JPH06506230A - インターナリゼーションを用いた、ｘ線コントラスト剤のデリバリー - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 インターナリゼーシミンを用いた、Ｘ線コントラスト剤のデリバリ− 技術分野 本発明は、Ｘ線コントラスト剤および、それらの薬剤を含んでいる放射性組成物 の、特定の細胞集団又は肝臓のような器官へのデリバリ−の方法に関する。

発明の背景 Ａ１通常のＸ線コントラスト剤 Ｘ線コントラスト剤は、Ｘ線又はコンピュータートモグラフィー（ＣＴ）を用い て、生理学的構造又は機能を視覚化する目的で投与される。Ｘ線コントラスト剤 は、高電子密度標識を含んでいる複合体分子から構成され得る。通常のＸ線コン トラスト剤は、一般の使用ではヨウ素から成り、それはＸ線に対して不透明化を もたらし、芳香族の原子核に付着し、薬理学的不活性に必要な高い安定性を与え る。この塩基性のアリールヨウ化物単位は、必要な高い水溶性、生体内での安定 性、選択的排出、および低粘度を供するため、かつ浸透圧上のあるいは細胞毒性 上の副作用のような不利な副作用をできるだけ少なくするために、種々の化学作 用のある基により修飾される。

通常のＸ線コントラスト剤は、血管内コントラスト剤またはターゲットに向けら れたコントラスト剤を含む。

血管内コントラスト剤は、現在広く使用されており、非選択的である。現在知ら れている、ターゲットに向けられた数少ないＸ線コントラスト剤は、主に細網内 皮系（ＲＥＳ）の固定されたマクロファージ、特に肝臓の画像化のためのクツペ ル細胞のターゲツティングに設計されている。

Ｂ、血管内コントラスト剤 通常の血管内コントラスト剤は一般に、血管空間または、細胞外の（間質）空間 を不透明化するために用いられる。血管内コントラスト剤の例は、メトリシン酸 （ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）　［３−アセトアミド−５−（Ｎ−アセチル メチルアミノ’）　−２，４，６−トリヨード安息香酸；図１、Ｒ＝　−ＣＯＯ ＩＩＩ、　Ｒ＝−１１１ＨＣ（０）ＣＨ３、Ｒ３＝−Ｎ（ＣＢ　）Ｃ（０）ＣＨ ３；英国特許第９７３．８８１号（１９６４年）］の塩、シアトリシン酸（ｄｉ ａｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）（Ｒ１＝　−ＣＯＯＨ。

Ｒ＝Ｒ＝−ＮＨＣ（０）ＣＢ３）の塩、イオバーソル（１ｏｖｅｒｓｏｌ）　［ Ｎ、　Ｎ−ビス（２，３−ジヒドロキシプロピル）］　−５−［（ヒドロキシア セチル）（２−ヒドロキシエチル）アミノ］　−２，４，６−トリヨード−１， ３−ベンゼンジカルポキサミド；　Ｒ＝　Ｒ＝　−Ｃ（０）ＮＨＣＨＣＨ（ＯＨ ）Ｃｌ１２０Ｈ。

Ｒ＝−Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２０Ｈ）（Ｃ（０）ＣＨ２０Ｈ）　；Ｌｉｎ、　ｙ、、（ 欧州特許出願第８３．９６４号、１９８３年１月５日出願、１９８３年７月２０ 日公開）のような、浸透圧重量モル濃度の低い非イオンコントラスト剤を含む。

これらの血管内および細胞外Ｘ線コントラスト剤を用いた、脳と腎臓以外の器官 の画像の増強の程度は、時間に極めて依存する。これらの通常のＸ線コントラス ト剤の薬物動態学は、綿密に考慮されなければならず、有意の診断用データを得 るため、Ｘ線もしくはＣＴスキャンは、コントラスト剤の投与と厳密に同調され なければならない。これらのコントラスト剤のポーラス（ｂｏｌｕｓ）の静脈内 注射あるいは注入は、血管内での混合による迅速な希釈と、毛細血管網から間質 あるいは細胞外空間へのコントラスト剤の拡散と、そして腎臓からの排出という 結果に終わる。この初期の血管相は、ポーラス注射の場合には、１〜２分間続く のみか、もしくは注入の継続している間続く。コントラスト剤の初濃度は、注射 では非常に高い（ポーラスの効果〈１分間）。コントラスト剤の血中濃度が間質 空間内の濃度より下がると、コントラスト剤は、継続した腎臓の排出を続けてい る静脈空間内にもどって拡散してくる（実質相）。これらの通常の血管内Ｘ線コ ントラスト剤は、血管の画像化（血管造影法）、および腎臓の画像化（尿路造影 法）に非常に有用である。

これらの血管内コントラスト剤では、増強された組織のコントラストは、第一に 組織の血管質の差に帰せられる。その結果ポーラス注射では、身体の組織におけ るコントラストの最大の増強は、血管相の短い１〜２分間に起こる。増強された 組織の区別は、正常組織および病理組織の、間質の相対的容積における差により 実質相の間にも生じ得るが、しかしながら脳および腎臓でのＸ線またはＣＴスキ ャンを除いて、それらの差はわずかである。

一般にＣＴスキャンは、診断を誤らないために、短い血管相の間に行なわれなけ ればならない。コントラスト剤が、注射した部位から興味の対象である標的部位 へ到達するのに必要な時間（循環時間）もまた、Ｘ線またはＣＴ検査の同調の要 因とされねばならない。

Ｃ０肝臓のコンピュータートモグラフィー肝臓の転移性腫瘍の大部分は、正常な 肝臓実質に比べて低血管分布（ｈｙｐｏｖａｓｃｕｌａｒ）であり、ＣＴスキャ ンでは等密度に（すなわちコントラストがなく）見える。低血管分布の腫瘍は、 血管内Ｘ線コントラスト剤のポーラスの、注射開始後１〜３分の間、正常な肝臓 に比較して明暗が弱く　（より暗く）見える。この初期の期間の後、Ｘ線コント ラスト剤は、正常な肝組織を流れ出るが、一方、低血管分布の腫瘍では、その濃 度は増加する。この情況は、増強されていないＣＴスキャンに存在するよりさら にコントラストの少ない結果に終わるであろう。一般に、このモデルは他の低血 管分布の病理組織（嚢腫、腫瘍、膿瘍、壊死、梗塞および虚血）にも適用される 。

高血管分布（ｈｙｐｅｒｖａｓｃｕｌａｒ）の腫瘍では、腫瘍のかん流が肝動脈 を経ておきるという事実から（循環時間２０秒）、組織のコントラストの増加は 、コントラスト剤のポーラス注射開始のおよそ３０秒後に得られる。この期間、 腫瘍は、門脈循環（循環時間３５秒）に頼っている肝実質組織に比較して、明暗 が強い（より明るい）。この増強は一時的（〜１分）で、コントラスト剤は急速 に、高血管分布の腫瘍を流れ出て、門脈循環を経て正常な肝臓に流れ込む。この 場合には、動的なＣＴスキャンのタイミングは、低血管分布の腫瘍のほとんどの 場合よりもさらに重大である。どちらのタイプの腫瘍も、実質相（注射後３〜５ 分）の間は、ＣＴスキャンにおいて明暗が等しく見える。コントラスト剤のゆっ くりした静脈内注入は、病巣である肝腫瘍検出には診断上の価値がない。

血管内コントラスト剤に特有の、短い一時的なコントラストの増強は、それらが いかなる器官あるいは組織特異性も示さないという事実によるものである。これ らの通常の、非特異的コントラスト剤での画像コントラストの増強は、組織にお ける血管質（血流および毛細血管床の容積）の差、および相対的な間質の容積の 差による。

血流中での迅速な希釈のため、興味の対象となる部位に十分高い濃度を得るため には、通常の血管内コントラスト剤の高い投与量（胴体のＣＴスキャン用として 、有機的に結合したヨウ素７〜６０＋ｇ）が必要である。これらの高い投与量は 、重い副反応をもたらし得る。すなわち、過度の供与量は生命を脅かす。浸透圧 電量モル濃度の低いコントラスト剤がこれらの不利な作用をできるだけ少なくし ようとする試みの中で開発された（Ｂ。

１：ａｔａｙａｍａ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｒａｄｉｏｌ、、２５．５ｕｐｐ１． １．　Ｓ７−３Ｌ０゜１９９０年）。

Ｄ、ターゲットに向けられた通常の肝臓のコントラスト剤 肝臓の不透明化のための、ターゲットに向けられたＸ線コントラスト剤を開発す るための先の試みは、二酸化トリウムのような微粒子状薬剤、および放射線不透 過性リポソーム、ＥＯＥ−１３（けしの実油のヨウ素化したエステル）およびＰ ＦＯＲ（ペルフルオロオクチルブロマイド）のようなエマルジョンの使用を伴っ ていた（Ｈ，Ｗ。

Ｆｉｓｈｅｒ、Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｒａｄｉｏｌ、、２５．５ｕｐｐ１．１．　Ｓ ２−３６゜１９９０年）。これらの薬剤は、細網内皮系（ＲＥＳ）の固定された 大食細胞により、血流からろ過される。肝実質のわずかな２〜３％を構成するク ツペル細胞による、これらの放射線不透過性薬剤の、肝臓への蓄積は、腫瘍のよ うな病理組織にはクツペル細胞がないため、正常な肝臓の選択的な放射線不透過 性をもたらす。これらの薬剤は、高い毒性および／または激しい副作用の確率の 高さから、一般には使用されない。放射性二酸化トリウムは、肝臓から除去され ず、肝臓および膵臓に腫瘍および繊維症を引き起こす。　血管内Ｘ線コントラス ト剤（たとえばシアトリシン酸）の被包により得られる放射線不透過性リポソー ムは、低い被包化率で、「もれ」があり、大きさに幅広い分布があり、肝臓の不 透明化には不十分であることが足伽になっていた。これらのリポソームの放射性 組成物の滅菌もまた、リポソーム構造に固有の不安定性から複雑である（たとえ ば加熱滅菌不可）。

ＥＯＥ−１３は、肝臓および膵臓により血流から迅速に除去され（５分で投与量 の９５％）、その代謝産物（遊離のヨウ素を含む）の腎臓からの排出により効率 よく放出される。ＥＯＥ−１３は、肝臓および膵臓の不透明化には効率がよいが 、肝臓および膵臓の腫瘍にはわずかなコントラストの増強しか示さない。ＥＯＥ −１３はまた、比較的高い発生率（４％）の、重い副作用を引き起こす。

ＰＦＯＢは肝臓および膵臓のＲＥＳにより、また肺により血管内から非常にゆっ くり除去され、注入後３時間より長い時間、血管構造の増強を生じ、２時間後で は、ＰＦＯＲは肝臓に比べ膵臓により強い不透明化を示した。ＰＦＯＲはＥＯＥ −１３と同じように作用し、肝臓および膵臓の病巣には最小限のコントラストの 増強しか示さなかった。このペルフルオロカーボンの臨床への応用に特異な障害 は、その継続した製造および処理の生態学的影響である。フルオロカーボンによ る大気中のオゾン層の破壊は、これらの化学物質に変わる物質の、別の適用での 開発を導いてきた。この現在の、フッ化炭化水素から離れる傾向は、ＰＦＯＢの 価格及び入手しやすさに不利な影響を及ぼすであろう。

交替に、肝臓のＸ線コントラスト剤は、肝臓実質の約９７％を構成する肝細胞に ターゲットとして向けられることができる。現在の肝細胞に向けられている（非 ＲＥＳ）Ｘ線コントラスト剤は、胆嚢造影用（経口）、または胆管造影用（血管 内）の薬剤で初めは胆嚢の不透明化に用いられた。これらの薬剤は、疎水部分を 芳香族原子核にもつ、トリヨード化アリール化合物である。それらは高い血清ア ルブミン結合性（非共有）を示し、肝細胞により血管系から除去される。

血流中の遊離の胆嚢造影用薬剤の低い濃度は、腎臓系によるそれらの血管からの 浸出を最小にする。肝細胞の形質膜を横切るこれらの小さな分子の輸送は、担体 輸送機構（Ｃ，Ａ、Ｇｏｒｅｓｋｙ及びＡ、Ｊ、Ｓｃｈｗａｂ　ｓ　Ｔｈｅ　Ｌ ｉｖｅｒ。

Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙｌｌ、　Ｍ、　Ａｒ１ａｓ 編、第２版、１９８８年、４６章）により起こる。続く胆汁排出および胆嚢での 濃縮は、胆嚢の画像を増進する結果となる。胆嚢造影剤では、小腸からの吸収が 遅く、血管内および肝臓内の濃度が低いため、肝臓の増強はほとんど得られない 。

胆管造影剤もまた、迅速な肝胆汁の排出のため、はとんどが肝臓の増強を示さず 、さらに血しょうタンパク質との高い親和性に起因する高い毒性のため、広くは 使用されていない。

Ｅ、インターナリゼーション（ＲＭＥ）ＲＭＥは細胞外空間にある高分子が、細 胞表面の特異的な受容体に結合し、細胞膜が切り取られて細胞内に取り込まれ、 細胞内小胞を形成する作用である。血管区画内に注射された高分子は、このＲＭ Ｅ作用により血しょうから排除（除去）される。ＲＭＥは細胞膜を横切る小。

さな分子の移動を容易にする、担体輸送系とは異なる。

ＲＭＥによる取り込みは、一般に、リガンド−受容体相互作用に特有である、３ つの一般的な性質、すなわち構造特異性、飽和性、および競合を示す。構造特異 性は、受容体が密に関連した構造を識別でき、さらに、受容体結合部位の、結合 の必要条件に合う構造を有する分子のみが細胞内に取り込まれる場合に観察され る。ＲＭＥに関与する受容体はしばしば、血液循環から糖タンパク賀を細胞内に 取り込むか、もしくは排除する能力によって発見される。飽和性は、ＲＭＥを経 て細胞内に取り込まれる薬剤の割合が、その薬剤の濃度の増加と共に減少する場 合に観察される。この効果は高い濃度においては、受容体がリガンドによってほ ぼ完全に占領されているに近いか、もしくはリガンドで飽和されてくるという事 実による。

競合は、薬剤のインターナリゼーションの速度が、その最初の薬剤に構造上の類 似性を持っている付加的な薬剤の存在により減少する場合に観察される。付加し た薬剤は、受容体の結合部位を競合し、最初の薬剤のインターナリゼーシジンの 速度を減少させる。飽和性は、高濃度の単一のリガンドが、限られた数の受容体 部位を競合する際に結果として生ずる。競合は化学的に異なるリガンドが限られ た数の受容体部位に結合する際に結果として生ずる。

ＲＭＥによる物質の取り込みは、正常で健康な細胞の特徴である。ＲＭ　Ｅ輸送 系は、正常な大食細胞、肝細胞、繊維芽細胞、および網状赤血球に見出される。

ＲＭＥは細胞に、アシアログリコプロティン、低密度リポタンパク質、トランス フェリン、およびインシュリンのような血しょう中の種々の高分子のインターナ リゼーションを可能にする。ＲＭＥを行なう細胞の一覧には、Ｗｉｌｅｍａｎら によるＢｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、　、２３２巻、１−１４頁、１９８５年、表１、 および１９８９年８月３日出願、１９９０年２月２２日公開のＭｅｎｚ、　Ｅ、 　Ｔ、らによる、特許協力条約下で公開された国際出願、国際公開１０９０１０ １２９５号を参照。前者の引用文献は、ＲＭＥの一般的な総説でもある。正常細 胞の腫瘍細胞への転換（形質転換）は、ＲＭＥを行なう受容体の活性の増加また は減少と関連しているらしい。肝細胞でのアシアログリコプロティンの受容体に よって行なわれるＲＭＥのような場合には、がん化した肝細胞への形質転換は、 受容体の減少と関連する（ＳｔｏｃｋｅｒｔおよびＢｅｃｋｅｒ、　Ｃａｎｃｅ ｒ　Ｒｅｓ、、４０巻、３１３２−３１３４頁、１９８０年）。

多くの場合、膿瘍抗原に対する薬剤の抗体によるターゲツティングのように、抗 原は腫瘍細胞上では増加し、正常細胞では減少する。

マンノースやアラビノガラクタンのような、ＲＭＥに関与する受容体と相互作用 をする単糖類および多糖類を、以下それぞれＲＭＥ型単塘類または多糖類と呼ぶ 。グルコース、デキストラン、デキストリン、セルロース、ヒドロキシエチルス ターチ、ヘパリン、デンプン、デキストラン硫酸塩、カルボキシメチル化デキス トラン、およびカルボキシメチルセルロースのような多くの通常の単糖類および 多糖類はＲＭＥに関与する受容体と相互作用をせず、それらを以下に非ＲＭＥ単 糖類または多糖類と呼ぶ。

非ＲＭＥ型多糖類は、診断薬あるいは治療薬として使用される種々の物質の合成 に用いられてきた（Ｊａｃｏｂｓｏｎ、　Ｔ、による欧州特許出願第１８６．９ ４７号、１９８５年１０月２５日出願、１９８６年７月９日公開；　５ｃｈｒｏ ｄｅｒによる、米国特許第４．５０１．７２６号：　Ｒａｎｎｅｙ　Ｄ、　Ｆ、 にょる特許協力条約下で公開された国際出願、国際公開１０９０１０３１９０号 、１９８９年９月２９日出願、１９９０年４月５日公開；Ｇｒｏｍａｎによる米 国特許第４．８２７．９４５号；　Ｇｒｏｍａｎによる米国特許第４．７７０． １８３号）　。ｇａｎｎｅｙは、腫瘍細胞に向けられる重合体担体を用いて、診 断薬（磁気共鳴（ＭＲ）用コントラスト剤としての金属イオン）のデリバリ−を 開示している。Ｒａｎｎｅｙは、他の治療用化合物も、この方法を用いて、化学 療法の効果のため、または放射線治療の増感もしくは増大を供するためにデリバ リ−されることを、詳しい例なしに示唆した（Ｒａｎｎｅｙ、　Ｄ、　Ｆ、にょ る国際公開Ｗ０９０１０３１９０号、１９８９年９月２９日出願、ｐ、５１）ｏ 　しかしながらＲａｎｎｅｙは、ＲＭＥ型糖類の使用も、電子密度の高い有機化 合物の結合も開示していない。

ＲＭＥ型多糖類であるアラビノガラクタンは、いろいろな診断薬、特に超常磁性 酸化鉄をターゲットに向けるために使用できることが知られている（ｌ［ｅｎｚ 、　Ｅ、　Ｔ、による国際公開１０９０１０１２９５号、１９８８年８月３日出 願）。

発明の概略 本発明は、Ｘ線コントラスト剤を、特定の細胞集団または器官にターゲティング する方法を提供する。ターゲティングは、放射線不透過性標識と、細胞の受容体 と相互作用することのできる糖類との複合体の形成により達成する。得られる複 合体は、次いでインターナリゼーシジンにより、特定の細胞集団または器官の細 胞内へ取り込まれる。本発明の１つの態様において、放射線不透過性標識は、ヨ ウ素を含有する化合物を含み、糖類はアラビノガラクタン、ガラクタン、または それらの誘導体を含むことができる。本発明は、標的である細胞または器官の、 代謝活性または病状を、ターゲットに向けられたＸ線コントラスト剤の取り込み および排出の程度と様式を、Ｘ線またはコンピュータートモグラフィーで画像化 することにより、決定する方法を提供する。

図面の簡単な説明 本発明の前述の特徴は、添付した図による以下の詳しい記述を参照することによ って、より容易に理解されるであろう。図１は、通常のＸ線コントラスト剤の構 造を図示している。

特別な態様の詳細な説明 Ａ、概略 本発明は、Ｘ線コントラスト剤およびそれらを含んでいる放射性組成物を、特定 の細胞集団または器官ヘターゲティングする方法を提供する。ターゲティングは 薬剤を修飾して、非経口投与の後に、細胞の特定の種類または細胞集団による取 り込みが、非修飾の薬剤で得られる以上に増加するようにすることである。ター ゲティングは、放射線不透過性標識と、細胞の受容体と相互作用することのでき る糖類（ＲＭＥ型糖類）との間に複合体を形成することにより達成される。得ら れる複合体は、次いでインターナリゼーションにより、特定の細胞集団に入るこ とができる。

本発明は特に、インターナリゼーションの可能な、アラビノガラクタン、ガラク トース、マンノースとそれらの誘導体および分解産物のような、ＲＭＥ型単糖類 および多糖類を含むＲＭＥ型糖類に向けられている。本発明の方法によれば、Ｒ ＭＥ型糖類と放射線不透過性診断用標識との複合体を形成することができ、イン ターナリゼーションにより特定の細胞集団にデリバリ−することができる。放射 線不透過性標識は、多ヨウ素化芳香族基または多ヨウ素化脂肪族基のような、ヨ ウ素をもつ組成物を含む。本発明の方法に従って特定の細胞集団にデリバリ−す ることのできる放射線不透過性標識は、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）　、 メトリシン酸、および２．４．６−ドリヨードフエノールを含む。

特に本発明は肝臓の、ガラクトース受容体を有する肝細胞または、マンノース受 容体を有するクツペル細胞（非ＲＥＳによる取り込み）に対して、Ｘ線コントラ スト剤をターゲティングする方法を提供する。本発明の方法によれば、Ｘ線コン トラスト剤のターゲティングは、Ｘ線またはＣＴで検査される部位を不透明化す ることのできる器官または組織においては、Ｘ線コントラスト剤の濃度を増加し 、望まない毒性の効果が生ずる他の器官または組織においては、その濃度を減少 させる方法を提供する。さらに本発明の方法によれば、血管空間での希釈は標的 器官の不透明化を減少させる結果にはならないため、ターゲットに向けられるＸ 線コントラスト剤の必要な投与量がより少なくなる。本発明の標的に向けられた Ｘ線コントラスト剤の薬物動態学は、従来の血管内Ｘ線コントラスト剤を用いて 現在可能であるよりも、より長く、より詳しい、器官のＸ線またはＣＴによる検 査を可能にし、Ｘ線またはＣＴスキャンの後は身体から排泄される。この性質は コントラスト剤の投与とＸ線またはＣＴスキャニングとの正確な同調性という決 定的必要性を除去する。血管内コントラスト剤の注射とＣＴスキャニングとの不 正確な同調は、診断を誤る結果になるかもしくは、その手順の繰り返しが必要に なる。前者は患者にとってひどい健康診断結果となるであろうし、後者は患者を 、望まない高い投与量のコントラスト剤およびＸ線を必要とするであろう。本発 明はまた、胆管および胆嚢のＣＴスキャンと超音波スキャンを含む、Ｘ線撮影方 法での、ターゲットに向けられたコントラスト剤の使用にも向けられている。

本発明の更なる態様において、ターゲットとされた器官あるいは組織による、Ｘ 線コントラスト剤の血流からの浸出は、ターゲットである組織の代謝、もしくは 機能生存度（病状）をＸ線またはＣＴスキャンで視覚化する方法を提供する。Ｒ ＭＥに向けられたＸ線コントラスト剤の生体内分布は、従来の血管内またはＲＥ Ｓに向けられたＸ線コントラスト剤のそれとは異なるため、本発明のコントラス ト剤の使用は、異なる器官の間、もしくは同一器官の異なる区画の間の解剖学的 詳細のすぐれた鑑別（すなわち、画像コントラストの増大を、Ｘ線あるいはＣＴ スキャンにおいて提供する。

本発明によれば、放射性組成物は、Ｘ線コントラスト剤と製薬学的に容認できる 放射性媒介物とを含むように調製することができる。製薬学的に容認できる放射 性媒介物は、たとえばリン酸塩、クエン酸塩、重炭酸塩等の緩衝水溶液、注射用 無菌水、生理的食塩水、およびＣａ　ｓ　Ｎ　ａ　ＳＫ　ＳＭ　ｇのような正常 な血しょうにある陽イオンの塩化物および／または重炭酸塩を含む平衡イオン溶 液のような注射に適したものを含んでいる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ　’Ｐｒａｃｔ ｉｃｅｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ、”ｌ１版、１７０頁。放射性組成物は、生きて いる動物体内に約１〜３時間残っているように投与されるが、しかしこれより短 い滞留時間およびより長い滞留時間も、一般には受け入れられる。

Ｂ、Ｘ線コントラスト剤のデリバリ−用担体としての多糖類の利点 Ｘ線コントラスト剤のデリバリ−に、タンパク質のかわりに多糖類を用いること の利点は、多糖類が高温でも容易に変性せず（熱の使用による滅菌が可能）、極 端なｐＨ１あるいは有機溶媒中で容易に変性しないことである。多糖類の安定性 から、Ｘ線コントラスト剤と多糖類との間の共有結合は、有機溶媒中で行なわれ る。このことは、いくつかのＸ線コントラスト剤が低い水溶性を有するため、か なりの利点である。非水溶性の媒体中での多糖類の溶解度に関連した利点は、エ ステルのような水に不安定な結合を、Ｘ線コントラスト剤と多糖類との間に作る ことができることである。かかる化学作用の例を、実施例１により提供した。

多糖類のもう一つの利点は、それらが微生物もしくは植物材料から得られること である。ヒトまたは動物材料からの多糖類は、それが存在しないことを確かめる のに費用のかかる、病原体を含んでいる可能性がある。微生物または植物材料か らの多糖類は、本発明に用いるために、毒性および免疫原性の非常に低いものを 選ぶことができる。植物または微生物は、粗多糖類標本を、大量に、確かな方法 で、手頃な価格で提供することができる。本発明に用いられる２種類の炭水化物 は、アラビノガラクタンおよびマンナンである。

Ｃ，アラビノガラクタン アラビノガラクタンは、多くの種類の木と草の細胞壁から得られる多糖類の一種 である。アラビノガラクタンは、肝細胞のアシアログリコプロティンに結合する 。アラビノガラクタンの一般的な材料は、アメリカ西部のカラマツ（カラマツ属 オクシデンタリス、Ｌａｒｉｘｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）である。この材料か らのアラビノガラクタンは、食品の結合剤、乳化剤、または安定剤として使われ ている。それはアラビノースおよびガラクトースの分枝鎖のある、ガラクトース 主鎖から成る。一般に、ガラクトース対アラビノースの比は、５：１と１０：１ の間である。分子量は１０キロダルトンと１００キロダルトンの間である。“Ｆ ｏｏｄ　Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ”、　Ｇｌｉｃｋｓｍａｎ編、ＣＲＣＰｒ ｅｓｓ　％　１９８２年、５頁および３３頁。

最も良い結果は、精製したアラビノガラクタンを用いた場合に得られる。市販の アラビノガラクタンを、限外ろ過によりさらに精製し、１００．０００ダルトン より大きな不純物および１０．０００ダルトンより小さな不純物を取り去ること ができる。この方法により精製したアラビノガラクタンを本発明の実施例に用い る。

アラビノガラクタンは、肝細胞のアシアログリコプロティン受容体に結合する。

この受容体は種々の物質でＲＭＥを行なう（ＢａｒｆｏｒｄおよびＡｓｗｅｌｌ による一ＴｈｅＧｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ″ｖｏ１．　ＩＶ　ＳＭ、１． 　ｌｌｏｒｏｗｉｔｚ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　１９８２年、２７ −５５頁）。アラビノガラクタンに結合したＸ線コントラスト剤は、肝細胞をタ ーゲマンナンは、酵母菌の細胞壁から得られる多糖類の一種である。マンナンは 、多くの種類の食細胞上のマンノース受容体に結合することができる。それらは 主に、種々の直鎖および分枝鎖の構造を有するα−Ｄ−マンノピランである。Ｐ 、　Ａ、　Ｊ、　ＧｏｒｉｎおよびＥ、　Ｂｅｒｒｅｔｏ−Ｂｅｒｇｔｅｒによ る　“Ｔｈｅ　Ｐｏ１ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ″Ｇ、０．　Ａｓｐｉｎｖａｌ １編、２巻、Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　１９８３年、３７６−３８０頁 。

マンナンは、ＲＥＳの大食細胞上に見られるマンノース受容体に結合する。マン ナンに付着したＸ線コントラスト剤は、大食細胞をターゲットとする。

Ｅ０本発明に用いられるＲＭＥ型単糖類および多糖類の識別 本発明では、Ｘ線コントラスト剤を単糖類もしくは多糖類に付着させ、得られた 複合体を、細胞表面の受容体の作用を通して特定の種類の細胞にターゲティング する。

本発明では、ある種の単糖類もしくは多糖類のみを使用し、これらをＲＭＥ型単 糖類、あるいは多糖類（ＲＭＥ型糖類）と呼ぶ。ＲＭＥ型糖類は、たとえばデキ ストラン、デキストリン、セルロース、ヒドロキシエチルスターチ、ヘパリン、 デンプン、デキストラン硫酸塩、カルボキシメチル化デキストリン、およびカル ボキシメチルセルロースのような一般の非ＲＭＥ型糖類とは異なる。非ＲＭＥ型 多糖類は、薬剤のデリバリ−１薬物製剤、食品添加物のような種々の適用に利用 され、血しょうの増量にも用いられている。ＲＭＥ型多糖類はアラビノガラクタ ンとマンナン、およびそれらの誘導体を含み、本発明の方法により、Ｘ線コント ラスト剤を直接に、それぞれ肝細胞および大食細胞にデリバリ−するために用い ることができる。ＲＭＥ型単糖類は、肝細胞上に存在するアシアログリコプロテ ィン受容体により認識されるガラクトース、および大食細胞上のマンノース受容 体に認識されるマンノースを含む。

本発明者らはこれらの複合体を以下、ＲＭＥ型糖類／Ｘ線コントラスト剤複合体 と呼ぶ。ＲＭＥ型糖類とＸ線コントラスト剤との間の複合体は、放射線不透過性 標識のＲＭＥ型糖類への直接の、あるいはポリカルボン酸、ポリアミノカルボン 酸、ポリアミンおよびアミノアルカノールを含む連結基を介した共有結合による 結合に関与する。

カルボキシメチル化、スクシニル化、ヒドロキシエチル化、および硫酸化を含む 非ＲＭＥ多糖類の化学修飾が行なわれてきた。一般には、通常の多糖類のかかる 化学修飾は、受容体に結合しＲＭＥを受ける能力を与えない。

しかしながら非ＲＭＥ多糖類は、ある場合にはＲＭＥを行なう受容体により認識 される置換基の結合により修飾され、かかる修飾は非ＲＭＥ多糖類にＲＭＥの性 質を与える。たとえば、ガラクトース残基を非ＲＭＥ多糖類であるデキストラン に結合することができ、得られた多糖類のガラクトースは、アシアログリコプロ ティン容体によ・り認識されＲＭＥを受ける。ガラクトースの結合により、デキ ストランはＲＭＥ型多糖類に変わる。同様に、マンノース基もデキストランに結 合することができ、得られた多糖類は大食細胞のマンノース受容体により認識さ れる。二官能性のカップリング剤また架橋剤の助けにより、炭水化物分子を重合 して得られる合成ポリマーも、この方法で修飾される。

ＲＭＥ型多糖類の第二の修飾は、部分的な消化を伴い、それらの派生物と考えら れる、より低分子の多糖類を生ずる。これは酸による制御された加水分解と、分 別法により行なうことができ、希望する大きさの類のＲＭＥ型多糖類を得ること ができる。本発明の多糖類は、分解または修飾の前では、約１０００ダルトンよ り大きい分子量をもつ。

多糖類を、ＲＭＥ型多糖類と呼ぶためには、ＲＭＥを行なう受容体への多糖類の 結合を証明しなければならない。１つの証明のタイプは、あるＲＭＥ型多糖類の 、ＲＭＥによって排除されることが知られている糖タンパク質の除去を妨げる能 力を含む。たとえば、アラビノガラクタンとアシアログリコプロティン受容体と の相互作用は、アラビノガラクタンがアシアログリコプロティンであるアジアロ フエツユインの放射性試料の除去を妨げる能力により証明された。ラットでは、 ５００ｍｇ／ｋｇのアラビノガラクタンが１２５Ｉ−アシアロフェツユインの除 去を妨げた（　Ｊｏｓｅｐｈｓｏｎらによる、Ｍａｇ、　Ｒｅｓ、　Ｉｍａｇ、 　６巻、６３７−６４６頁、１９９０年、表１参照）。他の実験と同様、この実 験の結果として、アラビノガラクタンが肝細胞のアシアログリコプロティン受容 体によって認識されることが結論される。従って、アラビノガラクタンはＲＭＥ 型多糖類である。。

本発明のＲＭＥ型糖類／Ｘ線コントラスト剤の除去は、たとえばデキストランま たはヒドロキシエチルスターチのような非ＲＭＥ型糖類の、相当な濃度の注射に よる影響を受けない。本発明のＲＭＥ型糖類／Ｘ線コントラスト剤の除去は、Ｒ ＥＳの大食細胞によって除去される粒子、コロイド、またはリポソームの相当な 濃度の注射による影響を受けない。

実施例 実施例１：アラビノガラクタン−ＤＴＰＡの調製精製したアラビノガラクタン（ ２３，０００ダルトン、２０．０ｇ　、　０．８７ミリモル）およびジエチレン トリアミンペンタ酢酸ジアンハイドライド（２，１５ｇ　、　６．０２ミリモル ）を６０℃でＤ　Ｓ　Ｍ　Ｏ（２００ｍＬ　）に溶解した。０．５時間後、澄ん だ溶液に１５℃でＨ２Ｏ（約５００ｍＬ　）を加えた。水溶液の少量のアリコー ト（２５ｍＬ）を分析用とした。残りの水溶液を、Ａｍ１ｃｏｎ　Ｙ　Ｍ　３お よびＹＭＩ限外ろ過膜（締め出しは各々５．０００および１．０００ダルトン） でろ過し、Ｈ２０（２×４００ｍＬ　）で洗浄した。膜上に残った溶液（〜７０ ｍＬ）を凍結し凍結乾燥した。白い粉末の収量は１８、８ｇであった。

上記のアリコート（〜０．２　ミリモルＤＴＰＡを含んでいる）を、０．１規定 のＮａＯＨで中和し、過剰のＭ　ｎ　ＣＩ　２　・４　Ｈ２０（７０ｍｇ１０． ３５ミリモル）を加えた。

ｐＨを７．０に再度調節し、セファデックスＧ−２５カラム（９，５Ｘ３００ｍ ｍ　）で０．１％　Ｎ　ａ　Ｎ　ａ　（０，３３ｍＬ／分）を溶離剤としＵＶ検 出器を２８０ｎｍに合わせて、ＨＰＬＣにより分析した。クロマトグラムは、保 持時間１６．４分および２３分のところに、それぞれアラビノガラクタン−ＤＴ ＰＡおよび遊離のＤＴＰＡに合う、Ｍｎ”＋によるピークを示した。結合してい ないＭ　ｎ　２＋は３９分に現われた。

アラビノガラクタン−［Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ　−Ｍ　ｎ　］のピークとＭ　ｎ　Ｄ　 Ｔ　Ｐ　Ａのピークとの相対面積は、ＤＴＰＡの３４％がアラビノガラクタンと 結合しており、ＤＴＰＡ　：アラビノガラクタンのモル比は２．４に相当するこ とを示した。この過程は、アラビノガラクタン−ＤＴＰＡも遊離のＤＴＰＡも、 ２８０ｎｍて吸収しないために必要であった。ＤＭＳＯ溶媒の存在比が大きいこ とが、反応の程度を分析するための屈折率検出器の使用をはばんだ。

イオバーソルのアラビノガラクタン−ＤＴＰＡへのカップリング（２１２７−１ ２４） 上記のアラビノガラクタン−Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ　（１，５１ｇ　。

０、５３　ミリ当量−ＣＤＯＢ）および固体のイオバーソル（０，５１ｇ　、　 ０．６３ミリモル）を６０℃でＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ（４０ｍＬ）に溶解した。１−（ ３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１，０５ｇ 、　５．８８ミリモル）を加え、反応混合物を６０℃で２８時間攪拌し、室温に 冷却して５０ｍＬのＨ２Ｏを混合した。セファデックスＧ−７５カラム（９，５ Ｘ３００ｍｍ）で０．１％Ｎ　ａ　Ｎ　３（０−３３ｍＬ　／分）を溶離剤とし 、２８０ｎｍにセットしたＵＶ検出器を用いたＨＰＬＣ分析は、イオバーソルの アラビノガラクタン−ＤＴＰＡへの結合が１９％であることを示した。

溶液をＡｍ１ｃｏｎ　Ｙ　Ｍ　３限外ろ過膜（締め出し　５．０００ダルトン） でろ過し、Ｈ２０（３Ｘ３０ｍＬ）で洗浄した。保持されていた物質を凍結乾燥 した。オフホワイトの粉末の収量は１．４８ｇであった。

実施例２：アラビノガラクタン−ＤＴＰＡの調製精製したアラビノガラクタン（ ２３，０００ダルトン、０．５０ｇ　、　２１．７μモル）およびジエチレント リアミンペンタ酢酸（Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ）ジアンハイドライド（０，１０２ｇ　、 　２８５μモル）を６０℃でＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ（２０ｍＬ）に溶解した。１時間後 、澄んだ溶液を室温に冷却した。Ｈ２０（１０ｍＬ）の添加により白い沈澱を生 じた。混合物をＡｍ１ｃｏｎ　Ｙ　Ｍ　５限外ろ過膜（締め出し　５．０００ダ ルトン）でろ過し、Ｈ２Ｏ（４×１０ｍＬ）で洗浄した。膜上に残った生成物を Ｈ２０に溶解し、凍結乾燥した。白色粉末の収量は０．４４ｇであった。

２、４．６−　ｈリョードフェノールのアラビノガラクタン−ＤＴＰＡへのカッ プリング アラビノガラクタン−Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａ　（４８，１ｍｇ、　１．７ｇモル）およ び２．４．６−トリヨードフェノール（２０，０＋＋ｇ　、　４２μモル）を６ ０℃でＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ（５ｍＬ）に溶解した。１−（３−ジメチルアミノプロピ ル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１１８＋ａｇ１６６０μモル）を加え 、溶液を６０℃で１．５時間攪拌した。反応液のアリコート（０，１ｍＬ）をセ ファデックスＧ−２５カラム（９，５Ｘ　３００ａ＋＋ａ）で、０．１％Ｎ　ａ 　Ｎ　３（０，３３ｍＬ　７分）を溶離剤としてＨＰＬＣにより分析した。遊離 および結合したトリヨードフェノールの検出は、２８０ｎｍにセットしたＵＶ検 出器を用いて行なった。クロマトグラムは、保持時間１６．４分で、アラビノガ ラクタン−ＤＴＰＡに結合したトリヨードフェノールによる、単一のピークを示 した。遊離のトリヨードフェノールは観察されなかった。　室温に冷却後、Ｈ２ ０（１０ｍ　Ｌ　）を加え、溶液をＡｍ１ｃｏｎＹ　Ｍ　３膜（締め出し　５． ０００ダルトン）を用いた限外ろ過により精製した。

膜上に残った生成物を５０％　Ｄ　Ｍ　Ｓ　Ｏ／　Ｈ２０（２０ｍＬ）およびＨ ２０（４×２０　ｍ　Ｌ　）で洗浄した。生成物をＨ２０（１５ｍＬ）に溶解し 、凍結乾燥した。オフホワイトの粉末の収量は０．４３ｍｇであった。

実施例３：２．３．５−トリヨードベンジルアルコールの調製２、３．５−　） リョード安息香酸（２０ｇ、　４０ミリモル）を、ＢＦ３−メタノール（１２ｍ Ｌ）複合体を用い、還流トルエン中で（１００ｍＬ、　２４時間）エステル化し た。生成物であるメチル２．３．５−トリヨード安息香酸は、還流ジエチルエー テルＣ２Ｃ２０Ｏ，２時間）・中で、Ｌ　ｔ　Ｂ　Ｈ４Ｃ４−Ｏｇ　１０．１８ モル）を用いて還元した。；の生成物を下記の２つの炭水化物誘導体の合成に用 い・た。

ガラクトピラノシル誘導体の調製 １、２．３．４．６−０−ペンタアセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノース（３， ９ｇ　、　１０ミリモル）を、Ｄ（＋）ガラクトース（２０ｇ、　０．１１モル ）と無水酢酸（１４０，４ｇ　、　１．３７６モル）とをピリジン（９５ｍＬ） 中で、１０℃で７２時間反応させることにより合成した。次いでジメチルホルム アミド（３０＋Ｌ）中で、２、３．５−　トリヨードベンジルアルコール（４， ８５ｇ１１０ミリモル）およびパラトルエンスルホン酸−水和物（５，０ｇ　。

２６、３　ミリモル）と共に８５−９０℃で２４時間濃縮した（　Ｈｅ１ｆｅｒ ｉｃｈグリコシド合成法）。メタノール中（２０ｍＬ　。

２５℃、２時間）で、触媒量（ｃａｔｙａｌｙｔｉｃ　ａｍｏｕｎｔ）のメトキ シドナトリウム（２００ｍｇ、　３．７ミリモル）を用いて残留したＯ−アセチ ル基を除去した後、１−０−（２，３，５−トリヨードベンジル）−Ｄ〜ガラク トピラノシドのアノマー混合物を、再結晶により２−プロパツールから単離する 。

４−０−β−Ｄ−ガラクトピラノシルーα−Ｄ−グルコピラノシル誘導体の調製 ａ−Ｄ−ラクトース（２０，０ｇ、　５８．４膜ｍｏｌ）を無水酢酸（８０ｍＬ 　、　８６ｇ　、　０．８５モル）とピリジン（６０ｍＬ）中で、１０℃で７２ 時間反応させて合成した２、　３．４．６−０−テトラアセチル−β−Ｄ−ガラ クトシルー１．２．３．５−０−テトラアセチル−α−り一グルコピラノシド（ ６，７８ｇ、　１０ミリモル）を、２．３．５−　トリヨードベンジルアルコー ル（４，８５ｇ、　１０ミリモル）およびパラトルエンスルホン酸−水化物（５ ，０ｇ　、　２６Ｊミリモル）と共にジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中で、 ８５−９０℃で２４時間濃縮した。メタノール中（２０ｍＬ　、　２５℃、２時 間）で、触媒量のメトキシドナトリウム（２００ｍｇ、　３ゴミリモル）を用い て残留したＯ−アセチル基を除去した後、１−０−（２，３，５−トリヨードベ ンジル）−４−０−β−Ｄ−ガラクトピラノシルーＤ−グルコピラノシドのアノ マー混合物を、再結晶により２−プロパツールから単離する。

実施例４：アラビノガラクタン−コハク酸塩の調製イオバーソルのアラビノガラ クタン−ＤＴＰＡへのカップリング 実施例５：アラビノガラクタン−エチレンジアミンの調製 実施例６：アラビノガラクタン−アミノエタノールの調製 国際調査報告 国際調査報告 Ｓ＾　５９５５７ フロントベージの続き （７２）発明者　パルムーチ、スチーブンアメリカ合衆国、マサチューセッツ州 ０２０８１、ウォルポール、グラニット・ストリート　１１０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　（ｉ）放射線非透過性標識と、細胞受容体と相互作用をすることができる糖 類との複合体を生成すること及び （ｉｉ）インターナリゼーションによって特定の細胞集団内に前記複合体を取り 込ませること を含む特定細胞集団にＸ線コントラスト剤をデリバリーするための方法。 ２　糖類が、アラビノガラクタン、マンノース、前記物質の分解生成物及び前記 物質の誘導体から成る群から選ばれる多糖類である、請求項１に記載の方法。 ３　多糖類が、有機結合基で修飾されたアラビノガラクタンである、請求項２に 記載の方法。 ４　有機結合基が、アミノポリカルボン酸、ポリカルボン酸、ポリアミン及びア ミノアルカノールから成る群から選ばれる、請求項３に記載の方法。 ５　有機結合基が、ジエチレントリアミンペンタ酢酸、コハク酸、エチレンジア ミン及びアミノエタノールから成る群から選ばれる、請求項４に記載の方法。 ６　放射線非透過性標識が、ヨウ素を含有する化合物を含む、請求項２に記載の 方法。 ７　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基か ら成る群から選ばれる、請求項６に記載の方法。 ８　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｃｒｓｏｌ）、メトリゾン酸 （ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールから 成る群から選ばれる化合物を含む、請求項７に記載の方法。 ９　放射線非透過性標識が、ヨウ素含有化合物を含む、請求項４に記載の方法。 １０　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基 から成る基から選ばれる、請求項９に記載の方法。 １１　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）、メトリゾン 酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールか ら成る群から選ばれる化合物を含む、請求項１０に記載の方法。 １２　放射線非透過性標識が、ヨウ素含有化合物を含む、請求項５に記載の方法 。 １３　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基 から成る群から選ばれる、請求項１２に記載の方法。 １４　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）、メトリゾン 酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールか ら成る群から選ばれる化合物を含む、請求項１３に記載の方法。 １５　糖類がインターナリゼーションを成し得ない化合物に結合し、その化合物 と糖類の複合体を提供し、得られた複合体が細胞受容体と相互作用をすること及 びインターナリゼーションをすることが可能である、請求項１に記載の方法。 １６　糖類がガラクトースである、請求項１に記載の方法。 １７　糖類が、有機結合基で修飾されたガラクトースである、請求項１６に記載 の方法。 １８　放射線非透過性標識が２，３，５−トリヨードベンジルアルコールを含む 、請求項１７に記載の方法。 １９（ｉ）細胞受容体と相互作用をすること及びインターナリゼーションをする ことができる糖類及び（ｉｉ）放射線非透過性標識 を含む組成物であり、該組成物がインターナリゼーションによって特定の細胞集 団内に取り込まれる、特定細胞集団にＸ線コントラスト剤をデリバリーするため の組成物。 ２０　糖類が、アラビノガラクタン、マンノース、前記物質の分解生成物及び前 記物質の誘導体から成る群から選ばれる多糖類である、請求項１９に記載の組成 物。 ２１　多糖類が、有機結合基で修飾されたアラビノガラクタンである、請求項２ ０に記載の組成物。 ２２　有機結合基が、アミノポリカルボン酸、ポリカルボン酸、ポリアミン及び アミノアルカノールから成る群から選ばれる、請求項２１に記載の組成物。 ２３　有機結合基が、ジエチレントリアミンペンタ酢酸、コハク酸、エチレンジ アミン及びアミノエタノールから成る群から選ばれる、請求項２２に記載の組成 物。 ２４　放射線非透過性標識が、ヨウ素を含有する化合物を含む、請求項２０に記 載の組成物。 ２５　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基 から成る群から選ばれる、請求項２４に記載の組成物。 ２６　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）、メトリゾン 酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールか ら成る群から選ばれる化合物を含む、請求項２５に記載の組成物。 ２７　放射線非透過性標識が、ヨウ素含有化合物を含む、請求項２２に記載の組 成物。 ２８　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基 から成る群から選ばれる、請求項２７に記載の組成物。 ２９　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）、メトリゾン 酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールか ら成る群から選ばれる化合物を含む、請求項２８に記載の組成物。 ３０　放射線非透過性標識が、ヨウ素含有化合物を含む、請求項２３に記載の組 成物。 ３１　放射線非透過性標識が、ポリヨウ素化芳香族基及びポリヨウ素化脂肪族基 から成る基から選ばれる、請求項３０に記載の組成物。 ３２　放射線非透過性標識が、イオバーソル（ｉｏｖｅｒｓｏｌ）、メトリゾン 酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ　ａｃｉｄ）及び２，４，６−トリヨードフェノールか ら成る群から選ばれる化合物を含む、請求項３１に記載の組成物。 ３３　糖類がインターナリゼーションを成し得ない化合物に結合し、その化合物 と糖類の複合体を提供し、得ら、れた複合体が細胞受容体と相互作用をすること 及びインターナリゼーションをすることができる、請求項１９に記載の組成物。 ３４　糖類がガラクトースである、請求項１９に記載の組成物。 ３５　糖類が、有機結合基で修飾されたガラクトースである、請求項３４に記載 の組成物。 ３６　放射線非透過性標識が２，３，５−トリヨードベンジルアルコールを含む 、請求項３５に記載の組成物。