JPH0666811A - 血清中間体の製造方法 - Google Patents

血清中間体の製造方法

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JPH0666811A
JPH0666811A JP2417971A JP41797190A JPH0666811A JP H0666811 A JPH0666811 A JP H0666811A JP 2417971 A JP2417971 A JP 2417971A JP 41797190 A JP41797190 A JP 41797190A JP H0666811 A JPH0666811 A JP H0666811A
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フィリップ、ヴィ、エングラ
Steven N Buhl
スティーヴン、エヌ、ブール
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Abstract

(57)【要約】 (修正有) 【目的】透明な光学的性質を有する極めて安定な血清を
高分子脂質成分の著しい損失なしに製造する方法を提供
する。 【構成】本発明は、酸を添加する処理により血清のpH
をより酸性にすることによつて血清の一つの、または複
数の成分を不溶化し、そして不溶化した成分を血清から
分離する。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般的に、透明な光学的性質を有する極めて安
定な血清を高分子脂質成分の著しい損失なしに製造する
ことに関する。処理した血清は改良された▲ろ過▼性お
よび熱力学的性質を特徴とし、その性質によりこの血清
は滅菌液体としても凍結状態においても長期間の貯蔵に
好適となる。処理した血清はまた、校正用および対照用
剤の製造に使用する場合改善された凍結乾燥および再水
和の性能を示す。現在まで、酸によつて沈殿可能な分子
および(または)画分の抽出に基礎をおき、安定で無類
の▲ろ▼過性を有し光学的に透明で、校正用および対照
試験用剤の製造に使用するのに好適であり極めて実用的
である血清を与えるような方法または手順は知られてい
ない。本発明によれば、血清の一つのまたは複数の成分
を不溶化し、不溶化した成分を血清から分離し、分離し
た血清を安定化する工程から成る。透明な光学的性質と
改良された▲ろ▼過性を有する安定で不変性の(con
sistent)血清の製造方法が記載されている。好
ましい態様の一つにおいては、出発材料たる血清はウシ
血清である。別の態様においては、不溶化工程は、好ま
しくは無機酸または有機酸の添加によつて、血清のpH
を約5より下に下げることによつて行なわれる。さらに
別の態様においては、分離工程は▲ろ▼過剤を通すこと
によりまたは遠心分離によつて行なわれる。さらに別の
態様においては、安定化工程または中和は、分離された
血清のpHを無機塩基または有機塩基の添加によつてp
H約7−8の範囲に上げることによつて行なわれる。本
発明はまた、処理した血清と慣用的に添加される分析試
剤とを混合することにより、前記の処理した血清を対照
試験用および校正用用途に使用することを目的としてい
る。本発明の範囲にはまた、血清をより酸性にすること
により血清の一つまたは複数の成分を不溶化し該成分を
血清から分離することによつて製造される血清中間体を
包含する。生成した血清中間体は前記のように安定化し
てもまたは凍結乾燥してもよい。凍結乾燥した材料は液
状に戻し次に安定化することができる。本発明の新規な
処理を受けた血清は、かかる処理によつて生ずるその非
常に望ましい性質のために長期間の貯蔵に好適となる。
凍結乾燥性および再水和性の改善により、それらは特に
校正用および対照試験用の用途に有用である。従来、診
断用に使用すべき血清は全く貯蔵しておくことができ
ず、貯蔵により混濁し、短期間放置後は▲ろ▼過困難で
あつた。例えば未処理の液状ウシ血清は冷蔵貯蔵すると
48時間以内に劣化を始めた。この劣化と同時に血清試
料は混濁して吸光性に悪影響を生じ、その使用に制約を
受ける。▲ろ▼過は困難で時間のかかるものとなり、た
とえ▲ろ▼過を行なつても生成血清は透明性に問題があ
り、これはその後の応用に対して不適当な特徴となる。
従つて、本発明の方法によつて得られる処理した血清の
顕著で現実的な利点は極めて明らかである。例えば本発
明によつて処理した血清は−20℃で冷凍された状態で
8ケ月以上劣化または混濁せずに貯蔵し得るのに対し、
未処理のウシ血清は同様の条件下で6ケ月以内に劣化し
混濁する。冷蔵液状貯蔵すなわち2−8℃における比較
はさらに著明である。本発明に従つて処理されたウシ血
清はこの条件下で約2週間まで貯蔵に安定であるのに対
し未処理の試料は48時間以内に劣化する。後者のすな
わち液状での貯蔵安定性は、これにより技術者が比較的
大量の血清組成物を劣化による廃棄の危険なしに調製、
貯蔵し得るようになるので、持に重要である。少量を繰
返して調製するかわりに比較的大量を調製し得ることは
時間の節約にもなることは明らかである。従つて本発明
の方法は、透明な光学的性質を有する安定で不変性のよ
い血清を、高分子脂質成分を著しく損失することなしに
提供するものである。生成した処理した血清は、その改
良された▲ろ▼過性と熱力学的性質とによつて、追加的
処理に対して特に適当となる物性を示す。これらの性質
により血清は滅菌液として、または凍結状態で長期間貯
蔵するのに好適となる。処理された血清はまた、校正用
および対照試験用剤調製への使用に対し改良された凍結
乾燥性および再水和性を示す。このように処理した血清
を調製する本発明の製造方法において、原料血清、例え
ばウシ血清は不溶化工程に付され、この工程において好
ましくは、pHは有機酸または無機酸の添加によつて低
下される。好ましくは、pHは約5より下に、より好ま
しくはpH範囲4−5に、さらに好ましくはpH範囲
4.4−4.6に調節される。校正用または対照試験用
に使用するためには、代表的にはウシ血清をここに開示
した方法に従つて処理する。しかし、ウマおよびヒト血
清を含めてその他の哺乳動物血清をこの方法によつて処
理することができる。さらに、血漿または線維素を除去
した血漿をこの方法に使用することができる。不溶化工
程は一般に、血清の本来の性質またはその予想される用
途に対して妨害とならない任意の有機酸または無機酸を
使用してpHを調節することによつて行なわれる。代表
的な酸の例としては塩酸および酢酸が挙げられる。不溶
化工程後の混濁した血清は次に、▲ろ▼過または遠心分
離処理して透明な液体を得る。pH低下によつて生ずる
混濁の原因はよくわかつていない。これ以上の研究なし
に特定の機溝にとらわれる積りはないが、酸で沈澱し得
る分子および(または)画分はタンパク質またはタンパ
ク近縁物であると理論づけられている。いずれにせよ、
この物質を徐去することにより、本質的により安定であ
り、冷凍の結果より良好な”結晶構造”を有する血清が
得られ、ここに開示する方法において本質的に重要であ
る。この物質の除去は分離工程によつて達成され、任意
の適当な▲ろ▼過方法によつて行なうことができる。例
えばpHを調節した血清を▲ろ▼紙の▲ろ▼過剤、例え
ば石綿−セルロース、セルロース、またはガラス繊維▲
ろ▼過剤を通して▲ろ▼過することができる。▲ろ▼過
助剤例えばケイソウ土を含有するのが適当であることが
見いだされた。別の方法として、分離は遠心分離により
適当に行なうことができる。▲ろ▼過の後、血清は、そ
の血清の本来の性質またはその予想される用途に対して
妨害とならない任意の有機塩基または無機塩基を加える
ことにより、好ましくは分離された血清のpHを約7−
8に、好ましくは7.5に上げることによつて安定化ま
たは中和される。代表的な例としては水酸化ナトリウム
およびトリヒドロキシアミノメタンが挙げられる。得ら
れた処理血清は前述したように、診断分析における校正
用または対照試験用としての使用に備えてかなり大量に
貯蔵し得るような、優れた貯蔵性を有している。従つて
このものは、前述の方法によつて得られた状態で相当長
期間貯蔵後でも配合することができ、また慣用の分析試
剤を混和後に凍結乾燥することもできる。凍結乾燥され
た材料は極めて安定で、容易に元に戻すことができる。
分析試剤の代表例としてはグルコース、カリウム、アル
カリリン酸塩、クレアチンキナーゼ、尿素、乳酸塩脱水
素酵素(LDH)、アラニン−アミノ転移酵素、トリグ
リセリド、コレステロール等が挙げられる。本発明はま
た、血清のpHをより酸性にすることによつてその一つ
または複数の成分を不溶化し、前記不溶化した成分を血
清から分離することによつて得られる血清中間体を包含
する。得られた血清は前記のように凍結乾燥するか、ま
たはその後で安定化することができる。凍結乾操した材
料は元に戻して次に安定化することができる。一般に分
析試剤は、中間体血清を安定化する迄は混和されない。
例 1 併合したウシ血清(1000l、pH7.5)を塩酸
(3M)によりpH4.4−4.6に調節する。このp
Hで血清は混濁する。▲ろ▼過助剤、例えばケイソウ土
(0.5重量%)をこの混濁した血清に加えたのち、▲
ろ▼過系、すなわちCUNO SOS▲ろ▼過パッドを
おさめた▲ろ▼過装置を通す。▲ろ▼液のpHを水酸化
ナトリウム(4M)により7.5−7.7に調節する。
得られた処理血清はここに記載の性質を示す。▲ろ▼過
工程のかわりに720,000g、滞留時間10分で連
続流式遠心分離を行なうことができる。
例 2 例1の処理血清に所定量の分析試剤−グルコース、カリ
ウム、アルカリリン酸塩、クレアチンキナーゼ、尿素、
乳酸塩脱水素酵素(LDH)、アラニン−アミノ転移酵
素(SGPT)、トリグリセリド、コレストロール、お
よびその他の、任意の分析方法の校正にまた分析の対照
試験に使用される分析試剤、特に臨床的に重要なものを
添加して校正用剤または対照試験用剤とする。対照用材
料のさらに具体的な例を次表に示す。
*テクニコン(Technicon)社SMAC(テク
ニコン社登録名)で分析して求めた通常値 配合した血清を次に一定量づつに分け、使用までの貯蔵
のために保存し、または凍結乾燥する。分析試剤添加の
前に、処理血清のナトリウムおよび塩化物濃度は任意の
便宜な方法例えば透析または膜▲ろ▼過によつて減少さ
せることができ血清を濃縮することができる。血清はま
た、pH処理および▲ろ▼過または遠心分離の前に、濃
縮することができナトリウムおよび塩化物濃度を減少さ
せることができる。
例 3 例1と同様に操作し、▲ろ▼過後の血清を凍結乾燥す
る。この凍結乾燥した材料は再び液状に戻し例1に記し
たように安定化することができる。
例 4 ウシ血清のかわりにヒト血清を処理する以外、実質的に
例1と同様に操作する。当業者にとつては、明細書に記
載し請求の範囲に記載した発明の趣旨および範囲を逸脱
することなしに本発明において種々の変形が可能である
ことが理解されるであろう。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】酸を添加する処理により血清のpHをより
    酸性にすることによつて血清の一つの、または複数の成
    分を不溶化し、そして不溶化した成分を血清から分離す
    る工程から成る高分子脂質成分の著しい損失なしに血清
    中間体を製造する方法。
  2. 【請求項2】生成し分離した血清を凍結または凍結乾燥
    する請求項1に記載の方法。
  3. 【請求項3】生成し分離した血清を安定化する請求項1
    に記載の方法。
  4. 【請求項4】安定化した血清を凍結乾燥する請求項3に
    記載の方法。
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