JPH06507917A

JPH06507917A - 抗真菌剤

Info

Publication number: JPH06507917A
Application number: JP5515804A
Authority: JP
Inventors: グレヴィッチ　ウラディミール　ゼット
Original assignee: ジェムラン　インコーポレイテッド
Priority date: 1992-03-04
Filing date: 1993-03-03
Publication date: 1994-09-08
Also published as: EP0597049A4; EP0597049A1; CA2102518A1; US6124352A; WO1993017676A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】抗真菌剤発明の分野本発明は、生物学的に活性なノニトロ安息香酸化合物及びその誘導体に関し、詳細には、これらの化合物を用いて真菌性疾患を治療する方法に関する。

発明の背景真菌性疾患（真菌症）に効果的な治療用薬剤の開発は、長い間看目されず、他の感染歯に有効な薬剤に向げられていた。最も一般的な真菌感染症は、本来表在性であり、生命を脅かすものでなく、製薬会社が新規な治療法の開発を促進するほどのものではない。しかしながら、このシナリオは変化してきており、真菌性疾患からの死亡は新しいことではないが、致死を引き起こす全身性真菌感染症の発症が増加している。皮肉なことに、他の分野（免疫抑制及び／又は細胞毒性療法）における最新の医療技術の進歩及び後天性免疫不全症候群（エイズ）のような疾患の出現が重篤な真菌感染症数増加をもたらしている主な原因である。

従って、真菌性疾患は、致命的な全身性感染症、例えば、ヒストプラスマ症、全身性カンシタ症、アスペルギルス症、プラストミセス症、コクシジオイデス症、バラコクシジオイデス症及びクリプトコックス症と一般的な表在性感染症、例えば、皮膚糸状菌（ヨ癖）症、即ち、足部口癖（水虫）及び股部口癖（いんきんたむし）、カンシタ症及びアクナノミセス症に大別される。致命的な真菌感染症は、上述の免疫抑制又は免疫防御患者ばかりでなくサイトメガロウィルス（ＣＭＶ）及びインフルエンザのような他のウィルス性感染症に罹っている患者、化学療法又は放射線療法を受けている癌患者、抗拒絶反応剤を受けている移植患者並びに毒性化学薬品、金属及び放射線照射を受けた患者に対しても増えている疾患である。

真菌症は、たいてい、病原体よりむしろ日和見真菌により引き起こされる。カンジダ症、アスペルギルス症、接合菌属、ノカルジア症及びクリプトコックス症は、典型的には、日和見真菌感染症である。例えば、カンジダアルビカンスは、通常、片利共生体として消化管に見出されるが、免疫防御された患者においては全身性真菌感染症及び健康体においては局所感染症の主な原因となる。

真菌症の治療に現在有用なほとんどの薬剤は、効能が限られていたり耐容性が不十分である。従来技術であまり着目されなかった抗真菌剤について持続している煩わしい課題は、合成が容易で経済的であり且つ細菌に対して高活性及び幅広いスペクトル活性を有し、低毒性を育し、副作用がわずかである薬剤がないことである。

更に、既知の多くの薬剤は、殺真菌性よりむしろ静翼菌性を有するにすぎない。

静翼菌活性は真菌の増殖防御能であり、殺真菌（真菌毒性）活性は真菌の殺滅能である。表在性真菌症の治療に用いられる多くの薬剤は使用濃度において静翼菌あるいは殺真菌作用が実際にはなく、有益な効果はおそらく真菌に対する直接作用に無関係な要因によるものである。

既知の抗真菌剤には、イミダゾール類及びトリアゾール類のようなアゾール類、ナイスクチン及びアムホテリノンＢのようなポリエンマクロライド抗生物質及び角質溶解剤がある。イミダゾール類及びトリアゾール類としては、ケトコナゾール、フルコナゾール、イトラコナゾールミコナゾール、クロトリマゾール及びエコナゾールが挙げられる。例えば、Ｂａ５ｓ等の米国特許第４．７６７、７７７号。

Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎの米国特許第４．４０４．２１６号；欧州特許出願第０１８３４９４号。

２７、　ｐｐ、　８３２−８３５（＋９８５）参照。これらの薬剤は、表在性及び全身性感染症の双方を治療するために局所及び経口両製剤に使用されている。

ケトコナゾールが最も注目される。しかしながら、毒性（例えば、悪心、食欲不振、嘔吐）が経口剤形と［２ての使用を妨げ、催奇形性、酵素特異性、特異体質性胛前性症候群の課題と共にこの化合物の使用が奪われていることは致命的である。

アムホテリンンＢ及びナイスクチンは、ポリエンマクロライド抗生物質の中で最も注目される。局所用として、これらの薬剤は皮膚及び粘膜のカンシタ症に有効であるが、０癖には無効である。アムホテリシンＢは、全身性真菌感染症に最も有効である。しかしながら、この薬剤は水に可溶性でなく、静脈内又は膜内用（脳を髄液の中へ）コロイド状製剤として調製されなければならない。ナトリウム又はカリウム塩が、コロイドの沈降を防止するために添加されなければならない。この薬剤は、また筋肉内又は経口投与することができない。アムホテリシンＢはほとんど必ず起こる重篤な熱性反作用を含む多くの副作用がある。腎毒性、低カリウム血症、貫血、悪心、体靭少及び静脈炎も一般的な副作用である。アムホテリシンＢとフルコナゾール及びイトラコナゾールとの効能を比較するために、　Ｖａｎ’　ｔ　Ｗｏｕｔ等、　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ、　Ａｇｅｎｔ　＆　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ、　ｖｏｌ、　３３．　ｐｐ、@１４７−１５１（１９８９）参照。

サリチル酸及び安息香酸のような角質溶解剤は、主として、特に過角化場所の角層の落屑を促進することによりその効果を示す。真菌はケラチンが基質である角層に存在し、毒素誘発病巣にはない。従って、角化は病原性真菌を取り除き且つ薬剤の浸透を促進する。

他の局所用薬剤としては、ウンデシレン酸、ンクロビロクスオラミン、ハロプロギン及びトルナフテートが挙げられる。ウンデシレン酸（１０−ウンデセン酸）は、主として静翼菌活性を示す数種の脂肪酸とその塩の１種である。ンクロビロクスオラミン及びハロプロギンは、イミダゾール類と同様の活性スペクトルを有する。トルナフテートは、０癖感染症に極めて有効であるが、カンジダ種には無効である。

安息香酸の角質溶解作用の他に、農業分野において、ある種の置換安息香酸化合物、即ち、ある種のモノ菫換ジニトロ安息香酸化合物が殺真菌性を有することが報告されている。例えば、４−クロロ−３，５−ノニトロ安息香酸エステルは既知の殺真菌剤である（例えば、日本特許出願第５３１０１５２８号参照）が、特定の栽培植物に植物毒性があることが報告されている。Ｂｏｈｕｓ等の米国特許第４．８０６．１５１号参照。米国特許第４．、８０６．１５１号には、殺真菌性及び除草性を有する４−アミノ−３，５−ジニトロ安息香酸化合物が開示されており、このような化合物が栽培植物に植物毒性がないことを示唆している。これらのモノ置換ンニトロ安息香酸化合物は典型的には強力な殺真菌剤であるが、その毒性は動物あるいはヒトに使用する場合はるかに強い。

しかしながら、３．５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸の抗結核結節剤としての使用がＯ，Ｆ、Ｇｉｎｓｂｕｒｇ、　Ｖ、Ｚ、Ｇｕｒｅｖｉｃｈ等のロンア特許第１１６０６９６号に開示されていることは留！される。

従って、抗真菌性を有すると言われたあるいは言われるあまりに多い薬剤にかかわらず、はとんとが単に静翼菌性であり、真菌毒性ではない。殺真菌性であるもの、例えば、゛アムホテリンンＢの場合、その使用を制限する致命的な副作用があり、その化学的性質、例えば、溶解性が薬剤送達方法を制限する。日和見全身性真菌感染症は罹病率及び死亡率が高くその罹轡率が増加しているが、当該技術は依然として幅広い抗真菌スペクトル活性と共に２１１作用が限られ毒性が低い安全で効果的な水溶性の合成が簡便な真菌毒性薬剤を供給しなければならない。

発明の要約本発明は、幅広い抗真菌スペクトル活性と共に副作用が限られ毒性が低い安全て ′駒果的で貯蔵安定性で水溶性の合成が簡便な真菌毒性化合物を提供する。本発明の化合物は、ジニトロ安息香酸及びその誘導体を包含し、本発明はこれらの化合物を用いて真菌感染症を治療する方法を提供する。

１剪様においては、本発明は、真菌感染症の治療に有効な医薬組成物である。

本組成物は、下記で定義される式（１）の化合物及びその付加塩、水和物及び溶媒和物及び薬学的に許容しうる賦形剤からなる。式（Ｉ）の化合物の用量は、抗真菌有効量であり、単位用量約１０〜約４０００ｍｇが好ましい。式（１）の好ましい化合物は、３．５−ツバロー２．６−ジニトロ安息香酸及びその誘導体である。

医薬組成物の１形寸は、式（１）の化合物の脂溶性形態としての徐放性処方である。

もう１つの実施態様においては、本発明は、式（１）の化合物の抗真菌有効量を投与することを含む真菌感染症及び真菌性疾−〇治療方法を提供する。式（１）の化合物は、経口、筋肉内、静脈内又は局所投与することが好ましし）。式（Ｉ）の化合物の一日量は、治療される患者の体重１ｋｇ当たり約１〜約１００ｍｇである。

本発明の他の利点並びに特定の適応症、種々の組成、物理的及び化学的性質のより十分な評価は、添付の図面と共に用いられる下記の本発明の詳細な説明の試験で得られるであろう。

図面の簡単な説明本発明は、以後添付の図面（式中、同し記号は同じ元素を意味する）と関連させて述べられる図１は種々のジニトロ安息香酸化合物及び誘導体の分取用合成工程を例示する本発明は、真菌性疾豐の治療方法及びそのような治療に有効な医薬用、動物用及び農業用組成物を提供する。本方法は有効成分として特定のジニトロ安息香酸化合物及び誘導体を使用し、本組成物はこれを含む。これらの化合物及び誘導体は、特定の有利な性質：水溶性、低分子量、経済的な生産、貯蔵安定性及び低毒性を特徴とする。

本明細書で用いられる“生物活性”又は“生物学的に活性な”とは、静翼菌性又は殺真菌性のような化合物の生化学的性質を指すことを意味する。本明細書において及び当該技術において一般的に用いられる“薬学的に許容しうる付加塩”とは、非毒性付加塩を形成する強塩基と形成された塩を！味する。このような塩は、例えば、はぼ等モル量の遊離酸と所望の塩基を含む溶液を混合する慣用的な手順により得られ、要求される塩が集められる。

本発明の態様の１つにおいては、４下記一般式（Ｉ）の生物学的に活性な化合物の使用方法が包含される。

式中、Ｓは窒素、酸素、アルキル、アルケニル、アミノ酸、アルコール、エステル、ポリエステル、炭水化物又は正電荷基より選ばれたスペーサーであり、Ｌはヒト七キノ、アルキル、アルケニル、ベンジル、アルコール、エステル、ポリエステル、酸、炭水化物、ステロイド、脂質、ポリ”７−１正電荷基より選ばれたりガント又はビタミンであり、Ｒ１及びＲ１はハロゲン又はヒドロキシルであり：Ｒ，は水素又はアルキルである。式（Ｉ）の中で好ましい化合物は、Ｒ１及びＲ１が共にハロゲンであり、Ｒ５が水素又はアルキルであるものである。式（Ｉ）の化合物がジ！換ジニトロ安銀香酸誘導体であり、従来報告されている殺真菌性があるが動物毒性が極めて高いモノ置換ジニトロ安息香酸化合物とは構造的にも化学的にも生理的にも異なることは留意される。

式（Ｉ）の化合物は、静翼画側でなく殺真菌剤として作用する有効な抗真菌活性を有することが判明した。式（１）の化合物は水溶性であり、すべての薬剤送達系によって全身性感染症における使用を容易にすることができる。本化合物は、一般的に、下記のように、爆発性溶媒あるいは高価な試薬を含まない単−工捏合成を用いて製造するのに簡便且つ容易である。低分子量の式（１）の化合物は、脳を髄液・＼の血液脳関門のようなすべての組織を浸透する確率が高い。

式（Ｉ）の化合物は、医薬特性を高める低毒性を有することも判明した。式（１）の化合物は、ＬＤ、。試験で測定した場合、アムホテリノンＢ（即ち、１．Ｄ、。

は４　ｍｇ、’ｋｇである）より約６０倍低い毒性（例えば、２．４−ジブロモ −３，５−ジニトロ安息香酸のＬＤ、、、は２４０＋ｎｇ／ｋｇである）を有する。従って、本発明の化合物は、種々の臨床及び農業分野に適用でき、表在性及び深部真菌症の治療に特に有効である。

式（＋）の化合物は、Ｍｏ＋ｒｅｎｋｏ等のＺｈ、　Ｏｒｇ、　Ｋｈｉｉ　ｖｏｌ、　１４．　ｐｐ、　１６６９−１６７６（１９７８）からの翻訳に記載されている同様の合成を用いて調製される。例えば、式（１）の図１では共にＸとして示されるＲ、及びＲ１がハロゲン、例えば、臭素又は塩素であり、図１ではＺとヒて示されるＲ２が水素又はメチルである化合物は、図１に示されるスキームに従って調製される。詳細には、３．５−ジハロ−２，６−ノ二トロ安口香酸又は４−メチル−１３，５−ツバロー２．６−ノニトロ安り、香酸は、硫酸の存在下に３．５−ノニトコ安密、香酸又は４−メチル−３，５−９フ１口安叡香酸をニトロ化して調製される。メチル（又はエチル）、：Ｉ−ステルは、硫酸の存在下に３゜５−ジハロ出発物質を適切なアルコールを用いてエステル化し、次いで、硫酸の存在下に硝酸てニトロ化して調製される。ベンノルエステルを得るためには、適切な３．５−ジハロ−２，６−ジニトロ化合物を塩化チオニルと反応させてクロロ無水物を生成し、次いでベンノルアルコールでエステル化する。３− ヒドロキシ−５−ハロー２，６−ジニトロ化合物は、適切な３．５−ジハロ−２，６−ジニトロ化合物のアルカリ加水分解により生成させることができる。

下記実施例で詳述されるように、種々のリガンドが、スペーサーによって、式（１）の化合物に、特に、好ましい３．５−ジハロ−２，６−ジニトロ安息香酸化合物に結合される。本発明の殺真菌性化合物を薬理的に更に活性にした又はより容易に送達させるような適切なりガントが選ばれる。スペーサーは、ジニトロ安見香酸誘導体及びリガンド双方に結合することができるアミノ残基のような小さな基又はより大きな残基とすることができる。スペーサーとリガンドの組み合わせとして式（Ｉ）の化合物の酸残基に結合された特定の分子を確認してもよいか、実際にはたいてい反応基を含む結合分子が単にスペーサーとみなされることが同様に正しく、引き続きこれに別個のリガンドが結合される。例えば、実施例１３の生成物においては、Ｃ１に結合した６−アミノヘキサン酸残基は、窒素スペーサーに結合した６炭素酸リガンドとして確認される。しかしながら、また、６ −アミノヘキサン酸残基は、その末端にＣ０ＯＨ反応基を有する点で単にスペーサーとして確認されることも同様に適切である。同様（ご、実施例１６において、生成物のアリルアミン残基はスペーサー−−リガンドの組み合わせとしであるいは単にスペーサーとして見られる。アリルアミン残基をスペーサー−リガンドの組み合わせとしで見る場合、生成物は分子のアリルアミン−及び芳香族部分双方において抗真菌活性を有する脂溶性薬剤である。スペーサー単独と（、て見る場合、アリルアミン残基の末端二重結合はりガントの手近な受容体である。

更にす様においては、本発明は、例えばカンツタ及びトリコフィトン、ミクロスポルム又はエピデルモフィトンのような皮膚糸状菌によって引き起こされる局所真菌感染症又はカンシタアルビカンスによって引き起こされる粘膜感染症（例えば、讐ロ癒ロ腔カンツタ症及び膣カンシタ症）を治療する真菌感染症の制御方法も含んでいる。式（１）の化合物は、例えば、カンツタアルビカンス、クリプトコｒ　′Ｔ：Ｚ、不才フすルマ２ス、アスベルギルスフラブス、アスベルギルヌフミガーソス、コクノン第１′デス、バうニクノノオイデス、ヒストプラスマ又はプラストミセスによって引き起、−さＴしる全身性轟菌哲染症の治療にも有効である。式（１）の化合物は、エイズ、Ｃ＼１ｖ及びインフルエンザのようなウィルス性感染症に罹っている生者、化学療法又は放射線療法を受けている癌患者、抗拒絶反応剤を受けている移植密者及乙＼毒性化学薬品、金属及び放射線照射を受けたｔ者のような免疫防御された生者において真菌感染症を治療するのに特に有効である。

式（Ｉ）の化合物は、７１′コハクテリウムレブレ又はハンセン菌によって引き起こされるハシセン病（Ｒ）に対しても有効である。

式（１）の化合物は、例えば、全身性真菌性疾豐に用いた場合、既知の抗真菌剤Ｊ比較して副作用か少なく毒性が低い医薬組成物において活性化合物として有効である。このような組成物には生理的に許容しうる賦形剤又は担体が含まれる。

これらの医薬組成物は、本発明のもう１つの態様を構成する。

本発明者等は、適切な培地中臭体的な微生物の発育が生じない試験化合物の濃度である最小阻止濃度（Ｒ１，Ｃ，）をめることにより化合物の試験管内抗真菌活性を評価した。カンツタアルビカンスの！ｔ１．ｃ、は１．５μｇ、／ｍｌであることが判明した。またアスベルギルスフミガーツス及びトリコフィトン種を試験して同様の結果であった。このような試験で用いられる他の微生物としては、ミクロスポルム種、エビデルモフィトンフロクコスム、コクシジオイデスイミチス及びトルロブノスゲラプラタが挙げられる。

式（Ｉ）の使用化合物の相対的試験管内効能を表１に示す。これらの相対的効能数は、命名された化合物１５μｇを含む重複寒天プレート上にカンシタアルビカンス１００−１５０細胞をプレーティンク七、各化合物の相対的発育阻止をめることにより得られたつ表１化合物　相対的試験管内効能３．５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安−１香酸　１００３．５−ジクロロ−２，６−ノニトロ安り香酸　１００２．４−ジクロロ−３，５−ノニトロ安息香酸　１０メチル３．５−ジブロモ−２，６−ノニトロ安慝香酸　４更に化合物の抗真菌活性の試験管内評価を２つの独立（た試験実験で行った。

１実験では、９真菌株（カン／り種、クリプトコノクス不オフォルマンス、アスベルギルヌフミガーツス）をＨＲ／Ｍｏｐｓブイヨン及びサブローデキストロースブ・アミン中で試験した場合、３．５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安苧、香酸の真菌株における最小阻止濃度（μｇ／ｍｌ）が１．５６〜６．３であることがわかった。

第２実験では、３．５−ジクロロ−２，６−ジ二トロ安息香酸とアムホテリノンＢ、抗真菌剤の最小阻止濃度（μｇ／ｍｌ）を比較した。標準寒天希釈法で単一の抗真菌剤を含むイソセンノテスト寒天上に菌株をプレートした。試験は広範囲の真菌に対して３，５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安慝香酸の幅広い特異性を示したが、細菌に対し、では示さず、！／、１．Ｃ，は４−３１μｇ／ｍｌであった。化合物はアムホテリン７Ｂより低い真菌阻止を示したが、寒天−プレート試験条件をアムホテリシンＢ活性を示すために最適化したことに留意することは重要である。アムホテリンンＢは水に不溶であるが、試験化合物は水に可溶である。このままで、アムホテリノンＢを寒天で試験すると、その活性は生体内より高いと思われる。反対に、水溶性試験化合物は、感染部位に移動するために遊離するので、生体内で高い活性を示すことは当然のことである。

更に、独立した試験実験は、化合物が種々のブイヨン培地中のＣアルビカンスＣ３１６に対して５０％マウス血清の存在下でさえも安定で活性のままであることを示し、生体内有用性を示唆した。更に、真菌生存度を’　Ｄ（］　］ｐ−アミノ安艷香の取込みにより測定した場合、ラット肺から取り出し短期培養でインキュベートしたニューモンスチスカリニ真菌に対して、化合物は活性（ＩＣ１，＝１７μｇ／ｍｌ）であった。これに比べて、Ｐ、カリニ真菌感染症を治療するために現在広く用いられている薬剤、ペンタミジンのＩＣ，、は２７１ｇ／ｍｌであった。

化合物の生体内評価は、例えば、カンシタアルビカンス又はアスペルギルスフラブスの菌株を接種するマウスに腹腔内又は静脈内注射あるいは経口投与により一連の用量レベルで行われる。活性は、未処理グループのマウスの死滅後、処理グループのマウスの生存に基づく。化合物が感染の致死作用に対して５０％防御（ＰＤ、。）を与える用量レベルが書き留められる。

本発明の薬理的に活性な化合物は、慣用的な製薬方法に従って処理して患者、例えば、人間のような哺乳動物に投与する治療用薬剤を製造することができる。

例えば、式（Ｉ）の化合物は、慣用の賦形剤、例えば、活性化合物との反応が有害でない経Ｉｆ！（例えば、経口）、非経口又は局所適用に適切な薬学的に許容しうる担体物質との混合物として用いられる。

適切な薬学的に許容しうる担体としては、水、塩溶液、アルコール、アラビアゴム、植物油（例えば、コーン油、綿実油、落花生油、オリーブ油、ヤシ油）、坤、肝油、ポリソルベート８０のような油状エステル、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭水化物（例えば１、ラクトース、アミロース又はデンプン）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、脂肪酸モノグリセリド及びジグリセリド、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられるが、これらに限定されない。

医薬製剤は、滅菌され、場合によっては、補助物質１例えば、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響する塩、バッファー、着色剤、香味剤及び／又は１種以上の他の活性化合物、例えば、他の抗真菌剤、ビタミン等と混合される。

非経口適用の場合、注射用無菌液剤、好まし、くは水溶液が特に適切であり、液剤を血液と等張にするために他の物質、例えば、十分量の塩又はグルコースを含めてもよい１．また、懸濁液剤、乳剤又は坐薬のような植込剤として投与することもできる。アンプル剤は便利な単位投薬である。

経腸適用の場合、錠剤、糖衣剤、液剤、点滴剤、坐薬、ロゼンジ剤、散剤又はカプセル剤が特に適切である。甘味賦形剤が所望される場合には、シロップ、エリキンル等が用いられる。

持続あるいは特定放出組成物、例えば、リポソーム又は差をっけて崩壊しうる剤皮、例えば、マイクロカプセル化、複数剤皮等を施すことにより活性化合物が保護されているものも処方される。特に、脂溶性剤形においては、活性化合物が徐々に放出され、組織及び細胞膜を浸透することができる。

局所適用の場合、局所適用と適合し且つ動的粘度が好ましくは水より大きい担体を含む適切な非噴射性の粘性半固形又は固形を用いることができる。適切な処方則と（−５では、液剤、懸７１！液剤、乳剤、クリーム剤、軟膏、散剤、リニメント剤、膏薬、エーロゾル剤、経皮貼剤等を場合によっては滅菌したり補助物質、例えば、保存剤、安定剤、乳化剤、湿潤剤等と混合するものが挙げられるが、これらに限定されない。また、有効成分を好ましくは固形又は液状の不活性担体物質と組み合わせてビン型絞り出し容器あるいは加圧された揮発性の通常ガス状の噴射剤と混合した状管で充填されている噴射性エーロゾル製剤が局所適用に適切である。

直腸投与の場合、化合物をカカオ脂又は他のトリグリセリドのような生薬基剤を含む医薬組成物に形成させる。貯蔵寿命を延長するために、組成物がアスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシアニソール又はヒドロキノンのような抗酸化剤を含むことが有利である。

本発明の医薬組成物は、経口、局所及び静脈内投与が好ましい。通常、本発明の化合物は、薬学的に許容しうる担体に約１ｍｇ〜約４ｇ含む単位剤形で調剤される。本発明による化合物の一日量は、通常約１〜約１００ｍｇ／ｋｇ　、好まシ、＜は経口の場合約１〜約１００ｍｇ／ｋｇ　、静脈内の場合約１〜約５０ｍｇ／ｋｇである。

個々の場合の活性化合物の好ましい実際の量は、使用される個々の化合物の効能、処方される具体的な組成物、適用方法並びに治療される具体的な位置及び細菌により変動することは理解されるであろう。例えば、具体的な患者に対する個々の投与量は、年令、体重、全身状態、性別、食事、投与時間と方法、排出速度並びに併用薬剤及び治療が適用される具体的な疾患の重篤度に左右される。投与される宿主に対する用量は、従来の考察を用いて、例えば、適当な慣用の薬理的プロトコールによって本化合物と既知の化合物の活性の差異の習慣的な比較により決定することができる。

またもう１つの態様においては、本発明の化合物は、動物においてアスペルギルス症、カンジダ症、クロモミコーンス、コクシジオイデス症、クリプトコックス症、エントモフトロミコーシス、家畜流行性リンパ管炎、ジオトリクム症、ヒストブラスマ症、毛菌症、足薗腫、北アメリカ分芽菌症、オオミコーシス、ペンリミコーシス、ベニ／リン症、リノスポリジウム症及びスブロトリクム症のような真菌性疾患を治療する動物用組成物として有利に用いられる。通常、本発明の化合物は、適切な担体に２ｍｇ〜約８ｇを含む単位剤形として調剤される。本発明の化合物は家畜用の飼料に含められて、該飼料の通常の消費により本発明の化合物の少なくとも１種を動物体重１ｋｇ当たり１口約ｌ〜約２００ｍｇ与えることが好ましいうつ／又はウマのような大きな動物の場合、−日量的１０−約４０ｇが適当である。

また更に態様においては、本発明の化合物は、さび病、べと病及びかびのような種々の植物病原性真菌を治療ｙは予防するために、農業用組成物、例えば、植物及び種子用組成物と（７て用いられることも有利である。通常、本発明の化合物は、散粉末、顆粒、種子粉衣、水溶液、分散液又はエマルジョン、ディップ、散布液、エーロゾル又はくん煙として施される。組成物を、分散性粉末、顆粒も（７くは細粒又は使用前に希釈する濃縮液として供給してもよい。このような組成物は、農業及び園芸において既知であり許容しつるような慣用の担体、希釈剤又は補助剤を含めてもよく、慣用的な方法に従って製造される。組成物は、典型的には、有効成分０．　ＯＩ−１０ｗｔ％、好ましべは０．１〜１ｗｔ％を含む。

組成物は、また他の有効成分、例えば、除草力又は殺虫力を有する化合物又は更に殺真菌剤を混合してもよい。化合物及び組成物は多くの方法で施され、例えば、植物の茎葉、幹、枝、種子もしくは根又は土壌もシ、＜は他の栽培媒体に直接施され、病気を根絶するばかりでなく、植物や種子を予防的に侵襲から保護するために用いてもよい。畑に使用する場合、有効成分の適切な施用薬量は約１００〜１０．０００ｇ／ニーカーである。

下記実施例は、単に具体的な説明であり、いかなる場合でもこれらに限定されないものとして解釈されるべきである。下記実施例において、温度はすべて℃として示される。化合物の純度は、５ｉｌｕｆｏｌ　ＵＶ−２５４プレート又はシリカゲル６０Ｆ−２５４プレートによる薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でチェックした。

丁”ＬＣの溶離剤と（、て下記系を用いた：　（１）クロロホルム；　（２）クロロホルム、ジエチルエーテル及び酢酸の２０：２０：１混合液；　（３）２− ブタノール及び３％アンモニアの５．２混合液：　（４）クロロホルム及び石油エーテルの１１混合Ｇ：　（５）へブタン、メタノール及び酢酸エチルの５０：２５：２５混合液：　（６）クロロホルム、メタノール及び酢酸の９５＋４：ｌ混合液；（７）ヘプタ：／、クロロホルム及びメタノールの５０・４０：１０混合液；及び（８）メタノール。

ＲＩ゛は使用した具体的なＴＬＣ溶離剤系の限値てあり、例えば、Ｒ１２は上記系２溶離剤のＲ，である。

実施例１３．５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸の合成１５０ｍ１の硝酸（ａ度＝１．５０）に１５０ｇの３，５−ジブロモ安曹香酸（図１のＩ）、次に４００ｍ１の硫酸（濃度＝１．８３）をｆｉ含液の温度が６０℃以上に上昇しないように攪拌しながら徐々に加える。次いで、この混合液を９０１００℃まで注意して加熱し、この温度で６−１０時間攪拌する。反応混合液からモノニトロ化合物（Ｒ，”　−０，６６）が消失したときこの処理を止めるっニトロ化の終わりに、反応混合液を冷却し、沈澱をろ別し、硫酸（濃度＝１．８３）で洗浄し、１５０ｇの砕いた氷と混合し、再びろ過し、水中に硫酸イオンがなくなるまで水洗する。１８４ｇ（９６％）のジブロモジニトロ化合物（４）が得られる。これは系２にクロマトグラフィー的に均一である；ｕｐ、　２１４−２１５℃。ＰＭＲスペクトル（アセトン中）、δ、　ｐｐｍ：　８．４４（ｓ、　ＩＨ，ＡｒＨ ’）。Ｎ％の実測値７．８６．８．２１゜Ｃ＋ＨｔＮｔＢｒｇＯｓ、計算値Ｎ％　＝７．５７゜実施例２：３．５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸の合成１５０ｍ１の硝酸（濃度＝１．５０）にＩＯ２，３ｇの３．５−ジクロロ安息香酸（２）、次に４００ｍ１の硫酸（＃炭＝１．８３）を混合液の温度が６０℃以上に上昇しないように攪拌しながら徐々に加える。次いで、この混合液を７７℃ まで注意して加熱し、この温度で６−１Ｏ時間攪拌する。反応混合液からモノニトロ化合物（Ｒ，’　＝０．６６）が消失したときこの処理を止める。ニトロ化の終わりに、反応混合液を冷却し、沈澱をろ別し、硫酸（濃度＝１．８３）で洗浄し、１５０ｇの砕いた氷と混合し、再びろ過し、水中に硫酸イオンがなくなるまで水洗する。

１４４．５ｇ（９６％）のジクロロジニトロ化合物（５）が得られる。これは系２にクロマトグラフィー的に均一である；ＩＬｐ、２０５℃。ＰＭＲスペクトル（アセトン中）、δ、　ｐｐｍ＋　８．４４（Ｓ、　ＩＨ，ＡｒＨ’）。Ｎ％の実測値９．６４．１０．１５Ｘ；　Ｃ，Ｈ２ＣＩＩＮ！０１；計算値Ｎ％　＝　９．９６゜実施例３：ベンジル３．５−ジブロモ−２，６−シニトロペンゾエートの合成３．６ｇの３．５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸（４）と２０ｍ１の塩化チオニルの混合液を３時間貴沸する。過剰量の塩化チオニルを減圧蒸留する。得られた化合物の塩化物（９）に１０ｎｌのベンジルアルコールを加え、この混合液を４０℃で３−４時間攪拌する。次いで、ベンジルアルコールを減圧蒸留（Ｐ、、、　＝２−４　ｏｎ　Ｈｇ）　Ｌ、残留物を３０ｍ１のクロロホルムに溶解する。この溶液を水及び１％重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、塩化カルシウムで乾燥する。クロロホルムを減圧蒸留し、残留物をベンゼンで結晶化する。１．６　ｇ収量（３７％）のベンジルエステル（１１）が得られる：ｔＬｐ、　１９（１−１９２℃。ＰＭＲスペクトル（アセトン中）。

δ、　ｐｐｍ：　８．６４（ｓ、　ＩＨ，ＡｒＨ’）、　７．４４（ｓ、　５Ｈ，Ｐｈ）、　５．４０（ｓ、　２Ｈ，Ｃ００ＣＨｔＰｈ）。

■■ 値Ｘ：　Ｂｒ　３５．４６．３５．５７＋　Ｎ　６．１７．６．４６−　ＣＩｔＨＪｒｔＮ＋Ｏｓ；計算値Ｘ：　Ｏｒ　３４．７３：Ｎ６０８゜実施例４　メチル３．５−ジブロモ−２，６−シニトロペンゾエートの合成８０ｍ１のメタノールとｌｏｍｌの硫酸（ｄ＝１．８３）の混合液中８．５ｇ試料の３．５−ジブロモ安息香酸（１）を５−６時間煮沸する。冷却後、沈澱をろ別する。ろ液を減圧下半分に蒸発し、残留物を水で希釈し、沈澱をろ別する。これを前の部分に加え、５０ｍ１の水と攪拌する。得られた混合液に１０％重炭酸ナトリウム溶液をｐＨ７，５まで加える。エステルをろ別し、水洗し、風乾し、次に、真空デシケータ−中塩化カルシウムで乾燥する。７．９ｇ収量（８９％）の化合物（１４）が得られた。生成物は、系１にクロマトグラフィー的に均一であった＋ｌ１１．６２−６３℃。

８４ｍ１の硝酸（濃度＝１．５０）に攪拌しながら２２ｇのメチル３．５−ジブロモベンゾエート（１４）を加え、次に１６０ｍ１の硫酸（濃度＝１．８３）を徐々に加える。ここで反応混合液の温度を４０℃より高くしてはならない。硫酸を加えたとき、反応混合液を９Ｏ−１００℃まで徐々に加熱し、この温度で１５ −２０時間保持する。ニトロ化の終わりは、モノニトロ化合物（Ｒ１’　＝０．５３）が反応混合液から消失することから判断する。冷却後、沈澱をろ別し、硫酸（濃度＝１．８３）を洗浄し、氷水と混合し、ろ過し、水中に硫酸イオンがなくなるまで水洗する。系２にクロマトグラフィー的に均一な２７．９ｇ収量（９７％）の化合物（１５）が得られる＋ｍｐ　１６Ｂ−１７０℃（四塩化炭素から）。

実施例５：３−ブロモ−２，６−シニトロー５−ヒドロキシ安息香酸の合成６００ｍ１の９５％水酸化ナトリウム中６０ｇの３．５−ジブロモ−２，６−）ニトロ安息香酸（４）の溶液を４５−５０℃で３０時間加略する。反応の終わりは、出発化合物（Ｒ，’　＝０．３５）が消失することがら判断する。次いで、反応混合液を減圧（Ｐ、。＝　２０−３０　ｒｒｒｍ　Ｈｇ）下で１５０−２００ｍｌノ容量まで蒸発し、１２０ｍ１の塩酸（濃度＝１．　ｌ　９）を攪拌及び冷却しながら加える。酸が油状物として分離するとまもなく結晶化が始まる。沈澱をろ別し、１０％塩酸、更に石油エーテルで洗浄し、乾燥する。４５ｇ収量（９０％）の化合物（７ＸＸ＝Ｂｒ）が得られる；　ｍｐ　１７４−１７５℃（ベンゼンから）。実測値％；　Ｂｒ　２６．７７、２６．４０；　Ｎ　９．１９゜９．４Ｌ　ＣｒＨ３ＢｒＮｚＯｓ：計算値Ｘ；　Ｂｒ　２６．０２；　Ｎ　９．１２゜実施例６・３．５−ジブロモ−２，６−シニトロー４−メチル安息香酸の合成５０ｍ１の硝酸（濃度＝１．５０）に３４ｇの３，６−ジプロモー４−トルイル酸（３）、次に１４８ｍ１の硫酸（濃度＝１．８３）を温度が４０℃以上に上昇しないように攪拌しながら徐々に加える。この混合液を８０−９０℃まで徐々に加熱し、この温度で７−８時間保持する。反応の終わりはモノニトロ化合物（Ｒ，’　＝０．５３）が消失することから判断する。冷却後、沈澱をろ別し、硫酸（濃度＝１．８３）で洗浄し、氷水と混合し、再びろ過し、水中に硫酸イオンがなくなるまで水洗する。３６ｇ収量（８０％）の化合物（６）が得られる。分解ｐｔ、　２２９−２３１℃（７０％アルコールから）。実測値Ｘ：　Ｂｒ　４０．２６．４０，２８；　Ｎ　６．９８．７．１９゜ＣｔＨｔＢｈＮｔＯ＋：計算値％：　Ｂｒ　４１．６６；　Ｎ　７．２９゜実施例７・メチル３．５−ジブロモ−２，６−シニトロトルエンの合成３ｇの３，５−ジブロモ−２，６−シニトロー４−トルエート（６）と１５ｍ１の塩化チオニルの混合液を出発生成物が完全に溶解するまで３時間煮沸する。過剰量の塩化チオニルを減圧蒸留し、残留物に３０ｍ１のメタノールを加え、この混合液を２時間煮沸する。冷却後、沈澱をろ別し、エーテルで洗浄する。系１にクロマトグラフィー的に均一な２．４ｇ収量（７７％）のメチルエステル（１３）が得られた；　ｍｐ　１９９−２０１’ Ｃ（メタノールから）。

実施ＰＩ８・ベンジル３．５−ジブロモ−２，６−ジ二トロー４−メチルベンゾエートの合成２０ｇの３．５−ジブロモ−２，６−シニトロー４−メチル安息香酸（６）と７０ｍ１の塩化チオニルの混合液を出発化合物が完全に溶解するまで５−８ｖＦ間員沸する。過剰量の塩化チオニルを減圧蒸留し、残留物に８０ｒｎＩのベンジルアルコールを加え、この混合液を４０°Ｃて２−３時間加熱する。冷却後、沈澱をろ別し、石油エーテルで洗浄する。系４にクロマトグラフィー的に均一な１７ｇ収量（６９％）のベンジルエステル（１２）が得られる；ｍｐ　１４７−１５０’Ｃ（ベンゼンから）。

実測値％：　Ｂｒ　３４．２７．３４．１０；　Ｎ　６．００．６゜０９６　ＣｎＨ＋ｏＢｒｔＮｚＯｉ；計算値％、Ｂｒ３３、７＋、　；　Ｎ　５．９０゜実施例９：試験管内殺真菌性試験式（１）の化合物、アムホテリシンＢ及びケトコナゾールの抗真菌活性を試験した。

本試験においてブレーティングのために用いられるｌ　Ｏｗ／ｗ％麦芽エキス、２％寒天溶液は、ｌｏｏｇの麦芽エキス、２０ｇの寒天及び１リツトルの蒸留脱イオン水（１）ＤＷ）中水酸化ナトリウム（約０．１　ｇ）のペレットを混合することにより調製した。この溶液をオートクレーブにかけて滅菌し、次いで、プレートに注ぎ入れた。Ｋｒｅｇｅｒ−ｖａｎ　Ｒｉｊ、　Ｔｈａ　Ｙｅａｓｔ　：　Ａ　Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　５ｔｕｄｙ、　Ｅｌｓｅｖｉｅｒ。

Ａｉ＋ｓｔｅｒｄａｍ、　ｐ、１０８２参照。

酵母−麦芽（ＹＭ）ブイヨンは、１リツトルのＤＤＷ中に３ｇの酵母エキス、３ｇの麦芽エキス、５ｇのペプトン及び１０ｇのグルコースを含有した。この溶液を無機化合物（例えば、塩酸又は水酸化ナトリウム）でｐＨ７，２にし、次いで、オートクレーブにかけて滅菌した。

試験されるべき薬剤の原液をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）とｐＨ７，２の０．０５Ｍリン酸塩バッファーの混合液中で製造し、４：６のＤＭＥ：バッファー比中で混合した。１ｍｇ／ｍｌ溶液の試験溶液を調製した。

２つの対照溶液を調製した。１つは上記リン酸塩バッファーであり、もう１つは上記４・６比のＤＭＦとバッファーの混合液とした。

すべての薬剤と対照溶液を０．２μフイルターでろ過して滅菌した。

３．６ｍｌのカンシタアルビカンス（Ａｉｏｏ　二０．１１−０．１９）＠濁液を各々０．４ｍｌの３．５−フクロロー２．６−ジニトロ安息香酸、アムホテリシンＢ及びケトコナゾール（ｌ　ｍｇ／ｍｌＸ最終濃度０．１　ｍｇ／ｍｌ）と混合し、２００ｒｐｍ、３０℃で８０分振盪した。（カンツタアルビカンスの発育特徴に対して、例えば、Ｉｔ　Ｇ、　５ｈｅｐｈｅｒｄ等、　Ｊ、　Ｇｅｎ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、、ｖｏｌ、９３．　ｐｐ、３６１−３７０（１９７６）；　Ｍ−Ｇ、５ｈｅｐｈａｒｄ等、Ｃａ氏AＪ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、、ｖｏｌ、２６．　ｐｐ、２ｌ−２６（１９８０）；　Ｖｉｄｏｔｔｏ等、　Ｍｙｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉａ、ｖｏｌA１００．　ｐｐ。

７−１５（１９８７）参照）。一連の寒天プレートに上記混合液を接種し、ＹＭブイヨンで１０００倍に希釈した１５０μｍ／プレートをブレーティングし、次いで、各プレートを３０℃で４８時間インキュベートした。各プレートのコロニー数を計数し表２に示した。

表２コロニー／プレート数としての殺真菌性試験グループ＼ブレー）Ｎｏ、　１　２　３　４　５　６　７　８　９対照　９３　６３　５６　１０２　１０９　１１０　１１５　１１８　ｌｌｌ３．５−ジクロロ−２，６−２２４３３１２８３３２０１９２５ジニトロ安息香酸アムホテリシン　５０　１５　９　５６　５１　４８　５５　６５　６４ケトコナゾール８２　３９　３７　９４　１０３　７８　１２０　１２２　９５これらのデータは、式（１）の試験化合物が真菌を殺滅するのに、即ち、殺真菌活性がアムホテリシンＢの約２倍及びケトコナゾールの約４倍効果があることを示している。

実施例１Ｏ：系列希釈アッセイ３．５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸及びナイスクチンの系列希釈アッセイをカンツタアルビカンス、トリコフィトン又はアスペルギルスについて行った。

９＋ｎ１（ＩＸ１０’細胞）の各酵母希釈懸濁液を１５ｍ１の遠心管中１ｍｌの試験されるべき薬剤の種々の系列希釈液に加えた。薬剤の最終濃度は、ｏ、　ｉ　−ｏ、　ｏ　ｏ　ｏ　＋ｍｇ／ｍｌとした。薬剤溶液の代わりにＤＤＷを用いて、２本の対照管も調製した。

これらの管に蓋をし、３０°で２４時間２００　ｒｐｍで振盪しながらインキュベートした。比濁計を用いて６００ｎｍにおける光学濃度を測定することにより、真菌の増殖を評価した。３．５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸及びナイスクチンの双方が最終濃度１．５ＨｇＡｐｌにおいてカンジダアルビカンス、トリコフィトン又はアスペルギルスの各真菌増殖を阻止した。しかしながら、ナイスクチンが試験した本発明の化合物より毒性が著しく高いことは留意される。

実施例１１　毒性試験周知の方法を用いて平均致死量（ＬＤ、。）をめることにより、マウスにおける３、５−ジブ０モ−２，６−ジニトロ安密、香酸の静脈内急性毒性を評価する。

マウスに標準実験食餌を８−１０週間与える。各性別を有する５匹のマウスに１用量の３，５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸を静脈内投与する。マウスを１４日間観察し、死亡した数を書き留める。ＬＤＩ。値は約２４０ｍｇ／ｋｇであることがめられる。

式（１）の化合物は以前に合成されているが、ヒトのような動物使用に適切な効能ある安全な抗真菌剤としての使用はこれまで知られていない。

実施例１２：３，５−ジクロｐ−２，６−ジニトロ安息香酸のクロロ無水物の合成Ｃ０ＯＨ０＝Ｃ−Ｃ１丈絶倒２のように調製した４ｇの３．５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸と２０の１の塩化チオニルの混合液を３時間煮沸し、た。過剰量の塩化チオニルを減圧下てぎ発すると、３．５−ジクロロ−２，６−′）二１・口安啓香酸のクロロ無水物が残留し２、これを＃＊製せずに数例の下記実施例の化合物の合成に用いた。クロロ無水物は、次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク　１７７８．１２０７（−ＣＯＣＩ）；　１５５０（ＮＯ）；　７３３（Ｃ−ＣＩ）を有した。

実施例１３　アミノ酸スベーづ−を有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸の合成Ｏｌ ’　９−ＣＬ１．２ｍｌの無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中約１−の実施例１２のクロロ無水生成物を１４４＋ｎｇの６−アミノヘキサン酸（１，１ｔ！ｌ）　、更に４１７　μｌ（３０３ｎｇ。

３、ｆ）＋＋Ｍ）のトリエチルアミンと混合した。この混合液を３７℃で一晩攪拌した。

減圧下でＴＨＦを蒸発した後、残留物を水中ｌＯ％重炭酸ナトリウム溶液（こ溶解した。溶解しない物質をろ過で取り除き、上澄み液を３ＭＨＣ１（最終ｐＨ＝１．ｏ）で再び沈澱した。生成物を５０％メタノールで再結晶すると、収率４７％（１８８ａ＋ｇ）を得た。生成物は、補正なしの融点２２７±１’Ｃ及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク：　１６８５（ＣＯ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）、　１５５５（Ｎｏ）を有した。Ｒ＋’は０．８５であった。Ｒ＋’は０．３５であった。

本実施例の生成物は、２つの方法で考えることができる。まず、Ｃ０ＯＨ反応基でリガンドを受容することができるスペーサーを有する中間体芳香族誘導体である。また、これは、これ自体でｒ＼Ｔスペーサーとアルキルリガンドを有する本発明の範囲内で有効な化合物として作用することができる。

実施例１４：アルコールスペーサーを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成Ｅ′、ｊｌＯ鴫の実施例１２の２０口無水生成物をｌｏｍｌの無水１−ＨＦに溶解し、２．４２ｇ（２ｎ蘭）の］’ＲＩＳｉ（ビトロキンメチル）アミノメタン）、更に１、３９ｍ１（１，ＯＩ　ｇ、ｌ　Ｏｉｌ、ｌ）のトリエチルアミンと混合した。この反応混合液を３７℃で一晩（〜１６時間）Ｉ！拌した。次いて、この反応混合液をろ過した。

フィルター上の結晶性、Ｚｔ澱を１用量のＴＨＦで２回、５ｍｌの蒸留水で５回すすいで過剰量のＴＲ，ＩＳを除去した。生成物を精製せずに用いた。収率は７８％（３，０３ｇ）であった。生成物は、補正なしの融り２３２±１℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク　３３００．　１０５０（ＯＨ）、１６６０（ＣＯＮＨ）、１５５５（Ｎｏ）ををした。ＲＩ′はＯ，Ｉ　Ｏであった。Ｒ２′は０．３５てあった。

実施例１３の生成物のように、実施例１４の生成物も２つの方法で考えることができる。ヒドロキフル基でリガンドを受容することができるスペーサーを有する芳香族誘導体及びスペーサー（Ｎ）−１Ｊガント（分枝鎖アルコール）の組み合わせを有する芳香族誘導体の双方である。

実施例１５　ジアミノポリエステルスペーサーを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成１２ｍ１の無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中約ＩＯ−の実施例１２のクロロ無水生成物を２．１２ｍｌ　（２，０４ｇ、ｌ　ＯｍｔＪ）　（７）４．９−’ ）オキサ−ｉ、ｉ２−ドデカンシアミン、更に１．５２ｍｌ　（１，０１ｇ、１０＋ＩＩＭ）のトリエチルアミンと混合した。この混合液を３７℃で一晩攪拌した。減圧下でＴＨＦを蒸発した後、残留物を９５％エタノールで結晶化した。収率は８８％（３，７８ｇ）であった。生成物は、補正なしの融へ２０９土１’Ｃ及び次＋７）　ＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク　３２７２．　１１１１（ＮＨ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）、１５５６（ＮＯ）を有しｔコ。Ｒ，’　ハ０．８５であった。Ｒ，ｉは０．３５であツタ。

実施例１６　アミノアルケン残基を有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成６用量の無１ｃＴＨＦ中約５ｍＭの実施例工２のクロロ無水生成物を３７５μｌ（２８５，５ｍｇ、、５ｎ’ｊ）　（Ｑ７’）ルア　ミン、更１：６９６μｌ（５０５ｍｇ、５ｍ）　ノトリエチルアミンと混合した。この混合液を３７℃で２時間攪拌した。黄色沈澱をろ過し、１用量のＴＨＦで２回、１用量のメタノールで２回すすいだ後、室温で一晩暗所で減圧乾燥した。収率は８４％（１，３６５ｇ）であった。生成物は、補正なしの融点１４６＋１　℃及び次（Ｄ　ＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク：　３２８１．３０８０（ＮＨ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）。

１５５６（ＮＯ）を存した。Ｒ，’は０．２０であった。Ｒ，Ｉはｏ、ａｏであツタ。

実施例１６の生成物は、これ自体本発明の範囲内の機能分子である。斐に、この分子は、アリルアミニルリガンドと芳香族部分の双方で殺真菌活性を与える。

しかしながら、更に、この分子は単にスペーサーを育するものとしても確認され、これにリガンドが結合されてもよい。このような第２段階付加を下記実施例１７に示す。

実施例１７．アミノアルケンスペーサーとポリマーリガンドを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成３種のモノマー（５０ｍｇの実施例１６の生成物、８５０ｍｇのアクリルアミド及び１００ｍｇのアリルアミン（１３］μｌ））を１０ｍ１のエタノール中でｌｏｍｇの２．２′　−アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）と７０°Ｃで一晩攪拌してアミンスペーサーを介して置換安息香酸に結合されるポリマーリガンドを生成した。得られた等濁液をろ過し、ろ液を減圧下で蒸発した。残留物をヘプタン：メタノール。

酢酸エチル（５０：２５・２５）溶媒の分取用薄層クロマトグラフィーできれいにした。収率は２３％（２３０ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点１４０±１℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク　３２８１．６００（ＮＨ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）、　１５６０（ＮＯ）を有した。ヘプタン　メタノール・酢酸エチル（５０：２５・２５）中のＲ，は０、４０であった。Ｒ＋’は０．３０であった。

実施例１８・炭水化物リガンドを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成０、１ｍ１ｉｉ　（３３，６ｍｇ）の６−アミノへキシル−Ｎ−アセチル−β− ｄ−チオグルコサミニドと約０．２蘭の実施例１２のクロロ無水生成物とを１ｍｌの無水ＴＨＦと２８μＩ（２７，８ｍｇ、　０．２　ｍＭ）のトリエチルアミン中で混合した。この反応混合液を３７℃で一晩攪拌した。この反応混合液に１ｍｌのＯ，１ＭＨＣｌを加えた。添加した塩素イオンのいくらかがトリエチルアミンの揮発性塩化物塩を生成し、これを減圧下でＴＨＦと共に蒸発した。クロロ無水反応物を加水分解すると３．５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸を生成し、酸性反応条件下で沈澱した。沈澱した過剰量の３．５−ジクロロ−２，６ −ジニトロ安息香酸を遠心分離で除去し、ろ液を凍結乾燥した。黄色残留物をエタノールで結晶化した。収率は５８．６％（３５，４ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点２３０±１℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク：　３３００．１１１０（０）１）、　２９３０（ＣＯ）、　１６６０（Ｃｏ聞）、１５５５（ＮＯ）を有した。Ｒｒ’は０．３５であった。Ｒ，Ｉは０．６５であった。

実施例１９：炭水化物リガンドを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成０．１酬（２９，５＋ｎｇ）の６−アミノへキシル−１−チオーβ−ｄ−ガラクトピラノ／ドと約０．２ｎＭの実施例１２のクロロ無水生成物とを１ｍｌの無水ＴＨＦと２８μｌのトリエチルアミン中で混合した。この混合液を３７℃で一晩攪拌した。この反応混合液に１ｍｌの０．１ＭＨＣｌを加えた。前の実施例のように、添加した塩素イオンのいくらかがトリエチルアミンの揮発性塩化物塩を生成し、これを減圧下でＴＨＦと共に蒸発した。７０口無水反応物を加水分解すると３．５−ジクロロ−２，６−ノニトロ安り、香酸を生成し、酸性反応条件下で沈澱した。沈澱した過剰量の３．５−／クロロー２．６−ノニトロ安」香酸を遠心分離で除去し、ろ液を凍結乾燥した。黄色残留物をエタノールで結晶化した。

収率は６４．３％（３６，２ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点２３５：！＝１　℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク３２７５、　１１１３（ＯＨ）、　２９２４（ＣＨ）、　１６６０（ＣＯｆｔ’Ｈ）、１５５５（Ｎｏ）を有した。Ｒ＋’は０３０であった。Ｒ１′は０．６０であった。

実施例２０　脂質リガンドを有する３、５−フクロロー２．６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成無水ＴＨＦ中４７２ｍｇ　（ｌｃ’＋ｔ）の実施例１５のアミノポリエステル生成物を含む５ｍｌの溶液に無水ＴＨＦ及び２７８μＩ（２０２＋＋＋ｇ、２＋＋＋Ｍ）のトリエチルアミン中２４７ｍｇ　（ｌＩｎ％ｌ）の塩化ミリストイルの５ｍｌの溶液を加えた。この反応混合液を３７℃で２時間攪拌した。冷却後、黄色結晶性沈澱をろ過し、１ｍｌのＴＨＦで３回すすぎ、次いで、乾燥した。収率は９４％（６４１ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点１７６土１℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク：　２９００（ＣＨ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）、１５５５（Ｎｏ）を有した。Ｒ＋’は０．７５であった。Ｒ，’　＋！０．２０であった。

実施例２１・ステロイドリガンドを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成４７２ｍｇ　（１ｍＭ）の実施例」５のアミンポリエステル生成物の溶液に無水ＴＨＦ及び２７８　μｌ（２０２ｍｇ、２ｍＭ）のトリエチルアミン中４４９ｍｇ　（１ｍＭ）のコレステリルクロロホーメートの５ｍｌの溶液を加えた。この反応混合液を３７℃で一晩攪拌した。冷却後、黄色結晶性沈澱をろ過し、１ｍｌのＴＨＦで３回すすぎ、乾燥した。収率は８６％（７０６ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点１９６：１℃及び次＋７）　ＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピー４：　３３００．２９００（ＣＨ）、　１６６０（ＣＯＮＨ）、　１５５５（ＮＯ）を有りニ。Ｒ１’は０．８０であった。Ｒｒ”は０．２５であった。

実施例２２　リガンドと（、て窒素含有正電荷基を有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成２ｍｌの無水ＴＨＦ中１．０ｍの実施例１２のクロロ無水生成物と１２．１μＩのＮ。

Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（９６，８ｍｇ、　１．１ｍＭ）とを混合した。

この混合液を３７℃で３時間攪拌した。冷却後、減圧下でＴＨＦを蒸発した。黄色残留物をエタノールで結晶化し、乾燥した。収率は８９％（３１７ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点２３０土ｉ℃及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ビーク：　２９００．２７００（Ｃ）Ｉ）。

１６５３（ＣＯＮＨ）、　１５４１（Ｎｏ）を有した。Ｒ＋”は０．２０であった。Ｒｔ’は０．４５であった。

実施例２３：リガンドとしてビタミンを有する３、５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸誘導体の合成１０＋ｎｌの無水ＴＨＦ中４７７．４１１１ｇの葉酸２水和物（１，０釧）、２６９ｃｇの３，５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸（ｌ−）及び２８７．５ｍｇ　（１，５ｍＭ）の１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）の混合液を３７℃で４８時間攪拌した。黄色沈澱をろ過し、熱水で２回すすぎ、乾燥した。

収率は４６％（３４３ｍｇ）であった。生成物は、補正なしの融点２６０±１℃ 及び次のＩＲ（ＫＢｒ）吸収ピーク：　３３５０（卸、　２９５０（ＣＨ）、　１７００（ＣＯＯＨ）、　１６７６（ＣＯＮＨ）。

１５５６（Ｎｏ）を有した。ＲＩ′は０．２０であった。Ｒ１’は０．４０であった。

ここでは本発明をある特殊性について述べ例示してきたが、当業者は述べられていることの中で変更、追加及び省略のような種々の修正をしてもよいことを理解するであろう。従って、これらの修正も本発明によって包含されるものであり且つ本発明の範囲は添付の請求の範囲に合法的に一致することができる最も広しλ 解釈によってのみ制限されるものである。

フロントページの続き（５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１１５６　７４３１−４Ｃ３１／７０　８３１４−４Ｃ３１／７４　８３１４−４Ｃ（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ）、　ＡＵ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＦＩ、　ＨＵ、ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ，ＮＯ，ＮＺ、ＰＬ、ＲＵ、ＵＡＩ

Claims

【特許請求の範囲】

１．真菌感染症を治療するのに有効な医薬組成物であって、下記式（Ｉ）で表される化合物及びその付加塩、水和物及び溶媒和物の抗真菌有効量及び薬学的に許容しうる賦形剤を含む医薬組成物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｓは窒素、酸素、アルキル、アルケニル、アルコール、エステル、ポリエステル、アミノ酸、炭水化物又は窒素含有正電荷基より選ばれたスペーサーであり；Ｌは水素、ヒドロキシル残基、アルキル残基、アルケニル残基、ベンジル残基、アルコール残基、エステル残基、ポリエステル残基、アルキル酸残基、炭水化物、ステロイド、脂質、有機ポリマー、窒素含有正電荷基又はビタミンより選ばれたリガンドであり；Ｒ１及びＲ３はハロゲン又はヒドロキシルであり；かつＲ２は水素又はアルキルである、但し、Ｓが酸素であり且つＲ２が水素又はメチルであるときＬは水素ではなく、Ｓが酸素であるときＬはメチル残基、エチル残基又はベンジル残基ではない。
２．Ｓ又はＳ−Ｌの組み合わせが６−アミノヘキサン酸残基である請求項１記載の医薬組成物。
３．Ｓ又はＳ−Ｌの組み合わせがＴＲＩＳ｛（ヒドロキシルメチル）アミノメタン｝残基である請求項１記載の医薬組成物。
４．Ｓ又はＳ−Ｌの組み合わせが４，９−ジオキサ−１，１２−ドデカンジアミン残基である請求項１記載の医薬組成物。
５．Ｓ又はＳ−Ｌの組み合わせがアリルアミン残基である請求項１記載の医薬組成物。
６．Ｌが請求項６記載の組成物、アリルアミン及びアクリルアミドを含むポリマーである請求項５記載の医薬組成物。
７．該化合物が３，５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸の６−アミノヘキシル−Ｎ−アセチル−β−ｄ−チオグルコサミニド誘導体である請求項１記載の医薬組成物。
８．該化合物が３，５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸の６−アミノヘキシル−１−チオ−β−ｄ−ガラクトピラノシド誘導体である請求項１記載の医薬組成物。
９．Ｌがミリストイル残基である請求項１記載の医薬組成物。
１０．Ｌがコレステリル残基である請求項１記載の医薬組成物。
１１．ＬがＮ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン残基である請求項１記載の医薬組成物。
１２．Ｌが葉酸残基である請求項１記載の医薬組成物。
１３．真菌性疾患の治療方法であって、下記式（Ｉ）で表される化合物の抗真菌有効量をこれに罹患している患者に投与することを含む方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｓは窒素、酸素、アルキル、アルケニル、アルコール、エステル、ポリエステル、酸、炭水化物又は窒素含有正電荷基より選ばれたスペーサーであり；Ｌは水素、ヒドロキシル残基、アルキル残基、アルケニル残基、ベンジル残基、アルコール残基、エステル残基、ポリエステル残基、酸残基、炭水化物、ステロイド、脂質、有機ポリマー、窒素含有正電荷基又はビタミンより選ばれたリガンドであり；Ｒ１及びＲ３はハロゲン又はヒドロキシルであり；Ｒ２は水素又はアルキルである。
１４．該化合物が治療される患者の体重ｋｇ当たり一日量約１〜約１００ｍｇで投与される請求項１３記載の方法。
１５．該化合物が３，５−ジブロモ−２，６−ジニトロ安息香酸である請求項１３記載の方法。
１６．該化合物が３，５−ジクロロ−２，６−ジニトロ安息香酸である請求項１３記載の方法。
１７．該投与段階が経口的、筋肉内的、静脈内的又は局所的に行われる請求項１３記載の方法。