JPH07291986A - 結晶マルトシルグルコシドとその製造方法並びに用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 新規結晶糖質とその製造方法並びに用途を提
供する。 【構成】 結晶マルトシルグルコシド、及びマルトシル
グルコシド含有溶液から結晶マルトシルグルコシドを晶
出、採取して製造する方法、並びに結晶マルトシルグル
コシドを含有せしめた組成物を主な構成とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規結晶糖質とその製
造方法並びに用途に関し、詳細には、結晶マルトシルグ
ルコシドとその製造方法並びに用途に関する。

【０００２】

【従来の技術】マルトトリオースは、式：Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−（１→４）−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−（１→４）−Ｄ−グルコピラノースで示され
る三糖類で、水飴、粉飴などに含まれる甘味糖質として
古くから知られている。この糖質は、低甘味を特徴に各
種飲料、加工食品、嗜好物などの組成物に利用されてい
る。

【０００３】しかしながら、マルトトリオースは、還元
性糖質であるため、飲料、加工食品、嗜好物などに含ま
れるタンパク質やアミノ酸などと褐変反応し易く、変
質、劣化を起こし易い欠点がある。そこで、本発明者等
は、この欠点を解消すべく鋭意研究し、先に特願平５−
３４９２１６号明細書で記載したグルコース重合度３以
上の還元性澱粉部分分解物から末端にトレハロース構造
を有する非還元性糖質を生成する酵素（本明細書におい
ては、本酵素を単に「非還元性糖質生成酵素」と略称す
ることがある。）を作用させることにより、マルトトリ
オースから非還元性のマルトシルグルコシドを生成する
ことを見いだした。しかしながら、この非還元性糖質マ
ルトシルグルコシドの粉末は、非晶質で物理的に不安定
であって、より安定な結晶の確立が望まれる。

【０００４】一方、マルトシルグルコシド自体について
は、例えば、フォン・ヴェルナー・フィッシャー（Ｖｏ
ｎ Ｗｅｒｎｅｒ Ｆｉｓｃｈｅｒ）等が、『ホッペー
ザイラース・ツァイトシュリフト・フュル・フィジオロ
ジッセ・ヘミー（Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ’ｓ Ｚｅ
ｉｔｓｈｒｉｆｔ ｆｕｒ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｓｈ
ｅ Ｃｈｅｍｉｅ）』、第３５０巻、第１１３７乃至１
１４７頁（１９６９年）で報告している微生物菌体から
抽出する方法や、シンキチ・コト（Ｓｈｉｎｋｉｔｉ
Ｋｏｔｏ）等が、『ブリティン・オブ・ケミカル・ソサ
イエティー・オブ・ジャパン（Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｏｆ
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙｏｆ Ｊａｐａ
ｎ）』、第５９巻、第４１１乃至４１４頁（１９８６
年）で報告し、またハンス・ピーター・ベッセル（Ｈａ
ｎｓ Ｐｅｔｅｒ Ｗｅｓｓｅｌ）等が、『ヘルベティ
カ・キミカ・アクタ（Ｈｅｌｖｅｔｉｃａ Ｃｈｉｍｉ
ｃａＡｃｔａ）』、第７４巻、第６８２乃至６９５頁
（１９９１年）で報告している化学的合成法などでその
調製方法が知られているものの、その結晶については何
らの記載もなく、未だ知られていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、結晶マルト
シルグルコシドの確立と結晶マルトシルグルコシドの製
造方法並びにその用途を提供しようとするものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、上記課題
を解決するために、鋭意研究を続けてきた。その結果、
還元性澱粉部分分解物であるマルトペンタオースに非還
元性糖質生成酵素を作用させて、マルトペンタオースを
非還元性のマルトテトラオシルグルコシドに変換させ、
次いで、これにβ−アミラーゼを作用させて得られるマ
ルトシルグルコシド含有液を塩型強酸性カチオン交換樹
脂を用いるカラムクロマトグラフィーにかけ、精製して
得られるマルトシルグルコシド高含有液を濃縮し、冷室
に保存していたところ、結晶が析出する現象を見いだ
し、更に、本結晶が結晶マルトシルグルコシドであるこ
とを解明して、新規結晶マルトシルグルコシドを確立す
るとともに、その製造方法並びに用途を確立して本発明
を完成した。併せて、結晶マルトシルグルコシドとし
て、含水結晶と無水結晶の存在を解明し、その製造方法
並びに用途を確立して本発明を完成した。

【０００７】結晶マルトシルグルコシドの製造方法とし
ては、本結晶が製造できる方法であればよく、通常、マ
ルトシルグルコシド含有溶液からこれを晶出、採取す
る。

【０００８】マルトシルグルコシドを製造するには、化
学的合成法であってもよいが、一般的には、糖転移酵素
又は非還元性糖質生成酵素などを用いる生化学的方法が
有利である。

【０００９】糖転移酵素を用いる方法としては、例え
ば、トレハロースとα−グルコシル糖質とを含有する水
溶液に糖転移酵素を作用させて、例えば、マルトシルグ
ルコシド、マルトトリオシルグルコシド、マルトテトラ
オシルグルコシドなどのα−Ｄ−オリゴグルコシルグル
コシドを生成させればよく、必要に応じて、これにβ−
アミラーゼ又はβ−アミラーゼとともにプルラナーゼ、
イソアミラーゼなどの澱粉枝切酵素を作用させて、マル
トシルグルコシドの含量を高めることも有利に実施でき
る。

【００１０】この際、α−グルコシル糖質としては、使
用される糖転移酵素によってトレハロースへグルコース
残基をα−１，４結合で１個又は２個以上糖転移できる
糖質であればよく、例えば、澱粉、糊化澱粉、液化澱
粉、可溶性澱粉、アミロース、アミロペクチン、還元性
澱粉部分分解物、澱粉糖転移物、シクロデキストリン、
デキストリン、マルトオリゴ糖、蔗糖などのα−グルコ
シル結合を有する糖質から選ばれる１種又は２種以上の
糖質が適宜採用される。

【００１１】通常、糖転移酵素がシクロマルトデキスト
リン・グルカノトランスフェラーゼ（ＥＣ ２．４．
１．１９）、α−アミラーゼ（ＥＣ ３．２．１．１）
の場合には、例えば、澱粉、糊化澱粉、アミロペクチ
ン、アミロース、還元性澱粉部分分解物、シクロデキス
トリン、デキストリン、マルトオリゴ糖などが好適であ
り、また、α−グルコシダーゼの場合には、マルトー
ス、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペ
ンタオースなどのマルトオリゴ糖、デキストリン、蔗糖
などが好適である。

【００１２】また、非還元性糖質生成酵素を用いて、マ
ルトシルグルコシドを生成させるには、高純度マルトト
リオースに該酵素を作用させてもよいが、一般的には、
グルコース重合度３以上の還元性澱粉部分分解物に非還
元性糖質生成酵素を作用させて、末端にトレハロース構
造を有する非還元性糖質、例えば、マルトシルグルコシ
ド、マルトトリオシルグルコシド、マルトテトラオシル
グルコシドなどのα−Ｄ−オリゴグルコシルグルコシド
を生成させればよい。この方法も糖転移酵素を利用する
場合と同様に、必要に応じて、更にβ−アミラーゼ又は
β−アミラーゼとともに澱粉枝切酵素を作用させて、マ
ルトシルグルコシドの含量を高めることも有利に実施で
きる。

【００１３】還元性澱粉部分分解物としては、非還元性
糖質生成酵素によってマルトシルグルコシドを生成する
か、又はマルトシルグルコシド構造を含む糖質を生成し
うるものであればよく、一般的には、澱粉、糊化澱粉、
液化澱粉、溶性澱粉、アミロペクチン、アミロース、デ
キストリン、ＤＥ１乃至４０の還元性澱粉部分分解物、
グルコース重合度３以上のマルトオリゴ糖などが有利に
利用できる。

【００１４】本発明に用いる非還元性糖質生成酵素とし
ては、例えば、本発明者等が、先に、特願平５−３４９
２１６号明細書で記載したように、既に茨城県つくば市
東１丁目１番３号にある通商産業省工業技術院生命工学
工業技術研究所、特許微生物寄託センターに寄託してい
るリゾビウム・スピーシーズ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍｓ
ｐ．）Ｍ−１１『受託番号、微工研条寄第４１３０号
（ＦＥＲＭ ＢＰ−４１３０）』やアルスロバクター・
スピーシーズ（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｓｐ．）Ｑ
３６『受託番号、ＦＥＲＭ ＢＰ−４３１６』などの微
生物、更には、公知の、例えば、ブレビバクテリウム・
ヘロボルム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈｅｌｏ
ｖｏｌｕｍ）ＡＴＣＣ１１８２２、フラボバクテリウム
・アクアティレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｑ
ｕａｔｉｌｅ）ＩＦＯ３７７２、ミクロコッカス・ルテ
ウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｌｕｔｅｕｓ）ＩＦＯ
３０６４、ミクロコッカス・ロゼウス（Ｍｉｃｒｏｃｏ
ｃｃｕｓ ｒｏｓｅｕｓ）ＡＴＣＣ１８６、クルトバク
テリウム・シトレウム（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｃｉｔｒｅｕｍ）ＩＦＯ１５２３１、マイコバクテリ
ウム・スメグマチス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓ
ｍｅｇｍａｔｉｓ）ＡＴＣＣ１９４２０、テラバクター
・ツメスセンス（Ｔｅｒｒａｂａｃｔｅｒ ｔｕｍｅｓ
ｃｅｎｓ）ＩＦＯ１２９６０などの非還元性糖質生成酵
素産生能を有する微生物を栄養培地に培養し、この培養
物を採取し、利用することもできるが、必要ならば、公
知の方法で適宜精製して利用してもよい。

【００１５】このようにして得られる非還元性糖質生成
酵素は、グルコース重合度３以上から選ばれる１種又は
２種以上の還元性澱粉部分分解物から末端にトレハロー
ス構造を有する非還元性糖質を生成する作用を有する。

【００１６】これらの酵素反応条件は、目的の酵素反応
が進む限り採用することができるが、一般的には、基質
濃度約１乃至５０ｗ／ｗ％（以下、本明細書では、特に
ことわらない限り、ｗ／ｗ％を％で示す。）、反応温度
約２０乃至８０℃、反応ｐＨは、約４乃至１０、反応時
間は、約１乃至１００時間から選ばれる条件から採用さ
れる。これら反応に利用される酵素は、必要に応じて、
担体結合法、架橋法、包括法などの公知方法により固定
化して、連続反応に利用することも、回分反応で繰り返
し利用することも随意である。

【００１７】以上述べたような酵素反応には、通常、固
形物当たりマルトシルグルコシドを１乃至６７％程度含
有している。この反応液から結晶マルトシルグルコシド
を製造するには、一般的には、夾雑物質を分離、精製し
て、マルトシルグルコシド高含有液とし、これを濃縮
し、晶出せしめた結晶マルトシルグルコシドを採取する
のが有利である。

【００１８】その分離、精製方法としては、例えば、酵
母発酵法、膜濾過法、分別沈澱法、アルカリ処理法、ク
ロマトグラフィー法などが適宜採用できる。とりわけ、
特開昭５８−２３７９９号公報、特開昭５９−１４８７
９４号公報などに開示されている塩型強酸性カチオン交
換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにより、夾雑
糖質を除去してマルトシルグルコシド高含有液を採取す
る方法が有利に実施できる。この際、公知の固定床方
式、移動床方式、擬似移動床方式のいずれの方法を採用
することも随意である。

【００１９】このようにして得られたマルトシルグルコ
シド高含有溶液からマルトシルグルコシドを晶出させる
には、結晶の種類によって、それぞれ適当な条件が選ば
れる。晶出条件としては、マルトシルグルコシドの過飽
和溶液であって、結晶マルトシルグルコシドが析出すれ
ばよく、マルトシルグルコシド自体の製造方法は問わな
い。

【００２０】具体的に述べれば、純度６０％以上のマル
トシルグルコシドを、濃度約６５乃至９５％又はこれ以
上の濃度とし、その溶液の温度は、溶液が凍結せず、ま
た結晶の融点以下でマルトシルグルコシドの褐変、分解
の懸念の少ない温度、例えば、含水結晶の場合、水分約
１０％以上の溶液を約１０乃至９０℃で、無水結晶の場
合、水分約１０％未満の溶液を約９０乃至１５０℃で晶
出させればよい。また、無水結晶は、含水結晶を減圧乾
燥又は加熱乾燥することによっても容易に製造すること
ができる。また、晶出させるに際して、溶液の過飽和
度、粘度などを調整するために、例えば、メタノール、
エタノール、アセトンなどを共存させることも随意であ
る。

【００２１】晶出方法は、通常、比較的高温の過飽和マ
ルトシルグルコシド含有溶液を助晶缶にとり、これに種
晶を、望ましくは、０．１乃至２０％共存せしめて、ゆ
っくり攪拌しつつ、徐冷し、晶出を促してマスキットに
すればよい。

【００２２】晶出したマスキットから結晶マルトシルグ
ルコシドを製造する方法は、結晶マルトシルグルコシド
が採取できればよく、例えば、分蜜方法、ブロック粉砕
方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法などの公知の方法を
利用すればよい。

【００２３】例えば、分蜜方法は、通常、バスケット型
遠心分離機にかけ、結晶マルトシルグルコシドと蜜とを
分離する方法で、必要により、該結晶に少量の冷水をス
プレーして洗浄することも容易であり、より高純度の結
晶マルトシルグルコシドを製造するのに好適である。他
の三つの方法は、蜜を分離しないので、得られる結晶製
品に純度の向上は見られないものの製品収量の多い特長
を有している。したがって、本製品の場合には、通常、
結晶製品に、マルトシルグルコシド以外に原料又は製造
工程由来の糖質、例えば、トレハロース、グルコース、
マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオースな
どの澱粉糖が含まれる。

【００２４】噴霧乾燥方法の場合には、通常、晶出率約
２５乃至６０％のマスキットを高圧ポンプでノズルから
噴霧し、結晶粉末が溶融しない温度、例えば、約６０乃
至１００℃の熱風で乾燥し、次いで、温風で乾燥熟成す
れば、非吸湿性又は難吸湿性の結晶含有粉末が容易に製
造できる。

【００２５】また、ブロック粉砕方法は、通常、晶出率
約１０乃至６０％のマスキットを約０．５乃至５日間静
置して全体をブロック状に晶出固化させ、これを粉砕又
は切削などの方法によって破砕し、乾燥すれば、非吸湿
性、難吸湿性の結晶含有粉末が容易に製造できる。

【００２６】また、マルトシルグルコシド含有水溶液
を、常法に従い、水分５％未満に加熱濃縮して、溶融状
態とした過飽和マルトシルグルコシド含有溶液とし、こ
の溶液に種晶を結晶の融点以下の温度で混捏し、これを
各種形状、例えば、粉体、顆粒、棒状、板状、立方体な
どに成形して、非吸湿性又は難吸湿性の結晶含有固体を
製造することも随意である。

【００２７】このようにして得られる結晶マルトシルグ
ルコシドは、そのマルトシルグルコシドの純度によっ
て、その非吸湿性は多少変動するが、実質的に非吸湿性
であり、流動性であり、粘着、固着の懸念も少なく取扱
い容易であり、その包装、輸送、貯蔵などの管理に要す
る物的、人的経費が大幅に削減できる。

【００２８】また、本発明の結晶マルトシルグルコシド
は、実質的に非吸湿性乃至難吸湿性の粉末で、耐熱性が
高く、安定性もよいので、従来、極めて困難とされてい
た粉末混合甘味料、チョコレート、チューインガム、即
席ジュース、即席スープ、顆粒、錠剤などの賦形剤、増
量剤、粉末基剤などとして、例えば、飲食物、化粧品、
医薬品、成形物などの各種組成物、更には試薬、化学工
業用原料などの各種用途に有利に利用できる。

【００２９】また、結晶マルトシルグルコシドは、その
純度の違いにより、融点、比旋光度などの理化学的性質
が変化する。このうち融点は、マルトシルグルコシドの
純度が低下するにともなって低下し、融点の幅も広くな
る。例えば、純度８８．６％の結晶マルトシルグルコシ
ドの融点は、１３８乃至１４６℃である。したがって、
結晶マルトシルグルコシドは、必要性に応じて、その純
度を適宜選択して利用すればよい。

【００３０】また、本発明の結晶マルトシルグルコシド
は、水に溶け、良質で中程度の甘味を有している。ま
た、経口摂取により、消化吸収され、カロリー源として
利用される。更に、虫歯誘発菌などによって、発酵され
にくいことより、虫歯を起こしにくい甘味料としても利
用できる。また、良質な甘味料、賦形剤であることよ
り、プルラン、ヒドロキシエチルスターチなどの結合剤
と併用して、錠剤の糖衣剤として利用することも有利に
実施できる。その他、ボディー付与性、照り付与性、保
湿性、粘性、耐熱性、耐酸性、非還元性乃至低還元性な
どの性質を具備している。

【００３１】結晶マルトシルグルコシドの持つこれら諸
性質は、食品、嗜好物、飼料、餌料などの飲食物、更に
は、化粧品、医薬品、成形物など各種組成物の製造に有
利に利用できる。

【００３２】本発明の結晶マルトシルグルコシドは、そ
のままで甘味付けのための調味料として使用することが
できる。必要ならば、例えば、粉飴、ブドウ糖、マルト
ース、蔗糖、異性化糖、蜂蜜、メープルシュガー、ソル
ビトール、ジヒドロカルコン、ステビオシド、α−グリ
コシルステビオシド、レバウディオシド、グリチルリチ
ン、Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
ステル、サッカリン、グリシン、アラニンなどのような
他の甘味料の１種又は２種以上の適量と混合して使用し
てもよく、また必要ならば、デキストリン、澱粉、乳糖
などのような増量剤と混合して使用することもできる。

【００３３】また、結晶マルトシルグルコシド粉末品
は、実質的に難吸湿性の粉末で、耐熱性が大きく、安定
性も良いので、増量剤、賦形剤、粉末基剤なとどとし
て、そのままで、又は必要に応じて、他の増量剤、賦形
剤、結合剤などと混合して、顆粒、球状、短棒状、板
状、立方体、錠剤など各種形状に成形して使用すること
も随意である。また、本粉末品は、小麦粉、コーングリ
ッツ、澱粉などの粉類の一部に置き換えて、例えば、製
菓材料、製パン材料、シリアル材料などに利用すること
も有利に実施できる。

【００３４】また、結晶マルトシルグルコシドの甘味
は、酸味、塩から味、渋味、旨味、苦味などの他の呈味
を有する各種物質とよく調和し、耐酸性、耐熱性も大き
いので、一般の飲食物の甘味付け、呈味改良に、また品
質改良などに有利に利用できる。例えば、醤油、粉末醤
油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、ふりかけ、マヨ
ネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中
華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、ケチャップ、焼肉の
タレ、カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの
素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガ
ー、コーヒーシュガーなど各種調味料として有利に使用
できる。さらに、例えば、せんべい、あられ、おこし、
餅類、まんじゅう、ういろう、あん類、羊羮、水羊羮、
錦玉、ゼリー、カステラ、飴玉などの各種和菓子、パ
ン、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリ
ン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリ
ーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナツ、チョコレ
ート、チューインガム、キャラメル、キャンデーなどの
各種洋菓子、アイスクリーム、シャーベットなどの氷
菓、果実のシロップ漬、氷蜜などのシロップ類、フラワ
ーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、
スプレッドなどのペースト類、ジャム、マーマレード、
シロップ漬、糖果などの果実、野菜の加工食品類、福神
漬、べったら漬、千枚漬、らっきょう漬などの漬物類、
たくあん漬の素、白菜漬の素などの漬物の素類、ハム、
ソーセージなどの畜肉製品類、魚肉ハム、魚肉ソーセー
ジ、かまぼこ、ちくわ、天ぷらなどの魚肉製品、ウニ、
イカの塩辛、酢コンブ、さきするめ、ふぐみりん干しな
どの各種珍味類、のり、山菜、するめ、小魚、貝などで
製造されるつくだ煮類、煮豆、ポテトサラダ、こんぶ巻
などのそう菜食品、乳製品、魚肉、畜肉、果実、野菜の
ビン詰、缶詰類、合成酒、洋酒などの酒類、コーヒー、
ココア、ジュース、炭酸飲料、乳酸飲料、乳酸菌飲料な
どの清涼飲料水、プリンミックス、ホットケーキミック
ス、即席しるこ、即席スープなどの即席食品、更には、
離乳食、治療食、ドリンク剤などの各種飲食物への甘味
付けに、呈味改良に、また、品質改良などに有利に利用
できる。

【００３５】また、家畜、家禽、その他蜂、蚕、魚など
の飼育動物のために飼料、餌料などの嗜好性を向上させ
る目的で使用することもできる。その他、タバコ、練歯
磨、口紅、リップクリーム、内服薬、トローチ、錠剤、
肝油ドロップ、口中清涼剤、口中香剤、うがい薬など各
種固形状、ペースト状、液状などで嗜好物、化粧品、医
薬品などの口中使用物への甘味剤として、又は呈味改良
剤、矯味剤として、更には品質改良剤として有利に利用
できる。

【００３６】また、結晶マルトシルグルコシドは、例え
ば、石鹸、スキンクリーム、ボディシャンプー、ヘアク
リーム、リップクリーム、美肌剤、育毛剤などへの安定
剤、浸透圧調節剤、賦形剤、保湿調節剤、粘度調節剤、
品質改良剤などとして化粧品製造に有利に利用できる。

【００３７】更に、生理活性物質、例えば、インターフ
ェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン
−γ、ツモア・ネクロシス・ファクター−α、ツモア・
ネクロシス・ファクター−β、リンホトキシン、マクロ
ファージ遊走阻止因子、コロニー刺激因子、トランスフ
ァー・ファクター、インターロイキン２などのサイトカ
イン、インシュリン、成長ホルモン、プロラクチン、エ
リトロポエチン、卵胞刺激ホルモンなどのホルモン、Ｂ
ＣＧワクチン、日本脳炎ワクチン、はしかワクチン、ポ
リオ生ワクチン、痘苗、破傷風菌トキソイド、ハブ抗毒
素、ヒト免疫グロブリンなどのワクチン、ペニシリン、
エリスロマイシン、クロラムフェニコール、テトラサイ
クリン、ストレプトマイシン、硫酸カナマイシンなどの
抗生物質、チアミン、リボフラビン、Ｌ−アスコルビン
酸、肝油、カロチノイド、エルゴステロール、トコフェ
ロールなどのビタミン、リパーゼ、エステラーゼ、ウロ
キナーゼ、プロテアーゼ、グルカナーゼなどの酵素、薬
用人参エキス、スッポンエキス、クロレラエキス、プロ
ポリス、ローヤルゼリーなどのエキス類、ウイルス、乳
酸菌、ビフィズス菌、酵母などの生菌類などの有効成
分、活性の安定剤として、更には、浸透圧調節剤、賦形
剤、経管栄養剤、シロップ剤などとして医薬品製造に有
利に利用できる。以上述べたような飲食物、化粧品、医
薬品、成形物など各種組成物に本発明の結晶マルトシル
グルコシドを含有せしめる方法は、その組成物が完成す
るまでの工程に含有せしめればよく、例えば、混和、混
捏、溶解、融解、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴
霧、注入、固化、晶出など公知の方法が適宜選ばれる。
その含有せしめる量は、組成物によっても異なるが、一
般的には、結晶マルトシルグルコシドとして、０．１％
以上、望ましくは０．５％以上の量が好適である。この
ようにして得られる組成物は、経口的又は非経口的に利
用される飲食物、化粧品、医薬品、成形物のみならず、
それ以外にも、例えば、生活用品、農林水産用品、化学
工業用品など広範な用途を有する。

【００３８】次に、実験により本発明を更に詳細に説明
する。

【００３９】まず、実験Ａで、非還元性糖質生成酵素の
一例として、リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１から
の酵素の生産、精製及び性質について説明し、その後、
該酵素を用いた還元性澱粉部分分解物から末端にトレハ
ロース構造を有する非還元性糖質及びトレハロースの調
製例について説明する。次に、実験Ｂで、本発明の結晶
マルトシルグルコシドの調製例とその理化学的性質につ
いて述べる。

【００４０】

【実験Ａ−１ リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１か
らの非還元性糖質生成酵素の生産】マルトース２．０ｗ
／ｖ％、ペプトン０．５ｗ／ｖ％、酵母エキス０．１ｗ
／ｖ％、リン酸二ナトリウム０．１ｗ／ｖ％、リン酸一
カリウム０．１ｗ／ｖ％及び水からなる液体培地をｐＨ
７．０に調整した。５００ｍｌ容三角フラスコにこの培
地を約１００ｍｌずつ入れ、オートクレーブで１２０℃
で２０分間滅菌し、冷却して、リゾビウム・スピーシー
ズ Ｍ−１１（ＦＥＲＭ ＢＰ−４１３０）を接種し、
２７℃、１３０ｒｐｍで２４時間培養したものを種培養
液とした。

【００４１】容量３０ｌのファーメンターに種培養の場
合と同組成の培地約２０ｌを入れて滅菌、冷却して温度
３０℃とした後、種培養液１ｖ／ｖ％を接種し、温度３
０℃、ｐＨ６．０乃至８．０に保ちつつ、約２４時間通
気撹拌培養した。培養液の本酵素活性は約１．５単位／
ｍｌであった。培養液の一部を採り遠心分離して菌体と
培養液上清とに分離し、更に菌体を５０ｍＭリン酸緩衝
液（ｐＨ７．０）で元の培養液と同じ液量の懸濁液とし
た後、菌体懸濁液と培養液上清の酵素活性を測定したと
ころ、菌体懸濁液には約０．６単位／ｍｌの酵素活性
が、また、培養液上清には約０．９単位／ｍｌの酵素活
性が認められた。

【００４２】非還元性糖質精製酵素の活性測定方法は、
基質としてマルトペンタオース１．２５ｗ／ｖ％（５０
ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．０）４ｍｌに酵素液を１ｍ
ｌ加え４０℃で６０分間反応させた後、１００℃で１０
分間加熱して反応を停止させ、その反応液を正確に脱イ
オン水で１０倍に希釈し、その希釈液の還元力をソモギ
ー・ネルソン法にて測定する。対照として、あらかじめ
１００℃で１０分間加熱させることにより失活させた酵
素液を用いて同様に測定する。上記の測定方法を用い
て、１分間に１μｍｏｌｅのマルトペンタオースに相当
する還元力を減少させる酵素量を１単位と定義した。

【００４３】

【実験Ａ−２ 酵素の精製】実験Ａ−１で得られた培養
液約１８ｌを超高圧菌体破砕装置ミニラボ（大日本製薬
株式会社製）で処理し、含まれる菌体を破砕した。処理
液を遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３０分間）するこ
とにより、約１６ｌの上清を得た。その液に飽和度０．
２になるように硫安を溶解させ、４℃、１時間放置した
後、遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３０分間）するこ
とにより上清を回収した。

【００４４】更に、その液に飽和度０．６になるように
硫安を溶解させ、４℃、２４時間放置した後、遠心分離
（１０，０００ｒｐｍ、３０分間）して硫安塩析物を回
収した。得られた硫安塩析物を１０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７．０）に溶解させた後、同じ緩衝液に対して２
４時間透析し、遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３０分
間）して不溶物を除いた。その透析液（３６０ｍｌ）を
２回に分けて、ＤＥＡＥ−トヨパールゲル（東ソー株式
会社製造）を用いたイオン交換カラムクロマトグラフィ
ー（ゲル量３００ｍｌ）を行った。

【００４５】本酵素はＤＥＡＥ−トヨパールゲルに吸着
し、食塩を含む同緩衝液でカラムから溶出した。得られ
る酵素活性画分を、２Ｍ硫安を含む同緩衝液に対して透
析し、その透析液を遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、３
０分間）して不溶物を除き、得られる上清をブチルトヨ
パール６５０ゲル（東ソー株式会社製造）を用いた疎水
カラムクロマトグラフィー（ゲル量３００ｍｌ）を行っ
た。吸着した本酵素を硫安２Ｍから０Ｍのリニアグラジ
エントによりカラムから溶出させ、酵素活性画分を回収
した。続いて、トヨパールＨＷ−５５樹脂（東ソー株式
会社製造）を用いたゲル濾過クロマトグラフィー（ゲル
量３００ｍｌ）を行い、酵素活性画分を回収した。精製
の各工程における酵素活性量、比活性、収率を表１に示
す。

【００４６】

【表１】

【００４７】表１の工程でゲル濾過溶出液として得られ
た精製酵素標品をポリアクリルアミドゲル（ゲル濃度
７．５ｗ／ｖ％）を用いる電気泳動法で純度を検定した
ところ、蛋白バンドは単一であることが示され、得られ
た酵素標品は電気泳動的に単一な純度の高い標品であっ
た。

【００４８】

【実験Ａ−３ 酵素の性質】実験Ａ−２で得られた精製
酵素標品をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル（ゲル濃度
１０ｗ／ｖ％）を用いる電気泳動法に供し、同時に泳動
した分子量マーカー（日本バイオ・ラド・ラボラトリー
ズ株式会社製）と比較して本酵素の分子量を測定したと
ころ、分子量約７７，０００乃至８７，０００ダルトン
であった。

【００４９】精製酵素標品をポリアクリルアミドゲル
（２ｗ／ｖ％アンフォライン含有、スウエーデン国、フ
ァルマシア・エルケイビー社製）を用いる等電点電気泳
動法に供し、泳動後、ゲルのｐＨを測定して本酵素の等
電点を求めたところ、等電点は約３．６乃至４．６であ
った。

【００５０】本酵素活性に対する温度の影響、ｐＨの影
響は活性測定方法に準じて調べた。結果を図１（温度の
影響）、図２（ｐＨの影響）に示した。酵素の至適温度
は、ｐＨ７．０、６０分間反応で、４０℃付近、至適ｐ
Ｈは、４０℃、６０分間反応で、約７．０であった。本
酵素の温度安定性は、酵素溶液（５０ｍＭリン酸緩衝液
を含む、ｐＨ７．０）を各温度に６０分間保持し、水冷
した後、残存する酵素活性を測定することにより求め
た。また、ｐＨ安定性は、本酵素を各ｐＨの５０ｍＭ緩
衝液中で２５℃、１６時間保持した後、ｐＨを７に調整
し、残存する酵素活性を測定することにより求めた。そ
れぞれの結果を図３（温度安定性）、図４（ｐＨ安定
性）に示した。本酵素の温度安定性は４０℃付近まで安
定であり、ｐＨ安定性は約６乃至９であった。

【００５１】

【実験Ａ−４ 非還元性糖質の調製】基質として、グル
コース、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラ
オース、マルトペンタオース、マルトヘキサオース、又
はマルトヘプタオースの２０％水溶液を調製し、それぞ
れに実験Ａ−２で得られた精製酵素標品を基質固形物グ
ラム当たり２単位の割合で加え、４０℃、ｐＨ７．０で
４８時間作用させた後、脱塩し、ワコービーズ ＷＢ−
Ｔ−３３０カラム（和光純薬工業株式会社製）を用いた
高速液体クロマトグラフィーで反応生成物を分析した。
高速液体クロマトグラフィーは、室温下で行い、溶離液
として水を流速０．５ｍｌ／分で流し、示差屈折計ＲＩ
−８０１２（東ソー株式会社製造）で分析した。その結
果を表２に示す。

【００５２】

【表２】

【００５３】表２の結果から明らかなように、反応物中
には残存するそれぞれの基質と新たに生成したそれぞれ
の糖質ＰＩ、ＰＩＩ、ＰＩＩＩ、ＰＩＶ、ＰＶからな
り、それ以外の糖質はほとんど検出されない。それぞれ
の生成率はグルコース重合度３のＰＩが比較的低いもの
の、グルコース重合度４以上のＰＩＩ、ＰＩＩＩ、ＰＩ
Ｖ、ＰＶは８５％以上の高い生成率であることが判明し
た。なお、グルコース、マルトースからは、新たな糖質
を生成しないことが判明した。

【００５４】それぞれの反応物から新たに生成した糖質
を精製するため、脱色、脱塩、濃縮後、アルカリ金属型
強酸性カチオン交換樹脂（ＸＴ−１０１６、Ｎａ⁺型、
架橋度４％、東京有機化学工業株式会社製造）を用いた
カラム分画を行った。樹脂を内径２．０ｃｍ、長さ１ｍ
のジャケット付きステンレス製カラム３本に充填し、直
列につなぎ、カラム内温度を５５℃に維持しつつ、反応
糖液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに５５℃の温
水をＳＶ０．１３で流して分画し、新たに生成した糖質
含量９７％以上の高純度画分を採取した。得られた高純
度画分を真空乾燥し、それぞれ高純度糖質標品を調製し
た。基質原料に対する収率は、固形物換算で、それぞれ
ＰＩで約９％、ＰＩＩで約６５％、ＰＩＩＩで約８２
％、ＰＩＶで約８０％、ＰＶで約７７％であった。その
純度は、それぞれＰＩで９７．５％、ＰＩＩで９８．６
％、ＰＩＩＩで９９．５％、ＰＩＶで９８．４％、ＰＶ
で９８．４％であった。

【００５５】またこれらの新たに生成した高純度糖質標
品の還元力をソモギー・ネルソン法で測定し、ＤＥで表
した。結果は表３にまとめた。

【００５６】

【表３】

【００５７】表３の結果から明らかなように、いずれの
標品にも僅かな還元力しか認めらなかった。その僅かな
還元力は、その標品中に微量に混入、残存している基質
由来の還元性マルトオリゴ糖に起因するものと推定さ
れ、新たに生成した糖質はいずれも実質的に非還元性で
あると判断される。

【００５８】

【実験Ａ−５ グルコアミラーゼによる酵素分解】実験
Ａ−４において調製した非還元性糖質標品、ＰＩ、ＰＩ
Ｉ、ＰＩＩＩ、ＰＩＶ又は、ＰＶのそれぞれ５０ｍｇ
を、５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）１ｍｌに溶解
し、１単位のグルコアミラーゼ（生化学工業株式会社製
造）を加え、４０℃で６時間保ち、酵素分解した後、高
速液体クロマトグラフィーで分解物を分析したところ、
いずれの標品からも分解物としてグルコースとトレハロ
ースのみが検出された。検出されたグルコース含量、ト
レハロース含量、その組成モル比の結果を表４に示す。

【００５９】

【表４】

【００６０】表４の結果から明らかなように、グルコア
ミラーゼにより、非還元性糖質ＰＩはグルコース１分子
とトレハロース１分子に分解され、非還元性糖質ＰＩＩ
はグルコース２分子とトレハロース１分子に分解され、
非還元性糖質ＰＩＩＩはグルコース３分子とトレハロー
ス１分子に分解され、非還元性糖質ＰＩＶはグルコース
４分子とトレハロース１分子に分解され、非還元性糖質
ＰＶはグルコース５分子とトレハロース１分子に分解さ
れることが判明した。

【００６１】また、グルコアミラーゼの反応特性を考慮
すると、これら非還元性糖質の構造はトレハロース分子
にグルコース分子がα−１，４結合、もしくはα−１，
６結合で結合した糖質で、それぞれ、ＰＩはトレハロー
ス１分子にグルコース１分子が結合したグルコース重合
度３の非還元性糖質で、ＰＩＩはトレハロース１分子に
グルコース２分子が結合したグルコース重合度４の非還
元性糖質で、ＰＩＩＩはトレハロース１分子にグルコー
ス３分子が結合したグルコース重合度５の非還元性糖質
で、ＰＩＶはトレハロース１分子にグルコース４分子が
結合したグルコース重合度６の非還元性糖質で、ＰＶは
トレハロース１分子にグルコース５分子が結合したグル
コース重合度７の非還元性糖質であると判断される。な
お、同様に、非還元性糖質標品、ＰＩ、ＰＩＩ、ＰＩＩ
Ｉ、ＰＩＶ、又はＰＶにβ−アミラーゼを作用させたと
ころ、非還元性糖質ＰＩ、ＰＩＩは分解されず、ＰＩＩ
Ｉはマルトースの１分子とＰＩの１分子に分解され、Ｐ
ＩＶはマルトースの１分子とＰＩＩの１分子に分解さ
れ、ＰＶはマルトースの２分子とＰＩの１分子に分解さ
れることが判明した。

【００６２】以上の結果から、本発明の非還元性糖質生
成酵素による反応は、基質の低分子化及び高分子化を伴
わない、換言すれば、グルコース重合度の変化を伴わな
い、分子内変換反応と判断され、また、この非還元性糖
質生成酵素によって生成した非還元性糖質、ＰＩ、ＰＩ
Ｉ、ＰＩＩＩ、ＰＩＶ及びＰＶは、それぞれ、α−グル
コシルトレハロース（別名、α−マルトシルグルコシ
ド）、α−マルトシルトレハロース（別名、α−マルト
トリオシルグルコシド）、α−マルトトリオシルトレハ
ロース（別名、α−マルトテトラオシルグルコシド）、
α−マルトテトラオシルトレハロース（別名、α−マル
トペンタオシルグルコシド）及びα−マルトペンタオシ
ルトレハロース（別名、α−マルトヘキサオシルグルコ
シド）で示されるα−グリコシルトレハロース（Ｇ_n−
Ｔ：但し、Ｇはグルコース残基を意味し、ｎは１以上の
整数を意味し、Ｔはα，α−トレハロースを意味す
る。）であると判断される。

【００６３】

【実験Ａ−６ 末端にトレハロース構造を有する非還元
性糖質とトレハロースの調製】澱粉部分分解物（松谷化
学工業株式会社製造、商品名パインデックス＃４）４０
重量部を水６０重量部に加熱溶解し、この溶液を４５
℃、ｐＨ６．５に調整した後、実験Ａ−２の方法で調製
した非還元性糖質生成酵素を還元性澱粉部分分解物ｇ当
たり１単位の割合になるように加えて９６時間反応さ
せ、末端にトレハロース構造を有する非還元性糖質を生
成させ、次いで１００℃で１０分間加熱して、酵素を失
活させた。本反応液を濃度約２０％まで希釈し、グルコ
アミラーゼ（ナガセ生化学工業株式会社製造、商品名グ
ルコチーム）を澱粉部分分解物ｇ当たり１０単位加えて
４０時間反応させ、次いで加熱して、酵素を失活させ
た。本溶液を、常法にしたがって、活性炭にて脱色し、
イオン交換樹脂にて脱塩し、濃度約６０％に濃縮した。
本糖液中には固形物当たり２９．５％のトレハロースを
含有していた。この濃縮液を塩型強酸性カチオン交換樹
脂（オルガノ株式会社販売、商品名ＣＧ６０００、Ｎａ
型）が充填されたジャケット付きステンレス製カラム
に、６０℃、ＳＶ ０．４でチャージし、トレハロース
高含有画分を採取した。本高含有液は、固形物当たり約
９０％のトレハロースを含有していた。本溶液を濃度約
７５％に濃縮した後、助晶缶にとり、種晶としてトレハ
ロース含水結晶を約２％加えて徐冷し、晶出率約４５％
のマスキットを得た。本マスキットを乾燥塔上のノズル
より１５０ｋｇ／ｃｍ²の高圧にて噴霧した。これと同
時に８５℃の熱風を乾燥塔の上部より送風し、底部に設
けた移送金網コンベア上に結晶粉末を補集し、コンベア
の下より４５℃の温風を送りつつ、該粉末を乾燥塔外に
徐々に移動させて、取り出した。この結晶粉末を熟成塔
に充填して温風を送りつつ、１０時間熟成させ、結晶化
と乾燥を完了し、トレハロース含水結晶粉末を得た。

【００６４】

【実験Ｂ−１ マルトシルグルコシドの調製】純度９８
％のマルトペンタオース（株式会社林原生物化学研究所
製造）５重量部を水１０重量部に加熱溶解し、ｐＨ７．
０、温度４０℃に調整し、これに実験Ａ−２の方法で調
製した非還元性糖質生成酵素をマルトペンタオースグラ
ム当たり２単位になるように加えた。４８時間反応させ
た後、１００℃で２０分間加熱して、酵素を失活させ
た。本溶液中には、マルトテトラオシルグルコシドを固
形物当たり約８８％含有していた。

【００６５】このマルトテトラオシルグルコシド含有溶
液を、ｐＨ５．５、温度４０℃に調整し、β−アミラー
ゼ（ナガセ生化学工業株式会社製造、商品名＃１５０
０）を固形物グラム当たり２０単位になるように加え
て、２４時間反応させた後、１００℃で２０分間加熱し
て、酵素を失活させた。本液には、マルトシルグルコシ
ドを固形物当たり約５３％含有しており、その他に、マ
ルトース、マルトトリオースが含まれていた。

【００６６】本液は、常法にしたがって、活性炭にて脱
色し、イオン交換樹脂（Ｈ型及びＯＨ型）にて脱塩し、
固形物濃度約５０％に濃縮した。次いで、この濃縮液
を、実験Ａ−６の方法に準じて、塩型強酸性カチオン交
換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにかけてマル
トシルグルコシド高含有画分を採取した。本液は、固形
物当たり約８１％のマルトシルグルコシドを含有してい
た。

【００６７】更に、純度を高めるために、この溶液に、
水酸化ナトリウムを０．１Ｎとなるように加え、１００
℃で２時間加熱し、還元性糖質を分解した。この反応液
は、常法にしたがって、脱色、脱塩し、固形物濃度約５
０％に濃縮した。本液は、固形物当たり約９４％のマル
トシルグルコシドを含有していた。採取されたマルトシ
ルグルコシド高含有液を、更にオクタデシルシリカゲル
を担体とした分取用液体クロマトグラフィー（株式会社
ＹＭＣ製造、分取用カラムＹＭＣ−ＰａｃｋＲ−３５５
−１５）にかけ、マルトシルグルコシド純度約９９％以
上の高含有画分を採取した。

【００６８】この画分を常法にしたがって、更に精製
し、濃度７８％に濃縮し、ビーカーに入れ、４℃の冷室
に放置したところ、結晶の析出が認められた。本結晶を
遠心分離して集め、少量の水で洗浄し、純度９９．９％
の含水結晶を得た。また、本品を１００℃で一夜減圧乾
燥して、無水結晶を得た。

【００６９】これら結晶の理化学的性質を調べたとこ
ろ、次の通りであった。 （１）元素分析（無水物として） 含水結晶 Ｃ＝４２．４％ Ｈ＝６．８％ 無水結晶 Ｃ＝４２．６％ Ｈ＝６．７％ 理論値 Ｃ＝４２．８６％ Ｈ＝６．３９％ （２）質量分析（無水物として） ＭＷ＝５０４（分子式Ｃ₁₈Ｈ₃₂０₁₆） （３）水分 カールフィッシャー法にて測定 含水結晶 ９．９％（マルトシルグルコシド１モルに
水３モル） 無水結晶 ０．３％ （４）融点 マルトシルグルコシドの含水結晶又は無水結晶を融点測
定器に入れ、昇温速度を毎分１℃で融点を観察したとこ
ろ、いずれの結晶も１８０℃で融解した。このことは、
両結晶の融点が必ずしも同一であることを意味している
とは限らず、例えば、含水結晶の場合には、加熱昇温中
に外観上変化することなく、含水結晶から無水結晶に変
わり、この無水結晶の融解現象を観察していることが考
えられる。 （５）比旋光度（無水物として） 含水結晶、無水結晶とも、 ［α］_D ²⁰ ＋２０７．９°（ｃ＝５．０、Ｈ₂Ｏ） （６）紫外線吸収スペクトル 含水結晶、無水結晶とも、水溶液にして測定すると特徴
ある吸収は示さない。 （７）赤外線吸収スペクトル 含水結晶又は無水結晶の粉末２ｍｇをそれぞれ乾燥ＫＢ
ｒ ２００ｍｇと攪拌、混合して透明なタブレットを作
成し、赤外線吸収スペクトルを測定した。結果は、含水
結晶、無水結晶ともほぼ同一のパターンを示した。図５
に含水結晶の結果を示す。 （８）溶解度（無水物として） 含水結晶、無水結晶ともに、２５℃で水１００ｍｌに対
し、約１６３ｇ溶解する。 （９）甘味度（無水物として） マルトシルグルコシド２５％水溶液の甘味は、蔗糖１０
％水溶液のそれとほぼ同等であることから、蔗糖の約４
０％の甘味度である。なお、その甘味の質は、極めて優
れている。 （１０）呈色反応 含水結晶、無水結晶ともアントロン−硫酸反応で緑色を
呈し、フェーリング氏液還元反応、よう素反応は陰性。 （１１）構造（無水物として） （ａ）１Ｎ−硫酸で加水分解するとＤ−グルコースのみ
を生成する。 （ｂ）グルコアミラーゼの作用により、グルコース１モ
ルとトレハロース１モルを生成した。 （ｃ）炭素核磁気共鳴分析（¹³Ｃ−ＮＭＲ）の結果を図
６に示す。クラウス・ボック（ＫＬＡＵＳ ＢＯＣＫ）
等が『アドバンス・イン・カーボハイドレート・ケミス
トリー・アンド・バイオケミストリー（Ａｄｖａｎｃｅ
ｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）』、第４２
巻、第１９３乃至２２５頁（１９８４年）で報告してい
る標準物質、α−Ｄ−グルコピラノース、α，α−トレ
ハロース及びマルトオリゴ糖の化学シフトより、各炭素
を帰属し、本物質は、Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル α−Ｄ−グル
コピラノシドすなわちマルトシルグルコシドの構造を有
していると判断される。 （１２）粉末Ｘ線回折 エフ・エイチ・ストドーラ（Ｆ．Ｈ．Ｓｔｏｄｏｌａ）
等が、『ジャーナル・オブ・ザ・アメリカン・ケミカル
・ソサイエティー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔ
ｙ）』、第７８巻、第２５１４乃至２５１８頁（１９５
６年）に報告されている方法に準じて、結晶マルトシル
グルコシドのＣｕＫα線を使用した粉末Ｘ線回折図形を
測定した。含水結晶の結果を図７に、無水結晶の結果を
図８に示した。図７、図８の結果より明らかなように含
水結晶は粉末Ｘ線回折法における主な回折角（２θ）と
して７．９°、１３．２°、１７．２°及び２２．６°
を有し、また、無水結晶は７．７°、１３．５°、１
７．６°及び２３．６°を有する。

【００７０】以上の事実より本発明の結晶は、従来全く
知られていないマルトシルグルコシドの結晶であると判
断される。

【００７１】

【実験Ｂ−２ 結晶マルトシルグルコシドと非晶質マル
トシルグルコシドに及ぼす吸湿性とその影響】含水結晶
マルトシルグルコシド、無水結晶マルトシルグルコシド
及び非晶質マルトシルグルコシドをそれぞれ、粉末状態
で約１ｇずつポリエチレン製容器にとり、相対湿度９
０．１％の高湿度雰囲気に放置して、経時的にそれらの
水分を測定し、粉末の状態の変化を観察した。試料とし
ては、含水結晶及び無水結晶は、実験Ｂ−１の方法で調
製したものを用い、非晶質は、その含水結晶を脱イオン
水で溶解し、真空乾燥して調製した。結果は、表５にま
とめた。

【００７２】

【表５】

【００７３】表５の結果から明らかなように、非晶質マ
ルトシルグルコシドは、著しく吸湿して固結し、容易に
流動性を失うことが判明した。これに対して、含水結晶
は、吸湿が少なく、流動性を保持して、取扱い容易であ
ることが判明した。また、無水結晶は、吸湿するもの
の、外観上変化なく、流動性を保持することから、無水
結晶から含水結晶に変化して、安定しているものと考え
られる。

【００７４】

【実験Ｂ−３ 急性毒性試験】マウスを使用して、実験
Ｂ−１の方法で調製したマルトシルグルコシドの含水結
晶及び無水結晶をそれぞれに経口投与して急性毒性テス
トを行った。その結果、これら結晶マルトシルグルコシ
ドは低毒性の物質で、投与可能な最大投与量においても
死亡例は認められなかった。したがって、正確な値はい
えないが、そのＬＤ５０値は、いずれも５０ｇ／ｋｇ以
上であった。

【００７５】以下、本発明の結晶マルトシルグルコシド
の製造方法を実施例Ａで、その用途を実施例Ｂで示す。

【００７６】

【実施例Ａ−１】純度９５％のマルトペンタオース（株
式会社林原生物化学研究所製造）５０重量部を水２００
重量部に加熱溶解し、ｐＨ７．０、温度４０℃に調整し
た後、実験Ａ−２の方法で調製した非還元性糖質生成酵
素を、マルトペンタオースグラム当たり５単位になるよ
うに加え、２４時間反応させた。この反応液を加熱し
て、酵素を失活させた。本液には、マルトテトラオシル
グルコシドを固形物当たり約８３％含有していた。本液
を固形物濃度約５０％に濃縮し、冷室に放置し、マルト
テトラオシルグルコシドの結晶を析出させ、濾過して、
結晶マルトテトラオシルグルコシドを採取した。

【００７７】本結晶マルトテトラオシルグルコシド１０
重量部を水１００重量部に加熱溶解し、ｐＨ５．５、温
度５０℃に調整し、β−アミラーゼ（ナガセ生化学工業
株式会社製造、商品名＃１５００）を固形物グラム当た
り２０単位になるように加えた。２４時間反応させた
後、１００℃で２０分間加熱して、酵素を失活させた。
本液にはマルトシルグルコシドを固形物当たり約５８％
含有しており、その他にマルトースと少量のマルトトリ
オースが含まれていた。

【００７８】本液は、常法にしたがって、活性炭にて脱
色し、イオン交換樹脂（Ｈ型及びＯＨ型）にて脱塩し、
固形物濃度約５０％に濃縮した。この濃縮液を塩型強酸
性カチオン交換樹脂（オルガノ株式会社製造、商品名Ｘ
Ｔ−１０１６、Ｎａ型）を充填したジャケット付きステ
ンレス製カラム（５．４ｃｍ×４ｍを４本直列に接続）
に、６０℃、ＳＶ０．４でチャージし、ついで、６０℃
温水で溶出してマルトシルグルコシド高含有画分を採取
した。本液は、固形物当たり約９２％のマルトシルグル
コシドを含有していた。

【００７９】本液は、常法にしたがって、活性炭にて脱
色し、イオン交換樹脂（Ｈ型及びＯＨ型）にて脱塩し、
固形物濃度約８０％に濃縮し、これを助晶缶にとり、結
晶マルトシルグルコシドを種晶として２％添加し、徐冷
しつつ、ゆっくり攪拌しながら助晶した。得られたマス
キットは、バスケット型遠心機で分蜜し、少量の水で洗
浄したのち、乾燥した。純度９９．４％の含水結晶マル
トシルグルコシドを採取した。

【００８０】本品は、実質的に吸湿性を示さず、取扱い
が容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定
剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形物
などの各種組成物に有利に利用できる。

【００８１】

【実施例Ａ−２】炭酸カルシウム０．１％を含む濃度約
２０％の馬鈴薯澱粉を、ｐＨ６．０に調整した後、α−
アミラーゼ（ノボノルディスク インダストリー社製
造、商品名ターマミール６０Ｌ）を澱粉固形物グラム当
たり０．３％加え、９５乃至１００℃に加熱して、澱粉
を糊化、液化した後、酵素を加熱失活させてＤＥ１９．
５の液化液を得た。

【００８２】本液をｐＨ６．２、温度４０℃に調整し、
これに実験Ａ−２の方法で調製した非還元性糖質生成酵
素を澱粉グラム当たり３単位、イソアミラーゼ（株式会
社林原生物化学研究所製造）を１，０００単位の割合と
なるように加え、７２時間反応させた。この反応液を加
熱して酵素を失活させた後、冷却し、ｐＨを５．５、温
度５０℃に調整した後、β−アミラーゼ（ナガセ生化学
工業株式会社製造、商品名＃１５００）を澱粉固形物グ
ラム当たり５０単位になるように加え、２４時間反応さ
せた。この反応液を加熱して、酵素を失活させた。本液
には、マルトシルグルコシドを固形物当たり約２１％含
有していた。

【００８３】これを実施例Ａ−１と同様に精製、濃縮
し、塩型強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマ
トグラフィーにかけて、マルトシルグルコシド高含有画
分を採取した。本液は、固形物当たり約８９％のマルト
シルグルコシドを含有していた。

【００８４】本液は常法にしたがって、活性炭にて脱色
し、イオン交換樹脂（Ｈ型及びＯＨ型）にて脱塩し、固
形物濃度約８５％に濃縮し、結晶マルトシルグルコシド
を、種結晶として２％添加し、徐冷しつつゆっくり攪拌
しながら、助晶した。得られたマスキットは、バスケッ
ト型遠心機で分蜜し、少量の水で洗浄した後、乾燥し
た。純度９８．１％の含水結晶マルトシルグルコシドを
採取した。

【００８５】本品は、実質的に吸湿性を示さず、取扱い
が容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定
剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形物
などの各種組成物に有利に利用できる。

【００８６】

【実施例Ａ−３】澱粉部分分解物（松谷化学工業株式会
社製造、商品名パインデックス＃４）を用いて、濃度２
０％、ｐＨ５．５、温度４５℃に調整し、イソアミラー
ゼを澱粉部分分解物グラム当たり５００単位加え、２４
時間反応し、澱粉由来のα−１，６結合を分解した。反
応液を１００℃に加熱し、１０分間保った後、４０℃に
冷却し、ｐＨを６．５に調整した。これに実験Ａ−２の
方法で調製した非還元性糖質生成酵素を固形物グラム当
たり５単位加え、４８時間反応させ、その反応液を１０
０℃に加熱し、１０分間保った後、冷却した。温度を５
０℃に調整した後、β−アミラーゼを固形物グラム当た
り５０単位、α−アミラーゼを１０単位となるように加
え、２４時間反応させた後、１００℃で２０分間加熱
し、酵素を失活させた。本液には、マルトシルグルコシ
ドを固形物当たり約２４％含有していた。

【００８７】これを実施例Ａ−１と同様に、精製、濃縮
し、塩型強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマ
トグラフィーにかけてマルトシルグルコシド高含有画分
を採取した。本液は、固形物当たり約９１％のマルトシ
ルグルコシドを含有していた。

【００８８】本液は、常法にしたがって、活性炭にて脱
色し、イオン交換樹脂（Ｈ型及びＯＨ型）にて脱塩し、
固形物濃度約８５％に濃縮し、結晶マルトシルグルコシ
ドを、種晶として３％添加し、ゆっくり攪拌しながら助
晶し、晶出率約４５％のマスキットを得た。

【００８９】本マスキットを乾燥塔上のノズルより１５
０ｋｇ／ｃｍ²の高圧で噴霧した。これと同時に８５℃
の熱風を乾燥塔の上部より送風し、乾燥塔底部に設けた
移送金網コンベア上に結晶粉末を捕集し、コンベアの下
より４５℃の温風を送りつつ、該粉末を乾燥塔外に徐々
に移動させて取りだした。この粉末結晶を熟成塔に充填
し、温風を送りつつ、１０時間熟成させ、結晶化と乾燥
を完了し、含水結晶マルトシルグルコシド含有粉末を得
た。

【００９０】本品は、実質的に吸湿性を示さず、取扱い
が容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定
化剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形
物などの各種組成物に有利に利用できる。

【００９１】

【実施例Ａ−４】実施例Ａ−３と同様の方法で澱粉部分
分解物にイソアミラーゼ、非還元性糖質生成酵素、次い
で、β−アミラーゼとα−アミラーゼを作用させた後、
分離、精製して得られたマルトシルグルコシド高含有液
を濃度約８０％まで濃縮した。この濃縮液を助晶缶にと
り、結晶マルトシルグルコシドを種晶として２％加え、
ゆっくり攪拌しながら助晶し、次いで、バットに取り出
し、ブロックを作製した。ブロックは、約２５℃で２日
間静置し、熟成させた後、切削型粉砕機で粉砕し、流動
乾燥し、分級し、含水結晶マルトシルグルコシド含有粉
末を得た。

【００９２】本品は、実質的に吸湿性を示さず、取扱い
が容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定
化剤、賦形剤などとして飲食物、化粧品、医薬品、成形
物などの各種組成物に有利に利用できる。

【００９３】

【実施例Ａ−５】実施例Ａ−１の方法で得た含水結晶マ
ルトシルグルコシドを１００℃で一夜減圧乾燥して、水
分約０．２％の無水結晶マルトシルグルコシドを得た。

【００９４】本品は、室内に放置すると吸湿し、水分約
１０％の含水結晶マルトシルグルコシドに容易に戻り安
定化する。本無水結晶マルトシルグルコシドは、種晶と
して有利に用いることができる他、吸湿剤、脱水剤、化
学原料などとして利用することも有利に用いることがで
きる。更に、飲食物、化粧品、医薬品、成形物などの各
種組成物に有利に用いることができる。

【００９５】

【実施例Ａ−６】トレハロース１重量部及び澱粉部分分
解物（松谷化学工業株式会社製造、商品名パインデック
ス＃４）１重量部を水３重量部に加熱溶解し、温度６５
℃、ｐＨ６．０に調整し、これにバチルス・ステアロサ
ーモフィラス由来のシクロマルトデキストリン・グルカ
ノトランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所製
造）を澱粉部分分解物グラム当たり１０単位加えて２４
時間反応の後、酵素を加熱失活させた。次いで、温度５
５℃に調整し、これにプルラナーゼ（株式会社林原生物
化学研究所製造）及びβ−アミラーゼを澱粉部分分解物
グラム当たりそれぞれ２５単位、５０単位加えて、２４
時間反応させて、これら酵素を加熱失活させた。この反
応液には、マルトシルグルコシドを固形物当たり約２５
％含有していた。

【００９６】これを実施例Ａ−１と同様に精製し、塩型
強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフ
ィーにかけてマルトシルグルコシド高含有画分を得、こ
れを脱色、脱塩し、濃縮、助晶し、バットに取り出して
ブロックを作製した。本ブロックを切削、乾燥、分級し
て、含水結晶マルトシルグルコシド含有粉末を原料当た
り収率約１７％で得た。

【００９７】本品は、実質的に吸湿性を示さず、取扱い
が容易であり、甘味料、呈味改良剤、品質改良剤、安定
剤、賦形剤などとして、飲食物、化粧品、医薬品、成形
物などの各種組成物に有利に利用できる。

【００９８】

【実施例Ｂ−１ 甘味料】実施例Ａ−１の方法で得た高
純度含水結晶マルトシルグルコシド１重量部に、α−グ
リコシルステビオシド（東洋精糖株式会社販売、商品名
αＧスイート）０．０５重量部を均一に混合し、顆粒成
形機にかけて、顆粒状甘味料を得た。本品は、甘味の質
が優れ、蔗糖の約２倍の甘味度を有し、甘味度当たりカ
ロリーは、蔗糖の約１／２に低下している。本甘味料
は、低カロリー甘味料として、カロリー摂取を制限して
いる肥満者、糖尿病者などのための低カロリー飲食物な
どに対する甘味付けに好適である。また、本甘味料は、
虫歯誘発菌による酸の生成が少なく、不溶性グルカンの
生成も少ないことより、虫歯を抑制する飲食物などに対
する甘味付けに好適である。

【００９９】

【実施例Ｂ−２ ハードキャンデー】５５％蔗糖溶液１
００重量部に実施例Ａ−３の方法で得た含水結晶マルト
シルグルコシド含有粉末３０重量部を加熱混合し、次い
で減圧下で水分２％未満になるまで加熱濃縮し、これに
クエン酸１重量部及び適量のレモン香料と着色料とを混
和し、常法にしたがって成形し、製品を得た。本品は、
歯切れ、呈味良好で、蔗糖の晶出も起こらない高品質の
ハードキャンデーである。

【０１００】

【実施例Ｂ−３ いちごジャム】生いちご１５０重量
部、蔗糖６０重量部、マルトース２０重量部、実施例Ａ
−４の方法で得た含水結晶マルトシルグルコシド粉末４
０重量部、ペクチン５重量部及びクエン酸１重量部をな
べで煮詰め、ビン詰して製品を得た。本品は、風味、色
調とも良好なジャムである。

【０１０１】

【実施例Ｂ−４ クリームウエファース】実施例Ａ−５
の方法で得た高純度無水結晶マルトシルグルコシド２，
０００重量部、ショートニング１，０００重量部、レシ
チン１重量部、レモンオイル１重量部、バニラオイル１
重量部を、常法により配合して得たクリームを加温して
４０乃至４５℃に保ちウエファースに挟んでクリームウ
エファースを製造した。本品は、クリームの溶け具合が
なめらかで風味も良好である。

【０１０２】

【実施例Ｂ−５ 加糖練乳】原乳１００重量部に実施例
Ａ−２の方法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシ
ド５重量部を溶解し、プレートヒーターで加熱殺菌し、
次いで濃度約７０％に濃縮し、無菌状態で缶詰して製品
を得た。本品は、温和な甘味で、風味もよく、乳幼児食
品、フルーツ、コーヒー、ココア、紅茶などの調味用に
有利に利用できる。

【０１０３】

【実施例Ｂ−６ 乳酸飲料】脱脂乳１０重量部を８０℃
で２０分間加熱殺菌した後、４０℃に冷却し、これにス
ターター０．３重量部を加えて約３７℃で１０時間醗酵
させた。次いで、これをホモゲナイズした後、実施例Ａ
−２の方法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド
５重量部及び異性化糖シラップ２重量部を加えて７０℃
に保って殺菌した。これを冷却し、適量の香料を加え、
ビン詰して製品を得た。本品は、風味、甘味が酸味とよ
く調和した高品質の乳酸飲料である。

【０１０４】

【実施例Ｂ−７ 粉末ジュース】噴霧乾燥により製造し
たオレンジ果汁粉末３３重量部に対し、実施例Ａ−２の
方法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド５０重
量部、蔗糖１０重量部、無水クエン酸０．６５重量部、
リンゴ酸０．１重量部、Ｌ−アスコルビン酸０．１重量
部、クエン酸ソーダ０．１重量部、プルラン０．５重量
部、粉末香料適量をよく混合撹拌し、粉砕し微粉末にし
てこれを流動層造粒機に仕込み、排風温度４０℃とし、
これに、実施例Ａ−２の方法で得た高含有マルトシルグ
ルコシド濃縮液をバインダーとしてスプレーし、３０分
間造粒し、計量、包装して製品を得た。本品は、果汁含
有率約３０％の粉末ジュースである。また、本品は異
味、異臭がなく、吸湿固結も起こさず長期に安定であっ
た。

【０１０５】

【実施例Ｂ−８ チョコレート】カカオペースト４０重
量部、カカオバター１０重量部、蔗糖２０重量部、実施
例Ａ−１の方法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコ
シド３０重量部を混合してレファイナーに通して粒度を
下げた後、コンチェに入れて５０℃で２昼夜練り上げ
る。この間に、レシチン０．５重量部を加え充分に混和
分散させた。次いで、温度調節機で３１℃に調節し、バ
ターの固まる直前に型に流し込み、振動機でアワ抜きを
行い、１０℃の冷却トンネルを２０分間くぐらせて固化
させた。これを型抜きして包装し製品を得た。本品は、
吸湿性がなく、色、光沢共によく、内部組織も良好で、
口中でなめらかに溶け、上品な甘味とまろやかな風味を
有する。

【０１０６】

【実施例Ｂ−９ チューインガム】ガムベース３重量部
を柔らかくなる程度に加熱溶融し、これに無水結晶マル
チトール（株式会社林原商事販売 登録商標マビット）
４重量部及び実施例Ａ−２の方法で得た高純度含水結晶
マルトシルグルコシド３重量部とを加え、更に適量の香
料と着色料とを混合し、常法にしたがって、ロールによ
り練り合わせ、成形、包装して製品を得た。本品は、テ
クスチャー、風味とも良好なチューインガムである。

【０１０７】

【実施例Ｂ−１０ カスタードクリーム】コーンスター
チ１００重量部、実施例Ａ−３の方法で得た含水結晶マ
ルトシルグルコシド含有粉末１００重量部、マルトース
（株式会社林原商事販売 登録商標サンマルト）８０重
量部、蔗糖２０重量部及び食塩１重量部を充分に混合
し、鶏卵２８０重量部を加えて撹拌し、これに沸騰した
牛乳１，０００重量部を徐々に加え、更に、これを火に
かけて撹拌を続け、コーンスターチが完全に糊化して全
体が半透明になった時に火を止め、これを冷却して適量
のバニラ香料を加え、計量、充填、包装して製品を得
た。本品は、なめらかな光沢を有し、温和な甘味で美味
である。

【０１０８】

【実施例Ｂ−１１ ういろうの素】米粉９０重量部に、
コーンスターチ２０重量部、実施例Ａ−６の方法で得た
含水結晶マルトシルグルコシド含有粉末１２０重量部、
プルラン４重量部を均一に混合してういろうの素を製造
した。ういろうの素と適量の抹茶と水とを混練し、これ
を容器に入れて６０分間蒸し上げて抹茶ういろうを製造
した。本品は、照り、口当たりも良好で、風味も良い。
また、澱粉の老化も抑制され、日持ちもよい。

【０１０９】

【実施例Ｂ−１２ 即席コーンポタージュスープ】α−
化コーン粉末３０重量部、α−化小麦粉５重量部、α−
化ポテトスターチ４重量部、α−化ワキシーコーンスタ
ーチ１２重量部、実施例Ａ−３の方法で得た含水結晶マ
ルトシルグルコシド含有粉末８重量部、グルタミン酸ナ
トリウム５重量部、食塩８．５重量部、脱脂粉乳７重量
部、オニオンパウダー０．５重量部を磨砕してよく混合
した後、これにソルビタン脂肪酸エステル０．５重量部
と植物性硬化油９重量部とを加熱融解したものを添加し
て混合し、更に、乳糖１０重量部を加えて混合し、これ
を実施例Ｂ−７と同様に流動層造粒機に仕込んで少量の
水をスプレーし、造粒した後、７０℃の熱風で乾燥し、
篩別して即席コーンポタージュスープを製造した。本品
は、熱湯を注げば、容易に溶解、分散し、風味の優れた
スープとなる。

【０１１０】

【実施例Ｂ−１３ べったら漬の素】実施例Ａ−４の方
法で得た含水結晶マルトシルグルコシド含有粉末４重量
部、甘草製剤０．０５重量部、リンゴ酸０．００８重量
部、グルタミン酸ナトリウム０．０７重量部、ソルビン
酸カリウム０．０３重量部及びプルラン０．２重量部を
均一に混合してべったら漬の素を製造した。大根３０ｋ
ｇを常法にしたがって、食塩により下漬し、次いで蔗糖
で中漬したものを、本べったら漬の素４ｋｇで調製した
調味液に漬けてべったら漬を製造した。本品は、色、
艶、香気ともに良好で、適度の甘味を有し、歯切れもよ
かった。また、本品は、酸敗しにくく長期間安定であっ
た。

【０１１１】

【実施例 Ｂ−１４ 経管栄養剤】実施例Ａ−１の方法
で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド２０重量
部、グリシン１．１重量部、グルタミン酸ナトリウム１
重量部、乳酸カルシウム０．４重量部、炭酸マグネシウ
ム０．１重量部、チアミン０．０１重量部及びリボフラ
ビン０．０１重量部からなる配合物を調製する。この配
合物２４ｇずつをラミネートアルミ製小包に充填し、ヒ
ートシールして製品を得た。本品は、１袋分を約３３乃
至５００ｍｌの水に溶解して栄養補給液とし、経管方法
により、鼻腔、胃腸などへ投与して使用する。本品は、
ヒトのみならず、家畜などへの非経口的栄養補給液とし
ても有利に利用できる。

【０１１２】

【実施例Ｂ−１５ 経管栄養剤】実施例Ａ−２の方法で
得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド５８０重量
部、乾燥卵黄１９０重量部、脱脂粉乳２０９重量部、塩
化ナトリウム４．４重量部、塩化カリウム１．８５重量
部、硫酸マグネシウム４重量部、チアミン０．０１重量
部、アスコルビン酸ナトリウム０．１重量部、ビタミン
Ｅアセテート０．６重量部及びニコチン酸アミド０．０
４重量部からなる配合物を調製する。この配合物２５ｇ
ずつを、ラミネートアルミ製小包に充填し、ヒートシー
ルして製品を得た。本品は、１袋分を約１５０乃至３０
０ｍｌの水に溶解して、栄養補給液とし、経管方法によ
り鼻腔、食道、胃などへ投与して使用する。

【０１１３】

【実施例Ｂ−１６ 外傷治療用膏薬】実施例Ａ−１の方
法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド３００重
量部及び結晶マルトース２００重量部に、ヨウ素３重量
部を溶解したメタノール５０重量部を加え混合し、更に
１０％プルラン水溶液２００重量部を加えて混合し、適
度の延び、付着性を示す外傷治療用膏薬を得た。本品
は、治癒期間が短縮され、創面もきれいに治る。

【０１１４】

【実施例Ｂ−１７ インターフェロン液剤】ヒト天然型
インターフェロン−γ標品（株式会社林原生物学研究所
製造、コスモ・バイオ株式会社販売）を、常法にしたが
って、固定化抗ヒトインターフェロン−γ抗体カラムに
かけ、該標品に含まれるヒト天然型インターフェロン−
γを吸着させ、安定剤である牛血清アルブミンを素通り
させて除去し、次いで、ｐＨを変化させて、ヒト天然型
インターフェロン−γを実施例Ａ−１の方法で得た高純
度含水結晶マルトシルグルコシドを７％含有する生理食
塩水を用いて溶出した。本液を精密濾過し、無菌的にバ
イアルビンに充填して、ｍｌ当たりヒト天然型インター
フェロン−γを１０⁵単位含有する液剤を得た。本品
は、１日当たり、大人 １乃至２０ｍｌ程度が経口的又
は非経口的に投与され、ウイルス性疾患、アレルギー性
疾患、リューマチ、糖尿病、悪性腫瘍などの治療に有利
に利用できる。本品は、マルトシルグルコシドが安定剤
として作用し、４℃又は２５℃で２０日間放置しても、
その活性をよく維持している。

【０１１５】

【実施例Ｂ−１８ ツモア・ネクロシス・ファクター液
剤】ヒト天然型ツモア・ネクロシス・ファクター−α標
品（株式会社林原生物化学研究所製造、コスモ・バイオ
株式会社販売）を、常法にしたがって、固定化抗ヒトツ
モア・ネクロシス・ファクター−α抗体カラムにかけ、
該標品に含まれるヒト天然型ツモア・ネクロシス・ファ
クター−αを吸着させ、安定剤である牛血清アルブミン
を素通させて除去し、次いで、ｐＨを変化させて、ヒト
天然型ツモア・ネクロシス・ファクター−αを実施例Ａ
−１の方法で得た高純度含水結晶マルトシルグルコシド
を１０％含有する生理食塩水を用いて溶出した。本液を
精密濾過し、無菌的にバイアルビンに充填して、ｍｌ当
たりヒト天然型ツモア・ネクロシス・ファクター−αを
１０⁴単位含有する液剤を得た。本品は、１日当たり、
大人 １乃至２０ｍｌ程度が経口的又は非経口的に投与
され、ウイルス性疾患、アレルギー性疾患、リューマ
チ、糖尿病、悪性腫瘍などの治療に有利に利用できる。
本品は、マルトシルグルコシドが安定剤として作用し、
４℃又は２５℃で２０間放置しても、その活性をよく維
持している。

【０１１６】

【実施例 Ｂ−１９ インターフェロン錠剤】ヒト天然
型インターフェロン−α標品（株式会社林原生物化学研
究所製造、コスモ・バイオ株式会社販売）を、常法にし
たがって、固定化抗ヒトインターフェロン−α抗体カラ
ムにかけ、該標品に含まれるヒト天然型インターフェロ
ン−αを吸着させ、安定剤である牛血清アルブミンを素
通りさせて除去し、次いでｐＨを変化させて、ヒト天然
型インターフェロン−αを実施例Ａ−１の方法で得た高
純度含水結晶マルトシルグルコシドを５％含有する生理
食塩水を用いて溶出した。本液を精密濾過し、約２０倍
量の無水結晶マルトース粉末（株式会社林原商事販売、
商品名ファイントースＴ）に加えて脱水、粉末化し、こ
れを打錠機にて打錠し、１錠（約２００ｍｇ）当たりヒ
ト天然型インターフェロン−αを約１５０単位含有する
錠剤を得た。本品は、舌下錠などとして、１日当たり、
大人１乃至１０錠程度が経口的に投与され、ウイルス性
疾患、アレルギー性疾患、リューマチ、糖尿病、悪性腫
瘍などの治療に有利に利用できる。とりわけ、近年、患
者数の急増しているエイズ、肝炎などの治療剤として有
利に利用できる。本品は、マルトシルグルコシドと共に
マルトースが安定剤として作用し、室温で放置してもそ
の活性を長期間よく維持する。

【０１１７】

【実施例Ｂ−２０ 糖衣錠】重量１５０ｍｇの素錠を芯
剤とし、これに実施例Ａ−２の方法で得た高純度含水結
晶マルトシルグルコシド４５重量部、プルラン（平均分
子量２０万）２重量部、水３０重量部、タルク２５重量
部及び酸化チタン３重量部からなる下掛け液を用いて錠
剤重量が約２３０ｍｇになるまで糖衣し、次いで、同じ
含水結晶マルトシルグルコシド含有粉末６５重量部、プ
ルラン１重量部及び水３４重量部からなる上掛け液を用
いて糖衣し、更に、ロウ液で艶出しして光沢のある外観
の優れた糖衣錠を得た。本品は、糖衣掛け時の作業性が
優れているだけでなく、耐衝撃性にも優れており、高品
質を長期間維持する。

【０１１８】

【実施例Ｂ−２１ 乳液】ポリオキシエチレンベヘニル
エーテル０．５重量部、テトラオレイン酸ポリオキシエ
チレンソルビトール１重量部、親油型モノステアリン酸
グリセリン１重量部、ベヘニールアルコール０．５重量
部、アボガド油１重量部、実施例Ａ−２の方法で得た高
純度含水結晶マルトシルグルコシド３．５重量部、α−
グリコシルルチン１重量部、ビタミンＥ及び防腐剤の適
量を、常法にしたがって加熱溶解し、これに１，３−ブ
チレングリコール５重量部、カルボキシビニルポリマー
０．１重量部及び精製水８５．３重量部を加え、ホモゲ
ナイザーにかけ、乳化し、乳液を製造した。本品は、保
湿性ある乳液で、日焼け止め、色白剤などとして有利に
利用できる。

【０１１９】

【実施例Ｂ−２２ スキンクリーム】モノステアリン酸
ポリオキシエチレングリコール２重量部、自己乳化型モ
ノステアリン酸グリセリン５重量部、α−グリコシルル
チン２重量部、流動パラフィン１重量部、トリオクタン
酸グリセリル１０重量部、実施例Ａ−１の方法で得た高
純度含水結晶マルトシルグルコシド１重量部、マルチト
ール３重量部及び防腐剤の適量を、常法にしたがって加
熱溶解し、これに１，３−ブチレングリコール５重量部
及び精製水６６重量部を加え、ホモゲナイザーにかけて
乳化し、更に、香料の適量を加えて撹拌混合し、クリー
ムを製造した。本品は、伸びの良いクリームで、日焼け
止め、美肌剤、色白剤などとして有利に使用できる。

【０１２０】

【実施例Ｂ−２３ 練歯磨】第二リン酸カルシウム４５
重量部、ラウリル硫酸ナトリウム１．５重量部、グリセ
リン２５重量部、ポリオキシエチレンソルビタンラウレ
ート０．５重量部、実施例Ａ−２の方法で得た高純度含
水結晶マルトシルグルコシド１５重量部、サッカリン
０．０２重量部及び防腐剤０．０５重量部を水１３重量
部と混合して練歯磨を得た。本品は、光沢、洗浄力も良
好で、練歯磨として好適である。

【０１２１】

【実施例Ｂ−２４ 肥料杭】配合肥料（Ｎ＝１４％、Ｐ
₂Ｏ₅＝８％、Ｋ₂Ｏ＝１２％）、プルラン、実施例Ａ−
６の方法で得た含水結晶マルトシルグルコシド含有粉
末、硫酸カルシウム及び水の割合を重量でそれぞれ７
０、５、５、１５及び５として充分混合した後、押出機
（Ｌ／Ｄ＝２０、圧縮比＝１．８、ダイスの口径＝３０
ｍｍ）で８０℃に加熱して肥料杭を製造した。本品は、
肥料用容器が不要で取扱い容易であり、全層施肥に適し
た強度を有し、更に配合割合を変えることにより肥料成
分の溶出速度を調節できる。必要ならば、この肥料杭に
植物ホルモン、農業用薬剤及び土壌改良剤等の混合も容
易である。

【０１２２】

【発明の効果】上記から明らかなように、本発明の結晶
マルトシルグルコシドは、実質的に非吸湿性乃至難吸湿
性で流動性良好であって取扱い易く、水に溶解し易い物
質であり、適度な粘性を有し、良質な甘味を有してい
る。また、結晶マルトシルグルコシドは、化学的に安定
であり、褐変反応を起こし易いアミノ酸、オリゴペプチ
ド、更には、有効成分、活性の失われ易い生理活性物質
などを安定化し得る性質を有している。加えて、浸透圧
調節性、賦活性、照り付与性、保湿性、他の糖の晶出防
止、難発酵性、澱粉の老化防止性などの性質を具備して
いる。これら諸性質は、飲食物、化粧品、医薬品、成形
物など各種組成物の製造に有利に利用できる。

【０１２３】したがって、本発明の結晶マルトシルグル
コシドとその製造方法並びに用途の確立は、飲食物、化
粧品、医薬品分野における産業的意義が極めて大きい。

【図面の簡単な説明】

【図１】リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１由来の非
還元性糖質生成酵素の活性に及ぼす温度の影響を示す図
である。

【図２】リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１由来の非
還元性糖質生成酵素の活性に及ぼすｐＨの影響を示す図
である。

【図３】リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１由来の非
還元性糖質生成酵素の温度安定性を示す図である。

【図４】リゾビウム・スピーシーズ Ｍ−１１由来の非
還元性糖質生成酵素のｐＨ安定性を示す図である。

【図５】含水結晶マルトシルグルコシドの赤外線吸収ス
ペクトルを示す図である。

【図６】マルトシルグルコシドの炭素核磁気共鳴分析結
果を示す図である。

【図７】含水結晶マルトシルグルコシドの粉末Ｘ線回折
図形を示す図である。

【図８】無水結晶マルトシルグルコシドの粉末Ｘ線回折
図形を示す図である。

Claims (14)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 結晶マルトシルグルコシド。
2. 【請求項２】 結晶が、含水結晶又は無水結晶であるこ
   とを特徴とする請求項１記載の結晶マルトシルグルコシ
   ド。
3. 【請求項３】 結晶が、粉末Ｘ線回折法における主な回
   折角（２θ）として、７．９°、１３．２°、１７．２
   °及び２２．６°を有するか、又は、７．７°、１３．
   ５°、１７．６°及び２３．６°を有することを特徴と
   する請求項１又は請求項２記載の結晶マルトシルグルコ
   シド。
4. 【請求項４】 マルトシルグルコシド含有溶液から結晶
   マルトシルグルコシドを晶出せしめ、これを採取するこ
   とを特徴とする結晶マルトシルグルコシドの製造方法。
5. 【請求項５】 マルトシルグルコシドが、トレハロース
   とα−グルコシル糖質とを含有する水溶液に糖転移酵素
   を作用させるか若しくはその糖転移酵素を作用させた後
   に加水分解酵素を作用させるか、又は、グルコース重合
   度３以上の還元性澱粉部分分解物に非還元性糖質生成酵
   素を作用させるか若しくはその非還元性糖質生成酵素を
   作用させた後に加水分解酵素を作用させて生成されたも
   のであることを特徴とする請求項４記載の結晶マルトシ
   ルグルコシドの製造方法。
6. 【請求項６】 糖転移酵素が、シクロマルトデキストリ
   ン・グルカノトランスフェラーゼ、α−アミラーゼ又は
   α−グルコシダーゼであることを特徴とする請求項５記
   載の結晶マルトシルグルコシドの製造方法。
7. 【請求項７】 加水分解酵素が、β−アミラーゼである
   か、又は、β−アミラーゼと澱粉枝切酵素であることを
   特徴とする請求項５又は６記載の結晶マルトシルグルコ
   シドの製造方法。
8. 【請求項８】 非還元性糖質生成酵素が、グルコース重
   合度３以上の還元性澱粉部分分解物から、末端にトレハ
   ロース構造を有する非還元性糖質を生成する酵素である
   ことを特徴とする請求項５又は７記載の結晶マルトシル
   グルコシドの製造方法。
9. 【請求項９】 トレハロースとα−グルコシル糖質とを
   含有する水溶液に糖転移酵素を作用させるか若しくはそ
   の糖転移酵素を作用させた後に加水分解酵素を作用させ
   るか、又は、グルコース重合度３以上の還元性澱粉部分
   分解物に非還元性糖質生成酵素を作用させるか若しくは
   その非還元性糖質生成酵素を作用させた後に加水分解酵
   素を作用させて得られるマルトシルグルコシドを含有す
   る水溶液を、アルカリ処理するか、又は、クロマトグラ
   フィーにかけてマルトシルグルコシド高含有液とし、こ
   れを濃縮し、晶出、採取することを特徴とする結晶マル
   トシルグルコシドの製造方法。
10. 【請求項１０】 結晶マルトシルグルコシドを含有して
    なる組成物。
11. 【請求項１１】 結晶マルトシルグルコシドを０．１ｗ
    ／ｗ％以上含有せしめた請求項１０記載の結晶マルトシ
    ルグルコシドを含有してなる組成物。
12. 【請求項１２】 組成物が、飲食物、化粧品、医薬品又
    は成形物であることを特徴とする請求項１０又は１１記
    載の結晶マルトシルグルコシドを含有してなる組成物。
13. 【請求項１３】 結晶マルトシルグルコシドを含有せし
    めることを特徴とする組成物の製造方法。
14. 【請求項１４】 組成物が、飲食物、化粧品、医薬品又
    は成形物であることを特徴とする請求項１３記載の組成
    物の製造方法。