JPH0688804A - フルクトースセンサ - Google Patents
フルクトースセンサInfo
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- JPH0688804A JPH0688804A JP5051920A JP5192093A JPH0688804A JP H0688804 A JPH0688804 A JP H0688804A JP 5051920 A JP5051920 A JP 5051920A JP 5192093 A JP5192093 A JP 5192093A JP H0688804 A JPH0688804 A JP H0688804A
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- fructose
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- enzyme
- electrode
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 信頼性の高いフルクトースセンサを得る。
【構成】 絶縁性の基板１上に測定極４と対極５を主体
とする電極系を設け、前記電極系上に親水性高分子と酵
素と電子受容体を含む反応層を設置したフルクトースセ
ンサ。
とする電極系を設け、前記電極系上に親水性高分子と酵
素と電子受容体を含む反応層を設置したフルクトースセ
ンサ。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、試料中のフルクトース
について、迅速かつ高精度な定量を簡便に実施すること
のできるフルクトースセンサに関する。
について、迅速かつ高精度な定量を簡便に実施すること
のできるフルクトースセンサに関する。
【０００２】
【従来の技術】フルクトース（果糖）は果物をはじめと
する食品中に広く含有される糖として知られており、そ
の濃度の測定には種々の方法が用いられている。なかで
も酵素電極反応を応用したフルクトースセンサを用いる
方法は、選択性に優れかつ迅速、簡便な測定法として種
々の試みがなされており、透析膜を用いたフルクトース
センサの例がある（Biosensors & Bioelectronics,6(19
91)55-72.）。このフルクトースセンサは、膜に固定化
されたフルクトースデヒドロゲナーゼ（以下ＦＤＨと略
す）と透析膜が組み合わされており、測定系全体として
は電子受容体が予め緩衝液に溶解された状態で構成され
ている。この測定系にフルクトースを含む試料液を滴下
し、酵素反応で生成した還元型の電子受容体を電気化学
的に酸化する際の電流値からフルクトース濃度を求める
ものである。
する食品中に広く含有される糖として知られており、そ
の濃度の測定には種々の方法が用いられている。なかで
も酵素電極反応を応用したフルクトースセンサを用いる
方法は、選択性に優れかつ迅速、簡便な測定法として種
々の試みがなされており、透析膜を用いたフルクトース
センサの例がある（Biosensors & Bioelectronics,6(19
91)55-72.）。このフルクトースセンサは、膜に固定化
されたフルクトースデヒドロゲナーゼ（以下ＦＤＨと略
す）と透析膜が組み合わされており、測定系全体として
は電子受容体が予め緩衝液に溶解された状態で構成され
ている。この測定系にフルクトースを含む試料液を滴下
し、酵素反応で生成した還元型の電子受容体を電気化学
的に酸化する際の電流値からフルクトース濃度を求める
ものである。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】上記構成のフルクトー
スセンサでは種々の膜を用いており、このため拡散にと
もなう応答の遅れが大きくなる。また、測定系が液体を
含んだ形態で構成されているため測定の操作性を向上さ
せることが難しく、また測定系の維持管理が煩雑であっ
た。
スセンサでは種々の膜を用いており、このため拡散にと
もなう応答の遅れが大きくなる。また、測定系が液体を
含んだ形態で構成されているため測定の操作性を向上さ
せることが難しく、また測定系の維持管理が煩雑であっ
た。
【０００４】
【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
めに本発明は、絶縁性の基板上に測定極と対極からなる
電極系を設け、前記電極系上に親水性高分子と酵素と電
子受容体を主体とする反応層を設置したことを特徴とす
る。
めに本発明は、絶縁性の基板上に測定極と対極からなる
電極系を設け、前記電極系上に親水性高分子と酵素と電
子受容体を主体とする反応層を設置したことを特徴とす
る。
【０００５】
【作用】上記構成により基板上に電極反応部分と、酵素
と基質および電子受容体の反応部分を一体化することが
でき、これにより試料液以外には何等の液体を用いるこ
となくフルクトース濃度を迅速に測定することができ
る。すなわち、簡易操作でかつ高い信頼性を有するフル
クトースセンサを得ることができる。
と基質および電子受容体の反応部分を一体化することが
でき、これにより試料液以外には何等の液体を用いるこ
となくフルクトース濃度を迅速に測定することができ
る。すなわち、簡易操作でかつ高い信頼性を有するフル
クトースセンサを得ることができる。
【０００６】
【実施例】以下、本発明を実施例により説明する。
【０００７】（実施例１）図１は本発明のフルクトース
センサの一実施例として作製したセンサの断面図であ
る。また図２は図１の斜め上方向からみた分解斜視図を
示した図である（反応層は図示せず）。
センサの一実施例として作製したセンサの断面図であ
る。また図２は図１の斜め上方向からみた分解斜視図を
示した図である（反応層は図示せず）。
【０００８】以下、フルクトースセンサの作製方法につ
いて説明する。ポリエチレンテレフタレートからなる絶
縁性の基板１に、スクリーン印刷により銀ペ−ストを印
刷しリ−ド２、３を形成した。さらに印刷法により、樹
脂バインダーを含む導電性カーボンペーストを用いて電
極系（測定極４、対極５）と絶縁性ペーストを用いて絶
縁層６を順次形成した。
いて説明する。ポリエチレンテレフタレートからなる絶
縁性の基板１に、スクリーン印刷により銀ペ−ストを印
刷しリ−ド２、３を形成した。さらに印刷法により、樹
脂バインダーを含む導電性カーボンペーストを用いて電
極系（測定極４、対極５）と絶縁性ペーストを用いて絶
縁層６を順次形成した。
【０００９】絶縁層６は測定極４の露出部分の面積（約
１ｍｍ2）を一定とし、かつリ−ド２、３を部分的に覆
っている。
１ｍｍ2）を一定とし、かつリ−ド２、３を部分的に覆
っている。
【００１０】次に、前記電極系上に親水性高分子として
カルボキシメチルセルロ−ス（以下ＣＭＣと略す）の
０．５ｗｔ％水溶液を滴下、乾燥させてＣＭＣ層を形成
した。つづいて、前記ＣＭＣ層上に酵素としてＦＤＨ
（東洋紡製フルクトースデヒドロゲナーゼ）１０００Ｕ
および電子受容体としてフェリシアン化カリウム３３ｍ
ｇを、ＣＭＣ０．５ｗｔ％を含むリン酸−クエン酸緩衝
液（０．２Ｍ：Ｎａ2ＨＰＯ4−０．１Ｍ：Ｃ3Ｈ4（Ｏ
Ｈ）（ＣＯＯＨ）3；ｐＨ＝５．０）１ｍｌに溶解させ
た混合溶液を４μｌ滴下し、５０℃の温風乾燥器中で１
０分間乾燥させて反応層７を形成した。反応層の外周部
分は直径約３．６ｍｍであり、対極の直径に略一致して
いる。
カルボキシメチルセルロ−ス（以下ＣＭＣと略す）の
０．５ｗｔ％水溶液を滴下、乾燥させてＣＭＣ層を形成
した。つづいて、前記ＣＭＣ層上に酵素としてＦＤＨ
（東洋紡製フルクトースデヒドロゲナーゼ）１０００Ｕ
および電子受容体としてフェリシアン化カリウム３３ｍ
ｇを、ＣＭＣ０．５ｗｔ％を含むリン酸−クエン酸緩衝
液（０．２Ｍ：Ｎａ2ＨＰＯ4−０．１Ｍ：Ｃ3Ｈ4（Ｏ
Ｈ）（ＣＯＯＨ）3；ｐＨ＝５．０）１ｍｌに溶解させ
た混合溶液を４μｌ滴下し、５０℃の温風乾燥器中で１
０分間乾燥させて反応層７を形成した。反応層の外周部
分は直径約３．６ｍｍであり、対極の直径に略一致して
いる。
【００１１】リン酸塩、クエン酸、ＦＤＨおよび電子受
容体の混合溶液を滴下すると、最初に形成したＣＭＣ層
は一度溶解し、その後の乾燥過程で酵素などと混合され
た形で反応層７を形成する。しかし、撹拌等をともなわ
ないため完全な混合状態とはならず、電極系表面はＣＭ
Ｃのみによって被覆された状態となる。すなわち、酵素
および電子受容体などが電極系表面に接触しないため
に、電極系表面へのタンパク質の吸着や、フェリシアン
化カリウムのような酸化能を有する物質の化学的作用に
よる電極系の特性変化が起こり難くなるもの考えられ、
その結果、高精度なセンサ応答を有するフルクトースセ
ンサ得ることができる。
容体の混合溶液を滴下すると、最初に形成したＣＭＣ層
は一度溶解し、その後の乾燥過程で酵素などと混合され
た形で反応層７を形成する。しかし、撹拌等をともなわ
ないため完全な混合状態とはならず、電極系表面はＣＭ
Ｃのみによって被覆された状態となる。すなわち、酵素
および電子受容体などが電極系表面に接触しないため
に、電極系表面へのタンパク質の吸着や、フェリシアン
化カリウムのような酸化能を有する物質の化学的作用に
よる電極系の特性変化が起こり難くなるもの考えられ、
その結果、高精度なセンサ応答を有するフルクトースセ
ンサ得ることができる。
【００１２】前記のようにして反応層７を形成した後、
カバー９およびスペーサー８を図２中、一点鎖線で示す
ような位置関係をもって接着した。カバーに透明な材料
を用いると、反応層の状態や試料液の導入状況を外部か
ら極めて容易に確認することが可能である。
カバー９およびスペーサー８を図２中、一点鎖線で示す
ような位置関係をもって接着した。カバーに透明な材料
を用いると、反応層の状態や試料液の導入状況を外部か
ら極めて容易に確認することが可能である。
【００１３】また、カバーを装着するとカバーとスペー
サーによって出来る空間部の毛細管現象によって、試料
液はセンサ先端の試料供給孔１０に接触させるだけの簡
易操作で容易に反応層部分へ導入される。試料液の供給
量はカバーとスペーサーによって生じる空間容積に依存
するため、予め定量する必要がない。さらに、測定中の
試料液の蒸発を最小限に抑えることができ、精度の高い
測定が可能となる。
サーによって出来る空間部の毛細管現象によって、試料
液はセンサ先端の試料供給孔１０に接触させるだけの簡
易操作で容易に反応層部分へ導入される。試料液の供給
量はカバーとスペーサーによって生じる空間容積に依存
するため、予め定量する必要がない。さらに、測定中の
試料液の蒸発を最小限に抑えることができ、精度の高い
測定が可能となる。
【００１４】上記のように作製したフルクトースセンサ
に試料液としてフルクトース水溶液３μｌを試料供給孔
１０より供給した。試料液は毛細管現象によって速やか
に空気孔１１部分まで達し、電極系上の反応層７が溶解
した。
に試料液としてフルクトース水溶液３μｌを試料供給孔
１０より供給した。試料液は毛細管現象によって速やか
に空気孔１１部分まで達し、電極系上の反応層７が溶解
した。
【００１５】試料液を供給してから一定時間後に電極系
の対極５を基準にして測定極４にアノード方向へ＋０．
５Ｖのパルス電圧を印加し、５秒後の電流値を測定した
ところ、試料液中のフルクトース濃度に比例した応答電
流値が得られた。
の対極５を基準にして測定極４にアノード方向へ＋０．
５Ｖのパルス電圧を印加し、５秒後の電流値を測定した
ところ、試料液中のフルクトース濃度に比例した応答電
流値が得られた。
【００１６】反応層７が試料液に溶解すると、試料液中
のフルクトースはＦＤＨによって酸化され５−ケト−フ
ルクトースが生成する。ＦＤＨによる酸化反応で移動し
た電子によってフェリシアン化カリウムがフェロシアン
化カリウムに還元される。次に、前記のパルス電圧の印
加により、生成したフェロシアン化カリウムの酸化電流
が得られ、この電流値は基質であるフルクトースの濃度
に対応する。
のフルクトースはＦＤＨによって酸化され５−ケト−フ
ルクトースが生成する。ＦＤＨによる酸化反応で移動し
た電子によってフェリシアン化カリウムがフェロシアン
化カリウムに還元される。次に、前記のパルス電圧の印
加により、生成したフェロシアン化カリウムの酸化電流
が得られ、この電流値は基質であるフルクトースの濃度
に対応する。
【００１７】（実施例２）上記実施例１と反応層７の組
成以外は全て同じであるので、ここでは省略して反応層
７に関してのみ説明する。
成以外は全て同じであるので、ここでは省略して反応層
７に関してのみ説明する。
【００１８】上記実施例１と同様に作成した電極系上に
ＣＭＣ０．５ｗｔ％水溶液を滴下、乾燥させてＣＭＣ層
を形成した。続いて、前記ＣＭＣ層に酵素としてＦＤＨ
４００ＵをＣＭＣ０．５ｗｔ％を含むリン酸−クエン酸
緩衝液１ｍｌに溶解させた混合溶液を４μｌ滴下し、５
０℃の温風乾燥器中で２０分間乾燥させＦＤＨ層を形成
した。続いてポリビニルピロリドン（以下ＰＶＰと略
す）の２ｗｔ％のエタノール溶液をＦＤＨ層上に４μｌ
滴下し約２０分間室温で乾燥させＰＶＰ層を形成した。
最後に、フェリシアン化カリウム１９０ｍｇを精製大豆
レシチン０．５ｗｔ％のエタノール溶液に分散させ、Ｐ
ＶＰ層上に３μｌ滴下し室温で２〜３時間放置して乾燥
させ、フェリシアン化カリウム層を形成した。
ＣＭＣ０．５ｗｔ％水溶液を滴下、乾燥させてＣＭＣ層
を形成した。続いて、前記ＣＭＣ層に酵素としてＦＤＨ
４００ＵをＣＭＣ０．５ｗｔ％を含むリン酸−クエン酸
緩衝液１ｍｌに溶解させた混合溶液を４μｌ滴下し、５
０℃の温風乾燥器中で２０分間乾燥させＦＤＨ層を形成
した。続いてポリビニルピロリドン（以下ＰＶＰと略
す）の２ｗｔ％のエタノール溶液をＦＤＨ層上に４μｌ
滴下し約２０分間室温で乾燥させＰＶＰ層を形成した。
最後に、フェリシアン化カリウム１９０ｍｇを精製大豆
レシチン０．５ｗｔ％のエタノール溶液に分散させ、Ｐ
ＶＰ層上に３μｌ滴下し室温で２〜３時間放置して乾燥
させ、フェリシアン化カリウム層を形成した。
【００１９】この後、実施例１と同様にカバー、スペー
サーを用いてセンサを組み立て、フルクトースに対する
応答を測定したところ良好な直線性が得られた。また、
４０℃での保存信頼性を評価したところ、実施例１と比
較して１ヶ月後においても初期応答性を維持するなど、
優れた保存特性を有することがわかった。一方で、実施
例２のセンサの反応層は、酵素を主体にする層と電子受
容体を主体とする層の少なくとも２層からなる多層構成
であるのに対し、実施例１のセンサは酵素と電子受容体
が混合されて単層構成になっているので、基質溶液と反
応層が速やかに溶解し、溶解速度および拡散速度の点で
実施例２より有利であり約１０秒程度でも基質濃度にセ
ンサ応答を得ることが可能であった。
サーを用いてセンサを組み立て、フルクトースに対する
応答を測定したところ良好な直線性が得られた。また、
４０℃での保存信頼性を評価したところ、実施例１と比
較して１ヶ月後においても初期応答性を維持するなど、
優れた保存特性を有することがわかった。一方で、実施
例２のセンサの反応層は、酵素を主体にする層と電子受
容体を主体とする層の少なくとも２層からなる多層構成
であるのに対し、実施例１のセンサは酵素と電子受容体
が混合されて単層構成になっているので、基質溶液と反
応層が速やかに溶解し、溶解速度および拡散速度の点で
実施例２より有利であり約１０秒程度でも基質濃度にセ
ンサ応答を得ることが可能であった。
【００２０】上記実施例ではＰＶＰ層を形成している
が、これは必ずしも必要ではない。反応層を酵素を主体
にする層と電子受容体を主体にする層に単に分離するだ
けでも、混合した反応層と比較して保存信頼性が大幅に
向上した。しかしながら、ＰＶＰからなる分離層を設け
たことにより、電子受容体と酵素を十分に分離すること
ができるめ、保存信頼性を更に向上させることができ
た。ここで、分離層としてＰＶＰを用いたのは、ＰＶＰ
は親水性高分子でアルコールにも溶解するので、ＰＶＰ
のアルコール溶液を滴下すれば酵素がアルコールに溶解
することなく分離層として酵素を被膜することができ、
また基質溶液は水溶液であるため、基質溶液が供給され
るとＰＶＰは速やかに水と親和し、酵素と基質が反応で
きるからである。従って、この分離層はＰＶＰに限定さ
れることなく有機溶剤にも可溶な親水性高分子でも同様
の効果を得ることができる。また、上記実施例ではＰＶ
Ｐの濃度が２ｗｔ％となっているが、ＰＶＰの濃度につ
いて検討を行なったところ４ｗｔ％よりも濃度が高くな
ると、最後に形成するフェリシアン化カリウム層の溶媒
であるエタノールとＰＶＰが溶解してしまいフェリシア
ン化カリウム層が乾燥しきらない、あるいは長時間を有
するなどセンサ作製に支障を来した。従ってＰＶＰの濃
度としては４ｗｔ％以下が好適であった。
が、これは必ずしも必要ではない。反応層を酵素を主体
にする層と電子受容体を主体にする層に単に分離するだ
けでも、混合した反応層と比較して保存信頼性が大幅に
向上した。しかしながら、ＰＶＰからなる分離層を設け
たことにより、電子受容体と酵素を十分に分離すること
ができるめ、保存信頼性を更に向上させることができ
た。ここで、分離層としてＰＶＰを用いたのは、ＰＶＰ
は親水性高分子でアルコールにも溶解するので、ＰＶＰ
のアルコール溶液を滴下すれば酵素がアルコールに溶解
することなく分離層として酵素を被膜することができ、
また基質溶液は水溶液であるため、基質溶液が供給され
るとＰＶＰは速やかに水と親和し、酵素と基質が反応で
きるからである。従って、この分離層はＰＶＰに限定さ
れることなく有機溶剤にも可溶な親水性高分子でも同様
の効果を得ることができる。また、上記実施例ではＰＶ
Ｐの濃度が２ｗｔ％となっているが、ＰＶＰの濃度につ
いて検討を行なったところ４ｗｔ％よりも濃度が高くな
ると、最後に形成するフェリシアン化カリウム層の溶媒
であるエタノールとＰＶＰが溶解してしまいフェリシア
ン化カリウム層が乾燥しきらない、あるいは長時間を有
するなどセンサ作製に支障を来した。従ってＰＶＰの濃
度としては４ｗｔ％以下が好適であった。
【００２１】上記実施例１および２においては、ＦＤＨ
が３９．３Ｕ／ｃｍ2、フェリシアン化カリウムが１．
３ｍｇ／ｃｍ2がそれぞれ担持されている。これら酵
素、電子受容体の担持量について検討したところ、ＦＤ
Ｈについては担持量が５Ｕ／ｃｍ2より少ないと反応速
度が低下し測定に長時間を要するなどの影響が出た。し
たがって、ＦＤＨの担持量としては５Ｕ／ｃｍ2以上が
好適であった。
が３９．３Ｕ／ｃｍ2、フェリシアン化カリウムが１．
３ｍｇ／ｃｍ2がそれぞれ担持されている。これら酵
素、電子受容体の担持量について検討したところ、ＦＤ
Ｈについては担持量が５Ｕ／ｃｍ2より少ないと反応速
度が低下し測定に長時間を要するなどの影響が出た。し
たがって、ＦＤＨの担持量としては５Ｕ／ｃｍ2以上が
好適であった。
【００２２】また、フェリシアン化カリウムの担持量と
しては２．７ｍｇ／ｃｍ2より多くなると平滑なあるい
は十分な強度を持った反応層を形成することができなく
なるなどの影響が見られた。これらのことより、フェリ
シアン化カリウムの担持量としては２．７ｍｇ／ｃｍ2
以下が好適であった。更に、実施例１ではＦＤＨとフェ
リシアン化カリウムの混合溶液に添加する親水性高分子
の濃度を高めるなど、混合溶液の粘性を高めてやると、
フェリシアン化カリウムの担持量は６．５ｍｇ／ｃｍ2
まで増やすことが可能であった。また、実施例２におい
ては、フェリシアン化カリウムの結晶の粒径を細かくし
たり、分散剤の濃度を高めてやることで、実施例１同様
にフェリシアン化カリウムの担持量を６．５ｍｇ／ｃｍ
2まで増やすことが可能であった。
しては２．７ｍｇ／ｃｍ2より多くなると平滑なあるい
は十分な強度を持った反応層を形成することができなく
なるなどの影響が見られた。これらのことより、フェリ
シアン化カリウムの担持量としては２．７ｍｇ／ｃｍ2
以下が好適であった。更に、実施例１ではＦＤＨとフェ
リシアン化カリウムの混合溶液に添加する親水性高分子
の濃度を高めるなど、混合溶液の粘性を高めてやると、
フェリシアン化カリウムの担持量は６．５ｍｇ／ｃｍ2
まで増やすことが可能であった。また、実施例２におい
ては、フェリシアン化カリウムの結晶の粒径を細かくし
たり、分散剤の濃度を高めてやることで、実施例１同様
にフェリシアン化カリウムの担持量を６．５ｍｇ／ｃｍ
2まで増やすことが可能であった。
【００２３】また、上記実施例１および２ではｐＨ＝
５．０のリン酸−クエン酸緩衝液を用いているが、電極
上に担持されたＦＤＨの触媒反応のｐＨ依存性について
検討を行なったところｐＨ＝２．５未満およびｐＨ＝
８．５より大きくなるとＦＤＨが失活し、センサの応答
が著しく低下した。これらのことより、使用する緩衝液
のｐＨとしてはｐＨ＝２．５以上ｐＨ＝８．５以下が好
適であり、特にｐＨ＝４．０以上ｐＨ＝６．０以下で、
フルクトース濃度とセンサ応答値に良好な直線関係が得
られた。
５．０のリン酸−クエン酸緩衝液を用いているが、電極
上に担持されたＦＤＨの触媒反応のｐＨ依存性について
検討を行なったところｐＨ＝２．５未満およびｐＨ＝
８．５より大きくなるとＦＤＨが失活し、センサの応答
が著しく低下した。これらのことより、使用する緩衝液
のｐＨとしてはｐＨ＝２．５以上ｐＨ＝８．５以下が好
適であり、特にｐＨ＝４．０以上ｐＨ＝６．０以下で、
フルクトース濃度とセンサ応答値に良好な直線関係が得
られた。
【００２４】なお、上記実施例１および２では酵素にフ
ルクトースデヒドロゲナーゼ（ＦＤＨ）を用いたが、こ
れに限定されることはない。ヘキソキナーゼ、ホスホグ
ルコースイソメラーゼ、グルコース−６−ホスフェイト
デヒドロゲナーゼの組み合せからなる酵素、あるいはグ
ルコースイソメラーゼ、グルコースオキシダーゼの組み
合せからなる酵素を前記ＦＤＨの替わりに用いても優れ
たセンサ応答がられた。
ルクトースデヒドロゲナーゼ（ＦＤＨ）を用いたが、こ
れに限定されることはない。ヘキソキナーゼ、ホスホグ
ルコースイソメラーゼ、グルコース−６−ホスフェイト
デヒドロゲナーゼの組み合せからなる酵素、あるいはグ
ルコースイソメラーゼ、グルコースオキシダーゼの組み
合せからなる酵素を前記ＦＤＨの替わりに用いても優れ
たセンサ応答がられた。
【００２５】また，上記実施例１および２では親水性高
分子としてＣＭＣを用いたが、これに限定されることは
なく、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、
ゼラチンおよびその誘導体、アクリル酸およびその塩、
メタアクリル酸およびその塩、スターチおよびその誘導
体、無水マレイン酸およびその塩、そして、セルロース
誘導体、具体的には、ヒドロキシプロピルセルロース、
メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチ
ルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、カ
ルボキシメチルエチルセルロースを用いても同様の効果
が得られた。
分子としてＣＭＣを用いたが、これに限定されることは
なく、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、
ゼラチンおよびその誘導体、アクリル酸およびその塩、
メタアクリル酸およびその塩、スターチおよびその誘導
体、無水マレイン酸およびその塩、そして、セルロース
誘導体、具体的には、ヒドロキシプロピルセルロース、
メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチ
ルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース、カ
ルボキシメチルエチルセルロースを用いても同様の効果
が得られた。
【００２６】一方、電子受容体としては、上記実施例１
および２に示したフェリシアン化カリウムは安定性や反
応速度の点などから優れているが、これ以外にもｐ−ベ
ンゾキノン、フェロセンなども使用できる。
および２に示したフェリシアン化カリウムは安定性や反
応速度の点などから優れているが、これ以外にもｐ−ベ
ンゾキノン、フェロセンなども使用できる。
【００２７】また、上記実施例１および２においては酵
素および電子受容体が試料液に溶解する方式について示
したが、これに制限されることはなく、固定化によって
試料液に不溶化させた場合にも本発明を適用することが
できる。
素および電子受容体が試料液に溶解する方式について示
したが、これに制限されることはなく、固定化によって
試料液に不溶化させた場合にも本発明を適用することが
できる。
【００２８】さらに、上記実施例１および２では測定極
と対極からなる２電極系について述べたが、参照極を加
えた３電極方式とするとより精度の高い測定が可能であ
る。
と対極からなる２電極系について述べたが、参照極を加
えた３電極方式とするとより精度の高い測定が可能であ
る。
【００２９】
【発明の効果】以上のように本発明によると、高い操作
性と信頼性を有するフルクトースセンサを得ることがで
き、これにより試料液中のフルクトース濃度をきわめて
容易に測定することができる。
性と信頼性を有するフルクトースセンサを得ることがで
き、これにより試料液中のフルクトース濃度をきわめて
容易に測定することができる。
【図１】本発明の一実施例フルクトースセンサの断面図
【図２】同フルクトースセンサにおいて反応層を除いた
分解斜視図
分解斜視図
１ 絶縁性の基板 ２、３ リード ４ 測定極 ５ 対極 ６ 絶縁層 ７ 反応層 ８ スペーサー ９ カバー １０ 試料供給孔 １１ 空気孔
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 南海 史朗 大阪府門真市大字門真1006番地 松下電器 産業株式会社内
Claims (9)
- 【請求項１】絶縁性の基板に形成した測定極と対極から
なる電極系と、前記電極系上に形成した反応層からな
り、前記反応層が少なくとも親水性高分子と酵素と電子
受容体からなることを特徴とするフルクトースセンサ。 - 【請求項２】絶縁性の基板に形成した測定極と対極から
なる電極系と、前記電極系上に形成した反応層からな
り、前記反応層が酵素および親水性高分子を主体とする
層と電子受容体を主体とする層の少なくとも２層からな
ることを特徴とするフルクトースセンサ。 - 【請求項３】酵素がフルクトースデヒドロゲナーゼ、あ
るいはヘキソキナーゼとホスホグルコースイソメラーゼ
とグルコース−６−ホスフェイトデヒドロゲナーゼの組
合せ、あるいはグルコースイソメラーゼとグルコースオ
キシダーゼの組合せのいずれかである請求項１もしくは
２記載のフルクトースセンサ。 - 【請求項４】フルクトースデヒドロゲナーゼの担持量が
５Ｕ／ｃｍ2以上である請求項３記載のフルクトースセ
ンサ。 - 【請求項５】電子受容体がフェリシアン化カリウムであ
る請求項１または２記載のフルクトースセンサ。 - 【請求項６】フェリシアン化カリウムの担持量が６．５
ｍｇ／ｃｍ2以下である請求項４記載のフルクトースセ
ンサ。 - 【請求項７】反応層に緩衝液の成分となる試薬を含む請
求項１または２記載のフルクトースセンサ。 - 【請求項８】緩衝液の成分となる試薬がリン酸塩あるい
はリン酸塩とクエン酸のいずれかである請求項６記載の
フルクトースセンサ。 - 【請求項９】緩衝液のｐＨがｐＨ＝２．５以上８．５以
下である請求項７に記載のフルクトースセンサ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP05192093A JP3158762B2 (ja) | 1992-03-13 | 1993-03-12 | フルクトースセンサ |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-54856 | 1992-03-13 | ||
| JP5485692 | 1992-03-13 | ||
| JP05192093A JP3158762B2 (ja) | 1992-03-13 | 1993-03-12 | フルクトースセンサ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0688804A true JPH0688804A (ja) | 1994-03-29 |
| JP3158762B2 JP3158762B2 (ja) | 2001-04-23 |
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ID=26392508
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP05192093A Expired - Fee Related JP3158762B2 (ja) | 1992-03-13 | 1993-03-12 | フルクトースセンサ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3158762B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0685737A1 (en) * | 1994-06-02 | 1995-12-06 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor and method for producing the same |
| ES2091714A1 (es) * | 1994-07-11 | 1996-11-01 | Univ Alcala Henares | Biosensor para la medida de fructosa, manera de prepararlo y su aplicacion al analisis de fructosa en productos alimenticios. |
| US6258254B1 (en) * | 1997-07-28 | 2001-07-10 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| JP2011214912A (ja) * | 2010-03-31 | 2011-10-27 | Cci Corp | バイオセンサ |
-
1993
- 1993-03-12 JP JP05192093A patent/JP3158762B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0685737A1 (en) * | 1994-06-02 | 1995-12-06 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor and method for producing the same |
| US5575895A (en) * | 1994-06-02 | 1996-11-19 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor and method for producing the same |
| ES2091714A1 (es) * | 1994-07-11 | 1996-11-01 | Univ Alcala Henares | Biosensor para la medida de fructosa, manera de prepararlo y su aplicacion al analisis de fructosa en productos alimenticios. |
| US6258254B1 (en) * | 1997-07-28 | 2001-07-10 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Biosensor |
| JP2011214912A (ja) * | 2010-03-31 | 2011-10-27 | Cci Corp | バイオセンサ |
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|---|---|
| JP3158762B2 (ja) | 2001-04-23 |
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