JPH06237665A - ビブリオ感染症の治療剤と、これを用いた治療及び予防法 - Google Patents
ビブリオ感染症の治療剤と、これを用いた治療及び予防法Info
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- JPH06237665A JPH06237665A JP5050213A JP5021393A JPH06237665A JP H06237665 A JPH06237665 A JP H06237665A JP 5050213 A JP5050213 A JP 5050213A JP 5021393 A JP5021393 A JP 5021393A JP H06237665 A JPH06237665 A JP H06237665A
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- Fodder In General (AREA)
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Abstract
(57)【要約】
【目的】耐性菌を出現させることなく、安全で、しかも
取扱容易なデロビブリオを用いたビブリオ感染症の治療
剤とビブリオ感染症の治療・予防法を提供する。 【構成】本発明は、デロビブリオ属に属する微生物、特
にデロビブリオ・ストルピー サブスピーシーズ BD-4
を用いる。この治療剤は、養殖池の水中に散布、あるい
は餌中に混入して養殖池中の魚介類に投与される。自然
界に存在する微生物を利用するため、耐性菌を生じさせ
たり、安全性を損なったりすることなくビブリオ感染症
が治療される。また、取扱も極めて容易で、コストも低
廉化できる。
取扱容易なデロビブリオを用いたビブリオ感染症の治療
剤とビブリオ感染症の治療・予防法を提供する。 【構成】本発明は、デロビブリオ属に属する微生物、特
にデロビブリオ・ストルピー サブスピーシーズ BD-4
を用いる。この治療剤は、養殖池の水中に散布、あるい
は餌中に混入して養殖池中の魚介類に投与される。自然
界に存在する微生物を利用するため、耐性菌を生じさせ
たり、安全性を損なったりすることなくビブリオ感染症
が治療される。また、取扱も極めて容易で、コストも低
廉化できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、デロビブリオを用い
た、主として養殖池中の魚介類に対して有効な、感染症
の治療剤と、その治療及び予防法に関するものである。
た、主として養殖池中の魚介類に対して有効な、感染症
の治療剤と、その治療及び予防法に関するものである。
【０００２】
【従来技術とその問題点】養殖池のように、養殖生物が
高密度に生息し、しかも水交換が少ないといった、本来
の自然生態系のバランスが崩された特殊な人為的環境下
では、養殖生物の排泄物や余剰餌によって水が富栄養化
の傾向にある。このような所では、その環境に適応した
微生物群が異常に発生し、ビブリオを含む腸内細菌もそ
の例に漏れない。
高密度に生息し、しかも水交換が少ないといった、本来
の自然生態系のバランスが崩された特殊な人為的環境下
では、養殖生物の排泄物や余剰餌によって水が富栄養化
の傾向にある。このような所では、その環境に適応した
微生物群が異常に発生し、ビブリオを含む腸内細菌もそ
の例に漏れない。
【０００３】病原菌に感染した養殖生物を治療し、ある
いは養殖生物が病原菌に感染するのを予防する手段とし
ては、従来、養殖生物の餌に、例えばオキシテトラサイ
クリンなどの抗生物質を混入することが行われている。
また、養殖生物の種類、例えば鮎に対しては、病原菌の
種類によっては、ワクチンを用いることも行われてい
る。
いは養殖生物が病原菌に感染するのを予防する手段とし
ては、従来、養殖生物の餌に、例えばオキシテトラサイ
クリンなどの抗生物質を混入することが行われている。
また、養殖生物の種類、例えば鮎に対しては、病原菌の
種類によっては、ワクチンを用いることも行われてい
る。
【０００４】しかしながら、こうした手段による場合、
抗生物質にあっては耐性菌の出現を促したり、安全性に
欠ける点で問題があり、またワクチンにあってはその取
扱が難しいといった問題がある。
抗生物質にあっては耐性菌の出現を促したり、安全性に
欠ける点で問題があり、またワクチンにあってはその取
扱が難しいといった問題がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする問題点】本発明の解決しよう
とする問題点は、耐性菌を出現させることなく、安全
で、しかも取扱も容易なデロビブリオを用いた感染症治
療剤と、感染症の治療及び予防法、特に、ビブリオ感染
症の治療剤とビブリオ感染症の治療及び予防法を提供す
ることにある。
とする問題点は、耐性菌を出現させることなく、安全
で、しかも取扱も容易なデロビブリオを用いた感染症治
療剤と、感染症の治療及び予防法、特に、ビブリオ感染
症の治療剤とビブリオ感染症の治療及び予防法を提供す
ることにある。
【０００６】
【問題点を解決するための手段】本発明は、上記した問
題点を解決するために、グラム陰性の病原性細菌、特に
ビブリオに寄生性を示すデロビブリオに着目し、これに
よって、グラム陰性細菌感染症、特にビブリオ感染症の
治療剤を構成するようにした。
題点を解決するために、グラム陰性の病原性細菌、特に
ビブリオに寄生性を示すデロビブリオに着目し、これに
よって、グラム陰性細菌感染症、特にビブリオ感染症の
治療剤を構成するようにした。
【０００７】本発明にかかる微生物としては、デロビブ
リオ属に属する微生物であればいずれでもよいが、特に
デロビブリオ・ストルピー サブスピーシーズ BD-4（B
de-llovibrio stolpii subsp.BD-4）が好ましい。
リオ属に属する微生物であればいずれでもよいが、特に
デロビブリオ・ストルピー サブスピーシーズ BD-4（B
de-llovibrio stolpii subsp.BD-4）が好ましい。
【０００８】この微生物 BD-1 の菌学的性質は次の通り
である。 １．形態 細胞はコンマ形で、直径0.4μm、長さ1.0μmの細菌で運
動性を有する。胞子は形成せず、グラム染色性及び抗酸
性はともに陰性である。 ２．生育状態 BD-4 テ゛ロヒ゛フ゛リオ ストルヒ゜ー ATCC27111 宿主菌を懸濁した寒天培地 ＋ ＋ での透明なプラーク様円形 溶菌斑の形成 宿主菌のスフェロプラスト ＋ ＋ 様球形細胞への転換能 宿主菌破砕液での生育 ＋ ＋ 大腸菌溶菌能 ＋ ＋ ３．生理学的性質 BD-4 テ゛ロヒ゛フ゛リオ ストルヒ゜ー ATCC27111 硝酸塩の還元 − ＋ カタラーゼ − ＋ 酸素に対する態度 好気性 好気性
である。 １．形態 細胞はコンマ形で、直径0.4μm、長さ1.0μmの細菌で運
動性を有する。胞子は形成せず、グラム染色性及び抗酸
性はともに陰性である。 ２．生育状態 BD-4 テ゛ロヒ゛フ゛リオ ストルヒ゜ー ATCC27111 宿主菌を懸濁した寒天培地 ＋ ＋ での透明なプラーク様円形 溶菌斑の形成 宿主菌のスフェロプラスト ＋ ＋ 様球形細胞への転換能 宿主菌破砕液での生育 ＋ ＋ 大腸菌溶菌能 ＋ ＋ ３．生理学的性質 BD-4 テ゛ロヒ゛フ゛リオ ストルヒ゜ー ATCC27111 硝酸塩の還元 − ＋ カタラーゼ − ＋ 酸素に対する態度 好気性 好気性
【０００９】BD-4は菌学的諸性質に於いてATCC27111 と
ほぼ同じ性質を示すが、硝酸塩の還元及びカタラーゼ反
応で陰性を示す点で、ATCC27111 とは異なる。従って、
本菌をデロビブリオ ストルピー（Bdellovibrio stolp
ii）の亜種と判断し、デロビブリオ ストルピー サブ
スピシーズ BD-4（Bdellovibriostolpii subsp. BD-
4）と命名した。この微生物は工業技術院微生物工業技
術研究所に微工研菌寄第１３４１７号として寄託した。
ほぼ同じ性質を示すが、硝酸塩の還元及びカタラーゼ反
応で陰性を示す点で、ATCC27111 とは異なる。従って、
本菌をデロビブリオ ストルピー（Bdellovibrio stolp
ii）の亜種と判断し、デロビブリオ ストルピー サブ
スピシーズ BD-4（Bdellovibriostolpii subsp. BD-
4）と命名した。この微生物は工業技術院微生物工業技
術研究所に微工研菌寄第１３４１７号として寄託した。
【００１０】本発明に係る治療剤を用いて、主として魚
介類の細菌感染症、特にビブリオ感染症の治療及び予防
をするには、デロビブリオ属細菌を生菌の状態で使用す
る。微生物の使用形態としては、培養液、生菌懸濁液、
生菌固形物、凍結物、凍結乾燥物などが挙げられる。
介類の細菌感染症、特にビブリオ感染症の治療及び予防
をするには、デロビブリオ属細菌を生菌の状態で使用す
る。微生物の使用形態としては、培養液、生菌懸濁液、
生菌固形物、凍結物、凍結乾燥物などが挙げられる。
【００１１】細菌感染症の治療及び予防法を行うには、
本資材を養殖池に投与し、もしくは餌中に混入する方法
などが挙げられるが、本資材の微生物が生菌の状態で海
水中に分散できればいずれの方法でもよい。
本資材を養殖池に投与し、もしくは餌中に混入する方法
などが挙げられるが、本資材の微生物が生菌の状態で海
水中に分散できればいずれの方法でもよい。
【００１２】デロビブリオは、グラム陰性の小型桿菌
で、グラム陰性細菌に対する寄生細菌として、水圏及び
土壌中に広く分布している。デロビブリオによるグラム
陰性細菌ヘの感染は、次のようにして行われる。海水中
に遊泳するデロビブリオは、宿主となるグラム陰性細菌
と衝突すると、その細胞内に侵入する。宿主細菌は感染
と同時に死に至ると言われている。侵入したデロビブリ
オは、宿主細菌の細胞内で成長する。充分成長したデロ
ビブリオは、宿主細菌の細胞を破壊して水中に放出され
る。その数は宿主細菌一細胞当たり、２００細胞位であ
る。放出されたデロビブリオは、新たに他の宿主細菌に
感染することにより、加速度的に水中の宿主細菌を死滅
させて行く。
で、グラム陰性細菌に対する寄生細菌として、水圏及び
土壌中に広く分布している。デロビブリオによるグラム
陰性細菌ヘの感染は、次のようにして行われる。海水中
に遊泳するデロビブリオは、宿主となるグラム陰性細菌
と衝突すると、その細胞内に侵入する。宿主細菌は感染
と同時に死に至ると言われている。侵入したデロビブリ
オは、宿主細菌の細胞内で成長する。充分成長したデロ
ビブリオは、宿主細菌の細胞を破壊して水中に放出され
る。その数は宿主細菌一細胞当たり、２００細胞位であ
る。放出されたデロビブリオは、新たに他の宿主細菌に
感染することにより、加速度的に水中の宿主細菌を死滅
させて行く。
【００１３】デロビブリオの宿主域は比較的狭い。即
ち、ある種のデロビブリオは、グラム陰性細菌の一種の
シュウドモナス属細菌には寄生性を示すが、同じグラム
陰性細菌のエンテロバクテリア科の細菌には寄生できな
いことが知られている。また、別種のデロビブリオは、
エンテロバクテリア科の細菌及びビブリオ科細菌には寄
生できるが、シュウドモナス属細菌には寄生できないこ
とが知られている。また、これまで分離されたデロビブ
リオは、すべて、グラム陽性細菌には寄生性を示さな
い。
ち、ある種のデロビブリオは、グラム陰性細菌の一種の
シュウドモナス属細菌には寄生性を示すが、同じグラム
陰性細菌のエンテロバクテリア科の細菌には寄生できな
いことが知られている。また、別種のデロビブリオは、
エンテロバクテリア科の細菌及びビブリオ科細菌には寄
生できるが、シュウドモナス属細菌には寄生できないこ
とが知られている。また、これまで分離されたデロビブ
リオは、すべて、グラム陽性細菌には寄生性を示さな
い。
【００１４】バクテリオファージの例を見ても解るよう
に、原核生物に寄生性を示す生物が真核生物に寄生性を
示すことはまず考えられないので、この資材の安全性は
極めて高い。本治療剤の投入量及び餌中への混入量は別
段制限されるものではないが、例えば養殖生物が車海老
でその餌がモイストペレットの場合には、０．１％であ
る。
に、原核生物に寄生性を示す生物が真核生物に寄生性を
示すことはまず考えられないので、この資材の安全性は
極めて高い。本治療剤の投入量及び餌中への混入量は別
段制限されるものではないが、例えば養殖生物が車海老
でその餌がモイストペレットの場合には、０．１％であ
る。
【００１５】
【実施例】次の方法により飼育した車海老を対象に後述
する実験を行った。 車海老の飼育方法 クルマエビの入手 築地の魚市場より入手した。 飼育槽 ポリカーボネイト製パンライト（３０Ｌ）の底に十分に
洗浄した砂を敷き、 循環式フィルターを埋設した。 飼育海水の調製 ｐＨが７．５〜８．０、塩分濃度を３５％。の海水を、
飼育海水として使用した。 被験クルマエビの選択 オガクズ中に入れられて送付されてきたエビを の海水
で十分洗浄した後、 活発に動き回るエビを１０匹単
位で３０Ｌパンライトに入れ、１夜放置した。翌日砂中
に潜っていないエビを除去し、砂中にいたエビだけを集
めて３０Ｌパンライト当り１０匹ずつ入れ、２５℃〜２
８゜Ｃで飼育し、被験エビとした。 飼料及び投餌 原則として、スーパーマーケットで購入した活きあさり
の片側の殻を除去し、夕方投餌した。日曜、祭日は凍結
保存したあさりを同様に片側の殻を除去し投餌した。投
餌した貝は翌朝除去した。 飼育海水の交換 ２日〜３日に１回の割合で交換した。
する実験を行った。 車海老の飼育方法 クルマエビの入手 築地の魚市場より入手した。 飼育槽 ポリカーボネイト製パンライト（３０Ｌ）の底に十分に
洗浄した砂を敷き、 循環式フィルターを埋設した。 飼育海水の調製 ｐＨが７．５〜８．０、塩分濃度を３５％。の海水を、
飼育海水として使用した。 被験クルマエビの選択 オガクズ中に入れられて送付されてきたエビを の海水
で十分洗浄した後、 活発に動き回るエビを１０匹単
位で３０Ｌパンライトに入れ、１夜放置した。翌日砂中
に潜っていないエビを除去し、砂中にいたエビだけを集
めて３０Ｌパンライト当り１０匹ずつ入れ、２５℃〜２
８゜Ｃで飼育し、被験エビとした。 飼料及び投餌 原則として、スーパーマーケットで購入した活きあさり
の片側の殻を除去し、夕方投餌した。日曜、祭日は凍結
保存したあさりを同様に片側の殻を除去し投餌した。投
餌した貝は翌朝除去した。 飼育海水の交換 ２日〜３日に１回の割合で交換した。
【００１６】上記飼育条件での５日間の経過状況は、表
１に示す通りである。この期間中、クルマエビは日中は
砂中に潜っており、餌もよく食べ、脱皮も行った。従っ
て、これを本発明の実験対象生物である車海老の基本飼
育システムとして使用できるものと判断した。
１に示す通りである。この期間中、クルマエビは日中は
砂中に潜っており、餌もよく食べ、脱皮も行った。従っ
て、これを本発明の実験対象生物である車海老の基本飼
育システムとして使用できるものと判断した。
【００１７】
【表１】 クルマエビの飼育 経過 パンラ 供試エビ数 水温（℃） 摂餌量（ｇ） 備 考 日数 イトNo １ １０ ２５ １２．１ 海水交換 （25%、pH7.8） １日 ２ １０ ２５ １１．４ 〃 ３ １０ ２５ １３．５ 〃 １ １０ ２５ １６．２ 脱皮数 １ ２日 ２ １０ ２５ １６．０ 〃 ２ ３ １０ ２５ １７．６ 〃 ０ １ １０ ２５ １７．０ ３日 ２ １０ ２５ １５．７ ３ １０ ２５ １５．６ １ １０ ２５ １８．６ 脱皮数１海水交換 （25%、pH8.0） ４日 ２ １０ ２５ １９．２ 脱皮数 ０ ３ １０ ２５ １７．６ 〃 １ １ １０ ２５ １３．５ ５日 ２ １０ ２５ １４．０ ３ １０ ２５ １３．５
【００１８】水槽レベルでのクルマエビのビブリオ感染
系の確立 ビブリオをエビ肉エキス培地（滅菌海水で、その１０％
量のクルマエビ筋肉をホモジナイズし、その濾液に１．
５％量の寒天を加えた物）で２５℃、２４時間培養後、
滅菌海水に懸濁したのち、クルマエビ（平均体重１４．
５ｇ）の第４腹節筋肉内に、体重ｇ当りの生菌数が１．
０×１０ 細胞となるように接種した。接種後１０日間
の症状の観察と死の有無を確認したところ、表２に示す
結果が得られた。
系の確立 ビブリオをエビ肉エキス培地（滅菌海水で、その１０％
量のクルマエビ筋肉をホモジナイズし、その濾液に１．
５％量の寒天を加えた物）で２５℃、２４時間培養後、
滅菌海水に懸濁したのち、クルマエビ（平均体重１４．
５ｇ）の第４腹節筋肉内に、体重ｇ当りの生菌数が１．
０×１０ 細胞となるように接種した。接種後１０日間
の症状の観察と死の有無を確認したところ、表２に示す
結果が得られた。
【００１９】
【表２】 ビブリオ接種菌量 被験個体数 へい死個体数 死滅率（％） １．０ｘ１０ １０ １０ １００ ｎｏｎｅ １０ ０ ０
【００１３】上記表２において、ｎｏｎｅとして表示し
た欄は対照区で、滅菌海水をビブリオの代わりに接種し
たものである。接種群は、接種後２４時間（１日後）以
内に９匹の個体が斃死し、１０日後に最後の１匹が斃死
した。斃死個体は、第６腹節の筋肉に顕著な白濁が認め
られたものと腹節全体の筋肉が白濁しているものとが認
められた。また、ビブリオを接種後斃死したエビの第６
腹節の筋肉からは、接種菌と菌学的性状において同一の
細菌が例外なく分離された。
た欄は対照区で、滅菌海水をビブリオの代わりに接種し
たものである。接種群は、接種後２４時間（１日後）以
内に９匹の個体が斃死し、１０日後に最後の１匹が斃死
した。斃死個体は、第６腹節の筋肉に顕著な白濁が認め
られたものと腹節全体の筋肉が白濁しているものとが認
められた。また、ビブリオを接種後斃死したエビの第６
腹節の筋肉からは、接種菌と菌学的性状において同一の
細菌が例外なく分離された。
【００２０】ビブリオ寄生細菌デロビブリオの分離 １．実験の材料及び方法 分離源：神奈川県横浜市の山下埠頭、東京水産大学ポン
ド及び坂田臨海実験実習場、クルマエビ養殖場等より採
取した海水を使用した。 分離：エビ肉エキス培地で２５℃、２４時間培養したビ
ブリオを滅菌海水に懸濁し、採取海水と１：１の割合に
混合した後、０．８％滅菌海水寒天と等量混合した物を
２５℃で１〜２週間培養することにより行った。 指示菌：ビブリオ感染症により斃死したクルマエビより
分離したビブリオＶ−４を使用した。 デロビブリオ分離の指標の培地に生じる溶菌班のうち、
培養２日後位から生じ、且つ、培養日数とともに増大す
る溶菌班を第１次の指標とした。 溶菌班形成菌の純粋分離 溶菌班の中心部をエーゼで寒天毎かきとり、滅菌海水に
浮遊させた後、滅菌ピペットで寒天を細かく砕き、溶菌
班形成菌を滅菌海水中に浮遊させる。懸濁液を滅菌海水
で適当に希釈した後、エビ肉エキス培地で培養したビブ
リオと混合し、寒天で固め、培養する。生じた溶菌班を
数回処理し、純粋分離を試みた。
ド及び坂田臨海実験実習場、クルマエビ養殖場等より採
取した海水を使用した。 分離：エビ肉エキス培地で２５℃、２４時間培養したビ
ブリオを滅菌海水に懸濁し、採取海水と１：１の割合に
混合した後、０．８％滅菌海水寒天と等量混合した物を
２５℃で１〜２週間培養することにより行った。 指示菌：ビブリオ感染症により斃死したクルマエビより
分離したビブリオＶ−４を使用した。 デロビブリオ分離の指標の培地に生じる溶菌班のうち、
培養２日後位から生じ、且つ、培養日数とともに増大す
る溶菌班を第１次の指標とした。 溶菌班形成菌の純粋分離 溶菌班の中心部をエーゼで寒天毎かきとり、滅菌海水に
浮遊させた後、滅菌ピペットで寒天を細かく砕き、溶菌
班形成菌を滅菌海水中に浮遊させる。懸濁液を滅菌海水
で適当に希釈した後、エビ肉エキス培地で培養したビブ
リオと混合し、寒天で固め、培養する。生じた溶菌班を
数回処理し、純粋分離を試みた。
【００２１】上記実験の材料及び方法による結果を表３
に示す。
に示す。
【表３】 ビブリオ寄生細菌デロビブリオの分離 培養日数 １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ １０ １４ フ゜ラーク数 ０ ０ ０ ０ （１０）（１０） ２１ ４３ ４３
【００１６】プラークは５日目から出現したが非常に微
小であった。プラークとして確認できたのは７日目以降
であった。デロビブリオの分離法が確立できたので、ク
ルマエビの養殖池他から海水を採取し、デロビブリオの
分離を試みた。デロビブリオは海水中での大腸菌等の消
長に関係していることが示唆されている。即ち、ビブリ
オ感染症が発生しているクルマエビの養殖池と発生して
いない養殖池、その他の海水では、クルマエビに病原性
を示すビブリオに寄生するデロビブリオの検出頻度が異
なることが期待できる。そこで、各地養殖池等より採取
した海水中のデロビブリオ生菌数の測定を行った。この
測定結果を表４に示す。
小であった。プラークとして確認できたのは７日目以降
であった。デロビブリオの分離法が確立できたので、ク
ルマエビの養殖池他から海水を採取し、デロビブリオの
分離を試みた。デロビブリオは海水中での大腸菌等の消
長に関係していることが示唆されている。即ち、ビブリ
オ感染症が発生しているクルマエビの養殖池と発生して
いない養殖池、その他の海水では、クルマエビに病原性
を示すビブリオに寄生するデロビブリオの検出頻度が異
なることが期待できる。そこで、各地養殖池等より採取
した海水中のデロビブリオ生菌数の測定を行った。この
測定結果を表４に示す。
【００２２】
【表４】 デロビブリオの地域局在性 採取地 指示菌 プラーク数 備 考 東水大ポンド Ｂｄ−４ − 東京湾 横浜市山下埠頭 〃 ＋ 〃 千葉県館山市 〃 − 東京水産大学坂田臨海 実験実習場 クルマエビ養殖場Ａ 〃 ＋ 毎年ビブリオ症発生 〃 Ｂ 〃 ＋ 〃 〃 Ｃ 〃 ＋ 〃 〃 Ｄ 〃 ＋＋ ビブリオ症発生少ない 表４から明らかなように、ビブリオ症発生とデロビブリ
オ生菌数との間には密接な関係があることが示唆され
た。
オ生菌数との間には密接な関係があることが示唆され
た。
【００２３】デロビブリオによるクルマエビビブリオ感
染症治療法の検討 １．海水中に於けるデロビブリオのビブリオへの感染能
の検討 Ｂｄ−４を滅菌海水に１０ cells/mlになるように懸濁
し、そこにデロビブリオを最終菌数１０ cells/ml添加
し、懸濁液中のＢｄ−４生菌数の経時変化を調べた。そ
の結果を図１に示す。図１から明らかなように、デロビ
ブリオ添加区では培養一日目で対照区の８０％位に菌数
が減少し、二日目には生菌数は１０％以下に減少した。
三日目以降では、ビブリオ生菌数は検出限界以下（＜１
０cells/ml）になった。このことからデロビブリオはＢ
ｄ−４を攻撃し、殺すことが示唆された。Ｂｄ−４生菌
数が二日目以降に激減するのは、ビブリオに感染したデ
ロビブリオが成熟してビブリオ菌体外に飛出し、再感染
したためと考えられる。
染症治療法の検討 １．海水中に於けるデロビブリオのビブリオへの感染能
の検討 Ｂｄ−４を滅菌海水に１０ cells/mlになるように懸濁
し、そこにデロビブリオを最終菌数１０ cells/ml添加
し、懸濁液中のＢｄ−４生菌数の経時変化を調べた。そ
の結果を図１に示す。図１から明らかなように、デロビ
ブリオ添加区では培養一日目で対照区の８０％位に菌数
が減少し、二日目には生菌数は１０％以下に減少した。
三日目以降では、ビブリオ生菌数は検出限界以下（＜１
０cells/ml）になった。このことからデロビブリオはＢ
ｄ−４を攻撃し、殺すことが示唆された。Ｂｄ−４生菌
数が二日目以降に激減するのは、ビブリオに感染したデ
ロビブリオが成熟してビブリオ菌体外に飛出し、再感染
したためと考えられる。
【００２４】２．ビブリオとデロビブリオ混合菌液のク
ルマエビ腹部筋注による影響 上記１の結果から、分離したデロビブリオが海水中でビ
ブリオを攻撃することが確認されたので、プラーク中の
菌懸濁液とビブリオ懸濁液を混合し、クルマエビの腹部
へ筋肉注射することにより、当該菌液のクルマエビに与
える影響について検討した。その結果を表５に示す。
ルマエビ腹部筋注による影響 上記１の結果から、分離したデロビブリオが海水中でビ
ブリオを攻撃することが確認されたので、プラーク中の
菌懸濁液とビブリオ懸濁液を混合し、クルマエビの腹部
へ筋肉注射することにより、当該菌液のクルマエビに与
える影響について検討した。その結果を表５に示す。
【００２５】
【表５】 ビブリオ及びデロビブリオ混合菌液のクルマ
エビ腹部筋注による影響 日 数 対照区 ビブリオ菌 デロビブリオ ビブリオ ＋ 筋注区 筋注区 デロビブリオ筋注区 ０ ５ ５ ５ ５ １ ５ ０ ５ ３ ２ ５ − ５ ３ ３ ５ − ５ ３ ４ ５ − ５ ３ ５ ５ − ５ ３
エビ腹部筋注による影響 日 数 対照区 ビブリオ菌 デロビブリオ ビブリオ ＋ 筋注区 筋注区 デロビブリオ筋注区 ０ ５ ５ ５ ５ １ ５ ０ ５ ３ ２ ５ − ５ ３ ３ ５ − ５ ３ ４ ５ − ５ ３ ５ ５ − ５ ３
【００２６】尚、上記表５の実験において、クルマエビ
は１１〜１３ｇの大きさのものを使用した。また、表５
において、ビブリオ及びデロビブリオを懸濁するために
使用した滅菌海水を、処理区と等量エビに筋注すること
により対照区とした。ビブリオまたはプラークの、滅菌
海水懸濁液（１０ cells/ml）０．５ｍｌをエビの第４
腹節に筋注することにより、ビブリオ筋注区叉はデロビ
ブリオ筋注区とした。更に、上記のようにして調製した
ビブリオ及びデロビブリオ懸濁液を９：１の割合で混合
し、その０．５ｍｌをエビの第４腹節に筋注することに
より、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区とした。
は１１〜１３ｇの大きさのものを使用した。また、表５
において、ビブリオ及びデロビブリオを懸濁するために
使用した滅菌海水を、処理区と等量エビに筋注すること
により対照区とした。ビブリオまたはプラークの、滅菌
海水懸濁液（１０ cells/ml）０．５ｍｌをエビの第４
腹節に筋注することにより、ビブリオ筋注区叉はデロビ
ブリオ筋注区とした。更に、上記のようにして調製した
ビブリオ及びデロビブリオ懸濁液を９：１の割合で混合
し、その０．５ｍｌをエビの第４腹節に筋注することに
より、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区とした。
【００２７】筋注したエビはパンライト中の海水に入れ
たとき、各区とも体を横にするものが２〜３尾いたが、
１分以内に起き上がり、砂中に潜り始めた。翌日ビブリ
オ筋注区は全個体が底砂上でへい死していたが、ビブリ
オ＋デロビブリオ筋注区では３尾が砂中で生存してい
た。対照区及びデロビブリオ筋注区は全個体が砂中で生
存していた。餌は冷凍アサリを片側の殻を取って海老１
個体当り１個ずつ与えたが、処理翌日は対照区、デロビ
ブリオ筋注区、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区とも少し
の食べ残しが観察された。ビブリオ処理区は全部の貝が
少しずつ食べられただけで、ほとんど食べ残された状態
であった。処理２日目以降は対照区、デロビブリオ筋注
区、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区ともほとんど食べ残
しが観察されなかった。以上の結果から、プラーク中の
菌はテストした条件内では、クルマエビに対し、毒性を
示すことなく、ビブリオ感染症を抑制することが分かっ
た。
たとき、各区とも体を横にするものが２〜３尾いたが、
１分以内に起き上がり、砂中に潜り始めた。翌日ビブリ
オ筋注区は全個体が底砂上でへい死していたが、ビブリ
オ＋デロビブリオ筋注区では３尾が砂中で生存してい
た。対照区及びデロビブリオ筋注区は全個体が砂中で生
存していた。餌は冷凍アサリを片側の殻を取って海老１
個体当り１個ずつ与えたが、処理翌日は対照区、デロビ
ブリオ筋注区、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区とも少し
の食べ残しが観察された。ビブリオ処理区は全部の貝が
少しずつ食べられただけで、ほとんど食べ残された状態
であった。処理２日目以降は対照区、デロビブリオ筋注
区、ビブリオ＋デロビブリオ筋注区ともほとんど食べ残
しが観察されなかった。以上の結果から、プラーク中の
菌はテストした条件内では、クルマエビに対し、毒性を
示すことなく、ビブリオ感染症を抑制することが分かっ
た。
【００２８】以上述べたように本発明によれば、ビブリ
オの寄生細菌であるデロビブリオを用いてビブリオ感染
症の治療剤としたので、自然界に存在する微生物を利用
することにより、耐性菌を生じさせたり、安全性を損な
ったりすることなくビブリオ感染症を治療できる。ま
た、本発明によれば、上記したように寄生細菌を用いる
ので、その取扱も極めて容易で、コストの点でも従来の
この種、物質に比べて低廉化できる利点を有するもので
ある。
オの寄生細菌であるデロビブリオを用いてビブリオ感染
症の治療剤としたので、自然界に存在する微生物を利用
することにより、耐性菌を生じさせたり、安全性を損な
ったりすることなくビブリオ感染症を治療できる。ま
た、本発明によれば、上記したように寄生細菌を用いる
ので、その取扱も極めて容易で、コストの点でも従来の
この種、物質に比べて低廉化できる利点を有するもので
ある。
【図１】本発明の一実施例に係る方法を車海老に対して
使用した実験結果を示す図。
使用した実験結果を示す図。
Claims (6)
- 【請求項１】デロビブリオ属に属する微生物から成る、
ビブリオ感染症の治療剤。 - 【請求項２】魚介類の養殖池の水中に、デロビブリオ属
の微生物から成るビブリオ感染症治療剤を散布すること
を特徴とする、ビブリオ感染症の治療及び予防法。 - 【請求項３】デロビブリオ属の微生物から成るビブリオ
感染症治療剤を餌中に混入し、養殖池中の魚介類にこれ
を投与することを特徴とする、ビブリオ感染症の治療及
び予防法。 - 【請求項４】微生物がデロビブリオ・ストルピーであ
る、請求項１に記載のビブリオ感染症の治療剤 - 【請求項５】微生物がデロビブリオ・ストルピー サブ
スピーシーズ BD-4（微工研寄第１３４１７号）であ
る、請求項１に記載の治療剤 - 【請求項６】微生物がデロビブリオ・ストルピー サブ
スピーシーズ BD-4である請求項２もしくは請求項３に
記載のビブリオ感染症の治療及び予防法
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5050213A JP2583473B2 (ja) | 1993-02-15 | 1993-02-15 | ビブリオ感染症の治療剤と、これを用いた治療及び予防法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5050213A JP2583473B2 (ja) | 1993-02-15 | 1993-02-15 | ビブリオ感染症の治療剤と、これを用いた治療及び予防法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06237665A true JPH06237665A (ja) | 1994-08-30 |
| JP2583473B2 JP2583473B2 (ja) | 1997-02-19 |
Family
ID=12852816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5050213A Expired - Fee Related JP2583473B2 (ja) | 1993-02-15 | 1993-02-15 | ビブリオ感染症の治療剤と、これを用いた治療及び予防法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2583473B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100483911B1 (ko) * | 2001-05-14 | 2005-04-18 | 주식회사 메디오젠 | 양식어류의 면역증강과 항병력강화 및 증체를 위한 사료첨가제 |
| CN111406849A (zh) * | 2019-01-04 | 2020-07-14 | 澄迈盛虾林农业科技有限公司 | 澳洲淡水龙虾的亲虾饲料及其制备方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2025057789A1 (ja) | 2023-09-12 | 2025-03-20 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | バクテロイドータ門の魚類病原性細菌を防除する方法 |
-
1993
- 1993-02-15 JP JP5050213A patent/JP2583473B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100483911B1 (ko) * | 2001-05-14 | 2005-04-18 | 주식회사 메디오젠 | 양식어류의 면역증강과 항병력강화 및 증체를 위한 사료첨가제 |
| CN111406849A (zh) * | 2019-01-04 | 2020-07-14 | 澄迈盛虾林农业科技有限公司 | 澳洲淡水龙虾的亲虾饲料及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2583473B2 (ja) | 1997-02-19 |
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|---|---|---|---|
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