JPH0585931A - ロイコトリエン類生合成阻害薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 ロイコトリエン類の増加に起因する炎症およ
びその他の疾病に対する治療効果を有する抗炎症剤を提
供する。 【構成】 図示された式で表される活性成分のいずれか
を有する抗炎症剤。 【効果】 プロスタグランジン生合成を阻害することな
く、ロイコトリエン類合成を選択的に阻害するので、副
作用内のない抗炎症剤を得ることができた。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ロイコトリエン類の生
合成阻害薬に関する。ロイコトリエン類は、アレルギ
ー、炎症等の原因物質である。したがって、本発明の化
合物は、これらのロイコトリエン類によって惹起される
疾病の治療に有用である。

【０００２】

【従来の技術】プロスタグランジン、トロンボキサン、
ロイコトリエン等に代表されるアラキドン酸代謝産物
は、多くの生理作用を有し、生体の恒常性維持などに働
くきわめて重要なホルモンである。アラキドン酸代謝産
物の生理作用は、その量に大きく依存する。外的要因な
どにより生体内のアラキドン酸代謝産物の量に変化が起
こると、種々の疾病の発生につながることが知られてい
る。

【０００３】特に、ロイコトリエン類は、喘息などの肺
疾患［Ｈ．Ｒ．Ｍｏｒｒｉｓら、Ａｄｖ．ＰＧＴＸＬＴ
Ｒｅｓ．，１１，２２１（１９８３），Ｔ．Ｉｓｏｎ
ｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏ
ｍｍｕｎ．，１３０，４８６（１９８５）］、花粉症、
眼アレルギー、接触皮膚炎などのアレルギー［Ｐ．Ｓ．
Ｃｒｅｔｉｃｏｓら、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅ
ｄ．，３１０，１６２６（１９８４），Ｒ．Ｊ．Ｓｈａ
ｗら、Ａｌｌｅｒｇｙ，４０，１（１９８５），Ｈ．Ｂ
ｉｓｇａａｒｄら、Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ，２
７，３６９（１９８４）］、リウマチ関節炎、大腸炎な
どの炎症性疾患［Ｌ．Ｂ．Ｋｌｉｃｋｓｔｅｉｎら、
Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，６６，１１６６（１９
８０），Ｐ．Ｓｈａｒｏｎら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒ
ｏｌｏｇｙ，８６，４５３（１９８４）］、乾せんなど
の皮膚疾患［Ｓ．Ｄ．Ｂｒａｉｎら、Ｐｒｏｓｔａｇｌ
ａｎｄｉｎｓ、２９，６１１（１９８５）］などに深く
関与していることが知られている［講座プロスタグラン
ジン７、室田誠逸、山本尚三、１８３−２０１（１９８
８）東京化学同人］。

【０００４】ロイコトリエン類は、アラキドン酸カスケ
ードにおいて、アラキドン酸から、５−リポキシゲナー
ゼにより酸化・脱水されてロイコトリエンＡ₄に変換さ
れ、ついでロイコトリエンＢ₄、ロイコトリエンＣ₄、ロ
イコトリエンＤ₄、ロイコトリエンＥ₄、等のロイコトリ
エン類に変換される。

【０００５】すなわち、５−リポキシゲナーゼは、アラ
キドン酸に一分子酸素を添加するオキシゲナーゼ活性
と、これにより生成される５−ヒドロペルオキシ−６，
８，１１，１４−エイコサテトラエン酸（５−ＨＰＥＴ
Ｅ）を脱水してロイコトリエンＡ₄に変換するロイコト
リエンＡ₄合成活性を有する。したがって、５−リポキ
シゲナーゼの酵素活性を阻害することにより、上記説明
したロイコトリエン類に起因する各種疾病を治療するこ
とができる。従来、このようなロイコトリエン類生合成
阻害薬としては、例えば、フェニドン、カフェイン酸等
が知られている。（現代医療ｖｏｌ．２１，ｐ５３，１
９８９）

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
ロイコトリエン類生合成阻害薬は、５−リポキシゲナー
ゼだけを選択的に阻害するのではなく、アラキドン酸カ
スケードにおいて並列関係にあるシクロオキシゲナーゼ
をも阻害するためにプロスタグランジン生合成阻害に基
づく副作用の可能性があり、その適用範囲が限られてい
た。したがって選択的に５−リポキシゲナーゼを阻害
し、ロイコトリエン生合成阻害を示す薬品が望まれてい
た。

【０００７】本発明は、かかる点に鑑みてなされたもの
であり、優れた選択的ロイコトリエン生合成阻害活性を
有すると共に、より毒性が低いロイコトリエン類生合成
阻害薬を提供するものである。

【０００８】

【課題を解決するための手段】上記課題を解決するため
に鋭意検討した結果、すでに、Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌ
ａｎｇａの種子から抗菌剤として単離されている化２お
よび化３に示す式で表されるラブダン型のジテルペン化
合物（Ｈｉｒｏｓｈｉ Ｍｏｒｉｔａ ａｎｄＨｉｄｅ
ｊｉ Ｉｔｏｋａｗａ，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，
５４，１１７−１２０，１９８８）が、上述の選択的ロ
イコトリエン類生合成阻害作用を有し、ロイコトリエン
類が惹起する各種疾病を治療する効果を有するものであ
ることを見いだした。

【０００９】すなわち、 化１に示す式で表される化合
物を有効成分とするロイコトリエン類生合成阻害薬また
は、化１に示す式で表される化合物を有効成分とする抗
炎症剤である。さらに詳しくは、 化２に示す式で表さ
れる化合物を有効成分とするロイコトリエン類生合成阻
害薬または抗炎症剤並びに、化３に示す式で表される化
合物を有効成分とするロイコトリエン類生合成阻害薬ま
たは抗炎症剤である。

【００１０】化２および化３に示す式で表される化合物
は、例えば次のようにして得ることができる。すなわ
ち、生ショウガをスライスし、ヘキサン等の有機溶媒で
抽出したのち濃縮する。濃縮物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィー、シリカゲル薄層クロマトグラフィー、
高速液体クロマトグラフィー等の各種クロマトグラフィ
ーによって分離し、化２および化３に示す式で表される
化合物を単離することができる。

【００１１】本発明のロイコトリエン類生合成阻害薬の
成人一人当りの投与量は、患者の症状に応じて適宜定め
られるが、通常体重１ｋｇ当り１ｍｇ〜１００ｍｇであ
る。また、投与経路は、経口、皮下注射、静脈注射、局
所的投与等が望ましいが特に限定されるものではない。
また、投与する薬剤の形態は、製剤学的に許容し得る賦
形剤または溶剤との混和により、常法で散剤、顆粒剤、
錠剤、カプセル剤、注射剤、局所用剤などに調製するこ
ともできる。

【００１２】

【実施例】以下、本発明のロイコトリエン類生合成阻害
薬を製造し、その物性および効果を調べた結果について
説明する。

【００１３】ロイコトリエン生合成阻害は、ロイコトリ
エン類生合成の初発酵素であるヒト５−リポキシゲナー
ゼの阻害活性を被験化合物のロイコトリエン類生合成阻
害活性の指標とした。すなわち、５−リポキシゲナーゼ
によるアラキドン酸の酸化により産出された５−ＨＰＥ
ＴＥを測定し、被験化合物が、５−ＨＰＥＴＥ産出を阻
害する割合を求めることにより判定した。

【００１４】また、ロイコトリエン類生合成阻害の選択
性を調べるために、プロスタグランジン生合成阻害を測
定した。プロスタグランジン生合成阻害は、ウサギの腎
臓から得た酵素・シクロオキシゲナーゼに対する阻害活
性を測定することにより求めた。

【００１５】

【実施例１】 （化２および化３で示される化合物の製造法およびそれ
らの物性）生ショウガ２ｋｇを約３ｍｍの厚さにスライ
スし、ｎ−ヘキサン４リットルで一晩浸漬抽出し、濾過
後濃縮してｎ−ヘキサン抽出物０．４６５ｇを得た。こ
の抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｓｉ
ｌｉｃａ：ＢＷ−３００、富士デヴィソン，２．０ｘ２
３ｃｍ）に吸着させ、次いで、４００ｍｌのｎ−ヘキサ
ンでカラムを洗い、さらにクロロホルム・メタノール
（４：１）混合溶媒５００ｍｌで溶出し、濃縮後０．４
１４ｇの粗分画を得た。この分画の一部０．１１０ｇを
メルク社製のシリカゲル薄層クロマトグラフィー（Ｓｉ
ｌｉｃａ ＰＦ₂₅₄ １ｍｍ厚）を用い、ｎ−ヘキサン・
酢酸エチルエステル（９：１）の展開溶媒で分離し、Ｒ
ｆが０．１７から０．２８の分画（ａ）を集めクロロホ
ルムで抽出し、４２．７ｍｇ、Ｒｆが０．４８から０．
５２の分画（ｂ）を集めクロロホルムで抽出して８．１
２ｍｇ得た。

【００１６】分画（ａ）はさらに高速液体クロマトグラ
フィー［カラム；Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＳＩ−６０−５
（８φｘ２５０ｍｍ、野村化学）、溶出溶媒；ｎ−ヘ
キサン・酢酸エチルエステル（１：１）、流速；２．０
ｍｌ／ｍｉｎ、検出；ＵＶ２７０ｎｍ］で分離し、化２
で示される化合物［（Ｅ）−８β（１７）−ｅｐｏｘｙ
ｌａｂｄ−１２ｅｎｅ−１５，１６−ｄｉａｌ］を３
０．８ｍｇ得た。

【００１７】物性値を以下に示す。 ＜性状＞ 黄色味を帯びた油状物。 ＜溶解性＞ メタノール、エタノール、アセトン、クロ
ロホルム、酢酸エチルエステル、ヘキサンに可溶。水に
は難溶。 ＜分子式＞ Ｃ₂₀Ｈ₃₀Ｏ₃

【００１８】＜ＵＶ＞ （ＣＨ₃ＯＨ）ｎｍ（ε）；２
３２（５１８２） ＜ＩＲ＞ （ＣＣｌ₄）ｃｍ^-1；１７３２（Ｃ＝Ｏ）、
１６９０（Ｃ＝Ｏ）、１６４２（Ｃ＝Ｃ） ＜ＥＩ−ＭＳ＞ ｍ／ｚ（％）；３１８（Ｍ⁺、４
３）、３０３（３０）、３００（３７）、１９４（６
０）、１７９（６８）、１３７（６８）、１２３（５
７）、１０９（６６）、９５（９０）、９１（７１）、
８１（９３）、６９（９０）、５５（１００）

【００１９】＜¹Ｈ−ＮＭＲ＞ δ（ｐｐｍ）、ＣＤＣ
ｌ₃・ＴＭＳ；０．８６（ｓ、３Ｈ）、０．９１（ｓ、
３Ｈ）、０．９３（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｄ、１
Ｈ）、２．４３（ｄ、１Ｈ）、６．６８（ｔ、１Ｈ）、
９．４１（ｓ、１Ｈ）、９．６２（ｔ、１Ｈ） ＜¹³Ｃ−ＮＭＲ＞ δ（ｐｐｍ）、ＣＤＣｌ₃・ＴＭ
Ｓ；１４．６、１８．５、２ ０．０、２１．
７、２２．２、３３．５、３３．５、３５．７、３９．
２、３９．３、３９．８、４１．８、４８．
８、５２．６、５４．９、 ５７．５、１３
５．１、１６０．４、１９３．２、１９６．７

【００２０】次に、分画（ｂ）を高速液体クロマトグラ
フィー［カラム；Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＳＩ−６０−５
（４．６φｘ２５０ｍｍ、野村化学）、溶出溶媒；ｎ
−ヘキサン・酢酸エチルエステル（９：１）、流速；
０．８ｍｌ／ｍｉｎ、検出；ＵＶ２７０ｎｍ］で分離
し、化３で示される化合物［（Ｅ）−８（１７），１２
−ｌａｂｄｄｉｅｎｅ−１５，１６−ｄｉａｌ］を５．
０ｍｇ得た。以下に物性値を示す。

【００２１】＜性状＞ 淡黄色の油状物。 ＜溶解性＞ メタノール、エタノール、アセトン、クロ
ロホルム、酢酸エチルエステル、ヘキサンに可溶。水に
は難溶。 ＜分子式＞ Ｃ₂₀Ｈ₃₀Ｏ₂

【００２２】＜ＵＶ＞ （ＣＨ₃ＯＨ）ｎｍ（ε）；２
３４（８５６０） ＜ＩＲ＞ （ＣＣｌ₄）ｃｍ^-1；１７２９（Ｃ＝Ｏ）、
１６８４（Ｃ＝Ｏ）、１６４６（Ｃ＝Ｃ） ＜ＥＩ−ＭＳ＞ ｍ／ｚ（％）；３０２（Ｍ⁺、１０
０）、２８７（１２）、２８４（１０）、２５８（２
９）、１３７（６６）、１２３（３０）、８１（４
７）、６９（４３）、５５（４１）

【００２３】＜¹Ｈ−ＮＭＲ＞ δ（ｐｐｍ）、ＣＤＣ
ｌ₃・ＴＭＳ；０．７３（ｓ、３Ｈ）、０．８２（ｓ、
３Ｈ）、０．９０（ｓ、３Ｈ）、２．３３（ｄｄｄ、１
Ｈ）、２．５０（ｄｄｄ、１Ｈ）、３．３９（ｄ、１
Ｈ）、３．４７（ｄ、１Ｈ）、４．３７（ｄ、１Ｈ）、
４．８６（ｄ、１Ｈ）、６．７７（ｔ、１Ｈ）、９．４
１（ｓ、１Ｈ）、９．６４（ｔ、１Ｈ） ＜¹³Ｃ−ＮＭＲ＞ δ（ｐｐｍ）、ＣＤＣｌ₃・ＴＭ
Ｓ；１４．６、１９．４、２１．９、２４．２、２４．
８、３３．７、３３．７、３７．９、３９．３、３９．
５、３９．７、４２．１、５５．４、５６．５、１０
８．０、１３４．９、１４８．１、１６０．０、１９
３．８、１９７．５

【００２４】

【実施例２】本発明のロイコトリエン類生合成阻害薬の
効果を確認するために、以下に示す生物検定を行った。

【００２５】（１）ロイコトリエン生合成阻害効果 本発明のロイコトリエン類生合成阻害薬の効果につい
て、次のような生物検定を行った。ここで、ロイコトリ
エン類生合成の初発酵素であるヒト５−リポキシゲナー
ゼの阻害活性を被験化合物のロイコトリエン類生合成阻
害活性の指標とした。ヒト５−リポキシゲナーゼの阻害
活性は、５−リポキシゲナーゼによるアラキドン酸の酸
化により産出された５−ＨＰＥＴＥを測定し、被験化合
物が、５−ＨＰＥＴＥ産出を阻害する割合を求めること
により判定した。

【００２６】（酵素の調製）野口らにより得られたヒト
５−リポキシゲナーゼ産生大腸菌（特開平第２−２１９
５７０号、菌株ＭＶ１１８４／ｐｈ５ＬＯＫＣ；微生物
寄託番号ＦＥＲＭＰ−１０２５０）を、１ｍｌあたり１
００μｇのアンピシリンを加えた下記に示すＬＢ培値１
２０ｍｌに、白金耳で小量接種して、約３０℃で１２時
間培養した。

【００２７】ＬＢ培地 バクトトリプトン １０ｇ／ｌ （Ｂａｃｔｏ ｔｒｙｐｔｏｎｅ；ＤＩＦＣＯ社製） 酵母エキス ５ｇ／ｌ 塩化ナトリウム ５ｇ／ｌ

【００２８】次いで、培養したヒト５−リポキシゲナー
ゼ産生大腸菌を、下記に示すＴＹＳＧ培地５００ｍｌの
入った３リットル容量のひだ付き三角フラスコ２本に５
ｍｌずつ移植し、２０℃で１０時間培養した。

【００２９】ＴＹＳＧ培地 バクトトリプトン １０ｇ／ｌ 酵母エキス ５ｇ／ｌ 塩化ナトリウム ２０ｇ／ｌ グリセロール ２０ｍｌ／ｌ ｐＨ＝７．８

【００３０】５−リポキシゲナーゼを誘導するために、
培養液に１Ｍイソプロピル−β−Ｄ−ジチオガラクトピ
ラノサイド（ＩＰＴＧ）を１００μｌずつ添加して、さ
らに２０℃で１５時間培養した。得られた培養液を、６
０００ｒｐｍで１０分間遠心分離にかけて集菌した。得
られた菌体の重量は、約１５ｇであった。得られた菌体
を、下記のＫＰ−１緩衝液１５０ｍｌに懸濁した。な
お、この懸濁液は−７０℃で保存した。

【００３１】ＫＰ−１緩衝液 ５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ＝７．１） １００ｍＭ塩化ナトリウム ２ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）

【００３２】懸濁液１ｍｌあたりジチオスレイトール
（ＤＴＴ）０．３ｍｇ、フッ化フェニルメチルスルホニ
ル（ＰＭＳＦ）０．５ｍＭを加え、その後、この溶液１
ｍｌあたり０．５ｍｇのリゾチームを加え、さらに氷中
に１時間放置して菌を完全に溶解させた。ついでこれを
約４℃で、フレンチプレスで処理し、菌を破砕した。こ
のフレンチプレスによる処理は、菌を完全に破砕するた
め２回行った。

【００３３】得られた溶液を、６５００ｒｐｍで２０分
間遠心し、その上清を分取した。分取した上清は、よく
氷冷したメスシリンダーで液量を測定して、上清の蛋白
質濃度を求め、適量毎に分注して−７０℃で保存し、適
宜解凍して使用した。

【００３４】（生物検定）前述の操作により得られた粗
酵素溶液を用い、以下に示す方法で生物検定を行った。
０．５Ｍトリス（ｐＨ８．０）、１０ｍＭ塩化カルシウ
ム、１０ｍＭＡＴＰからなる緩衝液２０μｌに、ホスフ
ァチジルコリン１ｍｇを０．１Ｍトリス（ｐＨ８．０）
６３５μｌに懸濁し超音波処理して均一にした溶液１０
μｌ、水５０μｌ、粗酵素溶液（ヒト５−リポキシゲナ
ーゼ）１０μｌ（蛋白質含量１０μｇ）、被験化合物の
ジメチルスルホキシド溶液１０μｌを加えて混合し、３
０℃で５分間静置してアッセイ溶液とした。なお、ここ
で緩衝液に塩化カルシウムおよびＡＴＰを用いるのは、
両者が、ヒト５−リポキシゲナーゼの活性化因子だから
である。

【００３５】得られたアッセイ溶液に５０ｍＭアラキド
ン酸２μｌを添加して３０℃で１０分間静置した後、１
ｍｌあたり内部標準物質である１３−ヒドロキシリノレ
ン酸２００ｎｇを含有する０℃のメタノール３００μｌ
を添加し、さらに１Ｍ酢酸１μｌを添加した。この結
果、ヒト５−リポキシゲナーゼによる酵素反応は停止す
る。

【００３６】次いで、この溶液を１００００ｒｐｍで１
０分間遠心分離して上清を分取した。上清１００μｌ
を、以下の分析条件で高速液体クロマトグラフィーによ
り分析した。

【００３７】カラム：Ｃａｐｃｅｌｌ Ｐａｋ Ｃ₁₈ （直径４．６ｍｍ、長さ１５０ｍｍ） 溶媒：メタノール：水：酢酸＝８０：２５：０．０１ 流速：１．２ｍｌ／分 カラム温度：３８℃ 検出器：ＵＶ２３３ｎｍ（吸光度）

【００３８】活性は、５−ＨＰＥＴＥのピーク面積を内
部標準（１３−ヒドロキシリノレン酸）を基準として求
め、被験化合物を含まない無処理区での５−ＨＰＥＴＥ
のピーク面積に対する処理区のピーク面積を百分率で表
して阻害活性とした。なお、ポジティブ・コントロール
としては、ＡＡ８６１（和光純薬社製、ＩＣ₅₀は、約
０．５μＭである）を用いた。

【００３９】上記説明したごとくに各種被験化合物につ
いて生物検定を行い、ヒト５−リポキシゲナーゼ酵素活
性の５０％阻害濃度を求めた結果を表１に示す。表１か
ら明らかなように、化２および化３に示す式で表される
化合物のロイコトリエン生合成阻害活性はきわめて高い
ことが確認された。

【００４０】

【実施例３】本発明のロイコトリエン類生合成阻害薬の
プロスタグランジン生合成阻害効果について、次のよう
なウサギの腎臓から得た酵素・シクロオキシゲナーゼに
対する阻害活性について生物検定を行った。

【００４１】（酵素の調製）Ｓａｎｋａｗａらの方法
（Ｕ．Ｓａｎｋａｗａ ｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｓｔａｇｌ
ａｎｄｉｎｓ，２４、２１（１９８２））に従い以下の
ように行った。ウサギ（Ｗｈｉｔｅ Ｒａｂｂｉｔ）を
解剖して腎臓を摘出し、腎臓の表皮、脂肪を取り除き、
約３等分に輪切りした。輪切りにした腎臓を、適量のリ
ン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ＝７．５）（以下、緩衝液
１と記す）に浸漬して洗浄した。この後、腎臓の表皮を
取り除き、さらに内側の脂肪を取り除いて髄質のみにし
た。該髄質を１ｍＭの還元型グルタチオンを含むリン酸
緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ＝７．５）（以下、緩衝液２と
記す）に懸濁し、テフロングラスホモジナイザーで粉砕
した。

【００４２】この粉砕物を、９０００ｘｇ、１５分、４
℃で遠心し、氷冷下で二重にしたガーゼで濾過して固形
物を除去した。次に、濾液を１０００００ｘｇ、１時間
超遠心した。上清を沈澱が舞い上がらないようにして捨
て、沈澱を緩衝液２で懸濁する。この懸濁液をガラスホ
モジナイザーに移し、数回ピストン運動させて均一にホ
モジナイズする。このようにして得た懸濁液を、プロス
タグランジン生合成酵素として、以下の生物検定に使用
した。なお、この酵素液は、少量（約５００μｌ）ずつ
分注し、ドライアイス−アセトンで瞬間的に凍結させた
後、−８０℃で保存し、使用時に適宜氷上で解凍して使
用した。

【００４３】（生物検定）まず、下記に示すような検定
溶液を、後述する生物検定の直前に作成した。

【００４４】 １０μＭ ヘモグロビン ５μｌ ４０ｍＭ トリプトファン ５０μｌ ８０ｍＭ 還元型グルタチオン １０μｌ ０．５Ｍ リン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５） ４０μｌ 精製水 ６３μｌ 酵素液 ２０μｌ 計 １８８μｌ

【００４５】検定溶液に、適当な濃度の被験化合物のＤ
ＭＳＯ溶液２μｌつづいて１．３５μＣｉの放射活性を
有するアラキドン酸のエタノール溶液１０μｌを加え
て、全量２００μｌの反応溶液を調製した。この反応溶
液を、３７℃の振とう培養器で２０分間反応させた。こ
の後、反応溶液に１Ｎ塩酸５０μｌを添加して反応を停
止させ、ジエチルエーテル２５０μｌを加えた。次に、
この溶液を、２０００ｒｐｍ、５分間遠心分離し、この
上清５０μｌを薄層クロマトグラフ上で下記条件で展開
した。

【００４６】薄層クロマトグラフの展開条件 薄層（ＴＬＣ）：Ｗａｔｔｍａｎ ＨＰＴＬＣ １０ｘ
１０ｃｍ、０．２ｍｍ、厚さ（Ｎｏ．４８０５−４１
１） 溶媒：クロロホルム：メタノール：酢酸＝９０：５：５

【００４７】展開後、薄層をイメージアナライザーＢＡ
１００（富士写真フィルム製）のイメージング・プレー
トで終夜露光した。この後、露光した薄層を、ＢＡ１０
０システム（富士写真フィルム製）で放射活性の測定を
行った。この際に、被験化合物を含む検定区のアラキド
ン酸からの変換物であるプロスタグランジンＥ₂ （ＰＧ
Ｅ₂）画分の放射活性値を、無処理区のＰＧＥ₂ 画分の
放射活性値の百分率、すなわち無処理区に対する変換率
を、プロスタグランジン生合成阻害活性とした。なお、
ポジティブ・コントロールとしては、インドメタシン
（ＩＣ₅₀ は、０．７５μＭである）を用いた。

【００４８】上記説明したごとく、各種被験化合物およ
びインドメタシンについて、化合物濃度が１０^-4Ｍおよ
び１０^-6Ｍの場合について生物検定を行い、プロスタグ
ランジン生合成阻害活性値を求めた結果を表２に示す。

【００４９】表２から明かなように、化２および化３に
示された式で表される化合物のプロスタグランジン生合
成阻害活性は、ロイコトリエン生合成阻害活性に比べて
きわめて低いことが確認された。

【００５０】

【発明の効果】以上説明したごとくに、本発明のロイコ
トリエン類生合成阻害薬は選択的なロイコトリエン類生
合成阻害効果を有する。したがってロイコトリエン類の
増加に起因する炎症およびその他の疾病に対する治療効
果を有するものである。

【化１】

【化２】

【化３】

【化４】

【化５】

【表１】

【表２】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｄ 303/32 7822−4Ｃ (72)発明者 二宮 正紀 神奈川県横浜市緑区梅が丘６番地２ 日本 たばこ産業株式会社たばこ中央研究所内 (72)発明者 川岸 舜朗 愛知県名古屋市千種区不老町（番地なし） 名古屋大学農学部内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 化１に示す式で表される化合物を有効成
   分とするロイコトリエン類生合成阻害薬（式中Ａは、化
   ４または化５を表す）
2. 【請求項２】 化１に示す式で表される化合物を有効成
   分とする抗炎症剤（式中Ａは、化４または化５を表す）
3. 【請求項３】 請求項１記載の化合物が化２に示す式で
   表される化合物であるロイコトリエン類生合成阻害薬
4. 【請求項４】 請求項２記載の化合物が化２に示す式で
   表される化合物である抗炎症剤
5. 【請求項５】 請求項１記載の化合物が化３に示す式で
   表される化合物であるロイコトリエン類生合成阻害薬
6. 【請求項６】 請求項１記載の化合物が化３に示す式で
   表される化合物である抗炎症剤