JPH06501453A - ペルオキシダーゼの予防および治療への応用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ペルオキシダーゼの予防および治療への応用発明の分野 本発明は、ペルオキシダーゼの予防および治療への応用とウィルス性伝染病の予 防法および治療法ならびに特にペルオキシダーゼ薬剤の予防および治療への応用 と単純庖疹ウィルスやヒト免疫不全症ウィルスなどのエンヴエロープ・ウィルス の伝染病の予防と治療にこの種薬剤を利用するための方法に関する。

発明の背景 エンヴエローブ・ウィルスとくに単純庖疹ウィルス（Ｈ３Ｖ）やヒト免疫不全症 ウィルス（ＨＩＶ）がもつ細胞への潜在的な毒性を予防し抑制するために有効な 予防および治療用薬剤の開発は、まだ不確かで問題が多い。

単純庖疹ウィルス（Ｈ５Ｖ−１、Ｈ３Ｖ−２など）は、その存在が広く認められ る。単純庖疹ウィルスによる伝染病の予防および治療のために開発された予防薬 および治療薬ならびに予防法および治療法は、一般的にいって、まだ部分的にし か成功していない。

ヒトの乳に含まれる各種分泌物に抗ウィルス作用があることは以前から知られて いる［マシューズ他ｒＬａｎｃｅｊＪ２：１３８８−１３９０（１９７６）、マ イケルズ、Ｒ，Ｈ，ｒＪ、　Ｉｍｍｕｎ。

１、Ｊ９４：２６２−２７１（１９６４）、レグリード他ｒＡｃ＋ａ　Ｐａｅｄ ｒｉａ＋ｚ　５ｃａｎｄ、Ｊ７５：６９６−７０１（１９８６）、アイザンクス 他ｒＪ、　ＩｎｆｅｃＬＤｉｓ、Ｊ１９５４：９６９−９７１（１９８６）参照 ］。とくに、ヒトの全乳は、単純庖疹ウィルス２に対してｒｉｎ−ｖｉｔｒｏＪ で抗ウイルス中和作用を示すことが認められている。［ロペズ他ｒＡｒｃｈ、Ｆ ｒ、Ｐｅｄｉａｔｒ、Ｊ４６：２６３−２６５（１９８９）コ。この抗ウィルス 作用が何に起因しているかについてはいくつかの説があるが、まだ確定的な説明 は得られていない。

乳の抗ウィルス作用の種たる原因は、従来、主としてそこに含まれる免疫グロビ ン（ＩｇＧ）の存在によるものとされてきた。この抗ウィルス作用をもたらす物 質としては、他にも、熱に対して比較的安定性のある非脂質高分子（マシューズ 他、マイケルズ、いずれも上記書）および／または分子重量が４００，０００ド ルトンの分子（レグリード他、上記書）および／またはカプセルに包まれたウィ ルスのみに作用する脂質層成分（アイザノクス他、上記書）であるとする説があ る。

このように乳の抗ウィルス作用の原因物質を特定できないために、乳あるいはそ の成分あるいはそのシステムを抗ウィルスの目的に使用することにはおのずから 限界がある。

ヒトの唾液も、また、単純庖疹ウィルス１を含む多くのウィルスに対する作用を もツコとが以前から知られている。［ジャリンク他ｒＪ、ｒｎｆｅｃ１．Ｄｉｓ 、＋１３７：５８３−５８６（１９７ｇ）参照］。残念ながら、ヒトの唾液の抗 ウィルス作用が何に起因しているかについてもまだ確定的な説明が得られておら ず、糖蛋白質［ラーナー他ｒＪ、Ｉｍｍｕｎｏ１．Ｊ９６：５９−６３（１９６ ６）コ、免疫ゴロプリンＡ［）マシｒＪ、ｅ１ｉｎ、１ｎｖｅｓ１．Ｊ４２：１ ５５２−１５６０（１９６３）］　、あるいは免疫グロブリンＧ［ジャリンク他 、上記書］に起因するものとするなどさまざまな説がある。最近では、さらに、 抗ウィルス作用は、ウィルス中和作用によるものではなく細胞はご作用によるも のではないか、すなわち、唾液が口部上皮細胞に直接作用して細胞をウィルスの 感染から防ぐのではないかという説も出されている。［ハイネマン、Ｈ，Ｓ、お よびＭ、Ｓ、グリーンバーブｒＡｒｃｈｓ　０ｒａｌ　Ｂｉｏｌ、＋２２５：２ ５７−２６１（１９８０）参照］。

残念ながら、唾液の抗ウィルス作用が何に起因するかもまだ明かとはなっていな い。

単純庖疹ウィルスによる感染およびそれがもつ細胞への潜在的な毒性をあらゆる 段階で予防し抑制することに成功した薬剤は存在しない。

ヒト免疫不全症ウィルス（ＨＩＶ）は、最近になってやっとその存在が確認され たウィルスであるが、致命的で広範に存在するウィルスである。これらＨＩＶウ ィルスの生化学および生理学的諸性質はまだほとんど知られていない。ｒｉｎ− ｖｉｔｒｏＪではヒトの全唾液と１時間半以上接触させることによってヒト免疫 不全症ウィルス（ＨＩＶ）のフィトヘムアグルチニンで刺激されたリンパ球を感 染させる能力が抑制されるという報告がある。［フルツｒＬａｎｃｅｌＪ２：１ ２１５（１９８６）］。しかし、培養時間がそれより短い場合には、顕著な消毒 作用は認められない［フルツ、上記書参照コ。さらに、報告された唾液の資料の すべてがＨＩＶ−１の伝染性の１００％の抑制を保証しているわけではない［フ ォックス他ｒＪＡＤＡＪ１１８ニア０９−７１１（１９８９）参照］。

現在までのところ、知り得る限りにおいて、ＨＩＶの感染およびその細胞への潜 在的な毒性の予防および治療に常に成功することを立証した薬剤あるいは方法は 存在しない。

予防と治療がとくに困難なエンヴエローブ・ウィルスとして、他にも、各種庖疹 ウィルスく水痘−帯状庖疹ウィルス、サイトメガロウィルス、ＥＢウィルス、ヒ ト庖疹ウィルス６など）、パラミクソウィルス（ヒトのパラインフルエンザウィ ルスなど）、オルトミクソウィルス科のウィルス（ＡおよびＢ型インフルエンザ ウィルスなど）、ロータウィルス、コロナウィルス、レトロウィルス（ヒトのＴ 細胞白血病ウィルス、ウシの白血病ウィルス、サルの免疫不全症ウィルスなど） などが挙げられる。

哺乳類の大部分の自然の外部分泌物には自然の抗菌作用物質が含まれていること はよく知られている。とくに、自然に発生し唾液や乳中に存在することが知られ る抗菌性のチオシアネート／ペルオキシダーゼ／Ｈ２Ｏ２系は、広範に研究が行 なわれている。

唾液中には抗菌性のペルオキシダーゼ依存系が存在することが確認されており、 これは、下記のようにハイポチオシアナイト（次亜チオシアン酸塩）　（○５Ｃ Ｎ−）を生成することができる。

［オラム、レイターｒＢｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、Ｊ１００：３７３−３８１（１９６ ６）、ホック、ジャゴｒＢｉｏｃｈｅｍ。

Ｊ、＋１１７：７７９−７９０（１９７０）Ｊ　、カールソン他ｒｌｎｒｅｃｔ 、　Ｉｍｍｕｎ、Ｊ４４：５８１−５８６（１９８４）コ。

唾液中に存在すると考えられており、この系の中でチオシアネートを酸化するペ ルオキシダーゼは、 唾液ペルオキシダーゼおよびラクトペルオキシダーゼを含む。乳の中にも同様な 抗菌性のラクトペルオキシダーゼ依存系が存在することが確認されている。［オ ラム、レイターｒＢｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、Ｊ１００：３８２（１９６６）］、実際 、唾液中で機能するチオシアネート／ペルオキシダーゼ／過酸化水素系は、乳の 中での同様に機能する。

［クレバノフ、Ｓ、Ｊ、他ｒＪ、Ｄｅｎｊ　Ｒｅｓ、Ｊ（ｓｕＰＰ−）Ｐ、８６ （１９６５）コ。

ｒｉｎ　ｖｏｌｒｏＪでは、ペルオキシダーゼ／チオシアネート／過酸化水素系 が頻繁に歯および／または歯周組織を破壊する原因となることが知られている若 干の細菌に対して抗菌効果をもつことが示されている。［カールソン、上述書、 コートイス他ｒＪ、Ｄｅｎｌ　Ｒｅｓ、Ｊ６８（ｓＰｅｃ、１ｓｓｕｅ）：＋０ ０２（１９８９）参照コ。この系の抗菌効果は、また、頬面粘膜のアフタ性外傷 の症例では「ｉｎ　ｖｉｖＯ」でも実証されている。［フージエンドーン、ビエ ッセンスｒＪ、０ｒａｌ　Ｐａｔｂｌ、Ｊ１６：４２５−４２７（１９８７）コ 。

残念ながら、チオシアネート／ペルオキシダーゼ／過酸化水素系の抗菌メカニズ ムはまだ正確には確認されていない。しかし、生理的ｐＨでは、　（この系で生 成される）ハイポチオシアナイト（次亜チオシアン酸塩）が細菌の必須アミの酸 および酵素のＳＨ基の酸化に介在して細菌の活動を抑制すると考えられている。

さらに、ラクトペルオキシダーゼが同じく細菌の活動を抑制する抗菌作用がある とみられるシアン亜硫酸やシアン硫酸などチオシアネート・イオンの高級オキシ 酸の形成にかかわっているとの説もある。［ビョルク、Ｌ、、Ｏ，クレツラン「 ｌ。

Ｄａｉｒｙ　Ｓｃｉ、Ｊ６３：９１９−９２１（１９８０）、ホック他、上記書 、プルイツト他ｒＢｉｏｃｈｅｍｉｓｌｒＹＪ２１：５６２−５６７（１９８２ ）コ。

チオシアネート／ペルオキシダーゼ／過酸化水素過酸化物系を含んだ口部で活性 化される抗菌性歯みがきも知られている。口部に投与されると、この種の抗菌性 歯みがき中の酵素依存系が口腔内の自然の化学的環境中の（酸素および／または 水など）各種構成物質によつｔ活性化されることになる。とくに、ベリコ他に与 えられたアメリカ合衆国特許第４５６４５１９号（以下ベリコ゛　５１９と呼ぶ ）は、２−酵素型の噛む口部活性化抗菌歯みがきを開示している。この歯磨きは 、チオシアネートとラクトペルオキシダーゼを含み、この中、ラクトペルオキシ ダーゼは、歯みがき中の他の酵素系によって形成される過酸化水素との相互作用 によって、ハイポチオシアン酸（次亜チオシアン酸）　（）ＩＯ３ｃＮ）を用い た酸−塩基の平衡溶液中に存在する負の一価のハイポチオシアナイト（次亜チオ シアン酸塩）イオン（Ｏ５ＣＮ−）の形をとる細菌抑制物質を生成する。

またモントゴメリー他に与えられたアメリカ合衆国特許第４５７６８１７号には 、消毒用のために抗菌性酵素を利用した包帯およびガーゼが開示されている。

このガーゼは、酵素を利用した用具を漿液と接触させて過酸化水素を生成する目 的で、漿液で活性化されるオキシドレダクターゼ（酸化還元酵素）を含んでいる 。

ある実施例では、この種の抗菌性包帯はラクトペルオキシダーゼなどの過酸化性 ペルオキシダーゼも含むように構成されている。

ジャーナルｒＢＩＯＦＵＴＵＲＪ　（１９９０年２月、５２ページ）には、共働 すると各種感染症の治療に有用とおもわれる有毒な遊離基を生成する２つの酵素 を有する系が開示されている。この系は、グルコースの存在下でＨ２０□を生成 するグルコース・オキシダーゼを含むものである。この系は、また、Ｈ２０□と ともに細胞にとって毒性の高いヨード化物も含んでいる。残念ながら、この毒性 の正確なメカニズムはまだわかっていない。このジャーナルの中では、さらに、 このグルコース・オキシダーゼ／ペルオキシダーゼ系がＣａａｄｉｄａ　ａｌｂ ｉｃａｎｓに対する単クローン抗体と結合された場合にマウスのこの種感染症の 予防に効果があったことが報告されている。このグルコース・オキシダーゼ／ペ ルオキシダーゼ系は、また、ＨＩＶのｇｌ）１２０フラクシヨンのエピトープ用 単クローン抗体と結合された場合にこのエピトープを表すＳａｃｂａｒｏｍｙｃ ｅｓの感染症に効果があったことも報告されている。

ジャーナルｒｃＬＩＮＩｃＡＬ　ＲＥＳＥＡＲＣＨＪＶｏ１３６、Ｎｏ、５（１ ９８８）８０９Ａには、ｒｉｎ　ｖＨｒｏＪでは、ラクトペルオキシダーゼ−ハ ロゲン化物−過酸化水素（ＬＨＨＰ）系が呼吸器シンシチウム・ウィルス（Ｒ３ Ｖ）の自己複製に効果があったことが報告されている。また、ミエロペルオキシ ダーゼ−ハロゲン化物−ベルオキシダーゼ系（食細胞によって捕食されたバクテ リアに対するホストの防御メカニズムの中で重要な役割を果たす）が、Ｒ３Ｖに 対するホストの防御においてもある役割を果たしているのではないかという説も 出されている。

最後に、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ３９１２４５７号の中には、マクロファージのレ ベルでヒトの自然の抗体活動を補強するためにミエロペルオキシダーゼをキャリ ヤと合わせたものをヒトに投与することが開示されている。この開示では、精製 したミエロペルオキシダーゼをマクロファージに親和力を有するキャリヤと結合 させ、キャリヤがミエロペルオキシダーゼをマクロファージが抗体防御のために それを補足して利用するところまで運ぶようにしている。開示されているキャリ ヤには、マクロファージに親和力を有する抗体あるいはその断片が含まれている 。他に利用できるキャリヤとしては、特殊なりボゾームおよびヒトの血清アルブ ミンが示されている。好ましくは、ミエロペルオキシダーゼおよびそれと結合さ れたキャリヤが、ＤＮＡ組み替え技術を利用して形成される。このような組成物 が、人体の自然の抗体防御機能を助け、高め、補強するために与えられ、また、 ＨＩＶを含めて各種伝染病の撲滅に有用であると考えられている。

ペルオキシダーゼとチオシアネート／ペルオキシダーゼ／過酸化水素系の性質に 関しては、それぞれに以前からいろいろなことが知られており、また、エンヴエ ロープ・ウィルス（とくに、単純庖疹およびヒトの免疫不全症ウィルス）による 感染症の予防および治療のための予防および治療薬がめられているにもかかわら ず、われわれの知るかぎり、今日まで、エンヴエローブ・ウィルスによる感染症 の予防および治療のために、またとくに、単純庖疹ウィルスおよびヒトの免疫不 全ウィルスによる感染症の予防および治療のために、ペルオキシダーゼまたは過 酸化物系を組み込んだ薬剤を利用したものはいない。

したがって、Ｈ３ＶおよびＨＩＶを含めてエンヴエローブ・ウィルスによる感染 症を予防しまた／または治療する予防用および治療用ペルオキシダーゼ薬剤に対 するニーズ、ならびに、それらに対する抑制作用を有する基質、酸素供与体、あ るいはペルオキシダーゼを自然に発生する濃度に頼るのではなく、それらを必要 としている人々に投与できるようにペルオキシダーゼを予防および治療のための 薬剤に応用することへのニーズが存在すると考えられる。最後に、そのようなペ ルオキシダーゼ薬剤をそれを必要としている人々に予防および治療に効果のある 量だけ投与することによって、Ｈ３ＶおよびＨＩＶを含むエンヴエロープ・ウィ ルスの感染症を予防し治療する方法に対するニーズも存在する。

発明の概要 本発明の主要な目的は、エンヴエローブ・ウィルスの予防および治療のための薬 剤の処方（製造）にペルオキシダーゼを使用（応用）する用途を提供することで ある。

本発明の他の目的は、単純庖疹ウィルスおよびヒトの免疫不全ウィルスを含めて エンヴエローブ・ウィルスの感染症を予防および治療するための薬剤にペルオキ シダーゼを予防および治療の目的で応用する用途を提供することである。

本発明のさらに他の主要な目的は、ペルオキシダーゼ薬剤をそれを必要としてい る個人に予防および治療に効果のある量を投与することによってウィルスに対す る予防法および治療法を提供することである。

本出願に関しては、「予防」という用語は、エンヴエローブ・ウィルスとくにＨ ５ＶおよびＨＩＶの感染症を予防するおよび／または予防に役立つ薬剤、量、方 法、用途、作用等に関してさまざまに使用される。また、本出願に関しては、「 治療」という用語は、エンヴエローブ・ウィルスとくにＨ３ＶおよびＨＩＶの感 染症状を改善する薬剤、量、方法、用途、作用等に関してさまざまに使用される 。

本発明が教えるところにもとづいて、ここには、単純庖疹ウィルスおよびヒトの 免疫不全症ウィルスを含めてエンヴエローブ・ウィルスの感染症を予防し治療す るための薬剤中にまたペルオキシダーゼ薬剤の投与の方法にペルオキシダーゼを 予防および治療の目的で応用する用途が開示されている。

本発明の好ましいペルオキシダーゼ薬剤（以下、「ペルオキシダーゼ組成物」ま たは単に「組成物」と呼ぶことがある）とは、それだけでほぼ必要物を備えた抗 ウイルス系で、その利用者が、自然に発生するｒｉｎ　ｖｉｖｏＪ化合物あるい はその濃縮物に依存しないでも作用するものである。この薬剤には、好ましくは 過酸化水素を生成するグルコース−グルコース・オキシダーゼ酵素系である酸素 供与体、たとえばラクトペルオキシダーゼのようなペルオキシダーゼ、ハロゲン およびギハロゲンからなるグループから選ばれた基質が含まれる。これらペルオ キシダーゼ薬剤は、それを比較的短期間投与しただけでもＨ３ＶおよびＨＩＶな どのエンヴエロープ・ウィルスの予防および治療に効果があるように処方される 。好ましくは、これら各種成分の濃縮および／または処方は、酸素供与体および ペルオキシダーゼで生成される化合物の生成を最大し、同時に酸素供与体の濃度 をペルオキシダーゼの活動を妨害しないレベルに維持するように選ばれる。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤の処方は、唾液のチオシアネート−ペルオキシダ ーゼ系の各種成分を含み、またややそれを模倣する形にすることが好ましいこと が認められている。そのような処方が好ましいのは、その成分がヒトの外分泌物 の純粋な成分であるためである。このような処方は、さらに、その各種成分のい ずれかによって食物の吸収が増進されるために薬剤の抗ウィルス作用がいっそう 高められることからも好ましい。

したがって、本発明は、最も好ましくは、それだけでほぼ必要物を備えて次亜チ オシアン酸塩を生成する予防および治療用のペルオキシダーゼ／チオシアネート ／過酸化水素薬剤であって、エンヴエロープ・ウィルスの感染症の予防および治 療のために利用者が自然に発生するそのｒｉｎ　ｖｉｖｏＪの口内濃縮物に依存 することなく適用あるいは利用できる薬剤を提供するものである。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤によって予防および／または治療されるエンヴエ ローブ・ウィルスには、他に、バラミクソウィルス（ヒトのパラインフルエンザ ウィルスなど）、オルトミクソウィルス科のウィルス（ＡおよびＢ型インフルエ ンザウィルスなど）、ロータウィルス、コロナウィルス、発疹ウィルス（帯状水 痘ウィルス、サイトメガロウィルス、ＥＢウィルス、ヒト庖疹ウィルス６など） 、レトロウィルス（ヒトのＴ細胞白血病ウィルス、ウシの白血病ウィルス、サル の免疫不全症ウィルスなど）が含まれる。

さらに、本発明が教えるところにもとづけば、単純庖疹ウィルスやヒトの免疫不 全ウィルスなどのエンヴエローブ・ウィルスの感染症の予防および治療の方法が 開示される。この方法は、本発明のペルオキシダーゼ薬剤をそれを必要とする人 に予防および治療に効果のある量だけ投与することを含むものである。

以上の目的および本発明の他の目的は、添付の図面を参照して行なう以下の説明 から明かとなろう。

図面の簡単な説明 第１図は、Ｈ３Ｖ−１を本発明の薬剤のペルオキシダーゼ／チオシアネート／過 酸化水素系で前治療した２０分、３０分、および１２０分後に得られた結果を示 す棒グラフである。

第２図は、本発明の薬剤のペルオキシダーゼ／チオシアネート／過酸化水素系で 治療した後に上清中の培養リンパ球中のＨＩＶ生成ｐ２４の成長に関して得られ た結果を示す線グラフである。

第３図は、本発明の薬剤のベルオキシダー＋！／チオシアネート／過酸化水素系 で治療した後に１０６の細胞ごとのｐ２４の細胞間成長に関して得られた結果を 示す線グラフである。

第４図は、ラクトペルオキシダーゼとミエロペルオキシダーゼでの検定結果を示 した線グラフである。

発明の詳細な説明 本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、一種類のペルオキシダーゼを含むものである 。好ましくは、ペルオキシダーゼ薬剤は、Ｈ３ＶおよびＨＩＶを含むエンヴエロ ーブ・ウィルスに対して抗ウイルス性を示すペルオキシダーゼ／酸化可能な基質 ／酸素供与体系を含むものである。これらの抗ウイルス性薬剤にあっては、ペル オキシダーゼが酸素供与体（過酸化物）による基質（ハロゲンまたはギハロゲン ）の酸化の触媒作用を果たして、負の電荷をもつ一価の酸化化合物を形成する。

この薬剤は請求めあるいは必要に応じて、Ｈ３ＶおよびＨＩＶなどのエンヴエロ ープ・ウィルスの感染症の予防および／または治療のためにそれを必要としてい る人にその予防および／または治療に有効な量を投与できるように、予防および ／または治療の目的で処方することができる。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、また、バラミクソウィルス、オルトミクソウ ィルス科のウィルス、ロータウィルス、コロナウィルス、発疹ウィルス（帯状水 痘ウィルス、サイトメガロウィルス、ＥＢウィルス、ヒト庖疹ウィルス６など） 、レトロウィルス（ヒトのＴ細胞白血病ウィルス−１、ウシの白血病ウィルス、 サルの免疫不全症ウィルスなど）などのエンヴエローブ・ウィルスの感染症に対 する予防および治療の用途に関しても有用である。

本発明の薬剤の基質は、負の電荷をもつハロゲン、その誘導体、負の電荷をもつ ギャロゲン、およびその誘導体で構成されるグループから選ばれる。「ノへロゲ ン」という用語は、当該技術に熟達した人には周知の通り、元素周期表の■族に 属する元素の負の電荷をもつ一価の状態のものを指し、臭化物、塩化物、および ヨウ化物を含む。　「ギハロゲン」という用語は、負の電荷をもつ一価のイオン およびイオン化合物を指す。本発明の「ギハロゲン」は、ナトリウムチオシアネ ート、カリウムチオシアネート、アンモニウムチオシアネート、鉄（ｍ）チオシ アネートなどのチオシアネート塩およびその混合物を含む。これらの基質および その誘導体は、自然の物質（たとえば、唾液およびヒトの乳）から抽出（遊離） することもできるし、また自然のまたは化学的方法で生成することもできる。こ れらは、いずれも、当該技術に熟達した人には周知のものである。

本発明の薬剤中のペルオキシダーゼは、酸素供与体による基質の酸化の触媒作用 を果たして、酸化化合物を生成する。これらのペルオキシダーゼには、セイヨウ ワサビのペルオキシダーゼのような植物の（植物性）ペルオキシダーゼ、ならび に、唾液ペルオキシダーゼ、ラクトペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ 、好酸性ペルオキシダーゼなどのような哺乳類のペルオキシダーゼが含まれる。

本発明の薬剤に用いられるペルオキシダーゼは、当該技術に熟達した人には周知 の方法および手法によって、セイヨウワサビや唾液から抽出されるペルオキシダ ーゼなどのように［たとえば、マンソンーラテムツラ他ｒＢｉｏｃｈｅｍｉｓｊ ｒ７Ｊ２７：２３３−２３９（１９８８）に記載されているようにコ、あるいは また、乳の誘導体（すなわち乳Ｖｔ＞から抽出されるラクトペルオキシダーゼや リンパ球から生成されるミエロペルオキシダーゼなどのように、自然の環境から 抽出することができる。これらのペルオキシダーゼは、やはり当該技術に熟達し た人には周知のように、ＤＮＡ組み替え技術によって生成されるペルオキシダー ゼ（ミエロペルオキシダーゼを含む）をも含むものである。

［本出願に関しては、「国際単位」という用語は、ｐＨ７および２５℃で、毎分 、１マイクロモルの基質の触媒作用を行なう酵素の量を指す。酵素は、ダラムま たはミリグラムの適当ないずれか一方を用いてｒＩＵ」　（国際単位）で濃度を 示したレーベルを付け、乾燥した状態または液状で供給される。コラクトベルオ キシダーゼは、糖蛋白質で、商品としては、乳から得られた凍結乾燥した粉末状 のものが市販されている。この市販のペルオキシダーゼは、８０国際単位（以下 ＩＵで表すことがある）の活性があり、Ｌ−チロシン・ヨウ素化に関しては９３ ，０００の分子量があると推定される。ラクトペルオキシダーゼの物理化学的性 質としては、分子量７８．０００、部分比体積０．７４、ヘム／分子１．０など が知られている。

唾液ペルオキシダーゼは、糖蛋白質で、唾液または耳下腺の線屑から得ることが できる。唾液ペルオキシダーゼの化学的特性は、よく知られていない。しかし、 唾液ペルオキシダーゼの物理化学的性質としては、分子量が約８０，０００−１ ００，０００の範囲にあることなどが知られている。

ミエロペルオキシダーゼも、やはり糖蛋白質である。市販されているものの中に は（アメリカ合衆国ミズーリ州セントルイスのＳＩＧＭＡ社）　、０．０２Ｍの 酢酸ナトリウム緩衝剤から凍結乾燥したヒトのリンパ球から得られるミエロペル オキシダーゼがある。この市販されているものは、４０−１００　Ｉ　Ｕの活性 がある。

セイヨウワサビのペルオキシダーゼも、糖蛋白質である。市販されているものの 中には（アメリカ合衆国ミズーリ州セントルイスのＳＩＧＭＡ社）、基本的に塩 を含まないものもある。この市販されているものは、固体ｍｇ当たり２５０−３ ３０単位の活性がある。この商品の予備的研究では、その中に２つの塩基性アイ ソチームが含まれており、酸性のアイソチームは含まれていないことが示されて いる。

［ここで用いられる「単位」という用語は、ｐＨ６および２０℃で２０秒間に１ ゜０ｍｇのプルブロガリンを生成するセイヨウワサビのペルオキシダーゼの量を 指す。このプルブロガリン（２０秒）の単位は、２５℃で毎分約１８ｕＭ単位と 等価である。コ 表ＩＡには、本発明の薬剤で利用する好ましいペルオキシダーゼ／基質の組み合 わせの例を示す。

表ＩＡ ペルオキシダーゼ　基質 （２）ラクトペルオキシダーゼ　チオシアネート、ヨウ化物（３）ミエロペルオ キシダーゼ　塩化物、ヨウ化物、チオシアネート（４）セイヨウワサビ・ペルオ キシダーゼ　塩化物、ヨウ化物下の表ＩＢには、（酸素供与体からの過酸化物一 本出願の説明に関しては過酸化水素−の存在下で）次亜ハロゲン酸塩または次亜 チオシアン酸塩化合物を生成するための本発明の表ＩＡの代表的な酵素系の反応 を示す。

表ＩＢ （１ａ）唾液ペルオキシダーゼがチオシアネートと過酸化水素の相互作用の触媒 として働いて、次亜チオシアン酸塩と水を生成する。

（１ｂ）唾液ペルオキシダーゼがヨウ化物と過酸化水素の相互作用の触媒として 働いて、次亜ヨウ素酸塩と水を生成する。

（２ａ）ラクトペルオキシダーゼがチオシアネートと過酸化水素の相互作用の触 媒として働いて、次亜チオシアン酸塩と水を生成する。

（２ｂ）ラクトペルオキシダーゼがヨウ化物と過酸化水素の相互作用の触媒とし て働いて、次亜ヨウ素酸塩と水を生成する。

（３ａ）ミエロペルオキシダーゼが塩化物と過酸化水素の相互作用の触媒として 働いて、次亜塩素酸塩と水を生成する。

（３ｂ）ミエロペルオキシダーゼがヨウ化物と過酸化水素の相互作用の触媒とし て働いて、次亜ヨウ素酸塩と水を生成する。

（３ｃ）ミエロペルオキシダーゼがチオシアネートと過酸化水素の相互作用の触 媒として働いて、次亜チオシアン酸塩と水を生成する。

（４ａ）セイヨウワサビ・ペルオキシダーゼが塩化物と過酸化水素の相互作用の 触媒として働いて、次亜塩素酸塩と水を生成する。

（４ｂ）セイヨウワサビ・ペルオキシダーゼがヨウ化物と過酸化水素の相互作用 の触媒として働いて、次亜ヨウ素酸塩と水を生成する。

（５ａ）植物ペルオキシダーゼが塩化物と過酸化水素の相互作用の触媒として働 いて、次亜塩素酸塩と水を生成する。

（５ｂ）植物ペルオキシダーゼがヨウ化物と過酸化水素の相互作用の触媒として 働いて、次亜ヨウ素酸塩と水を生成する。

（５ｃ）植物ペルオキシダーゼが臭化物と過酸化水素の相互作用の触媒として働 本発明の酸素供与体は、薬剤中で基質の酸化に必要な過酸化物（たとえば、過酸 化水素）を供給する。

好ましくは、酸素供与体は、基質、その基質に特定の酵素、および水および／ま たは酸素および／または水素など他の必要な反応物質を含む酵素系である。代わ りに、本発明の薬剤中においては、（過酸化水素の形で）過酸化物を供給するた めに連鎖球菌あるいは一般には乳酸菌と呼ばれている乳酸桿菌などの微生物を利 用することもできる。この種乳酸菌の具体的な例としては、Ｌａｃｌｏｂａｃｃ ｉｌｌｕｓｃａｓｅｉ、５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ、ｓｌ ＋ｅρｊｏｃｏｃｃｕｓ　ｍｕ＋ａｎｓなどを挙げることができる。この種の微 生物（細菌）の使用は、局部塗布用の腟クリームとして使用するために処方され る薬剤ではとくに好ましい。

本出願では、また、無機過酸化物（たとえば、過酸化ナトリウム、過酸化マグネ シウムなど）または有機過酸化物（たとえば、過酸化ベンジル、過酸化尿素など ）の使用も考えられる。また、反応すると過酸化水素と生成する薬品の使用も考 えられる。また、過酸化水素自身を酸素供与体として使用することもできる。

実際になにを酸素供与体として使用するかは、投与のための薬剤の処方を含むい くつかの要因によって異なってくる。

最も好ましくは、酸素供与体は、酸化可能な基質、その基質に特定の酸化還元酵 素、および酸素および／または水など他の必要な反応物質を含む酵素系である。

そのような酸化可能な基質およびそれに特定の酸化還元酵素の例は、ペリコ他に 与えられたアメリカ合衆国特許第４５６４５１９号（以下、ペリ二′５１９と呼 ぶ）に挙げられている。下の表ＩＩＡには、いくつかの例を示す。

表ｎＡ （ａ）Ｂ−Ｄ−グルコース　グルコース・オキシダーゼ　水、酸素（ｂ）Ｄ−ガ ラクトース　グルコース・オキシダーゼ　酸素（ｃ）尿素塩　尿素塩オキシダー ゼ　水、酸素（ｄ）コリン　コリン・オキシダーゼ　酸素（ｅ）Ｄ−アミノ酸１ 　Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ　水、酸素（ｆ）Ｄ−グルタミン酸塩　Ｄ−グルタ ミン酸塩オキシダーゼ　水、酸素（ｇ）グリシン　グリシン・オキシダーゼ　水 、酸素（ｈ）グリコレート　グリコレート・オキシダーゼ　水、酸素（１）Ｌ− ソルボース　し−ソルボース・オキシダーゼ（ｊ）第一級アルコール　アルコー ル・オキシダーゼ（ｋ）第一級アミン　アミン・オキシダーゼ（１）ＮＡＤ　（ Ｐ）ＨＮＡＤ　（Ｐ）Ｈオキシダーゼ’Ｄ−アミノ酸は、プロリン、メチオニン 、イソロイシン、アラニン、表ｍＡの代表的な酵素系が過酸化水素を生成する反 応を表ｎＢに示す。

相互作用の触媒として働いて、過酸化水素とグルコン酸を生成する。

（ｂ）ガラクトース・オキシダーゼがＤ−グルコースと酸素の相互作用の触媒と して働いて、過酸化水素とＤ−ガラクトガーヘキンージアルドーゼを生成する。

（ｃ）尿素塩オキシダーゼが尿素塩、水、および酸素の相互作用の触媒として働 いて、過酸化水素、アラントイン、および二酸化炭素を生成する。

（ｄ）コリン・オキシダーゼがコリンと酸素の相互作用の触媒として働いて、過 酸化水素とベタイン・アルデヒドを生成する。

（ｅ）Ｄ−アミノ酸オキシダーゼがプロリン、メチオニン、イソロイシン、アラ ニン、バリン、およびフェニルアラニンのＤ−異性体などのＤ−アミノ酸ならび に水および酸素の相互作用の触媒として働いて、過酸化水素、アンモニ乙および 対応するアルファーケト酸を生成する。

（ｆ）Ｄ−グルタミン酸塩オキシダーゼがＤ−グルタミン酸塩、水、および酸素 の相互作用の触媒として働いて、過酸化水素、アンモニア、および２−オキソゲ ルタン酸塩を生成する。

（ｇ）グリシン・オキシダーゼがグリシン、水、および酸素の相互作用の触媒と 特定の出典から引用して表ｎＡに挙げた代表的な酸化還元酵素の特性は、ベリコ ゛　５１９に述べられているが、そこに説明されている関連する特性を、本出願 の一部として以下に引用する。

最も好ましくは、本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、ラクトペルオキシダーゼま たあはミエロペルオキシダーゼのいずれかをチオシアネート（ＳＣＮ−）基質お よびグルコース／グルコース・オキシダーゼ酵素系酸素供与体と組み合わせたも のを含んでいる。

上に述べたペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系は、好ましくは、使用者の自然 に発生する「ｉｎ　ｖｉｖｏＪでの基質、酸素供与体、ペルオキシダーゼ、およ び他の成分の濃度にほぼ依存することなく適用あるいは使用できるそれだけでほ ぼ必要物を備えた系としてｒｉｎ　ｖｉｖｏＪで使用する予防および治療用薬剤 中に処方される。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤の有効性が、当該薬剤が投与される自然に発生す る環境によって生じることも明らかにされている。たとえば、ヒトの口の中では 、過酸化水素の濃度は生物学的生産および唾液の流れの正関数として変化する。

自然の事象としであるいは何らかの医療処置から生じた事象として唾液の流れが 低いレベルにあるときは、カリウム・チオシアネートやペルオキシダーゼなどの 各種成分の口内濃度はそれに対応して低下する。このことが、こんどは、薬剤が 投与されたときにその予防および治療効果を制限する限定要因になり得るであろ う。さらに、ペルオキシダーゼの口内濃度が唾液の流れの低下によって抑えられ ると、過酸化水素の口内濃度が閾値まで上昇し、そのため過酸化水素が薬剤のペ ルオキシダーゼの作用を妨害するおそれがある。

したがって、上に記した薬剤中の基質、酸素供与体、およびペルオキシダーゼの 濃度は、過酸化水素とペルオキシダーゼの濃度を調和させて過酸化水素の濃度を それによってペルオキシダーゼの作用が妨害されないｔ／ベベル制限するように 調節し制限しなければならない。

［ここで使用する限りにおいて、ミリモルという用語は、薬剤の分子量に対応す るダラムでの量を１０００で割ったものを意味する。］酸素供与体が過酸化水素 自身である場合には、それは、通常本発明の薬剤１グラムまたは１ミリリツトル 中に約２ないし３００ミリモルの量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミ リリツトル中に約３ないし３００ミリモルの量で存在する。

酸素供与体が酸化可能な基質とその基質に特定の酸化還元酵素である場合には、 酸化可能な基質は、通常ペルオキシダーゼ薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中 に約０．０１５ないし０．５ミリモルの量で、また好ましくは薬剤１グラムまた は１ミリリツトル中に約０．０２５ないし０．１ミリモルの量で存在し、また、 酸化還元酵素は、通常薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．５ないし５ ００１Ｕの量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約１． ０ないし４０ＩＵの量で存在する。

酸素供与体が無機または有機過酸化物である場合には、その過酸化物は、通常薬 剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．０００００６ないし０．６ミリモル の量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．００００ ６ないし０．０６ミリモルの量で存在する。

基質は、通常薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．００００００８ない し０．０１ミリモルの範囲の量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミリリ ツトル中に約０．０００００８ないし０．００６ミリモルの範囲の量で存在する 。

基質がチオシアネート塩（ギハロゲン）である場合には、それは１通常薬剤１グ ラムまたは１ミリリツトル中に約０．０００１ないし０．０１ミリモルの範囲の 量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．００１ない し０．００６ミリモルの範囲の量で存在する。薬剤の処方にあたっては、酵素の 作用を抑制または低減する金属化合物の使用を避けるように注意しなければなら ない。

基質がハロゲンである場合には、それは、通常薬剤１グラムまたは１ミリリツト ル中に約０．００００００８ないしｏ、ｏｏｇミリモルの量で、また好ましくは 薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．０００００８ないし０．００４ミ リモルの量で存在する。

ペルオキシダーゼは、通常薬剤１グラムまたは１ミリリツトル中に約０．０１な いし５０ミリの量で、また好ましくは薬剤１グラムまたは１ミリリンドル中に約 ０．２ないし４．０ＩＵの量で存在する。

のぞましい場合には、ペルオキシダーゼ薬剤は、「ｉｎ　ｖｉｖｏＪでの使用の ためにペルオキシダーゼによって生成される抗ウイルス性化合物を得る目的で、 ある系の化合物の一つまたは化合物の組み合わせの自然に発生する「ｉｎ　ｖｉ ｖｏ」濃度に依存するような系として処方できることが明らかにされている。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤の抗ウイルス性予防および治療効果は、本発明の 薬剤の処方によって生成される化合物の濃度に依存する。これら化合物の生成さ れる濃度は、１マイクロモルから１００ミリモルまでの間で変化するが、５マイ クロモルから１ミリモルの間の濃度が好ましい。この値を達成するために、酸素 供与体および／または基質の濃度に対するペルオキシダーゼ単位の濃度は、広い 範囲で変化させることができる。

水の存在は、本発明のペルオキシダーゼ薬剤の酸化／還元反応を促進する。水は 、また、ある種の反応では反応物質である。したがって、好ましくは、前記薬剤 の処方にあたっては、薬剤に最大限の安定性と保存寿命を与えるために、水の使 用を比較的低濃度にとどめる。

薬剤の中で活性化された酵素系の生成物が弱い有機酸を含む場合には、薬剤を有 機酸を中和する緩衝剤とともに処方すると有利である。適当な緩衝剤の一つは、 重炭酸ナトリウムである。

この点に関して１本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、生理的ｐＨにほぼ近似する ｐＨを示すように処方することが好ましい。具体的には、本発明のペルオキシダ ーゼ薬剤は、４．５から６．５の範囲のｐＨを有することが好ましく、６から６ ．５の範囲のｐＨを示すことがとくに好ましい。

それだけで必要物を備えた活性の薬剤として処方するためには、薬剤の成分をい っしょに処方の中に入れ、しかもその成分の少なくともいくつかは使用時まで互 いに化学的に分離された状態に保たれるようにすべきである。たとえば、ペルオ キシダーゼ、酸素供与体（酸素供与体酵素系または微生物）は、行動の自由を拘 束しあるいはマイクロカプセルに入れ、それらが使用されるときまで互いに反応 し合わないようにすることもできる。上に記した系のいかなる物質もいずれかの 成分によって破壊あるいは化学反応を抑制されることがなければ、薬剤は、単純 庖疹ウィルスおよびＨＩＶを含めてエンヴエロープ・ウィルスに作用する。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、特定の状況下での投与にとって好ましい任意 の適当な方法で、薬学的に許容されるキャリヤとともに処方することができる。

たとえば、薬剤を口内の感染症の治療に経口投与する歯みがき（チューインガム 、うがい薬、ペースト状歯みがき、スプレー、薬用ドロップ、食べられるボンボ ンなど）として処方することもできる。あるいは、薬剤をそれを必要とする人の 皮膚、目、毛など局部に投与するための局部処方薬（スプレー、ゲル、クリーム 、点眼剤、シャンプーなど）としておよび／または包帯またはガーゼに組み込ん で処方することもできる。最後に、薬剤を体内投与用の注射液として処方するこ ともできる。

本発明の薬剤を局部、経口、あるいは注射用処方として調製し包装するだめの方 法、機器、および加工処理技術は、当該技術分野では開発が進んでおりまたよく 知られている。

本発明の薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系は、このような処方に組み 込むのに適している。しかし、本出願に記載されている酵素は、強い剪断力や高 い温度などの条件下では劣化し不活性化するおそれがある。したがって、酵素が 薬剤の処方の他の成分と混ぜ合わされて完成品になる期間中、加工処理条件は、 いかなる長期間でも温度が５５℃より上に上昇しないように制御しなければなら ない。

保存の安定性を高めるために、本発明の薬剤のペルオキシダーゼの処方および調 製で行なわれる混和は、はぼ自由な水のない状態で行ない、また、完成品は、で きるだけ空気および水分に曝さないように包装しなければならない。

本発明のペルオキシダーゼ薬剤は、以下に説明する例によってさらによく理解さ れよう。ただし、これらの例は、あくまで説明のためのものであって、いかなる 意味でも本発明の範囲を限定するものではない。

実施例Ｉ 下の表■は、チューインガム、噛める錠剤、薬用ドロップなどの経口投与用歯磨 きとして処方されるペルオキシダーゼ薬剤用の薬学的に許容されるキャリヤの基 礎処方例を示したものである。

成分　（ａ）　（ｂ）　（ｃ）　（ｄ）ソルビトール、　７５　９８　２８ 結晶状コーンシユガー　７５７０ ガムベース　２３　２３　−　−− 香料　Ｉ　１　１　１ 着色剤　０．５　０．５　０．５　０．５緩衝剤　−−０，５０，５ 表面中、処方（ａ）および（ｂ）は、チューインガムの形での薬学的に許容され るキャリヤを示し、処方（Ｃ）および（ｄ）は、錠剤および薬用ドロップの形で の薬学的に許容されるキャリヤを示している。これらの処方の中で、ナトリウム ・サッカリンはアスパルテームで置換できる。

以下の各側は、本発明にもとづく経口投与で予防および治療に効果のある量を供 給するための歯みがきの調製に使用できる各種成分およびそれらの濃度を示した ものである。

表■ ４Ａ　４Ｂ　４Ｃ ソルビトール、結晶状　７０　７０　７０ガムベース　２３　２３　２３ グリセロール　５　５　５ 香料　Ｉｌ＋ 着色剤　０．５　０．５　０．５ 重炭酸ナトリウム　０．５　０．５　０．５１００．０　＋００．０　１００． ０ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 （チューインガム１００ｇあたり） グルコース・オキシダーゼ　４０．０００１Ｕ　−−−−Ｂ−Ｄグルコース　ｉ 、ｏｇ−−−一 コリン・オキシダーゼ　−８，０００１Ｕ　−コリン　−　］、Ｏｇ　− Ｄ−グルタミン酸塩オキシダーゼ　−−−−２，５００１ＵＤ−グルタミン酸塩 　−一−−０，］ｇラクトペルオキシダーゼ　４，０００１Ｕ　１，５００１Ｕ 　１，０００１Ｕカリウム・チオシアネート　０．０１　ｇ　０．００５　ｇ　 −表Ｖ ソルビトール、結晶状　４３　４３　４３ガムベース　２０　２０　２０ グリセロール　２５　２５　２５ 香料　１１１ 着色剤　０．５　０．５　０．５ 重炭酸ナトリウム　０．５　０．５　０．５１００−０　１００．０　！００． ０ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ　５，０００１Ｕ　−−−−Ｄ−アラニン　０、Ｉｇ 　−−−− グルコース・オキシダーゼ　−２０，０ＯＯＩＵ　２，０ＯＯＩＵＢ−Ｄ−グル コース　−−０，５ｇ　０．５ｇラクトペルオキシダーゼ　５００１Ｕ　２，５ ００１Ｕ　１，０００１Ｕカリウム・チオシアネート　−０，０１ｇ　０．００ ５　ｇナトリウム・チオシアネート　０．０１ｇ　−−−−表■ 重量（グラム） ６Ａ　６８　６Ｃ 薬用ドロツプ ソルビトール、結晶状　９７　９７　９７グリセロール　１　１　１ 香料　１　１　１ 着色剤　０．５　０．５　０．５ １００．０　１００．０　１００．０ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 グルコース・オキシダーゼ　１０，０００１Ｕ　−−−−Ｂ−Ｄグルコース　１ ．０ｇ　−− コリン・オキシダーゼ　−２，０００１Ｕコリン　０．５ｇ 尿酸塩オキシダーゼ　−１０，０００１０−尿酸塩　−０，７５ｇ　− ラクトペルオキシダーゼ　２００１Ｕ　２００１Ｕ　１，５００１Ｕカリウム・ チオシアネート　−−−−０，０１ｇ着色剤　０．５　０．５　０．５ 重炭酸ナトリウム　０．５　０．５　０．５１００．０　＋００．０　１００． ０ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 Ｂ−Ｄグルコース　−−０，５ｇ　ＩｇＤ−グルタミン酸塩オキシダーゼ　１０ ，０００１Ｕ−−−Ｄ−グルタミン酸塩　ｏ、ｏｓｇ　−−ラクトペルオキシダ ーゼ　１，５００　＋０　２，０００１０　１，０００１Ｕカリウム・チオシア ネート　０．００１ｇ　０．００５ｇ　一実施例■ 下の表■は、クリームまたはゲル状であるいは包帯またはガーゼに組み込んで局 部的に投与する局部用薬剤として処方されるペルオキシダーゼ薬剤用の薬学的に 許容されるキャリヤの基礎処方例を示したものである。

表■ 成分　（ａ）　（ｂ） 脱イオン水　＋９．０２　２０．０ コーンスターチ’　３８．０４　− Ｌｕｂ　ｒ　ａ　ｊ　ｅ　］　ＤＶ２３８．０４　−アロエ・ヴエラ　０．００ ００２１　−−Ｎａｔｒｏｓｏｌ　２５０Ｍ’　０．１　−キシリトール　４． ７６　− Ｃｉｒａｍｉ　Ｎ、１’　２０．０ ひまわり油　４０．０ ビタミンＥ　Ｏ，０５ Ｔｅｎｓａｍｉ　４１０７’　２．０ Ｔｅｎｓａｍｉ　１１０５”　３．０ Ｂｒｏｎｏｐｏｌ’　２．０ Ｍｙａｃ　ｉｄｅ　ＳＰ’　２．０ プロピレン・グリコール　１Ｏ１０ １ここに使用するコーンスターチの例としては、フランス、モントルーユのアル パン・ミュラー・インターナショナル社がＨＹＳＴＡＲＴＰＦの商品名で市販し ている水素処理をしたスターチ液が挙げられる。

２Ｌｕｂｒａｉｅｌ　Ｄは、フランス、モントルーユのアルパン・ミュラー・イ ンターナショナル社が市販しているグリセリンとアクリル溶液である。

３Ｎｉｌｒｏｓｏｌ　２５０Ｍは、アメリカ合衆国バージニア用ホープウェルの アクアロン社が市販しているヒドロキシエチレンセルロースである。

Ｃｉ＋ａｍｉ　Ｎ、１．Ｔｅｎｓａｍｉ　４１０７、Ｔｅｎｓａｍｉ　ｌ１０５ 、Ｂｒｏｎｏｐｏｌ、Ｍｙａｅｉｄｅ　ＳＰは、すべて、フランス、モントルー ユのアルパン・ミュラー・インターナショナル社が市販している製品名である。

表両中、処方（ａ）は、ゲルの形での薬学的に許容されるキャリヤを示しており 、処方（ｂ）は、クリームの形での薬学的に許容されるキャリヤを示している。

以下の各表は、本発明にもとづく局部用ペルオキシダーゼ薬剤の調製に使用でき る各種成分およびそれらの予防および治療に効果のある量を示したものである。

ゲル 脱イオン水　１９．０２　１９．０３ コーンスターチ　３８．０５４　３８．０５４Ｌｕ　ｂ　ｒ　ａ　ｊ　ｅ　ｌ　 ＤＶ　３８．０５４　３８．０５４アロエ・ヴエラ　０．００１　０．００！Ｎ ａｔｒｏｓｏｌ　２５０Ｍ　Ｏ，１０，１１００，００１００，００ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 コリン・オキシダーゼ　８，０００１０コリン　−　１．０ｇ ラクトペルオキシダーゼ　２００　１Ｕ　１，５００１Ｕカリウム・チオシアネ ート　−　ｏ、ｏｏｓ　ｇ表Ｘ 重量（％） 脱イオン水　２１．５１　２１．５］　２］、５１Ｃｉｒａｍｉ　Ｎ、１　２０ ．０　２０．０　２０．０ひまわり油　４０．０　４０．０　４０．０ビタミン Ｅ　Ｏ，０４０，０４０，０４Ｔｅ　ｎ　ｓ　ａｍ　ｉ　４１０７　２．０　２ ．０　２．ＯＴｅｎｓａｍｉ　１１０５　３．０　３．０　３．ＯＢ　ｒ　ｏ　 ｎ　ｏ　ｐ　ｏ　ｌ　２．０　２．０　２．ＯＭＹａ　ｃ　ｉｄｅ　ＳＰ　２． ０　２．０　２．０プロピレン・グリ：ｌ−用１０．０　１０．０　１０．０１ ００．０　＋００．０　１００．０ ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系 グルコース・オキシダーゼ　５．０００　１Ｕ　−−−−Ｂ−Ｄグルコース　０ ．５ｇ＋　−− Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ　−５，０００１０−Ｄ−アラニン　−　０．１ｇ− 尿酸塩オキシダーゼ　−−−−１０，０００１Ｕ尿酸塩　−−−−０，７５ｇ ラクトペルオキシダーゼ　２．０００　５００’　Ｉｏ　２００　１０カリウム ・チオシアネート　０．００５　ｇ−ｍ−一実施例■ 下の表℃は、点眼薬または洗眼薬として局部的に投与する洗眼液用に処方さゎる 本発明のペルオキシダーゼ薬剤のための薬学的に許容されるキャリヤの基礎処方 例を示したものである。

ソルビン酸、０．００２５％　０．０００２清浄水　９９．４　９８．１ ホウ酸　０．０１８　０．０１７６ ホウ酸ナトリウム（１，０）１２０で水和’）　０．００＋５　０．００１３塩 化ナトリウム　０．００２５　−−−塩化ペンザルコニウム’　０．０００１　 −−重エデン酸ナトリウム’　０．００１　−−１塩化ベンザルコニウムおよび 重エデン酸ナトリウムは、保存剤として添加しである。

以下の各表は、本発明にもとづく洗眼薬の調製に使用できる各種成分およびそれ らの予防および治療に効果のある量を示したものである。

グルコース・オキシダーゼ　２．５００　単位２グルコース　２０　ミリグラム ラクトペルオキシダーゼ　１５０，０００　ＡＢＴＳ単位３カリウム・チオシア ネート　２００マイクログラム１洗眼液は、ホウ酸９０ミリグラム、水和（１０ ８２０）ホウ酸ナトリウム６．６ミリグラム、ビタミンＡ２５００単位、０．０ ０２５％のソルビン酸Ｑ、］２Ｓμｇの５ｍｌ溶液である。

２この例に用いられる限り、グルコース・オキシダーゼの「単位」とは、ｐＨ５ ，１０および３７℃で３．０ミリグラムのグルコースを酸化してグルコン酸とす るグルコース・オキシダーゼの量を指す。検定条件は、フィンランドのフィニツ シユ・シュガー社の検定方法ＦＳ２５０に示されている。この例では、グルコー ス・オキシダーゼ１ミリグラムは、ｐＨ５および３７℃で１００−１２０単位の 活性を示す。

１この例に用いられる限り、ｒＡＢＴＳ単位Ｊとは、ｐＨ５および３７℃で１分 間にＡＴＢＳ基質［２，２’−アジノーｂｉｓ（３−エチルベンズチアゾリン− ６−スルホン酸］の酸化の触媒作用をするラクトペルオキシダーゼの量を指す。

検定条件は、マンソンーラテムツラ他ｒＢｉｏｃｂｅｍｉｓｔｒｙＪＶｏ１．２ ７：２３３−２３９ページ（１９８８）に記載されている。この例では、ラクト ペルオキシダーゼ１ミリグラムは、ｐ組成物は、２つの部分に分けて処方され、 使用に先立って組み合わし、よく振って２つの部分が溶けて混ざり合うようにす る。

第１の部分は、ラクトペルオキシダーゼとグルコース・オキシダーゼの混合物で ある。第２の部分は、ホウ酸、水和ホウ酸ナトリウム（１０Ｈ２Ｏ）、ビタミン Ａ、０、．００２５％のアスコルビン酸、カリウム・チオシアネート、水、グル コースの５ｍ１溶液である。この５ｍ］溶液（第２の部分）は、第１の部分と混 ぜ合わし、よく振って粉末が溶けるようにする。投与は、通常の点眼薬と同様に して行なう。

実施例■ 内部（注射）投与用の注射組成物（溶液）として処方されるペルオキシダーゼ薬 剤のための薬学的に許容されるキャリヤの基礎処方例を示す。この基礎組成物は 、塩化ナトリウム０．１５モルとリン酸ナトリウム６０ミリモルの緩衝液（ｐＨ ）である。この組成物に、ミエロペルオキシダーゼ３０単位を加え、溶液を混ぜ て薬剤を調製する。［この例に用いられている限りにおいて、単位とは、オート −ジアニシジンを使用して室温で１分間に４７０ｎｍで吸光度１単位を増大させ る触媒作用を果たすために必要な酵素の量を指す。クラウイックス他ｒＧａｓｌ ｒｏｅｎｉｅｒｏ１ｏｇｙＪｖｏ１．８７：１３４４−１３５０ページ（１９８ ４）参照。上の意味では、１マイクログラムは１単位に等しい。コ 次に、この薬剤の予防または治療に効果のある量（たとえば、約０．５ｍ１）を 、必要としている患者に投与する。好ましくは、この投与は、筋肉内注射によっ て行なう。

同じ溶液を通常認められているような噴霧療法を適用してスプレーで使用しても よい。

実施例Ｖ この例は、本発明のペルオキシダーゼ薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物 系のエンヴエロープ・ウィルスとくに単純庖疹ウィルス−１に対する効果を示す ものである。ペルオキシダーゼ薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系は、 下の表Ｘ１ｌｌに示す処方を用いて調製される。

グルコース　１．２０　ミリモル ５ＣＮ−０，０６ミリモル ラクトペルオキシダーゼ　４．００　ミリグラム１この緩衝液は、カルシウム、 マグネシウム、グルコースを含んでいないハングの均衡塩類溶液である。緩衝液 のｐＨは７．４である。ＨＢＳＳ緩衝液の内容物の重量は、次の通り。蒸留水１ ０１００Ｏごとに：ＮａＣｌ−８グラム、ＫＣｌ−０゜舌、鼻咽頭窩、および外 陰部の滲出液から４株のＨ３Ｖ−１ウイルスが得られた。これらの試料をプール し、次に、免疫蛍光法を用いて型の決定を行なってＨ３Ｖ−１とした。その後、 ＭＲＣ３細胞および成長媒質内で増殖させた。遠心分離によって細胞と細胞デブ リスの分離を行なった。次に、ウィルスをアリコートにして液体窒素内で貯蔵し た。

次に、ＨＩＶ−１のプールの試料を１０から１０のフォールドに希釈し、下から ３番目の細胞に対する毒性の規定濃度にして、これを各実験およびコントロール のベースラインにとった。

次に、上の表ＸＶに示したペルオキシダーゼの処方を等量のベースライン規定濃 度のＨＶＳ−１プール懸濁液と混ぜ合わせた（　１　ｍ　ｌ　／　１　ｍ　ｌ　 ＞。

これらウィルスとペルオキシダーゼ処方の混合物を、３７℃で３０分、６０分、 および１２０分町置装た。次に、これら混合物を１０から１０のフォールドに希 釈し、５０指数関数的に濃度が減少する懸濁液を得た。これらの懸濁液の各々か ら５０マイクロリツトルを試料としてとり、ｒｉｎ　ｖｉｌｒｏＪで育てたフィ ブロブラストの層に接種した。　接種後、細胞の培養物を７日間検査した。細胞 に対する毒性の評価を次の要領で半定量的に行なった。０から２５％までを１＋ 、２５がら５０％までを２＋、５０から７５％までを３＋、７５がら１００％ま でを４＋。

コントロールは、酸化作用のある半分を等量のＨＢＳＳ緩衝液で置換して安定さ せた。逆に、ブランクは、処方の完全な酸化系を保持したが、ウィルスの半分は 成長媒質で置換された。

予備処理されたウィルスの細胞に対する毒性をペルオキシダーゼ処方と接触させ なかった懸濁液のウィルスと比較した。この比較の結果は下記のように表した。

１、　効果なし：　すなわち、実験とコントロールの間に細胞に対する毒性の差 はない。

２、　遅延効果：　細胞に対する毒性の発現前に誘導期が最低２４時間延ばされ た場合。

３、　抑制効果：　ウィルスの細胞に対する毒性の完全な抑制が認められた場合 。

Ｈ５Ｖ−Ｚプールの２０の試料の各々を５つの連続希釈で分散させ（１０−４か ら１Ｏ−８）て、ペルオキシダーゼ処方と混ぜ合わせて処理した。これらの試験 を等しい数のコントロールと比較し、その結果をプロットしたのが図１である。

図１を見てわかるように、ペルオキシダーゼ処方の存在下で１２０分の装置によ ってＨ５Ｖ−１の細胞に対する毒性の潜在力が完全に抑制された。６０分および ３０分の装置では、それぞれ、完全な抑制の２／３および１／３、遅延の１／３ および１／６の効果が得られた。しかし、オキシダーゼ処方と３０分だけ装置し た試料の１／２では、細胞に対する毒性の損失は認められなかった。

混合物の最高濃度（Ｈ）を検定したとき、少数の例では、酸化作用のある半分に よるフィブロブラスト層に対するｉ接の毒性を避けることができなかった。しか し、その後の希釈（すなわち、ＨｘｌＯ−１）の間にこの毒性は認められなくな り、したがってウィルス自身の毒性の読みに混乱を生じることはなかった。

それでも、実験結果はウィルスの細胞に対する毒性力の明確な低下を示している 。これは、時間依存的であるように、巴われる。

実施例ＶＩ この例は、本発明のペルオキシダーゼ薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物 系のエンヴエローブ・ウィルスとくにヒトの免疫不全ウィルスに対する効果を示 すものである。ペルオキシダーゼ薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系は 、下の表ＸＩＶに示す処方で調製された。

５ＣＮ−０，０６ミリモル ラクトペルオキシダーゼ　４．００　ミリグラム１この緩衝液は、カルシウム、 マグネシウム、グルコースを含んでいないハングの均衡塩類溶液である。緩衝液 のｐＨは７．４である。ＨＢＳＳ緩衝液の内容物の重量は、次の通り。蒸留水１ ０１００Ｏごとに：　ＮａＣｌ−８グラム、ＫＣｌ−０，４グＨＩＶアリコート は、ＡＲＶ−４細胞系の表面部分から得た。次に、これらのアリコートをすぐに 等量の表ＸＩＶに示したペルオキシダーゼ処方と混ぜ合わせ、３７℃で１時間か ら２分間卿置した。

次に、ＨＩＶとペルオキシダーゼ処方の混合物をフィトヘムアグルチニンで刺激 したヒトのリンパ球の培養物に接種した。アリコートの最終希釈度は、１：２０ ．１　：　１００、および１　：　２００であった。ウィルスを緩衝液のみの中 で予備卿置してコントロールを得た。培養物には、１１１日目、再び新鮮なリン パ球を供給した（図２の矢印）。ウィルスの成長は、細胞内（１０６の細胞毎に ）または表面部分のいずれかでＥＬＩＳＡを用いてｐ２４を検出してモニターし た。

コントロールの実験では、ウィルスは、最終希釈度１：２０および１　：　１０ ０でヒトのリンパ球に接種したとき、初期に細胞内ｐ２４を生成した。しかし、 １：２００の希釈度では、ｐ２４の生成が遅延し、その量も少なかった。それに 比して、ペルオキシダーゼ処方で処理したウィルスは、１：２０の希釈度でも少 量のｐ２４しか生成しなかった。図２および３は、これらの実験の結果をまとめ て示したものである。

１５５日目、リンパ球の培養物は、１：２００で希釈されたウィルスを接種した コントロールで１０６毎に９０ｐｇのｐ２４を生成したが、ペルオキシダーゼ処 方で１時間処理した後１：２０に希釈したウィルスを接種したものでは２５ｐｇ しか検出されなかった。これより高い希釈度のものでは、１０６の細胞中でｐ２ ４は検出されなかった。しかし、１０７の細胞の培養物は、ｐ２４がその後に表 面部分にこぼれたために全体が感染粒子によって汚染された。

コントロールの実験のウィルスがもたらした細胞変性効果は、リンパ球をペルオ キシダーゼ処方のみで処理した後は観察されなかった。それに比して、混合物か ら５ＮＣ−を除外すると（したがってＨ２Ｏ２の蓄積を許すと）、最も低い希釈 度（１：２０）でも細胞に対する毒性があることが証明された。

２分、１０分、２０分、３０分、および６０分の予備卿置で活力的実験を行なっ た。希釈しないペルオキシダーゼ処方と２分間接触させるだけで、充分に試料の ＨＩＶの感染力の低下が認められた。

実施例ＶＩＩ この例も、本発明のペルオキシダーゼ薬剤のペルオキシダーゼ／基質／過酸化物 系のエンヴエローブ・ウィルスとくにヒトの免疫不全ウィルスに対する効果を示 すものである。この例で使用したペルオキシダーゼは、精製したヒトのミエロペ ルオキシダーゼを組み替えたものであった。

ＭＰＯ−ＭＩＸを調製した。このＭＰＯ−ＭＩＸは、５００ｕｌの培地（ＲＰＭ ｌ、Ｇｉｂｃｏ、および５％胎児の子牛の血清、５ｅｒａｌａｂ）にナトリウム ・チオシアネート（２０ｕｇ／ｍｌ＞　、グルコース１％、グルコース・オキシ ダーゼ（６ｍＵ／ｍｌ）　、および１０から４０ｕｇ／ｍ１の精製したヒトのミ エロペルオキシダーゼを組み替えたものを加えたものであった。このヒトのミエ ロペルオキシダーゼを組み替えたものは、特許出願ＰＣＴ／ＥＰ８９１００６６ ８に記載されている方法を使用して生成された。しかし、このようなミエロペル オキシダーゼは、任意の適当なものから得られることを理解術期である。

感染したＭｏＨ３細胞すなわち１２００ＴＣＩＤ５゜（Ｔ細胞感染ドーシス５０ ％）から得られたＨＴＬＶＩＩＩＢウィルスの６０ｕｌウイルス懸濁液を調製し た。

最後に、２．１０’レポーター細胞Ｓｕｐ　Ｔｌを得た。とくに、ヒトのリンパ 腫から得られた５ｕｐＴ１細胞（Ｊ、ホーキシ−、アメリカ合衆国ペンシルヴエ ニア州フィラデルフィア、ペンシルヴエニア大学）が利用された。

以下に説明するような標準的な実験手順が用いられた。

ＨＴＬｎｌｌＢウィルスのウィルス懸濁液（６０ｕｌ）をＭＰＯ−ＭＩＸ　（５ ００ｕ　ｌ）に加え、得られた混合物を３７℃で１５分間評装した。次に、混合 物を５ｕｐＴ］細胞のベレット（２，１０’の細胞を含む）に移し、ゆっくりか き回しながらさらに３７℃で３０分間卿１した。次に、細胞を培地（ＲＰＭＩお よび胎児の子牛の血清）で２回洗浄し、ベレットにし、同じ培地、すなわち２． １０’細胞／ｍｌの細胞密度で再び懸濁させた。次に、これらの再懸濁させた細 胞を３７℃で１０日間培養した。

３日目、５日目、および７日目に培養物の顕微鏡検査（モニター）を行ない、５ ｙｎｃ目１ａの形成などの細胞変性効果を記録した。１００日目は、細胞培養物 ４５０ｕｌが回収された。次に、この４５０ｕｌの細胞培養物を、１０％Ｔｒｉ ｔｏｎ　Ｘ−１００を含み使用前は一２０℃で保存されていた緩衝剤で処理した 食塩水５０ｕｌと混ぜ合わせた。その後、試料をＥＬＩＳＡで分析してＰ２４Ｈ ＴＬＶＩ　ＩＩＢ抗原（ウィルスの子孫）を定量した。より正確には、選ばれた ＥＬＩＳＡは、ＨＴＬＶＩＩＩＢｐ２４蛋白質を測定して、ｐ２４に対して育て られたマウスの単クローン抗体（アメリカ合衆国Ｄｕｐｏｎｊ社）を−次抗体と して使用し、ビオチンと呼ばれるヒトの抗ＨＴＬＶＩＩＩＢ免疫グロブリンを二 次抗体として使用する。ｓ＋ｒｅｐｌａｖｉｄｉｎ−セイヨウワサビ・ペルオキ シダーゼ抱合体（Ａｍｅｒｓｈａｍ）および０ＰＤＡ発色性基質（Ｓ　ｉ　ｇｍ ａ）を用いて具体的な複合が明にされた。光学密度は、４９０ｎｍと測定された 。

下の表ＸＶにこれらの実験の結果を示す。これらの結果は、１０から４０ｕｇ／ ｍｌの範囲の濃度でヒトのミエロペルオキシダーゼを組み替えたものを含む本発 明のペルオキシダーゼ薬剤が、ＨＴＬＶＩＩＩＢウィルスの複製を完全に抑制す ることを示している。

ウィルスのｒ　Ｍ　Ｐ　Ｏへの被曝後の培養日数試験　０　３　５　７　１０ １、ウィルスＨＴＬＶＩＩＩＢ 十ＣＰＥ’　ｎｄ　−−−−−ｎｄ ＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ’　ｎｄ　１５　１８　１９　１３２、ウイ＃スＨ ＴＬＶＩ　Ｉ　ＩＢ ＋　ＣＰＥ’　ｎｄ　−−−−−−ｎｄＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ２ｎｄ　２ ６　２３　１８　１９（２０ｕｇ／ｍｌ　ＭＰＯ） ３、ウィルスＨＴＬＶ夏ＪＩ８ 十　ＣＰＥ’　ｎｄ　−−−−−ｎｄ ＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ２　ｎｄ　２０　１４　１７　１３（４０ｕｇ／ｌ １ａｌ　ＭＰＯ） ４、ウィルスＨＴＬＶＩＩＩＢ　ＣＰＥ’　ｎｄ　（＋）　＋　＋＋　ｎｄのみ 　ＥＬＩＳＡ”　ＩＩｄ　７３　１７０　３５４　１０００十ＣＰＥ’　ｎｄ　 −−−−−ｎｄ ＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ”　ＩＩｄ　１８　２３　１９　１６（４０ｕｇ／ ｍｌ　ＭＰＯ） （ＨＴＬＶＩＩＩＢなし） ６、ウィルス）ＩＴＬＶＩＩＩＢ 十ＣＰＥ’　ａｄ　（＋）　＋　＋＋　ｎｄＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ”　ａ ｄ　８７　１１５　１９３　８３５（４０ｕｇ／ｍｌ　ＭＰＯ） ７、ウイ＃スＨＴＬＶＩ　ＩＩＢ ＋　ＣＰＥ’　ｎｄ　（＋）　＋　＋＋　ｎｄＭＰＯ−ＭＩＸ　ＥＬＩＳＡ”　 ｎｄ　１１５　３９４　６５８　８００（ＭＰＯなし） ’　ＣＰＥ　（細胞に対する毒性作用）ニー　５７ｎｅｉｔｉａがまったく観察 されなかった。

±　若干の小さい５ｙｎｃｉ＋ｉａが観察された。

＋→十＋５ｙｎｃＨｉａの数および大きさの増大が観察された。

表ＸＶかられかるように、試料１．２．３では、５７ｎｃｉｆｉａがまったく観 察されず、ウィルスの複製の抑制が認められた。試料４では、５ｙｎｃＨｉａお よびウィルスの複製の両方で正の制御が認めれられた。試料５では、負の制御が 認められ、検定物中にはウィルスが存在しなかった。試料６では、ＭＰＯ酵素に その基質の一つ（Ｈ２Ｏ２）が欠如していた。したがって、ウィルスの複製に対 する作用はまったく認められなかった。最後に、試料７では、検定物中にＭＰＯ が存在していないので、ウィルスの複製に対する作用はまったく認められなかっ た。

上の検定を全部合わせてみると、ミエロペルオキシダーゼを適当な濃度で本発明 の薬剤のペルオキシダーゼ系に使用すればＨＴＬＶＩｒｌＢウィルスの複製がが 完全に抑制されることが示されている。

実施例■ この例は、ペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系の抗ウィルス作用ならびにミエ ロペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系の性愛側の庖疹テンジクネズミ・モデル （腟内テンジクネズ・モデル）における生殖器ウィルスに対する効果を示すもの である全ウィルスに対する効果を示すものである。

２０匹のバートリー・テンジクネズミの腟内に１０５ｐｆｕのＨ５Ｖ２　ＭＳウ ィルスを接種した。４日目から始めで２４日目まで毎日連続してこれらのテンジ クネズミの庖疹病変状態（０から４までの尺度で）の発現および発達をモニター し、下記の３種類のゲルのいずれか１つを用いて処置した。

１、　表ＩＸの例９Ａのゲルの処方通りのコントロール・ゲル（４匹のテンジク ネズミのグループ用）。

２、　ラクトペルオキシダーゼの２００ＩＵではなくラクトペルオキシダーゼの ８８ＩＵ（ゲル１００ｇあたり）を使用した以外は表ＩＸの例９Ａにしめした通 りの処方で調製したラクトペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系を含むゲル（８ 匹のテンジクネズミのグループ用）。

３、　ラクトペルオキシダーゼの２００　ＩＵではなくミエロペルオキシダーゼ の７０．８１Ｕ（ゲル１００ｇあたり）を使用した以外は表ＩＸの例９Ａにしめ した通りの処方で調製したミエロペルオキシダーゼ／基質／過酸化物系を含むゲ ル（８匹のテンジクネズミのグループ用）。

庖疹の病変状態は、連続する２段階で発生した。第１の段階（−次感染）は、接 種されたウィルスによるものであり、第２の段階（再発）は、神経細胞内に潜伏 している状態で存在したウィルスの、多少とも頻繁な、再活性化によるものであ る。

処置は、外部生殖器の周囲に現われた庖疹の病変部に０．６グラムのゲルを塗布 することによって行なった。これらの実験の結果を表ＸＶＩ（−次感染に対する 処置の効果を示したもの）および表Ｘ■（再発に対する処置の効果を示したもの ）ならびに図４のグラフに示す。

表Ｘ■ ２　７．４　Ｐ　０．０２’　１．８　ｐ　０．０３”　６．５　ｐ　０．０１ ２３　８．４　Ｐ　Ｏ，０２２＋、９　ｐ　Ｏ，（Ｈ２７，９ｐ　Ｏ，０５２１ 平均重度　＝　４日月から１２日目までの点数の合計。

２研究者の試験にもとづけば有意である。

３　１．９　Ｎ、Ｓ、２３．３　Ｎ、Ｓ、”１ここでは、連続する２日間に０　 、５　（ｅｒｙｔｂｍａ）に等しい点数を測定するかまたは１田こ少なくとも１ 　（ｖｅｓｉｃｕｌｅ）に等しい点数を測定した場合に１つの再発となる。再発 の前後には１日の病変のない日がある。

表ＸＶＩおよび図４かられかるように、−次感染による病変部は、概して重度が 高く　（最高点２．５−３）、４日目から１２−１４日目まで続いた。一方、再 発による病変部は、比較的良性で（最高点０．５−１）、平均して３−４日後に 消えた。これらの処置の結果は、ラクトペルオキシダーゼおよびミエロペルオキ シダーゼを含んだゲルが一次感染の重度、最高点数、および期間を有意に低減す ることを明らかに示している。

図２および図３の説明 図２は、リンパ球培養物中でＨＩＶによって生成されたｐ２４の成長を表面部分 のｐ２４を測定して得られた結果で示した図である。図３は、リンパ球培養物中 でＨＩＶによって生成されたｐ２４の成長を１０６の細胞ごとに細胞内のｐ２４ を測定して得られた結果で示した図である。

図２および図３に用いられている記号は、以下の通りである。実線（）：緩衝液 のみ中での予備装置１時間。鎖線（−−−）　：酸化作用のある錯合体中での予 備装置１時間。ＨＩＶの初期プールの最終的な希釈物：１：２０（・Ｏ）、１： １００（■口）、１：２００（ム△）。

以上の説明および例から、当該技術分野に通常程度に熟達している人には、本発 明の精神および範囲から逸脱することなく等価の変更を行なうことが可能なこと は明らかであろう。

コＯ’　８０’　＋２０゜ Ｄ這ミ！ユ。

二二＝！ユ μ３ミｌユ ロ８γ−（ａｍシ、） 一〇−ボマド１　（プラシーボ） 一Δ−ボマド２（ラクトペルオキシダーゼ）・口・　ポマド４（ミエロペルオキ シダーゼ）国際調査報告 ｌａ＋囮博ｌｌＡｍ１ｃｍｍＮａ　ＤＩ’Ｔ／ＱｒＯ＋／ｎｆＴＩＭＧ国際調査 報告 フロントページの続き （７２）発明者　モギルブスキー　ニコルベルギー国、Ｂ−１１５０ブリュッセ ル、リュ　ペ　ドウクロワ　４

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. １．エンウェロープ・ウイルス感染症の予防または治療用薬剤の製造のためのペ ルオキシダーゼの使用。
2. ２．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該ペルオキシダーゼ に特定の酸素供与体および酸化作用のある基質がエンウェロープ・ウイルス感染 症の予防または治療用薬剤の製造のためにしようされることを特徴とする使用。
3. ３．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、該ペルオキシダーゼがラクト ペルオキシダーゼであることを特徴とする使用。
4. ４．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、該エンウェロープ・ウイルス が単純庖疹ウイルスであることを特徴とする使用。
5. ５．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、該エンウェロープ・ウイルス がヒトの免疫不全ウイルスであることを特徴とする使用。
6. ６．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、該酸素供与体が過酸化水素で あることを特徴とする使用。
7. ７．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、酸素供与体が基質お よび該基質に特定の酵素を含む酵素けいであり、それによって過酸化水素が形成 されることを特徴とする使用。
8. ８．特許請求の範囲第７項に記載の使用において、さらに、該酵素系の基質がグ ルコースであり、該酵素系の酵素がグルコース・オキシダーゼであることを特徴 とする使用。
9. ９．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸素供与体が無機 過酸化物であることを特徴とする使用。
10. １０．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸素供与体が有 機過酸化物であることを特徴とする使用。
11. １１．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸素供与体が微 生物であることを特徴とする使用。
12. １２．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸化作用のある 基質がチオシアネート塩であることを特徴とする使用。
13. １３．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸化作用のある 基質が塩化物、臭化物、ヨウ化物からなるグループから選ばれたハロゲン化物で あることを特徴とする使用。
14. １４．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該ペルオキシダー ゼが哺乳動物のペルオキシダーゼであることを特徴とする使用。
15. １５．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該ペルオキシダー ゼがミエロペルオキシダーゼであることを特徴とする使用。
16. １６．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該ペルオキシダー ゼが植物のペルオキシダーゼであることを特徴とする使用。
17. １７．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該基質がチオシア ネート塩であり、該ペルオキシダーゼが哺乳動物のペルオキシダーゼであること を特徴とする使用。
18. １８．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸化作用のある 基質が塩化物、臭化物、ヨウ化物からなるグループから選ばれたハロゲン化物で あり、該ペルオキシダーゼが植物のペルオキシダーゼまたはミエロペルオキシダ ーゼであることを特徴とする使用。
19. １９．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸化作用のある 基質がチオシアネート塩であり、該酸素供与体がグルコース基質およびグルコー ス・オキシダーゼを含む酵素系であり、該ペルオキシダーゼがラクトペルオキシ ダーゼであることを特徴とする使用。
20. ２０．特許請求の範囲第２項に記載の使用において、さらに、該酸化作用のある 基質がチオシアネート塩であり、該酸素供与体がグルコース基質およびグルコー ス・オキシダーゼを含む酵素系であり、該ペルオキシダーゼがミエロペルオキシ ダーゼであることを特徴とする使用。
21. ２１．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該薬剤が局部用薬 剤であることを特徴とする使用。
22. ２２．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該薬剤が口内歯み がき剤であることを特徴とする使用。
23. ２３．特許請求の範囲第１項に記載の使用において、さらに、該薬剤が注射でき る組成物であることを特徴とする使用。
24. ２４．エンウェロープ・ウイルスの予防または治療用薬剤の調製のため方法にお いて、特許請求の範囲第１項または第２項の組成物が薬学的に許容されるキャリ ヤと組み合わされることを特徴とする方法。
25. ２５．エンウェロープ・ウイルスの予防または治療のための方法において、特許 請求の範囲第１項または第２項に記載の薬剤の治療または予防に有効な量がそれ を必要とする患者に投与されることを特徴とする方法。
26. ２６．特許請求の範囲第２５項に記載の方法において、さらに、該エンウェロー プ・ウイルスが単純庖疹ウイルスであることを特徴とする方法。
27. ２７．特許請求の範囲第２５項に記載の方法において、さらに、該エンウェロー プ・ウイルスがヒトの免疫不全ウイルスであることを特徴とする方法。
28. ２８．特許請求の範囲第２５項に記載の方法において、さらに、該薬剤が局部用 薬剤であることを特徴とする使用。
29. ２９．特許請求の範囲第２５項に記載の方法において、さらに、該薬剤が口内歯 みがき剤であることを特徴とする使用。
30. ３０．特許請求の範囲第２５項に記載の方法において、さらに、該薬剤が注射で きる組成物であることを特徴とする使用。