JPH0699462B2

JPH0699462B2 - ラクト−ス高級脂肪酸誘導体

Info

Publication number: JPH0699462B2
Application number: JP25771386A
Authority: JP
Inventors: 英紀宮地; 秀三郎北国; 貞雄広田; 寛菊池
Original assignee: Meito Sangyo KK
Current assignee: Meito Sangyo KK
Priority date: 1985-10-31
Filing date: 1986-10-29
Publication date: 1994-12-07
Anticipated expiration: 2009-12-07
Also published as: JPS62209092A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は、臓器指向性とくには肝実質細胞に特異的親和
性を有する製剤、たとえばリポソームの構成成分として
有用な新規なラクトース高級脂肪酸誘導体に関する。

更に詳しくは、本発明は下記式（Ｉ）：（但し式中、Ｒは水素原子又はアシル基を示し、COR¹は
C₁₂〜C₃₀の脂肪酸残基を示し、はαもしくはβ結合を示す。）で表わされるラクトース高級脂肪酸誘導体に関する。

〔従来の技術〕

薬学及び医学分野において、臓器指向型製剤が注目され
ており、たとえば薬物をリポソームに含有せしめて投与
することにより、薬物を所望臓器に選択的に運搬せしめ
ようとする技術に関していくつかの提案が行なわれてい
る。これらのうち、肝実質細胞指向性リポソームに関し
て、特開昭55-98121号、バイオキミカ・バキオフイジカ
・アクタ（B.B.A.）497巻、760〜765（1977）及び734
巻、40〜47（1983）に記載されており、アシアロガング
リオシド配合リポソーム、ジガラクトシルグリセリドの
脂肪酸ジエステル配合リポソームが提案されている。し
かしながら、これらの配合剤は天然物であって、入手困
難且つ高価であるという不利益があり、更に実際上工業
的に製造することが極めて困難であって、その利用に著
しい制約を受けている。

このような事情から、入手容易で且つ満足し得る特異的
な肝実質細胞指向性リポソームを製造するのに有用な配
合剤が望まれているが、そのような配合剤は未だ提供で
きないのが実情である。

〔発明の内容〕

本発明者らは、満足し得る特異的臓器指向性を有するリ
ポソームの配合成分を開発すべく研究を行ってきた。そ
の結果、前記式（Ｉ）で表わされる新規なラクトース高
級脂肪酸誘導体が安定に存在でき且つ容易に合成できる
ことを発見し且つその合成に成功した。更に、該新規化
合物をリポソームに結合された製剤即ち脂質膜構造体は
肝実質細胞に対して特異的親和性を有し、斯くてリポソ
ーム配合用化合物として極めて有用な肝指向型製剤分野
において、注目すべき新規化合物であることを発見し
た。

従って、本発明の目的は、たとえばリポソーム配合成分
として有用な新規ラクトース高級脂肪酸誘導体を提供す
るにある。

本発明の上記目的及び更に多くの他の目的ならびに利点
は、以下の記載から一層明らかとなるであろう。

本発明の前記式（Ｉ）で表わされるラクトース高級脂肪
酸誘導体において、Ｒがアシル基である化合物はＲが水
素原子である化合物の製造中間体であって、それ自体公
知の脱アシル化手法によって容易にＲが水素原子である
化合物に転化できる。又、Ｒが水素原子である化合物は
それ自体公知のアシル化手法を利用してＲがアシル基で
ある化合物に転化することができる。

本発明の式（Ｉ）で表わされるラクトース高級脂肪酸誘
導体において、Ｒのすべてが水素原子又はアシル基であ
る必要はないが、水素原子又はアシル基のいずれか一方
であるのが普通である。アシル基の例としては、たとえ
ば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸などの如き低級脂
肪酸から誘導される低級アシル基及び安息香酸、パラニ
トロ安息香酸などの如き芳香族カルボン酸から誘導され
るアシル基を例示することができる。これらのうちアセ
チル基もしくはベンゾイル基を好ましく例示できる。
又、該式（Ｉ）においてCOR¹〔式中、R¹は飽和もしくは
不飽和のC₁₁〜C₂₃のアルキル基〕はC₁₂〜C₃₀の脂肪酸残
基を示し、好ましくはC₁₂〜C₂₂の脂肪酸残基を例示でき
る。このような脂肪酸残基が導かれるC₁₂〜C₃₀の脂肪酸
の例としては、たとえば、以下のような脂肪酸を例示で
きる。即ちラウリン酸、ｎ−トリデカン酸、ミリスチン
酸、ｎ−ペンタデカン酸、バルミチン酸、ｎ−ヘプタデ
カン酸、ステアリン酸、ｎ−ノナデカン酸、アラキジン
酸、ｎ−ヘニコサン酸、ベヘン酸、トリコサン酸、セロ
チン酸、メリシン酸、パルミトオレイン酸、オレイン
酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、エルシン
酸、ブラシジン酸である。このうち特にアラキジン酸を
好ましく例示できる。

本発明の式（Ｉ）化合物は、例えば、下記式（II）：（但し式中、は上記したと同義である。）で表わされる2,2′,3,3′,4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−ア
シル−ラクトシルアミンもしくはラクトシルアミンに、
C₁₂〜C₃₀の脂肪酸を酸アミド結合させることにより製造
することができる。前者のラクトシルアミンを用いた場
合には、得られた化合物を脱アシル化することにより前
記式（Ｉ）においてＲが水素原子の化合物に転化でき
る。又、後者のラクトシルアミンを用いた場合には得ら
れた化合物をアシル化することにより前記式（Ｉ）にお
いてＲがアシル基の化合物に転化できる。前者のラクト
シルアミンを用いる反応を採用するのが好ましい。

この好ましい態様によれば2,2′,3,3′,4′,6,6′−ヘ
プタ−Ｏ−アシル−ラクトシルアミンとC₁₂〜C₃₀の脂肪
酸を縮合試薬の存在下に反応させるそれ自体公知の手法
によって、Ｒがアシル基である式（Ｉ）化合物を容易に
製造することができる。C₁₂〜C₃₀の脂肪酸を縮合試薬の
存在下に反応させる上記方法の代りにC₁₂〜C₃₀の脂肪酸
ハライドたとえばクロライドを縮合試薬の不存在下に反
応させるそれ自体公知の酸塩化物法の採用は、C1−位の
NH₂が−CO(CH₂)_n−CH₃でジー置換された式（Ｉ）化合物
以外の化合物の実質的な形成が回避し難いので、不都合
である。

反応は、例えばテトラヒドロフラン、ジメチルホルムア
ミド、ジクロロメタン、酢酸エチル、メタノール、エタ
ノール、ベンゼン、これらの適当な混合溶出などの如き
溶出の存在下で行なうことができる。その使用量には特
別な制約はないが、例えば式（II）化合物に対して約10
〜約100重量体の如き使用量を例示するすることができ
る。また、利用する縮合試薬の例としては、たとえば、
N,N′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）、Ｎ−
エチル−５−フェニルイソオキサゾリウム−３′−スル
ホナート、ジフェニルケテン−Ｐ−トリルイミン、１−
エトキシカルボニル−２−エトキシ−1,2−ジヒドロキ
ノリン（EEDQ）、Ｎ−イソブチルオキシカルボニル−２
−イソ−ブチルオキシ−1,2−ジヒドロキノリン（IID
Q）、ジエチルフォスフォロシアニイデイト（DEPC）な
どを例示することができる。その使用量の適宜に選択変
更できるが、例えば、式（II）化合物１モルに対して約
１〜約３モルの如き使用量を例示することができる。更
に、式（II）化合物に対するC₁₂〜C₃₀の脂肪酸の使用量
も適当に選択変更することができるが、例えば、式（I
I）化合物１モルに対して約１〜約３モル程度の使用量
を例示することができる。

反応温度及び時間も適宜に選択変更でき、例えば、約−
10°〜約＋50℃、好ましくは約０°〜約30℃の如き反応
温度、及び例えば約２〜約72時間の如き反応時間を例示
することができる。

上述のようにして得ることができるＲがアシル基である
式（Ｉ）化合物は、それ自体公知の脱アシル化反応に賦
することによって、Ｒが水素原子である式（Ｉ）化合物
に容易に転化する事ができる。該脱アシル化反応はたと
えば、溶媒の存在下に、Ｒがアシル基である式（Ｉ）化
合物を脱アシル化剤で処理する事により容易に行う事が
できる。

脱アシル化手法の実施に際しては、例えばメタノール、
エタノール、等の如き極性溶媒や又メタノール−クロロ
ホルム等の如き混合溶媒Ｒがアシル基である式（Ｉ）化
合物を溶解し、例えばナトリウムメチラートの如きナト
リウムアルコキシド、アンモニアガス、トリエチルアミ
ンなどの如きアルカリで処理する事により行なうことが
できる。

反応温度及び時間も適宜に選択・変更でき、例えば約０
°〜約40℃の如き反応温度及び例えば約１〜約10時間の
如き反応時間を例示する事ができる。

反応終了後、必要に応じて、溶媒除去、結晶化、カラム
クロマトグラフィー等のそれ自体公知の分離精製手段を
利用して式（Ｉ）目的化合物を分離、精製する事ができ
る。

本発明式（Ｉ）化合物中、Ｒが水素原子である化合物
は、既述のように、リポソームの配合成分として、肝実
質細胞に特異的親和性を有する肝指向型製剤分野におい
て有用である。又、Ｒがアシル基である式（Ｉ）化合物
はＲが水素原子である化合物を形成する中間体として有
用である。本発明の式（Ｉ）の化合物中、Ｒが水素原子
である化合物を配合したリポソーム組成物は、該組成物
で形成されたリポソーム中にたとえば適当な薬理活性化
合物を収容させた形態で優れた肝指向型薬剤とすること
ができる。

以下の試験例に、Ｒが水素原子である本発明式（Ｉ）化
合物を配合したリポソーム組成物で形成されたリポソー
ムがそのラクトース部分（もしくは該ラクトースの末端
がラクトース部分）がリポソーム（球状膜体）の表面に
突出した形態を有するためと推測される優れた肝実質指
向性を有することを示す。

参考例１ 2,2′,3,3′,4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−
ラクトシルアジド（化合物１）ラクトース10gにピリジン80ml、無水酢酸50mlを加え、
室温で一夜攪拌した。生成物を常法で処理して白色粉末
状の1,2,2′,3,3′,4′、6,6′−オクタ−Ｏ−アセチル
−ラクトース19.5g（収率98.5％）を得た。これをジク
ロルメタン40mlに溶解し、氷冷下、臭化水素飽和酢酸溶
液90ml（30％ w/v）を加え、０℃15時間攪拌した。反
応液を氷水中に注ぎ、クロロホルムで抽出し、氷水、氷
冷炭酸水素ナトリウム水の順に洗浄し、乾燥（無水硫酸
マグネシウム）後、濃縮し、粗ブロミド22.6gを得た。
得られた粗ブロミド22.6gをジメチルホルムアミド160ml
に溶解し、チッカソーダ40gを加えて一夜攪拌した。反
応混合物を氷水へ注ぎ、クロロホルムで抽出し、氷水、
５％塩酸水、氷冷炭酸水素ナトリウム水で洗浄後、乾燥
し、粗アジド21.2gを得た。これをシリカゲルクロマト
グラフィー〔溶媒系：クロロホルム−アセトン（30:
1）〕で精製し、上記化合物１を得た。

収量;15g mp;70〜73°（文献値72〜74°） ▲〔α〕²² _D▼；−20.5°（C1.0、クロロホルム）（文献値−22°） IR（KBr） 1750（OAc）、2130（N₃）元素分析値；C₂₆H₃₅N₃O₁₇（分子量、661.58）として計算値 ;C,47.20;H,5.33;N,6.35 実験値 ;C,47.00;H,5,54;N,6.06 参考例２ 2,2′,3,3′,4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−
ラクトシルアミン（化合物２）上記化合物1.61gをメタノール250mlに溶解し、二酸化白
金600mg存在下、1.5時間接触還元した後、触媒をセライ
トで濾取し、濾液を濃縮して、比晶質を化合物２を得
た。

収量;5.3g TLC;Rf値＝0.3（クロロホルム：エタノール＝19:1） ▲〔α〕²² _D▼；＋8.0°（Ｃ＝1.0、エタノール）（文献値8.6°）実施例１１−Ｎ−エイコサノイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,
4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルア
ミン上記化合物２ 5.3gをエタノール200mlに溶解し、これ
にベンゼン200mlに溶解したアラキジン酸5.6gを加えた
後、Ｎ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−1,2−ジ
ヒドロキノリン（EEDQ）4.5gを加え室温で48時間攪拌し
た。反応液を冷却し、析出した未反応のアラキジン酸を
濾取した後、濾液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲ
ルクロマトグラフィー〔溶媒系；クロロホルム−アセト
ン（30:1）〕で精製すると白色粉末状の本発明物質が得
られた。

収量;6.5g ▲〔α〕²² _D▼;21.5°（Ｃ＝1.5、クロロホルム） TLC;Rf値＝0.45（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ,0.80〜1.60（39H,Eico
sanoyl）1.97〜2.20（21H,all S,OAc×７）6.22（d,1H,
J_NH,1＝9Hz,NH） IR（KBr）;3300（NH）、1750（OAc）1680（アミドＩ）1
545（アミドII）元素分析値；C₄₆H₇₅O₁₈N（分子量930.10）として計算値 ;C 59.40,H 8.13,N 1.51％実験値 ;C 59.51,H 8.09,N 1.47％実施例２１−Ｎ−エイコサノイル−１−デオキシ−β−ラクトシ
ルアミン実施例１の製品5gをクロロホルム45ml、メタノール130m
lに溶解しナトリウムメチラート200mgを加え、室温で４
時間攪拌した。生じた析出を濾取した後、これをメタノ
ール、エーテルで充分洗浄し本発明物質を得た。

収量;3.1g mp;253〜254° ▲〔α〕²² _D▼;18.63°（C1.2、ジメチルスルホキシ
ド）¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.50（39H,Eic
osanoyl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）、1670（アミドＩ）155
5（アミドII）元素分析値；C₃₂H₆₁O₁₁N（分子量635.83）として計算値 ;C 60.45,H 9.67,N 2.20％実験値 ;C 60.22,H 9.57,N 2.12％実施例３１−Ｎ−ラウロイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,4′,
6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルアミン実施例１のアラキジン酸5.6gをラウリル酸3.6gに変更し
た以外は実施例１と同様に操作して本発明物質を得た。

収量;5.80g TLC;Rf値＝0.43（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ0.80〜1.60（23H,Lauro
yl）1.97〜2.21（21H,all S,OAc×７）6.22（d,1H,J
_NH,1＝9Hz,NH） IR（KBr）;3300（NH）、1750（OAc）1670（アミドＩ）1
540（アミドII）元素分析値；C₃₈H₅₉O₁₈N（分子量817.87）として計算値 ;C 55.81,H 7.27,N 1.71％実験値 ;C 55.42,H 7.62,N 1.66％実施例４１−Ｎ−ラウロイル−１−デオキシ−β−Ｄ−ラクトシ
ルアミン実施例３の製品3gを無水メタノール80mlに溶解し、ナト
リウムメチラート120mgを加え実施例２と同様に操作し
て本発明物質を得た。

収量;1.63g¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.50（23H,Lau
royl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）、1670（アミドＩ）154
0（アミドII）元素分析値；C₂₄H₄₅O₁₁N（分子量523.61）として計算値 ;C 55.05,H 8.66,N 2.68として実験値 ;C 54.76,H 8.49,N 2.75 実施例５１−Ｎ−ミリストイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,
4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルア
ミン実施例１のアラキジン酸5.6gをミリスチン酸4.2gに変更
する以外は実施例１と同様に操作して本発明物質を得
た。

収量;5.20g TLC;Rf値＝0.43（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ0.80〜1.60（27H,Myris
toyl）1.97〜2.22（21H,all S,OAc×７）6.22（d,1H,J
_NH,1＝9Hz,NH） IR（KBr）;3300（NH）、1750（OAc）1675（アミドＩ）1
540（アミドII）元素分析値；C₄₀H₆₃O₁₈N（分子量845.93）として計算値 ;C 56.79,H 7.51,N 1.66％実験値 ;C 56.22,H 7.71,N 1.61％実施例６１−Ｎ−ミリストイル−１−デオキシ−β−ラクトシル
アミン実施例５の製品3gを無水メタノール100mlに溶解し、ナ
トリウムメチラート120mgを加えて実施例２と同様に操
作して本発明物質を得た。

収量;1.7g¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.50（27H,Myr
istoyl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）1670（アミドＩ）1540
（アミドII）元素分析値；C₂₆H₄₉O₁₁N（分子量551.67）として計算値 ;C 56.61,H 8.95,N 2.54 実験値 ;C 56.80,H 8.80,N 2.51 実施例７１−Ｎ−パルミトイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,
4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルア
ミン実施例１のアラキジン酸5.6gをパルミチン酸4.6gに変更
した以外は実施例１と同様に操作して本発明物質を得
た。

収量;5.6g TLC;Rf値＝0.45（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ0.80〜1.60（31H,Palmi
toyl）1.97〜2.22（21H,all S,OAc×７）6.22（d,1H,J
_NH,1＝9Hz,NH） IR（KBr）;3300（NH）1750（OAc）1670（アミドＩ）154
0（アミドII）元素分析値；C₄₂H₆₇O₁₈N（分子量873.98）として計算値 ;C 57.72,H 7.73,N 1.60％実験値 ;C 58.02,H 7.41,N 1.70％実施例８１−Ｎ−パルミトイル−１−デオキシ−β−ラクトシル
アミン実施例７の製品3gを実施例２と同様に操作して本発明物
質を得た。

収量;1.8g¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.52（31H,Pal
mitoyl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）1670（アミドＩ）1540
（アミドII）元素分析値；C₂₈H₅₃O₁₁N（分子量579.72）として計算値 ;C 58.01,H 9.21,N 2.42％実験値 ;C 58.22,H 9.43,N 2.22％実施例９１−Ｎ−ステアロイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,
4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルア
ミン実施例１のアラキジン酸5.6gをステアリン酸5.1gに変更
した以外は実施例１と同様に操作して本発明物質を得
た。

収量;5.9g TLC;Rf値＝0.45（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ0.80〜1.60（35H,Stear
oyl）1.97〜2.22（21H,all S,OAc×７）6.22（d,1H,J
_NH,1＝9Hz,NH） IR（KBr）;3300（NH）1750（OAc）、1670（アミドＩ）1
540（アミドII）元素分析値；C₄₄H₇₁O₁₈N（分子量902.04）として計算値 ;C 58.59,H 7.93,N 1.55％実験値 ;C 58.79,H 8.13,N 1.70％実施例10 １−Ｎ−ステアロイル−１−デオキシ−β−ラクトシル
アミン実施例９の製品3gを実施例２と同様に操作して本発明物
質を得た。

収量;1.7g¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.50（35H,Ste
aroyl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）1670（アミドＩ）1540
（アミドII）元素分析値；C₃₀H₅₇O₁₁N（分子量607.78）として計算値 ;C 59.29,H 9.45,N 2.30％実験値 ;C 59.51,H 9.66,N 2.62％実施例11 １−Ｎ−オレオイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,4′,
6,6′−ヘプタ−Ｏ−ベンゾイル−β−ラクトシルアミ
ン参考例１の無水酢酸50mlを塩化ベンゾイル40mlに変更し
た以外は参考例１と同様に操作して2,2′,3,3′,4′,6,
6′−ヘプタ−Ｏ−ベンゾイル−β−ラクトシルアジド1
7.5g（収率70％）を得た。この10gを参考例２と同様に
操作して、2,2′,3,3′,4′,6,6′−ヘプタ−Ｏ−ベン
ゾイル−β−ラクトシルアミン8.2gを得た。

次にこの化合物8.8gを実施例１のアラキジン酸5.6gをオ
レイン酸5.1gに変更した以外は実施例１と同様に操作し
て本発明物質を得た。

収量;8.4g TLC;Rf値＝0.43（クロロホルム：アセトン＝6:1）¹ H-NMR（90MHz,CDCl₃/TMS）；δ0.80〜1.60（33H,Oleoy
l）6.22（d,1H,J_NH,1＝9Hz,NH）7.2〜8.3（35H,Bz×
７） IR（KBr）;3300（NH）1750（OBz）1670（アミドＩ）154
0（アミドII）元素分析値；C₈₁H₈₉O₁₈N（分子量1364.59）として計算値 ;C 71.30,H 6.57,N 1.03％実験値 ;C 70.90,H 6.99,N 0.99％実施例12 １−Ｎ−オレオイル−１−デオキシ−β−ラクトシルア
ミン実施例11の製品5gを実施例２と同様に操作して本発明物
質を得た。

収量;1.8g（収率82.1％）¹ H-NMR（90MHz,DMSO-d₆/TMS）；δ0.80〜1.50（33H,Ole
oyl）4.60（d,1H,J_NH,1＝10Hz,NH） IR（KBr）;3400〜3300（OH,NH）1670（アミドＩ）1555
（アミドII）元素分析値；C₃₀H₅₅O₁₁N（分子量605.76）として計算値 ;C 59.48,H 9.15,N 2.31％実験値 ;C 59.77,H 9.50,N 2.18％試験例（１）リポソームＩ（本発明物質含有）の調製Ｌ−αージミリストイルホスファチジルコリン68.8μmo
l、コレステロール68.8μmol、ジセチルホスフェート6.
8μmol、実施例２の本発明物質16μmolをクロロホルム
とメタノールの混液（2:1）に溶かした。これを試験管
に加え、窒素ガス気流中で溶媒を留去し、³H−イヌリン
240μCiを含有する1mMイヌリンのリン酸緩衝化生理食塩
水6mlを加えて振盪し、更に軽く超音波処理してリポソ
ームの懸濁液を調製した。これを40〜45°に加温し、次
いで0.2μｍの孔径を有するポリカーボネート製メンブ
ランフィルターを通過させ、粒径0.2μｍ以下のリポソ
ームの懸濁液を調製した。次にこれを超遠心分離（15万
×ｇ、１時間、２回）し、上澄みを除去することにより
リポソームに保持されなかったイヌリンを除去し、リン
酸緩衝生理食塩水を加え、全量5.62mlのリポソームの懸
濁液を得た。Ｌ−αージミリストイルホスファチジルコ
リンのコリン基をマーカーとして酵素法により定量した
ところ得られた懸濁液は0.5mlあたり全脂質として10μm
olの脂質を有していた。又、このリポソームの懸濁液は
0.5mlあたり0.64μCiのイヌリンをリポソームに保持し
ていた。

（２）リポソームII（本発明物質含有）の調製Ｌ−αージミリストイルホスファチジルコリン72.4μmo
l、コレステロール72.4μmol、ジセチルホスフェート7.
2μmol、実施例２の本発明物質８μmolをクロロホルム
とメタノールの混液に溶かす以外は上記（１）と同様に
処理し、全量5.9mlのリポソームの懸濁液を得た。得ら
れた懸濁液は0.5mlあたり全脂質として10μmolの全脂質
及び0.78μCiのイヌリンをリポソームに保持していた。

（３）リポソームIII（対照）の調製Ｌ−αージミリストイルホスファチジルコリン76.2μmo
l、コレステロール76.2μmol、ジセチルホスフェート7.
6μmolをクロロホルムに溶かす以外は上記（１）と同様
に処理し、全量5.0mlのリポソームの懸濁液を得た。得
られた懸濁液は0.5mlあたり全脂質として10μmolの全脂
質及び1.29μCiのイヌリンをリポソームに保持してい
た。

（４）³H−イヌリン溶液（対照）の調製前述の³H−イヌリン240μCiを含有する1mMイヌリンのリ
ン酸緩衝化生理食塩水6mlをリン酸緩衝化生理食塩水に
て20倍に希釈し、全量0.5mlあたり１μCiのイヌリンを
含有する溶液を調製した。

試験１（１）及び（３）で得られたリポソームの懸濁液の一部
をとり、リン酸緩衝化生理食塩水を加えて全脂質として
0.5μmol/mlとなるように希釈した。別にβ−Ｄ−ガラ
クトースに糖特異性を有するレクチン（トウゴマ（Rici
nus Communis）由来、シグマ社製）を各々100μg/ml、2
00μg/ml含むリン酸緩衝化生理食塩水を調製した。次に
リポソームの懸濁液とレクチン溶液とを1:1の比率で混
合し、軽く振盪して分光光度計測定用のセルに分注後、
波長450nmにおける透過率を経時的に測定（15分間）し
た。試験例（１）の本発明物質を含むリポソームの懸濁
液では、経時的に透過率が減少することにより、リポソ
ームの凝集が認められ、その程度はレクチン量の多い方
が著しかった。これに対して（３）のリポソームでは特
に凝集製に認められなかった。

以上のことから（１）のリポソームは本発明物質がリポ
ソーム膜に組込まれ、乳糖のガラクトース残基が膜表面
に露出していることが確認された。

試験２（１）、（２）及び（３）で得られたリポソームの懸濁
液並びに（４）で得られた³H−イヌリン溶液をそれぞれ
SD系雄性ラット（体重140〜160g）の後肢静脈内に体重1
00gあたり0.5ml注入した。30分後頸動脈放血して開腹
し、肝を摘出した。この一部をとり、リン酸緩衝化生理
食塩水中でホモジェナイズした。次いで液体シンチレー
ション法により放射活性を測定し、投与量に対する回収
率（％）を求めた。又、血清中の放射活性回収率はラッ
トの全血液を体重の6.5％、血清量を全血液の50％とみ
つもって計算した。結果を表１に示した。

表−１より明らかなように、本発明物質を含有するリポ
ソームの肝臓への分布は対照に比べ、非常に大きく、又
添加量を増すほど肝臓への指向性が増大することが確認
された。

試験３（１）及び（３）で得られたリポソームの懸濁液を用い
て末端にガラクトース残基を有し、肝実質細胞指向性を
有するアシアロフェツインによる阻害効果をみた。即
ち、試験２と同一の条件でラットにリポソーム懸濁液を
投与する１分前に、アシアロフェツインのリン酸緩衝化
生理食塩水を後肢静脈内（リポソーム注入側と反対側の
後肢）に前投与し、以後試験２と同様の操作を行った。
アシアロフェツインの投与量はラット体重100gあたり1
3.3mgとした。結果を表２に示した。

表−２より明らかなように、本発明物質を含有するリポ
ソームの肝臓への分布はアシアロフェツインの前投与に
より有意に抑制された。これに対して対照のリポソーム
ではアシアロフェツインによる影響は受けなかった。

以上のことから本発明の脂質膜形成体は、優れた肝実質
細胞への指向性を有することが確認された。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者菊池寛東京都江戸川区北葛西１丁目16番13号第一製薬研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（Ｉ）：（但し式中、Ｒは水素原子又はアシル基を示し、COR¹は
C₁₂〜C₃₀の脂肪酸残基を示し、はαもしくはβ結合を示す。）で表わされるラクトース高級脂肪酸誘導体。
【請求項２】COR¹がC₁₂〜C₂₂の脂肪酸残基である特許請
求の範囲第（１）項記載のラクトース高級脂肪酸誘導
体。
【請求項３】該アシル基がアセチル基もしくはベンゾイ
ル基である特許請求の範囲第（１）項又は第（２）項記
載のラクトース高級脂肪酸誘導体。
【請求項４】Ｒが水素原子である特許請求の範囲第
（１）項又は第（２）項記載のラクトース高級脂肪酸誘
導体。
【請求項５】ラクトース高級脂肪酸誘導体が１−Ｎ−エ
イコサノイル−１−デオキシ−β−ラクトシルアミンで
ある特許請求の範囲第（１）項記載のラクトース高級脂
肪酸誘導体。
【請求項６】ラクトース高級脂肪酸誘導体が１−Ｎ−エ
イコサノイル−１−デオキシ−2,2′,3,3′,4′,6,6′
−ヘプタ−Ｏ−アセチル−β−ラクトシルアミンである
特許請求の範囲第（１）項記載のラクトース高級脂肪酸
誘導体。