JPH06319533A - 新規微生物及びそれを用いた廃棄物の分解処理方法 - Google Patents
新規微生物及びそれを用いた廃棄物の分解処理方法Info
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- JPH06319533A JPH06319533A JP5113069A JP11306993A JPH06319533A JP H06319533 A JPH06319533 A JP H06319533A JP 5113069 A JP5113069 A JP 5113069A JP 11306993 A JP11306993 A JP 11306993A JP H06319533 A JPH06319533 A JP H06319533A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ
吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有するシュード
モナス・テストステロニ種に属する微生物を用いて、ポ
リ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸）共重
合体を含む廃棄物を分解処理する。 【効果】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ
吉草酸）共重合体を含む廃棄物の埋め立てまたはコンポ
スト化において効率的に分解処理できる。
吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有するシュード
モナス・テストステロニ種に属する微生物を用いて、ポ
リ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸）共重
合体を含む廃棄物を分解処理する。 【効果】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ
吉草酸）共重合体を含む廃棄物の埋め立てまたはコンポ
スト化において効率的に分解処理できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は新規な微生物、具体的に
は、Alcaligenes eutrophus 等の微生物が産生するポリ
(３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸) 共重合
体 [以下、Ｐ(3HB−3HV)と称する] を資化分解する能力
を示すシュードモナス・テストステロニ (Pseudomonas
testosteroni) 種に属する新規な微生物、およびこの微
生物を用いるＰ(3HB−3HV)を含む廃棄物の分解処理方法
に関する。
は、Alcaligenes eutrophus 等の微生物が産生するポリ
(３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸) 共重合
体 [以下、Ｐ(3HB−3HV)と称する] を資化分解する能力
を示すシュードモナス・テストステロニ (Pseudomonas
testosteroni) 種に属する新規な微生物、およびこの微
生物を用いるＰ(3HB−3HV)を含む廃棄物の分解処理方法
に関する。
【０００２】
【従来の技術】軽くて強いプラスチックは近年ますます
需要が伸び、その生産量は日本だけでも年間1000万ｔを
超えるほどにまで増加してきている。それに伴い、廃棄
されるプラスチックも急激な増加となり、新しい社会問
題の１つとして注目を集めてきている。
需要が伸び、その生産量は日本だけでも年間1000万ｔを
超えるほどにまで増加してきている。それに伴い、廃棄
されるプラスチックも急激な増加となり、新しい社会問
題の１つとして注目を集めてきている。
【０００３】プラスチックの廃棄処理方法として現在行
われている主な方法は、埋め立ておよび焼却である。埋
め立て処理については、プラスチックは安定で微生物に
より分解されないため、蓄積による環境の悪化を招く。
また、重量に比較してかさ高くしかも埋めても腐らない
ため、埋立てには広い場所を必要とし、埋立地の不足が
問題となっている。
われている主な方法は、埋め立ておよび焼却である。埋
め立て処理については、プラスチックは安定で微生物に
より分解されないため、蓄積による環境の悪化を招く。
また、重量に比較してかさ高くしかも埋めても腐らない
ため、埋立てには広い場所を必要とし、埋立地の不足が
問題となっている。
【０００４】また、プラスチックは重量当たりの燃焼熱
が高く、焼却に際して炉を痛める。さらに、家庭で多用
されている塩化ビニルや塩化ビニリデン等の塩素系のプ
ラスチックについては燃焼時に発ガン性の高いダイオキ
シンが生成することが指摘されており、プラスチックの
焼却には種々の問題がある。
が高く、焼却に際して炉を痛める。さらに、家庭で多用
されている塩化ビニルや塩化ビニリデン等の塩素系のプ
ラスチックについては燃焼時に発ガン性の高いダイオキ
シンが生成することが指摘されており、プラスチックの
焼却には種々の問題がある。
【０００５】そこで、プラスチックのリサイクルが望ま
れるが、比較的排出源の明確な工場内の廃プラスチック
については近年盛んに行われてきているものの、一旦市
場に出回ったプラスチック製品については、回収・運搬
・分別・洗浄等に多大の労力とコストがかかり、ほとん
どがリサイクルされていないのが現状である。また、リ
サイクルをうまく回していくには社会システム作りが重
要であるが、それを受入れるのに十分なほど社会は成熟
していない。
れるが、比較的排出源の明確な工場内の廃プラスチック
については近年盛んに行われてきているものの、一旦市
場に出回ったプラスチック製品については、回収・運搬
・分別・洗浄等に多大の労力とコストがかかり、ほとん
どがリサイクルされていないのが現状である。また、リ
サイクルをうまく回していくには社会システム作りが重
要であるが、それを受入れるのに十分なほど社会は成熟
していない。
【０００６】この対策の１つとして近年注目されてきて
いるのが生分解性プラスチックである。生分解性プラス
チックは、微生物によって分解される素材であり、適当
な分解環境において速やかに分解する「地球に優しい」
素材である。中でも、微生物が自らのエネルギー源とし
てその体内に蓄積する脂肪族ポリエステルである (ポリ
−３−ヒドロキシ酪酸)(以下、Ｐ３ＨＢと称する) は、
その熱可塑性と優れた生分解性により、汎用プラスチッ
クの代替素材として注目を集めてきている。Ｐ３ＨＢは
硬く脆いという物性上の難点のため実用化は困難であっ
たが、Ｐ３ＨＢの硬くて脆いという性質を改良した種々
の共重合ポリエステルが、微生物により産生可能である
ことが見い出され、生分解性プラスチックの実用化が進
んでいる。特に、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒド
ロキシ吉草酸）共重合体〔以下、P(3HB-3HV)という〕
(特開昭61−293385号、特開昭63−269989号参照) は、
新しい生分解性素材として盛んにその用途開発が進めら
れている。
いるのが生分解性プラスチックである。生分解性プラス
チックは、微生物によって分解される素材であり、適当
な分解環境において速やかに分解する「地球に優しい」
素材である。中でも、微生物が自らのエネルギー源とし
てその体内に蓄積する脂肪族ポリエステルである (ポリ
−３−ヒドロキシ酪酸)(以下、Ｐ３ＨＢと称する) は、
その熱可塑性と優れた生分解性により、汎用プラスチッ
クの代替素材として注目を集めてきている。Ｐ３ＨＢは
硬く脆いという物性上の難点のため実用化は困難であっ
たが、Ｐ３ＨＢの硬くて脆いという性質を改良した種々
の共重合ポリエステルが、微生物により産生可能である
ことが見い出され、生分解性プラスチックの実用化が進
んでいる。特に、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒド
ロキシ吉草酸）共重合体〔以下、P(3HB-3HV)という〕
(特開昭61−293385号、特開昭63−269989号参照) は、
新しい生分解性素材として盛んにその用途開発が進めら
れている。
【０００７】しかしながら、これら分解性のプラスチッ
クは、埋め立てに際し適当な条件では分解することが分
かっていても、分解の速度をコントロールすることはで
きないし、場所によっては分解菌が存在しない場合があ
り、単なる埋め立て処理では分解に普遍性がない。特
に、自然の状態で微生物によって産生されるＰ３ＨＢと
違い、特殊な条件下で産生させたP(3HB-3HV)について
は、その分解菌が普遍的に存在している可能性は小さ
い。
クは、埋め立てに際し適当な条件では分解することが分
かっていても、分解の速度をコントロールすることはで
きないし、場所によっては分解菌が存在しない場合があ
り、単なる埋め立て処理では分解に普遍性がない。特
に、自然の状態で微生物によって産生されるＰ３ＨＢと
違い、特殊な条件下で産生させたP(3HB-3HV)について
は、その分解菌が普遍的に存在している可能性は小さ
い。
【０００８】例えば、Ｐ３ＨＢを効率的に分解すること
が知られているアルカリゲネス・フェカリースT1(Alcal
igenes faecalis T1) が体外に分泌する酵素では、P(3H
B-3HV)の分解速度は極めて遅く [K.Kunioka, Y. Doi, J
ournal of JSES, 15, [3], 16 〜22，(1989)] 、埋め立
てやコンポスト化において分解速度の促進が望まれてい
る。
が知られているアルカリゲネス・フェカリースT1(Alcal
igenes faecalis T1) が体外に分泌する酵素では、P(3H
B-3HV)の分解速度は極めて遅く [K.Kunioka, Y. Doi, J
ournal of JSES, 15, [3], 16 〜22，(1989)] 、埋め立
てやコンポスト化において分解速度の促進が望まれてい
る。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、P(3HB-3HV)を含む廃棄物の分解を効果的に進行させ
る方法を提供することである。
は、P(3HB-3HV)を含む廃棄物の分解を効果的に進行させ
る方法を提供することである。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、P(3HB-3H
V)を含む廃棄物を効率的に処理する方法として、P(3HB-
3HV)を効率的に分解資化しうる微生物を用いることを検
討し、そのような性質有する微生物を自然界より検索し
た結果、シュードモナス・テストステロニ種に属する細
菌菌種にこのような能力をもつものがあること、および
この微生物を用いてP(3HB-3HV)の分解速度を飛躍的に促
進させることができ実際の廃棄物処理に有効であること
を見いだし、本発明を完成させた。
V)を含む廃棄物を効率的に処理する方法として、P(3HB-
3HV)を効率的に分解資化しうる微生物を用いることを検
討し、そのような性質有する微生物を自然界より検索し
た結果、シュードモナス・テストステロニ種に属する細
菌菌種にこのような能力をもつものがあること、および
この微生物を用いてP(3HB-3HV)の分解速度を飛躍的に促
進させることができ実際の廃棄物処理に有効であること
を見いだし、本発明を完成させた。
【００１１】本発明は、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３
−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有
するシュードモナス・テストステロニ種 (Pseudomonas
testosteroni) に属する微生物またはこの微生物が体外
に分泌する酵素を用いて、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−
３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む廃棄物を分解処
理することを特徴とする、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−
３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む廃棄物の分解処
理方法を要旨とする。
−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有
するシュードモナス・テストステロニ種 (Pseudomonas
testosteroni) に属する微生物またはこの微生物が体外
に分泌する酵素を用いて、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−
３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む廃棄物を分解処
理することを特徴とする、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−
３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む廃棄物の分解処
理方法を要旨とする。
【００１２】また本発明は、ポリ（３−ヒドロキシ酪酸
−３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力
を有するシュードモナス・テストステロニ種 (Pseudomo
nastestosteroni) に属する微生物にも関する。
−３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力
を有するシュードモナス・テストステロニ種 (Pseudomo
nastestosteroni) に属する微生物にも関する。
【００１３】この微生物の具体例としては、ＦＥＲＭ
Ｐ−１３４０８として寄託された新規菌株、シュードモ
ナス・テストステロニ・2601株がある。このシュードモ
ナス・テストステロニ・2601株は茨城県鹿島郡で採取し
た土壌より分離された。本発明者らが分離した本発明に
係る新規菌株の菌学的性質は以下の通りである。
Ｐ−１３４０８として寄託された新規菌株、シュードモ
ナス・テストステロニ・2601株がある。このシュードモ
ナス・テストステロニ・2601株は茨城県鹿島郡で採取し
た土壌より分離された。本発明者らが分離した本発明に
係る新規菌株の菌学的性質は以下の通りである。
【００１４】シュードモナス・テストステロニ・2601株の菌学的性質 (a) 形態 (1) 細胞の形と大きさ : 桿菌、 (1.0 〜1.2)× (２〜
４)(μm) (2) 運動性の有無と鞭毛の着生状況 : 有り、極多毛
(３本) (3) 細胞の多形性および胞子の有無 :無 (4) グラム染色性 : 陰性 (b) 各種糖からの酸生成テスト (1) グルコース : − (2) フルクトース : − (3) ガラクトース : − (4) マンノース : − (5) ラムノース : − (6) キシロース : − (7) ラクトース : − (8) シュクロース : − (9) マルノース : − (10) マンニット : − (c) 各種糖および有機酸同化テスト (1) グルコース : − (2) Ｌ−アラビノース : − (3) Ｄ−マンノース : − (4) Ｄ−マンニット : − (5) Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン : − (6) マルトース : − (7) グルコン酸カリウム : ＋ (8) ｎ−カプリン酸 : ＋ (9) アジピン酸 : ＋ (10) ｄｌ−リンゴ酸 : ＋ (11) クエン酸ナトリウム : − (12) 酢酸フェニル : − (d) ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ− ガラクトピラシド: − (e) 硝酸塩還元 : − (f) Ｎ2 ガス生成 : − (g) オキシダーゼ : ＋ (h) アルギニンディハイドロラーゼ: − (i) リジンデカルボキシラーゼ : − (k) オルニチンデカルボキシラーゼ: − (l) 加水分解テスト (1) 尿素 : ＋ (2) エスクリン : − (3) Tween 80 : − (4) スターチ : − (5) ゼラチン : − (6) アセトアミド : − (m) 各種培地での生育 (1) ＳＳ培地 : − (2) マッコンキー培地 : ＋ (3) 6.5 ％ NaCl : − (4) セトリミド培地 : − (n) クエン酸利用 : − (o) ＰＨでの生育 (1) pH 4.5 : ＋ (2) pH 3.6 : − 本発明者らは、P(3HB-3HV)を分解資化する能力を有する
本発明の細菌菌株について、上述の菌学的性質に基づい
て、Manual of Clinical Microbiology 4th edition (1
985)および Bergey's Manual of Systematic Bacteriol
ogy Vol.1 (1984)に記載の基準に従って、シュードモナ
ス・テストステロニに属する公知の菌株との異同を検討
した結果、この菌株はシュードモナス・テストステロニ
種に属する新規な細菌菌株であることが判明し、シュー
ドモナス・テストステロニ・2601株と命名した。この菌
株はＦＥＲＭ Ｐ−１３４０８として工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託、保管されている。
４)(μm) (2) 運動性の有無と鞭毛の着生状況 : 有り、極多毛
(３本) (3) 細胞の多形性および胞子の有無 :無 (4) グラム染色性 : 陰性 (b) 各種糖からの酸生成テスト (1) グルコース : − (2) フルクトース : − (3) ガラクトース : − (4) マンノース : − (5) ラムノース : − (6) キシロース : − (7) ラクトース : − (8) シュクロース : − (9) マルノース : − (10) マンニット : − (c) 各種糖および有機酸同化テスト (1) グルコース : − (2) Ｌ−アラビノース : − (3) Ｄ−マンノース : − (4) Ｄ−マンニット : − (5) Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン : − (6) マルトース : − (7) グルコン酸カリウム : ＋ (8) ｎ−カプリン酸 : ＋ (9) アジピン酸 : ＋ (10) ｄｌ−リンゴ酸 : ＋ (11) クエン酸ナトリウム : − (12) 酢酸フェニル : − (d) ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ− ガラクトピラシド: − (e) 硝酸塩還元 : − (f) Ｎ2 ガス生成 : − (g) オキシダーゼ : ＋ (h) アルギニンディハイドロラーゼ: − (i) リジンデカルボキシラーゼ : − (k) オルニチンデカルボキシラーゼ: − (l) 加水分解テスト (1) 尿素 : ＋ (2) エスクリン : − (3) Tween 80 : − (4) スターチ : − (5) ゼラチン : − (6) アセトアミド : − (m) 各種培地での生育 (1) ＳＳ培地 : − (2) マッコンキー培地 : ＋ (3) 6.5 ％ NaCl : − (4) セトリミド培地 : − (n) クエン酸利用 : − (o) ＰＨでの生育 (1) pH 4.5 : ＋ (2) pH 3.6 : − 本発明者らは、P(3HB-3HV)を分解資化する能力を有する
本発明の細菌菌株について、上述の菌学的性質に基づい
て、Manual of Clinical Microbiology 4th edition (1
985)および Bergey's Manual of Systematic Bacteriol
ogy Vol.1 (1984)に記載の基準に従って、シュードモナ
ス・テストステロニに属する公知の菌株との異同を検討
した結果、この菌株はシュードモナス・テストステロニ
種に属する新規な細菌菌株であることが判明し、シュー
ドモナス・テストステロニ・2601株と命名した。この菌
株はＦＥＲＭ Ｐ−１３４０８として工業技術院生命工
学工業技術研究所に寄託、保管されている。
【００１５】本発明の菌株は、P(3HB-3HV)の構成単位の
3HB および3HV を区別なく切断するためP(3HB-3HV)の分
解資化性を有し、従って当然のことながらＰ３ＨＢにつ
いても分解資化する能力を有する。
3HB および3HV を区別なく切断するためP(3HB-3HV)の分
解資化性を有し、従って当然のことながらＰ３ＨＢにつ
いても分解資化する能力を有する。
【００１６】本発明菌株の分離は、次のようにして行
う。まず、炭素源としてP(3HB-3HV)を含有し、無機窒素
化合物およびその他の無機塩類を含有する培地、好まし
くは基本培地にP(3HB-3HV)を添加した培地での集積培養
を繰り返すことより、P(3HB-3HV)分解菌株の濃化を行
う。この場合の集積培養は静置培養法が適している。次
いで分離用の培地で、例えばＳＣＤ寒天培地での培養に
より得られたコロニーより、P(3HB-3HV)分解能を確認し
て本発明菌株を得る。
う。まず、炭素源としてP(3HB-3HV)を含有し、無機窒素
化合物およびその他の無機塩類を含有する培地、好まし
くは基本培地にP(3HB-3HV)を添加した培地での集積培養
を繰り返すことより、P(3HB-3HV)分解菌株の濃化を行
う。この場合の集積培養は静置培養法が適している。次
いで分離用の培地で、例えばＳＣＤ寒天培地での培養に
より得られたコロニーより、P(3HB-3HV)分解能を確認し
て本発明菌株を得る。
【００１７】本発明菌株の菌体増殖用に使用する培地
は、この菌株が良好に生育するものであれば特に限定さ
れない。培地成分としては適当な炭素源、窒素源および
無機塩類等を含有する。炭素源としてはP(3HB-3HV)に限
らず、アジピン酸、リンゴ酸、グルコン酸カリウムなど
の有機酸およびその塩などのような、本発明の菌株が利
用できる１種または２種以上の炭素化合物を任意に炭素
源として利用できる。窒素源としては、特に限定されな
いが、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどの無機
窒素化合物、およびペプトンなど有機窒素源が利用でき
る。有機窒素化合物を用いる場合、これには炭素も含ま
れているので、菌体増殖用培地にあっては別の炭素源は
必ずしも必要でない。無機塩類としては、各種のリン酸
塩、硫酸マグネシウムなどが使用できる。さらに、微量
の重金属塩 (例、鉄塩、マンガン塩など）を培地に含有
させてもよい。菌体増殖用の培地として好ましいのはＳ
ＣＤ寒天培地である。
は、この菌株が良好に生育するものであれば特に限定さ
れない。培地成分としては適当な炭素源、窒素源および
無機塩類等を含有する。炭素源としてはP(3HB-3HV)に限
らず、アジピン酸、リンゴ酸、グルコン酸カリウムなど
の有機酸およびその塩などのような、本発明の菌株が利
用できる１種または２種以上の炭素化合物を任意に炭素
源として利用できる。窒素源としては、特に限定されな
いが、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどの無機
窒素化合物、およびペプトンなど有機窒素源が利用でき
る。有機窒素化合物を用いる場合、これには炭素も含ま
れているので、菌体増殖用培地にあっては別の炭素源は
必ずしも必要でない。無機塩類としては、各種のリン酸
塩、硫酸マグネシウムなどが使用できる。さらに、微量
の重金属塩 (例、鉄塩、マンガン塩など）を培地に含有
させてもよい。菌体増殖用の培地として好ましいのはＳ
ＣＤ寒天培地である。
【００１８】培養温度は25〜40℃、培地のPHは中性付近
が好ましく、培養日数は分解の進行に応じて決めること
ができるが、通常は５〜７日が適当である。本発明で
は、上記菌株あるいはこの菌株が体外に分泌する酵素
を、P(3HB-3HV)の成型体等を含む廃棄物の埋め立てやコ
ンポスト化に際して散布することにより、P(3HB-3HV)の
分解速度を向上させて廃棄処理を効率よく行うことがで
きる。
が好ましく、培養日数は分解の進行に応じて決めること
ができるが、通常は５〜７日が適当である。本発明で
は、上記菌株あるいはこの菌株が体外に分泌する酵素
を、P(3HB-3HV)の成型体等を含む廃棄物の埋め立てやコ
ンポスト化に際して散布することにより、P(3HB-3HV)の
分解速度を向上させて廃棄処理を効率よく行うことがで
きる。
【００１９】散布する菌体あるいは酵素の形態は特に限
定されず、凍結乾燥菌体、培養液、酵素、酵素溶液等の
いずれでもよいが、液状で散布する方法が分散性がよく
最も効果的である。
定されず、凍結乾燥菌体、培養液、酵素、酵素溶液等の
いずれでもよいが、液状で散布する方法が分散性がよく
最も効果的である。
【００２０】菌体を培養液として散布する場合、適宜炭
素源、窒素源および無機塩等を含有する培地で本発明菌
株を培養して得られた培養液をそのままあるいは適宜希
釈して用いればよい。この培養では、炭素源としてP(3H
B-3HV)を単独で利用できる。また、P(3HB-3HV)以外に、
本発明の菌株が利用できる任意の炭素源を追加併用しう
る。この追加しうる炭素源には、上述のような、アジピ
ン酸、リンゴ酸、グルコン酸カリウムなどの有機酸およ
びその塩が挙げられる。窒素源としては特に限定されな
いが、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどの無機
窒素化合物およびペプトンなど有機窒素源が利用でき、
無機塩類としては各種のリン酸塩、硫酸マグネシウムな
どが使用できる。さらに、微量の重金属塩 (例、鉄塩、
マンガン塩など）を培地に含有させてもよい。特に好ま
しいのは、実施例に示す基本培地に炭素源としてP(3HB-
3HV)を含有させた培地である。培養方法としては、振盪
培養法、静置培養法、通気攪拌培養法等が利用できる。
培養温度は25〜40℃、培地のPHは中性付近が好ましく、
培養日数は分解の進行に応じて決めることができるが、
通常は５〜７日が適当である。炭素源として添加するP
(3HB-3HV)の形状についてはフィルム、ペレット、粉
末、塊等どのような形状でもよいが、比較的表面積の大
きい粉末状やフィルム状が適している。
素源、窒素源および無機塩等を含有する培地で本発明菌
株を培養して得られた培養液をそのままあるいは適宜希
釈して用いればよい。この培養では、炭素源としてP(3H
B-3HV)を単独で利用できる。また、P(3HB-3HV)以外に、
本発明の菌株が利用できる任意の炭素源を追加併用しう
る。この追加しうる炭素源には、上述のような、アジピ
ン酸、リンゴ酸、グルコン酸カリウムなどの有機酸およ
びその塩が挙げられる。窒素源としては特に限定されな
いが、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどの無機
窒素化合物およびペプトンなど有機窒素源が利用でき、
無機塩類としては各種のリン酸塩、硫酸マグネシウムな
どが使用できる。さらに、微量の重金属塩 (例、鉄塩、
マンガン塩など）を培地に含有させてもよい。特に好ま
しいのは、実施例に示す基本培地に炭素源としてP(3HB-
3HV)を含有させた培地である。培養方法としては、振盪
培養法、静置培養法、通気攪拌培養法等が利用できる。
培養温度は25〜40℃、培地のPHは中性付近が好ましく、
培養日数は分解の進行に応じて決めることができるが、
通常は５〜７日が適当である。炭素源として添加するP
(3HB-3HV)の形状についてはフィルム、ペレット、粉
末、塊等どのような形状でもよいが、比較的表面積の大
きい粉末状やフィルム状が適している。
【００２１】凍結乾燥菌体は、上記のようにして得た培
養液を常法により凍結乾燥させたものを使用すればよ
い。酵素として散布するには、上記の培養液を遠心分離
した液をそのまま用いる方法、遠心分離の上清液に硫安
を添加して塩析させた酵素を用いる方法、この酵素を適
当な濃度に溶解させた溶液を用いる方法等が利用でき
る。また、場合によってはP(3HB-3HV)に包含させて散布
することもできる。例えば、 P(3HB-3HV) をカプセルな
いしはマイクロカプセル化して、その中に酵素を含有さ
せたもの、あるいは酵素を含有したマイクロカプセル
[P(3HB-3HV)とは限らない] を P(3HB-3HV) に分散させ
たものを散布する。
養液を常法により凍結乾燥させたものを使用すればよ
い。酵素として散布するには、上記の培養液を遠心分離
した液をそのまま用いる方法、遠心分離の上清液に硫安
を添加して塩析させた酵素を用いる方法、この酵素を適
当な濃度に溶解させた溶液を用いる方法等が利用でき
る。また、場合によってはP(3HB-3HV)に包含させて散布
することもできる。例えば、 P(3HB-3HV) をカプセルな
いしはマイクロカプセル化して、その中に酵素を含有さ
せたもの、あるいは酵素を含有したマイクロカプセル
[P(3HB-3HV)とは限らない] を P(3HB-3HV) に分散させ
たものを散布する。
【００２２】これらの菌体あるいは酵素を散布する方法
としては、P(3HB-3HV)成型体の上から直接かける方法、
成型体の間にサンドイッチ状に散布する方法、埋め立て
後の土の上からかける方法等が挙げられる。その際、散
布量、散布の頻度、微生物菌体濃度は、成型体の種類や
散布の条件等に応じて、分解促進に最適な範囲を決定す
ればよい。
としては、P(3HB-3HV)成型体の上から直接かける方法、
成型体の間にサンドイッチ状に散布する方法、埋め立て
後の土の上からかける方法等が挙げられる。その際、散
布量、散布の頻度、微生物菌体濃度は、成型体の種類や
散布の条件等に応じて、分解促進に最適な範囲を決定す
ればよい。
【００２３】P(3HB-3HV)の分解菌の単離は、P(3HB-3HV)
を含む廃棄物の効率的な処理に有用である。また、P(3H
B-3HV)の生分解機構の検討においても有用である。新し
い生分解性素材については、単にその機械的性質だけで
はなく、どの程度まで分解し、その結果どのような生成
物が生じるかを検討することも重要である。以下、実施
例により本発明をさらに具体的に説明する。
を含む廃棄物の効率的な処理に有用である。また、P(3H
B-3HV)の生分解機構の検討においても有用である。新し
い生分解性素材については、単にその機械的性質だけで
はなく、どの程度まで分解し、その結果どのような生成
物が生じるかを検討することも重要である。以下、実施
例により本発明をさらに具体的に説明する。
【００２４】
(実施例１)茨城県鹿島郡の波崎研究センター構内で採取
した土壌を10cm3 の滅菌水に懸濁させ、十分に攪拌した
後、静置した。得られた土壌懸濁液上清１滴 (約0.05cm
3)を、P(3HB-3HV) (寸法: 10w ×10L ×0.06t 、重量７
〜８mg) のフィルムを入れた下記組成の培地 (基本培
地) からなる分離用培地 (６cm3)に加え、30℃で５〜７
日間静置培養した (集積培養) 。基本培地は、PH調節後
に濾過および滅菌してから使用した。
した土壌を10cm3 の滅菌水に懸濁させ、十分に攪拌した
後、静置した。得られた土壌懸濁液上清１滴 (約0.05cm
3)を、P(3HB-3HV) (寸法: 10w ×10L ×0.06t 、重量７
〜８mg) のフィルムを入れた下記組成の培地 (基本培
地) からなる分離用培地 (６cm3)に加え、30℃で５〜７
日間静置培養した (集積培養) 。基本培地は、PH調節後
に濾過および滅菌してから使用した。
【００２５】 基本培地の組成 硝酸アンモニウム 1.0 g リン酸水素２カリウム 1.0 g リン酸２水素ナトリウム 1.0 g 硫酸マグネシウム・７水塩 0.2 g 硫酸第一鉄・７水塩 0.01 g 硫酸マンガン・７水塩 ０．０１ ｇ 硫酸亜鉛・７水塩 ０．０１ ｇ 塩化カルシウム・２水塩 0.01 g イオン交換水 １ L ───────────────────────── PH 7.1 集積培養で得られた培養液の上清１滴を、上記フィルム
を入れた基本培地に加え、上記と同じ条件で集積培養す
ることを５回繰り返し、P(3HB-3HV)分解菌株の濃化を行
った。この集積培養で得られた培養液の１白金耳を滅菌
水で希釈した後、ＳＣＤ寒天培地 (ダイゴ製) 上に展開
し、30℃で５日間培養した。生じたコロニーの形状・色
合い等の外観を目視により識別し、10種類の菌株を得
た。この菌株をそれぞれ集積培養と同様の培地に植菌
し、30℃での培養を続けP(3HB-3HV)に対する分解性を検
討し、P(3HB-3HV)を分解資化する能力を有するシュード
モナス・テストステロニ・2601株を得た。
を入れた基本培地に加え、上記と同じ条件で集積培養す
ることを５回繰り返し、P(3HB-3HV)分解菌株の濃化を行
った。この集積培養で得られた培養液の１白金耳を滅菌
水で希釈した後、ＳＣＤ寒天培地 (ダイゴ製) 上に展開
し、30℃で５日間培養した。生じたコロニーの形状・色
合い等の外観を目視により識別し、10種類の菌株を得
た。この菌株をそれぞれ集積培養と同様の培地に植菌
し、30℃での培養を続けP(3HB-3HV)に対する分解性を検
討し、P(3HB-3HV)を分解資化する能力を有するシュード
モナス・テストステロニ・2601株を得た。
【００２６】この菌株の１白金耳を上記の基本培地 (６
cm3)およびP(3HB-3HV)フィルム(6.2〜8.7mg)を入れた試
験管に添加し、温度30℃、静置培養におけるフィルムの
分解状況を調べ、結果を表１と図１に示した。なお、分
解状況は、フィルム重量および培養液中のＴＯＣ (全有
機炭素) にて追跡した。
cm3)およびP(3HB-3HV)フィルム(6.2〜8.7mg)を入れた試
験管に添加し、温度30℃、静置培養におけるフィルムの
分解状況を調べ、結果を表１と図１に示した。なお、分
解状況は、フィルム重量および培養液中のＴＯＣ (全有
機炭素) にて追跡した。
【００２７】表１および図１に示す重量減少率とＴＯＣ
の関係から、明らかに本発明のシュードモナス・テスト
ステロニ・2601株によってP(3HB-3HV)が分解資化される
ことが分かる。
の関係から、明らかに本発明のシュードモナス・テスト
ステロニ・2601株によってP(3HB-3HV)が分解資化される
ことが分かる。
【００２８】
【表１】
【００２９】(実施例２)P(3HB-3HV)を熱プレスすること
によって厚さ50μｍのフィルムを作製し、これを50mm×
50mmの大きさに切断して試料とした。このフィルム数枚
に、以下のようにして調製した培養液を散布し、これを
兵庫県尼崎市総合研究開発センター構内の花壇に深さ10
0mm の位置に埋設した。定期的に試料を取り出して重量
を測定した。その結果を重量減少率として表２に示す。
によって厚さ50μｍのフィルムを作製し、これを50mm×
50mmの大きさに切断して試料とした。このフィルム数枚
に、以下のようにして調製した培養液を散布し、これを
兵庫県尼崎市総合研究開発センター構内の花壇に深さ10
0mm の位置に埋設した。定期的に試料を取り出して重量
を測定した。その結果を重量減少率として表２に示す。
【００３０】散布した培養液の調製 シュードモナス・テストステロニ・2601株の培養液の上
清液１滴（約0.05cm3)を、P(3HB-3HV) (寸法：10w ×10
L ×0.06t 、重量７〜８mg）のフィルムを入れた前述の
基本培地６cm3 に加え、30℃で５〜７日間振盪培養して
得た液を10倍希釈して使用した。
清液１滴（約0.05cm3)を、P(3HB-3HV) (寸法：10w ×10
L ×0.06t 、重量７〜８mg）のフィルムを入れた前述の
基本培地６cm3 に加え、30℃で５〜７日間振盪培養して
得た液を10倍希釈して使用した。
【００３１】(比較例)培養液を散布しないフィルムを、
実施例２と同様の条件で埋設し、定期的に取り出して重
量を測定した。その結果を重量減少率として表２に示
す。
実施例２と同様の条件で埋設し、定期的に取り出して重
量を測定した。その結果を重量減少率として表２に示
す。
【００３２】
【表２】
【００３３】表２から明らかなように、本発明菌株を用
いれば、P(3HB-3HV)成型体の埋め立てにおいても分解が
促進され短期間での分解が可能となり、実際の廃棄物処
理に十分な効果を有することが分かる。
いれば、P(3HB-3HV)成型体の埋め立てにおいても分解が
促進され短期間での分解が可能となり、実際の廃棄物処
理に十分な効果を有することが分かる。
【００３４】
【発明の効果】本発明によれば、P(3HB-3HV)を分解資化
することができるシュードモナス・テストステロニに属
する新規微生物を単離して提供しうる。この微生物をP
(3HB-3HV)を含むプラスチック廃棄物の処理に用いれ
ば、P(3HB-3HV)の生分解が促進され、非常に効率よく廃
棄物の処理を行うことができる。
することができるシュードモナス・テストステロニに属
する新規微生物を単離して提供しうる。この微生物をP
(3HB-3HV)を含むプラスチック廃棄物の処理に用いれ
ば、P(3HB-3HV)の生分解が促進され、非常に効率よく廃
棄物の処理を行うことができる。
【図１】本発明微生物によるP(3HB-3HV)フィルムの分解
状況を示す図である。
状況を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:38）
Claims (4)
- 【請求項１】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロ
キシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有するシュ
ードモナス・テストステロニ種に属する微生物またはこ
の微生物が体外に分泌する酵素を用いて、ポリ（３−ヒ
ドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む
廃棄物を分解処理することを特徴とする、ポリ（３−ヒ
ドロキシ酪酸−３−ヒドロキシ吉草酸）共重合体を含む
廃棄物の分解処理方法。 - 【請求項２】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロ
キシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有するシュ
ードモナス・テストステロニ種に属する微生物が、ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１３４０８として寄託された新規菌株シュー
ドモナス・テストステロニ・2601株である請求項１記載
の分解処理方法。 - 【請求項３】 ポリ（３−ヒドロキシ酪酸−３−ヒドロ
キシ吉草酸）共重合体を資化分解する能力を有するシュ
ードモナス・テストステロニ種に属する微生物。 - 【請求項４】 ＦＥＲＭ Ｐ−１３４０８号として寄託
された新規菌株シュードモナス・テストステロニ・2601
株である請求項３記載の微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5113069A JPH06319533A (ja) | 1993-05-14 | 1993-05-14 | 新規微生物及びそれを用いた廃棄物の分解処理方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5113069A JPH06319533A (ja) | 1993-05-14 | 1993-05-14 | 新規微生物及びそれを用いた廃棄物の分解処理方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06319533A true JPH06319533A (ja) | 1994-11-22 |
Family
ID=14602715
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5113069A Withdrawn JPH06319533A (ja) | 1993-05-14 | 1993-05-14 | 新規微生物及びそれを用いた廃棄物の分解処理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06319533A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0761732A4 (en) * | 1995-02-28 | 1998-04-08 | Mitsui Toatsu Chemicals | METHOD FOR DEGRADING POLYMERS |
| US9404821B2 (en) | 2012-03-31 | 2016-08-02 | China University Of Mining & Technology (Beijing) | Large deformation tensile testing system |
| CN112159771A (zh) * | 2020-09-07 | 2021-01-01 | 南京师范大学 | 聚丙烯高效降解菌株licme 200610 wgh-6及其生产的菌剂和应用 |
-
1993
- 1993-05-14 JP JP5113069A patent/JPH06319533A/ja not_active Withdrawn
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0761732A4 (en) * | 1995-02-28 | 1998-04-08 | Mitsui Toatsu Chemicals | METHOD FOR DEGRADING POLYMERS |
| US6313194B1 (en) | 1995-02-28 | 2001-11-06 | Mitsui Chemicals, Inc. | Degrading method of polymer |
| US9404821B2 (en) | 2012-03-31 | 2016-08-02 | China University Of Mining & Technology (Beijing) | Large deformation tensile testing system |
| CN112159771A (zh) * | 2020-09-07 | 2021-01-01 | 南京师范大学 | 聚丙烯高效降解菌株licme 200610 wgh-6及其生产的菌剂和应用 |
| CN112159771B (zh) * | 2020-09-07 | 2022-09-09 | 南京师范大学 | 聚丙烯高效降解菌株licme 200610 wgh-6及其生产的菌剂和应用 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Application deemed to be withdrawn because no request for examination was validly filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20000801 |