JPH06153970A - 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 - Google Patents
高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法Info
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- JPH06153970A JPH06153970A JP4305523A JP30552392A JPH06153970A JP H06153970 A JPH06153970 A JP H06153970A JP 4305523 A JP4305523 A JP 4305523A JP 30552392 A JP30552392 A JP 30552392A JP H06153970 A JPH06153970 A JP H06153970A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）
属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）亜属に
属する微生物を利用して効率よく高度不飽和脂肪酸及び
これを含有する脂質を製造する方法を提供する。 【構成】 モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）
属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）亜属に
属する微生物を液体培地中で通気培養して、高度不飽和
脂肪酸及びこれを含有する脂質を製造する方法におい
て、培養液中の溶存酸素濃度を５〜２８ppm に維持する
ことを特徴とする、高度不飽和脂肪酸又はこれを含有す
る脂質の製造方法。 【効果】 通常の発酵条件に比べて、本発明の酸素供給
条件により、高度不飽和脂肪酸の生産量がおよそ１．２
〜１．８倍に増加する。
属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）亜属に
属する微生物を利用して効率よく高度不飽和脂肪酸及び
これを含有する脂質を製造する方法を提供する。 【構成】 モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）
属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）亜属に
属する微生物を液体培地中で通気培養して、高度不飽和
脂肪酸及びこれを含有する脂質を製造する方法におい
て、培養液中の溶存酸素濃度を５〜２８ppm に維持する
ことを特徴とする、高度不飽和脂肪酸又はこれを含有す
る脂質の製造方法。 【効果】 通常の発酵条件に比べて、本発明の酸素供給
条件により、高度不飽和脂肪酸の生産量がおよそ１．２
〜１．８倍に増加する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、モルティエレラ（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ）亜属に属する微生物を利用した発酵法に
よる、ω−３系やω−６系、ω−９系等の高度不飽和脂
肪酸（以下ＰＵＦＡとする）又はこれらを含有する脂質
を製造する方法に関する。
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ）属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ）亜属に属する微生物を利用した発酵法に
よる、ω−３系やω−６系、ω−９系等の高度不飽和脂
肪酸（以下ＰＵＦＡとする）又はこれらを含有する脂質
を製造する方法に関する。
【０００２】糸状菌であるモルティエレラ属微生物を用
いてアラキドン酸（以下、ＡＲＡと称する）やジホモ−
γ−リノレン酸（以下、ＤＧＬＡと称する）をはじめと
するω−６系ＰＵＦＡを製造することは既に知られてい
る（特開昭６３−０４４８９１、特開平１−２４３９９
２）。又、モルティエレラ属微生物を用いて、低温培養
することによりω−３系ＰＵＦＡであるエイコサペンタ
エン酸（以下ＥＰＡとする）を製造することも知られて
いる（特開昭６３−１４６９７）。さらにモルティエレ
ラ属微生物の突然変異株を用いて、ミード酸等のω−９
系ＰＵＦＡを製造することやＤＧＬＡを製造することが
見い出されている（特願平３−２５１９６６、特願平３
−２５１９６４）。
いてアラキドン酸（以下、ＡＲＡと称する）やジホモ−
γ−リノレン酸（以下、ＤＧＬＡと称する）をはじめと
するω−６系ＰＵＦＡを製造することは既に知られてい
る（特開昭６３−０４４８９１、特開平１−２４３９９
２）。又、モルティエレラ属微生物を用いて、低温培養
することによりω−３系ＰＵＦＡであるエイコサペンタ
エン酸（以下ＥＰＡとする）を製造することも知られて
いる（特開昭６３−１４６９７）。さらにモルティエレ
ラ属微生物の突然変異株を用いて、ミード酸等のω−９
系ＰＵＦＡを製造することやＤＧＬＡを製造することが
見い出されている（特願平３−２５１９６６、特願平３
−２５１９６４）。
【０００３】これらの脂肪酸が該菌体内で生産される際
の菌体内での脂肪酸不飽和化反応は、酸素添加反応によ
る好気的不飽和化反応であり、培養液中の溶存酸素濃度
（以下ＤＯとする）はＰＵＦＡ生産における重要な因子
と考えられる。糸状菌によるＰＵＦＡ生産に及ぼすＤＯ
の影響については、２〜３ppm の比較的低いＤＯの範囲
内で検討された報告はあるが（Appl. Microbiol. Biote
chnol., 37, 18 (1992))、常圧下での通常空気を通気し
た場合の飽和ＤＯに近い値、またはそれを越える高いＤ
Ｏ条件下などでの糸状菌によるＰＵＦＡ生産について詳
細に検討された報告はない。
の菌体内での脂肪酸不飽和化反応は、酸素添加反応によ
る好気的不飽和化反応であり、培養液中の溶存酸素濃度
（以下ＤＯとする）はＰＵＦＡ生産における重要な因子
と考えられる。糸状菌によるＰＵＦＡ生産に及ぼすＤＯ
の影響については、２〜３ppm の比較的低いＤＯの範囲
内で検討された報告はあるが（Appl. Microbiol. Biote
chnol., 37, 18 (1992))、常圧下での通常空気を通気し
た場合の飽和ＤＯに近い値、またはそれを越える高いＤ
Ｏ条件下などでの糸状菌によるＰＵＦＡ生産について詳
細に検討された報告はない。
【０００４】一方、モルティエレラ属のような糸状菌を
用いて、液体培地で発酵生産を行なう場合、往々にして
菌体増殖による培養液粘度の増加とそれに伴う酸素供給
の不足が起こる（Biotechnol. Bioeng.,37, 960 (199
1)) 。その対策として、一般的には培養槽の攪拌回転数
を上げる等の手段が知られているが、それは一般にせん
断力に弱いと言われている糸状菌の培養には適しておら
ず、このことが糸状菌のスケールアップに伴う生産性低
下の一因となっている（J. Ferment. Technol.,56, 374
(1978), Biotechnol. Bioeng.,35, 1011 (1990))。
用いて、液体培地で発酵生産を行なう場合、往々にして
菌体増殖による培養液粘度の増加とそれに伴う酸素供給
の不足が起こる（Biotechnol. Bioeng.,37, 960 (199
1)) 。その対策として、一般的には培養槽の攪拌回転数
を上げる等の手段が知られているが、それは一般にせん
断力に弱いと言われている糸状菌の培養には適しておら
ず、このことが糸状菌のスケールアップに伴う生産性低
下の一因となっている（J. Ferment. Technol.,56, 374
(1978), Biotechnol. Bioeng.,35, 1011 (1990))。
【０００５】このような糸状菌に対して酸素供給を十分
に行なう方策として、培養槽の形状改良の試み（Biotec
hnol. Lett.,14, 491 (1992), Appl. Microbiol. Biote
chnol., 37, 32 (1992), Appl. Microbiol. Biotechno
l.,37, 37 (1992), Biotechnol. Bioeng., 32, 835 (19
88)) などが成されているが、多目的に使用される工業
規模での培養層においては、その形状変更は実用上不可
能である。
に行なう方策として、培養槽の形状改良の試み（Biotec
hnol. Lett.,14, 491 (1992), Appl. Microbiol. Biote
chnol., 37, 32 (1992), Appl. Microbiol. Biotechno
l.,37, 37 (1992), Biotechnol. Bioeng., 32, 835 (19
88)) などが成されているが、多目的に使用される工業
規模での培養層においては、その形状変更は実用上不可
能である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明はモルティエレ
ラ亜属微生物によるＰＵＦＡ生産効率とＤＯの関係を解
明し、微生物に損傷を与えることなく、工業規模でも容
易に実施できる酸素供給方法を用いて同微生物による効
率的なＡＲＡ，ＤＧＬＡをはじめとするＰＵＦＡまたは
これらを含有する脂質の製造方法を提供しようとするも
のである。
ラ亜属微生物によるＰＵＦＡ生産効率とＤＯの関係を解
明し、微生物に損傷を与えることなく、工業規模でも容
易に実施できる酸素供給方法を用いて同微生物による効
率的なＡＲＡ，ＤＧＬＡをはじめとするＰＵＦＡまたは
これらを含有する脂質の製造方法を提供しようとするも
のである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者等は上記の課題
を解決するため、ＤＯと目的とするＰＵＦＡの生産量と
の関係を詳細に検討した結果、モルティエレラ亜属の微
生物を用いてＰＵＦＡを製造する場合、液体培養時に、
培養液中のＤＯを５〜２８ppm に維持すれば、目的物で
あるＰＵＦＡを効率的に生産できること、且つ微生物を
損傷することなく、簡単に酸素供給する方法として培養
槽加圧法、および酸素富化空気通気法が有効であること
を見出し、本発明を完成するに至った。
を解決するため、ＤＯと目的とするＰＵＦＡの生産量と
の関係を詳細に検討した結果、モルティエレラ亜属の微
生物を用いてＰＵＦＡを製造する場合、液体培養時に、
培養液中のＤＯを５〜２８ppm に維持すれば、目的物で
あるＰＵＦＡを効率的に生産できること、且つ微生物を
損傷することなく、簡単に酸素供給する方法として培養
槽加圧法、および酸素富化空気通気法が有効であること
を見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
【具体的な説明】本発明において、モルティエレラ属の
モルティエレラ亜属に属する微生物であれば、すべて使
用することができ、例えば、モルティエレラ・エロンガ
タ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）、モ
ルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ）、モルテ
ィエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐ
ｉｎａ）等の菌を挙げることができる。
モルティエレラ亜属に属する微生物であれば、すべて使
用することができ、例えば、モルティエレラ・エロンガ
タ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）、モ
ルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
ｅｘｉｇｕａ）、モルティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏ
ｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ）、モルテ
ィエレラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐ
ｉｎａ）等の菌を挙げることができる。
【０００９】さらに具体的には、モルティエレラ・エロ
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｅｌｏｎｇａｔａ）Ｉ
ＦＯ８５７０、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔ
ｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）ＩＦＯ８５７１、モル
ティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ）ＩＦＯ５９４１、モルティエレ
ラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎ
ａ）ＩＦＯ８５６８等の菌株を挙げることができ、これ
らはいずれも、財団法人醗酵研究所からなんら制限なく
入手することができる。また土壌分離菌株であるモルテ
ィエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌ
ｏｎｇａｔａ）ＳＡＭ０２１９（微工研条寄１２３９
号）を使用することもできる。しかしながらこれらの菌
に限定されるものではない。
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｅｌｏｎｇａｔａ）Ｉ
ＦＯ８５７０、モルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔ
ｉｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）ＩＦＯ８５７１、モル
ティエレラ・ヒグロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ
ｈｙｇｒｏｐｈｉｌａ）ＩＦＯ５９４１、モルティエレ
ラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎ
ａ）ＩＦＯ８５６８等の菌株を挙げることができ、これ
らはいずれも、財団法人醗酵研究所からなんら制限なく
入手することができる。また土壌分離菌株であるモルテ
ィエレラ・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌ
ｏｎｇａｔａ）ＳＡＭ０２１９（微工研条寄１２３９
号）を使用することもできる。しかしながらこれらの菌
に限定されるものではない。
【００１０】また本発明において使用できるモルティエ
レラ亜属に属する微生物の中には、その突然変異株も含
まれる。例えばモルティエレラ亜属に属する微生物に突
然変異操作を行ない、不飽和化酵素や炭素鎖延長化酵素
の活性が低下または欠損あるいは向上した変異株を使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化酵
素活性が低下した変異株としてモルティエレラ・アルピ
ナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）ＳＡＭ１
８６０（微工研条寄３５８９号）、Δ１２不飽和化酵素
活性が低下した変異株としてモルティエレラ・アルピナ
（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）ＳＡＭ１８
６１（微工研条寄３５９０号）等の変異株を挙げること
ができる。しかしながらこれらの菌に限定されるもので
はない。
レラ亜属に属する微生物の中には、その突然変異株も含
まれる。例えばモルティエレラ亜属に属する微生物に突
然変異操作を行ない、不飽和化酵素や炭素鎖延長化酵素
の活性が低下または欠損あるいは向上した変異株を使用
することができる。さらに具体的には、Δ５不飽和化酵
素活性が低下した変異株としてモルティエレラ・アルピ
ナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）ＳＡＭ１
８６０（微工研条寄３５８９号）、Δ１２不飽和化酵素
活性が低下した変異株としてモルティエレラ・アルピナ
（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎａ）ＳＡＭ１８
６１（微工研条寄３５９０号）等の変異株を挙げること
ができる。しかしながらこれらの菌に限定されるもので
はない。
【００１１】突然変異操作としては、放射線（Ｘ線、γ
線、中性子線）や紫外線を照射したり、高熱処理を行っ
たり、また微生物を適当なバッファー中などに懸濁し、
変異源を加えて一定時間インキュベート後、適当に希釈
して寒天培地に植菌し、変異株のコロニーを得るといっ
た操作を行うこともできる。
線、中性子線）や紫外線を照射したり、高熱処理を行っ
たり、また微生物を適当なバッファー中などに懸濁し、
変異源を加えて一定時間インキュベート後、適当に希釈
して寒天培地に植菌し、変異株のコロニーを得るといっ
た操作を行うこともできる。
【００１２】変異源としては、ナイトロジェンマスター
ド、メチルメタンサルホネート（ＭＭＳ）、Ｎ−メチル
−Ｎ′−ニトロソ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）
等のアルキル化剤や、５−ブロモウラシル等の塩基類似
体や、マイトマイシンＣ等の抗生物質や、６−メルカプ
トプリン等の塩基合成阻害剤や、プロフラビン等の色素
類や、４−ニトロキノリン−Ｎ−オキシド等のある種の
発癌剤や塩化マンガン、重クロム酸カリウム、亜硝酸、
ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、ホルムアルデヒド、
ニトロフラン化合物類などを挙げることができ、使用す
る微生物は、生育菌体（菌糸など）でも良いし、胞子で
も良い。
ド、メチルメタンサルホネート（ＭＭＳ）、Ｎ−メチル
−Ｎ′−ニトロソ−Ｎ−ニトロソグアニジン（ＮＴＧ）
等のアルキル化剤や、５−ブロモウラシル等の塩基類似
体や、マイトマイシンＣ等の抗生物質や、６−メルカプ
トプリン等の塩基合成阻害剤や、プロフラビン等の色素
類や、４−ニトロキノリン−Ｎ−オキシド等のある種の
発癌剤や塩化マンガン、重クロム酸カリウム、亜硝酸、
ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、ホルムアルデヒド、
ニトロフラン化合物類などを挙げることができ、使用す
る微生物は、生育菌体（菌糸など）でも良いし、胞子で
も良い。
【００１３】本発明に使用される菌株を培養するために
は、その菌株の胞子、菌子、又は予め培養して得られた
前培養液を、液体培地に接種し培養する。炭素源として
はグルコース、フラクトース、キシロース、サッカロー
ス、マルトース、可溶性デンプン、糖蜜、グリセロー
ル、マンニトール等の一般的に使用されているものが、
いずれも使用できるが、これらに限られるものではな
い。
は、その菌株の胞子、菌子、又は予め培養して得られた
前培養液を、液体培地に接種し培養する。炭素源として
はグルコース、フラクトース、キシロース、サッカロー
ス、マルトース、可溶性デンプン、糖蜜、グリセロー
ル、マンニトール等の一般的に使用されているものが、
いずれも使用できるが、これらに限られるものではな
い。
【００１４】窒素源としてはペプトン、酵母エキス、麦
芽エキス、肉エキス、カザミノ酸、コーンスティプリカ
ー、大豆蛋白等の天然窒素源の他に、尿素等の有機窒素
源、ならびに硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸
アンモニウム等の無機窒素源を用いることができる。こ
の他必要に応じリン酸塩、硫酸マグネシウム、硫酸鉄、
硫酸銅等の無機塩及びビタミン等も微量栄養源として使
用できる。
芽エキス、肉エキス、カザミノ酸、コーンスティプリカ
ー、大豆蛋白等の天然窒素源の他に、尿素等の有機窒素
源、ならびに硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸
アンモニウム等の無機窒素源を用いることができる。こ
の他必要に応じリン酸塩、硫酸マグネシウム、硫酸鉄、
硫酸銅等の無機塩及びビタミン等も微量栄養源として使
用できる。
【００１５】これらの培地成分は微生物の成育を害しな
い濃度であれば特に制限しない。実用上一般に、炭素源
は０．１〜３０重量％、好ましくは１〜１０重量％、窒
素源は０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量
％の濃度とするのが良い。培養温度は５〜４０℃、好ま
しくは２０〜３０℃とし、ＥＰＡを製造する際には好ま
しくは１０〜２０℃とする。さらに培地のpHは４〜１
０、好ましくは６〜９として培養を行う。培養は通常２
〜１０日間行う。
い濃度であれば特に制限しない。実用上一般に、炭素源
は０．１〜３０重量％、好ましくは１〜１０重量％、窒
素源は０．０１〜５重量％、好ましくは０．１〜２重量
％の濃度とするのが良い。培養温度は５〜４０℃、好ま
しくは２０〜３０℃とし、ＥＰＡを製造する際には好ま
しくは１０〜２０℃とする。さらに培地のpHは４〜１
０、好ましくは６〜９として培養を行う。培養は通常２
〜１０日間行う。
【００１６】また、本発明におけるＰＵＦＡの生産を促
進するため、目的とするＰＵＦＡの基質を培地に添加す
ることができる。たとえばω−６系ＰＵＦＡの基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭素数１２〜２０の炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサ
デカン酸、オクタデカン酸等の炭素数１２〜２０の脂肪
酸、又はその塩（例えばナトリウム塩またはカリウム
塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成成分として含
む油脂（例えばオリーブ油、大豆油、綿実油、ヤシ油）
等を挙げることができる。
進するため、目的とするＰＵＦＡの基質を培地に添加す
ることができる。たとえばω−６系ＰＵＦＡの基質とし
ては、テトラデカン、ヘキサデカン、オクタデカン等の
炭素数１２〜２０の炭化水素、テトラデカン酸、ヘキサ
デカン酸、オクタデカン酸等の炭素数１２〜２０の脂肪
酸、又はその塩（例えばナトリウム塩またはカリウム
塩）、脂肪酸エステル、又は脂肪酸を構成成分として含
む油脂（例えばオリーブ油、大豆油、綿実油、ヤシ油）
等を挙げることができる。
【００１７】本発明において、ＰＵＦＡの収量を向上さ
せるため、培養中のある一定期間、好ましくは全培養期
間中に、培養液中のＤＯを５〜２８ppm に制御しつつ培
養する。このような比較的高いＤＯを、微生物に損傷を
与えることなく維持するためには次の２つの方法が有効
である。一つは、培養槽への通気ガスの圧力調整及び培
養槽通気出口の開度調整によって培養槽内全体の圧力を
上げて通常空気を通気する方法であり、この際、培養槽
内の圧力は０．４〜３kg／cm2G、好ましくは０．８〜２
kg／cm2Gにするとよい。
せるため、培養中のある一定期間、好ましくは全培養期
間中に、培養液中のＤＯを５〜２８ppm に制御しつつ培
養する。このような比較的高いＤＯを、微生物に損傷を
与えることなく維持するためには次の２つの方法が有効
である。一つは、培養槽への通気ガスの圧力調整及び培
養槽通気出口の開度調整によって培養槽内全体の圧力を
上げて通常空気を通気する方法であり、この際、培養槽
内の圧力は０．４〜３kg／cm2G、好ましくは０．８〜２
kg／cm2Gにするとよい。
【００１８】また別の方法としては、通常空気に純酸素
又は酸素濃度の高い（酸素濃度が２１％より高い）ガス
を混合するか、あるいは通常空気から窒素等の酸素以外
の成分を一部又は全て除去した酸素富化空気を、培養槽
に通気することにより、所定量の酸素を供給することが
できる。この際、酸素富化空気の酸素濃度は２５〜７７
％、好ましくは２５〜５４％に設定するとよい。またこ
の方法を実施する場合、培養液中のＤＯは５〜２０ppm
に制御しつつ培養することが好ましい。さらにこれらの
方法は単独でも、または併用してあるいは組み合せて行
なうことができる。なおこれらの方法において、培養槽
への通気は通常、０．１vvm （単位vvm：Ｎｌ／ｌ−ｂ
ｒｏｔｈ／min 、以下すべて同様）以上、好ましくは
０．５〜２vvm の範囲で行なう。
又は酸素濃度の高い（酸素濃度が２１％より高い）ガス
を混合するか、あるいは通常空気から窒素等の酸素以外
の成分を一部又は全て除去した酸素富化空気を、培養槽
に通気することにより、所定量の酸素を供給することが
できる。この際、酸素富化空気の酸素濃度は２５〜７７
％、好ましくは２５〜５４％に設定するとよい。またこ
の方法を実施する場合、培養液中のＤＯは５〜２０ppm
に制御しつつ培養することが好ましい。さらにこれらの
方法は単独でも、または併用してあるいは組み合せて行
なうことができる。なおこれらの方法において、培養槽
への通気は通常、０．１vvm （単位vvm：Ｎｌ／ｌ−ｂ
ｒｏｔｈ／min 、以下すべて同様）以上、好ましくは
０．５〜２vvm の範囲で行なう。
【００１９】本発明では、目的のＰＵＦＡを製造するた
めに、必要であれば従来から知られている酵素活性阻害
剤や活性化剤を用いることができる。このようにして培
養して、菌体内に目的とするＰＵＦＡを含有する脂質が
生成蓄積される。この培養菌体から、通常の方法により
目的とするＰＵＦＡの採取を行う。
めに、必要であれば従来から知られている酵素活性阻害
剤や活性化剤を用いることができる。このようにして培
養して、菌体内に目的とするＰＵＦＡを含有する脂質が
生成蓄積される。この培養菌体から、通常の方法により
目的とするＰＵＦＡの採取を行う。
【００２０】
【実施例】次に、実施例により、この発明をさらに具体
的に説明する。実施例１． グルコース２％、酵母エキス１％を含む培地
（pH６．３）１００mLを５００mLエルレンマイヤーフラ
スコに入れ、１２０℃で２０分殺菌した。モルティエレ
ラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎ
ａ）ＩＦＯ８５６８を１白金耳植菌し、レシプロシェー
カー（１００rpm)により２８℃で４日間振盪培養し、こ
れを前培養液とした。本培養は、前培養と同じ組成の培
地を５０Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分
殺菌・冷却後、前培養液５００mlを接種した。
的に説明する。実施例１． グルコース２％、酵母エキス１％を含む培地
（pH６．３）１００mLを５００mLエルレンマイヤーフラ
スコに入れ、１２０℃で２０分殺菌した。モルティエレ
ラ・アルピナ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ａｌｐｉｎ
ａ）ＩＦＯ８５６８を１白金耳植菌し、レシプロシェー
カー（１００rpm)により２８℃で４日間振盪培養し、こ
れを前培養液とした。本培養は、前培養と同じ組成の培
地を５０Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分
殺菌・冷却後、前培養液５００mlを接種した。
【００２１】本発明法では、培養液のＤＯが培養の全期
間を通じてそれぞれ６〜１１ppm 、１０〜１５ppm 、１
４〜１９ppm になるように、通気中の酸素濃度を調整し
た。ちなみに、この場合の酸素濃度は各々約３０％、約
４１％、約５１％であった。コントロールは通常の空気
（酸素濃度２１％）を通気した。なお、いずれの場合も
培養温度２８℃、攪拌回転数２００rpm 、通気量１vvm
、槽内常圧の条件で７日間培養を行なった。また、培
養１〜５日目には、各々１日当たりグルコース１％（対
ブロス）を添加し、必要に応じて消泡剤を添加して培養
した。培養後濾過により菌体を回収し、十分に水洗した
後、１０５℃で２時間静置して乾燥菌体を得た。
間を通じてそれぞれ６〜１１ppm 、１０〜１５ppm 、１
４〜１９ppm になるように、通気中の酸素濃度を調整し
た。ちなみに、この場合の酸素濃度は各々約３０％、約
４１％、約５１％であった。コントロールは通常の空気
（酸素濃度２１％）を通気した。なお、いずれの場合も
培養温度２８℃、攪拌回転数２００rpm 、通気量１vvm
、槽内常圧の条件で７日間培養を行なった。また、培
養１〜５日目には、各々１日当たりグルコース１％（対
ブロス）を添加し、必要に応じて消泡剤を添加して培養
した。培養後濾過により菌体を回収し、十分に水洗した
後、１０５℃で２時間静置して乾燥菌体を得た。
【００２２】乾燥菌体より、クロロホルム−メタノール
−水の一層系の溶媒を用いるＢｌｉｇｈ＆Ｄｙｅｒの抽
出法によって総脂質を抽出、さらにこれを無水メタノー
ル−塩酸（９５：５）を用いて２０℃にて３時間処理す
る事によってメチルエステル化し、エーテルで抽出して
脂肪酸メチルを得た。得られた脂肪酸メチルをガスクロ
マトグラフィーで分析した。表１にその結果を示す。
−水の一層系の溶媒を用いるＢｌｉｇｈ＆Ｄｙｅｒの抽
出法によって総脂質を抽出、さらにこれを無水メタノー
ル−塩酸（９５：５）を用いて２０℃にて３時間処理す
る事によってメチルエステル化し、エーテルで抽出して
脂肪酸メチルを得た。得られた脂肪酸メチルをガスクロ
マトグラフィーで分析した。表１にその結果を示す。
【００２３】 表 １ 酸素富化空気 通常空気 通気ガス酸素濃度（％） 30 41 51 21 DO値 培養液中の最低DO(ppm) 6.6 10.5 14.2 1.1 培養液中の最高DO(ppm) 10.5 14.9 18.0 7.8 培養成績 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 18.9 19.8 19.2 16.6 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 9.17 9.52 9.30 6.55 ARA(ｇ／Ｌ） 3.77 4.01 3.80 2.61 DGLA（ｇ／Ｌ） 0.39 0.38 0.37 0.20
【００２４】表１から明らかなようにコントロールに比
べ、ＤＯを６〜１１ppm に制御の場合、ＡＲＡで４４
％、ＤＧＬＡで９５％、ＤＯを１０〜１５ppm に制御の
場合、ＡＲＡで５４％、ＤＧＬＡで９０％、ＤＯを１４
〜１９ppm に制御の場合、ＡＲＡで４６％、ＤＧＬＡで
８５％、各々生産量が増大した。
べ、ＤＯを６〜１１ppm に制御の場合、ＡＲＡで４４
％、ＤＧＬＡで９５％、ＤＯを１０〜１５ppm に制御の
場合、ＡＲＡで５４％、ＤＧＬＡで９０％、ＤＯを１４
〜１９ppm に制御の場合、ＡＲＡで４６％、ＤＧＬＡで
８５％、各々生産量が増大した。
【００２５】実施例２．グルコース２％、酵母エキス１
％を含む培地（pH６．３）を５０Ｌ容培養槽に２５Ｌで
仕込み、１２０℃で４０分殺菌、冷却後、実施例１と同
様に調製したモルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）ＩＦＯ８５７１の前培養
液を５００mL接種した。本発明法では培養液のＤＯが、
培養の全期間を通じて５〜１０ppm 、１１〜１６ppm 、
１７〜２２ppm 、２３〜２８ppmの範囲となるように培
養槽内の圧力を調整した。
％を含む培地（pH６．３）を５０Ｌ容培養槽に２５Ｌで
仕込み、１２０℃で４０分殺菌、冷却後、実施例１と同
様に調製したモルティエレラ・エキシグア（Ｍｏｒｔｉ
ｅｒｅｌｌａ ｅｘｉｇｕａ）ＩＦＯ８５７１の前培養
液を５００mL接種した。本発明法では培養液のＤＯが、
培養の全期間を通じて５〜１０ppm 、１１〜１６ppm 、
１７〜２２ppm 、２３〜２８ppmの範囲となるように培
養槽内の圧力を調整した。
【００２６】ちなみに、この場合の内圧は各々約０．５
kg／cm2G、約１．２kg／cm2G、約２．０kg／cm2G、約
２．６kg／cm2Gであった。コントロールは常圧で培養し
た。なお何れの場合も、培養温度２８℃、攪拌回転数２
００rpm 、通常空気１vvm 通気の条件で７日間の培養を
行った。また、実施例１と同様に、培養１〜５日目のグ
ルコース添加、必要に応じた消泡剤添加を行なった。培
養後、実施例１と同様の方法で菌体回収および脂肪酸メ
チルの調製を行い、ガスクロマトグラフィーで分析し
た。表２にその結果を示す。
kg／cm2G、約１．２kg／cm2G、約２．０kg／cm2G、約
２．６kg／cm2Gであった。コントロールは常圧で培養し
た。なお何れの場合も、培養温度２８℃、攪拌回転数２
００rpm 、通常空気１vvm 通気の条件で７日間の培養を
行った。また、実施例１と同様に、培養１〜５日目のグ
ルコース添加、必要に応じた消泡剤添加を行なった。培
養後、実施例１と同様の方法で菌体回収および脂肪酸メ
チルの調製を行い、ガスクロマトグラフィーで分析し
た。表２にその結果を示す。
【００２７】 表 ２ 本 発 明 法 コントロール 培養槽内圧力（kg／cm2G) 0.5 1.2 2.0 2.6 0 培養中の最低DO(ppm) 5.0 12.5 17.0 23.2 1.1 培養中の最高DO(ppm) 9.8 15.4 21.3 27.5 7.8 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 18.9 20.7 21.1 17.5 16.2 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 7.46 8.20 8.25 7.01 6.56 ARA(ｇ／Ｌ） 3.06 3.63 3.72 2.86 2.55 DGLA（ｇ／Ｌ） 0.32 0.41 0.43 0.31 0.24
【００２８】表２から明らかなようにコントロールに比
べ、ＤＯを５〜１０ppm に制御の場合、ＡＲＡで２０
％、ＤＧＬＡで３３％、ＤＯを１１〜１６ppm に制御の
場合、ＡＲＡで４２％、ＤＧＬＡで７１％、ＤＯを１７
〜２２ppm に制御の場合、ＡＲＡで４６％、ＤＧＬＡで
７９％、ＤＯを２３〜２８ppm に制御の場合、ＡＲＡで
１２％、ＤＧＬＡで２９％、各々生産量が増大した。
べ、ＤＯを５〜１０ppm に制御の場合、ＡＲＡで２０
％、ＤＧＬＡで３３％、ＤＯを１１〜１６ppm に制御の
場合、ＡＲＡで４２％、ＤＧＬＡで７１％、ＤＯを１７
〜２２ppm に制御の場合、ＡＲＡで４６％、ＤＧＬＡで
７９％、ＤＯを２３〜２８ppm に制御の場合、ＡＲＡで
１２％、ＤＧＬＡで２９％、各々生産量が増大した。
【００２９】実施例３．グルコース０．５％、オリーブ
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分殺菌、冷
却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・エロ
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）
ＩＦＯ８５７０の前培養液５００mlを接種した。本実施
例では、培養液のＤＯが培養の全期間を通じて１１〜１
６ppm 、２５〜３０ppm 、３０〜３５ppm になるよう
に、通気中の酸素濃度を調整した。ちなみに、この場合
の酸素濃度は各々約４３％、約８１％、約９５％であっ
た。コントロールは通常の空気（酸素濃度２１％）を通
気した。
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分殺菌、冷
却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・エロ
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）
ＩＦＯ８５７０の前培養液５００mlを接種した。本実施
例では、培養液のＤＯが培養の全期間を通じて１１〜１
６ppm 、２５〜３０ppm 、３０〜３５ppm になるよう
に、通気中の酸素濃度を調整した。ちなみに、この場合
の酸素濃度は各々約４３％、約８１％、約９５％であっ
た。コントロールは通常の空気（酸素濃度２１％）を通
気した。
【００３０】なお、いずれの場合も培養温度２８℃、攪
拌回転数２００rpm 、通気量１vvm、槽内常圧の条件で
７日間培養を行なった。また、培養１〜５日目には、各
々１日当たりグルコース１％（対ブロス）を添加し、必
要に応じて消泡剤を添加して培養した。培養後、実施例
１と同様の方法で菌体回収および脂肪酸メチルの調製を
行い、ガスクロマトグラフィーで分析した。表３にその
結果を示す。
拌回転数２００rpm 、通気量１vvm、槽内常圧の条件で
７日間培養を行なった。また、培養１〜５日目には、各
々１日当たりグルコース１％（対ブロス）を添加し、必
要に応じて消泡剤を添加して培養した。培養後、実施例
１と同様の方法で菌体回収および脂肪酸メチルの調製を
行い、ガスクロマトグラフィーで分析した。表３にその
結果を示す。
【００３１】 表 ３ 酸素富化空気通気 通常空気通気 通気ガス酸素濃度（％） 43 81 95 21 DO値 培養液中の最低DO(ppm) 11.0 25.4 31.0 1.4 培養液中の最高DO(ppm) 15.3 29.9 34.4 7.6 培養成績 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 19.8 15.6 12.3 16.7 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 9.52 7.49 5.88 7.98 ARA(ｇ／Ｌ） 3.83 2.85 2.00 3.03 DGLA（ｇ／Ｌ） 0.42 0.33 0.25 0.36
【００３２】表３から明らかなように、本発明法でＤＯ
を１１〜１６ppm に制御した場合、コントロールに比べ
ＡＲＡで２６％、ＤＧＬＡで１７％生産量が増大した。
しかし、ＤＯを２５〜３０ppm に制御した場合はＡＲＡ
で６％、ＤＧＬＡで８％の生産量減少、さらに、ＤＯを
３０〜３５ppm に制御した場合はＡＲＡで３４％、ＤＧ
ＬＡで３１％の生産量減少が起こった。
を１１〜１６ppm に制御した場合、コントロールに比べ
ＡＲＡで２６％、ＤＧＬＡで１７％生産量が増大した。
しかし、ＤＯを２５〜３０ppm に制御した場合はＡＲＡ
で６％、ＤＧＬＡで８％の生産量減少、さらに、ＤＯを
３０〜３５ppm に制御した場合はＡＲＡで３４％、ＤＧ
ＬＡで３１％の生産量減少が起こった。
【００３３】実施例４．グルコース０．５％、オリーブ
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌで仕込み、１２０℃で４０分殺菌、
冷却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・ヒ
グロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｈｙｇｒｏｐｈｉ
ｌａ）ＩＦＯ５９４１の前培養液を５００mL接種した。
本実施例では培養液のＤＯが、培養の全期間を通じて９
〜１３ppm 、２８〜３３ppm の範囲となるように培養槽
内の圧力を調整した。
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌで仕込み、１２０℃で４０分殺菌、
冷却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・ヒ
グロフィラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｈｙｇｒｏｐｈｉ
ｌａ）ＩＦＯ５９４１の前培養液を５００mL接種した。
本実施例では培養液のＤＯが、培養の全期間を通じて９
〜１３ppm 、２８〜３３ppm の範囲となるように培養槽
内の圧力を調整した。
【００３４】ちなみに、この場合の内圧は約０．９kg／
cm2G、約３．２kg／cm2Gであった。コントロールは常圧
で培養した。なお何れの場合も、培養温度２８℃、攪拌
回転数２００rpm 、通常空気１vvm 通気の条件で７日間
培養を行なった。また、実施例１と同様に、培養１〜５
日目のグルコース添加、必要に応じた消泡剤添加を行な
った。培養後、実施例１と同様の方法で菌体回収および
脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマトグラフィーで
分析した。表４にその結果を示す。
cm2G、約３．２kg／cm2Gであった。コントロールは常圧
で培養した。なお何れの場合も、培養温度２８℃、攪拌
回転数２００rpm 、通常空気１vvm 通気の条件で７日間
培養を行なった。また、実施例１と同様に、培養１〜５
日目のグルコース添加、必要に応じた消泡剤添加を行な
った。培養後、実施例１と同様の方法で菌体回収および
脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマトグラフィーで
分析した。表４にその結果を示す。
【００３５】 表 ４ 槽内加圧 槽内常圧 培養槽内圧力（kg／cm2G) 0.9 3.2 0 培養中の最低DO(ppm) 9.2 28.5 1.4 培養中の最高DO(ppm) 12.9 32.2 7.5 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 22.3 16.4 17.2 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 10.9 8.02 8.41 ARA(ｇ／Ｌ） 3.92 2.49 2.78 DGLA（ｇ／Ｌ） 0.90 0.67 0.69
【００３６】表４から明らかなように、本発明法でＤＯ
を９〜１３ppm に制御した場合、コントロールに比べＡ
ＲＡで４１％、ＤＧＬＡで３０％生産量が増大した。し
かし、ＤＯを２８〜３３ppm に制御した場合はＡＲＡで
１０％、ＤＧＬＡで３％の生産量減少が起こった。
を９〜１３ppm に制御した場合、コントロールに比べＡ
ＲＡで４１％、ＤＧＬＡで３０％生産量が増大した。し
かし、ＤＯを２８〜３３ppm に制御した場合はＡＲＡで
１０％、ＤＧＬＡで３％の生産量減少が起こった。
【００３７】実施例５．グルコース１．８％、酵母エキ
ス１％、オリブ油０．５％を含む培地（pH６．３）を５
０Ｌ容培養槽に２５Ｌで仕込み、１２０℃で４０分殺
菌、冷却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ
・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｅｌｏｎｇａｔ
ａ）ＳＡＭ１８６０の前培養液を５００mL接種した。本
発明法では培養液のＤＯが、培養の全期間を通じて１２
〜１７ppm の範囲となるように、酸素富化空気と培養槽
内の圧力で調整した。
ス１％、オリブ油０．５％を含む培地（pH６．３）を５
０Ｌ容培養槽に２５Ｌで仕込み、１２０℃で４０分殺
菌、冷却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ
・エロンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａｅｌｏｎｇａｔ
ａ）ＳＡＭ１８６０の前培養液を５００mL接種した。本
発明法では培養液のＤＯが、培養の全期間を通じて１２
〜１７ppm の範囲となるように、酸素富化空気と培養槽
内の圧力で調整した。
【００３８】ちなみに、この場合の酸素濃度は約２５
％、内圧は約０．８kg／cm2Gであった。コントロールは
通常の空気を常圧で通気した。なお何れの場合も、培養
温度２８℃、攪拌回転数２００rpm 、通気量１vvm 通気
の条件で７日間培養を行なった。また、実施例１と同様
に、培養１〜５日目のグルコース添加、必要に応じた消
泡剤添加を行なった。培養後、実施例１と同様の方法で
菌体回収および脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマ
トグラフィーで分析した。表５にその結果を示す。
％、内圧は約０．８kg／cm2Gであった。コントロールは
通常の空気を常圧で通気した。なお何れの場合も、培養
温度２８℃、攪拌回転数２００rpm 、通気量１vvm 通気
の条件で７日間培養を行なった。また、実施例１と同様
に、培養１〜５日目のグルコース添加、必要に応じた消
泡剤添加を行なった。培養後、実施例１と同様の方法で
菌体回収および脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマ
トグラフィーで分析した。表５にその結果を示す。
【００３９】 表 ５ Ｉ（本発明法） II（コントロール） 培養中の最低DO(ppm) 13.1 1.6 培養中の最高DO(ppm) 16.6 7.7 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 22.3 17.2 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 10.2 8.03 DGLA（ｇ／Ｌ） 3.72 2.94 ARA(ｇ／Ｌ） 0.95 0.80 表５から明らかなように、本発明法の場合、コントロー
ルに比べてＤＧＬＡで２７％、ＡＲＡで１９％生産量が
増大した。
ルに比べてＤＧＬＡで２７％、ＡＲＡで１９％生産量が
増大した。
【００４０】実施例６．グルコース０．５％、オリーブ
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分殺菌、冷
却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・エロ
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）
ＳＡＭ０２１９の前培養液５００mlを接種した。本発明
法では、培養液のＤＯが培養の全期間を通じて２２〜２
７ppm になるように、通気中の酸素濃度と培養槽内圧力
で調整した。
油２％、酵母エキス１％を含む培地（pH６．０）を５０
Ｌ容培養槽に２５Ｌ仕込み、１２０℃で２０分殺菌、冷
却後、実施例１と同様に調製したモルティエレラ・エロ
ンガタ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ ｅｌｏｎｇａｔａ）
ＳＡＭ０２１９の前培養液５００mlを接種した。本発明
法では、培養液のＤＯが培養の全期間を通じて２２〜２
７ppm になるように、通気中の酸素濃度と培養槽内圧力
で調整した。
【００４１】ちなみに、この場合の酸素濃度は約２９
％、内圧は約１．５kg／cm2Gであった。コントロールは
通常の空気（酸素濃度２１％）を常圧で通気した。な
お、いずれの場合も培養温度２８℃、攪拌回転数２００
rpm 、１vvm 通気の条件で７日間培養を行なった。ま
た、培養１〜５日目には、各々１日当たりグルコース１
％（対ブロス）を添加し、必要に応じて消泡剤を添加し
て培養した。培養後、実施例１と同様の方法で菌体回収
および脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマトグラフ
ィーで分析した。表６にその結果を示す。
％、内圧は約１．５kg／cm2Gであった。コントロールは
通常の空気（酸素濃度２１％）を常圧で通気した。な
お、いずれの場合も培養温度２８℃、攪拌回転数２００
rpm 、１vvm 通気の条件で７日間培養を行なった。ま
た、培養１〜５日目には、各々１日当たりグルコース１
％（対ブロス）を添加し、必要に応じて消泡剤を添加し
て培養した。培養後、実施例１と同様の方法で菌体回収
および脂肪酸メチルの調製を行い、ガスクロマトグラフ
ィーで分析した。表６にその結果を示す。
【００４２】 表 ６ Ｉ（本発明法） II（コントロール） DO値 培養液中の最低DO(ppm) 22.5 1.4 培養液中の最高DO(ppm) 26.2 7.6 培養成績 乾燥菌体（ｇ／Ｌ） 21.4 17.3 総脂肪酸（ｇ／Ｌ） 10.5 8.13 ARA(ｇ／Ｌ） 4.09 3.09 DGLA（ｇ／Ｌ） 0.63 0.41 表６から明らかなように、本発明法の場合、コントロー
ルに比べＡＲＡで３２％、ＤＧＬＡで５４％生産量が増
大した。
ルに比べＡＲＡで３２％、ＤＧＬＡで５４％生産量が増
大した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 新免 芳史 東京都府中市緑町２−18−９ アルト東府 中302 (72)発明者 松元 信也 大阪府三島郡島本町桜井台８−15 (72)発明者 山田 秀明 京都府京都市左京区松ヶ崎木ノ本町19−１
Claims (4)
- 【請求項１】 モルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌ
ａ）属のモルティエレラ（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）亜
属に属する微生物を液体培地中で通気培養して、高度不
飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質を製造する方法にお
いて、培養液中の溶存酸素濃度を５〜２８ppm に維持す
ることを特徴とする、高度不飽和脂肪酸又はこれを含有
する脂質の製造方法。 - 【請求項２】 さらに、培養時の培養槽内の圧力を加圧
状態に維持することを特徴とする、請求項１記載の高度
不飽和脂肪酸又はこれを含有する脂質の製造方法。 - 【請求項３】 さらに、酸素濃度が通常空気より高い酸
素富化空気を、通気することを特徴とする、請求項１記
載の高度不飽和脂肪酸又はこれを含有する脂質の製造方
法。 - 【請求項４】 培養液中の溶存酸素濃度を５〜２０ppm
に維持することを特徴とする請求項３記載の高度不飽和
脂肪酸又はこれを含有する脂質の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30552392A JP3354608B2 (ja) | 1992-11-16 | 1992-11-16 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30552392A JP3354608B2 (ja) | 1992-11-16 | 1992-11-16 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06153970A true JPH06153970A (ja) | 1994-06-03 |
| JP3354608B2 JP3354608B2 (ja) | 2002-12-09 |
Family
ID=17946177
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP30552392A Expired - Lifetime JP3354608B2 (ja) | 1992-11-16 | 1992-11-16 | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3354608B2 (ja) |
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| WO1998029558A1 (en) | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Suntory Limited | Media for culturing microorganisms and process for producing unsaturated fatty acids or lipids containing the same |
| WO1998039468A1 (en) * | 1997-03-04 | 1998-09-11 | Suntory Limited | Process for preparing highly unsaturated fatty acid and lipid containing highly unsaturated fatty acid |
| WO2001012780A1 (en) * | 1999-08-13 | 2001-02-22 | Suntory Limited | Microorganism secreting out lipid and process for producing the lipid and lipid balls having the lipid encapsulating therein by using the microorganism |
| EP1342787A2 (en) | 1995-01-03 | 2003-09-10 | Martek Biosciences Corporation | Arachidonic acid and methods for the production and use thereof |
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| JP2006067964A (ja) * | 2004-09-06 | 2006-03-16 | Suntory Ltd | 菌体培養方法 |
| EP2239316A1 (en) | 2004-08-12 | 2010-10-13 | Nippon Suisan Kaisha, Ltd. | Method for polyunsaturated fatty acid production using novel cell preservation technique |
| US7863024B2 (en) | 2002-04-26 | 2011-01-04 | Suntory Holdings Limited | Process for producing highly unsaturated fatty acid-containing lipid |
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| WO2017110970A1 (ja) * | 2015-12-24 | 2017-06-29 | 花王株式会社 | 有機酸の製造方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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