JPH06237787A - カンタキサンチンの製造法 - Google Patents
カンタキサンチンの製造法Info
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- JPH06237787A JPH06237787A JP2883193A JP2883193A JPH06237787A JP H06237787 A JPH06237787 A JP H06237787A JP 2883193 A JP2883193 A JP 2883193A JP 2883193 A JP2883193 A JP 2883193A JP H06237787 A JPH06237787 A JP H06237787A
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- JP
- Japan
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- canthaxanthin
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- producing
- culture
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes
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- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 工業的に安価に効率よくカンタキサンチンを
製造する。 【構成】 ファフィア（Phaffia ) 属に属し、かつカン
タキサンチン生産能を有する微生物を培地に培養し、培
養物中にカンタキサンチンを生成蓄積させ、該培養物よ
りカンタキサンチンを採取することを特徴とするカンタ
キサンチンの製造法。
製造する。 【構成】 ファフィア（Phaffia ) 属に属し、かつカン
タキサンチン生産能を有する微生物を培地に培養し、培
養物中にカンタキサンチンを生成蓄積させ、該培養物よ
りカンタキサンチンを採取することを特徴とするカンタ
キサンチンの製造法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は天然カロチノイドの一種
であるカンタキサンチンの製造法に関する。カンタキサ
ンチンは、天然赤色色素として化粧品、鶏卵および養殖
魚類の色調改善に有用である。
であるカンタキサンチンの製造法に関する。カンタキサ
ンチンは、天然赤色色素として化粧品、鶏卵および養殖
魚類の色調改善に有用である。
【０００２】
【従来の技術】カンタキサンチンは、甲殻類や赤色魚類
にその存在が知られている。しかしその蓄積量は非常に
少なく、存在が確認されているに過ぎない。カンタキサ
ンチンを生産する微生物としては、ミクロコッカス（Mi
crococcus）属に属する微生物〔ジャーナル・オブ・バ
クテリオロジー（Jonrnal of Bacteriology), 96巻, 23
4 ページ, 1968年〕、ブレビバクテリウム (Brevibacte
rium) 属に属する微生物〔ブリテン・オブ・ザ・ケミカ
ル・ソサイエティ・オブ・ジャパン（Bulletin of the
Chemical Society of Japan) 44 巻, 481 ページ, 1971
年〕、ロドコッカス(Rhodococcus) 属に属する微生物
（特開平２−138996）が知られている。しかしながら、
ファフィア（Phaffia ) 属に属し、カンタキサンチン生
産能を有する微生物は知られていない。
にその存在が知られている。しかしその蓄積量は非常に
少なく、存在が確認されているに過ぎない。カンタキサ
ンチンを生産する微生物としては、ミクロコッカス（Mi
crococcus）属に属する微生物〔ジャーナル・オブ・バ
クテリオロジー（Jonrnal of Bacteriology), 96巻, 23
4 ページ, 1968年〕、ブレビバクテリウム (Brevibacte
rium) 属に属する微生物〔ブリテン・オブ・ザ・ケミカ
ル・ソサイエティ・オブ・ジャパン（Bulletin of the
Chemical Society of Japan) 44 巻, 481 ページ, 1971
年〕、ロドコッカス(Rhodococcus) 属に属する微生物
（特開平２−138996）が知られている。しかしながら、
ファフィア（Phaffia ) 属に属し、カンタキサンチン生
産能を有する微生物は知られていない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】天然に存在するカンタ
キサンチンの蓄積量は非常に少なく、甲殻類や赤色魚類
から抽出分離することは効率的でない。本発明の目的
は、工業的に安価でかつ効率の良いカンタキサンチンの
製造法を提供することにある。
キサンチンの蓄積量は非常に少なく、甲殻類や赤色魚類
から抽出分離することは効率的でない。本発明の目的
は、工業的に安価でかつ効率の良いカンタキサンチンの
製造法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明によれば、ファフ
ィア属に属し、カンタキサンチン生産能を有する微生物
を培地に培養し、培養物中にカンタキサンチンを生成蓄
積させ、該培養物よりカンタキサンチンを採取すること
を特徴とするカンタキサンチンの製造法を提供すること
ができる。
ィア属に属し、カンタキサンチン生産能を有する微生物
を培地に培養し、培養物中にカンタキサンチンを生成蓄
積させ、該培養物よりカンタキサンチンを採取すること
を特徴とするカンタキサンチンの製造法を提供すること
ができる。
【０００５】以下に本発明を詳細に説明する。本発明に
使用する微生物としては、ファフィア属に属し、カンタ
キサンチン生産能を有する微生物であれば野生株でも、
通常の変異処理により変異させた変異株でもいずれも用
いることができる。野生株としては、ファフィア・ロド
チーマ（Phaffia rhodozyma )ATCC24202（以下、ATCC
24202 株という。) をあげることができる。
使用する微生物としては、ファフィア属に属し、カンタ
キサンチン生産能を有する微生物であれば野生株でも、
通常の変異処理により変異させた変異株でもいずれも用
いることができる。野生株としては、ファフィア・ロド
チーマ（Phaffia rhodozyma )ATCC24202（以下、ATCC
24202 株という。) をあげることができる。
【０００６】変異株としては、ファフィア属に属し、シ
トロネロールまたはプリマキンに耐性を有し、かつカン
タキサンチン生産能を有する微生物があげられる。本明
細書において「薬剤に耐性を有する」とは、親株が生育
阻害を受ける濃度の薬剤（本明細書では、シトロネロー
ルやプリマキンのことをいう）存在下でも生育しうるこ
とをいう。
トロネロールまたはプリマキンに耐性を有し、かつカン
タキサンチン生産能を有する微生物があげられる。本明
細書において「薬剤に耐性を有する」とは、親株が生育
阻害を受ける濃度の薬剤（本明細書では、シトロネロー
ルやプリマキンのことをいう）存在下でも生育しうるこ
とをいう。
【０００７】このような変異株は、ファフィア属に属す
るカンタキサンチン生産菌（たとえば、ATCC24202 株)
に通常の変異手段（例えば、紫外線照射、メタンスルホ
ン酸エチルやＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソ
グアニジン等の変異誘導起剤処理等）を施し、シトロネ
ロールまたはプリマキン耐性を付与することにより得る
ことができる。
るカンタキサンチン生産菌（たとえば、ATCC24202 株)
に通常の変異手段（例えば、紫外線照射、メタンスルホ
ン酸エチルやＮ−メチル−Ｎ’−ニトロ−Ｎ−ニトロソ
グアニジン等の変異誘導起剤処理等）を施し、シトロネ
ロールまたはプリマキン耐性を付与することにより得る
ことができる。
【０００８】具体的には、ファフィア・ロドチーマＨ−
８２６４（以下、H-8264株という。）、ファフィア・ロ
ドチーマＨ−８４３４（以下、H-8434株という。）をあ
げることができる。本明細書において、Ｈ−８２６４株
は親株の生育できないシトロネロール220μｇ／mlに、
Ｈ−８４３４株は、プリマキン3.９ｇ／l に生育でき
る。
８２６４（以下、H-8264株という。）、ファフィア・ロ
ドチーマＨ−８４３４（以下、H-8434株という。）をあ
げることができる。本明細書において、Ｈ−８２６４株
は親株の生育できないシトロネロール220μｇ／mlに、
Ｈ−８４３４株は、プリマキン3.９ｇ／l に生育でき
る。
【０００９】以下に前記変異株の具体的取得方法につい
て示す。ATCC24202 株をメタンスルホン酸エチル0.０２
ml／mlで２２℃、６０分間処理した後、親株であるATCC
24202 株が生育阻害を示す濃度（220 μｇ／ml) のシト
ロネロールを含む最少寒天平板培地（グルコース20ｇ／
ｌ、ディフコ社製 Yeast Nitrogen Base ７ｇ／ｌ、寒
天２０ｇ／ｌ）上に塗布した。２２℃で、７〜１０日間
培養後、生育してくる変異株のうち、２５０ml容三角フ
ラスコでの液体培養試験で親株よりカンタキサンチンの
生産能が優れている菌株を選んだ。そのうちとくに優れ
ている株としてＨ−８２６４株を得た。
て示す。ATCC24202 株をメタンスルホン酸エチル0.０２
ml／mlで２２℃、６０分間処理した後、親株であるATCC
24202 株が生育阻害を示す濃度（220 μｇ／ml) のシト
ロネロールを含む最少寒天平板培地（グルコース20ｇ／
ｌ、ディフコ社製 Yeast Nitrogen Base ７ｇ／ｌ、寒
天２０ｇ／ｌ）上に塗布した。２２℃で、７〜１０日間
培養後、生育してくる変異株のうち、２５０ml容三角フ
ラスコでの液体培養試験で親株よりカンタキサンチンの
生産能が優れている菌株を選んだ。そのうちとくに優れ
ている株としてＨ−８２６４株を得た。
【００１０】また、シトロネロールの代わりにプリマキ
ン（3.９ｇ／ｌ）を用いる以外は前記の方法と同様にお
こない、とくにカンタキサンチンの生産能の優れた菌株
として、Ｈ−８４３４株を得た。Ｈ−８２６４株は平成
３年５月１８日付で、Ｈ−８４３４株は平成４年３月１
３日付で、ブダペスト条約に基づきそれぞれ工業技術院
生命工学工業技術研究所に微工研条寄第3404号（FERM B
P-3404) 、微工研条寄第3800号（FERM BP-3800)として
寄託されている。
ン（3.９ｇ／ｌ）を用いる以外は前記の方法と同様にお
こない、とくにカンタキサンチンの生産能の優れた菌株
として、Ｈ−８４３４株を得た。Ｈ−８２６４株は平成
３年５月１８日付で、Ｈ−８４３４株は平成４年３月１
３日付で、ブダペスト条約に基づきそれぞれ工業技術院
生命工学工業技術研究所に微工研条寄第3404号（FERM B
P-3404) 、微工研条寄第3800号（FERM BP-3800)として
寄託されている。
【００１１】尚、Ｈ−８２６４株およびＨ−８４３４株
は、本出願人により平成４年６月４日付で出願された国
際出願JP92/00722にアスタキサンチン生産菌として記載
されている。これら変異株の耐性の確認は次のようにし
ておこなった。変異株（H-8264株およびH-8434株) と親
株(ATCC24202株) を第１表および第２表に示す濃度の添
加物の含む前記最少寒天平板培地に塗布し、２２℃で培
養したときの生育度を調べた。その結果を第１表および
第２表に示す。
は、本出願人により平成４年６月４日付で出願された国
際出願JP92/00722にアスタキサンチン生産菌として記載
されている。これら変異株の耐性の確認は次のようにし
ておこなった。変異株（H-8264株およびH-8434株) と親
株(ATCC24202株) を第１表および第２表に示す濃度の添
加物の含む前記最少寒天平板培地に塗布し、２２℃で培
養したときの生育度を調べた。その結果を第１表および
第２表に示す。
【００１２】
【表１】
【００１３】
【表２】
【００１４】本発明で用いられる微生物の培養は、通常
の微生物を培養する方法にしたがい炭素源、窒素源、無
機塩、生育因子等を含む培地で好気的におこなえばよ
い。炭素源としては、グルコース、フラクトース、シュ
クロース、糖蜜等があげられる。また、窒素源として
は、アンモニア、硫酸アンモニウム、ペプトン、酵母エ
キス、コーンスティープリカー等があげられる。さら
に、無機塩としては、リン酸一カリウム、リン酸二カリ
ウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、硫酸第
一鉄、硫酸マンガン、塩化カルシウム等があげられる。
生育因子としては、ビタミン、アミノ酸、核酸関連物質
等があげられる。
の微生物を培養する方法にしたがい炭素源、窒素源、無
機塩、生育因子等を含む培地で好気的におこなえばよ
い。炭素源としては、グルコース、フラクトース、シュ
クロース、糖蜜等があげられる。また、窒素源として
は、アンモニア、硫酸アンモニウム、ペプトン、酵母エ
キス、コーンスティープリカー等があげられる。さら
に、無機塩としては、リン酸一カリウム、リン酸二カリ
ウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、硫酸第
一鉄、硫酸マンガン、塩化カルシウム等があげられる。
生育因子としては、ビタミン、アミノ酸、核酸関連物質
等があげられる。
【００１５】培養は温度１５〜３５℃好ましくは２０〜
２５℃、ｐＨは３〜８、好ましくは４〜６でおこなわ
れ、通常２〜７日間で終了する。培地のｐＨは炭酸カル
シウム、無機または有機の酸、アルカリ溶液、アンモニ
ア、ｐＨ緩衝液（例えばフタル酸水素カリウム）等によ
って調整される。培養終了後、培養液から菌体を分離
し、破砕した後、該破砕菌体からカンタキサンチンを溶
媒抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーで処理して得
る。
２５℃、ｐＨは３〜８、好ましくは４〜６でおこなわ
れ、通常２〜７日間で終了する。培地のｐＨは炭酸カル
シウム、無機または有機の酸、アルカリ溶液、アンモニ
ア、ｐＨ緩衝液（例えばフタル酸水素カリウム）等によ
って調整される。培養終了後、培養液から菌体を分離
し、破砕した後、該破砕菌体からカンタキサンチンを溶
媒抽出し、シリカゲルクロマトグラフィーで処理して得
る。
【００１６】以下に本発明実施例を示す。
【００１７】
実施例１ ATCC24202 株、Ｈ−８２６４株およびＨ−８４３４株を
それぞれ試験管中の下記組成からなる種培地８mlに植菌
した後、２２℃で３日間培養した。 種培地組成：グルコース １０ｇ／ｌ、酵母エキス ３
ｇ／ｌ、ペプトン ５ｇ／ｌ、肉エキス ３ｇ／ｌ、フ
タル酸水素カリウム ２０．４ｇ／ｌ（ｐＨ5.０、ＫＯ
Ｈで調整、１２０℃で２０分間加圧蒸気殺菌） 得られた種培養液３mlをそれぞれ２５０ml容三角フラス
コ中の下記組成からなる生産培地30mlに植菌し、２２℃
で４日間培養した。 生産培地組成：グルコース ３０ｇ／ｌ、硫酸アンモニ
ウム ２ｇ／ｌ、酵母エキス ２ｇ／ｌ、ＫＨ2 ＰＯ4
１ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ 0.５ｇ／ｌ、ＣａＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ 0.１ｇ／ｌ、フタル酸水素カリウム
２0.４ｇ／ｌ（ｐＨ5.０、ＫＯＨで調整、１２０℃で２
０分間加圧蒸気殺菌） その結果、培養液中のカンタキサンチン生成量はそれぞ
れ0.０２mg／l 、0.９mg／l および1.１mg／l であっ
た。
それぞれ試験管中の下記組成からなる種培地８mlに植菌
した後、２２℃で３日間培養した。 種培地組成：グルコース １０ｇ／ｌ、酵母エキス ３
ｇ／ｌ、ペプトン ５ｇ／ｌ、肉エキス ３ｇ／ｌ、フ
タル酸水素カリウム ２０．４ｇ／ｌ（ｐＨ5.０、ＫＯ
Ｈで調整、１２０℃で２０分間加圧蒸気殺菌） 得られた種培養液３mlをそれぞれ２５０ml容三角フラス
コ中の下記組成からなる生産培地30mlに植菌し、２２℃
で４日間培養した。 生産培地組成：グルコース ３０ｇ／ｌ、硫酸アンモニ
ウム ２ｇ／ｌ、酵母エキス ２ｇ／ｌ、ＫＨ2 ＰＯ4
１ｇ／ｌ、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ 0.５ｇ／ｌ、ＣａＣ
ｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ 0.１ｇ／ｌ、フタル酸水素カリウム
２0.４ｇ／ｌ（ｐＨ5.０、ＫＯＨで調整、１２０℃で２
０分間加圧蒸気殺菌） その結果、培養液中のカンタキサンチン生成量はそれぞ
れ0.０２mg／l 、0.９mg／l および1.１mg／l であっ
た。
【００１８】実施例２ Ｈ−８２６４株およびＨ−８４３４株をそれぞれ２リッ
トル容三角フラスコ中の実施例１に示した種培地３００
mlに植菌した後、２２℃で３日間培養した。得られた種
培養液３００mlを５リットル容培養槽中の実施例１に示
した培地からフタル酸水素カリウムを除いた培地３リッ
トルに植菌した後、２２℃で４８時間培養（回転数６０
０rpm, 通気量３ l／min)した。培養中のｐＨは、アン
モニア水で５に調整した。その結果、培養液中のカンタ
キサンチン生成量はそれぞれ1.９mg／l および2.５mg／
l であった。培養終了後、Ｈ−８４３４株の培養液につ
いて菌体を遠心分離にて集め、ガラスビーズセルホモジ
ナイザーで菌体を破砕した。該破砕菌体からカンタキサ
ンチンをクロロホルム、メタノール混合液を用いて抽出
した。抽出液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマト
グラフィー（溶出溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝10：
１）により精製すると4.５mgのカンタキサンチンが得ら
れた。実施例１および２で得られたカンタキサンチン
は、その紫外可視部吸収スペクトルがカンタキサンチン
標準品（フナコシ製）の吸収スペクトルに一致したこと
より確認した。
トル容三角フラスコ中の実施例１に示した種培地３００
mlに植菌した後、２２℃で３日間培養した。得られた種
培養液３００mlを５リットル容培養槽中の実施例１に示
した培地からフタル酸水素カリウムを除いた培地３リッ
トルに植菌した後、２２℃で４８時間培養（回転数６０
０rpm, 通気量３ l／min)した。培養中のｐＨは、アン
モニア水で５に調整した。その結果、培養液中のカンタ
キサンチン生成量はそれぞれ1.９mg／l および2.５mg／
l であった。培養終了後、Ｈ−８４３４株の培養液につ
いて菌体を遠心分離にて集め、ガラスビーズセルホモジ
ナイザーで菌体を破砕した。該破砕菌体からカンタキサ
ンチンをクロロホルム、メタノール混合液を用いて抽出
した。抽出液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマト
グラフィー（溶出溶媒 ヘキサン：酢酸エチル＝10：
１）により精製すると4.５mgのカンタキサンチンが得ら
れた。実施例１および２で得られたカンタキサンチン
は、その紫外可視部吸収スペクトルがカンタキサンチン
標準品（フナコシ製）の吸収スペクトルに一致したこと
より確認した。
【００１９】
【発明の効果】本発明によれば、工業的に安価に効率よ
くカンタキサンチンを製造することができる。
くカンタキサンチンを製造することができる。
Claims (1)
- 【請求項１】 ファフィア（Phaffia ) 属に属し、かつ
カンタキサンチン生産能を有する微生物を培地に培養
し、培養物中にカンタキサンチンを生成蓄積させ、該培
養物よりカンタキサンチンを採取することを特徴とする
カンタキサンチンの製造法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2883193A JPH06237787A (ja) | 1993-02-18 | 1993-02-18 | カンタキサンチンの製造法 |
| PCT/JP1994/000031 WO1994019483A1 (fr) | 1993-02-18 | 1994-01-12 | Procede de production de canthaxanthine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2883193A JPH06237787A (ja) | 1993-02-18 | 1993-02-18 | カンタキサンチンの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06237787A true JPH06237787A (ja) | 1994-08-30 |
Family
ID=12259335
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2883193A Withdrawn JPH06237787A (ja) | 1993-02-18 | 1993-02-18 | カンタキサンチンの製造法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06237787A (ja) |
| WO (1) | WO1994019483A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007066454A1 (ja) | 2005-12-06 | 2007-06-14 | Tosoh Corporation | 新規微生物およびそれを用いたカロテノイド類の製造方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02138996A (ja) * | 1988-11-18 | 1990-05-28 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | カンタキサンチンの製造法 |
-
1993
- 1993-02-18 JP JP2883193A patent/JPH06237787A/ja not_active Withdrawn
-
1994
- 1994-01-12 WO PCT/JP1994/000031 patent/WO1994019483A1/ja not_active Ceased
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007066454A1 (ja) | 2005-12-06 | 2007-06-14 | Tosoh Corporation | 新規微生物およびそれを用いたカロテノイド類の製造方法 |
| US8030022B2 (en) | 2005-12-06 | 2011-10-04 | Tosoh Corporation | Microorganism and method for producing carotenoid using it |
| US8569014B2 (en) | 2005-12-06 | 2013-10-29 | Tosoh Corporation | Microorganism and method for producing canthaxanthin |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1994019483A1 (fr) | 1994-09-01 |
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