JPH06509093A

JPH06509093A - 新規な磁気共鳴造影用組成物

Info

Publication number: JPH06509093A
Application number: JP5502197A
Authority: JP
Inventors: ムーア，デニス・アラン; ワレス，レベッカ・アバナシィー; ペリアサミィ，マサナダー・ピー
Original assignee: マリンクロッド・メディカル・インコーポレイテッド
Priority date: 1991-07-02
Filing date: 1992-04-30
Publication date: 1994-10-13
Also published as: CA2110815A1; WO1993000931A1; AU2025592A; US5138040A; EP0592474A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】新規な磁気共鳴造影用組成物背景技術本発明は、磁気共鳴造影剤に関し、特に、磁気共鳴造影を改善する方法及び組成物に関する。

近年開発された磁気共鳴造影（画像法）（ＭＲＩ）の技術は、磁場及び電波放射を利用した特定の原子核の検出を含む。このＭＲＩは、幾つかの点で、軟組成の詳細を優れた解像度で人体組織解剖の断面を表示することにおいて、Ｘ線コンピュータ断層撮像（ＣＴ）と類似している。

現在使用されているのは、得られる像は、器官、組織における緩和時間及び／又はプロトンの密度分布の地図である。ＭＲＩの技術は電離放射線を使用しないで済むので、組織を害さない利点がある。

ＭＲＩの現象は１９４５年に発見されたが、ラーターバ（Ｌａｕｔｅｒｂｕｒ）が最初に提案して（Ｎａｔｕｒｅ　、　２４２　、１９０−１９１（１９７３））体の内部組織をマツピングする手段として利用できることが見出されたのは、比較的最近である。基本的に使用する磁場や電波場のレベルにおいて何も危険が知られていないので、無防備な個体に対して繰返し走査することが可能である。

さらに、横断面、頭頂面、矢状面等のいかなる走査面も容易に選択できる。

Ｎ１ＲＩ装置では、適当な電波周波数（ＲＦ）エネルギーにより、サンプル内の測定対象の核（例えばプロトン）を、制御されている勾配磁場で照射する。これらの核は、緩和するにしたがって、鋭い共鳴周波数でＲＦエネルギーを放出する。核の共鳴周波数は、使用する磁場によって決まる。

既知の原理によれば、適当なスピンを有する核が磁場（Ｂ、一般にガウス又はテラス（１０４ガウス）の単位で表される）に置かれた時、核は磁場方向に配列する。プロトンの場合は、それらの核は、ｌテスラの強さの場で、４２．６ＭＨ２の周波数で、前進する。この周波数では、放射線のＲＦパルスは、核を励起し、場の方向から磁化を傾けると考えることができる。この回転の程度は、パルス、持続時間及びエネルギーによって決まる。ＲＦパルスの後、核は“緩和”し、即ち、共鳴周波数で放射線を放出して磁場との平衡に戻る。放出された放射線の減衰は、二つの緩和時間により特徴付けられる。即ち、１つは、ＴＩ、スピン−格子緩和時間又は縦緩和時間である。これは、核が外部の磁場方向に添ってモ衡に戻る時間である。もう１つは、Ｔｔ、スピン−スピン緩和時間であり、これは個々のプロトンスピンの最初の可干渉性の前進の位相のずれと関連する。これらの緩和時間は、哺乳動物の異なる種の様々な体液、器官及び組織について確立している。

ＭＲＩにおいては、走査面及び切り取った試料の厚さを選択できる。

この選択により、高品質の横断、頭頂、矢状像が直接得られる。ＭＲ１装置は可動部品を含まないので、信頼性が改善され、高い信頼性を有している。ＭＲＩはＣＴよりも、組織特性の選択的検査にはるかに優れていると信じられている。この理由は、ＣＴではＸ線減衰及び係数のみで像のコントラストが決定するが、ＭＲＩでは少なくとも４つの独立した変数（Ｔ５、Ｔ２、プロトン密度及び流速）がＭＲＩシグナルに影響するからである。例えば、一般に、組織の緩和Ｔ、　、Ｔ２の値は、宿主の組織に比べ摘出した腫瘍組織の試験片のが、長いことが示されている（ダマディアン（Ｄａｍａｄｉａｎ）、針ｅｎｃｅ、１７１．１１５１（１９７１））。

ｈｉＲＩは器官及び／又は組織間の微妙な物理化学的相違に対して感度を有するため、ＭＲＩは異なる組織のタイプの違いを識別でき、物理化学的変化を引き起こす疾患を検出できると考えられている。Ｘ線やＣＴは組織の電子密度の違いにしか感度がないため、このような物理化学的変化を検出できない。

前述したように、主な造影パラメータの２つは緩和時間Ｔ＋、Ｔｔである。プロトン（又は他の適当な核）では、これらの緩和時間は核の環境により影響される（例えば、粘性、温度等）。これら２つの緩和現象は、本質的に、最初の電波周波数エネルギーを周囲の環境に放散するメカニズムである。このエネルギー消失又は緩和速度は、他の特定の常磁性の核により影響を受ける。これらの常磁性核を取り込む化合物は、近くのプロトンに対しＴ、　、Ｔ、の値をかなり変えることができる。ある化合物の常磁性効果の程度は、その化合物が存在する環境と相関がある。

一般に、原子番号２１〜２９．４２〜４４及び５８〜７０の元素の常磁性イオンは、ＭＲＩ造影（コントラスト）剤として有効であることが見出されている。好ましいイオンは、クロム（■）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（■）、鉄（■）、鉄（■）、コバルト（■）、ニッケル（ＩＩ）、銅（■）、プラセオジム（■ ）、ネオジム（■）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）である。磁性モーメントが非常に強いため、ガドリニウム（■）、テルビウム（■）、ジスプロシウム（■）、ホルミウム（■）、エルビウム（ＩＩＩ）が好ましい。

ガドリニウム（Ｉ［）は、ＭＲＩ造影剤として、特に好ましい。

通常は、２価及び３価の常磁性イオンは、有機錯化剤との錯体の形で、投与される。このような錯体は、可溶性で無毒な形で常磁性イオンを提供し、造影処理の後に体から速やかに取り除くのを容易にする。グリス（Ｇｒｉｅｓ）等のＵＳ特許４．６４７．４４７は、種々の常磁性イオンと従来のアミノカルホン酸錯化剤との錯体を示している。グリス等に開示されている好ましい錯体は、ガドリニウム（ＩＩＩ）とジエチレントリアミン五酢酸（“Ｄ　Ｔ　））　Ａ”）との錯体である。ＤＴＰＡは以下の式で表される。

ガドリニウム（ＩＩＩ）のような常磁性イオンは、他のポリアミノカルボン酸と強い錯体を形成することが見出されている。ポリアミノカルボン酸の例として、シクロヘキセンジアミン四酢酸（“ＣＤＴＡ”）（図示せず）、以下の式で表されるエチレンジアミン四酢酸（“ＥＤＴＡ“）、及び、以Ｆの式で表されるテトラアサシクロドデカン−Ｎ、Ｎ’、Ｎ”。

Ｎ°゛−四酢酸（“ＤＯＴＡ”）が挙げられる。

これらの錯体は生理的水性液体では、はとんど分離しない。錯体は、−１又は− ２の実効電荷を有し、一般には可溶性塩として投与される。

代表的な塩はナトリウム及びＮ−メチルクルサミン塩である。

イオン性塩の投与は、欠点が伴う。これらの塩は、生体でイオン濃度を高め、浸透性の局在的な乱れの原因となりつる。この乱れは、浮腫や他の好ましからぬ反応を引き起こす。

非イオン性常磁性イオン錯体を得るために努力かなされた。一般に、この目標は、ＥＤＴＡやＤＴＰＡ等のポリアミノ酸タイプのリガンドの１以上の遊離カルボン酸基を、中性の非イオン性基に変換することにより、達成される。例えば、Ｓ、　Ｃ，カー４（Ｑｕａｙ）のＵＳ特許４．６８７．６５８及び４．６８７．６５９には、ＤＴＰＡ錯体の各々アルキルエステル誘導体又はアルキルアミド誘導体が開示されている。同様に、公開されたディージ（Ｄｅａｎ　）等のＵＳ特許４．８２６．６７３は、ＤＴＰＡのモノ−及びポリヒドロキシアルキルアミド誘導体、およびそれらの常磁性イオン用錯化剤としての用途を、開示している。

カルホン酸基を非イオン性基に変換するために使用する誘導体の性質は、溶解性に大きな影響を及ぼす。例えば、カルボン酸基を疎水性アルキルアミド基で誘導すると、錯体の水溶解性はかなり低下する。生理的液体での錯体の溶解性は、錯体の組織選択性に影響する。親水性錯体は、間質液体に集中する傾向があり、疎水性錯体は細胞に結合する傾向がある。従って、親水性の違いにより、化合物は異なった用途で使用される。

このように、ＭＲＩ剤として使用するための、新規で異なった構造の常磁性イオンのイオン性及び非イオン性錯体が、必要とされていた。さらに、当分野では、良好な緩和特性及び低い浸透特性を有する安定性の高い錯体の開発が必要とされていた。

発明の概要本発明は、新規な錯化剤及び、ＭＲＩに使用するための錯化剤と常磁性イオンとの錯体を提供する。錯体は以下の２つの一般式で表される。

式Ｉ式中、Ｒ＋　、Ｒ１、Ｒｓ基は、水素、メチル基又はエチル基等の炭素数１から６のアルキル基、ここで脂肪親和性を最少とするためにはメチル基が好ましい、メトキシ基又はエトキシ基等の炭素数１から６のアルコキシ基、ヒドロキシメチル基又はジヒドロキシプロピル基等の炭素数１から６の七ノー又はポリ−ヒドロキシアルキル基、ここで水溶解性を改善するためにはジヒドロキシプロピル基が好ましい：メチルメトキシ基等の炭素数１から６のアルキルアルコキシ基；メトキシメチル基又はメトキシエチル基等の炭素数１から６のアルコキシアルキル基、ここで脂肪親和性を減少させるためにはトメキシメチル基が好ましい；ピラジニル基、ピリジル基、フェニル基、ナフチル基又はベンジル基等の炭素数４から１２のアリール基、ここで水溶解性を改善するためにはピリジル基が好ましい；アセチル基、ベンゾイル基、メトキシアセチル基又はヒドロキシアセチル基等の炭素数１から１２のアシル基、ここで脂肪親和性を減少させるためにはベンゾイル基が好ましく、水溶解性を改善するためにはメトキシアセチル基が好ましい；から選択される同−又は異なる基を表わす。このような置換基の例として、限定するものでないが、以下のものが挙げられる、ＲＲＲ式中、２つのＲ基は結合して、１以上のＸ基による置換又は非置換の４から１２の環を形成できる。Ｘは、０、Ｓ、Ｎ及びＮＣＲから選択され、ｎは０からＩＩまでの整数を表し、Ｍ”は原子番号２１〜２９．４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンであり、原子価２は２＋、３＋又は４＋である。

本発明の錯体は、さらに、１以上の側鎖を介して他の錯体と結合して、より良好な溶解性及びモル緩和性を有するダイマーを形成できる。

本発明は、さらに、診断組成物及びＭＲＩ診断方法を開示する。このＭＲＩ診断方法は、温血動物に上記の錯体を有効量投与し、その後温血動物を〜ｉＲＩ処置に晒し、それにより温血動物の体の少な（とも一部を造影する。

発明の詳細な説明本発明に使用される錯化剤は、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＣＤＴＡ又はＤＯＴＡ等の既知のキレ−１・剤の誘導体である。これ等の誘導体では、遊離カルホン酸基（これらは常磁性イオンとの配位結合の形成に関与しない）はアミド塙に変換される。従って、例えば、常磁性イオンが三価ならば、ＤＴＰＡの２つのカルボン酸基がアミド形に誘導される。同様に、常磁性イオンが二価ならば、ＤＴＰＡの３つのカルボン酸基がアミド形に誘導される。二価又は三価の常磁性イオンと反応する時、得られる錯体はほぼ非イオン性で中性である。ＥＤＴＡ、ＣＤＴＡ又はＤＯＴＡ等の他のキレート剤を使用する時も、同じ原理が成立する。

ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＣＤＴＡ又はＤＯＴＡ等のキレート剤のアミド誘導体は、常法で製造する。一般に、以下の一般式のアミン基を有する化合物を化学量論的量で、キレート剤の反応性誘導体と、アミド形成条件下で、反応させて製造する。このような反応性誘導体には、例えば、無水物、混合無水物、酸塩化物がある。

一実施例では、反応は有機溶媒中高温で行われる。好ましい溶媒は、その中で反応物質が十分に溶解し、その溶媒自身はほとんど反応物質や生成物と反応しない溶媒である。低級脂肪族アルコール、ケトン、エーテル、エステル、塩化炭化水素、ベンゼン、トルエン、キシレン、低級脂肪族炭化水素等は、好ましい反応溶媒として使用できる。このような溶媒の例として、メタノール、エタノール、プロパツール、ブタノール、ベンテノール、アセトン、メチルエチルケトン、ジエチルケトン、酢酸メチル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジクロロエタン、ヘキサン、ペプタン、オクタン、デカン等が挙げられる。出発物質として、酸塩化物を使用する時は、好ましい反応溶媒は、ヒドロキシ基等の反応官能基を含まない溶媒である。溶媒が反応官能基を含むと、酸塩化物と反応し好ましくない副生成物が生成される恐れがあるからである。

反応温度は、使用する出発物質、反応溶媒の性質、他の反応条件によって、広範囲である。反応温度は、例えば、約θ℃から約１５０℃、好ましくは、約３０℃ から約７０℃である。

反応性誘導体とアミンの反応に続いて、残りの無水物又は酸塩化物基は、化学量論的に過剰の水を反応混合体に加えて短時間加熱することにより、加水分解されカルボキシル基となる。

得られたＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、ＣＤＴＡ又はＤＯＴＡアルコキシアルキルアミドは、反応混合体から、常法で回収する。例えば、沈澱溶媒を反応混合体に加えてその生成物を沈澱させ、１濾過又は遠心分離により回収する。

水素；メチル基又はエチル基等の炭素数１から６のアルキル基、ここで脂肪親和性を減少させるためにはメチル基が好ましい；メトキシ基又はエトキシ基等の炭素数１から６のアルコキシ基、ここで脂肪親和性を減少させるためにはメトキシ基が好ましい；ヒドロキシメチル基又はジヒドロキシプロピル基等の炭素数１から６のモノ−又はポリ−ヒドロキシアルキル基、ここで水溶解性を改善するためにはジヒドロキシプロピル基が好ましい二アミノ基又はメチルアミノ基等のアミン基；又は、アセチルアミノメチル基又はプロピオニルアミノメチル基等のアシルアミノアルキル基、ここでアシル基又はアルキル基はそれぞれ炭素数が１から６である。である。

その後、常磁性イオンは、錯体形成条件下で、上記の単離したアルコキシアルキルアミド誘導体と結合する。一般に、前記の全ての常磁性イオンは、本発明の錯体を製造するのに使用できる。錯体は、通常、適当な酸化物又は塩を、錯化剤と共に水性溶液中で、常磁性イオンに混ぜることにより製造できる。確実に完全な錯体を形成するために、少しだけ化学量論的に過剰な量の錯化剤を使用してもよい。また、例えば約２０℃から約１００℃、好ましくは、約４０℃から約８０℃ の、高温で反応させて、確実に完全な錯体を形成してもよい。一般に、混合後、数分から数時間の間に、完全な錯体が形成する。錯体は、アセトン等の沈澱溶媒により沈澱させて回収し、さらに所望により結晶化により精製する。

本発明の新規な錯体は、経腸又は非経口投与用診断組成物に製剤できる。これらの組成物は、有効量の常磁性イオン錯体を、意図する投与の種類による通常の製剤の担体及び賦形剤とともに、含む。例えば、非経口製剤は、好ましくは、約０．０５から１．０Ｍの本発明の常磁性イオン錯体の滅菌水性溶液又は懸濁液を含む。好ましい経腸製剤の常磁性イオン錯体の濃度は、Ｏ，１Ｍから０．５Ｍである。この様な溶液は、製剤上許容される緩衝液や、場合によっては塩化ナトリウム等の電解液も含んでもよい。好ましくは、組成物は、さらに生理学的に許容される無毒のカチオンを、グルコン酸塩、塩化物又は他の適当な有機、無機の塩の形で含んでもよく、安全性を高めるために適当な可溶のキレート／リガンドの錯体としてよい。このようなキレート／リガンドの例には、常磁性及び／又は重金属と合体し本発明の錯体製剤を製造するために使用した前記のリガンドが含まれる。好ましくは、カチオン−リガンド錯体は、リガンド−金属錯体より過剰に約０．００１モルパーセントから約１５モルパーセントの範囲の量で供給される。

生理学的に許容される無毒のカチオンの例として、ナトリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、銅イオン、亜鉛イオン等及びそれらの混合物が挙げられる。カルシウムイオンが好ましい。

非経口組成物は、直接に、又は全身投与のために大用量の非経口組成物と混合して、注射できる。

経腸投与用製剤は、当分野でよ（知られているように、多様である。

一般に、その様な製剤は、水性溶剤又は懸濁液中に有効量の常磁性イオン錯体を含むリガンドである。この経腸組成物は、場合により、緩衝液、界面活性剤、チキソトロピック剤等を含んでもよい。経口投与用組成物は、感覚的質を向上させるために、若番剤や他の成分も含んでもよい。

この診断組成物は、ＮＭＲ像を好適に改善できる用量で、投与する。

この用量は、用いる特定の常磁性イオン錯体、造影処置を受ける器官や組織、使用するＮＭＲ造影装置等に依存して、広範囲である。一般に、非経口投与量は、患者体重−当たり、常磁性イオン錯体は約０．０１から約１．０　ｍｍｏｌである。好ましい非経口投与量は、患者体重眩当たり、常磁性イオン錯体は約０．０５から約０．５ｍｍｏｌである。一般に、経腸投与量は、患者体重−当たり、常磁性イオン錯体は約０．５から約１００ｍｍｏｌであり、好ましくは約１．０から約２０ｍｍｏｌである。

本発明の新規なＭＲＩ造影剤は、好ましい特徴を独特に組み合わせて有している。常磁性イオン錯体は、はぼ非イオン性であるのにかかわらず、生理学的液体に高い溶解性を有している。溶解性が高いので、濃縮した溶液の作製が可能であり、従って投与に必要な液量を少な（できる。

また、錯体は非イオン性なので、診断組成物の浸透性を低下させ、好ましからぬ浮腫やその他の副作用を妨げる。

この発明の診断組成物は通常の方法で使用する。組成物は、温血動物に全身に又は造影する器官や組織に局部的に、好適に可視化できる十分な量で投与し、その後温血動物はＭＲＩ処置をうける。組成物は、これらの方法により得られる磁性共鳴像を改善することが、見出された。さらに、これらの用途及び磁性共鳴造影方法に加えて、本発明の錯化剤は放射線製剤又はＸ線対照用の重金属を体内に運ぶためにも使用できる。

本発明を、限定を意図しない以下の実施例によりさらに説明する。

（実施例１）（アクア（Ｎ、Ｎ”−ヒス（Ｎｌｌｌｌ　’ｌ−メトキシエチルカルノくモイルメチル−Ｎ　ｌ　ｌ　＋−メチルカルバモイルメチル）ジエチレントリアミン− Ｎ、　Ｎ”　、　Ｎ’“−三酢酸））がトリニウム（ＩＩＩ）　（４）の製造方法第１の工程は、２−メトキシ−エチルアミンの変形ショツテン−バウマン−アセチル化である。クロロアミドｌは容易に真空蒸留により精製する（１トル、５８℃）。次に、メチルアミンはクロロアミドを用いてＮ−アルキル化する。得られたＮ−メチルグリシン（２−メトキシエチルアミド）２も真空蒸留により精製する（ｌトル、２８°Ｃ）。グリシンアミドを、２−プロパツールの中で、ジエチレントリアミン四酢酸二無水物と反応させ、所望のＤＴＰＡ３のビス（アミド）を得る。リガンドをガドリニウムと錯体化させ、錯体４を得る。錯体は逆相閃光（ｆｉａｓｈ）クロマトグラフィにより精製する。

（実　験）Ａ）クロロ（Ｎ−（２−メトキシエチル））アセトアミド（１）４００ｍｌのジクロロメタン中に５６．４　ｇ　（３９，８ｍｌ　０．５０ｍｏｌｅ）のクロアセチルクロライドを、４００＋ｎｌの水中に２０　ｇ　（０，５０ｍｏｌｅ）の水酸化ナトリウムを各々含む２個の５００ｍ１添加漏斗、及び水冷凝縮器が付いている３首２Ｌ丸底フラスコに、３５．７ｇ　（４１，３ｍｌ、０．４８ｍｏｌｅ）の２−メトキシエチルアミン、ｌｏＯｍｌの水、１００ｍ１のジクロロメタンを入れた。この反応容器を塩水浴により０℃まで冷やした。有機溶液及び水性溶液をゆっくりと（分光たり０．２５ｍ１まで）、反応液に加えた。添加の間、反応液の水相のｐＨを監視し、ｐＨが１２を保つように、アルカリ溶液の添加速度を調節した。添加が終わると、混合物を室温まで暖め、−晩攪拌した。有機相をサイフオンを用いて取り出し、硫酸マグネシウムにより４時間乾燥した。混合物をブラフネル濾過器上の＃４の濾紙で濾過し、硫酸塩を２Ｘ１００ｍｌの新鮮なジクロロメタンで洗浄した。その後、集めた１戸液を２Ｌ丸底フラスコに入れ、混合物を１トルで蒸留した。５５°Ｃ〜６０℃で集めた留分を一緒にして、ＮＭＲで分析した。、収１３１．１ｇ（始めの２−メトキシエチルアミンに基づいて４３％）。ＴＬＣ（ガラス上にシリカ、ジクロロメタン中に２％メタノール）　Ｒ＋　＝０．４０゜　’Ｈ（δ、ＣＤＣＬｓ　）３．２８　（ｓ、３Ｈ）、３．４０（ｍ、４Ｈ）　、３．９７　（ｓ、２Ｈ）　、６．９２　（ｂｒ、ＩＨ）、”Ｃｆ　’Ｈ１（δ、ＣＤＣＬ！　）３９．２７．４２．３２．５８．６０．７０、５４．１６６．２２゜Ｂ）Ｎ’−（２−メトキシエチル）−Ｎ−メチルグリシンアミド（２）５００ｇＩ！４０％ｗ／ｗ水性メチルアミンを含む、還流凝縮器付ＩＬ丸底フラスコに、攪拌しながら、３１．１　ｇ　（０，２１ｍｏｌ、ｅ）のクロロアミドｌを加えた。この混合物を３５℃まで加熱し、−晩攪拌した。この混合物に８．８　ｇ　（０，２２ｍｏｌ、ｅ）の水酸化ナトリウムを加え、室圧で蒸留し、８９°Ｃ〜９８８Ｃの留分を得た。この粗留出物を硫酸マグネシウムで乾燥し再度蒸留して、透明な無色の油状物質を得た。収量１３．９ｇ（始めのクロロアミドｌに基づいて４５％）。ＴＬＣ（ガラス上にシリカ、メタノール中に１５％濃縮水酸化アンモニウム）Ｒ，＝０．３５゜’Ｈ（δ、ＣＤＣＬｓ　）１．３８　（ｂｒ、ＬＨ）　、２．３２　（ｓ、３Ｈ）　、３．１４　（ｓ。

２Ｈ）　、３．２６　（ｓ、３Ｈ）　、３．３７　（ｍ、４Ｈ）　、７．３５　（ｂｒ、ＩＨ）。”Ｃ（’Ｈ１（δ、ＣＤＣＬ！＞３６．２８．３８．３９．５４．２４．５８、５３、？　１．　＋　３．１７１．６２゜Ｃ）Ｎ、Ｎ’“−ビス（Ｎ””−２−メトキシエチルカルバモイルメチル−Ｎ”’−メチルカルバモイルメチル）ジエチレントリアミン−Ｎ、　Ｎ’。

Ｎ”−三酢酸　（３）２Ｌの丸底フラスコに１３．９　ｇ　（０，０９５ｍｏｌｅ）のグリシンアミド２．１７、０　ｇ　（０，０４７ｍｏｌｅ）のジエチレントリアミン四酢酸二無水物及びＩＬの２−プロパツールを入れた。この混合物を６０℃まで加熱し、− 晩攪拌した。この混合物を室温まで冷やし、２Ｌの回収用フラスコにＩＬロットづつ移し、溶媒を回転式蒸発器（水アスピレータ）で取り除いた。残査に１１− の蒸留／脱イオン水を加え、混合物を濾過しジエチレントリアミン四酢酸を取り除く。水は回転式蒸発器により取り除き、オレンジ色のガラス状物質を得た。収量３４ｇ（始めの無水物に基づいて１００！％＝３０．９ｇ）。一般には、このリガンドはそのままで錯化反応に使用する。少量の試料を逆相関光力ラムクロマトグラフィにより精製した。ＩＲ（ｃｍ−’）　Ｃ−０，Ｉ　７２４　（ｍ、ｓｈ）、１６５９（ｖｓ）。

理論値％Ｃ４８，０７、％Ｈ７，２９、％Ｎ　１５．０９゜実測値％Ｃ４７，７７、％Ｈ７，０４、％ＮＩ５．３９８Ｄ）　Ｉアクア（Ｎ、Ｎ”−ビス（Ｎ””−２−メトキシエチルカルバモイルメチル−Ｎ°゛°−メチルカルバモイルメチル）ジエチレントリアミン−Ｎ、Ｎ’ 、Ｎ”−三酢酸））ガドリニウム（ＩＩＩ）　（４）ＩＬの丸底フラスコに、３４ｇの粗リガンド３（３０，９ｇ、０．０４８ｍｏｌｅの無水リガントが存在すると仮定する）　、８．６　ｇ　（０，０２４ｍｏｌｅ）のがトリウム酸化物及び５００ｍ１の水を入れた。混合物を加熱し緩やかに還流し、−晩攪拌した。少し濁った黄色の混合物をｌ濾過しく０．４２ミクロン）、水アスピレータを用いて回転式蒸発器により５０ｍ１まで濃縮した。濃い透明な溶液を、ＹＭＣ，Ｃ− １８逆相バツキングで詰めた５Ｘ３５ｃｍのカラムにかけた。カラムは水で溶出した。２１５ｎｍのＵＶ検出器を用いたＨ　Ｐ　Ｌ　Ｃによる９８％を越える純粋錯体を含む分画を一緒にして、濃縮し、ｌ濾過しく０．４２ミクロン）そして蒸発させて透明な無色の粉末を得た。収量２０．５ｇ（始めのリガンド３に基づいて５０％）。

ＩＲ（ｃｍ−１）　Ｃ＝Ｏ１１６７６（ｓ、ｓｈ）　、１６２０　（ｖｓ）　。

ＣｔｓＨ＋５Ｎ７０＋２・３Ｈ２０の理論値％Ｃ３６，３１、％Ｈ６，０９、％Ｎ　１１゜４０．０６Ｇｄ１８．２９．、実測値％Ｃ３６，０４、％Ｈ５，９０、％Ｎ　Ｉ　１．１２．０６６ｄ　ｌ　７．７９ｏカール・フィッシャ水分理論値５．９１％、実測値６、３０９６゜（アクア（Ｎ、Ｎ”−ビス（Ｎ””−２−メトキシエチルカルバモイルメチル− Ｎ゛′°−メチルカルバモイルメチル）ジエチレントリアミン−Ｎ、Ｎ’　、Ｎ ”−三酢酸））ガドリニウム（ＩＩＩ）の０．５Ｍ溶液のマウスの静脈投与におけるＬＤｉｏ値は、３２．５　ｍｍｏｌ／ｋｇ　（信頼限界２７．３〜３８、８　ｍｏｌ／ｋｇであった。緩和速度（ｍｍｏｌ−’　５ｅｅ−’）は、ブラッカーＮＭＲミニスペック（２０ＭＨｚ）スペクトロメータを用いて、４０℃で注射用滅菌水（ＳＷＦ　Ｉ）及び４％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）において、得た。

Ｒ８・５ＷＦＩ、４．３；ＢＳＡ、４．６　；Ｒ，：　５ＷＦＩ、４．１；ＢＳＡ、５．３゜（実施例２）Ａ）Ｎ“−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）クリシンアミド　（６）クロロアセチルクロライド（５６，７ｇ、０．５ｍｏｌ）を滴下して、塩化メチレン（１５０ｍｌ）中のエタノールアミン（１６０ｇ、２．６ａ＋ｏｌ）に、氷水温度で加えた。この混合物を、この温度で６０分、その後室温で６０分攪拌した。溶媒は回転式蒸発器で取り除いた。エタノール（１５０ｍｌ）を用いて残査を溶かした。水酸化ナトリウムペレット（４０，０ｇ、１．０ｍｏｌ）をこの混合物に加え、室温で２時間攪拌した。塩化ナトリウムは１濾過て取り除いた。１戸液を減圧下（＜０．５１−ル）で回転式蒸発器で蒸発させ、エタノール、水及びエタノールアミンを取り除いた。粗生成物（７２，３ｇ、８９％）を溶出に脱イオン水を用いたＣ−１８クロマトグラフイで精製した。水を取り除いた後、精製物は無色の液体であった。

’ＨＮＭＲδ　２．７−２．８（ｍ、２Ｈ）　、３．３−３．５　（ｍ、４Ｈ）、及び３．６−３．８（ｍ、４Ｈ）；Ｃ−１３ＮＭＲδ　ｌ　７７．６　（Ｃ＝Ｏ）、及び４４．２．５２．９．５４．０．６３，０、及び６３．４、これらのデータはそれぞれ２つのヒドロキシエチル基土の４つの炭素原子、及びグリシン基土の１つのメチレン炭素原子を表している。

Ｂ）Ｎ、Ｎ”−ビス［Ｎ””−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイルメチル− Ｎ”’　−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイルメチル〕ジエチレントリアミン−Ｎ、　Ｎ’、　Ｎ”−三酢酸　（７）２０ｍ１の乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中４．６４　ｇ　（１３，０ｍｍｏｌ）ＤＴＰＡ二無水物の安定液を作製した。１５ｍ１の乾燥ＤＭＦ中４．０ｇ（２４、７ｍｍｏｌ）の第二アミン（６）の溶液を、滴下してその中に加えた。

この混合物は、室温で６０分、その後５５℃で２時間攪拌した。反応の最後に、未反応のＤＴＰＡ二無水物を消化するために、水５ｍｌを加えた。

混合物全体を室温で一晩攪拌した。形成された固体（ＤＴＰＡ）は１濾過により取り除いた。溶媒は減圧下回転式蒸発器により取り除いた。ＤＴＰＡビスアミド（７）が残査からＣ−１８クロマトグラフイにより精製された。

Ｃ）［Ｎ、Ｎ”−ビス（Ｎ””−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイルメチル −Ｎ”’　−（２−ヒドロキシエチル）カルバモイルメチル〕ジエチレントリアミン−Ｎ、　Ｎ’　、　Ｎ”−三酢酸〕〕がトリニウム（ＩＩＩ）ｄｔＯｓＪガドリニウム酸化物（ｌ、９１ｇ、５．２７　ｍｍｏｌ）を水５０ｍ１中の（７）（７，２ｇ、ＩＯ，６ｍｍｏｌ）に加えた。混合物を６９℃〜７１０Ｃで一晩攪拌した。溶液を濾過し、水を回転式蒸発器により取り除いた。粗生成物（ｉｌｌ）　（９，２ｇ、１０３．４％）は、白色粉末であった。

上記の化合物及び方法において、この発明の範囲から外れなＬ）限り、種々の変更力呵能である。上記の記載に含まれる又は添付の図面に示される全ての事項は、例として説明したものであり、限定を意味しなＬｌ。

フロントページの続き（７２）発明者　ペリアサミイ、マサナダー・ビーアメリカ合衆国、６３０１７　ミズーリ州、チェスターフイールド、ビッグ・ティンバー・レーン　１４６４０

Claims

【特許請求の範囲】

１．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、Ｍｚ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される錯体。
２．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第１項記載の錯体。
３．少なくとも１つのＲ基が他の錯体の側鎖と結合してダイマーを形成する請求の範囲第１項記載の錯体。
４．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、Ｍｚ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される錯体。
５．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第４項記載の錯体。
６．少なくとも１つのＲ基か他の錯体の側鎖と結合してダイマーを形成する請求の範囲第４項記載の錯体。
７．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、Ｍｚ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される常磁性イオンの錯体のＭＲＩ有効量及び製薬学的に許容される担体を含む温血動物への経腸又は非経口投与用診断組成物。
８．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第７項記載の診断組成物。
９．錯体が、約０．０５から１．０Ｍの濃度で、滅菌水性の製薬学的に許容される担体中に溶解しているか懸濁している請求の範囲第７項記載の診断組成物。
１０．さらに製薬学的に許容される緩衝液を含む請求の範囲第７項記載の診断組成物。
１１．少なくとも１つのＲ基が他の錯体の側鎖と結合してダイマーを形成する請求の範囲第７項記載の診断組成物。
１２．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、Ｍｚ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される常磁性イオンの錯体のＭＲ１有効量及び製薬学的に許容される担体を含む温血動物への経腸又は非経口投与用診断組成物。
１３．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第１２項記載の診断組成物。
１４．錯体が、約０．０５から１．０Ｍの濃度で、滅菌水性の製薬学的に許容される担体中に溶解しているか懸濁している請求の範囲第１２項記載の診断組成物。
１５．さらに製薬学的に許容される緩衝液を含む請求の範囲第１２項記載の診断組成物。
１６．少なくとも１つのＲ基が他の錯体の側鎖と結合してダイマーを形成する請求の範囲第１２項記載の診断組成物。
１７．下記式：　 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、ＭＺ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される錯体の有効量を温血動物へ投与し、その後温血動物を磁気共鳴造影処置に晒し、それにより温血動物の体の少なくとも一部を造影する磁気共鳴造影診断処置を実施する方法。
１８．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第１７項記載の方法。
１９．下記式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３基は、水素、炭素数１から６のアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のモノヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のポリヒドロキシアルキル基、炭素数１から６のアルキルアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシアルキル基、炭素数４から１２のアリール基及び炭素数１から１２のアシル基から選択される同一又は異なる基を示し、２以上のＲ基は結合して４から１２個の置換又は非置換の環を形成してもよく、ｎは０から１１までの整数を示し、Ｍｚ＋は原子番号２１〜２９、４２〜４４及び５８〜７０の元素から選択される常磁性イオンを示し、原子価ｚは２＋、３＋又は４＋を示す。）で表される錯体の有効量を温血動物へ投与し、その後温血動物を磁気共鳴造影処置に晒し、それにより温血動物の体の少なくとも一部を造影する磁気共鳴造影診断処置を実施する方法。
２０．Ｍｚ＋はクロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、マンガン（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、イッテルビウム（ＩＩＩ）、ガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、エルビウム（ＩＩＩ）、ユーロピウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ＩＶ）である請求の範囲第１９項記載の方法。