JPH0728741B2 - 安定なβ−ガラクトシダ−ゼ水性組成物 - Google Patents
安定なβ−ガラクトシダ−ゼ水性組成物Info
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- JPH0728741B2 JPH0728741B2 JP60100612A JP10061285A JPH0728741B2 JP H0728741 B2 JPH0728741 B2 JP H0728741B2 JP 60100612 A JP60100612 A JP 60100612A JP 10061285 A JP10061285 A JP 10061285A JP H0728741 B2 JPH0728741 B2 JP H0728741B2
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Description
【発明の詳細な説明】 （１） 発明の目的 ＜産業上の利用分野＞ 本発明は安定なアスペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガ
ラクトシダーゼ水性組成物に関するものである。
ラクトシダーゼ水性組成物に関するものである。
β−ガラクトシダーゼは乳糖を加水分解してグルコース
とガラクトースを生成する酵素であり，医薬品，あるい
は食品製造工業に於ける乳糖分解酵素として利用されて
いる。
とガラクトースを生成する酵素であり，医薬品，あるい
は食品製造工業に於ける乳糖分解酵素として利用されて
いる。
医薬品としては，乳糖不耐症（乳糖分解酵素欠損症）の
治療や乳幼児の下痢症の治療に広く利用されている。
治療や乳幼児の下痢症の治療に広く利用されている。
食品製造工業に於いては，乳糖除去ミルクの製造はホエ
ー（固形分6.3％，乳糖4.5％）及びホエー粉（固形分9
4.6％、乳糖72.3％）その他乳糖を多量含む廃棄物を加
水分解して，グルコース及びガラクトースを製造するた
めに利用されている。
ー（固形分6.3％，乳糖4.5％）及びホエー粉（固形分9
4.6％、乳糖72.3％）その他乳糖を多量含む廃棄物を加
水分解して，グルコース及びガラクトースを製造するた
めに利用されている。
なお，これらの産業分野で実際に利用されているβ−ガ
ラクトシダーゼは，主として，アスペルギルス・オリー
ゼ（Aspergillus oryzae），クルイベロマイセス・ラク
チス（Kluyveromyces lactis）又はクルイベロマイセス
・フラギリス（K.fragilis）により産生されている。
ラクトシダーゼは，主として，アスペルギルス・オリー
ゼ（Aspergillus oryzae），クルイベロマイセス・ラク
チス（Kluyveromyces lactis）又はクルイベロマイセス
・フラギリス（K.fragilis）により産生されている。
これらの酵素は，起源により理化学的性質がかなり相違
するため，それぞれの酵素が最大活性を発揮するような
使用場面を選んで利用されている。
するため，それぞれの酵素が最大活性を発揮するような
使用場面を選んで利用されている。
例えば，医薬品については，経口投与の際，酸性の胃液
中で安定な活性を発揮する必要があるため，至適pHが酸
性側にあり，且つ麹菌として古くからの使用実績により
安全性の点でも問題の無いアスペルギルス・オリーゼ産
生のβ−ガラクトシダーゼが利用されている。
中で安定な活性を発揮する必要があるため，至適pHが酸
性側にあり，且つ麹菌として古くからの使用実績により
安全性の点でも問題の無いアスペルギルス・オリーゼ産
生のβ−ガラクトシダーゼが利用されている。
＜従来の技術＞ β−ガラクトシダーゼは一般に酵素製剤としての安定性
が乏しく，特に水溶液の場合は非常に不安定である。
が乏しく，特に水溶液の場合は非常に不安定である。
例えば，アスペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガラクト
シダーゼを水溶液状態で保存した場合，最大活性は４℃
では数ケ月間維持出来るが,37℃では数日間しか維持出
来ないことが知られている。〔ジヤーナル・オブ・バイ
オケミストリー（Journal of Biochemistry）第80巻,11
95頁,1976年．〕 そのため，医薬品としては，冷所（15℃以下）保存を必
要とする固形製剤のみが市販されている。
シダーゼを水溶液状態で保存した場合，最大活性は４℃
では数ケ月間維持出来るが,37℃では数日間しか維持出
来ないことが知られている。〔ジヤーナル・オブ・バイ
オケミストリー（Journal of Biochemistry）第80巻,11
95頁,1976年．〕 そのため，医薬品としては，冷所（15℃以下）保存を必
要とする固形製剤のみが市販されている。
使用場面の拡大あるいは使用上の簡便さのため液剤医薬
品の開発が要望されているが，未だ，市販されるに到っ
ていない。
品の開発が要望されているが，未だ，市販されるに到っ
ていない。
β−ガラクトシダーゼ水溶液の安定化方法としては，
大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼについて，水溶液を
凍結保存する際，その溶液に糖類，ゼラチン又はグリセ
リンを約0.1〜５％程度添加することにより，凍結時の
酵素の失活を防止する方法。（特開昭58−81782号）。
大腸菌由来のβ−ガラクトシダーゼについて，水溶液を
凍結保存する際，その溶液に糖類，ゼラチン又はグリセ
リンを約0.1〜５％程度添加することにより，凍結時の
酵素の失活を防止する方法。（特開昭58−81782号）。
酵母（クルイベロマイセス・フラギリス）起源のβ−
ガラクトシダーゼ水溶液に10〜80％のソルビトールを添
加して，安定な水性組成物を得る方法。（USP 446446
9） 発酵液よりβ−ガラクトシダーゼを分離精製する工程
に於いて，被処理液中に安定剤としてCo ,Mn ,Mg 及
び含硫アミノ酸の１種以上とリン酸イオンとを共存させ
る方法。
ガラクトシダーゼ水溶液に10〜80％のソルビトールを添
加して，安定な水性組成物を得る方法。（USP 446446
9） 発酵液よりβ−ガラクトシダーゼを分離精製する工程
に於いて，被処理液中に安定剤としてCo ,Mn ,Mg 及
び含硫アミノ酸の１種以上とリン酸イオンとを共存させ
る方法。
（特公昭49−20515号） などが公知である。
β−ガラクトシダーゼは，個々の酵素を詳細に比較すれ
ば，それらを産生する微生物の種類（起源）により，酵
素分子としての理化学的性質に著しい差異のあることも
亦知られている。
ば，それらを産生する微生物の種類（起源）により，酵
素分子としての理化学的性質に著しい差異のあることも
亦知られている。
第１表は，起源の異なる９種のβ−ガラクトシダーゼに
ついて諸性質の文献値を比較したものであり，分子量は
10.5〜54（万），至適pHは3.2〜8.3,至適温度は46〜80
（℃）,Km値は0.72〜9.8（mM〜ONPG）とそれぞればらつ
きの大きい値を示している。
ついて諸性質の文献値を比較したものであり，分子量は
10.5〜54（万），至適pHは3.2〜8.3,至適温度は46〜80
（℃）,Km値は0.72〜9.8（mM〜ONPG）とそれぞればらつ
きの大きい値を示している。
このように、β−ガラクトシダーゼは起源により性質に
著るしい差異があるため，実際の使用に当ってはその使
用目的に適した理化学的性質のものが選ばれ，その酵素
に適した安定化方法が採用されているのが現状である。
著るしい差異があるため，実際の使用に当ってはその使
用目的に適した理化学的性質のものが選ばれ，その酵素
に適した安定化方法が採用されているのが現状である。
＊生産菌 E.コリー:Escherichiia coli. K.フラギリス:Kluyveromyces fragilis. S.プノモニア:Streptococcus pneumoniae. A.オリーゼ:Aspergillus oryzae. A.ニガー:Aspergillus niger. P.シトリナム:Penicillium citrinum. P.マルチカラー:Penicillum multicolor. T.サーモフィルス:Thermus thermophilus. B.ステアロサーモフィルス:Bacillus stearothermophil
us. ＊＊文献 メソツド・イン・エンチモロジー（Methods in Enz
ymology）第５巻,212頁,1962年． アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカル・ケ
ミストリー（Agricultural and Biological chemistr
y）第36巻,570−577頁,1975年． バイオケミストリー（Biochemistry）第３巻,1535
頁,1964年． ジヤーナル・アブ・バイオケミストリー（Journal
of Biochemistry）第77巻,241−247頁,1975年． メソツド・イン・エンチモロジー第28巻,728−734
頁,1972年． アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカルケミ
ストリー第43巻,943−950頁,1979年． 同上 第47巻,2533−2540頁,1983年． 特開昭56−154991号． カナデイアン・ジヤーナル・オブ・マイクロバイオ
ロジー（Canadian Journal of Microbiology）第22巻,8
17−825頁,1976年． ＜発明が解決しようとする問題点＞ 本発明は安定なアスペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガ
ラクトシダーゼ水性組成物を提供することを目的とする
ものである。
us. ＊＊文献 メソツド・イン・エンチモロジー（Methods in Enz
ymology）第５巻,212頁,1962年． アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカル・ケ
ミストリー（Agricultural and Biological chemistr
y）第36巻,570−577頁,1975年． バイオケミストリー（Biochemistry）第３巻,1535
頁,1964年． ジヤーナル・アブ・バイオケミストリー（Journal
of Biochemistry）第77巻,241−247頁,1975年． メソツド・イン・エンチモロジー第28巻,728−734
頁,1972年． アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカルケミ
ストリー第43巻,943−950頁,1979年． 同上 第47巻,2533−2540頁,1983年． 特開昭56−154991号． カナデイアン・ジヤーナル・オブ・マイクロバイオ
ロジー（Canadian Journal of Microbiology）第22巻,8
17−825頁,1976年． ＜発明が解決しようとする問題点＞ 本発明は安定なアスペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガ
ラクトシダーゼ水性組成物を提供することを目的とする
ものである。
現在，医薬品として市販されているβ−ガラクトシダー
ゼは，アスペルギルス・オリーゼ起源の固形製剤のみで
ある。
ゼは，アスペルギルス・オリーゼ起源の固形製剤のみで
ある。
β−ガラクトシダーゼの固形製剤は前述のように冷所保
存が義務付けられており，そのために本酵素を主薬とし
た医薬品の流通過程ならびに取扱いに大きな制約をうけ
ているのが現状である。
存が義務付けられており，そのために本酵素を主薬とし
た医薬品の流通過程ならびに取扱いに大きな制約をうけ
ているのが現状である。
また固形製剤を例えば乳児や幼児に与えるとき，そのま
までは飲みずらいため，一般に水や牛乳などに溶解させ
てから与える場合が多く煩わしいことが問題である。
までは飲みずらいため，一般に水や牛乳などに溶解させ
てから与える場合が多く煩わしいことが問題である。
これらの点に鑑み，例えば室温から高温にかけて安定で
あり，微生物汚染の極めて少なく，更に飲みやすい液剤
の開発が望まれるところである。
あり，微生物汚染の極めて少なく，更に飲みやすい液剤
の開発が望まれるところである。
本発明者等は上述の事情により，種々の安定剤の使用を
検討し，従来困難視されていた安定なアスペルギルス・
オリーゼ起源のβ−ガラクトシダーゼ水性組成物の創製
に成功し，本発明を完成した。
検討し，従来困難視されていた安定なアスペルギルス・
オリーゼ起源のβ−ガラクトシダーゼ水性組成物の創製
に成功し，本発明を完成した。
（２） 発明の構成 本発明は「マルチトール，キシリトール及びソルビトー
ルから選ばれる糖アルコールの１種又は２種以上を50〜
80％（W/W）濃度で含有することを特徴とする安定なア
スペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガラクトシダーゼ水
性組成物」に関するものである。
ルから選ばれる糖アルコールの１種又は２種以上を50〜
80％（W/W）濃度で含有することを特徴とする安定なア
スペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガラクトシダーゼ水
性組成物」に関するものである。
本発明に使用する糖アルコールはいづれも粉体あるいは
水溶液として工業的安価に入手し得るものである。
水溶液として工業的安価に入手し得るものである。
本発明に使用するアスペルギルス・オリーゼ起源のβ−
ガラクトシダーゼは，古くからの使用実績により，安全
性が確認され副作用等の懸念の全く無いものである。
ガラクトシダーゼは，古くからの使用実績により，安全
性が確認され副作用等の懸念の全く無いものである。
糖アルコールの使用濃度は50〜80％（W/W）が好まし
い。
い。
50％未満の場合は，安定効果が劣り,80％を超えると，
安定性の面では大差無いが糖アルコール溶解度上限を超
えてしまい取扱いにくくなる。
安定性の面では大差無いが糖アルコール溶解度上限を超
えてしまい取扱いにくくなる。
以下実施例によって本発明を更に詳細に説明するが，本
発明はこれによって限定されるものではない。
発明はこれによって限定されるものではない。
実施例 アスペルギルスβ−gal.（製造番号914153）685,000Uを
１％ソルビトール500mlで溶解し，この溶液をダイアフ
ローホローファイバーシステム（米国アミコン社製,DC2
型使用，ホローファイバーカートリッジとしてHIP30−2
0タイプ使用）で濃縮と透析（透析外液として蒸留水使
用）を行い，更に限外過（米国アミコン社製PM30過
膜使用）して酵素液68ml（10,000U/ml,96.5mg蛋白質/m
l）を得た。ソルビトール3.45g,蒸留水0.5mlにこの酵素
液1.0mlを加え溶解して酵素濃度2020U/ml,ソルビトール
濃度70％（W/W）のβ−ガラクトシダーゼ水性組成物を
得た。
１％ソルビトール500mlで溶解し，この溶液をダイアフ
ローホローファイバーシステム（米国アミコン社製,DC2
型使用，ホローファイバーカートリッジとしてHIP30−2
0タイプ使用）で濃縮と透析（透析外液として蒸留水使
用）を行い，更に限外過（米国アミコン社製PM30過
膜使用）して酵素液68ml（10,000U/ml,96.5mg蛋白質/m
l）を得た。ソルビトール3.45g,蒸留水0.5mlにこの酵素
液1.0mlを加え溶解して酵素濃度2020U/ml,ソルビトール
濃度70％（W/W）のβ−ガラクトシダーゼ水性組成物を
得た。
この水性組成物は、乳幼児に与える牛乳に１回宛約1ml
程度添加することにより下痢症の治療及び予防効果を奏
するものである。
程度添加することにより下痢症の治療及び予防効果を奏
するものである。
この場合，従来の固形剤（粉剤，顆粒剤等）に比較し
て、牛乳への添加混合が容易であり,50〜60℃に加温し
た牛乳に添加した場合でも殆んど失活しない優れた特性
を示すものである。
て、牛乳への添加混合が容易であり,50〜60℃に加温し
た牛乳に添加した場合でも殆んど失活しない優れた特性
を示すものである。
また，この水性組成物は好浸透圧酵母のクルイベロマイ
セス・ルクシー（K.rouxii）などごく限られた微生物を
除き，カビ，細菌，酵母など殆んど総べての微生物が生
育しないため，衛生面でも安全に使用出来るものであ
る。
セス・ルクシー（K.rouxii）などごく限られた微生物を
除き，カビ，細菌，酵母など殆んど総べての微生物が生
育しないため，衛生面でも安全に使用出来るものであ
る。
また，所望により，食品添加物として許容される香料，
色素，等を適宜添加出来るのは勿論である。
色素，等を適宜添加出来るのは勿論である。
（３） 発明の効果 本発明により安定なアスペルギルス・オリーゼ起源のβ
−ガラクトシダーゼ水性組成物が提供される。
−ガラクトシダーゼ水性組成物が提供される。
次下，本発明の効果を説明するため試験例を示す。
試験例1.（起源の異なる酵素の安定性比較試験） 試験方法 酵素起源（酵素産生微生物）の異なる市販のβ−ガラク
トシダーゼを20単位/mlの濃度になるように50％（W/W）
ソルビトール水溶液及び70％（W/W）ソルビトール水溶
液に溶解し，試験管に5ml宛封入して70℃の湯浴中で保
温し,2時間経過した時の酵素活性を測定し，保温前の酵
素活性と比較して各供試酵素の活性残存率を算出した。
トシダーゼを20単位/mlの濃度になるように50％（W/W）
ソルビトール水溶液及び70％（W/W）ソルビトール水溶
液に溶解し，試験管に5ml宛封入して70℃の湯浴中で保
温し,2時間経過した時の酵素活性を測定し，保温前の酵
素活性と比較して各供試酵素の活性残存率を算出した。
なお，酵素１単位（Ｕ）は１分間当り１μmolのＯ−ニ
トロフエニルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド（以下ONPGと
いう）を加水分解する酵素量とした。但し，起源により
酵素の理化学的性質が異なるため，酵素活性の測定は後
述するようにそれぞれの酵素毎に,pH,温度及び基質濃度
が最適になるような条件で行った。
トロフエニルβ−Ｄ−ガラクトピラノシド（以下ONPGと
いう）を加水分解する酵素量とした。但し，起源により
酵素の理化学的性質が異なるため，酵素活性の測定は後
述するようにそれぞれの酵素毎に,pH,温度及び基質濃度
が最適になるような条件で行った。
供試酵素 下記４種の起源の異なる市販のβ−ガラクトシダーゼを
供試酵素とした。
供試酵素とした。
１） エセリシア・コリ産生のβ−ガラクトシダーゼ。
（米国シグマ会社製市販品，カタログ番号T6008番グレ
ード6,以下「大腸菌β−gal」という） ２） クルイベロマイセス・ラクチス産生のβ−ガラク
トシダーゼ。
ード6,以下「大腸菌β−gal」という） ２） クルイベロマイセス・ラクチス産生のβ−ガラク
トシダーゼ。
（合同酒精会社製市販品，ラクターゼGODO−YNL,以下
「酵母β−gal.L」という） ３） クルイベロマイセス・フラギリス産生のβ−ガラ
クトシダーゼ。
「酵母β−gal.L」という） ３） クルイベロマイセス・フラギリス産生のβ−ガラ
クトシダーゼ。
（米国シグマ会社製市販品，カタログ番号Ｇ−7013番グ
レード12,以下「酵母β−gal.F」という） ４） アスペルギルス・オリーゼ産生のβ−ガラクトシ
ダーゼ。
レード12,以下「酵母β−gal.F」という） ４） アスペルギルス・オリーゼ産生のβ−ガラクトシ
ダーゼ。
（新日本化学工業会社製市販品，スミラクトＬ以下「ア
スペルギルスβ−gal.」という） 試験結果 本試験の結果は第２表に示す通りである。
スペルギルスβ−gal.」という） 試験結果 本試験の結果は第２表に示す通りである。
即ち，ソルビトール50％及び70％の水溶液に溶解したア
スペルギルスβ−galは70℃に２時間保温した場合殆ん
ど失活しなかった。これに対し，大腸菌β−gal,酵母β
−gal.L及びＦはいづれも不安定であり，ソルビトール5
0％（W/W）溶液の場合は完全に酵素活性が消滅し,70％
（W/W）溶液の場合でも，活性残存率がそれぞれ25.3％,
66.1％及び3.6％と非常に低い値を示した。
スペルギルスβ−galは70℃に２時間保温した場合殆ん
ど失活しなかった。これに対し，大腸菌β−gal,酵母β
−gal.L及びＦはいづれも不安定であり，ソルビトール5
0％（W/W）溶液の場合は完全に酵素活性が消滅し,70％
（W/W）溶液の場合でも，活性残存率がそれぞれ25.3％,
66.1％及び3.6％と非常に低い値を示した。
また，第２表の成績から明らかなように，β−ガラクト
シダーゼが同一属（クルイベロマイセス）に属する微生
物起源のものであっても，それらを産生した微生物の種
（ラクチス及びフラギリス）が相違すれば，それぞれの
酵素（酵母β−gal.L及び酵母β−gal.F）のソルビトー
ル添加による安定化効果に大差を示した。
シダーゼが同一属（クルイベロマイセス）に属する微生
物起源のものであっても，それらを産生した微生物の種
（ラクチス及びフラギリス）が相違すれば，それぞれの
酵素（酵母β−gal.L及び酵母β−gal.F）のソルビトー
ル添加による安定化効果に大差を示した。
なお，本発明に於いて，各酵素の活性測定はそれぞれの
酵素毎にpH,温度及び基質濃度が最適になるように，次
の方法で行った。
酵素毎にpH,温度及び基質濃度が最適になるように，次
の方法で行った。
大腸菌β−gal.の活性測定 常法により行った。即ち， 0.1Mリン酸ナトリウム緩衝液（pH7.3）1.25ml,3.36M2−
メルカプトエタノール50μ,30mM塩化マグネシウム水
溶液50μ及び供試酵素液50μからなる溶液を37℃,3
分間保温して酵素を活性化した後,34mMのONPGを含む0.1
Mリン酸ナトリウム緩衝液（pH7.3）100μを加え，さ
らに37℃で10分間保温した後1mMのエチレンジアミンテ
トラアセテイト（以下EDTAという）ジナトリウムを含む
1M炭酸ナトリウム0.5mlを加えて反応を停止させ,420nm
での吸光度を測定し，この溶液中に生成したＯ−ニトロ
フエノールの量を求めた。
メルカプトエタノール50μ,30mM塩化マグネシウム水
溶液50μ及び供試酵素液50μからなる溶液を37℃,3
分間保温して酵素を活性化した後,34mMのONPGを含む0.1
Mリン酸ナトリウム緩衝液（pH7.3）100μを加え，さ
らに37℃で10分間保温した後1mMのエチレンジアミンテ
トラアセテイト（以下EDTAという）ジナトリウムを含む
1M炭酸ナトリウム0.5mlを加えて反応を停止させ,420nm
での吸光度を測定し，この溶液中に生成したＯ−ニトロ
フエノールの量を求めた。
酵母β−gal.L及びＦの活性測定法 ウエンドルフ（Wendorf）等の方法〔ジヤーナル・オブ
・ミルク・アンド・フッド・テクノロジー（Journal of
Milk and Food Technology）第34巻,451頁,1971年〕を
若干変更して行った。即ち,27mMのONPGを含む0.1Mリン
酸カリウム緩衝液（pH7.0）3ml,5mM塩化マンガン水溶液
1ml及び供試酵素液1mlを混合し,37℃,10分間保温した後
1m MEDTAジナトリウムを含む1M炭酸ナトリウム溶液1ml
を加え,3000rpm,5分間遠心分離して上清を得，その420n
mでの吸光度を測定した。
・ミルク・アンド・フッド・テクノロジー（Journal of
Milk and Food Technology）第34巻,451頁,1971年〕を
若干変更して行った。即ち,27mMのONPGを含む0.1Mリン
酸カリウム緩衝液（pH7.0）3ml,5mM塩化マンガン水溶液
1ml及び供試酵素液1mlを混合し,37℃,10分間保温した後
1m MEDTAジナトリウムを含む1M炭酸ナトリウム溶液1ml
を加え,3000rpm,5分間遠心分離して上清を得，その420n
mでの吸光度を測定した。
アスペルギルスβ−gal.の活性測定法 pH4.5に調整した5.7mM ONPG溶液3.5mlと供試酵素0.5ml
の混合液を30℃に10分間保った後,1M炭酸ナトリウム溶
液1mlを加えて反応を停止させ，この溶液の420nmでの吸
光度を測定し，生成したＯ−ニトロフエノールの量を求
めた。
の混合液を30℃に10分間保った後,1M炭酸ナトリウム溶
液1mlを加えて反応を停止させ，この溶液の420nmでの吸
光度を測定し，生成したＯ−ニトロフエノールの量を求
めた。
上記１）〜３）の方法に於いて，酵素１単位（Ｕ）は,1
分間当り１μmolのONPGを加水分解する酵素量とした。
分間当り１μmolのONPGを加水分解する酵素量とした。
試験例2.（糖アルコールの種類別安定性比較試験） アスペルギルスβ−gal.を蒸留水で充分に透析して脱塩
後，濃度50％（W/W）の各種の糖アルコール水溶液に濃
度430U/gになるように溶解し，各溶液を5g宛試験管に封
入し,70℃湯浴中で30分間保温後の酵素活性を測定し，
保温前の活性と比較して酵素活性残存率を算出した。
後，濃度50％（W/W）の各種の糖アルコール水溶液に濃
度430U/gになるように溶解し，各溶液を5g宛試験管に封
入し,70℃湯浴中で30分間保温後の酵素活性を測定し，
保温前の活性と比較して酵素活性残存率を算出した。
本試験の結果は第３表に示す通りである。
試験例3.（糖アルコールの濃度別安定性比較試験） アスペルギルスβ−gal.を充分に透析して脱塩後，濃度
10％（W/W）,30％（W/W）,50％（W/W）,70％（W/W）及
び80％（W/W）のソルビトール水溶液に濃度430U/gにな
るように溶解し，各溶液を5g宛試験管に封入し,70℃湯
浴中で30分間保温後の酵素活性を測定し，保温前の活性
と比較して酵素活性残存率を算出した。
10％（W/W）,30％（W/W）,50％（W/W）,70％（W/W）及
び80％（W/W）のソルビトール水溶液に濃度430U/gにな
るように溶解し，各溶液を5g宛試験管に封入し,70℃湯
浴中で30分間保温後の酵素活性を測定し，保温前の活性
と比較して酵素活性残存率を算出した。
なお，比較のためソルビトール水溶液の代りに水を使用
して同様な試験を行った。
して同様な試験を行った。
本試験の結果は，第４表に示す通りである。
試験例4.（耐熱性試験） アスペルギルス・オリーゼ種に属するが菌株の相違する
微生物によって産生された２種のβ−ガラクトシダーゼ
を,70％（W/W）濃度のソルビトール水溶液中にそれぞれ
所定濃度に溶解し,5ml宛試験管に封入後80℃湯浴中で30
分,1時間及び２時間保温した時の酵素活性を測定し，保
温前の活性と比較して酵素活性残存率を算出した。
微生物によって産生された２種のβ−ガラクトシダーゼ
を,70％（W/W）濃度のソルビトール水溶液中にそれぞれ
所定濃度に溶解し,5ml宛試験管に封入後80℃湯浴中で30
分,1時間及び２時間保温した時の酵素活性を測定し，保
温前の活性と比較して酵素活性残存率を算出した。
なお，供試酵素及び酵素濃度は以下の通りである。
（イ） 供試酵素 試料1:（アスペルギルスβ−gal.） 試料2:〔アスペルギルス・オリーゼＵ−８（微工研菌寄
第7378号）が産生したβ−ガラクトシダーゼ〕 （ロ） 酵素濃度 試料1:766U/ml 試料2:272U/ml 本試験の結果は第５表に示す通りである。
第7378号）が産生したβ−ガラクトシダーゼ〕 （ロ） 酵素濃度 試料1:766U/ml 試料2:272U/ml 本試験の結果は第５表に示す通りである。
第５表から明らかなように，本発明のβ−ガラクトシダ
ーゼ水性組成物は，比較的短時間であれば80℃の高温で
も活性低下の少ない耐熱性を示した。
ーゼ水性組成物は，比較的短時間であれば80℃の高温で
も活性低下の少ない耐熱性を示した。
Claims (1)
- 【請求項１】マルチトール，キシリトール及びソルビト
ールから選ばれる糖アルコールの１種又は２種以上を50
〜80％（W/W）濃度で含有することを特徴とする安定な
アスペルギルス・オリーゼ起源のβ−ガラクトシダーゼ
水性組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60100612A JPH0728741B2 (ja) | 1985-05-14 | 1985-05-14 | 安定なβ−ガラクトシダ−ゼ水性組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60100612A JPH0728741B2 (ja) | 1985-05-14 | 1985-05-14 | 安定なβ−ガラクトシダ−ゼ水性組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61260882A JPS61260882A (ja) | 1986-11-19 |
| JPH0728741B2 true JPH0728741B2 (ja) | 1995-04-05 |
Family
ID=14278666
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60100612A Expired - Lifetime JPH0728741B2 (ja) | 1985-05-14 | 1985-05-14 | 安定なβ−ガラクトシダ−ゼ水性組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0728741B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5621094A (en) * | 1990-05-14 | 1997-04-15 | Quadrant Holdings Cambridge Limited | Method of preserving agarose gel structure during dehydration by adding a non-reducing glycoside of a straight-chain sugar alcohol |
| TWI491361B (zh) * | 2008-06-10 | 2015-07-11 | Oriental Yeast Co Ltd | 對食品用抗老化劑賦予耐熱性之用途 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS57118790A (en) * | 1981-01-14 | 1982-07-23 | Takeda Chem Ind Ltd | Freeze-dried substance containing beta-d-galactosidase |
| JPS589688A (ja) * | 1981-07-06 | 1983-01-20 | Toyobo Co Ltd | 安定な酵素組成物 |
-
1985
- 1985-05-14 JP JP60100612A patent/JPH0728741B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61260882A (ja) | 1986-11-19 |
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