JPH06169797A - Ｈｒｐの測定方法 - Google Patents
Ｈｒｐの測定方法Info
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- JPH06169797A JPH06169797A JP11082093A JP11082093A JPH06169797A JP H06169797 A JPH06169797 A JP H06169797A JP 11082093 A JP11082093 A JP 11082093A JP 11082093 A JP11082093 A JP 11082093A JP H06169797 A JPH06169797 A JP H06169797A
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Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 ＨＲＰの測定条件を確立してその検出感度を
向上させる。 【構成】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノール
を含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反応時
における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する際
に、上記発光測定試薬の緩衝液としてトリス緩衝液を用
いると共に、この発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０
６〜４１.２(mmol/l)とする。好ましくはＰ−ヨードフ
ェノール濃度を３６.４〜３６４(μmol/l)とする。更に
好ましくはルミノール濃度を２.０６〜１０.３(μmol/
l)とする。
向上させる。 【構成】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノール
を含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反応時
における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する際
に、上記発光測定試薬の緩衝液としてトリス緩衝液を用
いると共に、この発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０
６〜４１.２(mmol/l)とする。好ましくはＰ−ヨードフ
ェノール濃度を３６.４〜３６４(μmol/l)とする。更に
好ましくはルミノール濃度を２.０６〜１０.３(μmol/
l)とする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は臨床検査、微量分析等に
おける西洋わさびペルオキシターゼ（ホースラディッシ
ュペルオキシターゼ；ＨＲＰ）の検出方法に関する。
おける西洋わさびペルオキシターゼ（ホースラディッシ
ュペルオキシターゼ；ＨＲＰ）の検出方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、ＨＲＰは生化学分析、臨床検査等
の分野でよく用いられる代表的な酵素であり、特に微量
分析が期待できるので、様々な測定に用いられている。
の分野でよく用いられる代表的な酵素であり、特に微量
分析が期待できるので、様々な測定に用いられている。
【０００３】このＨＲＰを用いた測定における測定条件
は、例えば1986 G.H.G.Thorpe Methods in Enzymology
133,331-353、Enhanced Chemiluminescent reactions C
atalyzed by Horseradish Peroxidase等の文献に述べら
れており、通常は以下のような測定条件が用いられてい
る。
は、例えば1986 G.H.G.Thorpe Methods in Enzymology
133,331-353、Enhanced Chemiluminescent reactions C
atalyzed by Horseradish Peroxidase等の文献に述べら
れており、通常は以下のような測定条件が用いられてい
る。
【０００４】
【表１】 発光測定試薬（0.1mol/l Tris buffer pＨ8.5) ルミノール（luminol） 61.6(μmol/l) 過酸化水素（Ｈ2Ｏ2） 20.6(mmol/l) Ｐ−ヨードフェノール（P-iodophenol） 374(μmol/l)（最終濃度） （各１ml）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】上記のように、ＨＲＰ
を高感度に測定する事はそのＨＲＰを検出系に利用した
測定系そのものの感度を上昇させることになり、実用上
の意義はきわめて大きい。
を高感度に測定する事はそのＨＲＰを検出系に利用した
測定系そのものの感度を上昇させることになり、実用上
の意義はきわめて大きい。
【０００６】しかし、ＨＲＰの検出時における測定条件
は未だ確立されてはおらず、最適なＨＲＰ測定条件の選
定が求められている。
は未だ確立されてはおらず、最適なＨＲＰ測定条件の選
定が求められている。
【０００７】本発明は上記背景のもとになされたもので
あり、ＨＲＰの測定条件を確立してその検出感度を向上
させることを目的とする。
あり、ＨＲＰの測定条件を確立してその検出感度を向上
させることを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段及び作用】上記課題を解決
するため、請求項１記載の発明はルミノール、Ｈ2Ｏ2、
Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを
反応させ、この反応時における発光量に基づいてＨＲＰ
の濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前記発光
測定試薬中のＰ−ヨードフェノール濃度を３６.４〜３
６４(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方
法を提供する。
するため、請求項１記載の発明はルミノール、Ｈ2Ｏ2、
Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを
反応させ、この反応時における発光量に基づいてＨＲＰ
の濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前記発光
測定試薬中のＰ−ヨードフェノール濃度を３６.４〜３
６４(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方
法を提供する。
【０００９】請求項２記載の発明はルミノール、Ｈ
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜４１.２(mmo
l/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方法を提供す
る。
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜４１.２(mmo
l/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方法を提供す
る。
【００１０】請求項３記載の発明はルミノール、Ｈ
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬は緩衝液としてトリス緩衝液を用いると
共に、この発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜４
１.２(mmol/l)とし、かつ前記発光測定試薬中のＰ−ヨ
ードフェノール濃度を３６.４〜３６４(μmol/l)とした
ことを特徴とするＨＲＰの測定方法を提供する。
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬は緩衝液としてトリス緩衝液を用いると
共に、この発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜４
１.２(mmol/l)とし、かつ前記発光測定試薬中のＰ−ヨ
ードフェノール濃度を３６.４〜３６４(μmol/l)とした
ことを特徴とするＨＲＰの測定方法を提供する。
【００１１】請求項４記載の発明はルミノール、Ｈ
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬中のルミノール濃度を２.０６〜１０.３
(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方法を
提供する。
2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノールを含む発光測定試薬とＨＲ
Ｐとを反応させ、この反応時における発光量に基づいて
ＨＲＰの濃度を決定するＨＲＰの測定方法において、前
記発光測定試薬中のルミノール濃度を２.０６〜１０.３
(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方法を
提供する。
【００１２】請求項５記載の発明は請求項３記載のＨＲ
Ｐの測定方法において、前記発光測定試薬中のルミノー
ル濃度を２.０６〜１０.３(μmol/l)としたことを特徴
とするＨＲＰの測定方法を提供する。
Ｐの測定方法において、前記発光測定試薬中のルミノー
ル濃度を２.０６〜１０.３(μmol/l)としたことを特徴
とするＨＲＰの測定方法を提供する。
【００１３】上記各請求項記載の発明においてはＰ−ヨ
ードフェノール濃度、Ｈ2Ｏ2濃度、ルミノール濃度によ
ってＨＲＰの測定感度が変化する。
ードフェノール濃度、Ｈ2Ｏ2濃度、ルミノール濃度によ
ってＨＲＰの測定感度が変化する。
【００１４】上記Ｐ−ヨードフェノールはその濃度を0.
1×364(μmol/l)〜10×364(μmol/l)として測定を行う
ことが好ましく、特に濃度を182(μmol/l)とすると高い
測定精度が得られる。
1×364(μmol/l)〜10×364(μmol/l)として測定を行う
ことが好ましく、特に濃度を182(μmol/l)とすると高い
測定精度が得られる。
【００１５】また、Ｈ2Ｏ2はその濃度を0.1×20.6(mmol
/l)〜2×20.6(mmol/l)として測定を行うことが好まし
く、特に濃度を4.12(mmol/l)とすると高い測定精度が得
られる。
/l)〜2×20.6(mmol/l)として測定を行うことが好まし
く、特に濃度を4.12(mmol/l)とすると高い測定精度が得
られる。
【００１６】更に、ルミノールはその濃度を２.０６〜
１０.３(μmol/l)として測定を行うことが好ましく、特
に濃度を４.１２(μmol/l)とすると高い測定精度が得ら
れる。
１０.３(μmol/l)として測定を行うことが好ましく、特
に濃度を４.１２(μmol/l)とすると高い測定精度が得ら
れる。
【００１７】また、ＨＲＰの測定を行う際のトリス緩衝
液濃度には特に制限はなく、通常のＨＲＰ測定時と同じ
濃度としてよい。好ましくはトリス緩衝液としては0.1
(mol)，pＨ8.5のものを用いる。
液濃度には特に制限はなく、通常のＨＲＰ測定時と同じ
濃度としてよい。好ましくはトリス緩衝液としては0.1
(mol)，pＨ8.5のものを用いる。
【００１８】
実施例１ 本実施例においてはＨＲＰの測定試薬としてルミノー
ル、過酸化水素、Ｐ−ヨードフェノールを含むトリス緩
衝液を用い、この測定試薬におけるＰ−ヨードフェノー
ルの濃度を変化させてＨＲＰの測定を行い、最適なＰ−
ヨードフェノール濃度を求めた。尚、ＨＲＰの測定器と
しては明電舎製のルミノメータＵＰＤ−８０００を用い
た。
ル、過酸化水素、Ｐ−ヨードフェノールを含むトリス緩
衝液を用い、この測定試薬におけるＰ−ヨードフェノー
ルの濃度を変化させてＨＲＰの測定を行い、最適なＰ−
ヨードフェノール濃度を求めた。尚、ＨＲＰの測定器と
しては明電舎製のルミノメータＵＰＤ−８０００を用い
た。
【００１９】まず、ＨＲＰを１×１０-4(mol/l)の濃度
に調製し、このＨＲＰ溶液を順次希釈してＨＲＰ濃度１
０-12〜１０-7(mol/l)の標準液を調製した。
に調製し、このＨＲＰ溶液を順次希釈してＨＲＰ濃度１
０-12〜１０-7(mol/l)の標準液を調製した。
【００２０】次に、ルミノール（シグマ製）２８.５(m
g)を０.２(mol/l)炭酸塩緩衝液（carbonate buffer，p
Ｈ９.８）に溶解し、２５(ml)に調製した。
g)を０.２(mol/l)炭酸塩緩衝液（carbonate buffer，p
Ｈ９.８）に溶解し、２５(ml)に調製した。
【００２１】同様に、Ｐ−ヨードフェノール（P-iodoph
enol，東京化成製）１００(mg)をＤＭＳＯに溶解し、２
５(ml)に調製して１８.２(mmol/l)の溶液を得た。
enol，東京化成製）１００(mg)をＤＭＳＯに溶解し、２
５(ml)に調製して１８.２(mmol/l)の溶液を得た。
【００２２】過酸化水素は市販の１０(mol/l)のものを
用いた。
用いた。
【００２３】
【表２】 基本測定試薬 ６ (mmol/l) luminol １(ml) １０ (mol/l) Ｈ2Ｏ2 ２０(μl) １８.２ (mmol/l) P-iodophenol ２(ml) ０.１ (mol/l) Tris buffer pＨ８．５ １００(ml) 上記基本測定試薬を用いて、６(mmol/l)のルミノール１
(ml)、１０(mmol/l)のＨ2Ｏ2２０(μl)、及びＰ−ヨー
ドフェノールを含むトリス緩衝液１００(ml)を調整し、
上記ＨＲＰの各標準液と発光反応を行った。この際、Ｐ
−ヨードフェノールの最終濃度が0，0.1×364(μmol/
l)，0.5×364(μmol/l)，1×364(μmol/l)，2×364(μm
ol/l)，10×364(μmol/l)となるようにそれぞれ試料液
ａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅを作成してそれぞれ検量線を作成し
た。その結果を順次図１のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆの各
線にて示す。
(ml)、１０(mmol/l)のＨ2Ｏ2２０(μl)、及びＰ−ヨー
ドフェノールを含むトリス緩衝液１００(ml)を調整し、
上記ＨＲＰの各標準液と発光反応を行った。この際、Ｐ
−ヨードフェノールの最終濃度が0，0.1×364(μmol/
l)，0.5×364(μmol/l)，1×364(μmol/l)，2×364(μm
ol/l)，10×364(μmol/l)となるようにそれぞれ試料液
ａ，ｂ，ｃ，ｄ，ｅを作成してそれぞれ検量線を作成し
た。その結果を順次図１のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆの各
線にて示す。
【００２４】上記検量線においては、 １．バックグラウンドが低い（ＨＲＰ濃度０における発
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
【００２５】図から明らかなように、Ｐ−ヨードフェノ
ールの濃度が上がるにつれてバックグラウンドは低くな
るが、検量線の傾きは小さくなっており試料液ｄ，ｅの
検量線は良好とはいいがたい。これに対し、試料液ａ，
ｂ，ｃにおいては検量線の傾きが大きく、良い検量線が
得られている。最も良い検量線は試料液ｂ（Ｐ−ヨード
フェノール濃度１８２(μmol/l)：最終濃度）のもので
ある。
ールの濃度が上がるにつれてバックグラウンドは低くな
るが、検量線の傾きは小さくなっており試料液ｄ，ｅの
検量線は良好とはいいがたい。これに対し、試料液ａ，
ｂ，ｃにおいては検量線の傾きが大きく、良い検量線が
得られている。最も良い検量線は試料液ｂ（Ｐ−ヨード
フェノール濃度１８２(μmol/l)：最終濃度）のもので
ある。
【００２６】実施例２ 実施例１と同様に、ＨＲＰを１×１０-4(mol/l)の濃度
に調製して順次希釈することにより、１０-13〜１０
-7(mol/l)の検量線用の標準液を作成した。
に調製して順次希釈することにより、１０-13〜１０
-7(mol/l)の検量線用の標準液を作成した。
【００２７】次に、実施例１に示した基本測定試薬を用
いて６(mmol/l)のルミノール1(ml)、１０(mol/l)のＨ2Ｏ
2２０(μl)、３６４(μmol/l)のＰ−ヨードフェノール
２(ml)を含む0.1(mol/l)のトリス緩衝液１００(ml)を調
整し、上記ＨＲＰの各標準液と発光反応を行った。
いて６(mmol/l)のルミノール1(ml)、１０(mol/l)のＨ2Ｏ
2２０(μl)、３６４(μmol/l)のＰ−ヨードフェノール
２(ml)を含む0.1(mol/l)のトリス緩衝液１００(ml)を調
整し、上記ＨＲＰの各標準液と発光反応を行った。
【００２８】この際、上記トリス緩衝液におけるＨ2Ｏ2
濃度を0，0.1×20.6(mmol/l)，0.2×20.6(mmol/l)，0.5
×20.6(mmol/l)，１×20.6(mmol/l)，２×20.6(mmol/l)
としてそれぞれ試料液ｆ，ｇ，ｈ，ｉ，ｊ，ｋを作成
し、それぞれ検量線を作成した。その結果を順次図２の
Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｊ，Ｋの各線にて示す。
濃度を0，0.1×20.6(mmol/l)，0.2×20.6(mmol/l)，0.5
×20.6(mmol/l)，１×20.6(mmol/l)，２×20.6(mmol/l)
としてそれぞれ試料液ｆ，ｇ，ｈ，ｉ，ｊ，ｋを作成
し、それぞれ検量線を作成した。その結果を順次図２の
Ｆ，Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｊ，Ｋの各線にて示す。
【００２９】実施例１と同様に、上記検量線において
は、 １．バックグラウンドが低い（ＨＲＰ濃度０における発
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
は、 １．バックグラウンドが低い（ＨＲＰ濃度０における発
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
【００３０】図２から明らかなように、Ｐ−ヨードフェ
ノールの濃度が上がるにつれてバックグラウンドは高く
なり、検量線の傾きも小さくなって検量線の精度が低く
なっていることがわかる。
ノールの濃度が上がるにつれてバックグラウンドは高く
なり、検量線の傾きも小さくなって検量線の精度が低く
なっていることがわかる。
【００３１】しかし、Ｈ〜Ｋ線にてはＨＲＰ濃度が10
-12(mol/l)程度で検量線が立ち上がるのに対し、Ｐ−ヨ
ードフェノール濃度が0.1×20.6(mmol/l)と低いＧ線に
ては，ＨＲＰ濃度10-11(mol/l)程度にてようやく検量線
が立ち上がっており、検量線の立ち上がりが悪くなって
いる。
-12(mol/l)程度で検量線が立ち上がるのに対し、Ｐ−ヨ
ードフェノール濃度が0.1×20.6(mmol/l)と低いＧ線に
ては，ＨＲＰ濃度10-11(mol/l)程度にてようやく検量線
が立ち上がっており、検量線の立ち上がりが悪くなって
いる。
【００３２】従って、最も良い検量線は試料液ｈ（Ｈ2Ｏ
2濃度４.１２(mmol/l)：最終濃度）のものであるが、試
料液ｇ，ｉ，ｊ，ｋおける検量線においても比較的良好
な検量線が得られていることがわかる。
2濃度４.１２(mmol/l)：最終濃度）のものであるが、試
料液ｇ，ｉ，ｊ，ｋおける検量線においても比較的良好
な検量線が得られていることがわかる。
【００３３】実施例３ 実施例１と同様に、ＨＲＰを１×１０-4(mol/l)の濃度
に調製して順次希釈することにより、１０-13〜１０
-7(mol/l)の検量線用の標準液を作成した。
に調製して順次希釈することにより、１０-13〜１０
-7(mol/l)の検量線用の標準液を作成した。
【００３４】次に、実施例１に示した基本測定試薬を用
いて、ルミノール、１０(mol/l)のＨ2Ｏ220(μl)、１
８.２(mmol/l)のＰ−ヨードフェノール２(ml)を含む0.1
(mol/l)のトリス緩衝液１００(ml)を調整し、上記ＨＲ
Ｐの各標準液と発光反応を行った。
いて、ルミノール、１０(mol/l)のＨ2Ｏ220(μl)、１
８.２(mmol/l)のＰ−ヨードフェノール２(ml)を含む0.1
(mol/l)のトリス緩衝液１００(ml)を調整し、上記ＨＲ
Ｐの各標準液と発光反応を行った。
【００３５】この際、上記トリス緩衝液におけるルミノ
ール濃度を20.6(μmol/l)としたものを基本として、ルミ
ノール濃度がそれぞれ0，0.1×20.6(μmol/l)，0.2×2
0.6(μmol/l)，0.5×20.6(μmol/l)，１×20.6(μmol/
l)である試料液ｌ，ｍ，ｎ，ｏ，ｐを作成し、それぞれ
検量線を作成した。その結果を順次図３のＬ，Ｍ，Ｎ，
Ｏ，Ｐの各線にて示す。
ール濃度を20.6(μmol/l)としたものを基本として、ルミ
ノール濃度がそれぞれ0，0.1×20.6(μmol/l)，0.2×2
0.6(μmol/l)，0.5×20.6(μmol/l)，１×20.6(μmol/
l)である試料液ｌ，ｍ，ｎ，ｏ，ｐを作成し、それぞれ
検量線を作成した。その結果を順次図３のＬ，Ｍ，Ｎ，
Ｏ，Ｐの各線にて示す。
【００３６】実施例１と同様に、上記検量線において
は、 １．バックグラウンドが低い（ＨＲＰ濃度０における発
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
は、 １．バックグラウンドが低い（ＨＲＰ濃度０における発
光値が低い） ２．検量線の立ち上がりが良い（Ｓ／Ｎ比が大きい） ３．検量線のカーブがスムーズであること という３点を判断基準とする。
【００３７】図３から明らかなように、ルミノールの濃
度が上がるにつれてバックグラウンドは高くなり、検量
線の傾きも小さくなる（検量線Ｏ，Ｐ）。従って検量線
の精度が低くなることがわかる。
度が上がるにつれてバックグラウンドは高くなり、検量
線の傾きも小さくなる（検量線Ｏ，Ｐ）。従って検量線
の精度が低くなることがわかる。
【００３８】これに対し、ルミノール濃度が低くなると
検量線の立ち上がりが悪くなり、低濃度領域を測定する
ことが困難となる（検量線Ｍ）。
検量線の立ち上がりが悪くなり、低濃度領域を測定する
ことが困難となる（検量線Ｍ）。
【００３９】従って、最も良い検量線は試料液ｎの検量
線Ｎ（ルミノール濃度４.１２(μmol/l)：最終濃度）で
あるが、試料液ｍ，ｏにおいても比較的良好な検量線
Ｍ，Ｏが得られていることがわかる。
線Ｎ（ルミノール濃度４.１２(μmol/l)：最終濃度）で
あるが、試料液ｍ，ｏにおいても比較的良好な検量線
Ｍ，Ｏが得られていることがわかる。
【００４０】
【発明の効果】本発明によれば、ＨＲＰを高感度に検出
できるので様々な測定系を高感度化できる。
できるので様々な測定系を高感度化できる。
【００４１】また、特殊な設備や試薬等を必要としない
ので、容易に測定を行うことができ、経済的にも有利で
ある。
ので、容易に測定を行うことができ、経済的にも有利で
ある。
【図１】各Ｐ−ヨードフェノール濃度におけるＨＲＰ濃
度と発光強度との相関を示すグラフ。
度と発光強度との相関を示すグラフ。
【図２】各Ｈ2Ｏ2濃度におけるＨＲＰ濃度と発光強度と
の相関を示すグラフ。
の相関を示すグラフ。
【図３】各ルミノール濃度におけるＨＲＰ濃度と発光強
度との相関を示すグラフ。
度との相関を示すグラフ。
Claims (5)
- 【請求項１】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノ
ールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反
応時における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する
ＨＲＰの測定方法において、 前記発光測定試薬中のＰ−ヨードフェノール濃度を３
６.４〜３６４(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰ
の測定方法。 - 【請求項２】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノ
ールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反
応時における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する
ＨＲＰの測定方法において、 前記発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜４１.２(m
mol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方法。 - 【請求項３】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノ
ールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反
応時における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する
ＨＲＰの測定方法において、 前記発光測定試薬は緩衝液としてトリス緩衝液を用いる
と共に、この発光測定試薬中のＨ2Ｏ2濃度を２.０６〜
４１.２(mmol/l)とし、かつ前記発光測定試薬中のＰ−
ヨードフェノール濃度を３６.４〜３６４(μmol/l)とし
たことを特徴とするＨＲＰの測定方法。 - 【請求項４】 ルミノール、Ｈ2Ｏ2、Ｐ−ヨードフェノ
ールを含む発光測定試薬とＨＲＰとを反応させ、この反
応時における発光量に基づいてＨＲＰの濃度を決定する
ＨＲＰの測定方法において、 前記発光測定試薬中のルミノール濃度を２.０６〜１０.
３(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方
法。 - 【請求項５】 請求項３記載のＨＲＰの測定方法におい
て、 前記発光測定試薬中のルミノール濃度を２.０６〜１０.
３(μmol/l)としたことを特徴とするＨＲＰの測定方
法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11082093A JPH06169797A (ja) | 1992-10-09 | 1993-05-13 | Ｈｒｐの測定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-271249 | 1992-10-09 | ||
| JP27124992 | 1992-10-09 | ||
| JP11082093A JPH06169797A (ja) | 1992-10-09 | 1993-05-13 | Ｈｒｐの測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06169797A true JPH06169797A (ja) | 1994-06-21 |
Family
ID=26450351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11082093A Pending JPH06169797A (ja) | 1992-10-09 | 1993-05-13 | Ｈｒｐの測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06169797A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103604918A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-02-26 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种发光底物及应用和含该发光底物的检测试剂盒 |
| CN106990100A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-07-28 | 武汉海吉力生物科技有限公司 | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 |
-
1993
- 1993-05-13 JP JP11082093A patent/JPH06169797A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103604918A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-02-26 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种发光底物及应用和含该发光底物的检测试剂盒 |
| CN106990100A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-07-28 | 武汉海吉力生物科技有限公司 | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 |
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