JPH06287191A - マイカラマイド様物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 海綿の産生する新規マイカラマイド様物質の
提供。 【構成】 海綿テオネラ属（Theonella sp.）に由来す
る図示構造式で表されるマイカラマイド様物質。 【効果】 マイカラマイド様物質は、腫瘍細胞増殖抑制
作用を有し、抗腫瘍剤として有用である。 〔式中Ｒは、２−ヒドロキシ−４−メトキシカルボニル
ブチル基、２−ヒドロキシテトラヒドロピラン−６−イ
ル基、ヒドロキシル基、２−オキソテトラヒドロフラン
−５−イル基または２−オキソテトラヒドロピラン−６
−イル基を示す。またＭｅはメチル基を示す〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、海綿からの抽出成分で
ある抗腫瘍作用を示す新規マイカラマイド様物質に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】海綿類からは、これまでに幾つかの生理
活性物質が単離されている。たとえば、ハリコンドリア
オカダイ（Harichondria okadai）からは、細胞毒性を
示す炭素数３８個からなる脂肪酸（オカダ酸、Okadaic
acid）およびノルハリコンドリンＡが報告され〔ジャー
ナル オブ ザ アメリカン ケミカル ソサエティー
（J. Am. Chem. Soc. ），1981，103, 2469-2471および
J. Am. Chem. Soc.,1985，107, 4796-4798〕，パンダロ
ス アカンチホリウム（Pandaros acanthifolium）から
は、エピスルフィド結合を有するポリエーテルカルボン
酸（アカンチホリシン、Acanthifolicin）が報告され
〔J. Am. Chem. Soc.,1981，103, 2467-2468〕，さらに
カリブ海産海綿のテダニアイグニス（Tedania ignis）
からは、細胞毒性を有する１８員環マクロライド（テダ
ノライド，Tedanolide）が報告〔J. Am. Chem. Soc.,19
84，106, 7251-7252〕されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明者等は、我国産
の海綿類からの生理活性物質の探索を行ない、海綿ディ
スコデルミア カリックス（Discodermia calyx）から
抗腫瘍作用を示すスピロケタール化合物を見出した（特
開昭６２−１７８５９５号公報）。また、マイカル属
（Mycale sp.）の海綿から強い細胞毒性を示すマクロラ
イド物質を見出し、特許出願した（特願平２−１７４９
５４）。そして、さらに海綿から新規で有用な生理活性
物質を見出すべく探索したところ、八丈島周辺海域の水
深１０〜１５ｍに生息していた海綿テオネラ属（Theone
lla sp.）の親油性抽出成分中に、強い細胞毒性を示す
物質を認め、この物質を単離し、本発明を完成するに至
った。すなわち、本発明の課題は、海綿から新規で有用
な生理活性物質を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、八丈島周辺海
域の水深１０〜１５ｍに生息していたテオネラ属（Theo
nella sp.）の海綿の親油性抽出成分中に、強い細胞毒
性を示す物質が数種あることを見出し、この物質を単離
し、本発明を完成した。本発明の物質は、化２で示され
るマイカラマイド様物質である。

【０００５】

【化２】 式中Ｒは、２−ヒドロキシ−４−メトキシカルボニルブ
チル基〔化３〕、２−ヒドロキシテトラヒドロピラン−
６−イル基〔化４〕、ヒドロキシル基〔化５〕、２−オ
キソテトラヒドロフラン−５−イル基〔化６〕または２
−オキソテトラヒドロピラン−６−イル基〔化７〕を示
す。またＭｅはメチル基を示す。

【０００６】

【化３】

【化４】

【化５】

【化６】

【化７】

【０００７】本発明のマイカラマイド様物質は、海綿Th
eonella sp.をエタノールで抽出し、抽出成分を水とジ
エチルエーテルで２層分配し、ジエチルエーテル層に移
行する成分の中から単離することによって得ることがで
きる。原料となる海綿Theonella sp.は、八丈島周辺海
域をはじめ、我国近海に生育しており、これを採取して
使用することができる。海綿は凍結し、粉砕したのち抽
出する。抽出は常温で行い、抽出に用いるエタノールは
９９％以上のものが用いられる。抽出は、海綿の２倍量
以上のエタノールを用い数回行う。抽出液を必要により
減圧濃縮したのち、水−ジエチルエーテルによる２層分
配に付し、ジエチルエーテル層をｎ−ヘキサンと９０％
メタノールで２層分配し、９０％メタノール属をさらに
四塩化炭素と８０％メタノールで２層分配し、四塩化炭
素層を得る。この四塩化炭素層をＯＤＳを用いフラッシ
ュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶媒：含水メタノ
ール）に付して活性成分を分画する。

【０００８】７０％メタノールで溶出した活性画分をト
ヨパールＨＷ４０（商品名）を用い、クロロホルム／メ
タノール（１：１）およびヘキサン／クロロホルム／メ
タノール（８：７：１）によるゲル濾過で活性画分Ｉ及
び活性画分ＩＩを得た。この活性画分ＩをCapcell pack
Ｃ₁₈（商品名）を用い６０％メタノールによって逆相Ｈ
ＰＬＣで精製し、化合物１を得た。一方、活性画分ＩＩ
を、SenshupakODS-H-4251を用い、７０％メタノールに
よる逆相ＨＰＬＣに付し、化合物２を得た。この逆相Ｈ
ＰＬＣによってさらに３種の活性画分Ａ，Ｂ及びＣを得
た。活性画分Ａ及びＢを、それぞれCapcell packＣ
₁₈（商品名）を用い６０％メタノールによる逆相ＨＰＬ
Ｃで精製し、化合物３及び化合物４を得た。活性画分Ｃ
を、シリカゲルカラムで分画し、Capcell packＣ₁₈（商
品名）を用い６０％メタノールによる逆相ＨＰＬＣで精
製して化合物５を得た。

【０００９】本発明の化合物１〜５の理化学的物質及び
化学構造式は次のとおりである。 １．化合物１（ＭＳ−１０３０−Ａ−２−１−Ａ−
１）： １）分子量 ５７３ ２）分子式 Ｃ₂₈Ｈ₄₇ＮＯ₁₁ ３）施光度 〔α〕_D ＋49.1°（ｃ0.06，CHCl₃ ） ４）質量分析（FABMS) ｍ／ｚ 574(MH⁺ ), 542(M⁺ -C
H₃O),541(M⁺ -CH₃OH) ５） ¹Ｈ及び¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） 表１のとおり

【００１０】 ２．化合物２（ＭＳ−１０３０−Ａ−２−１−４）： １）分子量 ５４３ ２）分子式 Ｃ₂₇Ｈ₄₅ＮＯ₁₁ ３）施光度 〔α〕_D ＋88.1°（ｃ0.14, CHCl₃ ） ４）質量分析（FABMS) ｍ／ｚ 566 (M＋Na⁺ ), 494 ５） ¹Ｈ及び¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） 表２のとおり

【００１１】 ３．化合物３（ＭＳ−１０３０−Ａ−２−１−１−１） １）分子量 ４５９ ２）分子式 Ｃ₂₂Ｈ₃₇ＮＯ₉ ３）施光度 〔α〕_D ＋ 136.7°（ｃ0.03, CHCl₃ ） ４）質量分析（FABMS) ｍ／ｚ 482 (M＋Na⁺ ），428
(M⁺ -CH₃O) ５） ¹Ｈ及び¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） 表３のとおり

【００１２】 ４．化合物４（ＭＳ−１０３０−Ａ−２−１−２−１） １）分子量 ５２７ ２）分子式 Ｃ₂₆Ｈ₄₁ＮＯ₁₀ ３）施光度 〔α〕_D ＋80.0°（ｃ0.04，CHCl₃ ） ４）質量分析（FABMS) ｍ／ｚ 550 (M＋Na⁺ ), 496
(M⁺ -CH₃O), 478 ５） ¹Ｈ及び¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） 表４のとおり

【００１３】 ５．化合物５（ＭＳ−１０３０−Ａ−２−１−２−２） １）分子量 ５４１ ２）分子式 Ｃ₂₇Ｈ₄₃ＮＯ₁₀ ３）施光度 〔α〕_D ＋ 172.0°（ｃ0.03，CHCl₃ ） ４）質量分析（FABMS) ｍ／ｚ 542(MH⁺ ），510 (M⁺
-CH₃O) ５） ¹Ｈ及び¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） 表５のとおり

【００１４】

【表１】

【表２】

【表３】

【表４】

【表５】

【００１５】以上の理化学的物質から、化合物１〜５の
化学構造式は、次のとおりであると考えられている。な
お、化合物２は２１位のヒドロキシル基の位置によって
化９及び化１０の２種の異性体であると考えられる。 化合物１ 〔化８〕 化合物２ 〔化９〕及び〔化１０〕 化合物３ 〔化１１〕 化合物４ 〔化１２〕 化合物５ 〔化１３〕

【化８】

【化９】

【化１０】

【化１１】

【化１２】

【化１３】

【００１６】次に本発明化合物の有用性についつて説明
する。本発明化合物は、すぐれた抗腫瘍作用を有してい
る。以下in vitroにおける腫瘍細胞増殖抑制作用及びin
vivo における抗腫瘍作用を、実験方法と共に示す。

【００１７】（ｉ）in vitroにおける作用 白血病細胞Ｐ３８８に対する細胞増殖抑制試験 腫瘍細胞Ｐ３８８を１０％牛胎児血清を含むＲＰＭＩ
１６４０培養液に加えた溶液を用い、培養液の中の細胞
数を１×１０⁵ 個／ｍｌに調整する。その１ｍｌをプラ
スチック ウェルに分注する。マイカラマイド様物質は
ジメチルスルホキシド（以下ＤＭＳＯと略記する）に溶
解し、ＤＭＳＯの最終濃度が０．４容量％でマイカラマ
イド様物質が所定濃度となるように細胞浮遊培養液に添
加した後、５％炭酸ガスを含む空気中で３日間培養し
た。対照としてＤＭＳＯ ０．４容量％を加えた細胞浮
遊培養液を同様に培養した。培養後、トリバンブルー染
色液で染色し、生細胞数を計測して対照に対する抑制率
からＩＣ₅₀値（５０％細胞増殖抑制濃度）を求めた。対
照薬物としてマイトマイシンＣを用いた。結果を表６に
示す。

【００１８】

【表６】 ──────────────────────────────────── 化合物番号 ＭＳ番号 ＩＣ₅₀（ng／ml） ──────────────────────────────────── １ MS−1030−Ａ−２−１−Ａ−１ ０．１１ ２ −４ ０．０５３ ３ −１−１ ９．１ ４ −２−１ １．１ ５ −２−２ ０．７１ ──────────────────────────────────── マイトマイシンＣ １０または９．２ ────────────────────────────────────

【００１９】（ｉｉ）in vivo における作用 白血病細胞Ｐ３８８に対する抗腫瘍試験 ＤＢＡ／ＣＲＪマウス腹腔内に移植した７日目のＰ３８
８細胞４×１０⁵ 個を一群６匹のＢＤＦ₁ マウス（５週
令、雄）の腹腔内に移植した。活性成分は移植２４時間
後から表７に示した日程に従って所定量腹腔内投与し
た。腫瘍増殖抑制効果に各活性成分投与群の中間生存日
数を求め、対照群に対する各投与群の延命率（Ｔ／Ｃ
％）を下記式より算出した。結果を表７に示す。 Ｔ／Ｃ％＝Ｔ／Ｃ×１００ Ｔ：投与群の中間生存日数 Ｃ：対照群の中間生存日数

【００２０】

【表７】

【００２１】本発明のマイカラマイド様物質を医薬とし
て使用するには、抗腫瘍効果を発現するのに都合のよい
形で投与する。マイカラマイド様物質はそのままの状態
で医薬となり得るが、製薬上の慣習に従って製薬的に許
容し得る希釈剤及び／又は他の薬理作用物質との混合物
として組成された状態でも提供され得る。従って本発明
のマイカラマイド様物質は、経口的又は非経口的に投与
するための形態を適宜に採り得る。例えば散剤、顆粒、
錠剤、糖衣錠、カプセル、ピル、坐剤、懸濁剤、液剤、
乳剤、注射剤、エアゾール剤である。本発明のマイカラ
マイド様物質の投薬量は、感受性差、年令、性別、体
重、投与方法、投与の時期、間隔、病状、体調、医薬製
剤の性質、調剤の種類等種々の原因によって変動する。

【００２２】つぎに実施例を挙げて、本発明の化合物お
よびその製造法をさらに説明する。

【実施例】八丈島周辺水深１０〜１５ｍで採集し、内部
が黄色の海綿Theonella sp.の凍結試料１５ｋｇをエタ
ノールで抽出し、水とジエチルエーテルで二層分配し
た。ジエチルエーテル層をｎ−ヘキサンと９０％メタノ
ールで分配後、含水メタノール層をさらに四塩化炭素と
８０％メタノールで二層分配し、四塩化炭素層２．１ｇ
を得た。四塩化炭素層をＯＤＳと含水メタノールを用い
るフラッシュクロマトグラフィーで分画した。７０％メ
タノールで溶出した活性画分をトヨパール（TOYOPEARL
）ＨＷ４０とクロロホルム／メタノール（１：１）お
よびヘキサン／クロロホルム／メタノール（８：７：
１）を用いるゲル濾過で順次分画し、活性画分Ｉおよび
ＩＩを得た。活性画分Ｉをカプセルパック（Capcell p
ak）Ｃ₁₈と６０％メタノールを用いる逆相のＨＰＬＣに
よって精製し、化合物１を２．１ｍｇ得た。一方、活性
画分ＩＩを、センシュパック（Senshupak ）ＯＤＳ−Ｈ
−４２５１と７０％メタノールを用いる逆相のＨＰＬＣ
に付し、化合物２を４．８ｍｇ得ると共に、３つの活性
画分Ａ，ＢおよびＣを得た。活性画分ＡおよびＢを，そ
れぞれカプセルパック（Capcell pak）Ｃ₁₈と６０％メ
タノールを用いる逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物３を
０．６ｍｇおよび化合物４を０．８ｍｇ得た。活性画分
Ｃは、シリカゲルのカラムで分画後、Capcell pak Ｃ
₁₈と６０％メタノールを用いる逆相のＨＰＬＣで精製
し、化合物５を０．５ｍｇ得た。化合物１〜５の理化学
的性質及び化学構造式は前述の通りであった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 化１で表されるマイカラマイド様物質 【化１】 式中Ｒは、２−ヒドロキシ−４−メトキシカルボニルブ
   チル基、２−ヒドロキシテトラヒドロピラン−６−イル
   基、ヒドロキシル基、２−オキソテトラヒドロフラン−
   ５−イル基または２−オキソテトラヒドロピラン−６−
   イル基を示す。またＭｅはメチル基を示す。