JPH06157332A - 血管再建術後血管再狭窄及び動脈硬化の治療用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 トロンボモジュリン又はその相同変異体を主
成分とする血管再建術後血管再狭窄及び動脈硬化の治療
用医薬組成物 【構成】 血管再建術後の血管再狭窄症あるいは動脈硬
化症の進展過程においてヒトトロンボモジュリンポリペ
プチド又はその相同変異体を適当な担体と混合し、静脈
内投与、経口投与、などの投与経路で投与し、上記疾患
の予防及び治療に用いる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は血管中膜平滑筋細胞の異
常増殖を原因とする様々な疾患、例えば血管再形成術後
の血管再狭窄を含む血流不全、及び動脈硬化症に対する
予防薬、治療薬として期待できるヒトトロンボモジュリ
ンポリペプチド又はその部分ペプチドを含む医薬組成物
に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、狭心症、急性心筋梗塞に対し経皮
的冠動脈再建術（ＰＴＣＡ）が成功率の高い治療法とし
て広く適用されるに至っている。しかしながら、冠動脈
再灌流後の血管再狭窄が本治療適用の障害となってい
る。この血管再狭窄はＰＴＣＡ後数日以内に起る急性期
再狭窄と３〜６ケ月後に起る遠隔期再狭窄とに分類でき
る。急性期再狭窄は血管傷害後の血液凝固亢進、血小板
粘着凝集が原因となって発症することが明らかになって
おり、ＰＴＣＡ施行中および１〜２日後にわたるヘパリ
ン投与でその発症が効率的に予防されており臨床上ほと
んど問題とはなっていない。一方、遠隔期の血管再狭窄
は、血管傷害に伴う中膜平滑筋細胞の異常増殖によって
起ることが確かめられており、短期間の内に進展する動
脈硬化症の一つとして捉えられている。このＰＴＣＡ施
行後３〜６ケ月後の再狭窄はＰＴＣＡ患者の２５〜４０
％という高率で発症し、ＰＴＣＡ施行中および１〜２日
後にわたるヘパリンの投与ではその発症が全く抑制され
ない。現在のところ、遠隔期の再狭窄を起こした患者に
は再びＰＴＣＡを行うなどの処置が施されているにすぎ
ず、有効な治療法、予防法が見出されておらず、ＰＴＣ
Ａ施行の最大の障害となっている。

【０００３】

【発明が解決しようとする問題点】血管傷害後様々な複
合病変を伴って起こる血管内腔狭窄すなわち動脈硬化症
の治療においては、その危険因子である高脂血症などの
軽減が図られているのみで、動脈硬化自体に対する有効
な治療法や予防法は見出されていない。又、ＰＴＣＡ後
の血管再狭窄の治療、予防においては、ＰＴＣＡ施行中
及び直後の再閉塞を防止する目的でＰＴＣＡ直前から１
〜２日後までのヘパリンの持続点滴静注、アスピリンの
長期投与などが行われているが、ＰＴＣＡ後の遠隔期再
狭窄を確実に治療、予防する方法はなんら見出されてい
ない。以上に述べた理由から、動脈硬化症及びＰＴＣＡ
後の遠隔期血管再狭窄に対する予防薬、治療薬が臨床現
場より強く求められている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】トロンボモジュリンは血
管内皮細胞膜上に存在する糖蛋白質であり、トロンビン
と特異的に結合しトロンビンの向凝固活性を阻害すると
同時にトロンビンのプロテインＣ活性化能を著しく促進
するため、強力な血液凝固阻害作用を有する。ヒトトロ
ンボモジュリンのｃＤＮＡのクローニングについては本
発明者らは先に明らかにした。（Ｓ．Ｙａｍａｍｏｔｏ
ら 国際公開番号ＷＯ８８／０５０３３）トロンボモジ
ュリンはＮ末端からドメイン１（Ｎ末端ドメイン）、ド
メイン２（ＥＧＦドメイン）、ドメイン３（Ｏ−ｇｌｙ
ｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ ｒｉｃｈドメイ
ン）、ドメイン４（膜貫通ドメイン）、ドメイン５（細
胞内ドメイン）からなり遺伝子工学的手法を用いること
により可溶性のドメイン１２３を大量に得ることができ
る。この可溶性の組換え型トロンボモジュリンはトロン
ビンとの結合能、プロテインＣ活性化促進能を保持して
おり、抗血液凝固作用を有するため血栓症及びＤＩＣな
どの凝固亢進を伴う疾患の治療、予防に有効であること
が動物実験により証明されている。さらに、トロンボモ
ジュリンの活性最小単位はドメイン２内のＥＧＦドメイ
ン４，５，６番目であることが確かめられており、トロ
ンボモジュリンの部分ペプチドも血栓症及びＤＩＣなど
の凝固亢進を伴う疾患の治療に有効であると考えられて
いる。一方、血栓症及びＤＩＣなどの凝固亢進を伴う病
態以外の疾患に対するトロンボモジュリンの適用例はい
まだ報告されていない。本発明者らはトロンボモジュリ
ン及びその部分ペプチドの薬理作用について鋭意研究し
た結果、ラット総頚動脈バルーン傷害後の内膜肥厚をＴ
Ｍが著明に抑制することを見出した。本モデルは血管中
膜平滑筋細胞の異常増殖を伴い、ＰＴＣＡ後の血管内膜
肥厚の病理的変化を再現可能なモデルであるといわれて
いることから、血管中膜平滑筋細胞の異常増殖を原因と
する様々な疾患に対するトロンボモジュリン及びその部
分ペプチドの新たな医薬用途を発明するに至った。さら
に、動脈硬化発症においても中膜平滑筋細胞の異常増殖
がその主病変であることから、ＰＴＣＡ後血管再狭窄
症、動脈硬化症の有効な治療、予防剤としての本医薬組
成物の発明に至った。

【０００５】すなわち、本発明はヒトトロンボモジュリ
ンポリペプチドを有効成分とした、血管中膜平滑筋細胞
の異常増殖を原因とする様々な疾患に対する予防、治療
剤を提供することを目的とし、また更には同有効成分を
用いたＰＴＣＡ後遠隔期血管再狭窄及び動脈硬化に対す
る予防、治療剤を提供するものである。本発明のヒトト
ロンボモジュリンポリペプチドのアミノ酸部分の構造は
細胞内ドメインも含む557個のアミノ酸配列を有してい
てもよいが、生物学的活性発現部位を少なくとも含めば
よい。血管内皮傷害後の血管壁肥厚抑制に寄与するヒト
トロンボモジュリンポリペプチドの生物学的活性は不明
であるが、実施例２に示すように式Ｉで示されるアミノ
酸配列部位が血管傷害後の内膜肥厚を抑制したため、上
記の生物学的活性発現部位とは式Ｉで示されるアミノ酸
配列部位を意味する。またこのことから、コンドロイチ
ン硫酸鎖を含むトロンボモジュリンポリペプチド、およ
びコンドロイチン硫酸鎖を含まないトロンボモジュリン
ポリペプチドとも同様な内膜肥厚抑制効果を発揮すると
考えられる。好ましいアミノ酸配列部位としては、精製
工程を簡単にするために、全長アミノ酸配列から膜結合
部位及び細胞質部位（第１図第５１７番目〜５７５番
目）を除いたもの及び式Ｉで示されるアミノ酸配列部位
などが挙げられる。ヒトトロンボモジュリンポリペプチ
ド及びその部分ペプチドは公知の方法、例えば〔Ｓ．Ｙ
ａｍａｍｏｔｏら、国際公開番号ＷＯ８８／０５０３
３〕に記載されている方法又は〔Ｍ．Ｚｕｓｈｉら、
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４．１０３５１−１０３
５３（１９８９）〕に記載されている方法を用いること
により製造することができる。

【０００６】本発明のヒトトロンボモジュリンポリペプ
チドをＰＴＣＡ後の遠隔期再狭窄、又は動脈硬化症の治
療に用いる際には、薬剤として使用可能な担体と混合す
ることができる。すなわち、上記の疾患を治療または予
防するのに有効な量のヒトトロンボモジュリンポリペプ
チドを適当な量の担体と混ぜて、患者に効果的に投与す
るのに適した医薬組成物を調製することができる。本医
薬組成物はペプチド医薬に一般に使用されている投与
法、すなわち、非経口投与法、例えば、静脈内投与、筋
肉内投与、皮下投与などによって投与することが望まし
い。また、経口投与、直腸内投与、鼻内投与、舌下投与
なども可能である。

【０００７】本発明の医薬組成物の投与量は、患者の年
齢、体重、疾患の程度、投与経路などによっても異なる
が、一般的に０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であり、
一日当たり一回または必要に応じて数回投与する。以下
に実施例及び参考例を挙げ、この発明をさらに具体的に
説明する。

【０００８】

【実施例１】ヒトトロンボモジュリンポリペプチドの血
管バルーン傷害後内膜肥厚に対する効果体重３５０〜４
００ｇのＳＤラットをペントバルビタール麻酔後、大腿
動脈より２Ｆ ｆｏｒｇａｔｙ ｃａｔｈｅｔｅｒを左
総頚動脈に挿入しバルーンを膨らまし（直径４ｍｍ）、
総頚動脈を全長にわたり傷害した。バルーン傷害後14日
に頚動脈を摘出し組織標本を作成した。血管の最大肥厚
部の内膜／中膜面積比を算出し各ラットにおける内膜肥
厚度とした。第１群においては生食を投与し、第２群に
おいてはヒトトロンボモジュリンポリペプチドドメイン
１２３を２ｍｇ／ｋｇ投与した。生食、被験薬とも傷害
直前、傷害後６時間、傷害後１２時間に静脈内投与し
た。

【０００９】表１に示すように、ヒトトロンボモジュリ
ンポリペプチドの投与群のラットにおいては、内膜肥厚
度が生食投与群のラットと比較して顕著に低く、ヒトト
リンボモジュリンポリペプチドがＰＴＣＡ後の血管再狭
窄の治療、予防に有効であることが示された。

【００１０】

【実施例２】式Ｉで示されるヒトトロンボモジュリンＥ
ＧＦドメイン４５６の血管バルーン傷害後内膜肥厚に対
する効果 実施例１と同様にラットにおけるバルーン傷害後の内膜
肥厚モデルを作成した。第１群においては生食を投与
し、第２群においては式Ｉで示されるヒトトロンボモジ
ュリンＥＧＦドメイン４５６を２ｍｇ／ｋｇ投与した。
生食、被験薬とも傷害直前、傷害後６時間、傷害後１２
時間、傷害後２４時間に静脈内投与した。

【００１１】表２に示すように、ヒトトロンボモジュリ
ンＥＧＦドメイン４５６投与群のラットにおいては、バ
ルーン傷害後１４日目の内膜肥厚度が生食投与群のラッ
トと比較して顕著に低く、ヒトトリンボモジュリンポリ
ペプチドのみでなくその部分ペプチドもＰＴＣＡ後の血
管再狭窄の治療、予防に有効であることが示された。

【００１２】

【実施例３】ヒトトロンボモジュリンポリペプチドの単
回投与毒性試験をラットを用いて実施した。成績を表３
に示した。１８０ｍｇ／ｋｇでも死亡は発現しなかっ
た。

【００１３】

【表１】

【００１４】

【表２】

【００１５】

【表３】

【００１６】

【発明の効果】本発明により、血管中膜平滑筋細胞の異
常増殖を原因とする様々な疾患、例えば血管再形成術後
の血管再狭窄を含む血流不全、及び動脈硬化症に対する
予防薬、治療薬の提供が可能となる。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ヒトトロンボモジュリンポリペプチドを
   有効成分とする血管再建術後の遠隔期血管再狭窄を含む
   血流不全、及び動脈硬化症に対する予防、治療剤。
2. 【請求項２】 該ペプチド鎖が、次式（Ｉ）: Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ− Ｔｙｒ−Ｇｌｎ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ− Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ− Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ− Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｔｈｒ− Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ− Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ− Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ− Ａｓｎ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ− Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｒｇ− Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ で表されるアミノ酸配列を少なくとも含有してなるヒト
   トロンボモジュリンポリペプチド又は生理的に活性な相
   同変異体を有効成分とする、請求項１記載の血管再建術
   後の遠隔期血管再狭窄を含む血流不全、及び動脈硬化症
   に対する予防、治療剤。