JPH0566090B2 - - Google Patents
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- JPH0566090B2 JPH0566090B2 JP61179177A JP17917786A JPH0566090B2 JP H0566090 B2 JPH0566090 B2 JP H0566090B2 JP 61179177 A JP61179177 A JP 61179177A JP 17917786 A JP17917786 A JP 17917786A JP H0566090 B2 JPH0566090 B2 JP H0566090B2
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Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は大豆タンパク質の主要成分であるグリ
シニン、すなわち11Sグロブリンから、その構成
成分である酸性サブユニツトと塩基性サブユニツ
トを採取するための分離方法を関する。 これらのサブユニツトは、その供給源であるグ
リシニンにみらない食品加工上のそれぞれの機能
特性を有するものであつて、食品加工上の素材と
して有効に利用されるものである。 技術的背景 大豆は古くから豆腐、納豆、湯葉等の食品原料
として用いられてきたにもかかわらず、その主要
構成成分である大豆タンパク質が注目され本格的
に研究されるようになつたのは比較的近年のこと
であり、その構造が明らかになつたのは最近であ
る。 一方、最近、大豆のみならず、大豆から抽出し
た分離タンパクの優れた栄養価及び食品加工上の
機能特性からその需要が増大してきている。 上述のように大豆タンパクの構造についての最
近の研究からそのサブユニツト構造及びサブユニ
ツトの種類の一次構造が明らかとなり、そしてタ
ンパク質の加工技術上最も利用性の高い加熱によ
る変性がサブユニツト構造の見地か検討されるよ
うになつた。 例えば、WOLF W.J.and Tamura T.「シリア
ル ケミストリイ（Cereal Chem.）、46 331
（1969）」は、大豆11Sグロブリンの熱変性の影響
について検討し、加熱により11Sグロブリンが酸
性サブユニツトと塩基性サブユニツトに分離され
ることを明らかにた。また、Castimpoolas N.、
et al.、「アルカイブ オブ バイオケミストリ
イ エンド バイオフイジイクス（Arch.
Biochem.Biophys.）、131、577（1969）」は、イオ
ン強度、２−ME（２−メルカプトエタノール）
濃度、金属イオン、PHなどの影響を調べ、Saito
K.、et al.、「アグリカルチユアル エンド バ
イオロジカル ケミストリイ（Agr.Biol.Chem.）
35、890、（1971）」により加熱中の遊離SH基の挙
動が明らかにされた。 また、Yamagishi T.et al.、「アグリカルチユ
アル エンド バイオロジカル ケミストリイ
（Agr.Biol.Chem.）44、1575、（1980）」は、11S
グロブリンの酸性サブユニツト及び塩基性サブユ
ニツトが還元剤の存在下での加熱により比較的明
確に分離されることを明らかにした。また、最
近、大屋の研究により、食品加工上使用し得る還
元剤として亜硫酸ソーダ（Na2SO3）を用いるこ
とによつて11Sグロブリンからの酸性及び塩基性
サブユニツトの分離が可能となつた。 本発明者らは、亜硫酸ソーダを還元剤に用い加
熱をオイルバスを用いて行うことにより、下記の
ような知見が得られた。 11Sグロブリンを上記還元剤（亜硫酸ソー
ダ）の存在下で加熱することにより分離された
上澄画分に存在する酸性サブユニツトは、還元
剤の濃度に関係なくモノマーから成つている
が、一方沈澱画分に存在するサブユニツトは還
元剤の濃度の増加に伴つてモノマーのほかにダ
イマー、トリマー等が増加する傾向がみられ
る。 上澄及び沈澱画分に分布する種々のサブユニ
ツトは還元剤の濃度と加熱時間に依存するも、
タンパク質濃度及びイオン強度に依存しない。 しかし、上記オイルバスを用いた加熱では、分
離されるサブユニツトには異種サブユニツトの混
入や重合体が共存しているため各々のサブユニツ
トに分離することができず、したがつて、各サブ
ユニツトの機能特性を評価して食品加工上に利用
し得ないとがわかつた。 したがつて、11Sグロブリンを構成する各サブ
ユニツトの機能特性を有効に利用するには、各サ
ブユニツトを11Sグロブリンより明確に分離し
て、それらの機能特性を評価することが必要であ
る。 発明が解決しようとする課題 本発明は、11Sグロブリンの構成成分であるサ
ブユニツトの有する機能特性を評価して、それを
食品加工に有効に利用する目的で、11Sグロブリ
ンより酸性サブユニツトと塩基性サブユニツトを
明確にかつ効率的に分離し得る方法を提供するこ
とを課題とする。 本発明者らは、11Sグロブリンを、還元剤の存
在下に高温、加圧下で加熱することにより、酸性
サブユニツトと塩基性サブユニツトを明確に分離
することに成功し、本発明をなすに至つた。 以下本発明に詳しく説明する。 発明の構成 本発明の特徴は、11Sグロブリンを、還元剤の
存在下に、高温、加圧下で加熱することにより、
酸性サブユニツト画分と塩基性サブユニツト画分
に分離し、各サブユニツトをモノマーとして得る
ことにある。 ここで“11Sグロブリン”とは、大豆タンパク
質の50％近くを占める主要成分であるグロブリン
の一種であるグリシニンを意味する。 課題を解決するための手段 本発明においてサブユニツトの供給源として用
いる11Sグロブリンは、脂肪大豆をタン法同時分
画（Thanh V.H.、K.Shibasaki「ジヤーナル オ
ブ アグリカルチユアル エンド フード ケミ
ストリイ」（J.Agr.Food Chem.）24、117
（1976）」）して得られる沈澱画分の粗11Sグロブ
リンを硫安分画し、ついで得られた11Sグロブリ
ンの溶液を限外濾過で濃縮し、ついでゲル濾過で
精製することにより調製し得る。なお、その具体
的は調製法は後記実施例を示す。 本発明は、上記により調製した約２％濃度に濃
縮された精製11Sグロブリンに還元剤を加えて、
高温、加圧下で加熱するものであつて、その際、
タンパク質濃度、還元剤濃度、PH、濃度、圧力及
び加熱時間等の条件を選定する。 本発明者らの実験結果によると、タンパク質濃
度0.5〜５％、還元剤（Na2CO3を使用）濃度
0.5M、PH8.0、濃度120℃、圧力2.0Kg／cm2及び加
熱時間10分〜20分（120℃の温度と2.0Kg／cm2の圧
力を維持する時間）程度が最適条件と言えるの
で、実際にはこの条件を基準として上記加熱条件
を設定するとよい。 なお、還元剤としては亜硫酸ナトリウム、２−
メルカプトエタノールを例示し得るが食品衛生上
の観点から、亜硫酸ナトリウムを用いるのが好ま
しい。 本発明では、上記条件に基づいて精製11Sグロ
ブリンを加熱して得た反応混合物を100℃程度の
温度まで下げてアイスバス（氷浴）中で急冷した
後、遠心分離により上澄により沈澱に分画し、上
澄画分は５℃温度で３〜４日間脱塩水で透析を行
い、沈澱画分は蒸溜水で３回程度洗浄した後、そ
れぞれ凍結乾燥して、酸性サブユニツトを上記上
澄画分として塩基性サブユニツトを上記沈澱画分
として得ることができる。 このようにして得られる各画分にはそれぞれの
サブユニツトの混入がなく、かつ画面分とも実質
上モノマーから成る。したがつて、本発明による
と、11Sグロブリンより酸性サブユニツトと塩基
性サブユニツトを明確に分離し得るので、それが
有する機能特性を食品加工等に有効に利用できる
ようになる。 次に、酸性サブユニツト並びに塩基性サブユニ
ツトの機能特性について説明する。 乳化特性について： 上記酸性サブユニツトについて、濁度法（小
川、山内及び柴崎「日本食品工業学会」誌、
27、631（1980）参照）と直接エマルジヨンの水
分含量を測定する方法（H.Aoki、O.
Taneyama and M.Inami、「ジヤーナル・オ
ブ・フード・サイエンス」（J.Food sci.）、45、
534（1980）参照）に従つて乳化安定を調べた結
果、添付の第１図乃至第４図に示すとおりであ
つて、第１図及び第２図にみられるように、酸
性サブユニツトASは、大豆グリシニンよりも
高いタンパク質濃度で乳化安定性が高く、カゼ
イン、ウシ血清アルブミンと同等の乳化安定性
を有し、またPHの変化の影響においても第３図
及び第４図にみられるとおり同様の結果が得ら
れ、特に酸性サブユニツトはグリシニン（11S
グロブリン）に比べて酸性領域で乳化安定性の
改善がみられる。 一方、脂肪に対する結合能力を、L.P.
Voutsinab and S.Nakaiの方法（「ジヤーナル
オブ アグリカルチユアル アンド フード
ケミストリイ」（J.Agric.Food Chem.）31、
58（1983）参照）により調べた結果、表１に示
すとおり、塩基性サブユニツトは、カゼイン、
ウシ血清アルブミンに比べて高い結合能力を示
し、かつグリシニン（11Sグロブリン）及び酸
性サブユニツトよりも優れた脂肪結合能力を有
する。 【表】 量mlで表わす。
上述のように、グリシリンは凝集性が高く、エ
マルジヨン形成の効果は低いが、グリシニンより
分離されるサブユニツトは乳化特性や脂肪結合能
力に優れているので、食品素材として食品加工に
有利に利用し得るものといえる。 以下に実施例を示して本発明を具体的に説明す
る。 実施例 11Sグロブリンの調製 粗11Sグロブリンの分画： 脂肪大豆に１：20の割合で0.03Mトリス−塩
酸緩衝液（PH8.0）を混合し、１時間以上撹拌
した後、この混合物を遠心分離（10000r.p.m.、
20℃で20分間）し、得られた上澄板をPH6.4に
調製し、１時間撹拌した後、遠心分離
（10000r.p.m.、５℃で20分間）して得られた沈
澱物を粗11Sグロブリンとした（タン法同時分
画）。この沈澱物をPH6.4に調製した0.03Mトリ
ス−塩酸緩衝液で２回洗浄した後、標準緩衝液
に溶解し、PH7.6に調整して５℃に一夜放置し
た。ついで、これを10000r.p.m.で５℃、15分
間遠心分離して沈澱物を除いた。 粗11Sグロブリンの粒安分画： 上述のようにして得た粗11Sグロブリンを約
２％濃度に標準緩衝液で希釈し、これに硫安を
51％飽和になるように加え、室温で30分〜１時
間撹拌後、遠心分離（10000r.p.m.、10℃で５
分間）した。得られた上澄液を硫安を66％飽和
になるように加え、室温で30分〜１時間撹拌し
た後、遠心分離して沈澱物を標準緩衝液に溶解
した。 精製11Sグロブリンの調製： 上記により得られた11Sグロブリン溶液をPH
７に調整し、分画分子量13000の限外濾過器を
用いて冷却しながら、３〜４％濃度に濃縮し
た。この濃縮11Sグロブリン溶液をゲル濾過用
カラム（140×４cm、Vt≒1750、ゲルはセフア
ローズ6B使用）に添加し標準緩衝液（２−メ
ルカプトエタノール、２−ME）で溶出した。
この溶出液の20mlを１フラクシヨンとして採取
しながら、約２溶出後、28nｍにおける各フ
ラツシヨンの吸光度を測定した。ついで、この
測定濃度１％以上のフラクシヨンの中から数点
を選び、それらについてSDS−尿素−ポリアク
リルアミドゲル電気泳動により11Sグロブリン
の精製度を検定を行つて不適当なフラクシヨン
を除去し、濃度１％以上のフラクシヨンを全て
採取し、限外濾過により約２％濃度に濃縮して
精製11Sグロブリンとした。 11Sグロプリンよりサブユニツトの分離 上記により得られた２％濃度の精製11Sグロ
ブリン溶液を分取し、これに還元剤として
Na2SO3をタンパク質濃度0.5、還元剤濃度
0.05、0.1、0.3及び0.5Mになるようにそれぞれ
加えた後、塩酸又は苛性ソーダでPH8.0に調整
した。 ついで、上記各溶液を試料として用い、それ
らを予め100℃に加温しておいたオートクレー
ブに収容し、温度が120℃及び圧力が２気圧に
達した時点から10分間その状態を保つた後、温
度を100℃まで下げ氷浴中で急冷した。冷却後、
各試料について、300r.p.m.で10分間遠心分離
を行つて、上澄と沈澱に分画し、上澄画分は５
℃で３〜４日間脱塩水で透析し、沈澱画分を蒸
留水で３回洗浄した後、それぞれ凍結乾燥し
た。 このようにして得られる各乾燥試料について
SDS−尿素−ポリアクリルアミドゲル電気泳動
により上記各画分のパターンを調べた。 その結果、上澄画分はその大部分が酸性サブ
ユニツトのモノマーから成り、塩基性サブユニ
ツトの混入が認められなかつた。また、酸性サ
ブユニツトのモノマーの量は還元剤
（Na2SO3）濃度にほとんド関係なく一定であ
つた。一方、沈澱画分は還元剤の濃度が高くな
るに伴い塩基性サブユニツトのモノマーの量が
多くなるが、ダイマー及びトリマーの量は常圧
下で100℃のオイルバス中で加熱した場合に比
べて非常に少ない。また、沈澱画分への酸性サ
ブユニツトの混入は認められなかつた。 したがつて、還元剤濃度を0.5Mにして加熱
を行うことにより、酸性サブユニツト及び塩基
性サブユニツトをモノマーとして明確に分離し
得るようになる。 なお、タンパク質濃度については、目的とす
る酸性サブユニツトと塩基性サブユニツトの分
離収量を高める観点から４〜５％程度にまで高
めることも可能である。
シニン、すなわち11Sグロブリンから、その構成
成分である酸性サブユニツトと塩基性サブユニツ
トを採取するための分離方法を関する。 これらのサブユニツトは、その供給源であるグ
リシニンにみらない食品加工上のそれぞれの機能
特性を有するものであつて、食品加工上の素材と
して有効に利用されるものである。 技術的背景 大豆は古くから豆腐、納豆、湯葉等の食品原料
として用いられてきたにもかかわらず、その主要
構成成分である大豆タンパク質が注目され本格的
に研究されるようになつたのは比較的近年のこと
であり、その構造が明らかになつたのは最近であ
る。 一方、最近、大豆のみならず、大豆から抽出し
た分離タンパクの優れた栄養価及び食品加工上の
機能特性からその需要が増大してきている。 上述のように大豆タンパクの構造についての最
近の研究からそのサブユニツト構造及びサブユニ
ツトの種類の一次構造が明らかとなり、そしてタ
ンパク質の加工技術上最も利用性の高い加熱によ
る変性がサブユニツト構造の見地か検討されるよ
うになつた。 例えば、WOLF W.J.and Tamura T.「シリア
ル ケミストリイ（Cereal Chem.）、46 331
（1969）」は、大豆11Sグロブリンの熱変性の影響
について検討し、加熱により11Sグロブリンが酸
性サブユニツトと塩基性サブユニツトに分離され
ることを明らかにた。また、Castimpoolas N.、
et al.、「アルカイブ オブ バイオケミストリ
イ エンド バイオフイジイクス（Arch.
Biochem.Biophys.）、131、577（1969）」は、イオ
ン強度、２−ME（２−メルカプトエタノール）
濃度、金属イオン、PHなどの影響を調べ、Saito
K.、et al.、「アグリカルチユアル エンド バ
イオロジカル ケミストリイ（Agr.Biol.Chem.）
35、890、（1971）」により加熱中の遊離SH基の挙
動が明らかにされた。 また、Yamagishi T.et al.、「アグリカルチユ
アル エンド バイオロジカル ケミストリイ
（Agr.Biol.Chem.）44、1575、（1980）」は、11S
グロブリンの酸性サブユニツト及び塩基性サブユ
ニツトが還元剤の存在下での加熱により比較的明
確に分離されることを明らかにした。また、最
近、大屋の研究により、食品加工上使用し得る還
元剤として亜硫酸ソーダ（Na2SO3）を用いるこ
とによつて11Sグロブリンからの酸性及び塩基性
サブユニツトの分離が可能となつた。 本発明者らは、亜硫酸ソーダを還元剤に用い加
熱をオイルバスを用いて行うことにより、下記の
ような知見が得られた。 11Sグロブリンを上記還元剤（亜硫酸ソー
ダ）の存在下で加熱することにより分離された
上澄画分に存在する酸性サブユニツトは、還元
剤の濃度に関係なくモノマーから成つている
が、一方沈澱画分に存在するサブユニツトは還
元剤の濃度の増加に伴つてモノマーのほかにダ
イマー、トリマー等が増加する傾向がみられ
る。 上澄及び沈澱画分に分布する種々のサブユニ
ツトは還元剤の濃度と加熱時間に依存するも、
タンパク質濃度及びイオン強度に依存しない。 しかし、上記オイルバスを用いた加熱では、分
離されるサブユニツトには異種サブユニツトの混
入や重合体が共存しているため各々のサブユニツ
トに分離することができず、したがつて、各サブ
ユニツトの機能特性を評価して食品加工上に利用
し得ないとがわかつた。 したがつて、11Sグロブリンを構成する各サブ
ユニツトの機能特性を有効に利用するには、各サ
ブユニツトを11Sグロブリンより明確に分離し
て、それらの機能特性を評価することが必要であ
る。 発明が解決しようとする課題 本発明は、11Sグロブリンの構成成分であるサ
ブユニツトの有する機能特性を評価して、それを
食品加工に有効に利用する目的で、11Sグロブリ
ンより酸性サブユニツトと塩基性サブユニツトを
明確にかつ効率的に分離し得る方法を提供するこ
とを課題とする。 本発明者らは、11Sグロブリンを、還元剤の存
在下に高温、加圧下で加熱することにより、酸性
サブユニツトと塩基性サブユニツトを明確に分離
することに成功し、本発明をなすに至つた。 以下本発明に詳しく説明する。 発明の構成 本発明の特徴は、11Sグロブリンを、還元剤の
存在下に、高温、加圧下で加熱することにより、
酸性サブユニツト画分と塩基性サブユニツト画分
に分離し、各サブユニツトをモノマーとして得る
ことにある。 ここで“11Sグロブリン”とは、大豆タンパク
質の50％近くを占める主要成分であるグロブリン
の一種であるグリシニンを意味する。 課題を解決するための手段 本発明においてサブユニツトの供給源として用
いる11Sグロブリンは、脂肪大豆をタン法同時分
画（Thanh V.H.、K.Shibasaki「ジヤーナル オ
ブ アグリカルチユアル エンド フード ケミ
ストリイ」（J.Agr.Food Chem.）24、117
（1976）」）して得られる沈澱画分の粗11Sグロブ
リンを硫安分画し、ついで得られた11Sグロブリ
ンの溶液を限外濾過で濃縮し、ついでゲル濾過で
精製することにより調製し得る。なお、その具体
的は調製法は後記実施例を示す。 本発明は、上記により調製した約２％濃度に濃
縮された精製11Sグロブリンに還元剤を加えて、
高温、加圧下で加熱するものであつて、その際、
タンパク質濃度、還元剤濃度、PH、濃度、圧力及
び加熱時間等の条件を選定する。 本発明者らの実験結果によると、タンパク質濃
度0.5〜５％、還元剤（Na2CO3を使用）濃度
0.5M、PH8.0、濃度120℃、圧力2.0Kg／cm2及び加
熱時間10分〜20分（120℃の温度と2.0Kg／cm2の圧
力を維持する時間）程度が最適条件と言えるの
で、実際にはこの条件を基準として上記加熱条件
を設定するとよい。 なお、還元剤としては亜硫酸ナトリウム、２−
メルカプトエタノールを例示し得るが食品衛生上
の観点から、亜硫酸ナトリウムを用いるのが好ま
しい。 本発明では、上記条件に基づいて精製11Sグロ
ブリンを加熱して得た反応混合物を100℃程度の
温度まで下げてアイスバス（氷浴）中で急冷した
後、遠心分離により上澄により沈澱に分画し、上
澄画分は５℃温度で３〜４日間脱塩水で透析を行
い、沈澱画分は蒸溜水で３回程度洗浄した後、そ
れぞれ凍結乾燥して、酸性サブユニツトを上記上
澄画分として塩基性サブユニツトを上記沈澱画分
として得ることができる。 このようにして得られる各画分にはそれぞれの
サブユニツトの混入がなく、かつ画面分とも実質
上モノマーから成る。したがつて、本発明による
と、11Sグロブリンより酸性サブユニツトと塩基
性サブユニツトを明確に分離し得るので、それが
有する機能特性を食品加工等に有効に利用できる
ようになる。 次に、酸性サブユニツト並びに塩基性サブユニ
ツトの機能特性について説明する。 乳化特性について： 上記酸性サブユニツトについて、濁度法（小
川、山内及び柴崎「日本食品工業学会」誌、
27、631（1980）参照）と直接エマルジヨンの水
分含量を測定する方法（H.Aoki、O.
Taneyama and M.Inami、「ジヤーナル・オ
ブ・フード・サイエンス」（J.Food sci.）、45、
534（1980）参照）に従つて乳化安定を調べた結
果、添付の第１図乃至第４図に示すとおりであ
つて、第１図及び第２図にみられるように、酸
性サブユニツトASは、大豆グリシニンよりも
高いタンパク質濃度で乳化安定性が高く、カゼ
イン、ウシ血清アルブミンと同等の乳化安定性
を有し、またPHの変化の影響においても第３図
及び第４図にみられるとおり同様の結果が得ら
れ、特に酸性サブユニツトはグリシニン（11S
グロブリン）に比べて酸性領域で乳化安定性の
改善がみられる。 一方、脂肪に対する結合能力を、L.P.
Voutsinab and S.Nakaiの方法（「ジヤーナル
オブ アグリカルチユアル アンド フード
ケミストリイ」（J.Agric.Food Chem.）31、
58（1983）参照）により調べた結果、表１に示
すとおり、塩基性サブユニツトは、カゼイン、
ウシ血清アルブミンに比べて高い結合能力を示
し、かつグリシニン（11Sグロブリン）及び酸
性サブユニツトよりも優れた脂肪結合能力を有
する。 【表】 量mlで表わす。
上述のように、グリシリンは凝集性が高く、エ
マルジヨン形成の効果は低いが、グリシニンより
分離されるサブユニツトは乳化特性や脂肪結合能
力に優れているので、食品素材として食品加工に
有利に利用し得るものといえる。 以下に実施例を示して本発明を具体的に説明す
る。 実施例 11Sグロブリンの調製 粗11Sグロブリンの分画： 脂肪大豆に１：20の割合で0.03Mトリス−塩
酸緩衝液（PH8.0）を混合し、１時間以上撹拌
した後、この混合物を遠心分離（10000r.p.m.、
20℃で20分間）し、得られた上澄板をPH6.4に
調製し、１時間撹拌した後、遠心分離
（10000r.p.m.、５℃で20分間）して得られた沈
澱物を粗11Sグロブリンとした（タン法同時分
画）。この沈澱物をPH6.4に調製した0.03Mトリ
ス−塩酸緩衝液で２回洗浄した後、標準緩衝液
に溶解し、PH7.6に調整して５℃に一夜放置し
た。ついで、これを10000r.p.m.で５℃、15分
間遠心分離して沈澱物を除いた。 粗11Sグロブリンの粒安分画： 上述のようにして得た粗11Sグロブリンを約
２％濃度に標準緩衝液で希釈し、これに硫安を
51％飽和になるように加え、室温で30分〜１時
間撹拌後、遠心分離（10000r.p.m.、10℃で５
分間）した。得られた上澄液を硫安を66％飽和
になるように加え、室温で30分〜１時間撹拌し
た後、遠心分離して沈澱物を標準緩衝液に溶解
した。 精製11Sグロブリンの調製： 上記により得られた11Sグロブリン溶液をPH
７に調整し、分画分子量13000の限外濾過器を
用いて冷却しながら、３〜４％濃度に濃縮し
た。この濃縮11Sグロブリン溶液をゲル濾過用
カラム（140×４cm、Vt≒1750、ゲルはセフア
ローズ6B使用）に添加し標準緩衝液（２−メ
ルカプトエタノール、２−ME）で溶出した。
この溶出液の20mlを１フラクシヨンとして採取
しながら、約２溶出後、28nｍにおける各フ
ラツシヨンの吸光度を測定した。ついで、この
測定濃度１％以上のフラクシヨンの中から数点
を選び、それらについてSDS−尿素−ポリアク
リルアミドゲル電気泳動により11Sグロブリン
の精製度を検定を行つて不適当なフラクシヨン
を除去し、濃度１％以上のフラクシヨンを全て
採取し、限外濾過により約２％濃度に濃縮して
精製11Sグロブリンとした。 11Sグロプリンよりサブユニツトの分離 上記により得られた２％濃度の精製11Sグロ
ブリン溶液を分取し、これに還元剤として
Na2SO3をタンパク質濃度0.5、還元剤濃度
0.05、0.1、0.3及び0.5Mになるようにそれぞれ
加えた後、塩酸又は苛性ソーダでPH8.0に調整
した。 ついで、上記各溶液を試料として用い、それ
らを予め100℃に加温しておいたオートクレー
ブに収容し、温度が120℃及び圧力が２気圧に
達した時点から10分間その状態を保つた後、温
度を100℃まで下げ氷浴中で急冷した。冷却後、
各試料について、300r.p.m.で10分間遠心分離
を行つて、上澄と沈澱に分画し、上澄画分は５
℃で３〜４日間脱塩水で透析し、沈澱画分を蒸
留水で３回洗浄した後、それぞれ凍結乾燥し
た。 このようにして得られる各乾燥試料について
SDS−尿素−ポリアクリルアミドゲル電気泳動
により上記各画分のパターンを調べた。 その結果、上澄画分はその大部分が酸性サブ
ユニツトのモノマーから成り、塩基性サブユニ
ツトの混入が認められなかつた。また、酸性サ
ブユニツトのモノマーの量は還元剤
（Na2SO3）濃度にほとんド関係なく一定であ
つた。一方、沈澱画分は還元剤の濃度が高くな
るに伴い塩基性サブユニツトのモノマーの量が
多くなるが、ダイマー及びトリマーの量は常圧
下で100℃のオイルバス中で加熱した場合に比
べて非常に少ない。また、沈澱画分への酸性サ
ブユニツトの混入は認められなかつた。 したがつて、還元剤濃度を0.5Mにして加熱
を行うことにより、酸性サブユニツト及び塩基
性サブユニツトをモノマーとして明確に分離し
得るようになる。 なお、タンパク質濃度については、目的とす
る酸性サブユニツトと塩基性サブユニツトの分
離収量を高める観点から４〜５％程度にまで高
めることも可能である。
添付の第１図乃至第３図は、本発明により分離
された酸性サブユニツトの乳化特性を示し、第４
図は同じく分離された塩基性サブユニツトの脂肪
結合特性を示す。
された酸性サブユニツトの乳化特性を示し、第４
図は同じく分離された塩基性サブユニツトの脂肪
結合特性を示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 大豆タンパク質の主要成分であるグリシニン
（11Sグロブリン）を、還元剤の存在下に、高温、
加圧下で加熱して酸性サブユニツト画分と塩基性
サブユニツト画分に分離し、各サブユニツトをモ
ノマーとして得ることを特徴とする大豆グリシニ
ンより酸性サブユニツトと塩基性サブユニツトを
分離して調製する方法。 ２ 11Sグロブリンは、脂肪大豆をタン法同時分
画して得られた沈澱画分の粗11Sグロブリンを硫
安分画し、ついで得られた11Sグロブリン溶液を
ゲル濾過により精製したものである特許請求の範
囲第１項記載の方法。 ３ 還元剤が亜流酸ナトリウムである特許請求の
範囲第１項記載の方法。 ４ 加熱を120℃の温度及び２気圧の圧力下で約
10〜20分行う特許請求の範囲第１項記載の方法。 ５ 加熱を11Sグロブリンのタンパク質濃度４
％、還元剤濃度0.5M及びPH８付近で行う特許請
求の範囲第１項又は第４項記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61179177A JPS6336748A (ja) | 1986-07-30 | 1986-07-30 | 大豆グリシニンよりサブユニツトを分離して調製する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61179177A JPS6336748A (ja) | 1986-07-30 | 1986-07-30 | 大豆グリシニンよりサブユニツトを分離して調製する方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6336748A JPS6336748A (ja) | 1988-02-17 |
| JPH0566090B2 true JPH0566090B2 (ja) | 1993-09-21 |
Family
ID=16061283
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61179177A Granted JPS6336748A (ja) | 1986-07-30 | 1986-07-30 | 大豆グリシニンよりサブユニツトを分離して調製する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6336748A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2562977B2 (ja) * | 1990-03-30 | 1996-12-11 | 健 鈴木 | 熱圧処理木粉の製造方法 |
| JPWO2006006521A1 (ja) * | 2004-07-13 | 2008-04-24 | 不二製油株式会社 | 多糖類と蛋白質との複合体並びにこれを含む乳化剤及び乳化物 |
-
1986
- 1986-07-30 JP JP61179177A patent/JPS6336748A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6336748A (ja) | 1988-02-17 |
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