JPH06507882A - 滑膜癒着の防止 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 溝膜癒着の防止 発明の分野 本発明は、生化学および医学の分野に関し、更に詳細には１■傷を受けた溝膜組 織ての癒着を防止する方法に関する。

発明の背景および要約 咄乳類の体には関節間隙、すなわち、四肢および他の部位を動かすだめの関節運 動のしくみを有する領域を数多く　４４−　Ｌ、ている。これらの関節間隙は溝 膜嚢としても知られている。関節間隙には溝膜組織があり、潤滑液（流体）を関 節の各慣成要素に供給している。

関節間隙の損傷は、それか外傷の結果であろうと手術の結果てあろうと、関節間 隙内で癒着を引き起こし、溝膜組織を更に破壊しく円板穿孔および他の二次的外 傷）、関節のＭＩ’＆および正常な機能を妨げることがある。

哺乳類の体の互いに関係のない（上皮）組織における癒着形成、具体的にはｌＪ ｘ腋の手術における癒着形成の抑制を試みる研究か行われてきた。例えば、ＥＰ Ａ第２２５１６２号明細書に示されたデータを参照されたい。しかしながら、関 節間隙は上皮組織とは著しく異なり、前記の明細書に記載の処方か溝膜組織に適 用できるとは考えられなかった。したがって、特に関節鏡手術後の、関節間隙に おける癒着防止の試みは成功していない。従って、溝膜嚢における癒着防止方法 の提供が切実にめられてきた。

本発明によれば、溝膜性関節間隙における非上皮組織間の癒着形成の防止方法は 、リポソーム介在非ステロイド性抗炎症剤を治療に有効な量で溝膜間隙へ投与す ることを特徴とする。

発明の詳細な説明 多種多様な脂質粒子には、本発明の小胞を形成するだめの非ステロイド性抗炎症 剤であって、漬膜嚢における癒着形成を防止することができるものがある。例え ば、Ｖｅｓｔａｒ社の欧州特許公報第０２７２０９１号明細書に開示のデリバリ −ビヒクルを用いることができる。

これらのビヒクルは、両親媒性基質と関連している単層のカプセル形成性のリン 脂質膜から成る。しかしながら、脂質微粒子は好ましくはリン脂質を含んでおり 、最も好ましくはリポソームを含んでいる。

リン脂質は両親媒性分子てあり、細胞膜の主要成分である。薬量的なリン脂質の 親水性群にはホスファチジルコリンおよびホスファチジルエタノールアミン残基 があり、一方典型的な疎水性群には様々な飽和および不飽和の脂肪酸残基がある 。リン脂質と水との混合物は、用いられる条件によってリン膠質分子を自発的に 構成し、様々な特徴を有する相となる。これらは二重層構造を有し、リン脂質の 親水性群は二重層の外部において水と相互作用し、疎水性群は二重層の内部にお いて近接分子上で同様の群と相互作用する。そのような二重層構造は非常に安定 であり、細胞膜の主要な基本構造を形成する。

リン脂質二重層構造は、リン脂質小胞またはリポソームと呼ばれる閉じた球形の 殻様構造を構成することもてきる。これらの構造における膜二重層は、典型的に はある水性の容量物を封入し、封入された容量物と外部溶液どの間に浸透性の障 壁を形成する。水性溶液中に分散したリン脂質は二重層を自発的に形成し、炭化 水素の尾部を内側に向け、極性の頭部基を外側に向けて水と相互作用するように する。この混合物は、通常は単純攪拌により直径１−１０μｍ（１，０００−１ ０，０００ｎｍ）のタマネギ様形態の多数の二重層を有する多重層小胞（Ｍ　Ｌ 　Ｖ　ｓ　）を形成する。これらの構造は、超音波処理よｔ＝は当該技術分野に おいて既知の他の方法により、平均直径が約３０−３００　ｎ　ｍの単層小胞（ ＵＶ　ｓ　）を形成する４つシ、かじながら、例えばイン・ヒポての最大循環時 間の観点からは、５０〜Ｉ００ｎｍの範囲が最適であるど考えられる。実際の平 衡直径は、主として用いられるりン脂質の性状およびコレステロールのような他 の脂質の配合の程度により決定される。リポソーム作成の標準的方法は当該技術 分野で知られており、例えばリポソームの商業用の生産方法は、Ｒｏｎａｌｄ　 Ｃ。

Ｇａｍｂ　ｌ　ｅの米国特許第４，７５３，７８８号明細書およびＫｅｖｉｎ　 Ｒ，Ｂｒａｃｋｅｎの米国特許第４゜９３５．１７１号明細書に記載されている 。

リポソームはＭ　Ｌ　Ｖ　ｓまたはＵＶｓのいずれとしても、動物およびヒ］・ において、薬剤デリバリ−のビヒクルとして有用であることが証明されている。

小さい親水性分子やポリペプチドのような活性薬剤はリポソームの水性コアに取 り込むことができ、一方線水性の物質はリポソーム膜に溶解させることができる 。リポソーム構造体は容易に注射することができ、また特定の細胞の種類または 体の部位に徐放し、薬剤デリバリ−するための基剤を形成することができる。Ｍ ＬＶｓは、主としてそれらが比較的大きいため、細網内皮系（肝臓および牌臓） によって通常急速に取り込まれる。本発明は、典型的には、数時間のあいだ循環 器系に留まり、標的細胞によるインターナリゼーション（ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚ ａｔｉｏｎ）後に分解するような小胞を利用する。これらの必要条件に対しては 、処方は、直径２００ｎｍ未満、好ましくは１１００ｎ未満のＵ　Ｖ　ｓを利用 するのが好ましい。好ましいリポソーム組成物には、様々なモル比のジステアロ イルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）およびジパルミトイルホスファチジルコ リン（ＤＰＰＣ）およびコレステロールがある。好ましいリポソームは、モル比 ２．１のＤＳＰＣとコレステロールから成っている。

非ステロイド性抗炎症剤およびプロドラッグ（ｐｒｏｄｒｕｇｓ）には、アサプ ロパシン、カルプロフェン、ジクロフェナックナトリウム、フエナム酸または塩 （詳細には、メク→フエナム酸ナトリウム）、フェンブフェン、フェンクロフェ ナック、フルールビプロフェン オキサプロジン、トルメチンナトリウム、ピロキシカムおよび関連オキシカムか 挙げられる。

本発明の脂質粒子／非ステロイド性抗炎症剤組成物は、損傷または手術後に注射 によって（または関節鏡洗浄液の一部として）関節間隙に投与して、薬剤の全量 が損傷後に溝膜嚢に止まるようにするのが好ましい。後述の実施例から、当業昔 は有効用量を容易に決定することができる。一般的には、この組成物を含む溶液 は等張であるへきである。

顎関節（　Ｔ　Ｍ　Ｊ　）障害は、若年から中年の成人に影響する一般的な問題 であり、疼痛、苦痛、および生産性の消失を引き起こす。

Ｔ　Ｍ　Ｊ障害は、筋膜症機能障害症候群および関節内陣という２つの異なるも のに分けることができる。関節内陣は、関節鏡手術または開放関節形成術を行い 、苦痛の除Ｊ．−および機能改善を行う必要のある外科性疾患である。

ヒｈ　Ｔ〜ＩＪの関節鏡手術により、関節内陣患者において高頻度で関節内癒着 か生しることか明らかになっている。これらの癒着は、関節の軟組織に対する外 傷性または医原性の損傷から生じる。術後癒着は、それらの手術において、正常 軸回の運動および機能を回復できなくするという深刻な影響を及はす。

現在、様々な方式を用いて、関節鏡または開放ＴＭＪ手術後に炎症を減少させ且 つ新しい癒着形成を防止している。手術時に関節に注射するコルチコステロイド 懸濁液は、術後の炎症を最小限にするために広く採用されて、いる。しかしなが ら、関節内にステロイドを使用すると、破壊的関節症のような重篤な副作用が長 期間にわたって見られている。ヒアルロン酸塩およびヒアルロニダーゼのような 他の薬剤が用いら第１てきた。ヒアルロン酸塩は潤滑剤として用いられ、ヒアル ロニダーゼは損傷を受けた組織で暴露され粉砕された基質の癒着を抑制すると推 定されている。いずれの薬剤についても、ＴＭＪの術後癒着を防止する効力を支 持する公表された研究は存在しない。

良好な外科的運動化回復、関節内コルチコステロイドおよび適切な物理療法にも かかわらず、ＴＭＪ手術後の不全率は約１５〜２７％である。術後の新しい癒着 形成は、外科治療失敗の主要な要因であると信しられている。

以下の実施例に記載されているように、ＴＭＪ癒着のような関節鏡手術による癒 着をウサギにおいて確実に誘導することが可能なモデルがある。ウサギは、形態 および機能か類似しており、大きさが適当であり、入手が容易であることから、 ヒトＴＭＪ手術のモデルとして頻繁に用いられている。

Ｌ−α〜ノステアロイルホスファチジルコリン（ｒＤｓＰｃＪ　）１．２１ｇ１ および０．２９ｇのコレステロール（ＤＳＰＣ対コレステロールのモル比は２： １である）、および４．３モル％α−トフフェロールを、加熱および攪拌を行い ながら適当な溶剤（クロロホルム）に、最小濃度が約３０％（Ｗ／Ｖ）となるよ うに溶解した。次いて、脂質を空気−窒素混合物を用いて噴霧乾燥機中て噴霧乾 燥し、微粉とした。実施例の操作条件は、空気温度か７１°Ｃ１空気取入れ量が ３．５〜４．５ｍ’／分、ノズルセツティングが１．５〜２．０ｋｇ／ｃｍ’お よび供給速度が５〜８ｍ１／分である。無菌の発熱物質不含リン酸緩衝食塩水に 溶解したＮａ−）ルメチンを、噴霧乾燥した脂質成分に加え、薬剤については３ ０ｍｇ／ｍｌの、脂質については１２０ｍｇ／ｍｌの最終濃度とした。この材料 を、窒素下にて６５°Ｃの水浴中で４０分〜６０分間、ボルテックス攪拌してＭ ＬＶｓを形成させ、その後す一トクレープ中で処理した。使用前に、Ｍ　Ｌ　Ｖ 　ｓをリン酸緩衝食塩水で１．３に希釈した。

ＴＭＪ関節関節仁術１づる癒着の防止 体重２．７３〜３．７５ｋｇの雌性ニューシーラント自ウサギ２１匹に、両側側 頭下顎骨関節（ＴＭＪｓ）に皮膚の自家移植を行い、関節円板の外科手術による 損傷を再現した。この手順により関節内癒着か生じることが知られているλ３か 所の関節は、正常対照とするために手術を行わなかった。ケタミン５０ｍｇ／ｋ ｇの筋肉注射により全身麻酔を行い、フオランおよびＮ　２０　／　Ｏｔの吸入 によって維持した。プロ力インペニシリン３００゜０００単位を手術の前に筋肉 内注射した。外科的損傷は、円板と後部付着組織の接合部にメスにより作成した 。次いて、２／３ｍｍの損傷を大腿側部から得た自家真皮で修復した。移植は、 ６−０メルシリンの縫合糸４本で固定した。Ｔ　Ｍ　Ｊ嚢は、５−０ビクリル縫 合糸で閉じ、上部関節間隙に下記の内から１つを０．５ｍｌ注射した。

乳酸含有リンゲル液（手術対照）−１０関節、トルメチンリポソームｌｏｍｇ／ ｍ１−９関節、ヒアルロン酸ナトリウム］　Ｏｍｇ／ｍ］　−１０関節、デキサ メサゾン酢酸８ｒｎｇ／ｍ　Ｉ　−１０関節。対照または試験物質は、無作為抽 出二重盲検法にのっとり、カバーを付けた注射器で施術者に供給した。皮膚切開 部は、３〜０クロム製ガツト縫合糸で閉し、抗生物質軟膏を３回塗布した。全て のウサギが手術後蘇生し、術後期間に体重が増加した。

手術４週間後に半数の動物を層殺し、残りの動物を手術８週間後に屠殺した。

手術したＴＭＪｓの総切片により、乳酸含有リンゲル液投与では１０／１０の関 節において重度の癒着が、ヒアルロン酸塩投与では１０／１０の関節において中 度から重度の癒着が、デキサメサゾン酢酸では１０／Ｉｏの関節において軽度、 中度または重度の癒着が、トルメチンリポソーム投与ては２／９の関節において 軽度の癒着か見られた（９関節のうち７関節は、癒着は見られなかった）。

総切片の結果のノンパラメトリック統計解析法に基いて検討したところ、トルメ チンリポソームでは、実験的に誘導したウサギＴ　Ｎｉ　Ｊの癒着形成は有意に 減少した。

ヒアルロン酸塩およびデギサメサゾンでは、乳酸含有リンゲル液に比較して有、 色な癒着の減少は見られながった。

国際調査報告 国際調査報告 −、０．ｏ＋ａ−＋＋ｍｍ、　ＰＣＴ／ＬＩＳ　９１１０９０１７Ｍ　Ｎ９−（ Ｍ　Ｎ口　＾ＮｈＪ　Ｅ：　Ｘ　４１　ＮＮＥＥ　Ｘ　Ｂ：フロントページの続 き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１１５４　 ７４３１−４Ｃ／／　Ｃ０７Ｄ　２０７／３３７　８２１７−４Ｃ２０９／３０ 　９２８４−４Ｃ ４１７／１２　２１３　９０５１−４ＣＩ

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. １．滑膜性関節間隙における非上皮性組織間の癒着形成を防止する方法であって 、リポソーム介在の非ステロイド性抗炎症剤を治療に有効な量で滑膜間隙へ投与 することを含む方法。
2. ２．非ステロイド抗炎症剤を、アザプロパゾン、カルプロフェン、ジクロフェナ ックナトリウム、フェナム酸、メクラフェナム酸ナトリウム、フェンブフェン、 フェンクロフェナック、フルールビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェ ン、ナプロキセン、オキサプロジン、トルメチンナトリウムおよびピロキシカム から成る群から選択する、請求の範囲第１項に記載の方法。
3. ３．非ステロイド性抗炎症剤を多重層小胞に封入する、請求の範囲第１項または 第２項に記載の方法。
4. ４．非ステロイド性抗炎症剤を単層小胞に封入する請求の範囲第１項または第２ 項に記載の方法。
5. ５．滑膜性関節間隙における非上皮性組織間における癒着形成を防止するための 組成物の調製における、リポソーム介在非ステロイド性抗炎症剤の使用。
6. ６．非ステロイド抗炎症剤を、アザプロパゾン、カルプロフェン、ジクロフェナ ックナトリウム、フェナム酸、メクラフェナム酸ナトリウム、フエンブフエン、 フェンクロフェナック、フルールビプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェ ン、ナプロキセン、オキサプロジン、トルメチンナトリウムおよびピロキシカム から成る群から選択する、請求の範囲第５項に記載の使用。
7. ７．非ステロイド性抗炎症剤を多重層小胞に封入する、請求の範囲第５項または 第６項に記載の使用。
8. ８．非ステロイド性抗炎症剤を単層小胞に封入する、請求の範囲第５項または第 ６項に記載の使用。