JPH07196408A - 抗菌性組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】本発明は、抗菌性組成物を提供する。 【構成】エタノール及び／又は界面活性剤とザーペシン
を有効成分とする抗菌性組成物に関し、当該抗菌性組成
物は、微量で強い抗菌作用を有し、その成分の安全性か
らも医療、食品の分野で広く使用でき、特に消毒剤や感
染予防剤、食品の殺菌剤・防腐剤などに利用される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗菌性組成物を提供す
る。更に詳細には、エタノール及び／又は界面活性剤と
ザーペシンを有効成分とする抗菌性組成物を提供する。
当該抗菌性組成物は、微量で強い抗菌作用を有し、その
成分の安全性からも医療、食品の分野で広く使用でき、
特に消毒剤や感染予防剤、食品の殺菌剤・防腐剤などに
利用される。

【０００２】

【従来の技術】従来より静菌・殺菌効果を有する薬剤に
ついては種々報告されている。またその使用分野として
も食品や医療など多様である。例えば、食品に使用する
場合には食品そのものに添加して使用する方法や揮発性
の保存剤と食品を同居させる方法等がある。食品に添加
する保存剤としては有機酸、無機酸、アルコール、化学
合成品、天然物由来のものなどが知られている。また、
揮発性薬剤と同居させる方法としては、例えば徐放性エ
タノール製剤（特開昭62−265971号）等が知られてい
る。

【０００３】一方、医療用分野としては、その特殊性か
ら種々の薬剤が使用されている。例えば、消毒用エタノ
ール、ポビドンヨード、ヘキサクロロフェン、クロルヘ
キシジン、ｐ−クロロ−ｍ−キシレノール、塩化ベンザ
ルコニウム、ステリハイドや各種の界面活性剤等が知ら
れている。

【０００４】更に、抗菌性蛋白としては各種のポリペプ
チドが知られている。（特開平４−330095、特開平５−
148295、特開昭63−185997）

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来よ
り用いられていた各種抗菌剤は食品用、医療用として使
用する場合、その効果、安全性、皮膚刺激性或いは耐性
菌（例えばＭＲＳＡ）に対する作用などの点で十分に満
足できるものではない。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、このような状
況に鑑み、細菌や異種の血球を、昆虫に接種したり単に
体表に傷をつけるといった刺激を与えると体液中に誘導
される抗菌性蛋白に注目し研究を重ねた。

【０００７】ザーペシンは、このような抗菌性蛋白の一
種でセンチニクバエの幼虫体液から得られ、単離されて
そのアミノ酸配列が決定されている（特開昭63−18599
7）。更に、ザーペシン（Sapecin）をコードする遺伝子
を宿主微生物である酵母に組み込んで形質転換し、該酵
母を培養することによってザーペシンを大量に製造する
方法（特開平４−335883）も知られている。

【０００８】このようにして得られたザーペシンは単独
でもグラム陰性菌の大腸菌及びグラム陽性菌の黄色ブド
ウ状球菌に対しても強い抗菌力を有している。

【０００９】本発明者らは、上記のような状況におい
て、ザーペシンを食品用及び医療用分野での応用を図る
ために鋭意研究した結果、意外にもザーペシンとエタノ
ール及び／又は界面活性剤を併用することによってザー
ペシンの抗菌作用を著しく増強することができることを
知り本発明を完成した。即ち、本発明はエタノール及び
／又は界面活性剤とザーペシンを有効成分とする抗菌剤
組成物に関する。

【００１０】本発明の必須成分であるザーペシンは、セ
ンチニクバエの幼虫体液から抽出し精製したもの、或い
は前記した形質転換体を用いて生産したもの等、いずれ
でもよく、抗菌活性を有していれば他の成分を含有して
いてもよい。形質転換体を用いて生産されたザーペシン
が純度、生産性の面からも本発明には好適に使用されう
る。

【００１１】また、ザーペシンと併用する物質としては
エタノール及び／又は界面活性剤が使用される。エタノ
ールとしては消毒用或いは食品用として使用されるもの
であればいずれでもよい。

【００１２】また界面活性剤としては、非イオン性界面
活性剤、陽イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤
及び両性界面活性剤などが知られている。

【００１３】非イオン性界面活性剤としては、ポリオキ
シエチレンアルキルエーテルを主成分（例えば、Brij 3
5、エマルゲン120等）、ポリオキシエチレンアルキルフ
ェニールエーテルを主成分（例えば、トリトン X-100、
エマルゲン903等）、ポリオキシエチレンモノアシルエ
ステルを主成分（ニッサンノニオンＬ、エマノーン1112
等）、ソルビタンモノアシルエステル（Span 20、Crill
K1等）、ポリオキシエチレンソルビタンモノエステル
を主成分（Tween 20、エマソール1130等）、脂肪酸モノ
グリセリドを主成分としたものなどが挙げられる。

【００１４】陰イオン性界面活性剤としては脂肪酸塩
（オレイン酸ソーダ等）、高級アルコール硫酸エステル
塩（ＳＤＳ等）、アルキルベンゼンスルホン酸塩（ドデ
シルベンゼンスルホン酸ソーダ等）、胆汁酸塩類（コー
ル酸）等を主成分としたものなどが挙げられる。

【００１５】陽イオン性界面活性剤としてはアルキルア
ミン塩（ラウリルアミン酢酸塩等）、４級アンモニウム
塩（アセタミン24等）等が挙げられる。

【００１６】両性界面活性剤としてはアルキルβアラニ
ン（アンヒトール24Ａ等）、アルキルベタイン（SB−12
等）、アルキルアミノポリオキシエチレンスルフェート
（アモールフェン等）、塩酸アルキルジアミノエチルグ
リシン（ニッサンアノン＃300、テゴ-51等）が挙げられ
る。

【００１７】本発明にはこれらのいずれも使用できる。
より好ましくは殺菌剤として使用される界面活性剤が用
いられ、より好ましくは両性界面活性剤が用いられる。

【００１８】本発明においては、ザーペシンとエタノー
ルの併用、ザーペシンと界面活性剤の併用、更にザーペ
シンとエタノール及び界面活性剤の併用のいずれの形態
でもザーペシンの抗菌効果を相乗的に増強することがで
きる。より好適にはザーペシンとエタノール及び界面活
性剤を併用した場合が挙げられる。

【００１９】次いで、本発明の抗菌性組成物における各
成分の濃度について述べる。各成分についての配合量に
ついては特に制限はないが、ザーペシンは非常に低濃度
で効果を発揮し、通常0.01〜1000μg/mlの濃度で使用さ
れる。また、エタノールは０〜80％で、界面活性剤はそ
の種類によって様々であるが０〜10％使用される。これ
らの配合量は本発明の抗菌性組成物の対象によって、適
宜変更できる。

【００２０】本発明の抗菌性組成物は、その成分の選択
によって食品にも応用できる。また、主成分の１つであ
るザーペシンは40のアミノ酸よりなる抗菌性ペプチドで
あり、皮膚に対する刺激性などの点でも問題なく使用で
きる。

【００２１】即ち、現在の病院内等で使用される皮膚消
毒剤等はいわゆる「手荒れ」等の問題がある。しかしな
がらこのような問題についても本発明の抗菌性組成物は
その成分が皮膚などに対する刺激はマイルドであるので
問題とならない利点を有する。更に、本発明の抗菌性組
成物は口腔組成物としての殺菌剤や歯磨き剤に配合して
虫歯予防剤としても使用することができる。

【００２２】特にザーペシンとエタノールを配合した組
成物は喉などの殺菌剤などの用途には好適に用いられ、
直接手などに噴霧する形態で本発明の抗菌性組成物を使
用するとザーペシンは皮膚表面を覆う形で残留し、感染
予防としての効果もある。また、ザーペシンは現在、院
内感染として問題とされているＭＲＳＡに対しても強い
抗菌力を発揮することができるため、このような分野に
はより好ましく適用できる。

【００２３】本発明の抗菌性組成物の使用方法として
は、上記に述べたように食品に対しては直接配合するこ
とができ、手指等に対しては浸漬或いは噴霧などによっ
て使用することができる。

【００２４】以下、本発明について参考例および実施例
を示し詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定
されるものではない。

【００２５】参考例 ザーペシンの耐性黄色ブドウ球
菌（ＭＲＳＡ）に対する効果 各種のＭＲＳＡ（消毒剤耐性臨床分離ＭＲＳＡ、消毒剤
感受性臨床分離ＭＲＳＡ、消毒剤低度耐性ＭＲＳＡ等）
及び感受性標準株（ＭＳＳＡ）を対象として各種濃度の
ザーペシンを使用して抗菌力を測定した。

【００２６】96穴マイクロタイタートレイの各ウエルに
各種濃度のザーペシン溶液100μｌを入れ、菌液を接種
した。試験菌液はミューラーヒントンブロス（Difco
製）による一夜培養液を洗浄後、滅菌生理食塩液にて10
倍に希釈した。接種にはダイナテック社のMIC200システ
ムのイノキュレーターを用い、各ウエルに１μｌを接種
した。これにより各ウエル当たり10⁵〜10⁶の細胞が接種
されたことになる。接種後、1.5、3.0、4.5、6.0、7.5
分後に同イノキュレーターを用い、各ウエルより１μｌ
をサンプリングして新鮮ミューラーヒントンブロス100
μｌに接種し、37℃一夜培養後の増殖を判定した。その
結果を表１から表７に示す。 １．消毒剤耐性臨床分離ＭＲＳＡ：Ａ株を対象とした結
果

【００２７】

【表１】

【００２８】２．消毒剤耐性臨床分離ＭＲＳＡ：Ｂ株を
対象とした結果

【００２９】

【表２】

【００３０】３．消毒剤感受性臨床分離ＭＲＳＡ：Ｃ株
を対象とした結果

【００３１】

【表３】

【００３２】４．消毒剤感受性臨床分離ＭＲＳＡ：Ｄ株
を対象とした結果

【００３３】

【表４】

【００３４】５．消毒剤低度耐性ＭＲＳＡ：Ｅ株を対象
とした結果

【００３５】

【表５】

【００３６】６．感受性標準株：Ｆ株を対象とした結果

【００３７】

【表６】

【００３８】７．感受性標準株：Ｇ株を対象とした結果

【００３９】

【表７】

【００４０】表１から表７よりザーペシンは非常に低濃
度で、しかも短時間でＭＲＳＡに対して抗菌作用を有し
ていることが判る。

【００４１】

【実施例】

実施例１ 黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ）に対するザーペ
シンと界面活性剤およびエタノールの相乗効果について 黄色ブドウ球菌ＦＤＡ２０９Ｐ株（ＭＳＳＡ）を被検菌
として非増殖条件下でザーペシンと各種併用物質を作用
させ、生菌数を測定した。

【００４２】 反応系 黄色ブドウ球菌（0.3 ＯＤ₆₅₀） 200μｌ 併用物質と0.2％牛血清アルブミン 150μｌ ザーペシン 50μｌ コントロールとしてザーペシンの代わりに緩衝液を使用
した。

【００４３】上記の反応組成物でザーペシンを除いた組
成物を37℃で５分間処理した後、各種濃度のザーペシン
を加え、37℃で20分と40分インキュベート後にサンプリ
ングし、緩衝液で希釈してＭ３寒天培地に塗抹し、37℃
で16〜24時間後のコロニー数を測定した。尚、被検菌は
対数増殖期の菌体を用いた。また、牛血清アルブミンは
ザーペシンの被特異的吸着を防ぐ意味から加えている。

【００４４】併用物質として、エタノール（５％）を使
用した場合の結果を図１に示す。図より明らかなように
ザーペシン単独の場合と比べその効果は明らかである。

【００４５】併用物質として、SB-12（両性界面活性
剤：Lauryl sulfobetaine）（0.0125％）を使用した場
合の結果を図２に示す。図より明らかなようにザーペシ
ン単独の場合と比べその効果は明らかである。

【００４６】併用物質として、トリトンX-100（非イオ
ン性界面活性剤）（0.008％）を使用した場合の結果を
図３に示す。図より明らかなようにザーペシン単独の場
合と比べその効果は明らかである。

【００４７】併用物質として、SDS（陰イオン性界面活
性剤）（0.005％）を使用した場合の結果を図４に示
す。図より明らかなようにザーペシン単独の場合と比べ
その効果は明らかである。

【００４８】併用物質として、エタノールとSB-12を使
用した場合の結果を図５に示す。図から明らかなように
SB-12又はエタノールとザーペシンを組み合わせた場合
と比べこれらを全て組み合わせた場合の方がザーペシン
の抗菌作用が明らかに増強されている。即ち、抗菌作用
としては、ザーペシン＋エタノール＋界面活性剤＞ザー
ペシン＋エタノール＞ザーペシン＋界面活性剤＞ザーペ
シンの順となった。尚、図中の値は反応液１ml当たりの
生菌数として表示した。

【００４９】

【発明の効果】本発明により、抗菌性タンパクであるザ
ーペシンの抗菌作用を増強することができ食品分野、医
療分野に広く応用できる抗菌剤を提供することができ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】ザーペシンとエタノールの併用効果を示す図で
ある。図中で黒丸はエタノール単独の場合を示し、白丸
はザーペシン単独の場合を示し、白四角はザーペシンと
エタノール併用時の場合を示す。尚、黒三角はコントロ
ール（緩衝液のみ）の場合を示す。

【図２】ザーペシンとSB-12の併用効果を示す図であ
る。図中で黒丸はSB-12単独の場合を示し、白丸はザー
ペシン単独の場合を示し、白四角はザーペシンとSB-12
併用時の場合を示す。尚、黒三角はコントロール（緩衝
液のみ）の場合を示す。

【図３】ザーペシンとトリトンX-100の併用効果を示す
図である。図中で黒丸はトリトンX-100単独の場合を示
し、白丸はザーペシン単独の場合を示し、白四角はザー
ペシンとトリトンX-100併用時の場合を示す。尚、黒三
角はコントロール（緩衝液のみ）の場合を示す。

【図４】ザーペシンとSDSの併用効果を示す図である。
図中で黒丸はSDS単独の場合を示し、白丸はザーペシン
単独の場合を示し、白四角はザーペシンとSDS併用時の
場合を示す。尚、黒三角はコントロール（緩衝液のみ）
の場合を示す。

【図５】ザーペシンとエタノールおよびSB-12の併用効
果を示す図である。図中で黒四角はエタノール単独の場
合を示し、黒丸はSB-12単独の場合を示し、十字はエタ
ノールとSB-12併用時の場合を示し、白丸はザーペシン
単独の場合を示し、×印はザーペシンとSB-12併用時の
場合を示し、黒三角はザーペシンとエタノール併用時の
場合を示し、白四角はザーペシンとSB-12及びエタノー
ル併用時の場合を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ２３Ｌ 3/3526 ５０１ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＤＺ // Ｃ０７Ｋ 14/435 8318−4Ｈ

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】エタノール及び／又は界面活性剤とザーペ
   シンを有効成分として含有する抗菌性組成物。
2. 【請求項２】界面活性剤が両性界面活性剤である請求項
   １記載の抗菌性組成物。