JPH06319588A - 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法 - Google Patents

光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法

Info

Publication number
JPH06319588A
JPH06319588A JP13104193A JP13104193A JPH06319588A JP H06319588 A JPH06319588 A JP H06319588A JP 13104193 A JP13104193 A JP 13104193A JP 13104193 A JP13104193 A JP 13104193A JP H06319588 A JPH06319588 A JP H06319588A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
formula
optically active
group
derivative represented
norstatin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
JP13104193A
Other languages
English (en)
Inventor
Wataru Takahashi
亘 高橋
Kazumasa Otsubo
一政 大坪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Asahi Chemical Industry Co Ltd
Original Assignee
Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Asahi Chemical Industry Co Ltd filed Critical Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority to JP13104193A priority Critical patent/JPH06319588A/ja
Publication of JPH06319588A publication Critical patent/JPH06319588A/ja
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【目的】 各種レニン阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害
剤、制癌剤の中間体である光学活性なノルスタチン誘導
体をシアノヒドリン誘導体或いはアルデヒド誘導体か
ら、酵素を用いて立体選択的に製造する方法を提供す
る。 【構成】 シアノヒドリン誘導体或いはアルデヒド誘導
体から、ニトリル加水分解酵素を用いて立体選択的に、
光学活性なノルスタチン誘導体を製造する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、医薬品の中間体として
有用な光学活性ノルスタチン誘導体の立体選択的な製造
方法に関する。さらに詳しく述べれば、本発明は、各種
レニン阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、制癌剤の中
間体である光学活性なノルスタチン誘導体を、シアノヒ
ドリン誘導体あるいはアルデヒド誘導体から、酵素を用
いて立体選択的に製造する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】ノルスタチン誘導体の製造方法として
は、特開昭６２−３３１４１号公報、特開平１−１７２
３６５号公報、特開平４−２０８２５７号公報などが知
られている。また、酵素を用いた方法としては、特開平
２−６０５９５号公報などが既に知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかし、上記の方法で
は、中間体として生成するシアノヒドリン誘導体のジア
ステレオ選択性が低く、従って、目的である光学活性な
ノルスタチン誘導体を得るためには煩雑な精製が必要と
なる等の欠点があり、満足すべき製法とは言い難い。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記の課
題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、シアノヒドリン
誘導体あるいはアルデヒド誘導体から、酵素を用いて立
体選択的にノルスタチン誘導体を製造する方法を見い出
し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、
【０００５】 下記式（１）；
【化７】 〔式中、Ｒ1 は水素、あるいはアミノ基の保護基を表
し、Ｒ2 は置換あるいは無置換のアルキル基、アリール
基、アラルキル基を表す。また、（Ｓ）を記した炭素原
子はＳ配置である。〕
【０００６】で示されるシアノヒドリン誘導体に、酵素
を作用させる、下記式（２）；
【化８】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｓ）は前述と同意味を表す。〕
で示される光学活性なノルスタチン誘導体の立体選択的
な製造方法を提供する。さらに
【０００７】 下記式（３）；
【化９】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 は前述と同意味を表し、（Ｒ）を記
した炭素原子はＲ配置である。〕で示されるシアノヒド
リン誘導体に、酵素を作用させる、下記式（４）；
【０００８】
【化１０】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｒ）、（Ｓ）は前述と同意味を
表す。〕で示される光学活性なノルスタチン誘導体の立
体選択的な製造方法を提供する。さらに
【０００９】 下記式（５）；
【化１１】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｓ）は前述と同意味を表す。〕
で示される光学活性なアルデヒド誘導体に、シアン化合
物の存在下、酵素を作用させる、上記式（２）で示され
る光学活性なノルスタチン誘導体の立体選択的な製造方
法を提供する。さらに
【００１０】 及び下記式（６）；
【化１２】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｒ）は前述と同意味を表す。〕
で示される光学活性なアルデヒド誘導体に、シアン化合
物の存在下、酵素を作用させる、上記式（４）で示され
る光学活性なノルスタチン誘導体の立体選択的な製造方
法を提供する。以下に本発明を詳細に説明する。
【００１１】本発明において、式中、Ｒ1 は水素、ある
いはアミノ基の保護基を表し、Ｒ2は置換あるいは無置
換のアルキル基、アリール基、アラルキル基を表す。ま
た、（Ｓ）を記した炭素原子はＳ配置であり、（Ｒ）を
記した炭素原子はＲ配置である。この場合、アミノ基の
保護基としては、通常一級アミノ基に使用されるウレタ
ン型、アミド型などの保護基、特に好ましくは、本発明
の化合物を原料としての、各種プロテアーゼ阻害剤の製
造において都合の良い保護基、すなわち、水素添加によ
って容易に脱保護できるベンジルオキシカルボニル基、
あるいは酸分解によって容易に脱保護できるtert. −ブ
トキシカルボニル基等が望ましい。
【００１２】また、Ｒ2 で表されるアルキル基、アリー
ル基、アラルキル基とは、例えば、メチル基、エチル
基、イソプロピル基、ｔ−ブチル基などのような炭素数
１〜５のアルキル基；また、炭素数３〜８のシクロアル
カンが置換した、例えば、シクロヘキシルメチル基、シ
クロペンチルメチル基、シクロヘキシルエチル基などの
ようなアルキル部分の炭素数１〜５のシクロアルカン置
換アルキル基；フェニル基、ナフチル基、トリル基など
のようなアリール基、例えば、ベンジル基、フェネチル
基、ｐ−メチルベンジル基などのようなものが挙げられ
る。
【００１３】この場合に、アルキル基、アリール基、ア
ラルキル基は官能基を有してもよい。官能基としては、
例えば、一置換から三置換までの、例えば、フッ素基、
塩素基、臭素基などのようなハロゲン基；メトキシ基、
エトキシ基、イソプロポキシ基などのような炭素数１〜
５のアルコキシ基；カルボキシル基、例えば、メトキシ
カルボニル基、エトキシカルボニル基、イソプロポキシ
カルボニル基などのような炭素数１〜５のアルコキシカ
ルボニル基；ニトロ基、アミノ基、アミノカルボニル基
などが挙げられる。
【００１４】式（１）、式（３）、式（５）および式
（６）で示される化合物は、対応するＤあるいはＬアミ
ノ酸から、公知の方法により容易に製造される。本発明
に用いるニトリル加水分解酵素としては、ニトリルをカ
ルボン酸に変換する酵素、即ち、ニトリラーゼ、もしく
はニトリルヒドラターゼ、アミダーゼ活性を有する物を
使用することができる。
【００１５】例えば、アシネトバクター属、アルカリゲ
ネス属、シュウドモナス属、ロドシュウドモナス属、コ
リネバクテリウム属、バチルス側、マイコバクテリウム
属、ロドコッカスぞク、ノカルディア属、アルスロバク
ター属、モラキセラ属、クレブシエラ属、アクレモニウ
ム属またはキャンディダ属に属する微生物の中から選ば
れた微生物の酵素である。
【００１６】具体的な微生物としては、アシネトバクタ
ー エスピー ＡＫ２２６（ＦＥＲＭ ＢＰ−２４５
１）、アルカリゲネス フェカリス ＡＴＣＣ ８７５
０、シュウドモナス フルオレッセンス ＩＦＯ ３９
２５、ロドシュウドモナス スフェロイデス ＡＴＣＣ
１１１６７、コリネバクテリウム エスピー ＫＯ−
２−４（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３５３）、バチルス サブ
チリス ＣＮ５（ＦＥＲＭ ＢＰ−２３５４）、マイコ
バクテリウム エスピー ＡＣ ７７７（ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−２３５２）、ロドコッカス エスピー ＡＫ ３２
（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６）、ノカルディア グロベ
ルラ ＡＴＣＣ ２１５０５、アルスロバクター エス
ピー Ａ７（微工研菌寄託 第８９２７号）、モラキセ
ラ エスピーＤ１２（微工研菌寄託 第８９３３号）、
クレブシェラ エスピー Ｄ５Ｂ（微工研菌寄託 第８
９３２号）、アクレモニウム エスピー Ｄ９Ｋ（微工
研菌寄託 第８９３０号）、キャンディダ トロピカリ
ス ＡＴＣＣ ２０３１１等が挙げられる。これらの菌
株は何れも特開平２−８４１９８号公報、特開昭６３−
２０９５９２号公報に記載されている。
【００１７】本発明における反応方法は、ニトリル加水
分解酵素、即ち微生物またはその調製物と、前記式
（１）あるいは、前記式（３）で示されるシアノヒドリ
ン誘導体、もしくはシアン化合物の存在下、前記式
（５）あるいは、前記式（６）で示されるアルデヒド誘
導体を接触させることにより行われる。微生物またはそ
の調製物とは、具体的には、前記微生物を培養した培養
物、そこから集めた菌体または菌体処理物（例えば、菌
体の破砕物または菌体より分離抽出した酵素）、さらに
は、菌体または菌体処理物を適当な方法により担体に固
定化したものを示す。
【００１８】本発明で使用される微生物の培養は、公知
の方法に準じて行うことができる。使用する培地は、一
般微生物の栄養源として公知のものが利用でき、グルコ
ース、グリセリン、エタノール、シュークロース、グル
タミン酸、酢酸、クエン酸等の炭素源、硫酸アンモニウ
ム、塩化アンモニウム、アンモニア、尿素等の窒素源、
酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、肉エキス等の有機
栄養源、リン酸、マグネシウム、カリウム、鉄、コバル
ト、マンガン、ランタン等の無機栄養源を適宜組み合わ
せて使用できる。
【００１９】また、微生物の本発明における反応活性を
上昇させる物質として、イソブチロニトリル等のシアノ
化合物、カプロラクタム等のアミド化合物を添加しても
良い。培地のｐＨは５〜１０の範囲で選べば良く、培養
温度は１８〜５０℃、好ましくは２５〜４０℃である。
培養時間は１〜１０日の範囲で活性が最大になるまで培
養すれば良い。
【００２０】本発明における反応条件を次に説明する。
反応媒体は、水、緩衝液または培養液等の水性媒体、水
性媒体とジメチルスルホキシド、メタノール等の水溶性
有機溶媒との混合媒体、さらには、水性媒体と水不溶性
有機溶媒とからなる２相系媒体が使用できる。また、反
応媒体中に適当な界面活性剤を０．０１〜１０重量％程
度添加しても良い。反応媒体中への基質の添加は前記式
（１），（３），（５）あるいは式（６）で示される化
合物を粉末または液状のままで、あるいは適当な溶媒に
溶かして添加する。
【００２１】添加濃度は０．０１〜７０重量％程度、好
ましくは、０．１〜４０重量％であり、反応媒体中に完
全に溶解しなくても良い。原料としてアルデヒド誘導体
を用いる場合はシアン化ナトリウム、シアン化カリウム
等のシアン化合物をアルデヒド誘導体に対して０．５〜
３０倍モル、望ましくは、１〜１０倍モル添加する。
【００２２】反応に菌体を使用する場合の菌体濃度は通
常、０．０１〜４０重量％であり、好ましくは０．０５
〜２０重量％の範囲でよい。反応温度は５〜８０℃、好
ましくは１５〜６０℃、反応ｐＨは４〜１２、好ましく
は６〜１０である。反応は、通常１〜１００時間で目的
生成物である前記式（２）、あるいは前記式（４）の光
学活性ノルスタチン誘導体の光学純度が低下しない範囲
で終了すれば良く、通常、反応率は１０〜１００％、望
ましくは、４０〜１００％である。このときの生成物の
光学純度は８０％e.e.以上が望ましい。消費される基質
は上記の範囲内に維持されるように添加しても良い。
【００２３】本発明における反応機構は、ニトリルをカ
ルボン酸に変換する酵素であるニトリラーゼもしくはニ
トリルヒドラターゼ、アミダーゼがシアノヒドリンの２
位にＲ配置を有するニトリルに選択的に作用すること、
即ち、該酵素による反応速度が不斉中心によって非常に
大きく異なることに基づくと考えられる。さらに、作用
されずに残るもう一方のシアノヒドリン異性体は、シア
ン化合物の存在下、アルデヒド誘導体との平衡反応によ
り、自然にラセミ化されたシアノヒドリン誘導体とな
り、反応は進む。この結果、ラセミ体の原料に対する反
応率は５０％を越えることもできる。従って、原料とし
て前記式（５）あるいは、前記式(6) で示すアルデヒド
誘導体とシアン化合物も用いることができる。
【００２４】本発明における目的生成物の分離は、次の
ようにして行われる。反応終了液より菌体等の不溶物を
除去したのち、ｐＨをアルカリ性、好ましくは８．５〜
１２とし、水と混和しない不活性な溶媒、例えば、ベン
ゼン、ジエチルエーテル、クロロホルム、ヘキサン、酢
酸エチル等の溶媒により未反応物を抽出除去し、次に、
ｐＨを酸性、好ましくは２．０〜３．０とし、上記溶媒
で抽出することによって目的物を分離する。更に、目的
物の精製は、シリカゲルを用いたカラムクロマトグラフ
ィーや活性炭処理等により行われる。
【００２５】反応生成物、及び、原料の光学純度は例え
ば、キラルセルＯＤ−Ｒ、キラルセルＯＪ、キラルＡＧ
Ｐ（ダイセル化学工業株式会社）、Ceramospher Chira
l RU −１（資生堂）、SUMICHIRAL OA（住友化学分析
センター）等の光学分割カラム、あるいは、ノバパック
−Rhenyl（ウォーターズ）等を用いたＨＰＬＣ分析によ
って測定することができる。
【００２６】
【参考例】
（参考例１）Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｌ−シクロヘキシル
アラニナール（下記式(7) の合成：
【化１３】
【００２７】Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｌ−シ
クロヘキシルアラニノール２５．７３ｇ（９９．９８mm
ol）をＤＭＳＯ１２０ ml 及びトルエン５８ ml に加
え、０℃に冷却した。これにトリエチルアミン７５．７
ml （５４１．８９mmol) を加えた後に、三酸化硫黄−
ピリジン錯体８６．２４ｇ（５４１．８９mmol）を徐々
に加え、０℃で１時間攪拌した。反応終了後、反応液
に、酢酸エチル３００ ml及び氷水３００ ml を加え、
有機層を分液した後、飽和食塩水３００ ml で有機層を
３回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し
た後、濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１〜３：１）で
生成し、Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｌ−シクロ
ヘキシルアラニナール２５．０３ｇ（９８．０２mmol）
を収率９８．０４％で得た。
【００２８】ＩＲ（ＫＢｒ）：３３００，２９２０，１
７３０，１６７０，１５２０，１３７０，１２９０，１
１７５cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８−２．０（ｍ，１３
Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），４．２９（ｂ，１Ｈ），
４．９０（ｂ，１Ｈ），９．５９（ｓ，１Ｈ）。 ＭＳ m／e ：２５６（Ｍ＋１）+
【００２９】（参考例２）Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシル
アラニナール（下記式(8) の合成：
【化１４】 Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシル
アラニノールから、参考例１と同様な方法を用いて、Ｎ
−tert．−ブトキシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシルア
ラニナールを得た。
【００３０】ＩＲ（ＫＢｒ）：３３００，２９２０，１
７３０，１６７０，１５２０，１３７０，１２９０，１
１７５cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８−２．０（ｍ，１３
Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），４．２９（ｂ，１Ｈ），
４．９０（ｂ，１Ｈ），９．５９（ｓ，１Ｈ）。 ＭＳ m／e ：２５６（Ｍ＋１）+
【００３１】（参考例３）３−（Ｓ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−４−
シクロヘキシル−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒドロキシブチロニ
トリル（下記式（9)の合成：
【化１５】
【００３２】Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｌ−シ
クロヘキシルアラニナール１３．０１ｇ（５０．９４mm
ol）を水１３２ ml 及びクロロホルム５３５ ml に加
え、０℃に冷却した。これにシアン化ナトリウム７．４
９ｇ（１５２．８２mmol）を加えた後に、１Ｎ−ＨＣｌ
１５３ ml を滴下し、０℃で１２時間攪拌した。反応
終了後、反応液の有機層を分液した後、水層からクロロ
ホルム３００ ml で有機層を抽出した。合わせた有機層
を水３００ ml で２回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで
乾燥した後、濃縮し無色透明油状物、３−（Ｓ）−ter
t．−ブトキシカルボニルアミノ−４−シクロヘキシル
−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒドロキシブチロニトリル１４．３
８ｇ（５０．９４mmol）を収率１００％で得た。
【００３３】高速液体クロマトグラフィーの分析によ
り、シン体（２Ｒ，３Ｓ）が６４％、アンチ体（２Ｓ，
３Ｓ）が３６％であった。以下、その分析条件を示し
た。（カラム：ウォーターズ Nova-PaK Pheny １３，９
×４７mm 溶離液： pH ＝３．５ ０．０５Ｍ−ＫＨ2 ＰＯ4 −Ｈ3 ＰＯ4 ／ＣＨ3 ＣＮ＝
７０／３０ 流速：１ml／min 検出：ＲＩ検出器 保
持時間：２６，１min （シン），２４．５min（アン
チ））
【００３４】ＩＲ（ＮａＣｌ）：３３３０，２８５０，
２２５０，１６９５，１５１０，１４５５，１３７０，
１２５０，１１７０cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８：１．８（ｍ，１３
Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），３．６−４．１（ｍ，１
Ｈ），４．３−４．７（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｄ，１
Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），５．３５（ｂｒ，１Ｈ） ＭＳ m／e ：２８３（Ｍ＋１）+
【００３５】（参考例４）３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−４−
シクロヘキシル−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒドロキシブチロニ
トリル（下記式(10)の合成：
【化１６】
【００３６】Ｎ−tert．−ブトキシカルボニル−Ｄ−シ
クロヘキシルアラニナールから、参考例３と同様な方法
を用いて、３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボニルア
ミノ−４−シクロヘキシル−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒドロキ
シブチロニトリルを得た。高速液体クロマトグラフィー
の分析により、シン体（２Ｓ，３Ｒ）が６４％、アンチ
体（２Ｒ，３Ｒ）が３６％であった。
【００３７】ＩＲ（ＮａＣｌ）：３３３０，２８５０，
２２５０，１６９５，１５１０，１４５５，１３７０，
１２５０，１１７０cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８：１．８（ｍ，１３
Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），３．６−４．１（ｍ，１
Ｈ），４．３−４．７（ｍ，１Ｈ），４．７８（ｄ，１
Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），５．３５（ｂｒ，１Ｈ） ＭＳ m／e ：２８３（Ｍ＋１）+
【００３８】
【実施例】以下に実施例を挙げて、本発明を具体的に説
明するが、本発明は、これらに限定されるものではな
い。 （実施例１）３−（Ｓ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−４−
シクロヘキシル−２−（Ｓ）−ヒドロキシ酪酸（下記式
(11)の合成：
【化１７】
【００３９】グルコース１．０％、酵母エキス０．５
％、ポリペプトン０．５％、リン酸１カリウム０．２
％、硫酸マグネシウム０．０２％、塩化ナトリウム０．
１％、イソブチロニトリル０．１％を含み、 pH を７．
５とした殺菌培地１００ ml に、予め同培地で培養した
ニトリラーゼ活性を持つロドコッカス属細菌を１％植菌
し、３２℃で４８時間培養した。培養終了後、遠心分離
により集菌し、これを水道水１０ ml の入った三角フラ
スコ中に懸濁させた後、１０ ml のエタノールに溶解さ
せた５０ mg の３−（Ｓ）−tert．−ブトキシカルボニ
ルアミノ−４−シクロヘキシル−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒド
ロキシブチロニトリルを添加し、３０℃で４８時間反応
を行った。
【００４０】反応終了後、遠心分離により菌体を除去し
た後、その上清液から抽出・クロマト操作にて、１６ m
g の３−（Ｓ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−
４−シクロヘキシル−２−（Ｓ）−ヒドロキシ酪酸を収
率３０％で得た。参考例３のＨＰＬＣ分析（保持時間：
５．９min ）から光学純度は９０％e.e.であった。
【００４１】ＩＲ（ＫＢｒ）：３３５０，２９２０，２
８５０，１７２０，１６９０，１５１０，１３７０，１
２５５，１１７０cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８：２．１（ｍ，１３
Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），４．１−４．５（ｍ，２
Ｈ），５．１−５．６（ｂｒ，１Ｈ），５．７−６．１
（ｂｒ，１Ｈ） ＭＳ m／e ：３０２（Ｍ＋１）+
【００４２】（実施例２）３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−４−
シクロヘキシル−２−（Ｓ）−ヒドロキシ酪酸（下記式
(12)の合成：
【化１８】
【００４３】グルコースの代わりに酢酸アンモニウムを
用いる以外は実施例１と同じ組成の培地で培養したニト
リル加水分解活性を有するアシネトバクター属細菌を培
養した後集菌した。これを４０ ml の水が入った三角フ
ラスコに懸濁した後、１０ ml のメタノールに溶解した
３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ−４−
シクロヘキシル−２−（Ｒ，Ｓ）−ヒドロキシブチロニ
トリル８０ mg を添加し、３０℃で４８時間反応を行っ
た。
【００４４】反応終了後、遠心分離によって菌体を除去
し、上清をpH１０にしたのち４０ ml のクロロホルムを
加え、未反応体を除去した。ついで、水層の pH を１．
５にし５０ ml のクロロホルムで抽出した。有機層を濃
縮して５２ mg の３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボ
ニルアミノ−４−シクロヘキシル−２−（Ｓ）−ヒドロ
キシ酪酸を収率６０％で得た。ＨＰＬＣ分析（保持時
間：７．０min ）における光学純度は９１％e.e.であっ
た。
【００４５】ＩＲ（ＫＢｒ）：３３５０，２９２０，２
８５０，１７２０，１６９０，１５１０，１３７０，１
２５５，１１７０cm-1 ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：０．８：２．１（ｍ，１３
Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），４．０−４．３（ｍ，２
Ｈ），４．８−５．１（ｂｒ，１Ｈ），６．０−６．３
（ｂｒ，１Ｈ） ＭＳ m／e ：３０２（Ｍ＋１）+
【００４６】（実施例３）実施例１と同じ組成の培地で
培養したマイコバクテリウム属細菌を培養した後、集菌
した。これを４０ ml の０．０５Ｍリン酸カリウムバッ
ファー（ pH ７．２）が入った三角フラスコに懸濁した
後、１０ ml のメタノールに溶解したＮ−tert．−ブト
キシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシルアラニナール５０
０ mg とシアン化ナトリウム９６ mg を添加し、３０℃
で４０時間反応を行った。
【００４７】反応終了後、遠心分離によって菌体を除去
し、上清を抽出・クロマト操作を行うことにより５００
mg の３−（Ｒ）−tert．−ブトキシカルボニルアミノ
−４−シクロヘキシル−２−（Ｓ）−ヒドロキシ酪酸を
収率８５％で得た。ＨＰＬＣ分析における光学純度は９
３％e.e.であった。
【００４８】
【発明の効果】本発明により、各種レニン阻害剤、ＨＩ
Ｖプロテアーゼ阻害剤、制癌剤の中間体であるノルスタ
チン誘導体をニトリル加水分解酵素を用いて、常温常圧
の反応条件で製造できる。さらに、本発明によれば光学
純度の極めて高いノルスタチン誘導体を高選択的、か
つ、高収率で得ることが可能となった。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:32）

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 下記式（１）； 【化１】 〔式中、Ｒ1 は水素、あるいはアミノ基の保護基を表
    し、Ｒ2 は置換あるいは無置換のアルキル基、アリール
    基、アラルキル基を表す。また、（Ｓ）を記した炭素原
    子はＳ配置である。〕で示されるシアノヒドリン誘導体
    に、ニトリル加水分解酵素を作用させることを特徴とす
    る、下記式（２）； 【化２】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｓ）は前述と同意味を表す。〕
    で示される光学活性なノルスタチン誘導体の立体選択的
    な製造方法。
  2. 【請求項２】 下記式（３）； 【化３】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｒ）は前述と同意味を表し、
    （Ｒ）を記した炭素原子はＲ配置である。〕で示される
    シアノヒドリン誘導体に、ニトリル加水分解酵素を作用
    させることを特徴とする、下記式（４）； 【化４】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｒ）、（Ｓ）は前述と同意味を
    表す。〕で示される光学活性なノルスタチン誘導体の立
    体選択的な製造方法。
  3. 【請求項３】 下記式（５）； 【化５】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｓ）は前述と同意味を表す。〕
    で示される光学活性なアルデヒド誘導体に、シアン化合
    物の存在下、ニトリル加水分解酵素を作用させることを
    特徴とする、上記式（２）で示される光学活性なノルス
    タチン誘導体の立体選択的な製造方法。
  4. 【請求項４】 下記式（６）； 【化６】 〔式中、Ｒ1 、Ｒ2 、（Ｒ）は前述と同意味を表す。〕
    で示される光学活性なアルデヒド誘導体に、シアン化合
    物の存在下、ニトリル加水分解酵素を作用させることを
    特徴とする、上記式（４）で示される光学活性なノルス
    タチン誘導体の立体選択的な製造方法。
  5. 【請求項５】 ニトリル加水分解酵素をアシネトバクタ
    ー属、アルカリゲネス属、シュウドモナス属、ロドシュ
    ウドモナス属、コリネバクテリウム属、バチルス属、マ
    イコバクテリウム属、ロドコッカス属、ノカルディア
    属、アルスロバクター属、モラキセラ属、クレブシェラ
    属、アクレモニウム属、または、キャンディダ属に属す
    る微生物の中から選ばれた微生物の酵素を単独、または
    任意に組み合わせ用いることを特徴とする請求項１〜４
    のいずれかに記載の製造方法。
JP13104193A 1993-05-10 1993-05-10 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法 Withdrawn JPH06319588A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP13104193A JPH06319588A (ja) 1993-05-10 1993-05-10 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP13104193A JPH06319588A (ja) 1993-05-10 1993-05-10 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPH06319588A true JPH06319588A (ja) 1994-11-22

Family

ID=15048642

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP13104193A Withdrawn JPH06319588A (ja) 1993-05-10 1993-05-10 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPH06319588A (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6057452A (en) * 1996-05-08 2000-05-02 Pharmacia & Upjohn Company Process to prepare taxol

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6057452A (en) * 1996-05-08 2000-05-02 Pharmacia & Upjohn Company Process to prepare taxol
US6177573B1 (en) 1996-05-08 2001-01-23 Pharmacia & Upjohn Company Process to prepare taxol
US6307064B1 (en) 1996-05-08 2001-10-23 Pharmacia & Upjohn Company Process to prepare taxol

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0449648B1 (en) Process for producing R(-)-mandelic acid and derivatives thereof
EP0610048B1 (en) Process for producing optically active alpha-hydrocarboxylic acid having phenyl group
EP0610049B1 (en) Process for producing optically active alpha-hydroxycarboxylic acid having phenyl group
JP2003528572A (ja) アスパルテートでの酵素トランスアミノ化によるｌ−ホスフィノトリシンの製造方法
JPH0595795A (ja) Ｒ（−）−マンデル酸およびその誘導体の製造法
US5686298A (en) Enzymatic reduction method for the preparation of compounds useful for preparing taxanes
CA2237297C (en) Process for the preparation of (1s,4r)-or(1r,4s)-4-(2-amino-6-chloro-9h-purin-9-yl)-2-cyclopentene-1-methanol
JP3129663B2 (ja) 光学活性３−キヌクリジノール誘導体の製造法
JPH06319591A (ja) 光学活性なノルスタチン誘導体の製造法
JPH06319588A (ja) 光学活性なノルスタチン誘導体の製造方法
JP2000175693A (ja) （ｒ）−２−ヒドロキシ−１−フェノキシプロパン誘導体の製造方法
JP2003299495A (ja) 光学活性３−メチルグルタル酸モノエステルの製造方法
JP3078597B2 (ja) Ｌ−スレオ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）セリン誘導体の製造法
JP3960667B2 (ja) β−カルバモイルイソ酪酸類及びその製造方法
JP4565672B2 (ja) 光学活性β−シアノイソ酪酸類及びその製造方法
US20060172393A1 (en) Process for producing optically active alpha -methylcysteine derivative
WO1999004028A1 (fr) Procede de preparation d'un acide alpha-trifluoromethylacetique optiquement actif et des esters antipodes dudit acide, et methode de purification dudit acide
JPH07303491A (ja) 光学活性な酸アミドの製造法
JP4746019B2 (ja) 光学活性β−シアノイソ酪酸類及びその製造方法
JPH10210997A (ja) 光学活性３−キヌクリジノールの製法
JPH0576390A (ja) 光学活性なカルボン酸の製造方法
JP3090761B2 (ja) 光学活性乳酸の製造法
JPH04144697A (ja) 光学活性カルボン酸、ニトリル、アミドの製造方法
JP2003002872A (ja) リジン誘導体の製造方法
JP2007117034A (ja) 光学活性ニペコチン酸化合物の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
A300 Withdrawal of application because of no request for examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300

Effective date: 20000801