JPH07155171A

JPH07155171A - 微生物代謝産物の消臭・不活性化培養法

Info

Publication number: JPH07155171A
Application number: JP31019993A
Authority: JP
Inventors: Kazuyuki Sugawara; 和行菅原
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1993-12-10
Filing date: 1993-12-10
Publication date: 1995-06-20

Abstract

(57)【要約】【構成】微生物培養に対し阻害のない気化性消臭・不
活性化成分を微生物培養環境に充満させている。【効果】微生物が増殖するにつれ産生する代謝物の臭
気を随時除去し消臭効果を持続することできる。検査終
了培地を保存する場合、発育した微生物の集落からの悪
臭は発せず、検査終了培地を長期間保存しておくことが
できる。微生物培養培地をオートクレーブで廃棄処理す
る場合、処理室全体に悪臭を発することはない。嫌気性
菌の培養において、強い腐敗臭を発する嫌気性菌が発育
していても不快臭および目や鼻腔への刺激がなく、菌集
落の観察が時間をかけ注意深く行えるため検査成績の質
的向上が得られる。身体もしくは装着物や検査室全体に
悪臭が付着しないため不快な思いをすることがない。嫌
気性菌の発育の促進と使用機器の腐食防止をはかるため
に、嫌気性菌の代謝産物である硫化物や他の酸化物など
を高価な試薬に反応させて培養器内から除去する必要も
ない。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、微生物検査、微生物
体の採集、微生物代謝産物の採集、微生物学的活性を利
用する場合などに使用される、微生物が生存もしくは増
殖する際の不要な代謝産物を不活性化することにより、
不快臭の除去や微生物の増殖促進をはかる微生物培養法
に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】微生物の培養器の中に活性炭沫を稀に極
限られた微生物の培養目的に添加することがあるが、こ
れは微生物が発育する際、代謝物として産生する主にア
ンモニアなどによる発育阻害物の一部を除去する目的で
添加されるもので、消臭が目的ではない。この場合の活
性炭沫の消臭効果は、極微細な活性炭沫を使用しても活
性炭沫は不溶であるため、寒天ゲル内に分散しゲル表面
のみには集積しないので、ゲル表面に発育する細菌集落
から発散する気化性代謝産物の消臭化・不活性化はでき
ない。また、吸着対象物もゲル内部に拡散する水溶性物
に限定されるため消臭効果は極めて乏しい。

【０００３】さらに、消臭機能を有する物質を直接、培
地器材内に溶存もしくは懸濁添加した場合は、消臭機能
を有する最小添加濃度域であっても微生物種によっては
発育を阻害される場合があり、使用が限定される。特
に、不快臭を多量に産生する嫌気性菌群は、発育を著し
く抑制されたり、菌種によっては殺菌されることがあり
使用できない。

【０００４】また、微生物の培養では、菌の発育に伴う
独特の代謝物臭気種は簡易な菌種の鑑別情報であるが、
消臭機能を有する物質を直接、培地中に添加した場合、
菌集落からの代謝物臭気はすべて消臭され検出できず鑑
別情報とはなり得ない。

【０００５】このように、現状における微生物の培養を
目的とした作業では、発育に伴う不快臭の消臭対策は講
じられていない。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかし、微生物の中で
細菌類（なかでも嫌気性菌）は培養時に発育に伴い、イ
ンドール、メチルメルカプタン、硫化水素、硫化メチ
ル、二硫化メチルなどの硫化物、酢酸アミル、トリメチ
ルアミン、アセトアルデヒド、アンモニア、脂肪酸など
の臭気の強い化合物を産生し悪臭を発するものが多く、
この代謝物臭気が検査員の衣服、頭髪類などの身体もし
くは装着物や検査室全体に付着し除去困難なため、不快
な気分と同時に目や鼻腔などの身体への強い刺激を受け
ながら微生物検査を行っている。

【０００７】また、検査終了後も再確認事項の発生など
に対応するために短期間ながら検査終了培地を保存する
必要があるが、細菌が発育した培地は悪臭を放つため早
急に廃棄せざるを得ず目的を達し得ないことすらもあ
る。

【０００８】さらに、微生物培養に供した培地類は使用
後、オートクレーブを用い滅菌処理しないと廃棄できな
い。しかし、このオートクレーブ処理により臭気の強い
代謝産物が放散し、耐え難い悪臭が処理室全体に充満す
る。

【０００９】しかも、嫌気性菌の培養においては、培養
器内のガスから嫌気性菌の代謝産物である硫化物や他の
酸化物などをパラジュウムなど高価な試薬に反応させ、
これらを除去し嫌気性菌の発育の促進と使用機器の腐食
防止をはかっている。

【００１０】そこで、この発明は、このような微生物検
査に使用しても悪臭が発生しない微生物代謝産物の消臭
・不活性化培養法を提供することを目的として成された
ものである。

【００１１】

【課題を解決するための手段】そのため、この発明に係
る微生物代謝産物の消臭・不活性化培養法は、微生物培
養に対し阻害のない気化性消臭・不活性化成分を微生物
培養環境に充満させている。

【００１２】前記気化性消臭・不活性化成分は、一種ま
たは二種以上の植物体および植物体からの抽出物、乾留
物、精製物、もしくはこれらの合成物、誘導体の単独ま
たは組み合わせたものとしている。そして、この気化性
消臭・不活性化成分は、ゲル剤、高分子吸収剤、紙、不
織紙、布、不織布、高分子重合体、セラミックス、ゼオ
ライト、活性炭などの吸水性素材、疎水性素材、超微細
孔または多孔性物質に含有、包含、担持させたもの、も
しくは形状加工したもの、もしくは微生物培養容器に直
接含有、包含、担持、塗布したものとしている。

【００１３】前記微生物培養環境は、微生物培養容器
内、微生物培養容器の収納容器内、培養用恒温器内、も
しくは検体容器内とすることができる。

【００１４】前記植物体としては、月桂樹などの楠科、
オレガノ、ローズマリー、サルビア、タイム、ペパーミ
ントなどのシソ科、クローブなどのフトモモ科、ハイビ
スカスなどのアオイ科、キャラウェーなどのセリ科、山
椒、柑橘類などのミカン科、その他リンゴ科、ショウガ
科、バラ科などの植物体、杉科、松科、檜科、楠科、椿
科、柳科、銀杏科、ブナ科などの生木材チップから選択
される少なくとも一種以上とすることができる。

【００１５】さらに、微生物培養用培地となり得る培地
の種類としては、トリプチケースソイ寒天培地、ミュラ
ーヒントン寒天培地、ドリガルスキー改良培地、羊血液
寒天培地、チョコレート寒天培地、ブルセラＨＫ寒天培
地、アネロコロンビアウサギ血液寒天培地、バクテロイ
デスバイルエスクリン寒天培地、食塩加卵黄マンニット
寒天培地など一般的に使用する好気性菌、嫌気性菌、微
好気性菌、真菌用寒天培地および特殊寒天培地などの固
形培地、さらにはトリプチケースソイブロス、コロンビ
アブロスなどの液状培地、メンブラン培地、スライド型
簡易培地などがあり、特に限定されない。

【００１６】また、微生物培養法も、通気培養、炭酸ガ
ス培養、微好気培養、嫌気培養などがあり、特に限定さ
れない。なお、個々の培養法において、フラン器、嫌気
ボックス、培養用タッパー、培養バッグ、培養ジャーな
ど設置する培養容器は何れでも使用可能である。

【００１７】

【作用】この発明に係る微生物代謝産物の消臭・不活性
化培養法では、培養温度の上昇にともない、気化性消臭
・不活性化成分は微生物培養環境に気化分散し、微生物
が産生する代謝産物の臭気、特に悪臭を放つ微生物の揮
発性代謝成分などを中和消臭する作用や、代謝産物の不
活性作用を発揮する。

【００１８】さらに、気化性消臭・不活性化成分は、微
生物培養環境での培養恒温度域（通常３０〜３７℃）へ
の到達にともない気化量が増大するが、吸水性素材、疎
水性素材、超微細孔または多孔性物質に含有、包含、担
持させたもの、もしくは形状加工したもの、もしくは微
生物培養容器に直接含有、包含、担持、塗布したものと
すれば、均一且つ持続的に徐放し、上記作用を長時間持
続させることができる。

【００１９】また、気化した成分は培養時に微生物培地
内に極めて微量溶存するが、微生物の発育を損なうこと
なしに微生物代謝産物の消臭・不活性化の持続性が培養
後も認められる。

【００２０】

【実施例】この発明に係る微生物代謝産物の消臭・不活
性化培養法を、実施例に従って詳細に説明する。

【００２１】（実施例１）患者の創部膿を塗布した１２
枚のアネロコロンビアウサギ血液寒天培地を嫌気培養用
タッパー（１６cm×２４cm×８．５cm）に入れ、同時に
檜の木片（５cm×５cm×２cm）をタッパー内の隙間に設
置する。続いて、アネロパック・ケンキ（三菱ガス化学
株式会社製品）２袋を開封し素早くタッパー内に入れ、
タッパーの蓋を閉じ密閉し嫌気状態にして、３５℃のフ
ラン器内に入れて３日間培養する。

【００２２】（実施例２）実施例１に用いた檜の木片の
代わりに、檜のおがくずと生松葉を細片化したものを等
量混合し、その約２０ｇを布袋に入れ、これをタッパー
内の隙間に設置し、実施例１と同様に培養する。

【００２３】（実施例３）実施例１に用いた檜の木片の
代わりに、市販の植物性精油ブレンド品（エアーケムＥ
ＰＯＣ No.191；第一工業製薬株式会社製品）に１．８
％となるように寒天もしくはカラギナンを加え、沸騰水
浴中で加温溶解する。溶解後、内径３〜５cm、深さ１cm
位のシャーレ型容器内に２〜３mlずつ分注し、固化した
１個をタッパー内の隙間に設置し、実施例１と同様に培
養する。

【００２４】（実施例４）実施例１に用いた檜の木片の
代わりに、市販の植物性精油ブレンド品（エアーケムＥ
ＰＯＣ No.191；第一工業製薬株式会社製品）に檜の木
片（５cm×５cm×２cm）を３日間浸漬し、軽く水切りし
たものをタッパー内の隙間に設置し、実施例１と同様に
培養する。

【００２５】（実施例５）実施例１に用いた檜の木片の
代わりに、檜、松、楠を等量ずつ混合したものに、１／
３量の活性炭粒を加え、その約２０ｇを布袋にいれ、こ
れをタッパー内の隙間に設置し、実施例１と同様に培養
する。

【００２６】（実施例６）患者の創部膿を塗布した１２
枚のアネロコロンビアウサギ血液寒天培地のそれぞれの
蓋の部分に直径１０〜１５mmのペーパーディスクを設置
する。これに市販の植物性精油ブレンド品（エアーケム
ＥＰＯＣ No.191；第一工業製薬株式会社製品）５０μ
l を含浸させ、培地面を上に、蓋の部分を下にし、嫌気
チャンバーを用い３５℃で３日間培養する。

【００２７】（実施例７）１０サンプルのうどん麺各々
のホモジナイズ液を塗布した１０枚のトリプチケースソ
イ寒天培地と、うどん製造所の床１０ヵ所および壁５ヵ
所の計１５サンプルを食塩加卵黄マンニット培地１５枚
にサンプル毎に塗布した。さらに、従業員１０名の右手
の手指５本を第二関節より上を５％羊血液加トリプチケ
ースソイ寒天培地上にスタンプし、フラン器（内寸５０
cm×５０cm×５０cm）の庫内に入れる。同様に検体塗布
はすべて二組行い片方の組を対照とした。次に、市販の
植物性精油ブレンド品（エアーケムＥＰＯＣ No.191；
第一工業製薬株式会社製品）に１．８％となるように寒
天もしくはカラギナンを加え、沸騰水浴中で加温溶解す
る。溶解後、内径２〜５cm、深さ５〜１０cm位の深型容
器内に１０〜３０mlずつ分注し、固化した一個をフラン
器庫内の底部に設置する。そして、このフラン器におい
て３５℃で３日間培養する。

【００２８】次に、上記実施例における微生物代謝産物
の臭気強度を、官能試験により評価した結果について説
明する。

【００２９】実施例１〜６では１２種の感染性臨床材料
を培養しているため、多種多量の嫌気性菌が発育し、イ
ンドール、メチルメルカプタン、硫化水素、硫化メチ
ル、二硫化メチルなどの硫化物、酢酸アミル、トリメチ
ルアミン、アセトアルデヒド、アンモニア、脂肪酸など
臭気の強い複数の化合物を産生し、強烈な悪臭を発す
る。培養終了後、５名のパネラーに臭気を感知してもら
い、官能試験を実施した。その結果を表１に示す。対照
は、気化性消臭・不活性化成分の不存在下で通常の培養
法を行った。なお、臭気強度は、６段階臭気強度表示法
（強度０…無臭、強度１…かろうじて感知できる臭い、
強度２…何の臭いであるかが感知できる弱い臭い、強度
３…何の臭いであるかが楽に感知できる臭い、強度４…
強い臭い、強度５…強烈な臭い）で評価した。

【００３０】

【表１】

【００３１】なお、実施例７では食品、環境、手指中の
一般細菌群を培養しているため、パネラー３名が１、パ
ネラー１名が２、パネラー１名が０（対照はパネラー５
名全部が３）と著しい効果が認められた。

【００３２】また、同定確認済みの菌種〔 E.coli(２
株) 、 S.aureus(３株) 、 E.faecalis(２株) 、 H.inf
luenzae(１株) 、 E.aerogenes (１株) 、 P.aeruginos
a(３株) 、 Cl.difficile(２株) 、 B.fragilis(３株)
、 B.ureolyticus (１株) 、 Pro.acnes (２株) 、 Fu
so.nucleatum(２株) 、 Pepto.micros(１株) 、 Pepto.
anaerobius(２株) 〕について発育阻害性を調べた結
果、対照と比較し、実施例１〜７いずれも発育抑制は認
められなかった。

【００３３】

【発明の効果】この発明に係る微生物代謝産物の消臭・
不活性化培養法は、微生物検査において、微生物が増殖
するにつれ産生する代謝物の臭気を随時除去し消臭効果
を持続することできる。また、検査終了後に検査終了培
地を保存する場合にも、発育した微生物の集落からの悪
臭は発せず、検査終了培地を長期間保存しておくことが
できる。さらに、微生物培養に使用した培地をオートク
レーブで廃棄処理する場合も処理室全体に悪臭を発する
ことはない。しかも、嫌気性菌の培養において、強い腐
敗臭を発する嫌気性菌が発育していても不快臭および目
や鼻腔への刺激がなく、菌集落の観察が時間をかけ注意
深く行えるため、検査成績の質的向上が得られる。その
うえ、検査員の衣服、頭髪類などの身体もしくは装着物
や検査室全体に悪臭が付着しないため不快な思いをする
ことがない。また、嫌気性菌の発育の促進と使用機器の
腐食防止をはかるために、嫌気性菌の代謝産物である硫
化物や他の酸化物などをパラジュウムなど高価な試薬に
反応させて培養器内から除去する必要もなくなった。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】微生物培養に対し阻害のない気化性消臭
・不活性化成分を微生物培養環境に充満させたことを特
徴とする微生物代謝産物の消臭・不活性化培養法。
【請求項２】気化性消臭・不活性化成分が、一種また
は二種以上の植物体および植物体からの抽出物、乾留
物、精製物、もしくはこれらの合成物、誘導体の単独ま
たは組み合わせたものであることを特徴とする請求項１
記載の微生物代謝産物の消臭・不活性化培養法。
【請求項３】気化性消臭・不活性化成分が、吸水性素
材、疎水性素材、超微細孔または多孔性物質に含有、包
含、担持させたもの、もしくは形状加工したもの、もし
くは微生物培養容器に直接含有、包含、担持、塗布した
ものであることを特徴とする請求項１記載の微生物代謝
産物の消臭・不活性化培養法。
【請求項４】微生物培養環境が、微生物培養容器内、
微生物培養容器の収納容器内、培養用恒温器内、もしく
は検体容器内であることを特徴とする請求項１記載の微
生物代謝産物の消臭・不活性化培養法。
【請求項５】植物体を、楠科、シソ科、フトモモ科、
アオイ科、セリ科、ミカン科、その他リンゴ科、ショウ
ガ科、バラ科などの植物体、もしくは生木材チップから
選択される少なくとも一種以上としたことを特徴とする
請求項２記載の微生物代謝産物の消臭・不活性化培養
法。