JPH06500532A

JPH06500532A - 骨髄毒性を減少させるマイトマイシン誘導体、その製法およびその用途

Info

Publication number: JPH06500532A
Application number: JP3508867A
Authority: JP
Inventors: テイルビアン，アブドルホッセン; ギオルギス，アレム; クラーク，ロバート・アール
Original assignee: ジョージタウン・ユニバーシティー
Priority date: 1990-04-25
Filing date: 1991-04-25
Publication date: 1994-01-20
Also published as: EP0533692A4; AU7792391A; WO1991016049A1; AU656137B2; CA2081346A1; US5091523A; EP0533692A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】骨髄毒性を減少させるマイトマイシン誘導体、その製法およびその用途関連出願についての説明本出願は、１９８８年８月２３日に出願したＵ、Ｓ、出願第０７／２３５．２２４号の一部継続出願である１９９０年４月２５日に出願したＵ、Ｓ、出願第０７１５１３．２６６号の一部継続出願であり、この内容は明細書中に充分に引用記載する。

発明の分野本発明は薬剤およびその用途の分野に属する。

発明の背景マイトマイシン類は下記一般式（１）：で示される化合物の族である。

マイトマイシン類Ａ、ＢおよびＣは、下記第１表に示すとおり、互いに関連している。符号Ｘ１ＹおよびＺは式１の符号である。

第１表マイトマイシン類は下記骨格（ｎ）て示されるミドサン化合物から誘導される。

ミドサン類は、人工的に調節された条件下で液体栄養培地中で微生物ストレプトマイセス・セスヒトサス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｃａｅｓｐｉｔｏｓｕｓ）を培養する間に形成される。ハタ（Ｈａｔａ）らに対するＵ、Ｓ特許第３．６６０．５７８号に開示されているとおり、得られた菌糸を分離した後、種々のマイトマイシン類を活性炭もしくは好ましくは非イオン交換樹脂吸着、有機溶媒抽出またはアルミナ上でのクロマトグラフィーによって後者から単離され得る。

ミドサン類は優れた抗生物質であるが、それらはヒト血液に対するそれらの毒性のために利用性を制限されていた［マツイ（Ｍａｔｓｕｉ）らに対するＵ、Ｓ、特許第３．４５０，７０５号を参照］。該化合物の比較的高い毒性は、抗生物質活性を増大させ、かつ毒性を減少させるマイトマイシンの誘導体類に関する調査を促進した。

例えば、マツイら、Ｕ、Ｓ、特許第３．４５０．７０５号には、７位がアミノ、低級アルキルアミノ、フェニルアミノまたはピリジルで置換され、１８位がハロアルカノイル、ハロベンゾイル、ニトロベンゾイル、アルケノイル、アセチル、グリシル、ソルボイルまたはアセチルメチオニルで置換されているマイトマイシン化合物が開示されている。

マツイら、Ｕ、Ｓ、特許第３．５５８．６５１号には、１ａ−アシル−７−アシルオキシ−９ａ−メトキシ化合物からなるミドサン誘導体類が開示されている。

あるマイトマイシン類およびマイトマイシン誘導体類は、抗腫瘍活性も有する。

オポシ（Ｏｂｏｓｈｉ）ら、ガン（Ｇａｎｎ）、５８：３１５−３２１（１９６７）；ウスブチ（Ｕｓｕｂｕｃｈｉ）ら、ガン、５８　：３０７−３１３（１９６７）＋マツィら、ジャーナル・オブ・アンチバイオティクス（Ｊ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）ＸＸ［：１８９　１９８（１９６８）；マツイらに対する日本国特許第６８０６６２７号（ケミカル・アブストラクツ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ａｂｓｔｒｕｃｔｓ）６９　：　８６９８６ｋ（１９６８））；およびチェノ（Ｃｈｅｎｇ）ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ　、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、　）２０　：　７６７−７７０（１９７７）。

マイトマイシンＣは実験的腫瘍の比較的広範囲のスペクトルに対して活性であるが、その毒性および骨髄抑制効果（ｍｙｅｌｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ）は臨床診療においてその用途を制限する（マイトマイシンＣ：現状および新規開発（ＭｉｔｏｍｙｃｉｎＣ：　Ｃｕｒｒｅｎｔ　５ｔａｔｕｓ　ａｎｄ　Ｎｅｗ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ）、カーター（Ｃａｒｔｅｒ）ら（編）、アカデミツク・プレス、ニューヨーク（１９７９））。前臨床学的および臨床学的研究において、マイトマイシンＣは種々のネズミおよびヒト腫瘍に対する活性を示したが、重篤な遅延型骨髄毒性も示した。ゴールディン、エイ（Ｇｏｌｄｉｎ、　Ａ、　）ら、マイトマイシンＣについてのＮＣＩ−ＥＯＲＴＣシンポジウム（ＮＣＩ−ＥＯＲＴＣＳｙｍｐｏｓｉｕ＋ｓ　ｏｎ　Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ　Ｃ）、ブラッセルズ、ベルギー（１９８１）。

他の研究において、５−フルオロウラシル、アドリアマイシンおよびマイトマイシンＣの配合物は、後生的胃癌および結腸直腸癌に罹患している患者の治療に有効であることが判明した。この療法は、２力月毎に一回投与スケジュールでマイトマイシンＣ投与を取り入れて、該化合物の治療制限遅延型骨髄抑制効果を減少させた。シエイン、ビー・ニス（Ｓｃｈｅｉｎ、　Ｐ、　Ｓ、）ら、マイトマイシンＣ：現状および新規開発（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ　Ｃ：　Ｃｕｒｒｅｎｔ　５ｔａｔｕｓ　ａｎｄ　Ｎｅｗ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ）、第１３３−１４３頁、カーターら（ｉｉ）、アカデミツク・プレス、ニューヨーク（１９７９）。

マイトマイシンＣの多くの合成誘導体類は、改良された治療特性を有する化合物を得る期待をもって製造された。これらの誘導体類は、アジリジン環上の置換、カルバモイル、またはヒドロキシメチル側鎖上のアシル基置換および他の官能基、特に置換アミン類でのキノン環の７＝置換基の置換を含む。しかし、レマーズ（Ｒｅｍｅｒｓ）ら、Ｕ、Ｓ、特許第４，２６８．６７６号に開示されているとおり、これらの類似物は、日本における最近の研究に含まれるマイトマイシンＣの７−ヒドロキシ類似体をできるだけ除いて、臨床学的薬物として明らかになったものはない。この類似物はマイトマイシンＣよりも白血球減少性が低いと主張されているが、効果もあまりない。全体的に、レマーズ（上記文献）によっても開示されているミドサン型の合成マイトマイシン類似物（モット（Ｍｏｔｔ）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー（Ｊ、Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、）２１　：　４９３（１９７８））は、主にそれらの抗菌活性のために製造される。

キノシタ、ニス（Ｋｉｎｏｓｈｉｔａ、　Ｓ、）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、１４　：　１０３−１１２（１９７１）には、１ａ、７および９ａ位が置換されたマイトマイシンのいくつかの誘導体が開示されている。特に、１８位がスルホニル、オルト−置換ベンゾイルおよびアシル誘導体で置換されている化合物が開示されていた。

イエンガー、ビー・ニス（Ｉ　ｙｅｎｇｅｒ、　Ｂ、　Ｓ、）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２４　：　９７５−９８０１９８１）には、７位および１８位に種々の置換基を有する一連の３１種類のマイトマイシンＣおよびポルフィロマイシン類似物が開示されている。７位の最も活性な置換基としてはアジリジン、２−メチルアジリジン、プロパルギルアミン、フルフリルアミン、メチルグリシネートおよび３−アミノピロリジンが挙げられる。

イエンガー、ビー（Ｉ　ｙｅｎｇｅｒ、　Ｂ　、　）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２６　：　１６−２０（１９８３）には、一連の７−置換マイトマイシンＣおよびポルフィロマイシン誘導体ならびに標準的な抗腫瘍システムにおけるそのスクリーニングが開示されている。該著者らは、７位がキノン環の還元を抑制すると報告しており、かくして、正常な細胞およびある癌細胞間の選択性を得るために７位の置換基を変えることが可能であろうと示唆している。

イエンガー、ビー・ニスら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２６：１４５３−１４５７（１９８３）には、７位を第２級アミンで置換した２０種類のマイトマイシンＣ類似物が開示されている。これらの類似物のうちの１１種類は、Ｐ３８８ネズミ白血病に対してマイトマイシンＣよりも活性であり、これらの１１種類のうちの２種類は白血球減少性が有意に低かった。該著者らは、該類似物の抗腫瘍活性および物理化学的特性の間の定量的関係は明らかではないが、キノン還元の比較的容易さは活性に関係していると報告している。

イエンガー、ビー・ニス、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２９・１８６４＝１８６８（１９８６）には、７−置換アミノ−１，２−アジリジノ−ミドセン類の製造が開示されている。該著者らは、アジリジン窒素上のメチル基がた７−アミツミトセン誘導体類は実質的に不活性であった。

サミ、ニス（Ｓａｍｉ、　Ｓ、　）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２７：７０１−７０８（１９８４）には、一連の３０種類のＮ７−フェニル −置換マイトマイシンＣ類似物が開示されている。７位にピラゾリルまたはアミノピリジル置換基を有する化合物のうちの２種類は、Ｐ３８８ネズミ白血病に対する活性においてマイトマイシンＣより明らかに優れていると開示されていた。

セミ。ティ（Ｓａｍｉ、Ｔ、）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー、２２：２４７−２５０（１９７９）には、マウスにおいて白血病１２１０に対する強い抗腫瘍活性を示した３種類の三糖類誘導体を含む、グリコジルアミン類のＮ−（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソカルバモイル誘導体が開示されている。さらに、Ｎ−ニトロソ尿素のグルコビラノース誘導体は免疫特性および骨髄スパーリング特性（ｍａｒｒｏｗ−ｓｐａｒｉｎｇ　ｐｒｏｐｅｒｔｙ）を有する。アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）ら、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）３５　：　７６１−７６５（１９７５）；パナッン（Ｐａｎａｓｃｉ）ら、ジャーナル・オブ・クリニカル・インベステイゲーション（ＪＣｌｉｎ、　Ｉ　ｎｖｅｓｔ、　）、６４：１１０３−１１１１（１９７９）。

Ｕ、　Ｓ、特許第４．７２０．５４３号には、下記一般式（ｍ）：［式中、Ｒ１はＮＨ２、Ｃ，−Ｃ４アルコキシおよびグリコジル残基からなる群から選択され；Ｒ２はＨ，Ｃｌ−Ｃ４アルキルおよびグリコジル残基からなる群から選択され、ただし、Ｒ３またはＲ２のいずれかは、同時にではなく、グリコジル基を含有する］で示される化合物が開示されている。

式（Ｉ［［）で示される該化合物は、優れた抗腫瘍活性を有し、同時に、減少した骨髄毒性およびより低い全体毒性を有する。

上記マイトマイシン誘導体にもかかわらず、良好な抗腫瘍特性ならびに低い骨髄および全体毒性を有する改良されたマイトマイシン誘導体が要求され続けている。

発明の概要本発明は、下記一般式（■）：し式中、ｎはＯまたは１；Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、および２− アミノ−１，３−シクロヘキサンジオール、あるいはそのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリド、もしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択され；Ｒは水素；Ｒ１は水素、Ｃ，−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミン、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバミルによって置換されているＣ、− Ｃ４アルキル、あるいはＲおよびＲ１は一緒になって５または６員の窒素含有環を形成する］で示されるマイトマイシン誘導体に関するものである。

本発明は、また、下記一般式（Ｖ）：［式中、ｎ、Ｒ，Ｒ’およびＹは上記定義と同じであり、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３０−である］で示されるマイトマイシン誘導体に関するものでもある。

本発明は、下記構造式（■）：［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３０−；Ｒ３は２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシピラノシルサツカリドまたは２−（４−モルホリニル）−２−デオキシピラノシルサツカリドである］で示されるマイトマイシン誘導体に関するものでもある。

また、本発明は、下記構造式（■）・［式中、Ｒは水素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル；ＡはＣ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジシン、ヘテロアリール、置換へテロアリール、またはＣ３−Ｃ，−へテロンクロアルキル：ｎはＯまたは１：ｎ、はＯまたは１：Ａ１は酸素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン、 −Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−：Ａ２は酸素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン、ＮＨ，ＮＲ，または−ＮＨ −Ｃ（＝Ｏ）−；Ｒ２はＯまたは１：Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、および１゜３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択され：ただし、ｎが１である場合、Ａ１はＣ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン：また、ｎがＯである場合、ｎｌおよびＲ２の一方はＯである］で示されるマイトマイシン誘導体に関するものでもある。

さらにまた、本発明は、式（■）［式中、Ｒは水素、Ｃｌ　Ｃａ＠鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡはＣｌ　Ｃ４１ｉｆＪｔｌ状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ｃＨ２Ｐｈ−）、ｆｌ換ベンシレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ，−へテロシクロアルキル。

ＱｏおよびＱゝはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１．３−ンクロヘキサンンオールー２−イル、あるいはその保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリド、あるいは式（■）。

（式中、Ｒ１は水素、Ｃ，−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ，アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているで示される基である］で示されるマイトマイシン誘導体に関するものでもある。

また、本発明は、式（Ｘ）［式中、Ｒは水素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡおよびＡ１はＣｌ　Ｃ４Ｂ鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジシン、ヘテロアリール、置換へテロアリール、またはＣｓ　Ｃｏ−へテロシクロアルキル：ＱｏおよびＱｌ′はアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１．３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはその保護誘導体、または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリド、もしくはトリアミノサツカリド、あるいは式（■）：（式中、Ｒ１は水素、Ｃ，−ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキン、アミ人グアニジ人イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているで示される基であるコて示されるマイトマイノン誘導体に関するものでもある。

本発明は、式（ＴＶ）・［式中、ｎは１゜Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、および１゜３−シクロヘキサンジオールー２−イル、あるいはそのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択され；Ｒは水素。

Ｒ１は水素、Ｃ，−Ｃ，アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ，アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾールまたはカルバモイルで置換されているＣｌ−Ｃ４アルキＲおよびＲ１は一緒になって５または６員の窒素含有環を形成するコて示されるマイトマイシン誘導体の製法であって、（ａ）脱水剤の存在下、Ｎ−保護アミノ酸をアルコールと縮合して活性エステルを得、（ｂ）工程（ａ）で得た活性エステルをアミノ化合物と縮合して保護アミノ酸− アミノ化合物コンジュゲート体を得、（Ｃ）工Ｗ（ｂ）で得た保護アミノ酸−アミノ化合物フンシュゲート体の保護基を除去してアミノ酸−アミノ化合物コンジュゲート体を得、（ｄ）工程（Ｃ）で得たアミノ酸−アミノ化合物コンシュケート体をマイトマイシンＡと縮合してマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものである。

本発明は、また、式（■）：［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３０−；Ｒ３は２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシサツカリドであるコて示されるマイトマイシン誘導体の製造方法であって、（ａ）シアノホウ水素化物の塩の存在下、ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルを２−アミノ −２−デオキシサツカリドと縮合して２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドおよび２−デオキシ−４−モルホリニルサツカリドを得、（ｂ）工程（ａ）で得た２−デオキシ−４−モルホリニルサツカリドから２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドを分離し、（Ｃ）工程（ｂ）で得た２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドをハロゲン化アセチルと反応させて２−デオキシ−１−ハロー２−（３−シアノ−４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドを得、（ｄ）工程（ｃ）で得た２−デオキシ−１−ハロー２−（３−シアノ−４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドをチオシアン酸銀で処理してサツカリド−１−チオシアネートを得、（ｅ）工程（ｄ）で得たサツカリド−１−チオシアネートとマイトマイシンＣまたはマイトマイシンＡを反応させてマイトマイシンＣ−またはマイトマイシンＡ −サツカリドペルアセテートカルボチオアミドを得、（ｆ）工程（ｅ）で得たマイトマイシンＣ−サツカリドベルアセテートのアセテート基を加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、また、下記式（■）：［式中、Ｒ２はＮＨ２−またはＣＨ３０−；Ｒ３は（４−モルホリニル）−２−デオキシサツカリドであるコで示されるマイトマイシン誘導体の製造方法であって、（ａ）シアノホウ水素化物の塩の存在下、ビス（アセトアルデヒド−２−イル）エーテルを２−アミノ−２−デオキシサツカリドと縮合して２−デオキシ−２−（３−ジアツー４−モルホリニル）サツカリドおよび２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サツカリドを得、（ｂ）工程（ａ）で得た２−デオキシ−２−（３−シアノ−４−モルホリニル）サツカリドから２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サツカリドを分離し、（Ｃ）工程（ｂ）で得た２−デオキシ−２−（４−モルホリニル）サツカリドをハロゲン化アセチルと反応させて２−デオキシ−１−ハロー２−（４−モルホリニル）ペルアセチルサツカリドを得、（ｄ）工程（Ｃ）で得た２−デオキシ−１−ハロー２−（４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドをチオシアン酸銀で処理してサツカリド−１−チオンアネートを得、（ｅ）工程（ｄ）て得たサツカリド−１−チオンアネートをマイトマイシンＡまたはＣと反応させてマイトマイシンＡ−またはＣ−サツカリドペルアセテートカルボチオアミドを得、（ｆ）工程（ｅ）で得たマイトマイシンＣ−サツカリドペルアセテートのアセテート基を加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、下記式（Ｖ）：［式中、ｎはＯまたは１；Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、および１゜３−シクロヘキサンジオール−２−イル、または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択され：Ｒは水素：Ｒ１は水素、Ｃ，−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシルニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ，アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニン人イミダゾールまたはカルバミルによって置換されているＣ、−Ｃ，アルキル、あるいはＲおよびＲ１は一緒になって５または６員の窒素含有環を形成し、Ｒ２はＮＨ２ −であるコで示されるマイトマイシン誘導体の製法であって、（ａ）塩基性条件下、マイトマイシンＣを無水コハク酸と縮合してマイトマイシンＣ−１ａ−コハク酸エステルを得、（ｂ）工ｆｕ（ａ）て得たマイトマイシンＣ−１ａ−コハク酸エステルを式（ＸＩ）［式中、Ｒ，Ｒ’およびｎは上記定義と同じであり、Ｙ２はグルコピラノノル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび１．３−ンアノヘキサンジオールー２−イルのヒドロキシル保護誘導体からなる群から選択されるヒドロキシル保護サツカリドまたは対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドである］て示される化合物と縮合し、（Ｃ）該ヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、また、下記式（Ｖ）：［式中、ｎは０または１、Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトノル、グルコフラノシル、マルトシル、および１゜３−シクロヘキサンノオールー２−イルまたは対応するアミノサ・ツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択され、Ｒは水素、Ｒ１は水素、ＣｌＣ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ，アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキン、アミノ、グアニジノ、イミダゾールもしくはカルバミルで置換されているＣ、−Ｃ，アルキル、あるいはＲおよびＲ１は一緒になって５または６員窒素含有環を形成し、Ｒ２はＣＨ３０ −であるコて示されるマイトマイシン誘導体の製法であって、（ａ）塩基性条件下、マイトマイノンＡを無水コハク酸と縮合してマイトマイシン、へ−１ａ−コハク酸エステルを得、（ｂ）工程（ａ）で得たマイトマイ／ンＡ−１．ａ−コハク酸エステルヲ式（Ｘ［）　：［式中、ＲＳＲ’およびｎは上記定義と同じであり、Ｙ２はグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシルおよび１．３−シクロヘキサンジオール−２−イルのヒドロキシル保護誘導体からなる郡から選択されるヒドロキシル保護サツカリドまたは対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリドである］で示される化合物と縮合し、（Ｃ）工程（ｂ）で得た化合物からヒドロキシル保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、また、下記式（■）：［式中、Ｒは水素、ｃ、−ｃ、ｉｉ鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡはＣＩ−Ｃ４！ｌ１Ｊｌ状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジシン、ヘテロアリール、置換へテロアリール、またはＣｓ　Ｃａ−へテロノクロアルキル、Ａ１は酸素、ｎ２は０、Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キンロピラノンル、セロビオノル、ラクトシルおよびグルコピラノシル、マルトノルあるいはそのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサ、。

カリドもしくはトリアミノサツカリドからなる群から選択される］て示されるマイトマイシン誘導体の製法であって、（ａ）ハロゲン化アセチルをサツカリド（Ｙ−Ｈ）と縮合して１−７１０ペルアセチルサツカリドを得、（ｂ）工程（ａ）で得た１−ハロペルアセチルサツカリドを式ＨＯＡ　ＮＯ２Ｃ式中、Ａは上記定義と同じ］で示される化合物と縮合してニトロサツカリド誘導体を得、（。）工程（ｂ）で得たニトロサツカリド誘導体のニトロ基を還元して第１級アミノサツカリドを得、（ｄ）工程（Ｃ）で得た第１級アミノサツカリドを式（ＸＩ［）で示されるマイトマイシンＡ誘導体と縮合してマイトマイシンＣ−サツカリドペルアセテートを得、（ｅ）工程（ｄ）で得たマイトマイシンＣ−サツカリドペルアセテートのアセテート基を加水分解して式（■）で示されるマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイノン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、式（■）［式中、ｎおよびｎ、は０、ｎ２は１、Ａ２は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−１Ｒ，ＡおよびＹは上記定義と同じである］で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法であって、（ａ）ハロゲン化アセチルをサツカリドと縮合して１−ハロベルアセチルサツカリドを得、（ｂ）アジド塩を工程（ａ）で得た化合物と縮合して１−アジドサツカリド誘導体を得、（Ｃ）工程（ｂ）で得た１−アンドサツカリド誘導体を還元して１−第１級アミノサツカリドを得、（ｄ）工程（Ｃ）で得た１−第１級アミノサツカリドを式ＰｈＣＨ２０Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで示される化合物と縮合してベンンルオギシカルボニル保護サツカリド誘導体を得、（ｅ　）工程（ｄ　）で得たベンノルカルボニル保護サツカリド誘導体を還元して式Ｙ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ａ−ＮＨ２て示される化合物を得、（ｆ）工程（ｅ）で得た式Ｙ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ａ−ＮＨｚで示される化合物を式（■）て示されるマイトマイシンＡ誘導体と縮合してペルアセチルサツカリド−結合マイトマイシン誘導体を得、（ｇ）工程（ｆ）で得たベルアセチルサンカリドー結合マイトマイシン誘導体のアセテート基を加水分解して式（■）で示されるマイトマイシン誘導体を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、また、下記式（■）。

［式中、ｎは１、ｎ、はＯまたは１、ｎ２は０、Ａ１はＣ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレンである］で示されるマイトマイシン誘導体の製造方法であって、（ａ）式Ｙ−（ＡＩ）、１−８Ｈで示されるヒドロキシ保護化合物を式ＣＨ３−０−Ｃ（＝Ｏ）　５Ｓ− Ａ−ＮＨ２で示される化合物と縮合してＹ−（ＡＩ）。、−５Ｓ−Ａ−ＮＨ２を得、（ｂ）工程（ａ）で得たＹ　（Ａｔ）−＋　ＳＳ　Ａ−ＮＨ２を式（ＸＩ［戸て示されるマイトマイシンＡ誘導体と縮合してヒドロキシル保護サツカリド− 結合マイトマイシン誘導体を得、（Ｃ）工程（ｂ）で得たヒドロキシル保護サツカリド−結合マイトマイシン誘導体の保護基を除去してマイトマイシン誘導体（■）を得ることからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、式（■）：［式中、Ｒは水素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡはＣｌ−Ｃ４１ｌ！鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジシン、ヘテロアリール、置換へテロアリール、または０３−０６−へテロシクロアルキル、ＱｏおよびＱｂはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはその保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリド、あるいは式（■）：（式中、Ｒ１は水素、ＣｌＣ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミ／、グアニジ人イミダゾリルまたはカルバモイルで置換されているｃ、−Ｃ，アルキル、で示されるマイトマイシン誘導体の製法であって、式（ＸＩ［［）　：で示される化合物を式（Ｘ［［）　：で示されるマイトマイシンＡ誘導体と縮合することからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、式（Ｘ）：［式中、Ｒは水素、Ｃ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡおよびＡ、はＣ，−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジシン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、Ｗ換ヘンンレン、ヘテロアリール、置換へテロアリール、またはＣｊ−Ｃ６−へテロシクロアルキル、Ｑ”およびＱ５はアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イルあるいはその保護誘導体または対応するアミノサツカリド、ジアミノサツカリドもしくはトリアミノサツカリド、あるいは式（■）：（式中、Ｒ＋は水素、Ｃ，−Ｃ，アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ，−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキン、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルまたはカルバモイルで置換されているＣ、−Ｃ，アルキル、Ｑ＝０〜４）で示される基である］て示されるマイトマイノン誘導体の製法であって、式（ＸＩＶ）て示される化合物を式（Ｘ［［）　：て示されるマイトマイシンＡ誘導体と縮合することからなるマイトマイシン誘導体の製法に関するものでもある。

本発明は、本発明のマイトマイシン誘導体の治療的に有効な量および医薬的に許容される担体からなる医薬組成物に関するものでもある。

本発明は、動物に本発明の医薬組成物を投与することからなる細菌感染の治療方法に関するものでもある。

本発明は、動物に本発明の医薬組成物を投与することからなる、増殖抑制され易い癌細胞の増殖を抑制することによる癌の治療方法に関するものでもある。

図面の説明第１図は、数種類の濃度の薬物マイトマイシン−ＣＸＭＣ−１−７７およびＭＣ −１−６２に対するＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳房腫瘍細胞株の応答を示すグラフである。

第２図は、数種類の濃度の薬物マイトマイシン−Ｃ，ＭＣ−１−７７およびＭＣ −１−６２に対するＭＣＦ−７ヒト乳房腫瘍細胞株の応答を示すグラフである。

　第３図は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の細胞集団動態へのマイトマイシン−Ｃ，ＭＣ−７７およびＭＣ−６２の効果を示す３つのグラフである。マイトマイシン−ＣおよびＭＣ−７７は共に細胞増殖の速度を有意に抑制した。

第４図は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の足場依存性コロニー形成能への種々の濃度のマイトマイシン−ＣＳＭＣ−７７およびＭＣ−６２の効果を示す。

第５図は、２種類の足場非依存性コロニー形成アッセイの結果を示す２つのグ本発明のマイトマイシン誘導体の合成調製は、それらの出発点としてマイトマイシンＣを有する。マイトマイシンＣは、概してチェノ（Ｃｈｅｎｇ）ら、ジャーナル・メディシナル・ケミストリー（Ｊ　、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、　）、２０　：　７６７−７７０（１９７７）に開示されている方法に従って調製され得る。

別法として、マイトマイシンＣは、マツイ・エム（Ｍａｔｓｕｉ、　Ｍ、　）ら、ジャーナル・オブ・アンチバイオティクス（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）ＸＸ［：　１８９（１９６８）によって開示されているようなメタノール性アンモニア溶液でマイトマイシンＡを処理することによってマイトマイシンＡから得ることができる。

ｎ＝ｏである式（ＩＶ）で示されるマイトマイシン誘導体（ＸＶＩ）は、極性有機溶媒中、塩基性条件下で、マイトマイシンＡ　（Ｘｌ［）のメトキシ基をアミノ化合物、例えばグルコサミン（Ｙ−ＮＨｚ：（ＸＶ））のアミノ基で置換してＮ７−置換マイトマイシン誘導体（ＸＶＩ）を得ることによって得ることができる（下記反応式Ｉを参照）。

７位で置換できるアミノ化合物（Ｙ−ＮＨ２）としては、限定されないが、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、キシロサミン、セロビオサミン、マルトサミンおよび２−アミノ−１，３−シクロヘキサンジオールならびにそのヒドロキシル保護誘導体が挙げられる。基ｒＹＪからなるサツカリドはアミノ基で２位を置換されているのが好ましい。本発明で使用され得る極性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパツール、ジメチルスルホキシドおよびジメチルホルムアミドが挙げられる。反応の塩基性条件を与えるために適している塩基としては、Ｃｌ−Ｃ５トリアルキルアミン類、ジイソプロピルエチルアミン、１，８−ジアザビンクロ［５，４，０１ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）のようなアルキルアミン類が挙げられる。一般に、マイトマイシンＡおよびアミノ誘導体はモル比１：１で存在させるが、過剰のアミノ誘導体が存在してもよい。確実に反応を全体的に塩基性のままにしておくのに充分な塩基を反応混合物中に存在させる。

式ＸＶＩで示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−（２−デオキシグルコビラノシル）マイトマイシンＣＳＮ’−（２−デオキシガラクトピラノシル）マイトマイシンＣ，Ｎ”−（テトラアセチル−２−デオキシグルコビラノノル）マイトマイシンＣ１およびＮ７（テトラアセチル−２−デオキシガラクトピラノノル）マイトマイノンＣが挙げられる。

反応経路ｌｎ＝１である式（ＴＶ）で示されるアミノ酸結合マイトマイシン誘導体は、Ｎ− 保護アミノ酸、例えばＮ−ベンジルオキシカルボニル誘導体（Ｘ■）を、例えば活性エステルを生じさせることができるＮ−ヒドロキシスクシンアミドのようなアルコールおよび脱水剤と縮合して活性エステル（Ｘ■）を得ることによってマイトマイシンＡから製造できる（反応経路■）。この方法で使用できる脱水剤としては、限定されないが、ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）およびジエチルアゾジカルポキンレート（ＤＥＡＤ）およびトリフェニルホスフィンが挙げられる。

該活性エステル（Ｘ■）を上記アミノ化合物（ＸＶ）のいずれかで処理して保護アミノ酸−アミノ化合物コンジュゲート体（ＸＩＸ）を得る。例えばＮ−ベンジルオキシカルボニル基の水素化分解によって、保護基を除去して遊離アミノ誘導体（ＸＸ）を得る。次いで、化合物（ＸＸ）を、上記と同様に一０ＣＨ３の置換によってマイトマイシンＡ　（ＸＩ）と縮合してアミノ酸結合マイトマイシン誘導体ＱＶ）を得ることができる。

ｎ＝１、Ｒ１＝ＨおよびＲ＝Ｈである式（ＩＶ）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−［［［（２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミノ］カルボニル］メチル］マイトマイシンＣおよびＮ’−［［［（テトラアセチル−２−デオキシ−２−グルコピラノシル）アミノコカルボニル］メチル］マイトマイシンＣが挙げられる。

反応経路■ ｖＲ２がＮＨ２、ｎが０である式（Ｖ）で示されるマイトマイシン誘導体（下記式（ＸＸ［））は、マイトマイシンＣ（ＸＸＩ［）を無水コハク酸と縮合してアミド（ＸＸＩ［Ｉ）を得、次いで、これを、上記脱水剤のいずれがを使用してヒドロキシル保護アミド誘導体Ｙ　”　−Ｎ　Ｈ２（Ｘ　Ｘ　ｒＶ　）と縮合し、次いで脱保護して（ＸＸＶ）を得ることによって製造できる（反応式■）。アミン誘導体の保護基としては、限定されないが、Ｃ２−Ｃ４アシルエステル類が挙げられる。

式（ＸＸＶ）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−［［２ −［［（２−チオキシ−２−グルコピラノシル）アミノコカルボニルコニチル］カルボニル］マイトマイシンＣが挙げられる。

反応経路■ Ｒ２が一〇ＣＨ５、ｎがＯである式（Ｖ）で示されるマイトマイシン誘導体（下記式（ＸＩＸ））は、無水メタノール中、マイトマイシンＣ（ＸＸＩＩ）をナトリウムメトキシドで処理してマイトマイシンＡ　（Ｘｌ［）を得、次いで、無水コハク酸と縮合してマイトマイ／ンＡ−１ａ−コハク酸エステル（ＸＸＶＩ）を得ることによって製造できる（反応経路■）。上記と同様に、（ＸＸＶＩ）のカルボン酸基をヒドロキシル保護アミノ誘導体Ｙ’−ＮＨ２（ＸＩＶ）と縮合し、次いで、脱保護して（ＸＸ■）を得る。

式（ＸＸ■）で示される好ましいマイトマイシン誘導体として（、ヨ、Ｎ’−［［２−［［（２−チオキシ−２−グルコピラノシル）アミノ］カルボニル］エチル］カルボニル］マイトマインンＡが挙げられる。

反応経路■ 式■で示されるマイトマイシン誘導体は、反応経路Ｖに示される反応系列に従って製造できる。極性有機溶媒中、３．４−ジヒドロキシテトラヒドロフラン（ＸＸ■）を過ヨウ素酸ナトリウム水溶液で処理してビス（アセトアルデヒド−２− イル）エーテル（ＸＸＩＸ）を得、シアノホウ水素化物の塩の存在下、これを２ −アミノ−２−デオキシ−サツカリド（ＸＸＸ）と縮合して２−デオキシー２− （３−シアノ−４−モルホリノ）サツカリド（（ＸＸＸＩａ）、Ｑ＝−ＣＮ）および２−デオキシ−４−モルホリニルサツカリド（（ＸＸＸ［ｂ）、Ｑ＝−Ｈ）の混合物を得、これを、例えばカラムクロマトグラフィーによって、分離できる。シアノホウ水素化物の塩としては、シアノホウ水素化物のアルカリ金属塩のいずれか、好ましくはシアノホウ水素化ナトリウムが挙げられる。サツカリド誘導体（ＸＸＸＩａ）をハロゲン化アセチルで処理して２−デオキシ−１−ハロー（４−モルホリニル）ベルアセチルサツカリドを得、これをチオシアン酸銀と反応させて１−チオシアネートサツカリド（ＸＸＸｌ［）を得る。チオシアネート（ＸＸＸｉ［）をマイトマイシンＣ（ＸＸｌ［）と縮合してマイトマイシンＣ−サツカリドベルアセテートカルボチオアミド（ＸＸＸｍ）を得る。（ＸＸＸＩＩ）を、例えばメタノール性アンモニアで、脱アシル化して（ＶＩＸＱ＝−ＣＮまたはＨ）を得る。

式■で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、２−（３−シアノ−４ −モルホリニル）２−デオキシグルコピラノシルマイトマイシン−１ａ−カルボチオアミドおよび２−（３−シアノ−４−モルホリニル）−２−デオキシガラクトピラノシルマイトマイシン−１ａ−カルボチオアミドが挙げられる。

反応経路Ｖ式■で示されるマイトマイシン誘導体は、反応経路■、■および■で示される反応系列に従って製造できる。反応経路■に示すように、サツカリド（ＸＸＸＩＶ）を、まず、ハロゲン化アセチルと反応させて１−ハロベルアセチルサツカリド（ＸＸＸＶ）を形成する。次いで、この化合物をｐ−ニトロフェノールと縮合して（ＸＸＸＶＩ）を得る。ニトロ基を、炭素上パラジウムのような水素添加触媒と反応させてアニリン誘導体（ＸＸＸ■）を得る。（ＸＸＸ■）をマイトマイシンＡ誘導体（ＸＩ［）と縮合してマイトマイシン誘導体（ＸＸＸ■）を得る。

反応経路■ 別法として、ｌ−ハロベルアセチルサツカリド（ＸＸＸＩＸ）（反応経路■を参照）０２および水素のような水素添加触媒を使用して（ＸＸＸＸ）の接触水素添加をしてアノマーアミン（ｘＸｘｘ［）を得る。（ＸＸＸＸ［）を式（ＸＸＸＸ［）で示されるカルボン酸と縮合して中間体（ＸＸＸＸＩＩＩ）を得る。水素雰囲気下で炭素上パラジウム反応経路■ 式■て示される他のマイトマイシン誘導体は、反応経路■に示すように製造できる。１−チオサツカリド（ｘｘｘｘＶＩ）をジチオアミン（ＸＸＸＸ■）と反応させて第１級アミン（ｘｘｘｘ■）を得る。次いで、式（ＸＸＸＸ■）で示される化合物をさらにマイトマイシンＡ誘導体（店）と反応させてマイトマイシン誘導体（ＸＸＸＸＩＸ）を得る。

反応経路■ 式（■）で示されるマイトマイシン誘導体は、例えば、反応経路■に示すように、極性有機溶媒中、マイトマイシンＡ誘導体（ＸＩ［）を式（Ｌ）で示されるアミノ化合物で処理することによって製造できる。

式（■）で示される好ましいマイトマイシン誘導体としては、Ｎ’−（４−ホスフェートフェニル）マイトマイシンＣが挙げられる。

反応経路■ しＩＩＩ式（Ｘ）で示されるマイトマイシン誘導体は、例えば、反応経路Ｘに示すように、極性有機溶媒中、マイトマイシンＡ誘導体（ＸＩ［）を式（ＬＩ）て示されるアミノ化合物で処理することによって製造できる。

反応経路Ｘ典型的なＣＩ　Ｃ４アルキル基としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ− プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、およびｉ−ブチル基が挙げられる。

典型的なヘテロアリール基としては、フリル、チェニル、ピロリル、チアゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリジニルおよびオキサシリル基が挙げられ、これらはベンゼン環と縮合できる。

典型的な置換へテロアリール基としては、ハロ、Ｃｒ　−Ｃｓアルキルなどで置換されている上記へテロアリール基が挙げられる。

典型的なＣｓ　Ｃａへテロシクロアルキル基としては、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリノおよびピロリジニル基が挙げられる。

本発明の化合物は、医薬的に許容される塩の状態で存在できる。好ましいアニオン対イオンのうち、塩化物、臭化物、またはフッ化物のような、（ハロゲン化水素酸から誘導された）ハロゲン化物のものがある。他のアニオンとして、スルホネートまたはｐ−トルエンスルホネートが挙げられる。

抗生物質として、本発明化合物は、親化合物の抗菌作用に影響され易い全ての微生物に対して有用である。これらの微生物としては、限定されないが、シュードモナス（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、スタフィロコッカス（Ｓ　ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、サルシニア（Ｓ　ａｒｃｉｎｉａ）、ジブロコツカス（Ｄ　１ｐｌｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトコッカス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｅｔｅｒｉｕｍ）、ヘモフィルス（Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）、エシェリキア（Ｅ　ｓｃｈｅｒｉｃＭａ）、クレブシェラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス（Ｐ　ｒｏｔｅｕｓ）、サルモネラ（Ｓ　ａｌｍｏｎｅｌｌａ）、シゲラ（Ｓ　ｈｉｇｅｌｌａ）、プルセラ（Ｂｒｕｅｅｌｌａ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｅｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ノカルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）、サツカロマイセス（Ｓ　ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉ１１ｉｕ＋ｉ）およびアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）が挙げられる。本発明化合物で処置可能な特定の微生物としては、シュードモナス・アエルギノーザ（Ｐ　ｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、スタフィロコッカス舎アウレウス（Ｓ　ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）、スタフィロコッカス・アルプス（Ｓ　ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｌｂｕｓ）、スタフィロコッカス・シトレウス（Ｓ　ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｉｔｒｅｕｓ）、サルシナ・ルテア（Ｓａｒｃｉｎａ　１ｕｔｅａ）、ジブロコッカス費ニューモニエ（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ヘモリティカス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、ストレプトコッカス・ラクティス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　１ａｃｔｉｓ）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、ヘモフィルス・ペルトウシス（Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）、クレブシェラ参ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐ　ｒｏｔｅｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ）、サルモネラ・チフォサ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｔｙｐｈｏｓａ）、サルモネラ・バラチフィ（Ｓ　ａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｐａｒａｔｙｐｈｉ）、シゲラ・ディセンテリエ（Ｓｈｉｇｅｌｌａｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、プルセラ°アポータス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｂｏｒｔｕｓ）、プルセラ・メガテリウム（Ｂ　ｒｕｃｅｌｌａ　ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｗ）、プルセラ・ミコイデス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、プルセラ・アントラシラス（Ｂｒｕｃｅｌｌａ　ａｎｔｈｒａｃｉｕｓ）、マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　Ａ　Ｔ　ＣＣ６０７、マイコバクテリウム・アビアム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｖｉｕｍ）、マイコバクテリウム・フレイ（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｐｈｌｅｉ）、ノカルジア・アステロイデス（Ｎｏｅａｒｄｉａ　ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、サツカロミセス・セルビシエ（Ｓ　ａｃｃｈａｒｏ＋ａｙｃｅｓ　ｃｅｒｖｉｓｉａｅ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）、ペニシリウム・グラカム（ＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕＩｌｌｇｌａｃｕｍ）およびアスペルギルス・ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ）が挙げられる。

本発明のマイトマイシン誘導体は、防腐薬として、すなわち消毒用としてイン・ビトロで有用である。該化合物は、例えば、ブドウ球菌性皮膚炎、細菌性肺炎、レブトブセロシス（ｌｅｐｔｏｐｓｅｒｏｓｉｓ）、リケッチア症、サルモネラ症などの場合、病原細菌と戦う際に、治療薬として局所的および内部的に有用でもある。

典型的には、局所的投与については、本発明のマイトマイシン類は、０．０１〜１０００μｇ／ｍｌの範囲の濃度を有する組成物中で適用される。

抗腫傷薬としては、本発明化合物は、限定されないが、親化合物によって細胞増殖抑制され易い癌を含む種々の癌を治療する際に有用である。親化合物による癌の治療は、以下の文献に開示されている。

トリスコール、ジェイ・ニス（Ｄｒｉｓｃｏｌｌ、　Ｊ　、　Ｓ、　）ら、キャンサー・ケモセラピー・レポート（Ｃａｎｃｅｒ　ＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐＶ　Ｒｅｐ、）、４　：　１（１９７４）。

コジマ、アール（Ｋｏｊｉｍａ、　Ｒ，）ら、キャンサー・ケモセラピー・レポート、３：１１１（１９７２）。

スギウラ、ケイ（Ｓ　ｕｇｉｕｒａ、　Ｋ、　）、キャンサー・リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、）、１９：４３８（１９５９）。

オポシ、ｚス（Ｑｂｏｓｈｉ、　Ｓ、）ら、ガン（Ｇａｎｎ）、５８　：　３１５（１９６７）。

スギウラ、ケイ、キャンサー・ケモセラピー・レポート、１３：５１（１９６１）。

ペンディティ、ジェイ・エム（Ｖｅｎｄｉｔｔｉ、　Ｊ　、　Ｍ、　）ら、癌化学治療の進歩（Ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ）、第２０１〜２０９頁（１９７８）、編集者：エイチ・ウメザワ（Ｈ，Ｕ＋ｎｅｚａｖａ）ら、ジャパン・ソサイエティ・プレス、トーキヨー／ユニバーシティ・パーク・プレス、ボールチモア。

ウスブチ、アイ（Ｕｓｕｂｕｃｈｉ、　Ｉ　、　）ら、ガン、５８　：　３０７（１９６７）。

本発明のマイトマイシン誘導体によって治療される典型的な癌としては、限定されないが、胃および膵臓腫瘍が挙げられる（シェイン、ビー・ニス（Ｓ　ｃｈｅｉｎ、　Ｐ。

Ｓ、）ら、マイトマイシンＣ：現状および新規開発（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ　Ｃ：　ＣｕｒｒｅｎｔＳｔａｔｕｓ　ａｎｄ　Ｎｅｗ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ）、第１３３〜１４３頁、カーター（Ｃａｒｔｅｒ）ら編、アカデミツク・プレス、ニューヨーク（１９７９）。本発明の化合物を使用して治療できる他の癌としては、肺、乳房、肛門、結腸直腸、頭および首、ならびに黒色腫が挙げられる。

本発明の化合物は、以下の腫瘍系に対しても活性である：白血病Ｌ−１２１０、白血病Ｐ３８８、Ｐ１５３４白血病、フレンドウィルス白血病、白血病Ｌ４９４６、メッカ・リンパ肉腫（Ｍｅｃｃａ　ｌｙｍｐｈｏｓａｒｃｏｍａ）、ガードナー・リンパ肉腫（Ｇａｒｄｎｅｒ　ｌｙｍｐｈｏｓａｒｃｏｍａ）、リッジウェイ骨原性肉腫（Ｒｉｄｇｗａｙ　Ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｓａｒｃｏｍａ）、肉腫１８０（腹水）、ワグナ−前原性肉腫（Ｗａｇｎｅｒ　ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｓａｒｃｏｍａ）、肉腫Ｔ２４１、ルイス肺癌（Ｌｅｖｉｓ　ｌｕｎｇ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、癌７５５、ＣＤ８Ｆ、乳癌、結腸３８、癌１０２５、エールリッヒ癌（Ｅ　ｈｒｌｉｃｈ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ）（腹水および固体）、クラジス２癌（Ｋｒｕｂｓ　２　ｃａｒｃｉｎｏｍａ）（腹水）、バラシュホード癌６３　（Ｂ　ａｓｈｆｏｒｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　５３　）、腺癌Ｅ　０７７１、ＢＩ３黒色腫、ハーディングーパッセー黒色腫、ギロマ２６（Ｇｉｌｏｍａ　２６）、ミョナ腺癌（Ｍｉｙｏｎａａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）、ウォーカー癌肉腫２５６、フレクスナーージョブリング癌（Ｆ　１ｅｘｎｅｒ　−Ｊ　ｏｂｌｉｎｇ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、イエンセン肉腫、イグレシアス肉腫（Ｉ　ｇｌｅｓｉａｓ　ｓａｒｃｏｍａ）、イグレシアス卵巣腫瘍（Ｉ　ｇｌｅｓｉａｓ　ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒ）、マーフィー−スターンリンパ肉腫（Ｍｕｒｐｈｙ　−Ｓ　ｔｕｒｎ　１ｙ＋＋＋ｐｈｏｓａｒｃｏｍａ）、ヨシダ肉腫（Ｙｏｓｈｉｄａ　ｓａｒｃｏｍａ）、ダニング白血病（Ｄｕｎｎｉｎｇ　ｌｅｕｋｅｍｉａ）、ラウス・ニワトリ肉腫（Ｒｏｕｓ　ｃｈｉｃｋｅｎ　ｓａｒｃｏｍａ）およびクラブｅハムスター肉腫（Ｃｒａｂｂ　ｈａｍｓｔｅｒｓａｒｃｏｍａ）。

本発明の医薬組成物は、所定の目的を達成するいずれの手段によっても投与できる。例えば、投与は、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、または口腔経路によって行われ得る。別法として、または同時に、経口経路によって投与することもできる。投与量はレシピエンドの年齢、健康および体重、同時治療の種類、いくらかでもあれば治療の回数、および所望の効果の質に左右されるであろう。

本発明の範囲内の組成物は、その所定の目的を達成するために有効な量のマイトマイシン誘導体を含有する全ての組成物を含む。個々の要求は異なるけれど、各成分の有効量の最適範囲の決定は当業者によって行われる。典型的な投与形態は、動物１ｋｙ当たりマイトマイシン誘導体１０〜３００μ＋＊ｏｌｅ、または等量のその医薬的に許容される塩を含有する。

新規な医薬調製物は、薬理活性化合物に加えて、活性化合物の医薬的に使用できる調製物への製造を促進する賦形剤および補助剤からなる適切な医薬的に許容される担体を含み得る。好ましくは、調製物、特に、錠剤、糖衣剤およびカプセルのような、経口投与でき、かつ好ましいタイプの投与に使用できる調製物、および全開のような直腸に投与できる調製物、ならびに注射によるまたは経口的投与に適している溶液剤は、賦形剤と一緒に、約０．０１〜９９％、好ましくは約２５〜７５％の活性化合物を含有する。

本発明の医薬組成物は、それ自体公知の方法で、例えば、慣用の混合、造粒化、糖衣剤製剤化、溶解、または凍結乾燥法によって製造される。かくして、経口用医薬調製物は、該活性化合物を固形賦形剤とを合わせ、所望により、得られた混合物を粉砕し、所望により、または必要に応じて、適当な補助剤を添加した後、該混合物または顆粒を処理して錠剤または糖衣剤核を得ることによって得ることができる。

特に、適当な賦形剤は、乳糖またはショ糖のようなサツカリド類、マンニトールまたはソルビトールの如き充填剤、セルロース調製物および／またはリン酸三カルシウムまたはリン酸水素カルシウムのようなリン酸カルシウム、ならびに、例えばトウモロコシ・デンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモ・デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウム・カルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドンを使用するデンプンペーストのような結合剤である。所望により、上記のようなデンプン類、およびカルボキシメチル−デンプン、交差結合ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムのようなその塩の如き崩壊剤を添加してもよい。補助剤は、上記の全て、流動調節剤および滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウムのようなその塩、および／またはポリエチルレンゲリコールである。糖衣剤核は、所望により胃液に耐性である、適当なコーティングを供給されている。このためには、所望によりアラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適当な有機溶媒または溶媒混合物を含有していてもよい濃縮サツカリド溶液を使用してもよい。胃液に対して耐性のコーティングを製造するために、フタル酸アセチルセルロースまたはフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロースのような適当なセルロース調製物の溶液を使用する。例えば、同定するために、または活性化合物投薬の組合せを特徴付けるために、該錠剤または糖衣剤コーティングに染料または顔料を添加してもよい。

経口的に使用できる他の医薬調製物としては、ゼラチン製ブツシュ−フィツト・カプセル、ならびにゼラチン製軟質密封カプセルおよびグリセロールまたはソルビトールのような可塑剤が挙げられる。ブツシュ−フィツト・ゼラチンは、乳糖のような充填剤、デンプンのような結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、および所望により安定化剤と混合することができる顆粒の形態の活性化合物を含有することができる。軟質カプセルにおいては、活性化合物は、脂肪油または液体パラフィンのような適当な液体に溶解または懸濁される。さらに、安定化剤を添加してもよい。

直腸で使用できる可能な医薬調製物としては、例えば、活性化合物と全開基剤との配合からなる全開が挙げられる。適当な全開基剤は、例えば、天然または合成トリグリセリド類、またはパラフィン炭化水素類である。さらに、活性化合物と基剤との配合からなるゼラチン直腸用カプセルを使用するのも可能である。可能な基剤物質としては、例えば、液体トリグリセリド類、ポリエチレングリコール類、またはパラフィン炭化水素類が挙げられる。

非経口投与に適している製剤としては、水溶性塩のような水溶性形態の活性化合物の水溶液が挙げられる。さらに、適当な油性注射用懸濁液として活性化合物の懸濁液を投与することができる。適当な凍結乾燥溶媒または賦形剤としては、ゴマ油のような脂肪油、またはオレイン酸エチルまたはトリグリセリド類のような合成脂肪酸エステル類が挙げられる。水性注射用懸濁液は、例えば、ナトリウム・カルボキシメチルセルロース、ソルビトール、および／またはデキストランを含む懸濁液の粘性を増大させる物質を含み得る。所望により、該懸濁液は安定化剤も含有し得る。

以下の実施例は、本発明の方法および組成物の説明であり、本発明を限定するものではない。臨床的治療で通常行われ、かつ当業者に明らかである種々の条件およびパラメータの他の適当な変形および改変は、本発明の概念および範囲内である。

実施例実施例１：マイトマイシンＡの調製５０％メタノールおよび５０％０．１Ｎ　ＮａＯＨの溶液３ｍｌにマイトマイシンＣ（５０ｍｇ、　０．１５ｍｍｏｌ）を溶解し、室温で１８時間撹拌した。反応の完了後（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ，１０：　１）　、反応混合物をドライアイスでクエンチして水酸化ナトリウムを中和した。次いで、混合物を真空中で凍結乾燥し、ミドサン化合物をメタノールで取り出した。メタノール溶液を真空中で濃縮乾固し、残渣を最小量のメタノールに再溶解し、次いで、エーテルで沈澱させて赤紫色の粉末２０ｍｇを得た。これを酢酸エチル１５ｍ１に溶解し、５℃に冷却し、ジアゾメタン（ジアゾメタンのエーテル溶液はアルント（＾ｒｎｄｔ）　［オーガニック・シンセシス（Ｏｒｇ、　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）、通算第■巻、１６５〜１６７頁コの手法により調製した）で処理し、２０分間撹拌した（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ。

１０：１）。反応の完了後、まず溶媒を水流アスピレータ−減圧下で除去し、次いで、真空中で乾燥した。残渣をエーテルから再結晶して赤色がかった針状物１８ｍｇを得た。融点１５９〜１６０℃。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ　：７セトン、４：１）は、Ｒｆ＝０．９１の１のスポットを与え、（アセトン：ベンゼン、４：１）はＲｆ＝０．４８の１のスポットを与えた。ＵＶ（メタノール）２１６および３５８ｍｕ、、ＮＭＲ（アセトン−ｄ６．２．１０にてアセトンの中ピーク）、 δ、５．９４　（ｂｒ、２Ｈ）：　４．７６　（ｄｄ、ＩＨ）：　４．３８　（ｔ、ＩＨ）：　４．０７　（ｓ、３Ｈ）　；３．９６　（ｄ、ＬＨ）　；３．５４　（ｄｄ、ＬＨ）　；３．４１　（ｄ。

ＩＨ）；３．３５　（ｄ、ＬＨ）；３．２５　（ｓ、３Ｈ）；２．９９−２．２６４（ｍｍｍ）：　２．８７　（ｓ）；　１．６４０　（ｓ、３Ｈ）実施例２・Ｎ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシンの調製無水メタノール中のマイトマイシンＡ　（Ｉ　Ｑｍｇ、　ｏ、　０２８ｍａ＋ｏｌ）の溶液に、グルコサミン・ＨＣＩ　（７０ｍｇ、０．３２５＋ｕ＋ｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（１００μｌ）のメタノール溶液を添加した。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ　：アセトン、１：１）で判断して反応が完了するまでこの混合物を、室温窒素下で撹拌し、その時点（１０時間）で、溶液は赤味かがった色がら暗紫色に色が変化した。

窒素気流での蒸発によって該溶液を濃縮し、アセトン−酢酸エチル（１：　１）で溶出させる分取用シリカプレート上のクロマトグラフィーに付した。元の位置近くの紫色バンドを掻き取り、メタノールで溶出させた。ＨＰＬＣ（Ｃ＋。逆相、半分収用カラム、メタノール：０．ＩＮリン酸緩衝液、１：１）によるさらなる精製ニヨリ、紫色粉末カ得うレタ。ＮＭＲ（Ｄ２０）６５．３２　（ｄ、ＩＨ，”ｊッヵリドア／マーＨ）；　３．８５　（ｓ、３Ｈ，９ａ−ＯＣＨｓ）；　４．０９ｍ’シングレットが消失〔マツイ・エム（Ｍａｔｓｕｉ、　Ｍ、　）ら、ジャーナル・オブ・アンティバイオティックス（Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔ、　）　２↓：１８９　（１，９６８）；チオン・エルおよびレーマーズ・ダブリュー・エイ（Ｃｈｅｎｇ、　Ｌ、　、　ａｎｄ　Ｒｅ＋５ｅｒｓ、　Ｗ、　Ａ、　）、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Ｊ、１ｌｅｄ、　Ｃｈｅｔ　）λ旦ニア６７　（１９７７）；ピアス・ディ・エム（Ｖｙａｓ、　Ｄ」、）ら、ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリーＮ−ベンジルオキシカルボニルグリシン（３ｇ、　１４．３ａ＋ｍｏｌ）のジオキサン中溶液に、冷却しつつ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１，６５ｇ、　１４．３ｍｍｏｌ）およびＮ、　Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミド（２，９６ｇ、　１４．３＋ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を０〜５℃で１時間撹拌し、冷蔵下で一晩放置した。尿素沈澱を吸引濾過によって除去し、濾液を真空中で濃縮乾固した。黄色がかった残渣を酢酸エチル−エーテルから再結晶して、収率８４％でグリシン活性化エステルを得た。融点１１２〜１１４℃。ＮＭＲ（ＣＨＣｌｓ）。

前記調製のグリシンの活性化エステル（２５ｇ、　Ｏ，ＯＯ８＋ｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）１５ｍｌ中に溶解し、５℃未満まで冷却し、ＤＭＦ中の２−アミノ−１，３−シクロヘキサンジオール（２，１８ｇ、０．０１６璽ｏ１）を窒素下、撹拌しつつ滴下した。反応の完了後（ＴＬＣ，、ＣＨＣｌ５：ＭｅＯＨ。

１０；１）、減圧下でＤＭＦを除去し、得られた固体残渣を酢酸エチルから結晶化して収率８４％で白色結晶を得た。融点１７０〜１７２℃。ＮＭＲ（Ｄ２０）：６７．４５　（ｓ、５Ｈ，芳香族Ｈ）　：　５．２０　（ｓ、２Ｈ，ベンジル −ＣＨ２）。

３．９５　（ｓ、２Ｈ，ＣＯＣＨ２ＮＨ２）　；　３．６　（ｔ、ＩＨ，シクロヘキサン環０）Ｃ１Ｈ＞　：　３．４５　（ｍ、２Ｈ，ンクｏへ＋シン環（ＤＣ！ＨおよびＣ５Ｈ）；２．０．１．８および１．３５　（ｍ、　ｍ、　ｍ、　２ないし１ないし３Ｈ；シクロヘキサンのＣ５、Ｃ１およびＣ３水素）。生成物はＮ−（２，６−シヒドロキシシクロヘキシル）グリシンアミドのＮ−保護ペンジルオキシカルボニル誘導体よりなる。

Ｎ−保護ベンジルオキシカルボニルＮ−（２，６−シヒドロキシシクロヘキシル）シリジンアミド（３ｇ、　０．０９３ｍｏｌ）を、モル等量の１０％ＨＣＩを含ム無水エタノール１００ｍ１に溶解した。３０ｐｓｉにおける５％Ｐｄ／Ｃでの水素化分解、セライトでの触媒の除去、および引き続いての真空中での溶媒の蒸発により淡茶色固体が得られ、これをエーテルでトリチュレートし、酢酸エチルおよびエーテルから再結晶化した。融点２０７〜２１０’Ｃ０ＮＭＲ（Ｄ２０）δ、３．６５　（ｔ、３Ｈ，シクロヘキサン環のＣ＋Ｈ）：　３．５５　（ｍ、２Ｈ，シクロヘキサ：／（７）Ｃ２ＨおよびＣ５Ｈ）：　３．４　（Ｓ、２Ｈ，Ｃｏ　ＣＨ２ＮＨ２）：２．０５．１．８０、および１．３８　（ｍ、　ｍ、　ｍ１２ないし１ないし３Ｈ，シクロヘキサンのＣ８、Ｃ４およびＣ５の水素）。

実施例４・７−＋３−　［（２−アセトアミド−３，４，６−１−リー０−アセチルーβ−Ｄ−グルコビラノノル）アミノコカルボニルプロピルアミノ）−９− メトキシミドサン（ＭＣ６２）の調製２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−α−Ｄ− グルコピラノシルクロリドを以下のごとくに調製した。２−アセトアミド−２− デオキシーＤ−グルコース（５０ｇ、　０．２２６ｍｏｌ）を冷却したアセチルクロリド（１２５ｍｌ）に添加した。次いで、室温で混合物を１６時間撹拌した。クロロホルム（３００ｍｌ）をコンデンサーを通して反応混合物に添加し、得られた均一溶液を、激しく撹拌した氷４００ｇおよび水１００ｍ１の溶液に添加した。

有機層を分離し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過した。この濾液を減圧下で濃縮して約７５ｍ】とした。エーテル（４００ｍｌ）を該濃縮溶液に添加し、室温で２時間放置して生成物を白色固体として得た。この白色固体を濾過し、水酸化ナトリウムおよび五酸化リン上の真空デシケータ−中で乾燥して表記化合物５２．５ｇを得た。融点１２３〜１２５℃。

２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−β−Ｄ− グルコピラノシルアミンは以下のごとくに調製した。２−アセトアミド−３゜４、　６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド（１１，２５ｇ、　３０．８ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、還流アセトン（５０ｍｌ）中でリチウムアジド（２，２５ｇ、　４６ｍｍｏｌ）と反応させた。次いで、該アセトンを減圧下で除去して半固体残渣が得られ、これをクロロホルムおよび水の混合物中に採取した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過した。濾液を蒸発乾固して粗製のアゾ−サツカリドを茶色残渣として得た。この残渣を酢酸エチル中に溶解し、活性炭で脱色した。生成物を含有する酢酸エチルへのエーテルの添加によって、糖アジドを白色沈澱とした得た。シリカゲル上のＴＬＣ（メタノール：クロロホルム／１　：　９）は、単一の均一スポットを与えた。室温・大気圧下にて、得られたアジド（４，０ｇ）を酸化白金（０，３ｇ）上で水素化した。反応の完了後、触媒を濾去し、溶液を蒸発乾固してアミノサツカリド（３゜４ｇ）を白色固体として得た。ＴＬＣは１つのスポットを与えた（メタノール：クロロホルム／１　：　９）。

Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−β −Ｄ−グルコピラノシル）−４−（ベンジルオキシカルボニル）アミノブタンアミドは以下のごとくに調製した。ＥＥＤＱ　（２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン（２，８９４ｇ、　１１．７ｍｍｏｌ）の存在下、前記にて得られた該アミノサツカリド（３，７９６ｇ’＋　１０．９７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１００ｍｌ）中の４−（ベンジルオキシカルボニル）アミノ酪酸（２，６０ｇ。

１０、９７ｍ１ｌｌｏｌ）と３２℃で６日間反応させた。反応混合物を蒸発させて淡黄色固体が得られ、これを酢酸エチルおよびエーテルの混合液中に懸濁させた。次いで、該固体を濾過し、１．ＱＭ　ＨＣＩ、水、５％Ｎ　ａ　ＨＣＯ３、水で洗浄し、真空下で乾燥して、生成物を白色粉末として得た。融点２０６〜２０７℃。

元素分析Ｃ！　６　Ｈｓ　ｓ　Ｎ　ｓ　Ｏｒ　＋として、計算値・Ｃ（５５，２２）　、Ｈ（６，２４）、Ｎ（７，４３）　実測値：Ｃ（５５，５８）　、Ｈ（６，２９）　、Ｎ　（７，３５）Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドは以下のごとくに調製した。室温にて、エタノール（２５Ｑｍ　ｌ　）中の前記で得られた該ベンジルオキシカルボニル誘導体（１，５ｇ）を炭素上の１０％パラジウム（０，８ｇ）で水素化した。反応の完了後、触媒を除去し、溶液を減圧下で蒸発乾固し、アミン（０，２３ｇ）が得られた。元素分析Ｃ＋５ＨｚｓＮｓＯ＊として、計算値：Ｃ（５０，１１）、Ｈ（６，７８）　、Ｎ　（９，７４）　実測値：Ｃ（５０，５７）、Ｈ（７，１７）、Ｎ（８，７２）７−　＋３−　［（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ− Ｄ−グルコビラノシル）アミノコカルボニルプロピルアミノ）−９−メトキシミドサン（ＭＣ−６２）は以下のごと（に調製した。無水メタノール（２ｍｌ）中のマイトマイシンＡ（３１ｍｇ）の溶液に、２−Ｎ−（２−アセトアミド−３，４゜６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−４ −アミノブタンアミド（１５０ｍｇ）を添加した。窒素雰囲気下、室温にて、ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール／９　：　１）が完了を示すまで、該混合物を暗所で撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物を、溶離剤としてメタノール：クロロホルム（１：９）を用いるシリカゲル分取用プレート（２０Ｘ２０．１ｍｍ厚さ）上のクロマトグラフィーに付した。溶媒を除去して、表記化合物４１ｍｇを得た。

ＴＬＣは単一のスポットを与えた（メタノール：塩化メチレン／１　：　９、Ｒｆ＝０．３１）。

実施例５ニア−（２−［（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）アミノコカルボニルエチルアミノ）−９−メトキシミドサンの調製２−Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−１−クー０−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドの代わりに２−Ｎ− （２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ−β−Ｄ −グルコピラノシル）−３−アミノプロパンアミドを用いる以外は実施例４に記載したごと（に７−　（２−［（２−アセトアミド−３，４，６−トリー○−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）アミノ］カルポニルエチノげミヵー９−メトキシミドサンを調製した。

す園６：７−［４二（２，３，支亙ゴ上辷止ｌゴ互ゴヨヒグルコピラノシル）オキシフェニルコアミノ）−９−メトキシミドサン（ＭＣ７７）の調製２−Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ −β−Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドの代わりに４−　（２゜３、　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）オキシアニリンを用いる以外は実施例４に記載したごとくに７−　（［４−（２，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）オキシフェニルコアミノ）−９−メトキシミドサン（ＭＣ−７７）を調製した。元素分析Ｃｓ５Ｈ４ｔｒＮ４Ｃ）＋ｓとして、計算値：Ｃ（５５，５６）、Ｈ（５，３３）、Ｎ（７，４０）　実測値：Ｃ（５５，８６）　、Ｈ（５，６７）　、Ｎ　（６，７３）４−アミノフェニル−２，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシドは以下の手法によって製造した。２．　３．　４．　６−チトラー。−アセチル−α−Ｄ−グルコビラノシルブロミド（１０ｇ、　２４ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１００ｍｌ）中溝液にｐ−ニトロフェノール（６，６７ｇ、　４８ｍｍｏｌ）、ベンジルトリエチルアンモニウムプロミド（ＢＴＥＡＢ、５．５３ｇ、２０ｍｍｏｌ）および１．２５Ｎ　ＮａＯＨ（５０ｍｌ、６２ｍｏ＋ｏｌ）（７）混合物を添加した。６０’ＣＣ’３・１／２時間撹拌した後、溶液を水（１００ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、１．２５Ｎ　ＮａＯＨ，水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。減圧下で溶媒を除去して黄色粉末を得た。４−ニトロフェニル−２，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシドを白色沈澱として（５，３０ｇ）、沸騰９５％エタノールから結晶化させた。融点１７８〜１７９゜この化合物（１６，４４ｇ）を、室温にて、活性炭上の１０％パラジウムで水素化した。

触媒を濾去し、溶媒を完全に蒸発させて４−アミノ−２，３，４，６−チトラー ○−アセチルーβ−Ｄ−グコルビラノシド（５，８２ｇ）を白色粉末として得た。

実施例７：７−　＋［４−（２，３，４，６−チトラーＯ−アセチルーβ−Ｄ− グルコピラノシル）ジチオ］エチルアミ刈−９−メトキシミドサンの調製２−Ｎ −（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシーβ− Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドの代わりに４−（２゜３、　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオコニチルアミノ・ＨＣＩを用いる以外は実施例６に記載したごとくに７−　（［４−（２゜３、　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオコニチルアミノ）−９−メトキシミドサンを調製した。ＴＬＣは単一のスポットを示した（クロロホルム：メタノール／９　：　１　：Ｒｆ＝０．４３）。

２、　３．　４．６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオエチルアミン・ＨＣＩは以下のごと（に調製した。メタノール（５ｍｌ）中のメチル−２−アミノエチルスルフェニルチオカルボネート・ＭＣＩ　（４４７ｍｇ。

２１９６關ｏ１）の撹拌溶液にメタノール（１０ｍｌ）中の２．　３．　４．　６−テトラ−０−アセチル−１−チオ−β−Ｄ−グルコース（８００ｍｇ、　２．１９６ｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を蒸発乾固して該テトラアセテートを白色固体として得た。

実施例８ニア−１［４−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオコニチルアミノ）−９−メトキシミドサンの調製２−Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドの代わりに４−（２− アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオエチルアミン・Ｆ（ＣＩを用いる以外は実施例７に記載したごとくに７− （［４−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオコニチルアミノ）−９−メトキシミドサンを調製した。ＴＬＣは単一のスポットを示した（クロロホルム：メタノール／９　：　１　、Ｒｆ＝０、２６）。

４−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオエチルアミン・ＨＣＩは以下のごと（に調製した。メチル−２ −アミノエチルスルフェニルチオカルボネート・ＨＣＩ　（４４７ｍｇ、２．１９６ｍｍｏ１）のメタノール（５ｍｌ）中撹拌溶液にメタノール（１０ｍｌ）中の２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー１−チオ−β−Ｄ−グルコース（７９８ｍｇ、２．１９６配ｏ１）を添加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を蒸発乾固して該テトラアセテートを白色固体として得た。

２−Ｎ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリー〇−アセチルー２−デオキシ −β−Ｄ−グルコピラノシル）−４−アミノブタンアミドの代わりに４−　（２゜３、　４．　６−チトラーＯ−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオアニリン・ＨＣＩを用いる以外は実施例７に記載したごとくに７−　（［４−（２，３，４゜６−チトラーＯ−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオコニチルアミノ）−９−メトキシミドサンを調製した。ＴＬＣは単一のスポットを示した（クロロホルム：メタノール／９　：　１　、Ｒｆ＝０．４３）。

４−　（２，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオアニリン・ＨＣＩは以下のごと（に調製した。２．　３．　４．　６−チトラーＯ−アセチルー１−チオ−β−Ｄ−グルコース（５９ｉｍｇ、　ｉ、　０７ｉｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）中溝液をメタノール（２ｍｌ）中のメチル −４−アミノフェニルスルフェニルチオカルボネート・ＨＣ１（２７０ｍｇ、　１．０７ｍａｏｌ）の溶液に滴下した。室温で一晩撹拌した後、溶媒を減圧下で除去してジチオ糖４８０ｍｇを得た。

実施例１０　Ｎ’−（４−フォスフアトフェニル）マイトマイシンＣの調製４− アミノフェニルリン酸二ナトリウム４−アミノフェニルリン酸二ナトリウム（アルドリッチ）２．５ｇ、炭素上のパラジウム２．０　ｇ、および水性エタノール（５０％）２５０ｍｌの混合物を室温、３５ｐｓ　ｉにて水素化した。濾過によって触媒を除去し、真空下で溶液を濃縮して約５ｍｌとした。この溶液を無水エタノールで希釈して生成物の沈澱を得た。該生成物を濾過し、エタノール、エーテルで洗浄し、乾燥して４−アミノフェニルリン酸二ナトリウム１．４５５ｇ　（９２，７％）を灰色がかった白色粉末とし調製した。（前記したごと（に調製した）マイトマイシンＡ２３．８ｍｇおよび４−アミノフェニルリン酸二ナトリウム２４ｍｇの乾燥メタノールｌ、Ｑｍｌ中混合物を室温にて５時間撹拌した。

減圧下でメタノールを除去し、得られた緑色残渣を水中に採取し、クロロホルム（３ｘ５ｍｌ）で洗浄し、凍結乾燥してＮ７−（４−フォスフアトフェニル）マイトマイシンＣ３４，６ｍｇを得た。

実施例２に従って調製したＮ’−（２−デオキシグルコピラノシル）マイトマイシンＣを、マウスＰ２８８白血病抗腫瘍活性および正常マウスにおける骨髄に対する毒性について評価した。

Ａ、マウス抗腫瘍活性の測定雌ＤＢＡ／２マウスにおいて腹腔内で維持したマウスＰ３８８白血病系を用いて抗腫瘍活性を評価した。親化合物マイトマイシンＣに対するその公知の感受性のためにこの腫瘍を選択した［トリスコール（Ｄｒｉｓｃｏｌｌ）ら、キャンサー・ケモセラビー・レポーツ（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ　Ｒｅｐｏｒｔｓ）４　：　１　（１９７４］　ｏ投与の直前にＮ７−　（２−デオキシグコルビラノシル）マイトマイシンＣを（４℃の）滅菌水に溶解した。マイトマイシンＣをエタノールに溶解し、得られた溶液を５％エタノール、９５％滅菌水に調整した。

ｌＸｌ０’　Ｐ３８８白血病細胞の腹腔内移植の後第１日目に、各化合物をＣＤ２Ｆ＋雄マウス群に腹腔内投与した。テスト化合物のＰ３８８抗白血病活性は、平均生存日数およびパーセント寿命増加（Ｌ　Ｉ　Ｓ）によって評価した。

該％ＬＩＳは下式によって計算した。

％ＬＩＳ＝　（Ｔ−Ｃ）／Ｃｘ１ＯＯ；ここに、Ｔは処理したマウスの平均生存臼であって、Ｃは非処理マウスの平均生存臼である。

親マイトマイシンＣと比較して、Ｎ’−（２−デオキシグルコラノシル）マイトマイシンＣのＰ３８８抗腫瘍活性を表２にまとめる：表２Ｐ３８８白血病に対する抗腫瘍活性！惣　用量（＋ａｇ／ｋｇ）　％ＬＩＳ　平均生存（日）Ｎ’−（２−デオキシ　５１　４２％　１４．２グコルピラノシル）− ｖイトフィシンｃ　１３．５”　６１％　１６．１マイトマイシンＣ４，５１８１％　１８．１対照’　１０．０ ’ＬＤｏ用量ゝはぼＬＤ、。用量 °薬物ビヒクルで処理Ｎ？−（２−デオキシグコルビラノシル）マイトマイシンＣ１３，５ｍｇ／ｋｇまたはマイトマイシンＣ４，５ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与後第３日目に、正常なＣＤ　２　Ｆ　＋雄マウスから得た眼窩後洞血液の２０μｍ検体を用いて末梢白血球（ＷＢＣ）計数の測定を行った。得られた血液検体をイソトン（Ｉｓｏｔｏｎ）　（中性で等張の緩衝液）９．９８ｍ１中に希釈し、ザポグロビン（赤血球を溶解するが白血球は溶解しない酵素溶液）での溶解の後、コールタ−カウンターで計数した。

ＷＢＣ計数は薬物ビヒクルのみを受容した対照マウスからの値のパーセントで表した。結果を以下の表にまとめる：Ｎ７−　（２−デオキシグルコプラノシル）−１，６６〜３．３ｍｃｇ／ｍｌマイトマイシンＣは、転移性乳癌を持つ患者において、有意パーセントの目的応答を誘導する。アナログの主要用途はこの疾患の治療にあるので、ヒト乳癌細胞系に対するｉｎ　ｖｉｔｒｏスクリーニングを調べた。２種の細胞系を調べた。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系は、検出可能なエストロゲンレセプターを持たず、胸腺性ヌードマウスにおいて腫瘍形成にエストロゲンを必要とせず、抗エストロゲン療法に対して耐性であって、貧弱な予後を有する腫瘍の代表なものである。該ＭＣＦ−７細胞系はエストロゲンレセプター発現を保持し、ヌードマウスにおいて腫瘍を形成するためにエストロゲンの絶対的な要求を持たず、抗エストロゲン療法に応答し、良好な予後を持つ腫瘍のより代表的なものである。

（ａ）ＤＮＡ合成の抑制マイトマイシンＣの細胞毒効果は、はとんど、ＤＮＡとのその相互反応の結果である。その結果、［’Ｈ］デオキシチミジンのＤＮＡへの取り込み速度を抑制するマイトマイシンＣおよびそのアナログの能力をまず測定した。デオキシチミジンはＤＮＡ合成についての本質的前駆体である。実験は、クラーク（Ｃ１ａｒｋｓ）ら［ブリティッシュ・ジャーナル・オン・キャンサー（Ｂｒ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ）　５１　：　３６５−３６９　（１９８５）］によって記載されているごとくに行った。薬理学的に関連する濃度のマイトマイシンＣおよびＭＣ−７７は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１（図１）およびＭＣＦ−７ヒト乳腫瘍細胞（図２）双方において、ＤＮＡ合成の有意で用量依存性の抑制を誘導する。親化合物と比較した場合、等モル濃度では、２ないし５倍大きなりＮＡ合成の抑制が、ＭＣ− ７７での治療の後に観察された。

顕著に対照的に、ＭＣ−６２はマイトマイシンＣおよびＭＣ−７７双方よりも有意に能力が劣っている。

（ｂ）細胞増殖速度の抑制細胞毒性薬物の細胞増殖速度に対する効果の解釈は、解釈するのがより困難な終点である。例えば、細胞毒薬剤は、見たところ、細胞の一部を殺すことによって、細胞増殖速度を減少させるようである。別に、集団におけるすべての細胞は増殖が阻止され得るが、殺されない。これらの事象系列は共に同一の増殖曲線を生じ得る。しかしながら、細胞を殺すのは、細胞数が出発細胞数を有意に下回るようになった場合に、明らかに証明される［パン・デン・ベルブ（ｖａｎ　ｄｅｎ　Ｂｅｒｇ）ら、ニーロビーアン・ジャーナル・オン・キャンサー・オンコロジー（Ｅｕｒ、　Ｊ。

Ｃａｎｃｅｒ　０ｎｃｏ１．　）　１ユニ１２７５〜１２８１（１９８１）コ。

図３は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の細胞集団動力学に対するマイトマイシンＣ％ＭＣ−７７およびＭＣ−６２の効果を示す。ＭＣ−６２はＭＤＡ−ＭＢ−２３１増殖の速度に顕著に影響しない。マイトマイシンＣおよびＭＣ−７７は共に細胞増殖速度を有意に抑制した。しかしながら、１．５μＭ　ＭＣ−７７での処理のみが、出発細胞数を下回る細胞数を減少させた。

（ｃ）足場依存性コロニー形成多（の細胞毒性薬剤は、それらおよびそれらの子孫が１回またはそれを超える細胞分裂を完了するまでは細胞を殺さない。その結果、細胞を殺すのを測定する最も正確な方法では、単一の細胞が５０個またはそれを超える細胞（６回またはそれを超える分裂に等しい）のクローンを産生ずる能力を測定する。２のクローン原性アッセイを利用した。足場依存性アッセイは、付着のための固体プラスチック基材を細胞に与える。実験は、パン・デン・ベルブ（ｖａｎ　ｄｅｎ　Ｂｅｒｇ）ら［（１９８１）、前掲〕によって記載されているごとくに行った。図４は、ｆＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する足場依存性コロニー形成能に与えるマイトマイシンｃ１ＭＣ−７７およびＭＣ−６２の効果を示す。ＭＣ−６２での処理は、コロニー形成に有意に影響しなかった。ＭＣ−７７および親化合物は共に、０．２５μＭ薬物での処理に続き、コロニー形成能での有意な減少を誘導した。

０．２５μＭＭＣ−７７によって誘導される抑制は、等モル濃度のマイトマイシンＣによって誘導されるよりもほぼ２倍ないし５倍太き（評価される。

（ｄ）足場−非依存性コロニー形成足場−非依存性アッセイでは、細胞が軟寒天溶液中の懸濁液中で増殖することを確保する。かくして、細胞は、その基礎再生産状態およびその懸濁液中で増殖するその能力を共に保持しなければならない。図５のデータは、２の足場−非依存性コロニー形成アッセイの結果を表す。該アッセイは、クラーク（Ｃ１ａｒｋｅ）ら［ジャーナル・オブーエンドクリノロジ−（Ｊ、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ、　）　１２２　：　３３１〜３４０　（１９８９）］によって記載されているごとくに行った。ＭＣ−６２は矛盾な（コロニー形成に影響を与えない。マイトマイシンＣおよびＭＣ−７７は共に細胞生存において用量依存性減少を誘導する。

しかしながら、ＭＣ−７７は、マイトマイシンＣと比較すると、２倍ないし５倍大きい細胞毒性のようである。

（ｅ）結論すべての４つの終点からのデータは、ＭＣ−６２に存在する構造修飾が有意に抗腫瘍性能力を減少させたことを示す。しかしながら、親薬物と比較して、ＭＣ− ７７の用量応答曲線におけるシフトが矛盾なく観察され、これは、明らかに、２倍および５倍の間の細胞毒性能における顕著な改良を示す。

実施例１４　：　ｉｎ　ｖｉｖｏテスト：マウスＰ３８８白血病抗腫瘍活性Ｎ’ −（４−フォスフアトフェニル）マイトマイシンＣを、親マイトマイシンＣとの実験において、マウスＰ３８８抗腫瘍活性について評価した。マイトマイシンＣに対するその公知の感受性のため、雌ＤＢＡ／２Ｆ＋マウスにて腹腔内に維持したＰ３８８白血病を選択した［トリスコール（Ｄｒｉｓｃｏｌｌ）ら、キャンサー・ケモセラピーーノポート（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅ＋５ｏｔｈｅｒａｐｙ　Ｒｅｐｏｒｔ）４　：　１　（１９７４）　］。

マイトマイシンＣの最適単−腹腔内Ｐ３８８治療用量は４．５〜５．５ｍｇ／ｋｇ群に各化合物を腹腔内投与した。親マイトマイシンＣに関するこれらの比較実験において、複数の用量範囲にて投与したＮ’−（４−フォスフアトフェニル）マイトマイシンＣのＰ３８８抗白血病活性を、寿命のパーセント増加の計算によって評価した。

ここに、％ＬＩ　５＝（Ｔ−Ｃ）／ＣＸ１００ｍ’あッテ、Ｔは薬物を受容したマウス＝処理マウスの平均生存日数である。

Ｃは薬物ビヒクルを受容したマウスの平均生存口である。

薬物細胞毒の結果からの体重減少も測定した。

フェニル）マイトマイシンＣ１５″　８４３０′′　＞１５０（１１５３０日生存）４５：薬物注射後６日まで、この薬物用量で処理したすべてのマウスについての体重は２０〜２４％減少した。

さらに、ｉｎ　ｖｉｖｏテストを２パートにて行う。第１に、親薬物と比較したアナログの宿主細胞毒性をテストする。次いで、マウス集団のほぼ１０％を殺すのに必要な濃度を測定する。組織病理学分析では、薬物処理が組織および器官に与える効果を測定する。白血球細胞計数の分析は、造血細胞毒性についての情報を与える。１の実験からの予備データは、ＭＣ−７７は細胞毒性につき急勾配の用量依存性を有することを示す。ＭＣ−７７３０および４０ｍｇ／ｋｇを１回腹腔内注射した後、各々、８０％および１００％の致死率が観察された。ＭＣ−７７は、マイトマイシンＣと比較して、それほど毒性ではないようである。現在の確定的でない予備データは、ＭＣ−７７は親薬物より２倍まで小さい毒性であり得ることを示唆する。

ｉｎ　ｖｉｖｏテストの第２段階では抗腫瘍活性を測定する。Ｐ２Ｓ５およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍を担うマウスを複数用量範囲のマイトマイシンＣおよびＭＣ−７７で処理する。腹水腫瘍Ｐ３８８については、終点として寿命増加を利用できる。固体腫瘍ＭＤＡ−ＭＢ−２３１については、樹立された腫瘍の増殖を抑制する薬物の能力および／または腫瘍の樹立を腫瘍細胞接種物から妨げる薬物の能力を測定する。これらの実験では、適当な薬物処理投与量の選択を可能とする毒性実験の結果を待つ。

さて、本発明の詳細な説明したので、当業者が、本発明またはその具体例の範囲に影響することなく、広くかつ等しい範囲の疾患、処方および他のパラメーター内で実施できることを当業者は理解するであろう。

ＦｆＧ、１０．２５　０．５　０，７５　１．０　１．２５　１．５０ＦＩＧ、　２日数 υ１顕二玉ＭＤＡ−ＭＳ−２３１０，００００，０５００，１０００，１５００，２０００，２５００，３００［Ｗｉ物］ｎＭＦＩＧ、　５Ａ［薬物］ｎＭｆ（６，６Ｂ国際調査報告１争−一−＾−１，，ロ裔１層句ｐｃＴｌｕＯ＊１１ｏ２８ｓ。

フロントページの続き（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、　ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、ＳＥ）、ＡＵ、ＣＡ、ＪＰ（７２）発明者　ギオルギス、アレムアメリカ合衆国ワシントン・ディー・シイ−２０００７、ナンバー９、エヌ・ダブリュ、トウエンティーセブンス・ストリート１２４０番（７２）発明者　クラーク、ロバート・アールアメリカ合衆国メリーランド州２０８１７、ベセスダ、バーナム・ロード７７０９番

Claims

【特許請求の範囲】

１．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル；ＡはＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ｎは０または１；ｎ１は０または１；Ａ１は酸素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン、 −Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−；Ａ２は酸素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン、ＮＨ、ＮＲ、または−ＮＨ −Ｃ（＝Ｏ）；ｎ２は０または１；Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、および１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそれらのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドからなる群から選択され；ただし、ｎが１である場合、Ａ１はＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状の飽和または不飽和アルキレン；また、ｎが０である場合、ｎ１およびｎ２の一方は０である］を有するマイトマイシン誘導体。
２．７−｛３−［（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−べータ−Ｄ−グルコピラノシル）アミノ］カルボニルプロピルアミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
３．７−｛２−［（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β− Ｄ−グルコピラノシル）アミノ］カルボニルプロピルアミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
４．７−｛［４−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシフェニル］アミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
５．７−｛［４−［（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオ］エチルアミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
６．７−｛［４−［（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β −Ｄ−グルコピラノシル）ジチオ］エチルアミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
７．７−｛［４−［（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ジチオ］フェニルアミノ｝−９−メトキシミトサンである請求の範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
８．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡはＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ＱａおよびＱｂはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそれらの保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドであるか、あるいは式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているＣ１−Ｃ４アルキル；ｑ＝０〜４）で示される基］を有するマイトマイシン誘導体。
９．Ｎ７−（４−フォスファトフェニル）マイトマイシンＣである請求の範囲第８項記載の化合物。
１０．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡおよびＡ１はＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ＱａおよびＱｂはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそれらの保護誘導体、または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリド、もしくはトリアミノサッカリドであるか、あるいは式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているＣ１−Ｃ４アルキル；ｑ＝０〜４）で示される基〕を有するマイトマイシン誘導体。
１１．請求の範囲第１項、第８項または第１０項いずれか１項記載のマイトマイシン誘導体および医薬上許容される担体よりなる医薬組成物。
１２．請求の範囲第１項、第８項または第１０項いずれか１項記載のマイトマイシン誘導体および医薬上許容される担体よりなる医薬組成物を治療を必要とする動物に投与することを特徴とする細菌感染の治療方法。
１３．該細菌感染がエシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、クレブシェラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）およびリステリア（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）よりなる群から選択される細菌によって引き起こされる請求の範囲第１２項記載の方法。
１４．請求の範囲第１項、第８項または第１０項いずれか１項記載のマイトマイシン誘導体の癌細胞増殖抑制量および医薬上許容される担体よりなる医薬組成物を治療を必要とする動物に投与することを特徴とする動物において増殖抑制に罹患した癌細胞の増殖を抑制することによって癌を治療する方法。
１５．該癌が白血病、メラノーマ、サルコーマ、およびカルチノーマよりなる群から選択される請求の範囲第１４項記載の方法。
１６．（ａ）アシルハライドをサッカリド（Ｙ−Ｈ）と縮合させて１−ハロペルアセチルサッカリドを得；（ｂ）工程（ａ）で得られた該１−ハロベルアセチルサッカリドを、Ａが後記で定義するに同じである式ＨＯ−Ａ−ＮＯ２の化合物と縮合させてニトロサッカリド誘導体を得：（ｃ）工程（ｂ）で得られた該ニトロサッカリド誘導体のニトロ基を還元して第 −級アミノサッカリドを得；（ｄ）工程（ｃ）で得られた該第一級アミノサッカリドを、式：▲数式、化学式、表等があります▼ を有するマイトマイシンＡ誘導体と縮合させてマイトマイシンＣ−サッカリドペルアセテートを得；次いで、（ｅ）工程（ｄ）で得られたマイトマイシンＣ−サッカリドペルアセテートを加水分解させてマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル；ＡはＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ｎは０または１；ｎ１は０または１：Ａ１は酸素；ｎ２は０；Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、あるいはそれらのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドからなる群から選択される〕を有するマイトマイシン誘導体の製法。
１７．（ａ）アセチルハライドをサッカリドと縮合させて１−ハロペルアセチルサッカリドを得；（ｂ）アジド塩を工程（ａ）で得られた化合物と縮合させて１−アジドサッカリド誘導体を得；（ｃ）工程（ｂ）で得られた１−アジドサッカリド誘導体を還元して１−第一級アミノサッカリドを得；（ｄ）工程（ｃ）で得られた１−第一級アミノサッカリドを式ＰｈＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−Ａ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨの化合物と縮合させてベンジルオキシカルボニル保護サッカリド誘導体を得；（ｅ）工程（ｄ）で得られた該ベンジルオキシカルボニル保護サッカリド誘導体を還元して式Ｙ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ａ−ＮＨ２の化合物を得；（ｆ）工程（ｅ）で得られた式Ｙ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ａ−ＮＨ２の化合物を、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するマイトマイシンＡ誘導体と縮合させてペルアセチルサッカリド−結合マイトマイシン誘導体を得；次いで、（ｇ）工程（ｆ）で得られたペルアセチルサッカリド−結合マイトマイシン誘導体のアセテート基を加水分解してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル；ＡはＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；Ｙはグルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、およびグルコフラノシル、マルトシル、あるいはそれらのヒドロキシル保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドからなる群から選択され；ｎおよびｎ１は０；ｎ２は１：Ａ２は−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−を意味する］を有するマイトマイシン誘導体の製法。
１８．（ａ）式Ｙ−（Ａ１）ｎ１−ＳＨのヒドロキシ保護化合物を式ＣＨ３−Ｏ −Ｃ（＝Ｏ）−ＳＳ−Ａ−ＮＨ２の化合物と縮合させてＹ−（Ａ１）ｎ１−ＳＳ −Ａ−ＮＨ２を得；（ｂ）工程（ａ）で得られたＹ−（Ａ１）ｍ１−ＳＳ−Ａ− ＮＨ２を式：▲数式、化学式、表等があります▼ を有するマイトマイシンＡ誘導体と縮合させてヒドロキシル保護サッカリド−結合マイトマイシン誘導体を得；次いで、（ｃ）工程（ｂ）で得られたヒドロキシル保護サッカリド−結合マイトマイシン誘導体の保護基を除去してマイトマイシン誘導体を得ることを特徴とする式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、ｎは１；ｎ１は０または１；ｎ２は０；Ａ１はＣ１−Ｃ４直鎖状または分岐鎖状の飽和または不飽和アルキレンを意味する〕を有するマイトマイシン誘導体の製法。
１９．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ の化合物を式： ▲数式、化学式、表等があります▼ のマイトマイシンＡ誘導体と縮合させることを特徴とする式：▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡはＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ＱａおよびＱｂはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそれらの保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドであるか、あるいは式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているＣ１−Ｃ４アルキル；ｑ＝０〜４）で示される基］を有するマイトマイシン誘導体の製法。
２０．式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する化合物を式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するマイトマイシンＡ誘導体と縮合させることを特徴とする式：▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒは水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキル、ＡおよびＡ１はＣ１−Ｃ４直鎖状または分枝鎖状アルキレンまたは不飽和アルキレン、フェニレン、置換フェニレン、ベンジレン（−ＣＨ２Ｐｈ−）、置換ベンジレン、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、またはＣ３−Ｃ６−ヘテロシクロアルキル；ＱａおよびＱｂはアルカリ金属、グルコピラノシル、ガラクトピラノシル、マンノピラノシル、キシロピラノシル、セロビオシル、ラクトシル、グルコフラノシル、マルトシル、１，３−シクロヘキサンジオール−２−イル、あるいはそれらの保護誘導体または対応するアミノサッカリド、ジアミノサッカリドもしくはトリアミノサッカリドであるか、あるいは式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはフェニル、ヒドロキシフェニル、インドリル、メルカプト、Ｃ１−Ｃ４アルキルチオ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ、グアニジノ、イミダゾリルもしくはカルバモイルで置換されているＣ１−Ｃ４アルキル；ｑ＝０〜４）で示される基］を有するマイトマイシン誘導体の製法。