JPH0720873B2 - 創傷治癒剤 - Google Patents
創傷治癒剤Info
- Publication number
- JPH0720873B2 JPH0720873B2 JP60505204A JP50520485A JPH0720873B2 JP H0720873 B2 JPH0720873 B2 JP H0720873B2 JP 60505204 A JP60505204 A JP 60505204A JP 50520485 A JP50520485 A JP 50520485A JP H0720873 B2 JPH0720873 B2 JP H0720873B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- platelet
- platelets
- wound
- blood
- thrombin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
- A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
- A61L26/0028—Polypeptides; Proteins; Degradation products thereof
- A61L26/0033—Collagen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0061—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L26/0066—Medicaments; Biocides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/41—Particular ingredients further characterized by their size
- A61K2800/412—Microsized, i.e. having sizes between 0.1 and 100 microns
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
- A61L2300/414—Growth factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
- A61L2300/64—Animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/18—Materials or treatment for tissue regeneration for hair reconstruction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Birds (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 この出願は米国政府の退役軍人局との契約のもとに行わ
れた。発明に対する権利は、すべての政府目的に関し使
用許諾を与える権利を有する発明において非排他的、不
変的、特許料使用料無しという条件つきの、米国政府の
留保に従う発明者に帰する。
れた。発明に対する権利は、すべての政府目的に関し使
用許諾を与える権利を有する発明において非排他的、不
変的、特許料使用料無しという条件つきの、米国政府の
留保に従う発明者に帰する。
本出願は1984年11月29日付の係属中の特許出願第676471
号の一部継続出願である。
号の一部継続出願である。
発明の分野 本発明は創傷治癒剤（特に血管形成因子および成長因
子）、血液からのそれらの調製法、および創傷の治癒を
促進するためのそれらの使用に関する。
子）、血液からのそれらの調製法、および創傷の治癒を
促進するためのそれらの使用に関する。
発明の背景 線維増殖およびコラーゲン合成をともなう毛細血管内皮
細胞の増殖および制御された成長である血管形成（angi
ogenesis）は、創傷に対して宿主が応答する欠くことの
できない要素である。血小板の活性化および血液凝固カ
スケードは損傷に対する第一の反応に含まれる。
細胞の増殖および制御された成長である血管形成（angi
ogenesis）は、創傷に対して宿主が応答する欠くことの
できない要素である。血小板の活性化および血液凝固カ
スケードは損傷に対する第一の反応に含まれる。
トロンビンによつて活性化された血小板は、線維芽細胞
や平滑筋細胞のためのマイトジエン（すなわち成長因
子）を放出し、in vitroにおいて平滑筋細胞によるコラ
ーゲン合成を刺激する。マイトジエン（血小板由来成長
因子、以後PDGFと略す）は２つのポリペプチドから成
る。PDGFに関する論文はグローテンドルスト（G.R.Grot
endorst）、チエン（T.Chang）、セパ（H.E.J.Sepp
a）、クライマン（H.K.Kleinman）およびマーチン（G.
R.Martin）の「血小板由来成長因子は血管平滑筋細胞の
化学誘引剤である」と題するJournal of Cellular Phys
iology,Vol.113,p.261−266（1982）に発表された。上
記論文は参照によりここに引用される。
や平滑筋細胞のためのマイトジエン（すなわち成長因
子）を放出し、in vitroにおいて平滑筋細胞によるコラ
ーゲン合成を刺激する。マイトジエン（血小板由来成長
因子、以後PDGFと略す）は２つのポリペプチドから成
る。PDGFに関する論文はグローテンドルスト（G.R.Grot
endorst）、チエン（T.Chang）、セパ（H.E.J.Sepp
a）、クライマン（H.K.Kleinman）およびマーチン（G.
R.Martin）の「血小板由来成長因子は血管平滑筋細胞の
化学誘引剤である」と題するJournal of Cellular Phys
iology,Vol.113,p.261−266（1982）に発表された。上
記論文は参照によりここに引用される。
血管形成因子と呼ばれる非マイトジエン物質もまたトロ
ンビン活性化血小板により産生され、毛細血管の成長を
刺激する。腫瘍、網膜および損傷液（wound fluid）の
血管形成因子を含めて、種々の血管形成因子が知られて
いる。全ての血管形成因子が毛細血管内皮細胞に対して
共通の作用機序を有するかどうかについては知られてい
ない。
ンビン活性化血小板により産生され、毛細血管の成長を
刺激する。腫瘍、網膜および損傷液（wound fluid）の
血管形成因子を含めて、種々の血管形成因子が知られて
いる。全ての血管形成因子が毛細血管内皮細胞に対して
共通の作用機序を有するかどうかについては知られてい
ない。
血管形成因子は単離され、バンダ（M.S.Banda）、ナイ
トン（D.R.Knighton）、ハント（T.K.Hunt）およびワー
ブ（Z.Werb）の「損傷液からの非マイトジエン血管形成
因子の単離」と題する論文（Proc.Nat′l.Acad.Sci.US
A,7773−7777,1982年12月）に発表された。この論文の
内容は参照によりここに引用される。
トン（D.R.Knighton）、ハント（T.K.Hunt）およびワー
ブ（Z.Werb）の「損傷液からの非マイトジエン血管形成
因子の単離」と題する論文（Proc.Nat′l.Acad.Sci.US
A,7773−7777,1982年12月）に発表された。この論文の
内容は参照によりここに引用される。
血管形成因子および血小板由来成長因子はナイトン（D.
R.Knighton）、ハント（T.K.Hunt）、タクラル（K.K.Th
akral）およびグツドソン（W.H.Goodson III）の「治癒
過程における血小板とブイブリンの役割」と題する論文
〔Annals of Surgery,196:379−388（1982）〕に記載さ
れており、この内容は参照によりここに引用される。こ
の論文には、単一の10単位血小板を輸血した際に患者の
非治癒性創傷が上首尾で治癒された旨記載されている。
その創傷は３週間で治癒した。
R.Knighton）、ハント（T.K.Hunt）、タクラル（K.K.Th
akral）およびグツドソン（W.H.Goodson III）の「治癒
過程における血小板とブイブリンの役割」と題する論文
〔Annals of Surgery,196:379−388（1982）〕に記載さ
れており、この内容は参照によりここに引用される。こ
の論文には、単一の10単位血小板を輸血した際に患者の
非治癒性創傷が上首尾で治癒された旨記載されている。
その創傷は３週間で治癒した。
最近の研究は、人体の正常な治癒過程が働く場合に、そ
れは約50％の有効レベルに達するにすぎないことを示し
ている。
れは約50％の有効レベルに達するにすぎないことを示し
ている。
トルバート（Tolbert）らの米国特許第4273871号では、
ヒト血管形成因子をヒト包皮線維芽細胞から生産してい
る。一般に入手しうる包皮線維芽細胞株を利用して、血
管形成因子を生産することができる。
ヒト血管形成因子をヒト包皮線維芽細胞から生産してい
る。一般に入手しうる包皮線維芽細胞株を利用して、血
管形成因子を生産することができる。
アントニアデス（Antoniades）の米国特許第4479896号
（この内容は参照によりここに引用される）では、血小
板由来成長因子が同定され、研究のためにゲル電気泳動
法により抽出された。
（この内容は参照によりここに引用される）では、血小
板由来成長因子が同定され、研究のためにゲル電気泳動
法により抽出された。
発明の要約 トロンビン活性化血小板は血管形成、増強されたコラー
ゲン合成およひ細胞分裂／成長を刺激する能力を有す
る。全血液試料を利用して血小板に富む血漿を調製し、
これをトロンビンで活性化すると、創傷の治癒過程を促
進するのに使用し得る血管形成因子と成長因子を含む血
小板濃厚化血漿が得られることが発見された。
ゲン合成およひ細胞分裂／成長を刺激する能力を有す
る。全血液試料を利用して血小板に富む血漿を調製し、
これをトロンビンで活性化すると、創傷の治癒過程を促
進するのに使用し得る血管形成因子と成長因子を含む血
小板濃厚化血漿が得られることが発見された。
血液を安定化し、遠心して血小板に富む血漿を得る。血
液をシトレート−ホスフエート−デキストロースと1:5
の比（20％ｖ溶液）で混合することにより安定化され
る。血小板に富む血漿（以後PRPと略す）は高濃度の血
小板が得られるまでさらに遠心することが好ましい。次
に、その血小板を血小板用緩衝液に加える。血小板の濃
度は１ミリリツトル当たり少なくとも1,000,000個の血
小板であり、好ましくは約1,000,000,000個の血小板で
あるだろう。
液をシトレート−ホスフエート−デキストロースと1:5
の比（20％ｖ溶液）で混合することにより安定化され
る。血小板に富む血漿（以後PRPと略す）は高濃度の血
小板が得られるまでさらに遠心することが好ましい。次
に、その血小板を血小板用緩衝液に加える。血小板の濃
度は１ミリリツトル当たり少なくとも1,000,000個の血
小板であり、好ましくは約1,000,000,000個の血小板で
あるだろう。
PRPにトロンビンを加えて血小板を活性化する。好まし
くは、１ミリリツトルのPRP当たり約１〜約10単位のト
ロンビンを使用する。トロンビン活性化血小板は血小板
由来成長因子（以後PDGFと略す）および血小板由来血管
形成因子（以後PDAFと略す）を放出する。血小板とトロ
ンビンは室温で約５〜10分間インキュベートさせる。
くは、１ミリリツトルのPRP当たり約１〜約10単位のト
ロンビンを使用する。トロンビン活性化血小板は血小板
由来成長因子（以後PDGFと略す）および血小板由来血管
形成因子（以後PDAFと略す）を放出する。血小板とトロ
ンビンは室温で約５〜10分間インキュベートさせる。
PDGFとPDAFを含む活性化PRPは、好ましくはキヤリアー
として作用する生物学的に適合性の高分子物質に加えら
れる。最初に、血小板を約950×ｇで遠心し、血小板不
含上清をキヤリアーと混合する。生物学的に適合性のキ
ヤリアーとしては、例えばペンシルバニア州（19061）
マーカスフツクのFMC社、アビセル部門から市販されて
いるアビテン（Avitene）という商標名のコラーゲンの
ような微結晶質コラーゲンである。微結晶質コラーゲン
は人体に適合性である。血液から得られる血小板に富む
血漿のすべてを吸収するのに十分なキヤリアーが添加さ
れる。例えば、40mlの血液試料は濃厚化後に一般に約25
mlのキヤリアーを必要とするだろう。こうして得られた
ペーストは好ましくは氷上または冷蔵庫内に保存され
る。
として作用する生物学的に適合性の高分子物質に加えら
れる。最初に、血小板を約950×ｇで遠心し、血小板不
含上清をキヤリアーと混合する。生物学的に適合性のキ
ヤリアーとしては、例えばペンシルバニア州（19061）
マーカスフツクのFMC社、アビセル部門から市販されて
いるアビテン（Avitene）という商標名のコラーゲンの
ような微結晶質コラーゲンである。微結晶質コラーゲン
は人体に適合性である。血液から得られる血小板に富む
血漿のすべてを吸収するのに十分なキヤリアーが添加さ
れる。例えば、40mlの血液試料は濃厚化後に一般に約25
mlのキヤリアーを必要とするだろう。こうして得られた
ペーストは好ましくは氷上または冷蔵庫内に保存され
る。
ニユージヤージー州ピスカタウエーのフアーマシア・フ
アイン・ケミカルズ社からデブリサン（Debrisan）とい
う商標名で市販される創傷用包帯として使用するための
医療製剤も適当なキヤリアーである。
アイン・ケミカルズ社からデブリサン（Debrisan）とい
う商標名で市販される創傷用包帯として使用するための
医療製剤も適当なキヤリアーである。
キヤリアー中に吸収された活性化PRPはその後創傷部位
に適用される。その中に高度に濃厚化された活性PDGFお
よびPDAFは毛細血管内皮細胞を増殖および成長させ、コ
ラーゲン合成の速度を倍加し、白血球の走化性をうなが
すことにより治癒を促進させる。マイトジエン活性は細
胞分裂／成長を誘起させて、欠損組織を再生させる。
に適用される。その中に高度に濃厚化された活性PDGFお
よびPDAFは毛細血管内皮細胞を増殖および成長させ、コ
ラーゲン合成の速度を倍加し、白血球の走化性をうなが
すことにより治癒を促進させる。マイトジエン活性は細
胞分裂／成長を誘起させて、欠損組織を再生させる。
活性PRPを創傷部位へ毎日適用すると、治癒過程が刺激
されかつ促進される。40mlの血液から調製されるPRPの
量は７日間の適用にとつて十分な量である。この物質は
創傷部位全体に比較的均一な厚さ（約2mmの厚さ）で適
用される。人体自身の修復シグナルが良好な治癒を刺激
するのに不十分である場合、活性化PRPの使用により肉
芽形成、収縮および上皮形成が開始される。
されかつ促進される。40mlの血液から調製されるPRPの
量は７日間の適用にとつて十分な量である。この物質は
創傷部位全体に比較的均一な厚さ（約2mmの厚さ）で適
用される。人体自身の修復シグナルが良好な治癒を刺激
するのに不十分である場合、活性化PRPの使用により肉
芽形成、収縮および上皮形成が開始される。
本明細書中で使用するとき、トロンビンとは血小板放出
のための生物学的放出剤としてのトロンビンを意味す
る。コラーゲン、ADPおよびセロトニンを含めて、当分
野で知られた他の生物学的放出剤もトロンビンの代わり
に又はトロンビンに加えて、血小板を活性化するために
使用しうるが、トロンビンが好適である。
のための生物学的放出剤としてのトロンビンを意味す
る。コラーゲン、ADPおよびセロトニンを含めて、当分
野で知られた他の生物学的放出剤もトロンビンの代わり
に又はトロンビンに加えて、血小板を活性化するために
使用しうるが、トロンビンが好適である。
発明の詳細な説明 本発明の創傷治癒因子で治療しようとする患者から採取
した血液は、酸−シトレート−デキストロース（0.15M
シトレート、２％グルコース、pH4.2）（以後CPDと略記
する）を含むシリコーン処理試験管中で安定化し、その
血液から血小板に富む血漿を分離するために遠心する。
40〜60mlの血液を４〜6mlのCPDと混合し、約135×ｇ、
約４℃で20分間遠心して血小板に富む血漿を得る。その
血漿を取り出して別の無菌の50ml試験管に加える。その
後血小板を数える。CPDを利用して血液とプラスチツク
性注射器との接触による一連の凝血活性化を抑える。血
液が患者から採取される間、注射器の中にCPDを入れて
おく。血液とCPDを連続混合して血液凝固を予防する。
その後、試験管中の血小板に富む血漿は750×ｇ、４℃
で10分間遠心する。
した血液は、酸−シトレート−デキストロース（0.15M
シトレート、２％グルコース、pH4.2）（以後CPDと略記
する）を含むシリコーン処理試験管中で安定化し、その
血液から血小板に富む血漿を分離するために遠心する。
40〜60mlの血液を４〜6mlのCPDと混合し、約135×ｇ、
約４℃で20分間遠心して血小板に富む血漿を得る。その
血漿を取り出して別の無菌の50ml試験管に加える。その
後血小板を数える。CPDを利用して血液とプラスチツク
性注射器との接触による一連の凝血活性化を抑える。血
液が患者から採取される間、注射器の中にCPDを入れて
おく。血液とCPDを連続混合して血液凝固を予防する。
その後、試験管中の血小板に富む血漿は750×ｇ、４℃
で10分間遠心する。
血小板不含血漿は取り出して捨てる。血小板沈殿物を適
量の血小板用緩衝液中に再懸濁して最終mlとする。1ml
当たり約100万個の血小板より低い濃度も使用し得る
が、あまり好ましくない。使用する血小板用緩衝液は0.
05M HEPES（Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−ｎ
−２−エタンスルホン酸）0.03Mグルコース、0.004M K
Cl、0.1M NaClおよび約pH6.5に調整された約0.35％ヒ
ト血清アルブミンを含む。試料はその後のマイトジエン
活性試験のために約−20℃で凍結する。別の試料は無菌
試験として血液寒天上で画線培養する。
量の血小板用緩衝液中に再懸濁して最終mlとする。1ml
当たり約100万個の血小板より低い濃度も使用し得る
が、あまり好ましくない。使用する血小板用緩衝液は0.
05M HEPES（Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−ｎ
−２−エタンスルホン酸）0.03Mグルコース、0.004M K
Cl、0.1M NaClおよび約pH6.5に調整された約0.35％ヒ
ト血清アルブミンを含む。試料はその後のマイトジエン
活性試験のために約−20℃で凍結する。別の試料は無菌
試験として血液寒天上で画線培養する。
血小板に富む血漿は本発明の方法および組成物において
利用される唯一の血液画分である。PRPはその後精製ト
ロンビンにより、PRP1ml当りトロンビン約１〜約10単位
の割合で活性化される。好ましくは、PRP1ml当たりトロ
ンビン約１単位が使用される。トロンビンの働きはフイ
ブリノーゲンを凝固させ、且つ血小板を活性化して血小
板由来成長因子と血小板由来血管形成因子を含むアルフ
ア顆粒を放出させる。使用されるトロンビンはイリノイ
州カンカキーのアーモー・フアーマシユーチカル社から
市販されているトロンビナー（Thrombinar）という商品
である。血小板とトロンビンは室温で約５〜10分間イン
キユベートさせる。
利用される唯一の血液画分である。PRPはその後精製ト
ロンビンにより、PRP1ml当りトロンビン約１〜約10単位
の割合で活性化される。好ましくは、PRP1ml当たりトロ
ンビン約１単位が使用される。トロンビンの働きはフイ
ブリノーゲンを凝固させ、且つ血小板を活性化して血小
板由来成長因子と血小板由来血管形成因子を含むアルフ
ア顆粒を放出させる。使用されるトロンビンはイリノイ
州カンカキーのアーモー・フアーマシユーチカル社から
市販されているトロンビナー（Thrombinar）という商品
である。血小板とトロンビンは室温で約５〜10分間イン
キユベートさせる。
次いで、PRPは遠心により血小板とフイブリンの除去に
付される。950×ｇ、４℃で約５分間遠心した後に得ら
れる上清はPDAFとPDGFの両方を含有する。PDAFとPDGFは
上清中に抽出されるので、沈殿物を捨てる。PDGFは単離
して性状決定を行つた。それは分子量30,000のタンパク
質であり、分子量が15,000と14,000の２つの物質に分解
される。
付される。950×ｇ、４℃で約５分間遠心した後に得ら
れる上清はPDAFとPDGFの両方を含有する。PDAFとPDGFは
上清中に抽出されるので、沈殿物を捨てる。PDGFは単離
して性状決定を行つた。それは分子量30,000のタンパク
質であり、分子量が15,000と14,000の２つの物質に分解
される。
こうして得られた血小板不含上清中のPDAFおよびPDGFを
創傷部位に適用するために、生物学的に適合性であつて
一時的“デポー”として作用するキヤリアー物質を使用
することが望ましい。微結晶質コラーゲンのような高分
子物質がキヤリアーである。特に好適なキヤリアーはペ
ンシルバニア州（19061）マーカスフツクのFMC社、アビ
セル部門からアビテンという商標名で市販されている微
結晶質コラーゲンである。得られた組成物は粘稠であ
り、創傷部位に接触した状態で保持されるであろう。セ
フアロースビーズを含むデブリサン創傷用包帯（ニユー
ジヤージー州ピスカタウエーのフアーマシア・フアイン
・ケミカルズ社の商標名）も別のキヤリアーとして利用
し得る。好ましくは、ペーストを調製するためにキヤリ
アー1g当たり上清約８〜10mlが使用される。
創傷部位に適用するために、生物学的に適合性であつて
一時的“デポー”として作用するキヤリアー物質を使用
することが望ましい。微結晶質コラーゲンのような高分
子物質がキヤリアーである。特に好適なキヤリアーはペ
ンシルバニア州（19061）マーカスフツクのFMC社、アビ
セル部門からアビテンという商標名で市販されている微
結晶質コラーゲンである。得られた組成物は粘稠であ
り、創傷部位に接触した状態で保持されるであろう。セ
フアロースビーズを含むデブリサン創傷用包帯（ニユー
ジヤージー州ピスカタウエーのフアーマシア・フアイン
・ケミカルズ社の商標名）も別のキヤリアーとして利用
し得る。好ましくは、ペーストを調製するためにキヤリ
アー1g当たり上清約８〜10mlが使用される。
創傷治療用組成物の適用は、薬用軟膏を塗るときのよう
にその物質を創傷部位に物理的に塗布することにより行
われる。治療はその創傷が開口している限り毎日繰り返
されるべきである。好適な治療は朝のうちに血小板／キ
ヤリアー複合体から成る約1mmの厚さの包帯を患部に適
用することである。その後無菌の乾燥包帯を当てる。夜
になつてから、包帯を取り除いて、滅菌塩水で洗うこと
によりその物質を除去する。
にその物質を創傷部位に物理的に塗布することにより行
われる。治療はその創傷が開口している限り毎日繰り返
されるべきである。好適な治療は朝のうちに血小板／キ
ヤリアー複合体から成る約1mmの厚さの包帯を患部に適
用することである。その後無菌の乾燥包帯を当てる。夜
になつてから、包帯を取り除いて、滅菌塩水で洗うこと
によりその物質を除去する。
本発明の創傷治療用組成物を使用する臨床試験が身体外
部の損傷に対して行われたが、本組成物は身体内部の損
傷も同様に治療し得る。縫合糸にこの創傷治療用組成物
を含浸させることにより、内部治療が倍加されるかも知
れない。また、創傷治療用組成物は外科手術において使
用される移植可能物品や生分解性物品上のコーテイング
として、生分解性包帯と共に使用することができる。一
般に、患者の中に挿入されるべき外来物体はどれも本組
成物で被覆されることにより、その治療過程を倍加し得
る。これとは別に、本組成物は患部組織に直接塗布する
ことができる。
部の損傷に対して行われたが、本組成物は身体内部の損
傷も同様に治療し得る。縫合糸にこの創傷治療用組成物
を含浸させることにより、内部治療が倍加されるかも知
れない。また、創傷治療用組成物は外科手術において使
用される移植可能物品や生分解性物品上のコーテイング
として、生分解性包帯と共に使用することができる。一
般に、患者の中に挿入されるべき外来物体はどれも本組
成物で被覆されることにより、その治療過程を倍加し得
る。これとは別に、本組成物は患部組織に直接塗布する
ことができる。
最初の臨床試験は、１〜５年の間の非治癒性創傷を有す
る８人の患者に対して行われた。全ての患者はその傷を
なおそうとして最大限度の標準的治療を受けたが、その
治療は失敗であつた。すべての場合において、血小板由
来因子の投与は肉芽組織形成（肉芽組織は線維芽細胞、
内皮細胞およびコラーゲンを含む）によつて示されるよ
うに、治癒応答を開始させた。創傷は収縮および上皮形
成により、あるいは皮膚移植により閉鎖された。すべて
の適用において、治癒の促進およびその結果としての修
復が生じた。
る８人の患者に対して行われた。全ての患者はその傷を
なおそうとして最大限度の標準的治療を受けたが、その
治療は失敗であつた。すべての場合において、血小板由
来因子の投与は肉芽組織形成（肉芽組織は線維芽細胞、
内皮細胞およびコラーゲンを含む）によつて示されるよ
うに、治癒応答を開始させた。創傷は収縮および上皮形
成により、あるいは皮膚移植により閉鎖された。すべて
の適用において、治癒の促進およびその結果としての修
復が生じた。
創傷治癒用の活性化PRPは損傷を受けた動物自身の血液
から直接調製することが好ましいが本発明の利点は同じ
種の動物から採取した血液または古い（outdated）血小
板を使用することにより達成し得る。治療されるべき患
者からの血液を利用することは、血液銀行に預けられて
いた血液から肝炎にかかる可能性やその他の汚染物質に
さらされる危険性が避けられるので特に好適である。患
者自身の血液の使用はまた起こりうるアレルギー反応を
排除するだろう。この物質のばらつきのない供給源は洗
浄された古いヒト血小板から得られる。この物質はまた
動物自身または同じ種に含まれる他の動物から誘導され
る血小板を利用することにより、獣医学的にも適用しう
る。
から直接調製することが好ましいが本発明の利点は同じ
種の動物から採取した血液または古い（outdated）血小
板を使用することにより達成し得る。治療されるべき患
者からの血液を利用することは、血液銀行に預けられて
いた血液から肝炎にかかる可能性やその他の汚染物質に
さらされる危険性が避けられるので特に好適である。患
者自身の血液の使用はまた起こりうるアレルギー反応を
排除するだろう。この物質のばらつきのない供給源は洗
浄された古いヒト血小板から得られる。この物質はまた
動物自身または同じ種に含まれる他の動物から誘導され
る血小板を利用することにより、獣医学的にも適用しう
る。
例 Ｉ 壊死組織切除および中足骨切断後の左足に開放創を有す
る患者は、彼自身の血液から上記のようにして得られた
PDGFおよびPDAFを用いて治療を開始した。治療計画通り
に進行させた後、その傷は新しい肉芽細胞によつて埋め
られた。その後の壊死組織切除は完全におおわれた中足
骨とかなり大きい傷の縮小を示した。
る患者は、彼自身の血液から上記のようにして得られた
PDGFおよびPDAFを用いて治療を開始した。治療計画通り
に進行させた後、その傷は新しい肉芽細胞によつて埋め
られた。その後の壊死組織切除は完全におおわれた中足
骨とかなり大きい傷の縮小を示した。
例 II 患者は右足の親指の切断を行い、３週間標準的な治療法
で治療したが創傷内には肉芽組織が集まらなかつた。そ
の後、彼は本発明の血小板因子による治療を開始した。
治療の３週間後、傷は約30〜40％に収縮し、速やかに治
癒しつつあつた。
で治療したが創傷内には肉芽組織が集まらなかつた。そ
の後、彼は本発明の血小板因子による治療を開始した。
治療の３週間後、傷は約30〜40％に収縮し、速やかに治
癒しつつあつた。
例 III 中足骨切断後の肢端の内側と外側に２つの大きな傷を有
する患者は通常の治療法を使用して４ケ月間治療した
が、治癒しなかつた。上記のようなPDAFおよびPDGFによ
る治療の２週間以内に、傷は明らかな感染が除かれ、肉
芽組織を産生し始めた。
する患者は通常の治療法を使用して４ケ月間治療した
が、治癒しなかつた。上記のようなPDAFおよびPDGFによ
る治療の２週間以内に、傷は明らかな感染が除かれ、肉
芽組織を産生し始めた。
28人の糖尿病患者からの38の非治癒性潰瘍をPRPペース
トで治療した。治療前の平均潰瘍存続期間は６−1/2年
であつた約109血小板/mlの濃度のPRPから調製したペー
ストはアビテン（Avitene）コラーゲンと組み合わされ
た。患者にはPDGF/PDAF含有ペーストを12時間おきに毎
日、平均８週間塗布した。毎日、壊死組織を切除した。
すべての患部は肉芽組織を産生し、開始時の創傷面積と
比較して平均83％が閉鎖された。潰瘍の95％は上首尾で
治療され、全創傷の上皮形成または上首尾の皮膚移植を
もたらした。これらの非治癒性潰瘍のうち２つのみが治
癒しなかつた。治癒した潰瘍は過形成性瘢痕や新生物が
形成される形跡もなく閉鎖されたままである。
トで治療した。治療前の平均潰瘍存続期間は６−1/2年
であつた約109血小板/mlの濃度のPRPから調製したペー
ストはアビテン（Avitene）コラーゲンと組み合わされ
た。患者にはPDGF/PDAF含有ペーストを12時間おきに毎
日、平均８週間塗布した。毎日、壊死組織を切除した。
すべての患部は肉芽組織を産生し、開始時の創傷面積と
比較して平均83％が閉鎖された。潰瘍の95％は上首尾で
治療され、全創傷の上皮形成または上首尾の皮膚移植を
もたらした。これらの非治癒性潰瘍のうち２つのみが治
癒しなかつた。治癒した潰瘍は過形成性瘢痕や新生物が
形成される形跡もなく閉鎖されたままである。
本発明を考慮する場合、開示された実施態様は本発明を
例証するためのものであつて、本発明の範囲は次の請求
の範囲により定められると理解されるべきである。
例証するためのものであつて、本発明の範囲は次の請求
の範囲により定められると理解されるべきである。
Claims (2)
- 【請求項１】血小板放出反応において血小板により放出
される物質からなる、創傷治癒のための局所的塗布用薬
剤。 - 【請求項２】血小板を活性化して物質を放出させ、そし
て、上記放出物質を有効成分とする薬剤を製剤化する工
程からなる、創傷治癒のための局所的塗布用薬剤の製造
方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US67647184A | 1984-11-29 | 1984-11-29 | |
| US676471 | 1984-11-29 | ||
| US786206 | 1985-10-10 | ||
| PCT/US1985/002205 WO1986003122A1 (en) | 1984-11-29 | 1985-11-08 | Wound healing agents |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62501628A JPS62501628A (ja) | 1987-07-02 |
| JPH0720873B2 true JPH0720873B2 (ja) | 1995-03-08 |
Family
ID=24714657
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60505204A Expired - Lifetime JPH0720873B2 (ja) | 1984-11-29 | 1985-11-08 | 創傷治癒剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0720873B2 (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5585007A (en) * | 1994-12-07 | 1996-12-17 | Plasmaseal Corporation | Plasma concentrate and tissue sealant methods and apparatuses for making concentrated plasma and/or tissue sealant |
| AT407484B (de) * | 1997-11-12 | 2001-03-26 | Bio Prod & Bio Eng Ag | Arzneimittel zur förderung der wundheilung |
| TW200505394A (en) | 2003-06-06 | 2005-02-16 | Asahi Medical Co | Material promoting wound healing |
| JP6456897B2 (ja) | 2016-10-05 | 2019-01-23 | マルハニチロ株式会社 | 抗菌性及び創傷治癒促進性を有する創傷治癒剤 |
-
1985
- 1985-11-08 JP JP60505204A patent/JPH0720873B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ANNALS OF SURGERY=1982 * |
| ＡｎｎａｌｓｏｆＳｕｒｇｅｒｙ，ｖｏｌ．１９６Ｎｏ．４，ＰＰ．３７９〜３８８ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62501628A (ja) | 1987-07-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1261259A (en) | Wound healing agents | |
| US5178883A (en) | Method for promoting hair growth | |
| US5165938A (en) | Wound healing agents derived from platelets | |
| US4957742A (en) | Method for promoting hair growth | |
| US12533398B2 (en) | Process, tube and device for the preparation of wound healant composition | |
| EP3395383A1 (en) | Cell preparations for extemporaneous use, useful for healing and rejuvenation in vivo | |
| US20040197319A1 (en) | Wound healing composition derived from low platelet concentration plasma | |
| US20030007957A1 (en) | Novel wound healing composition not containing bovine-derived activating reagents | |
| US20030152639A1 (en) | Novel wound healing composition not containing bovine-derived activating reagents | |
| JPH04504569A (ja) | 血小板抽出物の塗布による毛の成長促進法 | |
| US8268362B2 (en) | Medicinal product for the promotion of wound healing | |
| NZ202259A (en) | Wound healing composition,preparation and uses | |
| KR20150061806A (ko) | 활성화된 혈소판 풍부 혈장을 유효성분으로 포함하는 동물의 창상 치료용 수의학적 조성물 | |
| JPH0720873B2 (ja) | 創傷治癒剤 | |
| Piszczorowicz et al. | Autologous platelet-rich plasma therapy—a promising method for tissue repair//regeneration in many medical fields | |
| WO2017082441A1 (ko) | 활성화된 혈소판 풍부 혈장을 유효성분으로 포함하는 동물의 창상 치료용 수의학적 조성물 | |
| RU2657806C2 (ru) | Способ регионального лечения трофической язвы | |
| JPH11246420A (ja) | 創傷治癒促進剤 | |
| US12616720B2 (en) | Cell preparation for extemporaneous use, useful for healing and rejuvenation in vivo | |
| EP0669828A1 (en) | A method of promoting wound healing and compositions useful for same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |