JPH06122663A - 過度のコラーゲン破壊を防止する薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 優れた抗コラゼナーゼ活性を有し、毒性又は
副作用が殆どなく、しかも長期治療で使用できる、結合
組織破壊を特徴とする症状又は疾患を治療する薬剤を提
供する。 【構成】 により表される１２ａ−デオキシテトラサイクリン又は
その医薬上許容される塩をからなる過度のコラーゲン破
壊防止剤。［式中、Ｘ^１，Ｘ^２，Ｘ^３，Ｘ^４はそれぞれ
−ＯＨ又は＝Ｏを表しかつ所定の位置に示されている破
線は各々の位置で炭素−炭素結合又は、Ｘ^１〜Ｘ^４及び
環形成炭素原子により形成される結合が存在してもよい
ことを意味し、前記破線の位置に存在する二重結合の数
は所定の条件下に４である。又、Ｒ^１はＨ，−Ｎ（ＣＨ
_３）_２を；Ｒ^２はＨを表し、あるいはＲ^２とＣ−３の炭
素原子とで二重結合を形成する］

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は結合組織破壊を特徴とす
る疾患を治療するための医薬、更に詳しくは結合組織の
主要な成分であるコラーゲンの破壊を特徴とする関節疾
患を治療するための医薬に関する。

【０００２】

【従来の技術】種々の疾患は炎症及び結合組織破壊を特
徴としている。これらの疾患の治療のために、抗炎症薬
が殆どの場合に使用されていた。特に、非ステロイド系
抗炎症薬（以下、“NSAID 類" と称する）が、痛み及び
炎症を抑制する目的で使用されていた。NSAID 類は、炎
症部位に存在するアラキドン酸の代謝においてシクロオ
キシゲナーゼを抑制し、それによりプロスタグランジン
合成を抑制する。それ故、NSAID 類は直接の鎮静活性及
び抗炎症活性を有すると考えられる。免疫調節物質が関
節疾患の発病を抑制するのに使用される。症状が悪化し
た場合、アドレノコルチコイド、金化合物、免疫抑制物
質等が使用される。しかしながら、アドレノコルチコイ
ドの長期使用は骨多孔症を誘発し、一方、その他の薬剤
は制限された効果しか有しない。

【０００３】近年、上記薬剤の機構とは異なる機構によ
り作用する新規な薬剤を開発することに関心がもたれて
いる。幾つかの研究が、関節組織の破壊を抑制する薬剤
を得るために行われてきた。研究の過程で、コラゲナー
ゼの如きマトリックス・メタロプロテイナーゼ（metall
oproteinase)が結合組織を破壊するのに重要な役割を果
たすことが発見された［Drugs Fut.15：495(1990) ］。
テトラサイクリン、ミノサイクリン及びドキシサイクリ
ン、又はそれらの塩、例えば、塩酸塩の如き抗生物質テ
トラサイクリン類（以下、これらの化合物は時々“テト
ラサイクリン”と称される）は広範な抗菌スペクトルを
有することが知られている。抗生物質としての活性以外
の活性もまた研究されており、1983年にニューヨーク州
立大学の研究グループが歯周疾患におけるミノサイクリ
ンの抗コラーゲン分解活性を報告している［J.Periodon
tal Res.18: 516(1983) ］。それ以来、コラーゲン破壊
を特徴とする種々の疾患に関する研究の進展により、テ
トラサイクリンがこれらの疾患を治療するための臨床上
の適用につき研究されている。こうして、下記の疾患に
つきテトラサイクリンによる治療が報告されている。歯
周炎［J.Periodontal Res. 19 ：651(1984) 及びJ.Den
t.Res. 68(Spec.Issue)、1691(1989)］;J.Periodontal
Res. 25:321-330(1990); 角膜潰瘍［Cornea 3：75(198
4)及びAnn.Ophthalmol.17 ：742(1985) ］；ライター病
及びライム病［各々、Clin.Exp.Rheumatol. 7 :100(198
9)及びAnnual Internal Med.99：22(1983)］並びに慢性
関節リウマチ［J.Rheumatol.14：28(1987)］。

【０００４】また、慢性関節リウマチを患う患者に関す
るミノサイクリンの臨床試験の結果として、認められる
効果が投与の開始後４ケ月で観察されたことが報告され
た［J.Rheumatol.17：43(1990)］。テトラサイクリンの
コラゲナーゼ抑制活性に関する知識の結果として、テト
ラサイクリン誘導体を合成する努力がなされてきた。ニ
ューヨーク州立大学の研究グループは、化学的に修飾さ
れたテトラサイクリン、例えば、4-デジメチルアミノテ
トラサイクリン（以下、時々“DMAT" と称する）が慢性
関節リウマチ、歯周疾患及び治療薬の長期投与を要する
その他の疾患の治療に有益であると報告した。［米国特
許第4,704,383 号明細書（特開昭第61-243023 号公報）
を参照のこと］。DMATは同様の抗菌活性を有しないでコ
ラゲナーゼ抑制、骨吸収の抑制、等に関してテトラサイ
クリンと比較して有利であることがわかった［J.Dent.R
es. 66：1310(1987);J.Cell Biol. 105 Abstracts.要約
No.1223 p.216a(1987) 及びThe 36th Annual Meeting
Orth. Res.Soc.要約 p.268(1990)］。

【０００５】1991年に、ニューヨーク州立大学の研究グ
ループは、抗コラゲナーゼ活性を有するが抗菌活性を有
しない化学的に修飾されたテトラサイクリン、例えば、
DMATと、NSAID 、例えば、フルルビプロフェン（flurbi
profen) との組み合わせによる治療が骨の欠損を抑制
し、慢性関節リウマチの如き組織破壊疾患に有効である
ことが判明したと報告した［米国特許出願第07/445,410
号公報（特開平第3-227931号公報）］。NSAID （それら
はプロスタグランジン合成を抑制することにより鎮静効
果及び抗炎症効果を生じる）は関節疾患の痛み及び炎症
を抑制するのに有効であるが、それらは疾患の組織破壊
の進行を抑制又は遅延するための治療薬として知られて
いない。現在広く使用されているNSAID はプロスタグラ
ンジン合成の抑制を生じるが胃腸障害を引き起こす。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】それ故、本発明の目的
は、優れた抗コラゲナーゼ活性を有し、毒性又は副作用
が殆どなく、しかも長期治療で使用できる有効量の非抗
菌性テトラサイクリン誘導体又はその医薬上許容される
塩を含む結合組織破壊を特徴とする症状又は疾患を治療
するための医薬を提供することにある。この目的並びに
本発明のその他の目的及び利点は、下記の詳細な説明か
ら当業者に明らかである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明は、一般式(1) ：

【０００８】

【化３】

【０００９】により表される12a-デオキシテトラサイク
リン又はその医薬上許容される塩（以下、12a-デオキシ
テトラサイクリン又はその医薬上許容される塩は時々
“テトラサイクリン誘導体”と称する）からなる過度の
コラーゲン破壊防止剤に関する。［式中、Ｒ¹ は水素原
子又はジメチルアミノ基を表し、Ｒ² は水素原子を表す
か、又はC-3 位の炭素原子と二重結合を形成し、Ｘ¹ 、
Ｘ² 、Ｘ³ 及びＸ⁴ は各々ヒドロキシル基又はオキソ基
を表し、かつ所定の位置に示されている破線は、各々の
位置において、炭素−炭素結合又はＸ ¹ 、Ｘ² 、Ｘ³ 又
はＸ⁴ 及び環形成炭素原子により形成される結合が存在
してもよいことを意味し、その破線の位置に存在する二
重結合の数は下記の条件で４である：Ｘ¹ がヒドロキシ
ル基である場合には、C12a-C1 結合又はC1-C2 結合の一
つが二重結合であり；Ｘ² がヒドロキシル基である場合
には、C2-C3 結合又はC3-C4 結合の一つが二重結合であ
り；Ｘ³ がヒドロキシル基である場合には、C11-C11aが
二重結合であり；またＸ⁴ がヒドロキシル基である場合
には、C11a-C12結合又はC12-C12a結合の一つが二重結合
であり；（但し、前記C1-C2 結合と前記C2-C3 結合、前
記C11-C11a結合と前記C11a-C12結合、又は前記C12-C12a
結合と前記C12a-C1 結合が同時に二重結合ではあり得な
い）、またＸ¹ がオキソ基である場合には、前記C12a-C
1 結合とC1-C2 結合が各々単結合であり；Ｘ² がオキソ
基である場合には、前記C2-C3 結合とC3-C4 結合が各々
単結合であり；Ｘ³ がオキソ基である場合には、前記C1
1-C11a結合が単結合であり；またＸ⁴ がオキソ基である
場合には、前記C11a-C12結合とC12-C12a結合が各々単結
合である。］

【００１０】本発明に使用される12a-デオキシテトラサ
イクリンは、12a-デオキシテトラサイクリン（以下、時
々“DOTC" と称す）、即ち、Ｒ¹ がジメチルアミノ基で
ある式(1) の化合物、及び4-デジメチルアミノ-12a- デ
オキシテトラサイクリン（以下、時々“DODMAT" と称さ
れる）、即ち、Ｒ¹ が水素原子である式(1) の化合物で
あり、これらの中でDODMATが更に好ましい。DOTCは、例
えば、下記の式により表される異性体を含む。

【００１１】

【化４】

【００１２】一方、DODMATは、例えば、下記の式により
表される異性体を含む。

【００１３】

【化５】

【００１４】12a-デオキシテトラサイクリン類の医薬上
許容される塩の例は、酸、例えば、塩酸、硫酸、リン
酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、シュウ酸、
リンゴ酸、コハク酸、オレイン酸又はパルミチン酸との
塩；アルカリ金属又はアルカリ土類金属、例えば、ナト
リウム、カリウム、カルシウム又はアルミニウムの水酸
化物又は炭酸塩との塩；及びトリエチルアミン、ベンジ
ルアミン、ジエタノールアミン、t-ブチルアミン、ジシ
クロヘキシルアミン、アルギニンとの塩、等である。

【００１５】これらの12a-デオキシテトラサイクリンは
既知化合物であり、a)J.Am.Chem.Soc.82:745(1960)、b)
J.Am.Chem.Soc.82:3946(1960) 及びc)J.Am.Chem.Soc.8
2:3950(1960) に記載されている。文献a)は上記の式DOT
C-1及びDOTC-2により表される異性体を記載しており、
一方、c)は式DOTC-3により表される異性体を記載してい
る。文献b)は式DODMAT-1により表される異性体（これは
DODMAT-2により示される構造を有していたかもしてな
い）を記載している。

【００１６】12a-デオキシテトラサイクリンは上記の文
献に記載された方法に従って合成し得る。DODMATは下記
の式により表されるDMATを水性アンモニア中で亜鉛で還
元することにより得ることができる。

【００１７】

【化６】

【００１８】12a-デオキシテトラサイクリンの医薬上許
容される塩は、既知の塩生成反応を使用することにより
調製される。合成例１で得られるようなDODMAT-2とDODM
AT-3の混合物、及び本明細書で後記される合成例２で得
られるようなDOTCは、後記される試験例に示されるよう
に、優れた抗コラゲナーゼ活性を有する。後記される試
験例に示されるように、DODMAT-2とDODMAT-3の混合物
は、ウサギの骨関節炎モデルを使用して関節軟骨の破壊
のかなりの抑制を示した。毒物学的研究は本発明に使用
されたテトラサイクリン誘導体の低毒性を示し、副作用
が長期投与後に殆ど観察されなかった。

【００１９】こうして、本発明に使用されるテトラサイ
クリン誘導体は、結合組織の破壊を特徴とする関節疾患
の治療に有効である。これらのテトラサイクリン誘導体
は、経口投与、皮下投与、経皮投与、筋肉内投与もしく
は関節内投与されてもよく、又は噴霧化及び座薬を含む
外部適用により投与されてもよい。DOTC又はDODMATの異
性体、もしくはその異性体の二種以上の混合物を投与し
得る。テトラサイクリン誘導体は確立された製剤操作に
より投与用の組成物に製剤化され、調製し得る。このよ
うな医薬組成物が経口投与を目的としている場合、それ
らは胃腸道からの吸収に適した投薬形態で与えられるこ
とが好ましい。経口投与用の単位投薬形態である錠剤及
びカプセルは、結合剤、例えば、結晶性セルロース、マ
ンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゲ
ル及びポリビニルピロリドン；賦形剤、例えば、ラクト
ース、ソルビトール、トウモロコシ澱粉及びリン酸カル
シウム；滑剤、例えば、ステアリン酸カルシウム及びタ
ルク；崩壊剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、
等を含んでいてもよい。これらの錠剤は当業界で知られ
ている方法で被覆し得る。

【００２０】経口投与用の液体製剤は、水性又は油性の
懸濁液、溶液、シロップ、エリキシル剤等であってもよ
く、もしくは凍結乾燥物（これらは使用前に水又はその
他の適当なビヒクルで即時に再構成される）であっても
よい。このような液体製剤は、懸濁剤、例えば、ソルビ
トールシロップ、メチルセルロース、グルコース／蔗糖
シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カ
ルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウム
ゲル及び水添された食用油及び脂肪；乳化剤、例えば、
レシチン、ソルビタンモノオレエート及びアラビアゴ
ム；非水性ビヒクル、例えば、アーモンド油、分留ヤシ
油、油性エステル、プロピレングリコール及びエタノー
ル；防腐剤、例えば、メチルp-ヒドロキシベンゾエー
ト、プロピルp-ヒドロキシベンゾエート及びソルビン
酸；等を含む通常の添加剤を含んでいてもよい。

【００２１】注射液を調製するために、テトラサイクリ
ン誘導体は既知の方法で注射用の生理塩類溶液及びグル
コース溶液の如き適当な溶媒中で懸濁されて皮下投与、
筋肉内投与又は関節内投与用の注射液を得る。上記の注
射液を調製する際に、pH調節剤、緩衝剤、安定剤、防腐
剤、可溶化剤等を、必要により、その水溶液に添加して
もよい。外部適用に関して、テトラサイクリン誘導体は
軟膏、薬用液、クリーム、等に製剤化してもよい。これ
らの製剤は、普通使用される希釈剤、例えば、動物又は
植物の脂肪、ワックス、パラフィン、澱粉、トラガカン
ト、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリ
コーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク及び酸化亜鉛を
単独で、または組み合わせて含んでいてもよい。スプレ
ーを調製するために、通常の噴霧剤、例えば、クロロフ
ルオロカーボンが混入されてもよい。座薬に関して、カ
カオ脂肪、マクロゲル等のベースが使用され、更に表面
活性剤、防腐剤、香料、安定剤等が混入されてもよい。

【００２２】テトラサイクリン誘導体の投薬量は、疾患
の種類、疾患の重度、患者の寛容性及びその他の因子に
依存する。しかしながら、成人に関する通常の毎日の投
薬量は、経口又は注射による場合、１回の投薬又は数回
に分けた投薬で１〜1000mgである。外部適用において、
0.001 〜10％、好ましくは0.05〜５％のテトラサイクリ
ン誘導体を含む組成物が毎日１〜３回で疾患部分に適用
される。本発明のその他の特徴は、例示の実施態様の下
記の記載の過程で明らかになり、これらは本発明の説明
のために示されるものであり、本発明を限定することを
目的とするものではない。

【００２３】

【実施例】合成例１ 4-デジメチルアミノ-12a- デオキシテトラサイクリン(D
ODMAT)の合成 4-デジメチルアミノテトラサイクリン20.0g(50ミリモ
ル) を15％のアンモニア水溶液500 mlに溶解することに
より溶液を調製した。得られる溶液に、亜鉛微粉40g を
添加し、その混合物を激しく攪拌した。22時間攪拌した
後、その反応混合物を濾過して過剰の亜鉛微粉を除去し
た。濾液を、氷で冷却しながら濃塩酸で中和した。沈殿
した固体を濾過により回収し、水洗し、乾燥し、次いで
カラムクロマトグラフィーにより精製、単離して4-デジ
メチルアミノ-12a- デオキシテトラサイクリン3.5g( 収
率18％) を２種の異性体の混合物として得た。その混合
物をHPLCにより分離して異性体Ａ及び異性体Ｂを得た。
それらの性質を以下に示す。 異性体Ａ： UV(95 ％エタノール) λ_max 262nm, logε 4.21,λ_max
324nm, logε 4.12 異性体Ｂ： UV(95 ％エタノール) λ_max 260nm, logε 4.19,λ_max
362nm, logε 4.08 異性体ＡのUV吸収スペクトルは、J.Am.Chem.Soc.82:394
6(1960) に記載されたDODMAT-2のUV吸収スペクトルと同
一であった。異性体Ｂの構造は上記の式DODMAT-3である
と推定される。

【００２４】合成例２ 12a-デオキシテトラサイクリン(DOTC)の合成 テトラサイクリン2gを15％のアンモニア水溶液50mlに溶
解することにより溶液を調製した。得られる溶液に、亜
鉛微粉4gを添加し、その混合物を激しく攪拌した。２時
間攪拌した後、その反応混合物を濾過して過剰の亜鉛微
粉を除去した。濾液を、氷で冷却しながら濃塩酸で中和
した。沈殿した固体を濾過により回収し、次いで水450
mlと混合した。その混合物を塩酸の使用によりpH1.8 に
調節した。得られた溶液を液液抽出法によりエーテルで
抽出した。抽出液を濃縮して粗生成物450mg を得、これ
をジメチルホルムアミド−メタノールで再結晶して12a-
デオキシテトラサイクリン400mg(収率21％) を得た。HP
LCは、この生成物が二種の異性体の混合物であることを
明らかにした。分子量FD質量スペクトル［M ］⁺ 428 。

【００２５】実験例 本発明に使用されるテトラサイクリン誘導体を、コラゲ
ナーゼ抑制（試験管内）及びウサギ骨関節炎モデルを使
用する関節軟骨の破壊の抑制（生体内）につき試験し
た。試験法及び結果を以下に示す。試験したテトラサイ
クリン誘導体は合成例１で得られたDODMAT-2とDODMAT-3
の混合物（以下、この混合物を“DODMAT混合物”と称す
る）及び合成例２で得られたDOTC（異性体の混合物）で
あった。DMATを対照として使用した。1.コラゲナーゼ抑制試験実験 A.コラゲナーゼの調製 日本白ウサギ（生後４週）の膝関節軟骨を無菌で取り出
した。軟骨細胞をコリエー(S.Collier) らの方法［Ann.
Rheum.Dis.48: 372(1989) ］に従って分離した。ハムF1
2 培地（10％のウシ胎児血清を含む）30ml中で、4 x 10
⁶ 個の軟骨細胞を懸濁させ、その培地を、５％の二酸化
炭素蒸気を含む空気雰囲気下で150cm²のインキュベーシ
ョン・フラスコ（日本のイワキ・ガラス社製）中で37℃
でインキュベートした。培地を３〜４日毎に交換した。
細胞が集密状態まで増殖した時（インキュベーションの
開始の７〜９日後）、その培地を、血清を含まないハム
F12 培地（米国ゲンザイム社(Genzyme Co.) により製造
されたヒト組換えインターロイキン-1α30単位／ml）及
び0.4 ％のラクトアルブミン加水分解物（米国シグマ社
(Sigma Co.) により製造）で交換し、インキュベーショ
ンを４日間行った。培養上澄みを採取し、試験されるコ
ラゲナーゼ溶液として使用した。

【００２６】B.コラゲナーゼ活性の測定 上記コラゲナーゼ溶液をナガイらの方法［Ensho 4 : 24
7(1984) ］に従ってトリプシンで処理することにより活
性化し、次いで添加したトリプシンを大豆トリプシンイ
ンヒビター（シグマ社により製造）で失活して活性化コ
ラゲナーゼ溶液を得た。コラゲナーゼ活性をナガイらの
方法［Ensho 4 : 123(1984) ］（この方法はFITC標識コ
ラーゲンの分解活性を測定することを含む）に従って測
定した。コラゲナーゼ活性を１分間で35℃におけるコラ
ーゲン１μg の分解（１単位に等しい）に基いて表し
た。

【００２７】C.コラゲナーゼ抑制の活性 被検薬剤の溶液をジメチルスルホキシド(DMSO)に溶解
し、次いでコラゲナーゼ・アッセイ溶液に添加した。DM
SOの最終濃度は５％である。薬剤の抑制比を、それを添
加しないコラーゲン分解活性（100 ％である）に基いて
計算した。 結果を表１に示す。

【００２８】

【表１】被検薬剤 50 ％の抑制を示す薬剤の濃度、IC₅₀(M) DODMAT混合物 2.5 x 10^-6 合成例２で得られたDOTC 2.2 x 10^-5 DMAT 3.0 x 10^-4

【００２９】表１から明らかであるように、DODMAT混合
物及び合成例２で得られたDOTCの両方はDMATのコラゲナ
ーゼ抑制活性の10倍以上の強いコラゲナーゼ抑制活性を
有することが確認された。2.ウサギ骨関節炎モデルを使用する関節軟骨の破壊の抑
制に関する試験 A.ウサギ骨関節炎モデルの調製 ウサギ骨関節炎モデルをコロンボ(C.Colombo) らの方法
［Arthritis Rheum.26: 875(1983) ］に従って部分側方
半月切除操作により調製した。体重約3kg の成体の雄の
ニュージーランド白ウサギを各々使用した。これらの動
物を外科手術の前に40mg/kg のケタミン及び1.6mg/kgの
キシラジンの筋肉内注射により麻酔した。外科手術を以
下のように行った。右膝を横方向に開き、外側側副靱帯
を露出し、３〜４mmを取り出した。続いて、種子状靱帯
３〜４mmを取り出し、その後、露出した半月の前側方領
域４〜５mmを取り出した。次いで被膜及び皮膚を縫合し
た。外科手術後に、各々の動物には、感染から保護する
ために１週間にわたって２mg/kg/日のジベカシンスルフ
ェートの筋肉内注射を毎日行った。実験中、動物を通常
のウサギペレット及び随時の水道水で養った。

【００３０】B.関節軟骨の破壊の抑制に関する試験 被検薬剤（DODMAT混合物）又はビヒクルを手術後１週間
で投与を開始し、５週間にわたって１週間当たり７日お
きに続けた。１％のメチルセルロース、0.8 ％の塩化ナ
トリウム、及び0.1 ％のポリソルベート80を含むビヒク
ル水溶液中に懸濁させたDODMATを強制飼養により経口投
与した。手術６週後に、動物を殺し、手術した右膝及び
対照の左膝の大腿軟骨の試料を得、１週間にわたって20
％のホルマリン及び20％のメタノールを含む溶液中で直
ちに固定し、その後、0.5MのEDTA溶液（pH7.5)中で完全
に脱灰した。各々の大腿試料を三つの断面として採取し
た。一つを外側顆中の関節の中心から仮想線に沿って
得、そして他の二つを前者の両面で５mmの間隔で平行線
に沿って得た。これらの部分を組織評価用のサフラニン
O-ファースト・グリーンで染色した。左膝からの試料は
右膝の関節軟骨の破壊の評価のための正常な対照として
利用できた。組織スライドをコードし、コロンボら［Ar
thritis Rheum.26: 875(1983) ］により記載されたよう
に各々の型の異常につき+1〜+4の評価を使用して11のパ
ラメーター（これらを表２に示す）につき盲検で評価し
た。一つの大腿軟骨試料からの三つの部分の評価を合わ
せた。これらのデータを片側ウィルコキソン(Wilcoxon)
ランク合計法により分析した。これらの結果を表３に示
す。

【００３１】

【表２】 表２ 側方半月切除後のウサギ膝関節の関節軟骨の異常を評価するためのパラメータ ー 関節軟骨 評価 異常 +1 +2 表面層の損失 わずか 中間 侵食の潰瘍形成 検出可能 中間 フィブリル化 顕著 中間 （表面断片化） 裂溝 １非常に小さい １小さい （ｖ形裂溝） シスト １非常に小さい １小さい 骨増殖体／軟骨細胞 非常に小さい 小さい 染色可能なプロテオ 対照よりも サフラニノフィリア グリカンの損失 薄い染色 の中間の損失 軟骨細胞の組織崩壊 顕著 中間；列(column)の若干の損失 クローン^* 3-4 小さいか、 5-6 小さい、3-4 中間 又は1-2 中間 又は1-2 大きい 軟骨細胞の損失 細胞の顕著な減少 細胞の中間の減少 肋軟骨下の骨の露出 骨の病巣の露出 骨の中間の露出

【００３２】

【表３】 表２（続き） 側方半月切除後のウサギ膝関節の関節軟骨の異常をスコアリングするためのパ ラメーター 関節軟骨 スコアー 異常 +3 +4 表面層の損失 巣状でひどい 極めてひどい 侵食の潰瘍形成 巣状でひどい 極めてひどい フィブリル化 顕著 広範囲 （表面断片化） 裂溝 ２小さいか、 ３小さい、２中間、 （ｖ形裂溝） 又は１中間 又は１大きい シスト ２小さいか、又は ３小さいか、又は １大きい ２大きい 骨増殖体／軟骨細胞 中間 大きい 染色可能なプロテオ サフラニノフィリア サフラニノフィリア グリカンの損失 の顕著な損失 の完全な損失 軟骨細胞の組織崩壊 列(column)の顕著な 認められる組織化なし 損失 クローン^* ７以上小さい、5-6 ７以上中間又は5-6 大きい 中間又は3-4 大きい 軟骨細胞の損失 細胞の顕著な減少 細胞の非常に広範囲の減少 肋軟骨下の骨の露出 骨のかなり広範囲の 骨の非常に広範囲の露出 露出 ^* 小さい=2-4の細胞；中間=5-8の細胞；大きい=9以上の細胞

【００３３】

【表４】 表３ ウサギ骨関節炎モデルにおける関節軟骨の破壊に関するDODMATの効果 試験した 投薬量 動物の 軟骨損傷の平均 統計上の化合物 (mg/kg/ 日) 数 評価±S.E. 分析 ビヒクル − ７ 46.6±7.3 −DODMAT 15 ９ 24.7±3.3 ｐ＜0.05

【００３４】これらの結果は、少なくとも約47％の改良
がDODMATによる治療により生じることを示す。活性物質の投与用の組成物の実施例 製剤例１ 錠剤 DODMAT混合物 100g トウモロコシ澱粉 80g カルボキシメチルセルロース 15g ポリビニルピロリドン 3gステアリン酸カルシウム 2g 合計 200g 上記の製剤を混合して粉末形態を形成し、各々200mg の
錠剤を調製した。各々の錠剤はDODMAT混合物100mg を含
んでいた。

【００３５】製剤例２ 粉末及びカプセル DODMAT混合物 100g結晶性セルロース 100g 合計 200g 上記の表中の製剤実施例２に示された二種の粉末を混合
して粉末薬をつくった。その粉末薬を硬質No.3カプセル
に入れてカプセル投与系を形成した。明らかに、多数の
改良及び変化が上記の教示に鑑みて可能である。それ
故、特許請求の範囲内で、本発明が本明細書に特別に記
載された以外に実施し得ることが理解されるべきであ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ローン エム ゴーループ アメリカ合衆国 ニューヨーク州 11787 スミスタウン ウィットニー ゲート 29 (72)発明者 ナンガヴァラム エス ラママーシィ アメリカ合衆国 ニューヨーク州 11787 スミスタウン ライナム コート 10 (72)発明者 トーマス エフ マクナマラ アメリカ合衆国 ニューヨーク州 ポート ジェファーソン ピーオーボックス 44 (72)発明者 ロバート エイ グリーンウォールド アメリカ合衆国 ニューヨーク州 11747 メルヴィル ヴォークス ホール コー ト ５ (72)発明者 河合 勉 岡山県倉敷市酒津1660 (72)発明者 濱崎 高史 岡山県倉敷市酒津1660 (72)発明者 嶋村 三智也 岡山県倉敷市水江１−１ (72)発明者 小林 悟朗 岡山県倉敷市日吉町490−10 (72)発明者 滝川 哲夫 岡山県倉敷市白楽町160−４ (72)発明者 岩田 久 愛知県名古屋市北区大蔵町40

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式(1) ： 【化１】 により表される12a-デオキシテトラサイクリン又はその
   医薬上許される塩を含むことを特徴とする過度のコラー
   ゲン破壊防止剤。［式中、 Ｒ¹ は水素原子又はジメチルアミノ基を表し、 Ｒ² は水素原子を表すか又はC-3 位の炭素原子と二重結
   合を形成し、 Ｘ¹ 、Ｘ² 、Ｘ³ 及びＸ⁴ は各々ヒドロキシル基又はオ
   キソ基を表し、かつ所定の位置に示されている破線は各
   々の位置で炭素−炭素結合又は、Ｘ¹ 、Ｘ²、Ｘ³ 又は
   Ｘ⁴ 及び環形成炭素原子により形成される結合が存在し
   てもよいことを意味し、 前記破線の位置に存在する二重結合の数は下記の条件で
   ４である：Ｘ¹ がヒドロキシル基である場合には、C12a
   -C1 結合又はC1-C2 結合の一つが二重結合であり；Ｘ²
   がヒドロキシル基である場合には、C2-C3 結合又はC3-C
   4 結合の一つが二重結合であり；Ｘ³ がヒドロキシル基
   である場合には、C11-C11aが二重結合であり；及びＸ⁴
   がヒドロキシル基である場合には、C11a-C12結合又はC1
   2-C12a結合の一つが二重結合であり；（但し、前記C1-C
   2 結合と前記C2-C3 結合、前記C11-C11a結合と前記C11a
   -C12結合、又は前記C12-C12a結合と前記C12a-C1 結合が
   同時に二重結合とはなり得ない。）、またＸ¹ がオキソ
   基である場合には、前記C12a-C1 結合とC1-C2 結合が各
   々単結合であり；Ｘ² がオキソ基である場合には、前記
   C2-C3 結合とC3-C4 結合が各々単結合であり；Ｘ³ がオ
   キソ基である場合には、前記C11-C11a結合が単結合であ
   り；またＸ⁴ がオキソ基である場合には、前記C11a-C12
   結合とC12-C12a結合が各々単結合である。］
2. 【請求項２】 前記12a-デオキシテトラサイクリンが4-
   デジメチルアミノ-12a- デオキシテトラサイクリンであ
   る請求項１に記載の防止剤。
3. 【請求項３】 前記12a-デオキシテトラサイクリンが各
   々下記の二つの式： 【化２】 により表される二種の化合物の混合物である請求項１に
   記載の防止剤。