JPH0728715B2 - 培養液供給方法及び培養装置 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は培養細胞等を培養するため培養器に培養液を
供給する方法及びこの培養液供給方法を実施するための
培養装置に関するものである。

（従来の技術） 生体細胞内で営まれている生化学反応を、人工の容器の
中で再現することを目的とした培養装置の研究が近年盛
んに行なわれている。このような培養装置では、生体内
反応を行なわしめる人工的環境を作り出すことが出来、
さらに、従来はマウス等の動物の生体内で種培養物を培
養して生産して得ていた免疫グロブリン等のような人間
社会に有益な物質をより効率的にかつ連続して多量に生
産すること等が可能となる。

現在知られている培養方式としては、ジャーファーメン
ター培養、ローラーボトル培養、膜培養等があり、各方
式について培養装置の改良研究が進められている。

第３図は膜を用いた従来の培養装置の一構成例を概略的
に示すブロック図である。

この培養装置は膜を用いた培養器（例えばホロファイバ
ー）と、培養液タンクとを具えており、この培養液タン
クから所定の培養液を培養器に供給し培養器中で所望と
する細胞を培養することが出来るように構成されたもの
である。

第３図において、11はホロファイバーを示し、このホロ
ファイバー11は培養液タンク13から供給される培養液が
通る流通路11aと、細胞の培養が行なわれる培養室11bと
で主として構成されている。又、流通路11aと、培養室1
1bとは所定の分子量分画が可能な膜によって仕切られて
いる。このような仕切り11cを具えているため、培養室1
1bにおいて培養される細胞が流通路11aに入らないよう
にすることが出来ると共に、流通路11aを流れる培養液
を培養室11bに供給することが出来、かつ、培養室11bの
老廃物を流通路11aに取り出すことが出来る。

又、培養液タンク13にはpH（水素イオン濃度）、DO（酸
素溶存濃度）等が所定の値を示すように調整された培養
液が貯蔵されている。尚、培養液タンクにpH、DOその他
のパラメータを自動的に調整する手段を具備する培養装
置も従来公知である。

14は培養液を培養タンク13から培養器11に供給する駆動
源を示し、この駆動源14によって培養液は培養器11の流
通路11aの一方の側から流入し他方の側から流出する。
この駆動源14としては、従来は、ペリスタリチックポン
プ、ベローズポンプ、或いは、マグネチックポンプが用
いられていた。

ところで、駆動源14にペリスタリチックポンプを用いた
場合の培養器11への培養液の供給は、このポンプに備わ
るシリコンチューブ等の外皮表面を摺動手段を用いてし
ごきチューブ内部の培養液を移動させることによって行
っていた。

又、駆動源14にベローズポンプを用いた場合の培養器11
への培養液の供給は、このベローズの伸縮に応じベロー
ズ内に貯蔵されている培養液をベローズ外部に送り出す
ことによって行っていた。

又、駆動源14にマグネチックポンプを用いた場合の培養
器11への培養液の供給は、ポンプ内に設けられた磁性回
転子をポンプ外部から磁力によって回転させこの回転子
の回転力で培養液を移動させることによって行ってい
た。

（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、駆動源にペリスタリチックポンプを用い
た場合は、培養液を摺動手段によって移動させるため、
長期培養の際にチューブの破損が生じ、これがため、培
養液の供給が停止されたり、培養液を培養器以外の個所
に流失させたり、破損時に培養室が汚染されてしまう等
の問題点があった。

従って、このような問題点の発生を防止するため、摺動
手段をチューブの新たな位置に定期的に移動させること
等の保守が必要であった。

又、摺動手段によってチューブをしごいているため、チ
ューブの内壁が摩耗しチューブ材料が培養液中に混入す
ることがあった。従って、培養液中に混入しているチュ
ーブ材料をろ過する等の処置が必要となるという問題点
があった。

さらに、ペリスタリチックポンプの機構上、培養液を培
養器に供給する際には培養液流に脈流が生ずるため、培
養器への培養液供給が不整となるという問題点があっ
た。

又、ベローズポンプ或いはマグネチックポンプを用いた
場合は、ペリスタリチックポンプにおけるような欠点を
少しは緩和出来るが、ポンプの保守及び操作を必要とす
る等の問題点があった。

又、従来の培養装置、特に、限外ろ過膜等の膜を用いた
ものにあっては、培養器の流通路における培養液の流れ
方向が一方向のものしかなかった。このため、培養に用
いる細胞が付着細胞の場合は、培養室内の培養液の流れ
の上流に当たる領域に付着した細胞がpH等の調整された
培養液を摂取し、この結果、下流に当たる領域における
培養液は上流側に付着した細胞の新陳代謝で生じた老廃
物を含むものとなり易い。又、培養に用いる細胞が浮遊
細胞の場合は培養液の流れによってこれら細胞が下流領
域に運ばれ易くなる。従って、局部的に不均一な培養環
境が生じ、これがため、培養物の生育密度に片寄りが出
来るという問題点があった。

この出願の第一発明の目的は、上述した問題点を解決
し、培養液を培養器に供給する際に培養液を長期に亙り
一定流量で安定に供給できる方法を提供することにあ
る。

この出願の第二発明の目的は、第一発明に係る培養液供
給方法を実現することが出来、かつ、部品破損の生じに
くい構成を有した培養装置を提供することにある。

（問題点を解決するための手段） これらの目的の達成を図るため、この出願の第一発明に
よれば、培養器に培養液をガス圧力を利用して供給する
に当たり、 少なくとも第一および第二の２つの培養液供給兼回収タ
ンクを用意し、 これら第一および第二の培養液供給兼回収タンク内それ
ぞれがガス相と培養液相となるよう管理し、 前記第一および第二の培養液供給兼回収タンク内のそれ
ぞれの培養液相に少なくとも１つの培養器を接続し、 前記第一および第二の培養液供給兼回収タンクの一方の
ガス相の圧力を他方のタンクのガス相の圧力より高くし
て、前記一方のタンクから前記培養器に培養液を供給す
ると共に該培養液を前記他方のタンクに回収し、 前記供給・回収において前記一方または他方のタンク内
の培養液相のレベルが所定レベルに達した場合、これら
第一および第二の培養液供給兼回収タンクにおける前記
ガス相圧力の高低状態を逆転させて、該他方のタンクか
ら前記培養器に培養液を供給すると共に該培養液を前記
一方のタンクに回収し、 これら培養液相のレベル検出処理およびガス相圧力の高
低状態の逆転処理を順次繰り返して、培養液を前記培養
器に連続的に供給すること を特徴とする。

この発明の実施に当り、培養液の圧送方向を時間的に切
り換えて前記培養液を供給するのが好適である。すなわ
ち、ある時間期間中は培養液を培養器の一方側から流入
させ他方側から流出させ、次の時間期間中は他方側から
流入させ一方側から流出させるように培養器内を流れる
培養液流の方向を任意の時間経過毎に切り換えるのが好
適である。

尚、圧送方向の切換時間を、種培養物（例えば動物の皮
膚、臓器を形成している細胞等）の種類に応じ任意の時
間とするのが好適である。

又、この出願の第二発明の培養装置は培養器と、この培
養器に培養液を供給するための培養液供給部と、前述の
培養液供給部から前記培養器に培養液を圧送するための
ガス圧力を供給するガス圧力供給部とを具えたことを特
徴とする。

一例を上げて前述の培養液供給部につき具体的に説明す
る。この培養液供給部は、培養液の例えばpH、DO値等を
調整するための手段を具備した培養液調整タンクと、培
養液の供給・回収・補充のための例えば第一及び第二タ
ンクとを具える。さらに、この培養液供給部は、これら
培養液供給兼回収用第一及び第二タンクと培養液調整タ
ンクとをそれぞれ接続するための別々の流路と、これら
流路を所要に応じて選択的に有効にする流路切換手段と
を具える。さらに、この培養液供給部は、培養液調整タ
ンクと培養器の一方の側とを接続するための流路、培養
液調整タンクと培養器の他方の側とを接続するための流
路及びこれら流路のいずれか一方を有効にする流路切換
手段を具える。さらに、この培養液供給部は、培養液供
給兼回収用第一及び第二タンクと培養器との間を接続す
るための流路と、一方の培養液供給兼回収用タンク及び
培養液調整タンク間の流路が有効となっている時、培養
器からの培養液が他方の培養液供給兼回収用タンクに回
収されるように流路を切り換える流路切換手段とを具え
る。尚、上述した各流路切換手段は後述する制御部によ
って総合的に管理するのが好適である。

又、前述のガス圧力供給部は、例えば第一及び第二気圧
室と、これら第一及び第二気圧室内の気圧を互いに異な
る気圧にするためのコンプレッサとを具えたガス圧力発
生部を有していて、両気圧室の気圧を例えば第一気圧室
の気圧が第二気圧室のそれよりも高くなるよう構成す
る。さらに、このガス圧力供給部は、各気圧室からのガ
スを前述の培養液供給部をはじめとして培養装置の必要
箇所に送るための複数のガス供給流路と、これらガス流
路を切換る切換手段とを具える。

（作用） 上述の第一発明の構成によれば、培養液はガス圧力によ
って圧送され培養器に供給される。従って、このガス圧
力を一定とすることによって培養液の流量をガス圧力に
対応した一定量にすることが出来るから、培養液流が脈
うつことを防止出来る。然も、第一および第二の培養液
供給兼回収タンクの一方を培養液供給源としかつ他方を
培養液回収先として培養液を供給し、その後今度は、他
方のタンクを培養液供給源としかつ一方のタンクを培養
液回収先となるように培養液を供給することを、繰り返
すので、培養液の培養器への連続供給を長期に安定に行
なえる。さらに、ガス圧力を変えることによって培養液
の供給量を制御することが出来る。

又、培養液供給用の圧力源となるガスの種類及び又はガ
スの組成を変えることによって、培養液中に溶存するガ
ス量を容易に制御することも可能になる。

さらに、培養液の圧送方向を時間的に切り換えて培養液
を供給した場合、これに伴い培養器内の培養液の流れ方
向は逆方向に切り換えられる。従って、切り換わった培
養液の流れによって培養器の培養室内は撹拌され、よっ
て、培養環境も変化し、培養室内の培養条件を均一なも
のとすることも出来る。

又、上述の第二発明の培養装置の構成によれば、ガス圧
力供給部のガス圧によって培養液が培養液供給部から培
養器に供給される。

具体的に説明すれば、第一気圧室−培養液供給兼回収用
第一タンク−培養液調整タンク−培養器−培養液供給兼
回収用第二タンク−第二気圧室の流通経路を構成する
と、第一及び第二気圧室間の差圧によって培養液は培養
液供給兼回収用第一タンクから培養液調整タンク及び培
養器を経由し培養液供給兼回収用第二タンクへ圧送され
る。

又、培養液調整タンクと培養器の一方の側とを接続する
ための流路、培養液調整タンクと培養器の他方の側とを
接続するための流路及びこれら流路のいずれか一方を有
効とする流路切換手段を具え、かつ、培養器の、培養液
が供給されている側とは反対側を培養液供給兼回収タン
クと接続するように流路を切り換える流路切換手段を具
えているので、培養器内の培養液の流れる方向を時間的
に逆方向に切り換えながら細胞培養を行ない得る。

（実施例） 以下、図面を参照してこの発明の培養液供給方法と、こ
の供給方法を実施するために好適な培養装置とにつき説
明する。

培養装置実施例の説明 第１図はこの発明に係る培養装置の一実施例をその主要
部について示したブロック図である。尚、この図はこの
発明が理解出来る程度に概略的に示してあるにすぎず、
培養装置の滅菌、洗浄或いは保守等を行なう機能を有し
た各ブロック等を省略して示してある。さらに、各構成
成分の配置関係は図示例に限定されるものでない。

＜培養器＞ 第１図において、11は培養器を示しこの実施例の場合例
えば従来公知のホロファイバーを用いる。このホロファ
イバー11は第３図を用いて既に説明したように、培養液
の流通路11aと、培養室11bとを有しており、又、これら
の間には分子量分画が可能な仕切り11cを具える。尚、
この実施例の場合の培養装置は、ホロファイバー11を所
望の環境温度に維持するため、例えばウォータージャケ
ットを以って構成した第一温度制御手段13を具えてい
る。

さらに、ホロファイバー11は種培養物を入れるための入
口15と、生産物取り出し口17とを具え、又、この生産物
取り出し口17には手動弁MV1を介して生産物収容タンク9
1を接続する。

＜培養液供給部＞ 21は培養液供給部を示す。この実施例の場合、この培養
液供給部21は、培養液のpHやDO等を調整する機能を具備
する培養液調整タンク23と、培養液を培養器に供給し培
養器から戻って来た培養液を回収するための培養液供給
兼回収用第一及び第二タンク25a,25b（以下、第一タン
ク25a、第二タンク25bとそれぞれ略称することもあ
る。）と、培養器11、調整タンク23、第一タンク25a及
び第二タンク25b間に所定の関係（詳細は後述する）で
設けてある培養液流路と、これら流路を目的に応じて切
り換えるための切換手段（詳細は後述する。）とを具え
ている。さらに、貯蔵される培養液量の上限及び下限レ
ベルを検知するため、培養液調整タンク23は液面計LI2
を、第一タンク25aは液面計LI1を、第二タンク25bは液
面計LI3を具える。

又、この実施例の場合、流路切換手段を培養液供給部21
内に設けられた複数の流路の途中に所定通り設けた弁
（詳細は後述する）と、これらの弁を開閉させる機能手
段を含む制御部81とを以って構成する。

尚、この実施例の場合上述の弁をガス圧力供給部61から
のガス圧力によって駆動するように構成するが、これに
限定されるものではなく、電磁的に駆動するように構成
しても良い。尚、第１図中これら弁をAV1〜AV13で示し
てある。

次に、上述の各構成成分間相互に設ける培養液授受用配
管（流路）の接続関係につき説明する。

第一タンク25aと培養液調整タンク23との間を流路31、
弁AV1、及び流路32の経路によって接続する。第二タン
ク25bと培養液調整タンク23との間を流路33、弁AV4及び
流路34の経路によって接続する。

培養液調整タンク23と培養器11の流通路11aの一方の側
との間を流量計27を有する流路35、弁AV7、流路36、弁A
V9及び流路37の経路によって接続する。又、培養液調整
タンク23と培養器11の流通路11aの他方の側との間を流
量計27を有する流路35、弁AV8、流路38、弁AV10及び流
路39の経路によって接続する。

又、流路31と流路36とを弁AV3及び流路41を介して接続
し、流路33と流路36とを弁AV5及び流路42を介して接続
する。

又、流路31と流路38とを弁AV2及び流路43を介して接続
し、流路33と流路38とを弁AV6及び流路44を介して接続
する。

一方、別途用意された培養液補給タンク51を滅菌フィル
タF5、弁AV11及び流路45を介して第二タンク25bと接続
する。さらに、培養液補給タンク51を滅菌フィルタF6、
弁AV12及び流路46を介して第一タンク25aと接続する。

又、この実施例の場合、培養液調整タンク23には流路48
を介して酸素或いは二酸化炭素或いは窒素が供給され、
又、さらにこの培養液調整タンク23には、流路49を介し
て、アルカリ性水溶液（この実施例の場合、7.5％NaHCO
₃水溶液）が、第１図中50で示す貯蔵タンクから供給さ
れ、これらガス及び薬液によってpH、DOを調整する。第
１図中、29aはpH計のセンサを、29bは溶存酸素計のセン
サをそれぞれ示す。尚、酸素、二酸化炭素、或は窒素ガ
スが導入されたことによって、培養液調整タンク23内の
ガス圧が変動し、この結果、液面が変化する場合も考え
られるため、培養液調整タンク23には液面計LI4と、ガ
ス抜きのためのバルブV8が設けてあり、ガス導入時に液
面の異常状態が生じても対処可能となっている。又、培
養液調整タンク23は、流路切り替え時の流量変動等を抑
制するための緩衝装置としても機能する。

又、培養液調整タンク23から流路47、弁AV13及び滅菌フ
ィルタF7を介して不要な培養液を廃棄出来る。

尚、この実施例の場合、上述の培養液供給部と、既に説
明した培養器11とを、第二温度制御手段を具備した恒温
槽19に収納する。

＜ガス圧力供給部＞ 61はガス圧力供給部を示す。この実施例の場合このガス
圧力供給部61は、第一及び第二気圧室63a,63bと、これ
ら気圧室63a,63b内の気圧を互いに異なる気圧にするた
めのコンプレッサ65とを具えるガス圧力発生部62を有す
る。そして、外部からのガス、例えば空気をフィルタF1
を介し取り込み電磁三方弁SV1を介してコプレッサ65に
送り、このコンプレッサ65によってこのガスを加圧しな
がら第一気圧室63aに送り貯蔵する。又、三方弁SV1の他
の流路を第二気圧室63bと接続する。従って、第一気圧
室の気圧を第二気圧室のそれより高くすることが出来
る。

又、第一及び第二気圧室63a,63bには圧力スイッチ付き
圧力指示計PSI1,PSI2をそれぞれ設けると共に、これら
気圧室間を一時圧力調整弁RV2を介して接続する。これ
ら気圧室は培養液の圧送用ガス圧を供給するため、所定
の気圧にそれぞれ設定することが出来る。そして、第一
気圧室63aの圧力が所定値に達すると一次圧力調整弁RV2
によって室内の圧力調整を行なう。又、第一気圧室63a
の圧力が所定値より低くなった場合はSV1を空気取り入
れ側（F1側）に切り替えて所定の圧力まで空気を補給す
る。第二気圧室63b内の気圧が所定値以下になった場合
も三方弁SV1を空気取り入れ側に切り換えてガスを導入
し、一次圧力調整弁RV2によって室内の圧力調整が行な
われる。

又、第一気圧室63aと上述した培養液供給部21の第一タ
ンク25aとの間には圧力調整用弁RV1、電磁弁V1、電磁三
方弁SV2及び滅菌フィルタF2を有するガス流路71で構成
された経路を設ける。第二気圧室63bと第二タンク25bと
の間には弁V2、三方弁SV3及びフィルタF3を有するガス
流路72で構成された経路を設ける。さらに、三方弁SV2
とガス流路72との間をガス流路73で接続し、かつ、三方
弁SV3とガス流路71との間をガス流路74で接続する。

このように構成すれば、培養液供給部の一方の培養液供
給兼回収用タンクと第一気圧室63aとが接続され、他方
の培養液供給兼回収用タンクと、第二気圧室63bとが接
続されるので、両培養液供給兼回収用タンク25a,25b間
に差圧が生じ、この差圧によって培養液を圧送すること
が出来る。

尚、このような構成の場合であれば、三方弁SV2,SV3を
それぞれ切り換えることによって第一及び第二気圧室63
a,63bと接続される培養液供給兼回収用タンク25a,25bを
互いに変更することが出来る。従って、これら弁によっ
てガス流路を切り換えるガス流路切換手段が実現され
る。

尚、上述した例においては、培養液を圧送するためのガ
スを空気とした例で説明している。しかしながら、細胞
等の培養物の種類によっては、例えば培養に用いる培養
液の溶存酸素量が細胞の増殖或は生産物の生成に大きな
影響を与える場合がある。つまり、培養物の種類によっ
ては、培養液の溶存酸素量が、大気下における平衡溶存
酸素量よりも高い場合の方が至適環境である培養物や、
反対に、低い方が至適環境である培養物も存在する。

従って、このような培養物を培養する場合には、用いる
培養液の溶存酸素量も培養物に応じた適切なものにする
のが好適である。

このような要請に対し、この発明の培養液供給方法は、
培養液を圧送する上送源としてガスを用いていることか
ら、用いるガスの種類及び又はガスの組成を変えること
によって、培養液の例えば平衡溶存酸素量を容易に制御
することが出来る。即ち、培養液の溶存酸素量が、大気
下における平衡溶存酸素量よりも高いものを好む培養物
に対しては、第１図に示したフィルタF1を介してガス圧
力発生部に取り込むガスを、例えば大気と酸素とを混合
させて得た、酸素を高濃度で含む空気とすることで対処
出来る。又、培養液の溶存酸素量が、大気下における平
衡溶存酸素量よりも低いものを好む培養物に対しては、
ガス圧力発生部に取り込むガスを、例えば大気を窒素ガ
スで稀釈して得た、酸素を低濃度で含む空気とすること
で対処出来る。

＜制御部＞ この発明に係る培養装置は上述した各構成成分を制御す
るための制御部を具える。この制御部の構成は従来公知
の制御技術で実現することが出来るので、以下に簡単に
説明する。

第１図において、81は制御部を示し、この制御部81を、
例えばマイクロプロセッサ83と、培養液の圧送方向や培
養条件のプログラム等を格納するメモリ部85と、圧送方
向、培養条件のモード選択や変更等を指示する入力装置
87と、第一及び第二気圧室の圧力データ、培養液の流
量、pH及びDO等のデータ並びに各タンクの培養液量デー
タ等の読み込みや、これらデータを判定して圧力、pH、
DO等の修正及び各弁の操作を行うための指示信号の出力
を行う入出力（I/O）ポート89と、各種のメッセージ等
を表示する表示部90とを具えたものとしてある。

培養装置の動作説明 以下、この発明の培養装置の動作の実施例につき説明す
る。尚、この実施例の場合、この動作を以下の〜の
ような手順で行なう。しかしながら、この発明は以下の
手順に限定されるものではないこと明らかである。又、
以下の実施例で説明する数値的条件は単なる一例にすぎ
ず、例えば種培養物の種類に応じて種々の変更が出来る
こと明らかである。

滅菌 培養液供給部への培養液供給 培養液調整 培養器への種培養物注入 培養器への培養液供給 培養期間中の培養物等のサンプリング方法 尚、この実施例の場合、培養器11として例えば米国グレ
ース社製の「ビサファイバーII」と称する分画分子量30
000のホロファイバーカートリッジを用いる。

＜滅菌＞ 細胞培養に先立ち培養液供給部21と関連する滅菌フィル
タF2,F3,F5,F6,F7,F9F10及びF11で区切られた内側部分
のタンク23,25a,25b及び流路に対し任意好適な温度例え
ば約120℃の温度で一定時間例えば30分間蒸気滅菌を行
う。

＜培養液供給部への培養液供給＞ 次に、培養液補給タンクから培養液供給部に培養液を供
給する。この供給は、この場合、培養液補給タンク51か
ら一方の培養液供給・回収用タンク例えば第一タンク25
aに培養液を先ず補給し、さらに、この第一タンク25aを
経て培養液調整タンク23及びこの培養液調整タンク23を
経て他方の培養液供給・回収用第二タンク25bに培養液
を供給する例で行なう。

従って、弁V1を開の状態とし、第一気圧室63aから圧力
調整弁RV1によって調整された所定のガス圧力を流路75
と、滅菌フィルタF8とを介し培養液補給タンク51に供給
し、一方、第二気圧室63b、ガス流路72、第二タンク25
b、流路33、AV6、流路44、流路38、AV8、流路35、流量
計27、培養液調整タンク23、流路32、AV1及び流路31の
経路が有効になるように、弁V2、三方弁SV3、弁AV6、AV
8及びAV1をそれぞれ操作して、培養液補給タンク51、第
一及び第二タンク25a,25b、及び培養液調整タンク23間
で圧送系を形成する。このように圧送系を形成した後、
弁AV12を開け流路46を通じ、培養液補給タンク51から第
一タンク25aへと培養液を供給すると共に、この第一タ
ンク25aを通して培養液調整タンク23さらには第二タン
ク25bに培養液を圧送する。第二タンク25b内の培養液の
量を液面系LI3によって管理する。供給された培養液の
液面がLI3の下限レベルに達したのを検知したならば弁A
V1,AV6及びAV8を閉じる。引き続いて、培養液補給タン
ク51から第一タンク25aに培養液を圧送するため、SV3を
流路74側に切り替えて、第二気圧室63b、V2、SV3、流路
74、流路71、フィルタF2、第一タンク25a、流路46及びA
V12の経路を有効にする。液面計LI1によってこの第一タ
ンク25aの培養液の液面レベルを管理し、液面がLI1の上
限レベルに達したことを検知したならば、AV12及びV6を
閉じる。

次に、弁V1及び三方弁SV2を操作して第一気圧室63aから
圧力調整弁RV1によって所定の圧力に調整されたガス圧
力（第一ガス圧力と称することもある。）をガス流路71
を介して第一タンク25aに供給する。又、弁V2及び三方
弁SV3を操作して第二気圧室63bのガス圧力（第二ガス圧
力と称することもある。）をガス流路72を介して第二タ
ンク25bに供給する。さらに、AV1、AV8及びAV6を開けて
第一タンク25a内の培養液を培養液調整タンク23を通し
て第二タンク25bに圧送する。培養液調整タンク23内の
培養液の量を液面計LI2によって管理する。

＜培養液の調整＞ この培養液調整タンク23においては、培養液のpH、DO等
の各種パラメータをそれぞれのセンサ29a,29bによって
測定する。さらに、これら測定結果を制御部81に取り込
み、それらパラメータの値が培養細胞に適した値以外の
場合は所定値となるように培養液に処置を施す。この処
置を、例えば、DOについては溶存酸素を溶存酸素計で測
定し、酸素の補給を必要とする場合は流路48を介して酸
素を、又、溶存酸素量を低くしたい場合は流路48を介し
て窒素を培養液調整タンク23に補給する。pH値について
はpH計で測定し、pHを上げたい場合は流路49を介して貯
蔵タンク50のアルカリ溶液を、又、pHを下げたい場合は
流路48を介してCO₂ガスをぞれぞれ供給する。尚、pHを
下げることについては、CO₂ガスの代りに酸性水溶液を
用いても良い。又、培養液調整タンク23を第二温度制御
手段（恒温槽）19内に収納してあるので、培養液調整タ
ンク23内の培養液の温度は所定の値に管理される。さら
に、培養時には培養器内の培養液の温度は第一温度制御
手段13によってさらに高精度に管理される。

ここで、培養液調整タンク23においてpH等の調整の済ん
だ培養液を、培養器11に直に供給することはせず（AV9
及びAV10を閉状態としておく）、培養液供給部21内部で
循環させ安定させる。

この培養液の安定化操作は、先ず、流路35、弁AV8、弁A
V6及び流路33を介し培養液調整タンク23内の培養液を第
二タンク25bに圧送する。第二タンク25b内の培養液の上
限レベルを液面計LI3によって管理する。培養液調整タ
ンク23内の培養液を第二タンク25bに圧送した後、弁AV6
を閉じAV4を開ける。このとき、第一タンク25aに第二気
圧室63bから第二ガス圧力が、又、、第二タンク25bに第
一気圧室63aから第一ガス圧力がそれぞれ供給されるよ
うに、三方弁SV2、SV3等を操作しガス流路を切り換え
る。さらに、AV1を閉じ、AV7及びAV3を開ける。従っ
て、今度は第二タンク25bから培養液調整タンク23に培
養液が圧送され、この培養液調整タンク23において上述
のようなpH調整等が行われる。さらに、調整済み培養液
は流路35、AV7、流路36、AV3及び流路31を通じ第一タン
ク25aに圧送される。

培養液調整タンク23と、第一及び第二タンク25a及び25b
との間の培養液の循環を上述のようにサイクリックに行
って、培養液が所定の温度、pH及びDOとなるように調整
する。

＜培養器への種培養物の注入＞ 次に、例えば種細胞を、これが汚染されることがないよ
うな処置のされた環境において、ホロファイバー11の種
培養物入口15から培養室11a内に注入する。

＜培養器への培養液の供給＞ 次に、培養液を培養器に供給する。

この供給を、培養装置の培養液供給部において、例え
ば、第一タンク25aには第一ガス圧力を供給し、第二タ
ンク25bには第二ガス圧力を供給し、又、培養器11から
戻る培養液は第二タンク25bに回収するようにする場合
（第１図に示す状態）につき説明する。

このような場合に、培養器内を培養液が双方向に流れる
ようにするには、細胞培養が行われている期間中のある
時間期間中は、第一タンク25aの培養液を培養液調整タ
ンク23を介し、流路35−弁AV7−流路36−弁AV9−流路37
−培養器11−流路39−弁AV10−弁AV6−流路33−第二タ
ンク25bの経路で圧送する。又、次の時間期間中は、第
一タンク25aの培養液を培養液調整タンク23を介し、流
路35−弁AV8−流路38−弁AV10−流路39−培養器11−流
路37−弁AV9−流路42−弁AV5−流路33−第二タンク25b
の経路で圧送する。これによって、培養期間中における
培養液の流れを、培養器の一方の側から流入され他方の
側から流出される場合と、他方の側から流入され一方の
側から流出される場合との二方向とすることが出来る。
尚、圧送方向の切換回数及び切換周期は培養細胞に応じ
適正な値にする。

又、培養器11に供給された培養液が第二タンク25b内に
回収されて第二タンク25bの上限レベルに達した場合、
今度は第一タンク25aには第二ガス圧力を供給し、一
方、第二タンク25bには第一ガス圧力を供給し、培養器1
1から戻る培養液を第一タンク25aに回収するように上述
した培養液供給流路を切り換えれば、上述の例と同様な
培養液供給を行なうことが出来る。

又、培養器内の培養液の流れ方向を上述のように切り替
える操作を行なわず、一方向のみで圧送することも出来
る。

＜培養期間中の培養物等のサンプリング方法＞ 培養物の増殖及び生産物の評価等のために、この実施例
の場合以下に述べるような方法でサンプリングを行な
う。

培養器11へ培養液を供給するモードにおいて培養器11内
の培養液の流れの下流に当たるAV9（或いはAV10）を閉
じ、培養器11の生産物取り出し口17と、生産物収容タン
ク91との間のMV1を開ける。この操作によって、培養液
調整タンク23と、生産物収容タンク91との間に差圧が生
じ、よって、培養室11b内の生産物が培養液と共に生産
物収容タンク91に圧送される。このようにサンプリング
した細胞及び生産物を、細胞については顕微鏡を用い、
又生産物についてはその生産物に応じた所定の試薬を用
いそれぞれ観察する。

又、このように培養物を目視観察することと、pH変化及
びDO消費量と、培養液の目視観察とによって培養液の交
換時期を決定し、これに応じて培養液を交換することが
出来る。又、培養液の一部を、培養液調整タンク23−流
路47−AV13−滅菌フィルタF7の経路を介してサンプリン
グし、サンプリングした培養液中の例えばグルコース及
び乳酸等の代謝物質等を定量することによって、消費さ
れた成分及び老廃物のそれぞれの変化を調べることを併
せて行ない、この結果を培養液の交換時期を決定する情
報としても良い。

変形例 この発明は上述の実施例に限定されるものでないこと明
らかである。

例えば、上述の実施例においては、ガス圧力供給部61の
ガス圧力発生部62を第一及び第二気圧室63a,63bと、コ
ンプレッサ65と、複数個の弁と、圧力調整器とを具えた
構成例で説明した。しかし、このガス圧力発生部62を、
例えば第２図に示すような高圧ガスボンベ101と、圧力
調整器とを具えたものとし、かつ、低圧室は設けずその
代りに大気圧に直結させるようにして、さらに簡単な構
成とすることも出来る。このような構成の場合は、大気
が導入される導入口に目の粗いフィルタ103を設けて滅
菌フィルタF2,F3を保護するのが好適である。又、例え
ば空気、窒素等の各種ガスが高圧ガスとして供給されて
いるような設備を有する工場においては、これら設備か
らガス圧力を得ることも出来る。

尚、ガス供給部に取り込むガスは大気に限定されるもの
ではなく、他の好適なガス、例えばN₂,Ar等のガス又は
これらのガスの混合ガスを用いても良い。

又、上述の実施例においては、培養液供給部を培養液調
整タンク23を含む構成とした例で説明した。しかし、培
養液調整タンクを構成から除き、その代りに培養液供給
兼回収用タンク内或いは培養液の流路内で培養液のpH等
の調整を行なっても良い。尚、上述の実施例の培養装置
を培養液のpH、DO、液温を調整出来る手段を具備した例
で説明した。しかし、この培養装置は培養物に応じ他の
パラメータ例えばCO₂の溶存濃度等の調整手段を具える
ことも出来る。

又、培養液の供給や生産物の取り出し等の作業を、ガス
圧力を負圧にして吸引モードで行なうことも出来る。以
下に、培養液補給タンク51から培養液を第一タンク25a
に吸引モードで補給する例につき簡単に説明する。

この例の場合、滅菌フエィルタF8−弁V6間の流路75を取
り外し、F8の培養液補給タンク51とは反対側を大気に開
放する。

SV1を第二気圧室63b側に切り換えた状態でコンプレッサ
65を作動させる。V5を開状態V1を閉状態とし第二気圧室
63b内の空気をV5を介して系外に排気して第二気圧室を
負圧にする。その後、第二気圧室63b−V2−SV3−流路74
−流路71−F2−第一タンク25a−流路46の系が有効にな
るように各弁をそれぞれ切り換える。続いて、AV12を開
けると流路46を通して培養液補給タンク51の培養液は第
一タンク25aに吸引モードで圧送される。

圧送を開始した後第一タンク25aの液面計LI1によって第
一タンク25a内の培養液が上限に達したことを検知した
ならば、AV12、V2をそれぞれ閉じる。

次に、ガス圧力発生部を前述の培養液供給の状態と同様
な状態にした後、第一気圧室63a−RV1−V1−SV2−流路7
1−F2−第一タンク25a−流路31−AV1−流路32−培養液
調整タンク23−流量計27−流路35−AV8−流路38−流路4
4−AV6−流路33−第二タンク25b−F3−流路72−SV3−V2
−第二気圧室63bの系が有効になるように各弁をそれぞ
れ切り換えると、第一タンク25a内の培養液は培養液調
整タンク23を通って第二タンク25bに供給される。第二
タンク25bに供給される培養液の液量を液面計LI3で管理
しこの液面が下限に達したならば系を全て閉じ、ガス圧
力発生部を上述のような吸引モードの状態に戻し上述し
た要領で培養液補給タンク51内の培養液を第一タンク25
aに補給する。第一タンク25aの培養液量を液面計LI1に
よって管理しこの液面が上限に達したならばAV12を閉じ
る。以上の操作によって、第一タンク25a、第二タンク2
5b及び培養液調整タンク23に補給された培養液の液面は
第１図の如くなる。

このように、培養液の補給を吸引モードによっても行な
い得る。

又、この発明に係る、培養液供給部及びガス圧力発生部
は実施例の構成のみに限定されるものではなく、培養液
の供給のさせ方に応じ、種々の変更が可能である。

例えば、培養液を培養装置外部から連続的に取り入れ培
養器に連続的に供給しかつ培養装置外部に連続的に排出
すること、又、培養液を培養器に連続的に供給しながら
培養液の一部を培養装置内で循環させたり培養装置外部
に排出させたりすること、さらには、培養液を培養装置
内で循環させながら一部を培養装置外部に排出したり或
は培養装置外部から補給することをそれぞれ実施したい
場合には、培養装置を、例えば第４図に示すような構成
とすることで対処出来る。

第４図は、培養液をこのように供給或いは循環させる機
能を有する培養装置の一構成例をその主要部につき概略
的に示したブロック図である。尚、第４図においては、
第１図に示した構成成分と同様な構成成分については同
一の符号を付して示してあるが、一方、第１図に示した
構成成分のうちのここで述べたい培養液供給の説明に不
用と思われる構成成分例えば制御部81及び細部の構成成
分等については省略して示してある。

第４図において、162はこの変形例の培養装置における
ガス圧力発生部を示す。この場合のガス圧力発生部162
は、第１図に62で示し既に説明した構成成分の他に、さ
らに171で示した負の圧力発生部を付加した構成のもの
である。又、この場合の負の圧力発生部171は、173で示
される真空ポンプと、65cで示される第三の気圧室と、S
V4で示す三方弁と、V10及びV11で示す電磁弁と、PSI3で
示す圧力スイッチ付き圧力指示計とを具えた構成となっ
ている。そして、PSI3の設定値に応じ真空ポンプ173を
制御することによって、第三気圧室63c内のガス圧力を
所望の負の圧力に設定することが出来る。この第三気圧
室63cは、V12で示す電磁弁を具えるガス流路110によっ
て、既に説明した流路72のV2及びSV3間の部分に接続し
てある。

ここで、第一気圧室63aの室内の圧力をP₁、第二気圧室6
3bの室内の圧力をP₂、第三気圧室63cの室内の圧力をP₃
とそれぞれ表したとき、各気圧室の圧力が、 P₁＞P₂＞１気圧＞P₃ を満足するような関係になるように、ガス圧力発生部16
2のコンプレッサ、真空ポンプ及び弁類を操作する。

このような構成のガス圧力発生部162を具えるこの培養
装置においては、三方弁SV2及び三方弁SV3の切換操作に
応じ、第一タンク25aにはP₁のガス圧力が供給されかつ
第二タンク25bにはP₂のガス圧力が供給される状態、第
一タンク25aにはP₂のガス圧力が供給されかつ第二タン
ク25bにはP₁のガス圧力が供給される状態、第一タンク2
5aにはP₁のガス圧力が供給されかつ第二タンク25bにはP
₃のガス圧力が供給される状態、又は第一タンク25aには
P₃のガス圧力が供給されかつ第二タンク25bにはP₁のガ
ス圧力が供給される状態にすることが出来る。

又、第４図において、121は変形例の培養液供給部を示
す。この培養液供給部121は、基本的には、第１図に示
した培養液供給部21と変るところはないが、培養液流路
の配置と、弁の配置とを第１図に示したものとは変えて
ある。

この場合においては、培養液は、第４図に111で示す流
路を介して第一タンク25a又は第二タンク25bに供給さ
れ、この培養液はさらに、第一タンク25a又は第二タン
ク25bから培養液調整タンク23−流量計27−流路112−第
４図に123で示す流れ方向切換バイパスブロック（以
下、切換ブロックと略称することもある）−流路113の
経路で流れるようにすることが出来る。

ところで、上述の切換ブロック123は、以下に説明する
ような構成としてある。

AV7を有する流路36と、AV8を有する流路38と、AV3を有
する流路41と、AV6を有する流路44とでループ状の流路
を構成すると共に、流路36及び流路38の合流点に流路11
2を、流路41及び流路44の合流点に流路113をそれぞれ接
続してある。さらに、流路36及び流路41の合流点と、流
路38及び流路44の合流点との間に、AV9、培養器11及びA
V10で構成された系を具える。従って、各弁の操作を目
的に応じ切り換えることによってこの切換ブロック123
によっても、第１図で説明したと同様に、培養液の流れ
方向の切換や、培養器11に培養液を供給することなく培
養液を循環させることが出来る。このような経路を具体
的に説明すれば、流路112−AV7−AV9−培養器11−AV10
−AV6−流路113の順序で培養器11へ培養液を供給する経
路、若しくは、流路112−AV8−AV10−培養器11−AV9−A
V3−流路113の順序で培養器11に培養液を供給する経
路。又、流路112−AV7−AV3−流路113の経路から成る培
養器11をバイパスするバイパス経路、若しくは、流路11
2−AV8−AV6−流路113から成る同様なバイパス経路であ
る。

次に、第４図に示した培養装置の具体的な使用例につ
き、培養液の圧送の態様毎に分けてそれぞれ説明する。

＜使用例１＞ 培養液を培養装置外部からこの装置内に連続的に取り入
れ、この培養液を培養器11に連続的に供給し、さらに培
養液を培養装置外部に連続的に排出する場合。

第一タンク25aにP₁の圧力のガスが、第二タンク25bにP₃
の圧力のガスがそれぞれ供給されるように、各弁を操作
する。さらに、AV11−流路111−AV5−第二タンク25b−
流路の経路を有効とする操作をすると、AV11の一次側の
培養液供給・補給ラインを介し培養装置外部から第二タ
ンク25bに吸引モードによって培養液を圧送することが
出来る。一方、第一タンク25a−AV1−培養液調整タンク
23−流量計27−経路112−切換ブロック123−流路113−A
V13の経路を有効とすると、第一タンク25a内の培養液を
上述した経路を経て正圧圧送によって培養装置外部に排
出することが出来る。

又、第一タンク25aにP₃の圧力のガスが、第二タンク25b
にP₁の圧力のガスがそれぞれ供給されるように、各弁を
操作する。さらに、AV11−流路111−AV2−第一タンク25
aの経路を有効とする操作をすると、培養装置外部から
第一タンク25aに吸引モードによって培養液を圧送する
ことが出来る。一方、第二タンク25b−AV4−培養液調整
タンク23−流量計27−流路112−切換ブロック123−流路
113−AV13の経路を有効とすると、第二タンク25b内の培
養液を、切換ブロック123を含む上述した経路を経て正
圧圧送によって培養装置外部に排出することが出来る。

上述の二通りの培養液供給・排出経路を、液面計LI1〜L
I3の管理下で切り換えて使用することによって、使用例
１の方法による培養液の供給及び排出がなされる。

＜使用例２＞ 培養装置内に取り入れた培養液を連続的に循環させる場
合。

培養液を培養装置に取り込むことについては使用例１で
説明した方法を用いて行なうことが出来るので、その説
明は省略する。

第一タンク25aにP₁の圧力のガスが、第二タンク25bにP₂
の圧力のガスがそれぞれ供給されるように、各弁を操作
する。さらに、第一タンク25a−AV1−培養液調整室23−
流量計27−流路112−切換ブロック123−流路113−AV14
−流路111−AV5−第二タンク25bの経路を有効とする操
作をすると、第一タンク25a内の培養液を、切換ブロッ
ク123を含む上述の経路を経て正圧圧送によって第二タ
ンク25bに圧送することが出来る。

又、第一タンク25aにP₂の圧力のガスが、第二タンク25b
にP₁の圧力のガスがそれぞれ供給されるように、各弁を
操作する。さらに、第二タンク25b−AV4−培養液調整室
23−流量計27−流路112−切換ブロック123−流路113−A
V14−流路111−AV2−第一タンク25aの経路を有効とする
操作をすると、第二タンク25b内の培養液を、切換ブロ
ック123を含む上述の経路を経て正圧圧送によって第一
タンク25aに圧送することが出来る。

上述の二通りの培養液供給・排出経路を、液面計LI1〜L
I3の管理下で切り換えて使用することによって、使用例
２の方法による培養液の循環及び圧送がなされる。尚、
このようにして培養液を循環させている際に、必要に応
じAV13を開閉すれば、培養器11への培養液の供給を停止
することなく、循環させている培養液の一部を培養装置
外部に排出することも出来る。

さらに、上述した使用例１の操作と、使用例２の操作と
を適宜切り換えて行なうことによって、培養器11への培
養液供給を停止することなく、培養装置外部から培養液
をこの培養装置に補給することも出来る。

このように、この発明の培養液供給方法によれば、連続
液送も可能になる。

尚、第４図に示した培養装置においては、ガス圧力発生
源をコンプレッサ、真空ポンプとしているが、このガス
圧力発生源は工場配管等から得られるガス圧力、加圧ボ
ンベから得られるガス圧力等のような他の公適なものと
することが出来る。

又、上述した実施例及び変形例において示した培養液供
給部及びガス圧力供給部に対して、この発明の目的の範
囲内において種々の変更を行なうことが出来る。

この発明の特色 上述したようなこの発明の培養液供給方法又は培養装置
によれば、培養細胞については培養室に付着するような
ものや培養室内を浮遊するようなもの等種々のものを用
いることが出来る。又、培養器への培養液供給について
は培養器中の培養液の流れ方向を一方向に固定した場合
と、逆方向に時間的に切り換えた場合（双方向）との二
条件で行なうことが出来る。

例えば、細胞培養を培養室に付着するような細胞と、培
養室内を浮遊するような細胞とし、培養器への培養液供
給を一方向及び双方向として培養を行なった場合、以下
の第１表に示すような特色がそれぞれ見出せると思われ
る。

尚、この発明の培養装置によれば、培養液の各種パラメ
ータを例えば以下の〜に示すような値にそれぞれ設
定した場合でもこれら条件を制御することが充分可能で
ある。

培養温度…設定温度に対してプラスマイナス0.1℃ DO値…細胞の増殖量に応じ±0.1ppm …設定値に対して±0.1 （発明の効果） 上述した説明からも明らかなように、この発明の培養液
供給方法及び培養装置によれば、培養液を培養器に供給
する際ガス圧力を用いて培養液を圧送する。然も、第一
および第二の培養液供給兼回収タンクの一方を培養液供
給源としかつ他方を培養液回収先として培養液を供給
し、その後今度は、他方のタンクを培養液供給源としか
つ一方のタンクを培養液回収先となるように培養液を供
給することを、繰り返す。

これがため、培養器に培養液を長期に亙り安定に、か
つ、培養液の脈うち等が無くスムースに供給することが
できる。

さらに、この発明の培養装置によれば、機械的摺動部分
がないため、保守も容易であり、装置寿命も長い。さら
に、培養液が機械的に接するような部分がない。このた
め、万が一ガス圧力供給部が故障した場合であっても、
不純物が培養液中に混入することなく保守を行なうこと
が出来る。

又、培養液を培養器に供給する際、培養器中の培養液の
流れを逆方向に時間的に切り換えて行なっているから、
培養環境を培養室各所で均一にすることが出来、培養収
率を向上させることが出来る。

又、培養物の種類に応じて、培養液を圧送するためのガ
スの種類を換えたりガスの組成を調整したりすることに
よって培養収率をさらに向上させることが出来る。

このようにして、この発明の培養液供給方法及び培養装
置を用いることにより、モノクロナール抗体等の免疫グ
ロブリンのような人類に有益な物質や細胞等を生産する
ための培養を従来より効率良く行なうことが出来る。

【図面の簡単な説明】

第１図はこの発明の培養装置の一実施例の主要部を示す
ブロック図、 第２図はこの発明に係るガス圧力供給部の変形例を示す
ブロック図、 第３図は従来の培養装置の構成例を概略的に示すブロッ
ク図、 第４図はこの発明の培養装置の他の例の主要部を示すブ
ロック図である。 11……培養器、11a……流通路 11b……培養室、11c……仕切り（分子量分画の可能な
膜） 13……第一温度制御手段（ウォータージャケット） 15……種培養物取り入れ口 17……生産物取り出し口 19……第二温度制御手段（恒温槽） 21……培養液供給部、23……培養液調整タンク 25a……培養液供給兼回収用第一タンク 25b……培養液供給兼回収用第二タンク 27……流量計、29a……pHセンサ 29b……DOセンサ 31〜39,41〜47,111,112,113……培養液流路 48……ガス流路、49……薬液流路 50……薬液貯蔵タンク、51……培養液補給タンク 61……ガス圧力供給部、62……ガス圧力発生部 63a……第一気圧室、63b……第二気圧室 63c……第三気圧室、65……コンプレッサ 71〜75,110……ガス流路、81……制御部 83……マイクロプロセッサ 85……メモリ部、87……入力装置 89……入出力ポート、90……表示部 91……生産物収容タンク 121……変形例の培養液供給部 123……培養液流れ方向切換及びバイパスブロック 162……変形例のガス圧力発生部 171……負のガス圧力発生部 173……真空ポンプ AV1〜AV14……ガス駆動弁 LI1〜LI4……液面計 F1〜F12……滅菌フィルタ SV1〜SV4……三方弁 PSI1〜PSI4……圧力スイッチ付き圧力指示器 RV1〜RV5……圧力調整弁 V1〜V12……電磁弁。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】培養器に培養液をガス圧力を利用して供給
   するに当たり、 少なくとも第一および第二の２つの培養液供給兼回収タ
   ンクを用意し、 これら第一および第二の培養液供給兼回収タンク内それ
   ぞれがガス相と培養液相となるよう管理し、 前記第一および第二の培養液供給兼回収タンク内のそれ
   ぞれの培養液相に少なくとも１つの培養器を接続し、 前記第一および第二の培養液供給兼回収タンクの一方の
   ガス相の圧力を他方のタンクのガス相の圧力より高くし
   て、前記一方のタンクから前記培養器に培養液を供給す
   ると共に該培養液を前記他方のタンクに回収し、 前記供給・回収において前記一方または他方のタンク内
   の培養液相のレベルが所定レベルに達した場合、これら
   第一および第二の培養液供給兼回収タンクにおける前記
   ガス相圧力の高低状態を逆転させて、該他方のタンクか
   ら前記培養器に培養液を供給すると共に該培養液を前記
   一方のタンクに回収し、 これら培養液相のレベル検出処理およびガス相圧力の高
   低状態の逆転処理を順次繰り返して、培養液を前記培養
   器に連続的に供給すること を特徴とする培養液供給方法。
2. 【請求項２】特許請求の範囲第１項に記載の培養液供給
   方法において、 前記ガス相の圧力を高くした側の培養液供給兼回収タン
   クが前記培養器の一方の側に常に接続されるようにして
   前記培養器での培養液の圧送方向を一定にし、前記供給
   を行なうこと、を特徴とする培養液供給方法。
3. 【請求項３】特許請求の範囲第１項に記載の培養液供給
   方法において、 前記ガス相の圧力を高くした側の培養液供給兼回収タン
   クが前記培養器の一方および他方側に適時切り換えて接
   続されるようにして前記培養器での培養液の圧送方向を
   時間的に切り換えて、前記供給を行なうこと、を特徴と
   する培養液供給方法。
4. 【請求項４】内部にガス相および培養液相が形成される
   少なくとも第一及び第二の２つの培養液供給兼回収タン
   クと、 これら第一及び第二の培養液供給兼回収タンクに接続さ
   れている培養器と、 該培養器に培養液を供給するための培養液供給部と、 前記第一および第二の培養液供給兼回収タンクのうちの
   一方のタンクのガス相の圧力を他方のタンクのガス相の
   圧力より高くするためのガス圧力供給部と を具えたこと を特徴とする培養装置。
5. 【請求項５】特許請求の範囲第４項に記載の培養装置に
   おいて、 前記培養液供給部は、前記少なくとも２つの培養液供給
   兼回収タンクと、これらタンクおよび前記培養器間に設
   けられた複数の流路と、これら流路の切換手段と、を具
   えたことを特徴とする培養装置。
6. 【請求項６】特許請求の範囲第４項に記載の培養装置に
   おいて、 前記培養液供給部は、前記少なくとも２つの培養液供給
   兼回収タンクと、これら少なくとも２つのタンクおよび
   前記培養器間に設けられた培養液調整タンクと、これら
   少なくとも３つのタンク間およびこれら少なくとも３つ
   のタンクおよび培養器間に設けられた複数の流路と、こ
   れら流路の切換手段と、を具えたことを特徴とする培養
   装置。
7. 【請求項７】特許請求の範囲第４項に記載の培養装置に
   おいて、 前記ガス圧力供給部は、ガス圧力発生部と、該ガス圧力
   発生部および前記培養液供給部間に設けられた複数のガ
   ス流路と、これらガス流路の切換手段と、を具えたこと
   を特徴とする培養装置。
8. 【請求項８】特許請求の範囲第４項に記載の培養装置に
   おいて、 前記ガス圧力発生部は、第一および第二気圧室と、これ
   ら気圧室内の気圧を互いに異なる気圧にするためのコン
   プレッサと、を具えたことを特徴とする培養装置。