全量を５mlとなし、これに800単位のSLO溶液
５mlを添加し、室温において30分間インキユベー
トし、1500rpmで60分間遠心して上清を除去し、
これに上記の緩衝液を添加して全量を５mlとな
し、次いで超音波処理することによりSLO感作
ラテツクス試薬を得た。 これらの各SLO感作ラテツクス試薬における
SLO活性を調べた結果は第４図のグラフに示さ
れる通りであり、カゼインの場合には濃度が低い
場合にも高いSLO吸着効果を示し、一方牛血清
アルブミンの場合には濃度を上昇させてもSLO
吸着効果は余り高くならないことが判る。 試験例 ２ 試験例１と同様に、但しSLOの吸着促進剤と
して１％のカゼイン、卵アルブミン又は牛血清ア
ルブミン液を使用して予備感作ラテツクス液を調
製し、このラテツクス液と等量のSLO溶液（800
単位）とを用いて５回感作させることにより
SLO感作ラテツクス試薬を調製した。 これらの各SLO感作ラテツクス試薬のSLO活
性を調べ、カゼインを予備感作させた試薬が示す
SLO活性を100％として相対値を算出した処、予
備感作のために卵アルブミンを用いた場合には50
％であり、又牛血清アルブミンを用いた場合には
13％であり、カゼインによるSLO吸着効果が有
意に優れていることが判明した。
第１図はSLOの吸着促進剤としてカゼインを
用いた場合及び牛血清アルブミンを用いた場合並
びに吸着促進剤を用いない場合におけるSLOの
感作回数とラテツクスのSLO活性との関係を示
すグラフであり、第２図は本発明によるスクリー
ニング試薬を用いた場合の判定結果とマイクロタ
イター法によるASLO価測定結果との関係を示す
グラフであり、第３図は市販のスクリーニング試
薬を用いた場合の判定結果とマイクロタイター法
によるASLO価測定結果との関係を示すグラフで
あり、第４図はSLOの吸着促進剤としてカゼイ
ン又は牛血清アルブミンを種々の濃度で用いてラ
テツクスを予備感作させ、次いでSLOを感作さ
せた場合における吸着促進剤濃度とSLO活性と
の関係を示すグラフである。
用いた場合及び牛血清アルブミンを用いた場合並
びに吸着促進剤を用いない場合におけるSLOの
感作回数とラテツクスのSLO活性との関係を示
すグラフであり、第２図は本発明によるスクリー
ニング試薬を用いた場合の判定結果とマイクロタ
イター法によるASLO価測定結果との関係を示す
グラフであり、第３図は市販のスクリーニング試
薬を用いた場合の判定結果とマイクロタイター法
によるASLO価測定結果との関係を示すグラフで
あり、第４図はSLOの吸着促進剤としてカゼイ
ン又は牛血清アルブミンを種々の濃度で用いてラ
テツクスを予備感作させ、次いでSLOを感作さ
せた場合における吸着促進剤濃度とSLO活性と
の関係を示すグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ラテツクス粒子へのSLO吸着促進剤がカゼ
インであることを特徴とする、診断用スクリーニ
ング試薬。 ２ ラテツクス粒子をカゼイン溶液で予備処理
し、次いでSLO溶液で感作させることを特徴と
する、診断用スクリーニング試薬の調製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8615384A JPS60231167A (ja) | 1984-05-01 | 1984-05-01 | 診断用スクリ−ニング試薬及びその調製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8615384A JPS60231167A (ja) | 1984-05-01 | 1984-05-01 | 診断用スクリ−ニング試薬及びその調製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60231167A JPS60231167A (ja) | 1985-11-16 |
| JPH0565824B2 true JPH0565824B2 (ja) | 1993-09-20 |
Family
ID=13878790
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8615384A Granted JPS60231167A (ja) | 1984-05-01 | 1984-05-01 | 診断用スクリ−ニング試薬及びその調製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60231167A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0735393U (ja) * | 1993-12-13 | 1995-06-27 | 有限会社フタバ産業 | ビデオカセットの郵送保管箱 |
| JP2013145172A (ja) * | 2012-01-13 | 2013-07-25 | Sysmex Corp | 副腎皮質刺激ホルモンの検出方法および吸着剤 |
| KR101428492B1 (ko) * | 2013-08-30 | 2014-08-12 | 린나이코리아 주식회사 | 과열 방지용 전선 거치대를 구비한 보일러 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4847199A (en) * | 1987-02-27 | 1989-07-11 | Eastman Kodak Company | Agglutination immunoassay and kit for determination of a multivalent immune species using a buffered salt wash solution |
| EP0281327B1 (en) * | 1987-02-27 | 1993-06-30 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Immunoreactive reagent, method of preparation and its use to determine an immunoreactive species |
| US5120643A (en) * | 1987-07-13 | 1992-06-09 | Abbott Laboratories | Process for immunochromatography with colloidal particles |
| CN106153887A (zh) * | 2016-05-27 | 2016-11-23 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定抗链球菌溶血素“o”的试剂盒 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5531960A (en) * | 1978-08-30 | 1980-03-06 | Nitsusui Seiyaku Kk | Latex sensing for cohesion reaction |
| DE3210080A1 (de) * | 1982-03-19 | 1983-09-22 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Anti-streptolysin o-latex-reagenz und verfahren zu seiner herstellung |
-
1984
- 1984-05-01 JP JP8615384A patent/JPS60231167A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0735393U (ja) * | 1993-12-13 | 1995-06-27 | 有限会社フタバ産業 | ビデオカセットの郵送保管箱 |
| JP2013145172A (ja) * | 2012-01-13 | 2013-07-25 | Sysmex Corp | 副腎皮質刺激ホルモンの検出方法および吸着剤 |
| KR101428492B1 (ko) * | 2013-08-30 | 2014-08-12 | 린나이코리아 주식회사 | 과열 방지용 전선 거치대를 구비한 보일러 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60231167A (ja) | 1985-11-16 |
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